SK512011A3 - Kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3H-pyrazol-3-ónu a spôsob ich prípravy a použitia - Google Patents

Abstract

Vynález sa týka kokryštálov 5-methyl-2-fenyl-2,4-dihydro3H-pyrazol-3-ónu a ko-kryštalizačných partnerov vybraných zo skupiny nutraceutík, ako sú kvercetin, kyselina gálová, kyselina chlorogenová, kyselina 1,3,5- benzéntrikarboxylová, kyselina 3,4- dihydroxybenzoová, taurín, vitamíny ako nikotínamid a kyselina askorbová, kyselina adipová, kyselina citrónová, kyselina vínna, kyselina kamfor-10-sulfónová, kyselina glykolová, kyselina asparágová, kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2- oxabicyklo[2.2.1]heptán-l -karboxylová, kyselina hydrochinónsulfónová, kyselina 5- sulfosalicylová, kyselina 3- sulfobenzoová, kyselina trieslová, kyselinajantárová, močovina, imidazolidíntrión, biuref kyselina 2-ketoglutarová, hydrochlorotiazid, aloxán, kyselina 2-hydroxyjantárová, kyselina 4-aminosalicylová, kyselina etyléndiamíntetraoctová, kyselina chinová, 4-acetamidofenoI, kyselina listová, N(4)- acetylcytozín, amid kyseliny mliečnej, acetamidín, D-mannitol, D-tokoferoljantarát, D- tokoferol palmitát, cholín chlorid, D-glukóza, D-fruktóza, trehaloza, hidantoín, urazol, diacetamid, imid kyseliny gluáarovej, kyselina glutárová, 2-imidazolidinón, kofeín, 1,2-benzizotiazol-3(2i¥)- on-(l,l-dioxid), kyselina pyrolidín-5-karboxylová, kyselina L- glutámová, kyselina 7V-acetyl-L-glutámová, L-kamitín, kyselina mliečna, kyselina kávová, kyselina ferulová, kyselina 3,3'-tiodipropiónová kyselina, koenzým Q10, kyselina kojová, kyselina 2-metoxyizoftalová, kyselina maleínová, L-lyzín, donepezil. Vynález sa tiež týka spôsobu prípravy týchto kokryštálov a rovnako aj ich použitia na liečebné účely a prípravu liečivých prípravkov.

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka nových kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Hpyrazol-3-ónu a spôsobu ich prípravy a použitia.

Antioxidanty sú látky, ktoré ovplyvňujú aktivitu kyslíkatých zlúčenín. Obmedzujú ich vznik alebo ich pretransformujú do menej reaktívneho prípadne neaktívneho stavu. Kyslíkové radikály (napr. superoxid, peroxid vodíka, hydroxylový radikál, singletový kyslík a pod.) môžu reagovať s nenasýtenými mastnými kyselinami a aminokyselinami v lipidových micelách, v bunkových membránach alebo v proteínoch. Antioxidanty sa dajú deliť na prírodné (v prírode alebo v potravine sa prirodzene vyskytujúce) a syntetické (pripravené chemickými alebo biotechnologickými postupmi). Antioxidanty sa cielene používajú na inhibíciu oxidačného stresu a s ním spojených ochorení. Konzumácia látok s ich obsahom pôsobí pozitívne na zdravie organizmu, v ktorom zabraňujú oxidácii, pričom viaceré antioxidanty vykazujú viac než jeden mechanizmus antioxidačnej aktivity. Mnohé produkty obsahujú prírodné antioxidanty, ako sú napríklad resveratrol, deriváty 3,4-dihydroxyškoricovej kyseliny, kyseliny askorbovej a iné. Antioxidanty nemajú význam len v prevencii zhubného bujnenia, ale i pri iných, civilizačných ochoreniach (napr. ateroskleróza, sclerosis multiplex, rôzne cysty a dysplázie, poruchy imunity, vznik autoimúnnych ochorení a pod.). Antioxidanty v potravinách uvádza Schmid (Schmid, Š. 2010. In: Antioxidanty a oxidačné zmeny tukov v potravinách). Nedostatok antioxidantov v strave sa môže kompenzovať formou nutraceutík s obsahom napríklad koenzýmu Q, flavonoidov, L-kamitínu, acetylkamitínu, vitamínu C.

Väčšina z antioxidačne pôsobiacich látok je zahrnutá v skupine nutraceutík, ako sú polyfenoly, fenolové kyseliny, fytoestrogény, fytosteroly, fytáty, niektoré vitamíny a polynenasýtené mastné kyseliny.

Jedným zo skupiny syntetických antioxidantov je 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Hpyrazol-3-όη (Edaravone, norphenazone, CAS-89-25-8). Prípravu opisuje Knorr (Ann. 1887, 238, 137). Je silný antioxidant, neuroprotektívum používané pre liečbu postischemických príhod a lapač voľných radikálov, chrániaci proti oxidačnému stresu a apoptóze. V organizme človeka o.i. pôsobí ako antioxidant, zabraňuje autooxidácii nenasýtených mastných kyselín. Na trh bol uvedený v Japonsku firmou Mitsubishi Pharma v roku 2001 vo forme injekcii pod názvom Radicut. Sú dokumentované jeho účinky pri testovaní voči amyotropnej laterálnej skleróze a iným neurodegeneratívnym ochoreniam (Journal of Stroke and Ccerebrovascular Dioseases, 2011, 1; Experimental Neurology 213,2008,448; Recent Patents on Cardiovascular Drug Discovery, 2006, 1, 85).

Použitie norphenazone ako antipyretika uvádza patent GB 1072262 a ako protizápalovo účinnej látky patentové spisy US 4579844 a JP63132833.

Injekčné formy uvádzajú patentové spisy CA 2504873 a US 2004/0162330.

Farmaceutické kompozície pre oftalmologickú liečbu uvádza EP 0633025Al.

Prípravky obsahujúce norphenazone a koenzým Q uvádza W02005/034945A1.

Emulzné kompozície opisuje spis US 2009/0131496A1.

Patentový spis WO2010/059727Al uvádza prípravu formulácii s použitím amfifilných solubilizátorov.

Všeobecne nutraceutiká môžu byť aplikované v rôznych formách napr. ako soli, deriváty alebo v rôznych fyzikálnych formách ako amorfné, kryštalické polymorfy alebo kokryštály.

