SE532396C2 - Process for enzymatic decolorization of printed paper - Google Patents

Process for enzymatic decolorization of printed paper

Info

Publication number
SE532396C2
SE532396C2 SE0800051A SE0800051A SE532396C2 SE 532396 C2 SE532396 C2 SE 532396C2 SE 0800051 A SE0800051 A SE 0800051A SE 0800051 A SE0800051 A SE 0800051A SE 532396 C2 SE532396 C2 SE 532396C2
Authority
SE
Sweden
Prior art keywords
pulp
paper
culture
ink
decolorization
Prior art date
Application number
SE0800051A
Other languages
Swedish (sv)
Other versions
SE0800051L (en
Inventor
Raghukumar Chandralata
Mohandass Chellandi
Antonio Mascarenhas
Vijaykumar Kannoujia
Original Assignee
Council Scient Ind Res
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Council Scient Ind Res filed Critical Council Scient Ind Res
Publication of SE0800051L publication Critical patent/SE0800051L/en
Publication of SE532396C2 publication Critical patent/SE532396C2/en

Links

Classifications

    • DTEXTILES; PAPER
    • D21PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21CPRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/02Working-up waste paper
    • D21C5/025De-inking
    • DTEXTILES; PAPER
    • D21PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21CPRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/005Treatment of cellulose-containing material with microorganisms or enzymes
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02WCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00Technologies for solid waste management
    • Y02W30/50Reuse, recycling or recovery technologies
    • Y02W30/64Paper recycling

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Paper (AREA)
  • Developing Agents For Electrophotography (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

532 396 2 innehåller vanligen järnoxid (omkring 55%), olefiner (omkring 5 %) och plast eller polymer (webbsida: httgz//wvvweng-tigscom). Olika hydrolytiska enzymer såsom oellulas, lipas, amylas av bakteriellt ursprung eller svampursprung, har individuellt eller i kombination använts för avfärgning av pappersavfall från kontor. (i) En publikation kan omnämnas, vari en metod för avfärgning av elektrostatiskt kopierade och tryckta papper, vilket kollektivt kallas kontorsavfall, inbegriper anbringande av avfärgningslösning till pappret som ska avfärgas, varvid avfärgningslösningen är sammansatt av en rengömingslösníng och en ytaktiv substans, avskavning av pappret för att ta bort tryckfärg från pappret och tvättning av pappret för att ta bort avfärgningslösning från pappret (US6022423 daterad 2000-02-08). Emellertid innefattar detta patent användning av en speciell anordning för avfärgningav hela ark och kan ej användas för massa. (ii) En publikation kan omnämnas, i vilken ett monokomponent-oellulas används för att ta bort tryckfärg och toners från tryckta papper (US5525193). 532 396 2 usually contains iron oxide (about 55%), oils (about 5%) and plastic or polymer (website: httgz // wvvweng-tigscom). Various hydrolytic enzymes, such as oellulase, lipase, amylase of bacterial origin or fungal origin, have been used individually or in combination for decolorizing paper waste from offices. (i) Mention may be made of a publication in which a method of decolorizing electrostatically copied and printed paper, collectively referred to as office waste, comprises applying a decolorizing solution to the paper to be decolorized, the decolorizing solution being composed of a cleaning solution and a surfactant of the paperboard. to remove ink from the paper and wash the paper to remove the decolorization solution from the paper (US6022423 dated 2000-02-08). However, this patent involves the use of a special device for decolorizing whole sheets and cannot be used for pulp. (ii) Mention may be made of a publication in which a monocomponent cellulose is used to remove ink and toners from printed papers (US5525193).

Tekniken att isolera monokomponent-cellulaser från mikroorganismer genom olika reningar, kromatografiska steg är tidskrävande och dyr. (iii) En publikation kan omnämnas, i vilken endoglukanas och hemicellulaser från ett flertal svampar används för effektiv avfärgning av elektrostatiskt kopierat papper och laserutskrivna papper (Gubitz et al. 1998). Emellertid måste massan behandlas med ytaktiva substanser och tvättas för att ta bort de flytande tryckfärgspartiklarna. ' (iv) En publikation kan omnämnas, i vilken avfärgning av laserutskrivna eller elektrostatiskt kopierade papper görs medelst användning av enzymer som innehåller ett beständigt bindemedel. Enzymet tillförs i den speclficerade formen för att förbättra speck-borttagning (patent nr. GB 2304741 daterat 26.03.97). På samma sätt som i referensema ovan. kvarstår problemet att ta bort tryokfärg medelst flotation med tekniken. (v) En publikation kan omnämnas, i vilken avfärgning av avfallspapper från kontor utförs genom att förbinda massan med en avfärgningsagent som innefattar enzymcellulas som företrädesvis är aktivt vid pH 4 till 8. Det behandlade pappret används vid tillverkning tidningspapper och papper av hög kvalitet (patent nr. EP 717144 daterat 19.06.96). På samma sätt som i de ovannämnda referenserna kvarstår problemet att ta bort tryckfärg medelst flotation med tekniken. 532 398 3 (vi) En publikation kan omnämnas, i vilken avfärgning av avfallspapper âstadkoms genom att inkubera pappersmassan medgcellulas vid 40°C under tryck i en timme. Efterföljande dissociation av tryckfärgpartiklar resulterar i att den tvättade massan är ljusare (patent nr. JP 06346390 daterat 20.12.94).The technique of isolating monocomponent cellulases from microorganisms through various purifications, chromatographic steps is time consuming and expensive. (iii) Mention may be made of a publication in which endoglucanase and hemicellulases from a number of fungi are used for efficient decolorization of electrostatically copied paper and laser printed paper (Gubitz et al. 1998). However, the pulp must be treated with surfactants and washed to remove the surface printing ink particles. (iv) A publication may be mentioned in which decolorization of laser-printed or electrostatically copied papers is effected by the use of enzymes containing a resistant binder. The enzyme is added in the specified form to improve speck removal (Patent No. GB 2304741 dated 26.03.97). In the same way as in the references above. the problem remains to remove ink by means of flotation with the technology. (v) Mention may be made of a publication in which decolorization of waste paper from offices is carried out by combining the pulp with a decolorizing agent comprising enzyme cellulase which is preferably active at pH 4 to 8. The treated paper is used in the manufacture of newsprint and high quality paper (patent No. EP 717144 dated 19.06.96). In the same way as in the above-mentioned references, the problem of removing ink by means of totation with the technique remains. 532 398 3 (vi) A publication may be mentioned in which decolorization of waste paper is effected by incubating the pulp with cellulose at 40 ° C under pressure for one hour. Subsequent dissociation of ink particles results in the washed pulp being lighter (Patent No. JP 06346390 dated 20.12.94).

