SK278783B6 - Spôsob naviazania biologicky aktívnych látok obsah - Google Patents

Description

Uvedené nedostatky odstraňuje spôsob nadviazania biologicky aktívnej látky, obsahujúcej aminoskupiny, na polysacharid s karboxylovými skupinami, prostredníctvom aktivácie karboxylov izobutylchloroformiátom v bezvodom prostredí. Podstata vynálezu spočíva v tom, že karboxylovaný polysacharid v H⁺ forme sa rozsuspenduje v bezvodom dimetylformamide. Biologicky aktívna látka (ligand), obsahujúca aminoskupinu, sa rozpustí v rovnakom diele dimetylformamidu v molámom pomere 1 až 1000 : 1 voči polysacharidu. Suspenzia polysacharidu sa ochladí minimálne na 0 °C a pridá sa ekvimoláme množstvo (vzhľadom na ligand) trietylamínu a izobutylchloroformiátu. Inkubuje sa 15 až 30 min. Potom sa pridá roztok biologicky aktívnej látky v dimetylformamide a inkubuje sa pri laboratórnej teplote 15 až 30 hod. Nezreagovaná biologicky aktívna látka a v dimetylformamide rozpustné reakčné produkty sa odstránia filtráciou a premývaním vhodným nevodným rozpúšťadlom (metanol, etanol, dioxán, acetón a pod.) alebo dialýzou. Výťažnosť je v závislosti od reaktivity aminu 10 až 50 %.

Viazanie biologicky aktívnych látok, obsahujúcich aminoskupiny na polysacharid, spôsobom podľa vynálezu má oproti doteraz známym spôsobom viacero výhod. Predovšetkým sa pracuje v heterogénnej fáze. Biologicky aktívna látka je v kvapalnej fáze rozpustená v bezvodom dimetylformamide, kým polysacharid ostáva v tomto prostredí nerozpustený a tvorí druhú fázu. To znamená, že je možné jednoduché odstránenie reakčných produktov od polysacharidu s nadviazanou biologicky aktívnou látkou v kvapalnej fáze jednoduchou filtráciou. Vytvorená amidická väzba medzi biologicky aktívnou látkou a polysacharidom je štiepiteľná in vivo prostredníctvom nešpecifických esteráz a proteáz, nachádzajúcich sa na povrchu buniek, alebo v plazme vyšších organizmov.

Uvedené príklady ilustrujú, ale neobmedzujú predmet vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Polygalakturónová. kyselina (1 g) v H⁺ forme sa rozsuspenduje v 5 ml bezvodého dimetylformamidu a suspenzia sa ochladí na - 5 °C. Pridá sa 1 ml trietylamínu a 1 ml izobutylchloroformiátu. Inkubuje sa za miešania 30 min. Pridá sa 500 mg arabinozyl cytozínu (araC ) rozpusteného v 5 ml bezvodého dimetylformamidu a inkubuje sa za miešania cez noc za laboratórnej teploty. Reakčná zmes sa dialyzuje 48 h oproti 3x21 destilova2 nej vody pri 4 °C. Množstvo araC nadviazaného na polysacharid sa vyhodnotilo elementárnou a spektrálnou analýzou. Výťažok bol 100 mg araC/g nosiča (20 %).

Príklad 2

Postupovalo sa ako v príklade 1 s tým rozdielom, že miesto polygalakturónovej kyseliny sa použil 6-karboxymetyl-l,3-[l-glukán v H¹ forme. Výťažok reakcie bol 110 mg/g (22 %).

Príklad 3

Postupovalo sa ako v príklade 1 s tým rozdielom, že namiesto araC sa použil 1,6-diaminohexán. Výťažok reakcie bol 250 mg (50 %).

Príklad 4

Postupovalo sa ako v príklade 1 s tým rozdielom, že ako polysacharid sa použil 6-karboxymetyl-l,4-alfa-glukan v H⁺ forme a ako biologicky aktívna látka s voľnou aminoskupinou sa použil benzylamín. Výťažok reakcie 225 mg/g (45 %).

Príklad 5

Polygalakturónová kyselina (1 g) v H⁺ forme sa rozsuspenduje v 10 ml bezvodého dimetylformamidu a suspenzia sa ochladí na 2 °C. Pridá sa 100 ul trietylamínu a 100 ul izobutylchloroformiátu. Inkubuje sa za miešania 15 min. Pridá sa 50 mg benzylamínu a inkubuje sa 30 h za laboratórnej teploty a za miešania. Reakčná zmes sa filtruje, premýva metanolom, acetónom a vysuší sa. Výťažok 25 mg benzylamínu na gram polygalakturónovej kyseliny (50 %).

Priemyselná využiteľnosť

Vynález má využitie pri ochrane poľnohospodárskych rastlín humánnej a veterinárnej medicíny.

Claims (1)

1. Spôsob nadviazania biologicky aktívnych látok obsahujúcich aminoskupinu na polysacharid, vyznačujúci sa tým, že karboxylovaný polysacharid v ľl⁺ forme sa rozsuspenduje v bezvodom dimetylformamide, suspenzia sa ochladí minimálne na 0 °C, pridá sa ekvimolárne množstvo, vzhľadom na biologicky aktívna látku, trietylamínu a izobutylchloroformiátu, inkubuje sa 15 až 30 min, pridá sa roztok biologicky aktívnej látky v molámom pomere 1 až 1000 : 1 vzhľadom na polysacharid v bezvodom dimetylformamide a inkubuje sa pri laboratórnej teplote 15 až 30 hodín.