Kokryštály sú stechiometrické multikomponentné zlúčeniny typu hostiteľ (aktívna molekula, napr. farmakologicky účinná zlúčenina, nutraceutikum apod.) - hosť (kokryštalizačný partner, inaktívna alebo aktívna látka), tvorené z dvoch alebo viacerých zložiek, ktoré sú v čistom stave pri laboratórnej teplote pevné. Nevykonáva sa

2/ zásah do primárnej molekulovej štruktúry účinnej látky, tvoria sa nekovalentné väzby. Ako techniky prípravy kokryštálov sa používa spoločná kryštalizácia zložiek (kokryštalizacia) pri stechiometrických pomerov z roztoku, pričom je veľká variabilita podmienok pri hľadaní nukleácie a raste kokryštálov a voľbe rozpúšťadla (ak je kokryštál menej rozpustná forma).

Kokryštály tej istej účinnej látky môžu mať podstatne odlišné vlastnosti (teplota topenia, rozpustnosť, biodostupnosť, chemická stabilita, rýchlosť rozpúšťania, a pod.) v závislosti od druhej komponenty (partnera). Pôvodný fyziologický a biochemický účinok a mechanizmus účinku sa nemení. Prípravu, definíciu a vlastnosti kokryštálov prehľadne uvádzajú Brittain, H.G. (In Profiles of Drug Substances, Excipients and Related Methodology, 2010, Vol. 35., 373) a Krishnaiah S.R.Y. (J Bioequiv Availab. 2010, 2(2) 28-36).

Modifikáciou kryštalickej formy sa takýmto spôsobom získajú látky s priaznivejšími vlastnosťami najmä z hľadiska formulácii pre orálnu aplikáciu, technologické operácie (mletie, sušenie), stabilitu a rozpustnosť.

Kokryštály liečiv uvádza Sekhon, B.S. (In. Ars Pharm, 2009, Vol. 50, 2; p. 99-117) a patentové spisy US 2008/45481, 2008/51453, WO 2010/17343.

Pre nutraceutiká sú kokryštály opísané napr. u kofeínu (Jones, W. 2006, Int. J.Pharm., 31, 875-879) alebo patentový spis W02009/136408 uvádza kokryštály pre koenzým Q10.

Práca Aboaraye A. D. (2009, In Theses and Dissertations, Crystal engineering of nutraceutical cocrystal) opisuje kokryštály nutraceutík resveratrol, kyseliny citrónovej, a flavonu.

Práca Kapildev A. (2009, In Theses and Dissertations, Nutraceutical and Pharmaceutical co-crystals) opisuje prípravu kokryštálov nutraceutík epigallokatechin galátu, kvercetínu, hesperetínu, kyseliny galovej a kyseliny L-askorbovej s pyridínovými derivátmi.

Práca Pujar T. A. (2009, In Theses and Dissertations, Cocrystals of nutraceuticals: Protocatechuic acid and quercetin) uvádza kokryštály antioxidantu kvercetínu a kyseliny izonikotínovej resp. teobromínu.

Patentový spis US 2009/0258859 uvádza kokryštály metronidazolu anutraceutík ( kyseliny galovej, filmárovej a gentisovej).

Kokryštály 4-oxopimelovej kyseliny a 4,4'-bipyridínu uvádza Halasz (New J. Chem., 2011,35,24-27).

Kokryštály paracetamolu a kyseliny citrónovej uvádza Elbagerma, M. A. (Cryst. Eng. Comm, 2011,13,1877-1884).

Sériu kokryštálov nutraceutík uvádza patentový spis US 2010/204204. Tento spis opisuje aj niekoľko kokryštály antioxidantov a vitamínov (kvercetín, diosmín, hesperetin) s fenolovými kyselinami, alifatickými kyselinami, purínovými bázami a izonikotín amidom, kyselinou askorbovou resp. kyselinou nikotínovou.

Kokryštály kvercetín-kofeín a hesperetín-izonikotín amid resp. kyselina nikotínová a ich metanolické solváty uvádza aj práca Kavuru P. (2008, In Thesis. Crystal Engineering of Flavonoids). Výsledky doplnené o kokryštály dalších nutraceutík ako Laskorbová kyselina-sarcosine, kyselina nikotínová, betaín, katechol, a betaín-kyselina galová, resveratrol a kyselina ferulová - baklofen publikoval v Cryst. Growth Des., 2010,10 (8), pp 3568-3584.

Kokryštál pre cholín diepalrestat chráni patentový spis US2009/055868.

Synergický efekt pri tvorbe kokryštálu z dvoch biologicky účinných látok opisuje patentový spis WO 2009/136408.

4/

Nízka rozpustnosť a nevyhovujúce fyzikálnochemické vlastnosti u niektorých liečiv môžu byť zlepšené o.i. použitím alternatívnej kokryštalickej formy. Veľké množstvo nových foriem pre jednu účinnú látku je možné získať v závislosti od počtu testovaných komponent postupmi uvedenými v literatúre. Výsledkom sú nové patentovateľné formy API, s novými vlastnosťami. Kvantifikované rozdiely niektorých fyzikálnochemických parametrov (rozpustnosť, rýchlosť rozpúšťania, hydroskopicita...) voči vstupným formám umožňujú odhadnúť ich účinnosť a stabilitu.

Z hľadiska farmaceutickej firmy sa príprava nových formulácii resp. kokryštálov účinných látok pozitívne prejaví v lifecycle managemente liečiva.

Je zrejmé, že je výhodné získať nové formy nutraceutík s rozpustnosťou, ktorá umožňuje dosiahnuť plazmatické hladiny podľa potreby rýchlejšie alebo pomalšie. Zároveň úprava vlastností umožní špecificky zlepšiť stabilitu produktu a spracovateľnosť. Cieľom je získať formy vykazujúce nízku hygroskopicitu a dobrú spracovateľnosť pre farmaceutické operácie a stabilizáciu injekčnej formy liečiva. Predložený vynález rieši problémy prípravy technologicky ľahšie manipulovateľnejších, rozpustnejších a stabilnejších foriem antioxidantu 5-mety 1-2fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu (edavaronu) v kombinácii s nutraceutikami s tým, že sa získajú nové kokryštály ako je uvedená v patentovom nároku 1.