Tekniken för inkubering under tryck och hög temperatur är en dyr process. (vii) En publikation kan omnämnas, i vilken avfärgning åstadkommes genom att använda lipaser för att ta bort tryckfärg från använt papper. Förfarandet utförs under neutrala eller alkaliska förhållanden varvid regenererad massa som har förbättrad vithet framställs (patent nr. JP 2160984 daterat 20.06.90).The technology of incubation under pressure and high temperature is an expensive process. (vii) Mention may be made of a publication in which decolorization is effected by using lipases to remove ink from used paper. The process is carried out under neutral or alkaline conditions, in which case regenerated pulp having improved whiteness is produced (Patent No. JP 2160984 dated 20.06.90).

Tryckfärgspartiklarna avlägsnas genom tvättning och flotation. (vili) En publikation kan omnämnas, i vilken avfärgning av avfallspapper görs genom att använda jästen Hansenula polymorpha, vilken degraderar den tryckfärgsbaserade hartsen (patent nr. KR 9303705 daterat 08.05.93).The ink particles are removed by washing and totation. (vili) A publication can be mentioned, in which decolorization of waste paper is done by using the yeast Hansenula polymorpha, which degrades the ink-based resin (patent no. KR 9303705 dated 08.05.93).

Emellertid flyter tryckfärgen på ytan och massan måste tvättas utförligt för att avlägsna den avskilda tryckfärgen. (ix) En publikation kan omnämnas, ivilken avfärgning av tusch åstadkommas genom att använda termostabil alkalisk cellulas från en Bacíllus sp (patent nummer JP10313859). Emellertid är denna process mycket specifik för tusch. (x) Ett inlämnat patent kan omnämnas, i vilket avfärgningen av kontorsavfall àstadkoms genom att inokulera pappennassan med bakterien Vibrio afgíno/yticum (US patentansökan nummer 20030178162). Emellertid är hanteringen av levande bakterier en stor nackdel i denna process och hanteringen är för många kanske inte accepterbar.However, fl the ink on the surface and the pulp must be washed extensively to remove the separated ink. (ix) A publication may be mentioned in which the decolorization of ink is effected by using thermostable alkaline cellulase from a Bacillus sp (patent number JP10313859). However, this process is very specific to ink. (x) A filed patent may be mentioned in which the decolorization of office waste was accomplished by inoculating the paper pulp with the bacterium Vibrio afgíno / yticum (U.S. Patent Application No. 20030178162). However, the handling of live bacteria is a major drawback in this process and the handling may not be acceptable to many.

Sammanfattning av uppfinningen Det huvudsakliga syftet med föreliggande uppfinning är att tillhandahålla en process för enzymatisk avfärgning av pappersavfall från kontor vilket pappersavfall inbegriper elektrostatiskt kopierat papper samt papper utskrivna med bläckstråleskrivare vilka är tryckta med ej dispergerbar tryckfärg för anslagsfria skrivare.SUMMARY OF THE INVENTION The main object of the present invention is to provide a process for enzymatic decolorization of paper waste from offices which paper waste includes electrostatically copied paper and paper printed with ink jet printers which are printed with non-dispersible ink for non-impact printers.

Ett annat syfte med föreliggande uppfinning är att tillhandahålla en process för enzymatisk avfärgning av pappersavfall från kontor vilket pappersavfall inbegriper elektrostatiskt kopierat papper samt papper utskrivna med bläckstråleskrivare vilka är tryckta med ej dispergerbar tryckfärg för anslagsfria skrivare genom att använda cellkulturfri supematant av Vibrio alginolyticus eller immobiliserade celler av samma bakterie som har 532 398 4 accesslcnsnummer NlO/Dll32 och vilken deponerats vid ARS Patent Culture Collection, USA, under nummer NRRL-B-30638.Another object of the present invention is to provide a process for enzymatic decolorization of waste paper from offices which paper waste includes electrostatically copied paper and paper printed with ink jet printers which are printed with non-dispersible ink for non-impact printers using cell culture free cell alopecia. of the same bacterium having access number N10 / D1132 and deposited with the ARS Patent Culture Collection, USA, under number NRRL-B-30638.

Föreliggande uppfinning hänför sig till en process för enzymatisk avfärgning av pappersavfall från kontor vilket pappersavfall inbegriper elektrostatískt kopierat papper samt papper utskrivna med bläckstråleskrivare vilka papper är tryckta med ej dispergerbar tryckfärg för anslagsfria skrivare genom att använda cellkulturfri supematant av Vibrio alginoLvticus eller immobiliserade celler av samma bakterie som har accessionsnummer NIO/Dl/32 och vilken är deponerad vid ARS Patent Culture Collection, USA, under nummer NRRL- B-30638. Vidare hänför sig föreliggande uppfinning även till blekning av pappersmassa av kontorsavfall inom 72 timmar efter förbindelse av massan med 3 - 12 % konsistensgrad i havsvatten med nämnda enzymer från de nämnda bakterierna. Blekning åstadkoms genom att använda extracellulära enzymer som framställs av bakterien NlO/Dll32 vilken är framodlad i näringsbuljong som är kompletterad med stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat.The present invention relates to a process for the enzymatic decolorization of paper waste from offices which paper waste includes electrostatically copied paper as well as paper printed with ink jet printers which papers are printed with non-dispersible ink for non-impact printers using cell culture-free cell different which has accession number NIO / Dl / 32 and which is deposited with the ARS Patent Culture Collection, USA, under number NRRL-B-30638. Furthermore, the present invention also relates to the bleaching of pulp of office waste within 72 hours after combining the pulp with a degree of consistency in seawater with 3 - 12% with said enzymes from the said bacteria. Bleaching is accomplished using extracellular enzymes produced by the bacterium N10 / D1132 which is grown in nutrient broth supplemented with starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate.

Beskrivning av föredragna utföringsforrner Avfärgning av papper är en begränsande faktor vad gäller återvinning av papper. Tidningspapper och pappersavfall från kontor är vanligen avfärgade medelst användning av kemikalier som åker ut i avloppet och förorsakar förorening av vattenmassorna. Tidningstryck eller offsettryck görs genom användning av dispergerbar tryckfärg eller färg för anslagsfria skrivare medan tryckfärg för laserskrivare, elektrostatiska kopiatorer och bläckstråleskrivare inte dispergerar och även kallas tryckfärg för anslagsskrivare. Det finns ett flertal patent som beskriver olika metoder för att avfärga medelst användning av hydrolytiska enzymer som cellulas, hemicellulas och lipas av mikrobiellt ursprung som frigör tonerpartiklar från fibrer. Emellertid påverkas enzymfunktionen av papprets beståndsdelar i avfärgningsförhällandet. De kemiskt mosade fibrema är mer känsliga än mekaniskt mosade fibrer.Description of Preferred Embodiments Paper decolorization is a limiting factor in paper recycling. Newsprint and paper waste from offices are usually discolored by the use of chemicals that go down the drain and cause contamination of the water masses. Newspaper printing or offset printing is done by using dispersible printing ink or ink for non-impact printers, while printing ink for laser printers, electrostatic copiers and inkjet printers does not disperse and is also called ink for impact printers. There are a number of patents which describe various methods for decolorizing by the use of hydrolytic enzymes such as cellulase, hemicellulase and lipase of microbial origin which release toner particles from the fibers. However, the enzyme function is affected by the constituents of the paper in the decolorization ratio. The chemically mashed brems are more sensitive than mechanically mashed bres.

Pappersavfall från kontor har hög del av laser och toner i innehållet och teknologin för att avlägsna tonerpartiklarna är för tillfället inte så bra (Jefferies, 2002). Vi rapporterar här en process för avfärgning av pappersavfall från kontor som inbegriper elektrostatiskt kopierade papper och pappersutskrifter från bläckstråleskrivare medelst ett cellfritt odlingsfiltrat av en bakterie som isolerats ur marina sediment från en havsarm i Goa, Indien. vattnets saithalt 532 356 vid tidpunkten för isolering var omkring 15 delar per tusen vilket är ungefär ekvivalent med havsvatten med halv salthalt.Paper waste from offices has a high proportion of lasers and toner in the contents and the technology for removing the toner particles is currently not so good (Jefferies, 2002). We report here a process for decolorizing paper waste from offices that includes electrostatically copied paper and paper prints from inkjet printers using a cell-free culture filtration of a bacterium isolated from marine sediment from a sea arm in Goa, India. the salinity of the water 532 356 at the time of isolation was about 15 parts per thousand which is approximately equivalent to sea water with half salinity.

Organismen som ges i föreliggande uppfinning är Víbrio alginolyticus, en gramnegativ, coccoid bakterie som isolerats från kustmarina sediment och som givits accessionsnumret NIOIDI/32 och som deponerats i ARS patent culture collection center och som har acoessionsnummer NRRL-B-30638.The organism given in the present invention is Víbrio alginolyticus, a gram-negative, coccoid bacterium isolated from coastal marine sediments and given accession number NIOIDI / 32 and deposited in the ARS patent culture collection center and having accession number NRRL-B-30638.