Podstata vynálezu

Vynález rieši vyššie uvedené problémy prípravou nových foriem 5-metyl-2-fenyl-2,4dihydro-3//-pyrazol-3-ónu formou kokryštálov.

Prvým predmetom tohto vynálezu sú kokryštály, ktoré pozostávajú z 5-metyl-2-fenyl2,4-dihydro-3H-pyrazol-3-ónu ako aktívnej zložky a kokryštalizačného partnera.

Druhým predmetom tohto vynálezu je príprava kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4dihydro-3//-pyrazol-3-ónu spoločnou kryštalizáciou z rozpúšťadla.

Ďalším predmetom vynálezu je príprava kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//pyrazol-3-ónu spoločným mletím komponent.

Ďalším predmetom vynálezu sú kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3ónu, pričom kokryštalizačný partner je nutraceutikum alebo liečivo.

Ďalším predmetom vynálezu je poskytnúť kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//pyrazol-3-ónu, vhodné pre použitie vo farmaceutických kompozíciách, najmä pre použitie vo forme injekcii.

Objavenie nových kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a nutraceutík ako farmaceutický využiteľných foriem poskytuje príležitosti na zlepšenie vlastností a účinkov farmaceutických výrobkov. To rozširuje škálu foriem, ktorých formulácie sú k dispozícii pre navrhovanie prípravkov. Vynález sa rovnako týka aj solvátov kokryštálov a ich polymorfných modifikácií.

Predložený vynález sa týka kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a spôsobu ich prípravy a použitia.

Kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu podľa vynálezu sú látky pozostávajúce najmenej z dvoch neidentických tuhých látok v stechiometrickom pomere. Kokryštály môžu tiež zahrňovať jednu alebo viac molekúl solventu alebo vody v kryštalickej mriežke.

Bolo zistené, že keď antioxidant 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón (edavaron) a vybrané nutraceutikum ako kokryštalizačný partner tvoria kokryštál, tento má nové neočakávané vlastnosti. Tieto nové formy majú zmenenú rozpustnosť a zvýšenú stabilitu v porovnaní so pôvodnou formou 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Hpyrazol-3-ónu alebo nutraceutika, bez ohľadu na to, či táto bola vo forme soli, hydrátu alebo solvátu. Zmeny sa ďalej prejavujú v novej morfológii alebo habite, čo umožňuje lepšiu spracovateľnosť ako napr. mletie. Napríklad kokryštalická forma nutraceutika je výhodná, ak pôvodná molekula antioxidantu je nerozpustná vo vode. Naopak, ďalšiu výhodu poskytuje tvorba kokryštálu dvoch účinných látok v prípade kombinácie rozpustnej ších kokryštalizačných partnerov napr. cholín chlorid, kyselina citrónová, kyselina askorbová, atd.

6/

Zvlášť výhodný je stabilizačný efekt kokryštalizačného partnera pre prípravu injekčnej formy edavaronu, ktorý je ďalej spojený s nastavením vhodnej hodnoty pH injekčného roztoku.

Pôvodcovia tohto vynálezu zistili, že nové kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377pyrazol-3-ónu, opísané v tomto vynáleze, poskytujú ďalšie výhody. Vykazujú nízku hygroskopicitu a dobrú spracovateľnosť pri technologických operáciách a stabilitu injekčných roztokov edavaronu.

Prvým predmetom tohto vynálezu sú kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//pyrazol-3-ónu a nutraceutík. Zo skupiny nutraceutík sú vybrané najmä antioxidanty kvercetín, kyselina.gálová, kyselina chlorogenová, kyselina 1,3,5-benzéntrikarboxylová, kyselina 3,4-dihydroxybenzoová, taurín, vitamíny ako nikotínamid a kyselina askorbová, kyselina adipová, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina kamfor-10sulfónová, kyselina glykolová, kyselina asparágová, kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2.1]heptán-l-karboxylová, kyselina hydrochinónsulfónová, kyselina 5sulfosalicylová, kyselina 3-sulfobenzoová, kyselina trieslová, kyselina jantárová, močovina, imidazolidíntrión, biuret, kyselina 2-ketoglutarová, hydrochlorotiazid, aloxán, kyselina 2-hydroxyjantarová, kyselina 4-aminosalicylová, kyselina etyléndiamíntetraoctová, kyselina chinová, 4-acetamidofenol, kyselina listová, N(4)acetylcytozín, amid kyseliny mliečnej, acetamidín, D-mannitol, D-tokoferol jantarát, Dtokoferolpalmitát, cholín chlorid, D-glukóza, D-fruktóza, trehalóza, hydantoín, urazol, diacetamid, imid kyseliny glutárovej, kyselina glutárová, 2-imidazolidinón, kofeín, 1,2benzizotiazol-3(2//)-ón-( 1,1-dioxid), kyselina pyrolidín-5-karboxylová, kyselina Lglutámová, kyselina V-acetyl-L-glutámová, L-kamitín, kyselina mliečna, kyselina kávová, kyselina ferulová, kyselina 3,3'-tiodipropiónová, koenzým Q10, kyselina kojová, kyselina 2-metoxyizoftalová, kyselina maleínová, L-lyzín, donepezil.

Je známe, že účinok nutraceutík sa zvyšuje, ak sa používajú spoločne. Vybrané nutraceutiká sa prejavujú pri prevencii a liečbe diabetického šedého zákalu, zlepšení mozgového metabolizmu, neuropatie a retinopatie. Kombináciou nutraceutík, napr. s vitamínom C, sa vytvára synergický komplex, pričom vitamín C regeneruje vitamín E. Ovplyvňuje sa tvorba červených krviniek, obnova a rast svalovej hmoty a ďalších tkanív, nezriedka majú močopudné účinky, čím sa znižuje krvný tlak.

Je preto výhodné pripraviť spoločnú formu edavaronu a nutraceutika. Zvlášť výhodné je v niektorých prípadoch ovplyvnenie Teologických vlastností krvi a patológií hlavných tepien.

Postup prípravy podľa vynálezu je charakterizovaný :

a) rozpustením 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ónu v rozpúšťadle a zahrievaním pri definovanej teplote

b) pridaním stechiometrického množstva hosťovskej molekuly (kokryštalizačný partner) a zahrievaním pri definovanej teplote do vytvorenia roztoku

c) ochladením zmesi a izoláciou kokryštalickej formy a príležitostne

d) mikronizáciou kryštálov na požadovanú veľkosť

Podľa predloženého vynálezu sa v kroku (a) na prípravu roztoku používajú rozpúšťadlá vybrané zo skupiny hexán, toluén, acetonitril, dimetylformamid, alkoholy Ci až C5, kyselina octová, tetrahydrofurán, ketóny C3 až Cé, dietylénglykol, etoxyetanol, etyl laktát a voda alebo ich zmesi. V kroku (a) sa používa teplota 40 až 160 °C, s výhodou teplota varu rozpúšťadla.

Je zrejmé, že veľké množstvo ďalšieho rozpúšťadla môže viesť k vylúčeniu látky v olejovitej forme. Je preto výhodné ho pridávať za stáleho miešania. Naopak, v niektorých prípadoch môže viesť veľké množstvo rozpúšťadla k zriedenému roztoku, z ktorého kryštalizuje produkt až po dlhom čase resp. až po čiastočnom zakoncentrovaní. Je zrejmé, že je možné pridávať aj jednotlivé zložky rozpustené v rozdielnych rozpúšťadlách. V kroku (b) sa používa teplota 40 až 140°C, s výhodou teplota varu reakčnej zmesi. V kroku (c) sa ochladí kryštalizačná zmes na teplotu 0°C až 40°C, s výhodou na teplotu 10°C až 20°C.

Izolácia v kroku (c) sa uskutoční filtráciou, s výhodou za zníženého tlaku, alebo odstredením. Filtračný koláč je možné premývať rozpúšťadlom inertným za podmienok izolácie, ako sú étery C4 až Cé, alebo alkány ako hexán. Použitý molárny pomer aktívnej komponenty a kokryštalizačného partnera je 1:1, i keď v niektorých prípadoch sa získajú kokryštály kryštalizáciou s vyšším pomerom komponent napr. 1:2, 1:3, 1:4.

Alternatívne je možné zlúčeniny podľa vynálezu pripraviť:

a) zmiešaním stechiometrického množstva 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//pyrazol-3-ónu a kokryštalizačného partnera a

b) príležitostne prídavkom malého množstva rozpúšťadla a spoločným mletím tuhej fázy do vytvorenia kokryštálu

c) a izoláciou kokryštalickej formy

Ako rozpúšťadlo pre urýchlenie prípravy kokryštálov sa použije hexán, toluén, acetonitril, dimetylformamid, alkoholy C t až C₅, kyselina octová, tetrahydrofurán, ketóny C3 až Cď, diétylenglykol, etoxyetanol, etyl laktát a voda alebo ich zmesi.

Prednostne je kokryštalizačný partner vybraný zo skupiny nutraceutík a látok uvedených napr. v zozname GRAS alebo EAFUS alebo excipientov aplikovaných vo farmácii. Napr. kokryštalizačný partner môže byť amin, amid, sulfonamid, karboxylová kyselina, sulfonová kyselina, heterocyklická zlúčenina, fenol alebo polyfenol. Je zrejmé že uvedené látky môžu byť aj vo forme farmaceutický akceptovateľných solí ako napr hydrochloridy alebo sodné soli. Ako kokryštalizačný partner sú vybrané kvercetín, kyselina gálová, kyselina chlorogénová, kyselina 1,3,5-benzéntrikarboxylová, kyselina

3,4-dihydroxybenzoová, taurín, vitamíny ako nikotínamid a kyselina askorbová, kyselina adipová, kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina kamfor-10-sulfónová, kyselina glykolová, kyselina asparágová, kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2.1]heptán-l-karboxylová, kyselina hydrochinónsulfónová, kyselina 5sulfosalicylová, kyselina 3-sulfobenzoová, kyselina trieslová, kyselina jantárová, močovina, imidazolidíntrión, biuret, kyselina 2-ketoglutarová, hydrochlorotiazid, aloxán, 2-hydroxyjantarová kyselina, kyselina 4-aminosalicylová, kyselina etyléndiamíntetraoctová, kyselina chinová, 4-acetamidofenol, kyselina listová, N(4)acetylcytozín, amid kyseliny mliečnej, acetamidín, D-mannitol, D-tokoferol sukcinát, cholín chlorid, D-glukóza, D-fruktóza, hydantoín, urazol, diacetamid, imid kyseliny glutárovej, kyselina glutárová, 2-imidazolidinón, kofeín, l,2-benzizotiazol-3(2/7)-on(1,1-dioxid), kyselina pyrolidín-5-karboxylová, kyselina L-glutámová, kyselina Nacetyl-L-glutámová, L-kamitín, kyselina mliečna, kyselina kávová, kyselina ferulová, 3,3'-tiodi(propiónová kyselina), koenzým Q10, kyselina kojová, kyselina 2metoxyizoftalová, kyselina maleínová, L-lyzín, donepezil.

Postupom podľa vynálezu získané kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol3-ónu môžu byť použité pre prevenciu alebo liečbu rôznych chorôb. Ich primárna aktivita spočíva v schopnosti zhášať voľné radikály a platí, že ich antioxidačná aktivita

9?

všeobecne rastie s počtom hydroxylových skupín a je potenciovaná aj ich prítomnosťou v molekule kokryštalizačného partnera. Ich použitie pre liečbu alebo prevenciu zahrňuje, ale nie je limitované, neurodegeneratívne ochorenia ako Alzheimerova choroba, reumatoidné artritídy, regeneráciu po ischemickej cievnej mozgovej príhode, alebo infekčné choroby spôsobené baktériami.

Vynález sa rovnako týka aj solvátov kokryštálov a ich polymorfných modifikáci. Objavenie nových kokryštálov ako farmaceutický využiteľných zlúčenín poskytuje nové príležitosti na zlepšenie vlastností a účinkov farmaceutických výrobkov. To rozširuje repertoár foriem, ktorých formulácie mám k dispozícii pre navrhovanie prípravkov.