Nämnda bakterie odlas i en näringsbuljong som innehåller köttextrakt, peptisk sammansmältning av djurvävnad, som är framställd med havsvatten med salthalten utspädd till 50% och som har ett pH-värde om åtminstone 7,5 och som har kompletterats med 1% stärkelse eller 1% Tween-80-lösning eller bådadera. Bakterien framträder vid odling i näringsämnesagarrnedium som cirkulära kolonier med benvit färg, vilka kolonier är 2 mm idiameteri början och som växer till en storlek om 5 mm inom 3-4 dagar. Bakterien producerar esteras/lipas och amylas i närvaron av Tween-80 respektive stärkelse. Den är en fermentativ och katalasnegativ bakterie. Bakterien odlas vid rumstemperatur (30°C) i omkring 4 dagar, kulturens supematant ansamlas genom centrifugering under sterila förhållanden. Xeroxkopior, papper utskrivna med bläckstråleskrivare eller andra papper som är tryckta med anslagstryckfärg fördelas till en massa genom att blötläggas i varmt vatten i minst 2 timmar, macereras i en hushållsmixer med ytaktiva substanser som Tween-80. Ett exempel för processen för avfärgning innefattar att suspendera en sådan massa med åtminstone vid 3 - 12% konsistensgrad i havsvatten med salthalten utspädd till 50%, inkubera med supematant från cellfri odling av nämnda bakterie. Den behandlade massan inkuberas vid rumstemperatur av 37°C i minst 2 - 3 dagar för att erhålla fullständigt urblekt massa utan spår av tryckfärg i supernatanten. Massan förtunnas, syresätts underifrån för att frigöra fria föroreningspartiklar och salter. Tvållösning vid 1 % koncentration tillsätts för flotation av kvarvarande tryckfärgspartiklar. Massan filtreras vid undertryck genom en Buchner-tratt, pressas med plana plattor av rostfritt stål för att ge massmattan jämn tjocklek. Radiansen för den resulterande mattan avläses från 412 till 684 nm och radiansen utrycks i Lux-enheter (Lu). En LU motsvarar en pW/cmz/nm/Sr. Förhållandet för radians mellan enzymatiskt avfärgat och återvunnet papper anskaffade i handeln (hädanefter kallat referenspappret) är taget som ett mått på vithet.Said bacterium is grown in a nutrient broth containing meat extract, peptic fusion of animal tissue, prepared with seawater with a salinity diluted to 50% and having a pH value of at least 7.5 and which has been supplemented with 1% starch or 1% Tween -80 solution or both. The bacterium appears during cultivation in nutrient agarnetium as circular colonies with off-white color, which colonies are 2 mm in diameter at the beginning and which grow to a size of 5 mm within 3-4 days. The bacterium produces esterase / lipase and amylase in the presence of Tween-80 and starch, respectively. It is a fermentative and catalase negative bacterium. The bacterium is grown at room temperature (30 ° C) for about 4 days, the culture supernatant accumulates by centrifugation under sterile conditions. Xerox copies, paper printed with inkjet printers or other paper printed with impact ink are distributed to a mass by soaking in warm water for at least 2 hours, macerated in a household mixer with surfactants such as Tween-80. An example of the decolorization process involves suspending such a mass with at least 3-12% consistency in seawater with the salinity diluted to 50%, incubating with supernatant from cell-free culture of said bacterium. The treated mass is incubated at room temperature of 37 ° C for at least 2-3 days to obtain a completely faded mass without traces of ink in the supernatant. The mass is thinned, oxygenated from below to release free contaminant particles and salts. Soap solution at 1% concentration is added to fl otation of residual ink particles. The pulp is filtered under negative pressure through a Buchner funnel, pressed with flat stainless steel plates to give the pulp mat an even thickness. The radiance of the resulting mat is read from 412 to 684 nm and the radiance is expressed in Lux units (Lu). An LU corresponds to a pW / cmz / nm / Sr. The ratio of the radiance between enzymatically decolorized and recycled commercially available paper (hereinafter referred to as the reference paper) is taken as a measure of whiteness.

De flesta metodema som används för enzymatisk avfärgning frigör tryckfärgspartiklar från flbrema och de behöver således tvättas bort från massan. l den process som beskrivs i föreliggande uppfinning, uppkommer 532 35B 6 inte detta problem då tryckfärgen från tonerpartiklarna bleks fullständigt.The metod est methods used for enzymatic decolorization release ink particles from the behöver brema and thus need to be washed away from the pulp. In the process described in the present invention, this problem does not arise when the ink from the toner particles is completely bleached.

Metoden är mycket kostnadseffektiv och det enda steget som är inblandat är jäsning av bakterie inokulum i någon konventionell näringsbuljong som innehåller assimilerbart kol och kvävekälla och som är kompletterad med stärkelse eller Tween-SO. En jämförande framställning är given i tabell 1 vilken förklarar det nya med vår uppfinning i jämförelse med känd teknik inom detta område.The method is very cost effective and the only step involved is fermentation of bacterial inoculum in any conventional nutrient broth which contains assimilable carbon and nitrogen source and which is supplemented with starch or Tween-SO. A comparative presentation is given in Table 1, which explains the novelty of our invention in comparison with known technology in this field.

Tabell 1. Jämförande framställning Referens Typ av papper Källa för Kommentarer känd teknik) eller tryckfärL avfärgningggens Patent Anslagstryckfärg Kemikalie och ett lnte praktiskt i stor US6022423 och kontorsavfall ytaktiv substans, skala avskavning av pappret och tvättning av det avfärgade pappret medelst en specialanordning för att göra ett helt ark US5525193 Toners, Monokomponent- Färgpartiklarna frigörs anslagstryckfärg cellulas renat från från massan, men de från blandat cellulolytiska måste avlägsnas kontorsavfall enzymer av olika medelst mekaniska mikroorganismer metoder såsom och genetiskt flotatíon och tvättning manipulerade organismer vilka enbart producerar monokomponent- cellulas Gubitz et al. Xeroxkopior och Endoglukonaser Färgpartiklarna frigörs 1998 laserutskrifter och hemicellulaser från massan, men de från svamp måste avlägsnas medelst mekaniska metoder såsom flotatíon och tvättning_ 532 355 7 682304741 Laserutskrifter och Enzymer som Tryckfärgen flyter på xeroxkopior innehåller ett ytan och massan beständigt måste tvättas utförligt bindemedel Patent Pappersavfall från Cellulas Tryckfärgen flyter på EP717144 kontor ytan och massan måste tvättas utförligt JP0634639O Pappersavfall från [förbindelse med Enzym hög kontor cellulas vid 40°C i temperatur och tryck en timme under gör kostnaden för tryck tekniken opraktisk JP160984 Pappersavfall från Massan satt i Tryckfärgen flyter på kontor förbindelse med ytan och massan lipasenzym under måste tvättas utförligt neutrala eller alkaliska förhållanden KR9303705 Pappersavfall från Massan satt i Tryckfärgen flyter på kontor förbindelse med ytan och massan kultur av jästen måste tvättas utförligt Hansenula polymorpha vilken bryter ner den tryckfärgsbaserade hartsen .Table 1. Comparative Preparation Reference Type of Paper Source of Comments (Prior Art) or Ink Dyeing Patent Ink Pressure Ink Chemical and a non-practical large US6022423 and office waste surfactant, scale abrasion of the paper and washing of the decolorized paper by a special device to make a whole sheet US5525193 Toners, Monocomponent- The color particles are released impact ink cellulase purified from from the pulp, but those from mixed cellulolytic must be removed office waste enzymes of various by mechanical microorganisms methods such as and genetically at otation and washing engineered organisms which Gonubantz monok- monok- only cellulase. Xerox Copies and Endogluconases The dye particles are released in 1998 laser prints and hemicellulases from the pulp, but those from fungi must be removed by mechanical methods such as t otation and washing_ 532 355 7 682304741 Laser prints and Enzymes as the Ink floats on xerox copies Cellulas The ink flows on the EP717144 office surface and the pulp must be washed thoroughly JP0634639O Paper waste from [connection with Enzyme high office cellulase at 40 ° C in temperature and pressure one hour below makes the cost of printing technology impractical JP160984 Paper waste from the pulp sat in the printing ink fl surfaces on the office connection with the surface and the mass lipase enzyme underneath must be washed thoroughly neutral or alkaline conditions KR9303705 Paper waste from the mass sat in The printing ink fl surfaces in the office connection with the surface and the mass culture of the yeast must be washed thoroughly Hansenula polymorpha which breaks down the ink-based resin.

JP10313859 För blekning av Termostabil Rekommenderad för tusch alkaliska cellulas blandningar med från en bakterie ytverksamma substanser, som en fiberbehandlingsagens och som en avfärgningsagens för tusch US För avfärgning av Levande Rekommenderad för atentansökan kontorsavfall bakteriekultur av avfärgning av massa 532 335 8 nr. Vibrio alginolyticus av xeroxkopior och 200301 78162 bläckstråleutskrifter.JP10313859 For bleaching of Thermostable Recommended for ink alkaline cellulase mixtures with substances from a bacterium surfactant, as a treatment agent and as a decolorizing agent for ink US For decolorization of Living Recommended for attack office waste bacterial culture of decolorization of pulp 532 335 8 no. Vibrio alginolyticus of xerox copies and 200301 78162 inkjet prints.

Användning av levande bakterier kan vara oacceptabelt för många.The use of live bacteria can be unacceptable to many.

Föreliggande För pappersmassa Direktkontakt Inga enzymer, rening, uppfinning av xeroxkopior och mellan mass-slam ingen temperatur- eller bläckstråleutskrifter och supematanten pH-reglering, massan av den cellfria och vattnet är klart odlingen av och tvättning är bakterien endast valfri.Present For pulp Direct contact No enzymes, purification, invention of xerox copies and between mass sludge no temperature or ink jet printing and supernatant pH regulation, the mass of the cell-free and the water is ready the culture of and washing the bacterium is only optional.

N|0/D|/32 i 48 - 72 timmar vid rumstemperatur. för att erhålla total blekning av massan och klart avloppsvatten. l enlighet med föreliggande uppfinning tillhandahålls en process för enzymatisk avfärgning av tryckta papper inbegripet xerografiskt kopierade papper och bläckstràleutskrifter trycka med ej dispergerande tryckfårg för anslagsfria skrivare: a) odling av bakterieisolatet Vibrio alginolyticus som har accessionsnummer N|0/D|/32, vilken kultur är deponerad vid ARS Patent Culture Collection under NRRL-nummer NRRL-B-30638, i ett nytt medium i ett temperaturomrâde från 27°C till 37°C i 3 - 4 dagar, b) avlägsnande av bakteriella celler genom centrlfugering under sterila förhållanden för att erhålla cellkulturfri supematant, c) inkubering av pappersmassan av xerografiskt kopierade papper eller bläckstråleutskrifter vilken massa är utspädd till 3 - 12 % konsistensgrad i havsvatten med salthalten utspädd till 50% med den i steg (b) erhållna cellkulturfria supematanten vid 20% koncentration i åtminstone 72 timmar vid rumstemperatur följt av utspädning av massan tiofalt i vatten för att erhålla fullständigt blekt massa utan spår av tryckfärg i supematanten, 532 398 9 d) filtrering av den från steg (c) erhållna resulterande massan vid undertryck för att erhålla det önskade avfärgade pappret. l en utföringsfonn av föreliggande uppfinning framställs mediet genom att upplösa näringsbuljong som innehåller köttextrakt, peptisk sammansmâltning av djurvävnad i havsvatten med salthalten utspädd till 50% och kompletterad med polyoxietylensorbitanmonooleat eller 1% stärkelse eller båda delar. l en annan utföringsform av föreliggande uppfinning odlas bakterien i minst 4 dagar i en näringsbuljong som innehåller köttextrakt, peptisk sammansmältning av djurvävnad i havsvatten med salthalten utspädd till 50% och kompletterad med polyoxietylensorbitanmonooleat eller 1% stärkelse eller båda delar.N | 0 / D | / 32 for 48 - 72 hours at room temperature. to obtain total bleaching of the pulp and clear wastewater. In accordance with the present invention there is provided a process for enzymatic decolorization of printed papers including xerographically copied papers and inkjet prints printed with non-dispersive ink for non-impact printers: a) culture of the bacterial isolate Vibrio alginolyticus | is deposited with the ARS Patent Culture Collection under NRRL number NRRL-B-30638, in a new medium in a temperature range from 27 ° C to 37 ° C for 3-4 days, b) removal of bacterial cells by central fugue under sterile conditions for to obtain cell culture-free supernatant, c) incubating the pulp of xerographically copied paper or inkjet prints which mass is diluted to 3 - 12% consistency in seawater with salinity diluted to 50% with the cell culture-free supernatant obtained in step (b) at 20% 72 hours at room temperature followed by dilution of the mass tenfold in water to obtain complete slightly bleached pulp without traces of ink in the supernatant, d) filtering the resulting pulp obtained from step (c) under reduced pressure to obtain the desired decolorized paper. In one embodiment of the present invention, the medium is prepared by dissolving nutrient broth containing meat extracts, peptic fusion of animal tissue in seawater with a salinity diluted to 50% and supplemented with polyoxyethylene sorbitan monooleate or 1% starch or both. In another embodiment of the present invention, the bacterium is cultured for at least 4 days in a nutrient broth containing meat extracts, peptic fusion of animal tissue in seawater with a salinity diluted to 50% and supplemented with polyoxyethylene sorbitan monooleate or 1% starch or both.

I ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning, kan natriumklorid med minsta koncentration 1.5 % användas i stället för havsvatten för att odla bakterien. l ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning innehåller den cellfria supernatanten som används för avfärgning av papper extracellulära enzymer såsom esteras, lipas och amylas etc.In a further embodiment of the present invention, sodium chloride with a minimum concentration of 1.5% can be used instead of seawater to grow the bacterium. In a further embodiment of the present invention, the cell-free supernatant used for decolorizing paper contains extracellular enzymes such as esterase, lipase and amylase, etc.

I ytterligare en utföringsform av föreliggande uppfinning blötlägges xeroxkopior eller bläckstrâleutskrifter i varmt vatten i 1 - 2 timmar efter tillsättning av 1% ytaktiva substans följt av macerering till massa medelst användning av en hushållsmixer. l ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning pressas massmattan för att göra den jämn och torkas i omkring 60°C i minst 4 - 5 timmar. l ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning avläses radiansen för det resulterande mattan från 412 till 684 nm och radiansen utrycks i Lux- enheter (LU). En LU motsvarar en pW/cmzlnm/Sr.In a further embodiment of the present invention, xerox copies or inkjet prints are soaked in hot water for 1-2 hours after the addition of 1% surfactant followed by maceration to pulp by using a household mixer. In a further embodiment of the present invention, the pulp mat is pressed to make it even and dried at about 60 ° C for at least 4-5 hours. In a further embodiment of the present invention, the radius of the resulting mat is read from 412 to 684 nm and the radiance is expressed in Lux units (LU). A LU corresponds to a pW / cmzlnm / Sr.

I ytterligare en utföringsform av föreliggande uppfinning, används massamattan som är framställd av återvunnet papper som finns tillgängligt i handeln som en referens. l ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning kan samma sats av cellkulturfri supernatant effektivt användas för två-tre cykler av avfärgning av pappersmassa från xeroxkopior/bläckstrâleutskrifter. l ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning kan även supernatant från frystorkad odling även användas effektivt för avfärgning av nämnda massa. 532 395 I ytterligare en utföringsforrn av föreliggande uppfinning kan även bakterier som är immobiliserade i natriumalginatdroppar användas för avfärgning av pappersmassan av xeroxkopior/bläckstråleutskrifter för att erhålla fullkomligt blekt massa inom 48 - 72 timmar.In a further embodiment of the present invention, the pulp mat made from recycled paper which is commercially available is used as a reference. In another embodiment of the present invention, the same batch of cell culture-free supernatant can be effectively used for two to three cycles of xerox copy / inkjet printing. In a further embodiment of the present invention, supernatant from freeze-dried culture can also be used effectively for decolorizing said pulp. In a further embodiment of the present invention, bacteria immobilized in sodium alginate droplets can also be used to decolorize the pulp of xerox copies / inkjet prints to obtain fully bleached pulp within 48-72 hours.

Följande exempel förevisas som belysande exempel och ska inte tolkas som begränsande för omfattningen av föreliggande uppfinning.The following examples are given by way of illustration and are not to be construed as limiting the scope of the present invention.

EXElVlPEL 1 Bakterieisolatet Vibño alginolyticus NIO/DI/32 isolerades från kustestuarina sediment, Dona Paula, Goa, Indien i näringsagarmedium som innehåller köttextrakt och peptisk sammansmältning av djurvävnad och agar i havsvatten med salthalten utspädd till 50%. Odlingen kvarhölls på snedden i näringsagarmediet under alla ytterligare experiment.EXAMPLE 1 The bacterial isolate Vibño alginolyticus NIO / DI / 32 was isolated from coastal stuarina sediment, Dona Paula, Goa, India in nutrient agar medium containing meat extracts and peptic fusion of animal tissue and agar in seawater with salinity diluted to 50%. The culture was maintained at an angle in the nutrient agar medium during all further experiments.