Stabilita nových kokryštálov bola sledovaná pri vystavení definovanej vlhkosti. Tieto boli ponechané v stabilitnej komore do bodu, kedy sa dosiahla rovnováha. Obsah vody bol stanovený pre každú formu gravimetrický (% obsahu vody bolo stanovené v prepočte na vstupnú látku). Pozorovalo sa, že kokryštál tvorený 5-metyl-2-fenyl-2,4dihydro-3//-pyrazol-3-ónom a nutraceutikom ako nikotín amid, kyselina askorbová, cholín chlorid, kyselina izoaskorbová alebo N-acetylcytozín je podstatne menej hygroskopický než samotný nikotínamid, kyselina askorbová, kyselina izoaskorbová resp. N-acetylcytozín pri 65 % r.h. a teplote 25°C.

Zistilo sa, že v záťažovej komore po expozícii vlhkosťou 75% r.v., pri 25°C vzorka kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a N-acetylcytozínu sorbovala 1.1 % vody pričom samotný N-acetylcytozín sorboval 11% vody. Analogicky v prípade kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny izoaskorbovej sa dosiahla hodnota 0.4 % pričom kyselina izoaskorbová sorbovala 5% vody. Adsorpčné izotermy niektorých ďalších kokryštálov a kokryštalizačných partnerov udáva graf č. 1. Kde adsorpčné izotermy kokryštálov edaravonu a kokryštalizačných partnerov sú vzostupnom poradí: kyselina sulfosalicylová (homá čiara), laktamid, edaravonlaktamid, kyselina 3,5-dihydroxybenzoová, kyselina galová, edaravon-kyselina sulfosalicylová, edaravon-kyselina galová, edaravon-kyselina 3,5-dihydroxybenzoová (spodná čiara).

Nižšia hygroskopicita kokryštálov 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a nutraceutík je výhodou pre spracovanie a skladovanie v kryštalickej forme. Z toho vyplývajúcou ďalšou výhodou kokryštálov podľa tohto vynálezu je jednotnosť produktu a stabilita, v dôsledku čoho sa u týchto látok zlepšujú ich mechanické vlastnosti pre spracovanie (filtrácia, sušenie, mletie a pod.). Ak sú využité ako farmaceutické látky, kokryštály edavaronu podľa vynálezu sa podávajú vo forme farmaceutických kompozícii. Kompozície môžu byť pripravené pre ľubovoľný spôsob aplikácie a príprava vhodnej farmaceutickej kompozície pre konkrétny spôsob podávania je dobre známa odborníkom vo farmácii. Predložený vynález sa teda týka aj farmaceutických kompozícií, ktoré obsahujú terapeuticky významné množstvo kokryštálov edavaronu spolu s farmaceutický prijateľným riedidlom alebo nosičom. Významný je stabilizujúci efekt kokryštalizačného partnera pri príprave injekčnej liekovej formy. Bolo zistené, že vodno-etanolické roztoky kokryštálov edavaronu pripravené podľa vynálezu sú stabilné, bez rozkladných reakcii v injekčnom roztoku.

Vo výhodnej forme sú farmaceutické kompozície podľa vynálezu pripravené pre injekcie, napr. pre intravenóznu aplikáciu. Typická kompozícia pre aplikáciu zahŕňa sterilný izotonický vodný roztok a korozpúšťadlo napr. etanol, polyetylénglykol. Takýto prípravok môže zahŕňať chelatačné činidlo a antioxidant, ale výhodou podľa vynálezu je použitie kokryštálu edavaronu, ktorého kokryštalizačný partner kombinuje uvedené vlastnosti.

V ďalšom bode vynálezu sú uvedené kompozície zahŕňajúce nové kokryštály nutraceutík. Spôsob ich prípravy podľa tohto vynálezu závisí od zručnosti osôb majúcich príslušnú kvalifikáciu v danej oblasti. Kokryštály podľa uvedeného vynálezu sa môžu výhodne spracovať do farmaceutických prostriedkov. V tomto prípade sa hlavná aktívna zložka použije v kombinácii s niektorými prvkami, ako sú spojivá, plnivá, riedidlá, stabilizátory, chelatačné činidlá, disintegranty, mazivá podľa požadovaného podania.

Výhodné je kombinovať v prípravkoch nové kokryštály nutraceutík s ďalšími známymi nutraceutikami alebo ingradientami ako vitamíny, flavonoidy, koenzím Q, podobne ako u dosiaľ používaných potravinových doplnkov s aktívnou látkou bioflavonoidy.

Pevné perorálne liekové formy sú napríklad tvrdé želatínové kapsuly a tablety.

V prípravkoch podľa tohto vynálezu sa množstvo kokryštálu pohybuje v rozpätí od 5% do 85%, najvýhodnejšie 5% až 35% hmotnosti. Riedidlá, ktoré môžu byť začlenené podľa uvedeného vynálezu, sú prednostne vybrané zo skupiny prírodných alebo umelých uhľohydrátov, ako je napríklad laktóza, sacharóza, glukóza, škroby, sorbitol a mikro-kryštalická celulóza. Zo spojív sú prednostne vybrané škroby, cukry, celulóza a jej deriváty, želatína a polyvinylpyrolidón. Škrob a mikro-kryštalická celulóza majú

11, .· s prednosť v použití ako dobré disintegranty. Preferuje sa najmä Avicel (TM), typ komerčnej mikrokryštalickej celulózy. Mazivá použité pre pevné liekové formy sú vybrané zo skupiny pozostávajúcej z mastenca, oxidu kremičitého, magnézium stearátu, glidantu, aerosólu, kyseliny stearovej a stearínu.

Preferované pre aplikácie sú injekcie obsahujúce 3 až 60 mg/ml kokryštálu edavaronu na celkový objem injekcie. Ako riedidlo je použitá voda a farmaceutický akceptovateľné rozpúšťadlá v objeme 10 až 70% na objem injekcie. Ako farmaceutický akceptovateľné rozpúšťadlá sa použijú etanol, propylénglykol, polyetylénglykol a pod. Výhodné je udržovať pH injekcie v rozmedzí 2.0 až 6.5, taktiež sa môže použiť farmaceutický akceptovateľný stabilizátor. Pre úpravu pH sa použijú napr. kyselina citrónová, kyselina vinná, kyselina askorbová, kyselina etyléndiamíntetraoctová a ich soli. Injekcie ďalej môžu obsahovať farmaceutický akceptovateľný stabilizátor. Aj v tomto prípade je vhodné využiť ako farmaceutický akceptovateľný stabilizátor kokryštalizačného partnera napr. L-cysteín, kyselinu 3,3'-tiodipropiónovú, kyselinu askorbovú, kyselinu gálovú, kyselina etyléndiamintetraoctovú a ich soli.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok č. la-p predstavuje Fourierove transformačné infračervené spektrá FTIR vybraných kokryštálov meraných na prístroji Spektrometer Nicolet, Impact 410. Na meranie bola použitá ATR meracia technika, program Omnic verzia 5.2.