Nämnda bakterie odlas i näringsbuljong som innehåller köttextrakt, peptisk sammansmältning av djurvävnad i havsvatten med sin salthalt utspädd till 50%. Vid sidan om detta ändrades mediet antingen med stärkelse eller Tween-80 eller med båda tillsammans använda vid en 1% koncentration.Said bacterium is grown in nutrient broth containing meat extracts, peptic fusion of animal tissue in seawater with its salinity diluted to 50%. In addition, the medium was changed either with starch or Tween-80 or with both used together at a 1% concentration.

Bakterien odlas vid rumstemperatur (30°C) i omkring 4 dagar, de bakteriella cellerna avlägsnas medelst centrifugering och den cellkulturfria supernatanten används för avfärgningssyften. Xeroxkopior tryckta med anslagstryckfärg från HP eller Epson eller någon annan skrivare fördelas till massa genom blötläggning i varmt vatten i minst 2 timmar, samt macerering i en vanlig hushållsmixer med ytaktiva substanser som Tween-80. Ett exempel för processen för avfärgning innefattar att suspendera sådan massa vid 3, 6 och 9% konsistensgrad (g blöt massa i 100 ml vatten) att inkubera med 50 ml cellkulturfri supematant framställd som beskrivet ovan och att inkubera vid rumstemperatur i minst 3 dagar för att erhålla fullständigt blekt massa med tryckfärgen totalt försvunnen från supematantvattnet. Massan förtunnas, syresâtts underifrån för att frigöra fria föroreningspartiklar. Tvållösning vid 1% koncentration tillsätts för flotation av kvarvarande tryckfärgspartiklar. Massan filtreras vid undertryck genom en Buchner-tratt, pressas med plana plattor av rostfritt stål för att ge massmattan jämn tjocklek. Radiansen från den resulterande mattan avläses från 412 till 684 nm och radiansen utrycks i Lux- enheter (Lu). En LU motsvarar en pW/cmz/nm/Sr. Förhållandet för reflektans mellan återvunnet papper som är tillgängligt i vilken kontorsmaterialhandel som helst (referenspapper) och biologiskt avfärgat papper används som ett mått på vithet. Reflektansen från obehandlad massa utgör kontrollvärde. 532 335 11 l enlighet med detta visar figurerna 1A - 1C att reflektansen för pappersmassa av bläckstråleutskrifter (obehandlad) är lägre än den för referenspappersmassan (återvunnet papper anskaffat i handeln). Massan av tryckt papper vilken massa behandlats med supematanten av odlingen som innehåller stärkelse, Tween-80 eller båda visade högre radians än den obehandlade massan. Denna vithet uppnåddes 3 dagar efter inkubation med supematanten av odlingen. I enlighet visar fig. 1A, 1B och 1C att behandling med odlingsfiltrat som innehåller fettsyreester polyoxietylensorbitanmonooleat gav högst vithet. Behandling med odlingsfiltrat med kulturer odlade med stärkelse eller Tween - 80 eller med båda tillsammans ökade vitheten mycket mer än referenspappersmassan (målvärdet för vitheten). Radiansen för den obehandlade pappersmassan av tryckt papper i förhållande till det återvunna pappret och radiansen för enzymatiskt avfärgat papper i förhållande till massan med återvunnet referenspapper (tabell 1) visade att 6% massa behandlad med supernatant från odling som innehåller polyoxietylensorbitanmonooleat visade maximal vithet.The bacterium is grown at room temperature (30 ° C) for about 4 days, the bacterial cells are removed by centrifugation and the cell culture-free supernatant is used for decolorization purposes. Xerox copies printed with impact ink from HP or Epson or any other printer are distributed to pulp by soaking in warm water for at least 2 hours, as well as maceration in a standard household mixer with surfactants such as Tween-80. An example of the decolorization process involves suspending such pulp at 3, 6 and 9% consistency (g wet pulp in 100 ml of water) to incubate with 50 ml of cell culture-free supernatant prepared as described above and incubating at room temperature for at least 3 days to obtain completely bleached pulp with the ink completely disappeared from the supernatant water. The mass is thinned, oxygenated from below to release free contaminant particles. Soap solution at 1% concentration is added for flotation of residual ink particles. The pulp is filtered under negative pressure through a Buchner funnel, pressed with flat stainless steel plates to give the pulp mat an even thickness. The radiance from the resulting mat is read from 412 to 684 nm and the radiance is expressed in Lux units (Lu). An LU corresponds to a pW / cmz / nm / Sr. The ratio of re ectancy between recycled paper available in any office supplies store (reference paper) and biologically discolored paper is used as a measure of whiteness. The reactance from untreated pulp constitutes a control value. 532 335 11 l accordingly, Figures 1A - 1C show that the refractive power of ink jet printing pulp (untreated) is lower than that of reference paper pulp (commercially available recycled paper). The pulp of printed paper which pulp was treated with the supernatant of the culture containing starch, Tween-80 or both showed a higher radius than the untreated pulp. This whiteness was reached 3 days after incubation with the supernatant of the culture. Accordingly, fi g. 1A, 1B and 1C that treatment with culture filtrate containing fatty acid ester polyoxyethylene sorbitan monooleate gave the highest whiteness. Treatment with culture filtrate with cultures grown with starch or Tween-80 or with both together increased the whiteness much more than the reference pulp (the target value for the whiteness). The radiance of the untreated pulp of printed paper relative to the recycled paper and the radiance of enzymatically discolored paper relative to the pulp of recycled reference paper (Table 1) showed that 6% pulp treated with culture supernatant containing polyoxyethylene sorbitan monooleate showed maximum whiteness.