Obrázok č. la: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - kyselina asparágová (2:1), (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3/ŕpyrazol-3-ónu - kyseliny L- asparágovej (dolná línia)

Obrázok č. lb: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - močovina (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu močoviny (dolná línia)

Obrázok č. lc, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - kyselina 3,4dihydroxybenzoová (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Hpyrazol-3-ónu - kyseliny 3,4-dihydroxybenzoovej (dolná línia)

Obrázok č. ld, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - kyselina galová (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu kyseliny galovej (dolná línia)

12,

Obrázok č. le, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3J7-pyrazol-3-ónu a nikotínamidu (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu nikotínamidu (dolná línia)

Obrázok č. lf, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu adonepezil hydrochloridu (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol3-ónu a donepezil hydrochloridu (dolná línia)

Obrázok č. lg, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu aD-fruktózy (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu aDfruktózy (dolná línia)

Obrázok č. lh, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny mliečnej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny mliečnej (dolná línia)

Obrázok č. li, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny Lglutámovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3/Z-pyrazol-3ónu a kyseliny L-glutámovej (dolná línia)

Obrázok č. lj, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny kávovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny kávovej (dolná línia)

Obrázok č. lk, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3,3'-tiodipropiónovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4dihydro-3ŕ/-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3,3'-tiodipropiónovej (dolná línia)

Obrázok č. 11, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny kójovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny kójovej (dolná línia)

Obrázok č. Im, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ónu a draselnej soli kyseliny hydrochinónsulfónovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl2,4-dihydro-3ŕ/-pyrazol-3-ónu a draselnej soli kyseliny hydrochinónsulfónovej (dolná línia).

Obrázok č. In, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny glutárovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3ónu a kyseliny glutárovej (dolná línia).

Obrázok č. lo, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu aacetamidín hydrochloridu (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol3-ónu a acetamidín hydrochloridu (dolná línia).

Obrázok č. lp, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kofeínu (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kofeínu (dolná línia).

Obrázok č. 2a-f uvádza fotografie z polarizačného mikroskopu (Nikon Eclipse LV ÍOOPOL) vybraných kokryštálov a odpovedajúcich kokryštalizačných partnerov (vľavo).

(a) kyselina galová, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - kyselina galová (b) kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2-oxabicyklo[2.2.1 jheptán-l-karboxylová,kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo [2.2.1 jheptán-1 -karboxylová (c) močovina, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón - močovina 2 (d) gáforsulfónová kyselina, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón gáforsulfónová kyselina (e) izoaskorbová kyselina, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Z/-pyrazol-3-ón izoaskorbová kyselina (f) kyselina jantárová, kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3/7-pyrazol-3-ón kyselina j antárová

Obrázok č. 3a-e predstavuje vybrané difraktogramy (XRPD-rôntgenová prášková difrakcia). Meranie sa robilo na práškovom difraktometri: Bragg-Brentano diffractometer Philips PW 1730/1050, s kobaltovou lampou: β-filtered CoKa radiation, napätie 40 kV/35 mA, rozsah 3° - 51° 2Θ, krok 0.02°. Kľúčové medzirovinné vzdialenosti a relatívne intenzity k obrázkom sú uvedené v sprievodnej tabuľke.

3a: 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón (horná línia), kokryštál 5-metyl-2fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2.1 jheptán-1-karboxylovej (1:1) (stredná línia), kyselina 3-oxo-4,7,7trimetyl-2-oxabicyklo[2.2.1]heptán-l-karboxylová (dolná línia).

3b: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ónu a močoviny (1:1)

3c: gáforsulfónová kyselina (dolná línia), 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón (stredná línia), kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ónu a gáforsulfónovej kyseliny (1:1) (horná línia).

3d: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny gálovej (2:1).

14/

3e: 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ón (dolná línia), kvercetín (stredná línia), kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu akvercetínu (1:1) (horná línia).

Obrázok č. 4 a-b uvádzajú záznamy z disperzného Ramanovho mikroskopu DXR Smart Microscope s excitačným laserom (532 nm).

Obrázok č.4a, Ramanovo spektrum: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol3-ónu a kyseliny D-vínnej (horná línia), 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón (stredná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3/7-pyrazol-3-ón a kyselina D-vínna (dolná línia).

Obrázok č.4b, Ramanovo spektrum: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Z/pyrazol-3-ónu a kyseliny citrónovej (horná línia), mechanická zmes 5-metyl-2-fenyl2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón a kyselina citrónová (dolná línia).

Obrázky č.5 a-c uvádzajú záznamy získané diferenčnou kompenzačnou kalorimetriou (DSC). DSC merania sa uskutočnili za použitia prístroja Perkin-Elmer DSC-7 (PerkinElmer, USA) so softwarom Pyris. Teplotná škála bola kalibrovaná za použitia In, Sn a Zn. Entalpická škála bola kalibrovaná na entalpiu topenia In. Vzorky o hmotnosti 3-4 mg sa umiestnili v štandardnej zalisovanej hliníkovej miske, ako očistný plyn sa použil dusík. Na záznamoch sú endotermické piky orientované nahor. Záznamy sú korigované na základnú líniu. Rýchlosť ohrevu bola 10 C / min, v teplotnom rozsahu 100-250 C. Obrázok č.5a, DSC záznam: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kvercetínu (dolná línia), 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ón (stredná línia) a kvercetín (horná línia)

Obrázok č.5b, DSC záznam: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny galovej (dolná línia), 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón (stredná línia) a kyselina galová (horná línia)

Obrázok č.5c, DSC záznam: kokryštál 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny gáforsulfónovej (dolná línia), 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ón (stredná línia) a kyselina gáforsulfónová (horná línia)

Látky ktoré sú predmetom vynálezu boli charakterizované FT-IR spektrom, Ramanovým spektrom, teplotou topenia, DSC/TGA a XRPD.

V nasledovných príkladoch je opísaný spôsob prípravy kokryštálov 5-metyl-2-fenyl2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu podľa predloženého vynálezu. Príklady slúžia na ďalšie objasnenie predkladaného vynálezu bez toho, aby v zmysle vynálezu ohraničovali jeho uskutočnenie na opísané príklady.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyI-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ónu a nikotín amidu.

K 100 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ónu v mlecej nádobe, objemu 10 ml (nerezová oceľ) sa pridá 72.5 mg nikotínamidu a zmes sa premieša špachtľou. Následne sa pridá 10 μΐ metanolu a mlecia guľa 9 mm, (nerezová oceľ). Nádoba sa vyfúka dusíkom a uzavrie. Následne sa zmes podrobí mletiu vo vibračnom guľovom mlyne (frekvencia 25/s) počas 1 hodiny a ponechá sa stáť cez noc. Produkt sa vyberie. Získalo sa 160 mg kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-377-pyrazol-3-ónu a nikotín amidu (1:1). Bod topenia: ~99°C, (Kofler blok). Látka bola charakterizovaná XRPD, IR, DSC a RTG (monokryštálovou) štruktúrnou analýzou. Strata sušením bola stanovená termogravimetricky (TG) <0.15%.

Príklad 2

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny galovej. K 100 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu v mlecej nádobe objemu 10 ml (nerezová oceľ) sa pridá 48,8 mg kyseliny galovej a zmes sa premieša špachtľou. Následne sa pridá 10 μΐ DMF a mlecia guľa 9 mm, (nerezová oceľ). Nádoba sa uzavrie a obsah sa ochladí kvapalným dusíkom. Následne sa zmes melie vo vibračnom guľovom mlyne (frekvencia 25/s) počas 30 minút a ponechá sa stáť cez noc. Produkt sa vyberie. Získalo sa 128 mg kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny galovej (2:1). Bod topenia: 154-155°C (Kofler blok). Strata sušením stanovená termogravimetricky (TG) <0.15%.

Príklad 3

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3-oxo4,7,7-trimetyl-2-oxabicyklo[2.2.1 jheptán-1 -karboxylovej.

16'

K 100 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-37/-pyrazol-3-ónu v mlecej nádobe objemu 10 ml (nerezová oceľ) sa pridá 113 mg kyseliny 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2.1]heptán-l-karboxylovej a zmes sa premieša špachtľou. Následne sa pridá 10 μΐ DMF a mlecia guľa 9 mm (nerezová oceľ). Nádoba sa uzavrie a obsah sa ochladí kvapalným dusíkom. Následne sa zmes melie počas 0.5 hodiny a ponechá sa stáť cez noc. Jemne kryštalický produkt sa vyberie z nádoby. Získalo sa 200 mg kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3-oxo-4,7,7trimetyl-2-oxabicykIo[2.2. l]hepáan-l-karboxylovej (1:1). Bod topenia: 124°C (Kofler blok). Látka bola charakterizovaná XRPD ako je ukázané na obr.3 a RTG (monokryštálovou) štruktúrnou analýzou. Strata sušením stanovená termogravimetricky (TG)<0.15%.

Príklad 4

Príprava injekčnej formy

1.0 g kokryštálu edavaronu a kyseliny askorbovej sa rozpustil v 50 ml etanolu. Následne sa pridalo 50 ml vody pre injekcie a zmes sa prefiltrovala cez mikrobiálny aseptický filter. Sterilný roztok sa rozplnil do 10 ml vialiek pod atmosférou dusíka a následne sa vialky hermeticky uzavreli (koncentrácia edavaronu: 5mg/ml).

Príklad 5-17

Analogicky podľa príkladu 2 sa pripraví séria kokryštálov s tým, že sa použije uvedené rozpúšťadlo.

Príklad	5-metyl-2-fenyl-2,4-di hydro-377-pyrazol -3-ón	rozpúšťadlo	Kokryštalizačný partner
Príklad 5	100 mg	metanol	kyselina citrónová
Príklad 6	100 mg	DMF	kyselina vinná,
Príklad 7	100 mg	acetón	kyselina chinová
Príklad 8	100 mg	DMF	hydrochlorotiazid,
Príklad 9	100 mg	voda	EDTANa
Príklad 10	100 mg	metanol	močovina
Príklad 11	100 mg	toluén	kyselina 1,3,5-benzéntrikarboxylová
Príklad 12	100 mg	DMF	kyselina 3,4-dihydroxybenzoová
Príklad 13	100 mg	metanol	kyselina glutárová

Príklad 14	100 mg	voda	kyselina izoaskorbová
Príklad 15	100 mg	voda	kyselina askorbová
Príklad 16	100 mg	acetón	kyselina glutámová
Príklad 17	100 mg	DMF/voda	kyselina asparágová,

Príklad 18

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kyseliny 3-oxo4,7,7-trimetyl-2-oxabicyklo[2.2.1]heptan-l-karboxylovej.

200 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3Z/-pyrazol-3-ónu sa rozpustí v ultrazvukovom kúpeli v 5.5 ml metanolu. Následne sa pridá 226 mg kyseliny 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2.1]heptán-l-karboxylovej. Zmes sa zahreje do varu a následne sa prefiltruje cez Nylon filter (0.45pm). K filtrátu sa pridá voda do zákalu a zmes sa ponechá voľne kryštalizovať. Po niekoľkých dňoch sa vylúčená látka odfiltruje cez frítu S3, premyje sa 2 x 1.7 ml hexánu a vysuší pri teplote 20°C za vákua vodnej vývevy v exikátore. Izolovalo sa 375 mg kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3ónu a kyseliny 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2-oxabicyklo[2.2.1]heptan-l-karboxylovej (1:1).

Príklad 19

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kvercetinu.

57.6 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-onu a 100 mg kvercetinu sa rozpustí v 1.2 ml dimetylformamidu pri teplote 85-90 °C. Následne sa za miešania pridá 3.8 ml etanolu. Zmes sa zahreje do varu a rýchlo prefiltruje cez Nylon filter (0.45 pm). Zmes sa v otvorenej vialke nechá voľne kryštalizovať. Po niekoľkých dňoch sa vylúčená látka odfiltruje cez fritu S3, premyje sa 2 x 1.5ml éteru a vysuší pri teplote 45°C za vákua vodnej vývevy v exikátore. Izolovalo sa 110 mg kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a kvercetinu (1:1).

Príklad 20

Príprava disperzie 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a tokoferolpolyetylénglykoljantáranu pre pevné liekové formy.

Na vodnom kúpeli sa pri teplote 65 °C v banke roztopí 500 mg tokoferolpolyetylenglykoljantaranu (TPGS, Eastman-Kodak). Následne sa vnesie za miešania 250 mg 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu. Zmes sa mieša pod atmosférou dusíka počas 0.5 h pri teplote 65 až 70 °C. Po odstavení ohrevu sa pridá 18

PVP (BASF) a následne Cab-O-Sil (Cabot) vo forme vodných roztokov. Chladením postupne vykryštalizovaná hmota sa lyofilizuje počas 6 hodín a náslnedne sa rozdrví v trecej misky. Získaná tuhá disperzia 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu tokoferolpolyetylenglykoljantáranu a PVP-Cab-O-Silu sa použije pre prípravu pevnej liekovej formy.

Príklad 21

Príprava kokryštálu 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ónu a L-asparágovej kyseliny.

Analogicky ako v príklade 1 s tým, že sa použijú 2 eq. kyseliny L- asparágovej.

Príklad 22

Príprava injekčnej formy

V banke sa rozpustí 500 mg kokryštálu edavaronu a kyseliny etyléndiaminotetraoctovej (4:1), v 30 ml etanolu. Následne sa pridá roztok 210 mg kyseliny citrónovej a 150 mg trojsodnej soli kyseliny citrónovej v 65 ml vody pre injekcie a pH sa upraví na hodnotu

3.6 prídavkom kyseliny chlorovodíkovej. Objem sa doplní na 100 ml vodou pre injekcie a filtruje cez aseptický membránový filter. Roztok sa rozplní do 10 ml vialiek pod ochrannou atmosférou dusíka. Injekčný roztok bol transparentný a bez farebnej zmeny po 14 dňoch skladovania pri 65 °C.

Claims (10)

1. Kokryštály 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3H-pyrazol-3-ónu a kokryštalizačného partnera, kde kokryštalizačný partner je vybraný zo skupiny kvercetín, kyselina gálová, kyselina chlorogenová, kyselina 1,3,5-benzéntrikarboxylová, kyselina 3,4dihydroxybenzoová, taurín, vitamíny ako nikotín amid a kyselina askorbová, kyselina adipová, kyselina citrónová, kyselina vínna, kyselina gáfor-10-sulfónová, kyselina glykolová, kyselina asparágová, kyselina 3-oxo-4,7,7-trimetyl-2oxabicyklo[2.2. l]heptán-l-karboxylová, kyselina hydrochinónsulfónová, kyselina 5sulfosalicylová, kyselina 3-sulfobenzoová, kyselina trieslová, kyselina jantárová, močovina, imidazolidíntrión, biuret, kyselina 2-ketoglutárová, hydrochlorotiazid, aloxán, kyselina 2-hydroxyjantárová, kyselina 4-aminosalicylová, kyselina etyléndiamíntetraoctová, kyselina chinová, 4-acetamidofenol, kyselina listová, N(4)acetylcytozín, amid kyseliny mliečnej, acetamidín, D-mannitol, D-tokoferol jantarát, Dtokoferol palmitát, cholín chlorid, D-glukóza, D-fruktóza, trehalóza, hydantoín, urazol, diacetamid, imid kyseliny glutárovej, kyselina glutárová, 2-imidazolidinón, kofeín, 1,2benzizotiazol-3(2/7)-on-( 1,1 -dioxid), kyselina pyrolidín-5-karboxylová, kyselina Lglutámová, kyselina V-acetyl-L-glutámová, L-kamitín, kyselina mliečna, kyselina kávová, kyselina ferulová, kyselina 3,3'-tiodipropiónová, koenzým Q10, kyselina kojová, kyselina 2-metoxyizoftalová, kyselina maleínová, L-lyzín, donepezil a ich farmaceutický akceptovateľných solí.

2. Spôsob prípravy kokryštálov podľa nároku 1 vyznačujúci satým, že sa nechajú vzájomne pôsobiť 5-metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón a kokryštalizačný partner za tvorby vodíkových väzieb v molámom pomere komponent od 0.8 až 1.0 ku 1.0 až 4.2 a následne sa izoluje vzniknutý kokryštál.

3. Spôsob prípravy kokryštálov podľa nároku 2 vyznačujúci sa tým, že 5metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3H-pyrazol-3-ón a kokryštalizačný partner sa nechajú vzájomne pôsobiť v guľovom mlyne s výhodou s prídavkom rozpúšťadla.

4. Spôsob prípravy kokryštálov podľa nároku 2 vyznačujúci sa tým, že 5metyl-2-fenyl-2,4-dihydro-3//-pyrazol-3-ón a kokryštalizačný partner sa nechajú vzájomne pôsobiť v rozpúšťadle s jeho následným pomalým odparením.

5. Spôsob prípravy kokryštálov podľa nároku 3a4 vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo sa vyberie zo skupiny hexán, toluén, acetonitril, dimetylformamid, alkoholy Ci až C5, kyselina octová, tetrahydroíurán, ketóny C3 až Cô, dietylenglykol, etoxyetanol, etyl laktát a voda alebo ich zmesi.

6. Použitie kokryštálov podľa nároku 1 vyznačujúce sa tým, že sa použijú na prípravu nutraceutík a liečiv na prevenciu a liečenie chronickej žilovej nedostatočnosti, alergií, artritíd, ateroskleróz, diabetes, vysokého cholesterolu, vysokého krvného tlaku, zápalov, mŕtvice, vredového ochorenia tráviaceho systému.

7. Prípravok obsahujúci aspoň jeden kokryštál podľa nároku 1.

8. Prípravok obsahujúci aspoň jeden kokryštál podľa nároku 6 a 7 vyznačujúci satým, že jev injekčnej lieková forme.

9. Prípravok podľa nároku 8 vyznačujúci satým, že lieková forma obsahuje kokryštalizačného partnera ako farmaceutický akceptovateľný stabilizátor.

10. Prípravok podľa nároku 8a9 vyznačujúci sa tým, že farmaceutický akceptovateľný stabilizátor je chelatačné činidlo.