Tabell 1. Reflektansförhållande som åstadkoms med olika behandlingar.Table 1. Reflection ratio achieved with different treatments.

Behandling* Reflektansförhållande % ökning (Lux-enheter)*** av reflektans 3% massa Obehandlad massa (kontrollvärde) 0,54 Massa behandlad med OF som innehåller 1,04 48 stärkelse” Massa behandlad med OF som innehåller 1,39 61 polyoxietylensorbitanmonooleat” Massa behandlad med OF som innehåller 1,29 i 58 stärkelse+poIyoxietylensorbitanmonooleat 6% massa Obehandlad massa (kontrollvärde) 0,57 Massa behandlad med OF som innehåller 1,03 45 stärkelse Massa behandlad med OF som innehåller 1,24 64 polyoxietylensorbitanmonooleat 9% massa 532 355 12 Obehandlad massa (kontrollvärde) 0,68 Massa behandlad med OF som innehåller 0,88 23 stärkelse Massa behandlad med OF som innehåller 1,05 35 olyoxietylensorbitanmonooleat *Odlingsfiltrat (OF) av bakterien NlO/Dl/32 odlad i näringsmedium i 4 dagar tillsattes i pappersmassa med olika koncentrationer (VVN).Treatment * Reectect ratio% increase (Lux units) *** of reectane 3% pulp Untreated pulp (control value) 0.54 Pulp treated with OF containing 1,04 48 starch "Pulp treated with OF containing 1,39 61 polyoxyethylene sorbitan monooleate" Pulp treated with OF containing 1,29 in 58 starch + polyoxyethylene sorbitan monooleate 6% pulp Untreated pulp (control value) 0.57 Pulp treated with OF containing 1,03 45 starch Pulp treated with OF containing 1,24 64 polyoxyethylene sorbitan monooleate 9% pulp 532 355 12 Untreated pulp (control value) 0.68 Pulp treated with OF containing 0,88 23 starch Pulp treated with OF containing 1,05 35 olyoxyethylene sorbitan monooleate * Culture filtrate (OF) of the bacterium N10 / Dl / 32 grown in nutrient medium in 4 days were added in pulp with different concentrations (VVN).

"Stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat tillsattes mediet vid 1% koncentration."Starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate was added to the medium at 1% concentration.

***Reflektansförhållandet beräknades genom att dividera medelreflektansen för obehandlad eller behandlad massa vid olika våglängder med medelreflektansen för referens- (mâl-) pappersmassa.*** The reflectance ratio was calculated by dividing the mean reflectance of untreated or treated pulp at different wavelengths by the mean reflectance of reference (target) pulp.

EXEIVIPEL 2 Målet med föreliggande experiment var att jämföra avfärgning av massa medelst användning av supernatant från bakteriekultur som innehåller stärkelse och polyoxietylensorbitanmonooleat vid rumstemperatur och vid 37°C.EXAMPLE 2 The aim of the present experiment was to compare mass decolorization using supernatant from bacterial culture containing starch and polyoxyethylene sorbitan monooleate at room temperature and at 37 ° C.

Massan från utskrifter vid 3% konsistensgrad inkuberades med supematant från bakteriekultur som innehåller stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat i 72 timmar vid 37°C. Vid slutet av inkubationstiden tiltrerades slammet ut, tvättades och torkades som beskrivet i Exempel 1. Reflektansen mättes enligt detaljbeskrivningen ovan. l enlighet med detta visar figur 2A och 2B att inga signifikanta förbättringar i vithet uppträdde vid 37°C. Tabell 2 visar det relativa medeireflektansförhållandet vid olika behandlingar. Resultatet indikerar att effektiv avfärgning kan åstadkommas medelst behandling vid rumstemperatur ooh därigenom reduceras energiätgång.The mass from prints at 3% consistency was incubated with supernatant from bacterial culture containing starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate for 72 hours at 37 ° C. At the end of the incubation time, the sludge was filtered out, washed and dried as described in Example 1. The reactance was measured according to the detailed description above. Accordingly, Figures 2A and 2B show that no significant improvements in whiteness occurred at 37 ° C. Table 2 shows the relative average power ratio in different treatments. The result indicates that effective decolorization can be achieved by treatment at room temperature and thereby reduces energy consumption.

Tabell 2. Reflektansförhâllande ástadkommet medelst olika behandfingar Behandling* Reflektansförhållande % ökning (3% massa) (Lux-enheter)*** i reflektans Obehandlad massa (kontrollvärde) vid RT 0,54 Massa behandlad med OF som innehåller 1,04 48 stärkelse” inkuberad vid RT Massa behandlad med OF som innehåller 1,39 61 polyoxietylensorbitanmonooleat* 532 395 13 inkuberad vid RT Massa behandlad med oF som innehåller 1,29 se stårkelse+polyoxietylensorbitanmonooleat inkuberad vid RT Obehandlad (kontrollvärde) inkuberad vid 37°C 0,54 Massa behandlad med OF som innehåller 1,19 54 stärkelse" inkuberad vid 37°C Massa behandlad med OF som innehåller 1,14 53 Polyoxietylensorbitanmonooleat" inkuberad vid 37°C Massa behandlad med OF som innehåller 1,09 51 stärkelse+polyoxietylensorbitanmonooleat inkuberad vid 37°C *Odlingsfiltrat (OF) av bakterien NlO/Dl/32 odlad i näringsmedium i 4 dagar tillsattes i pappersmassa av olika koncentrationer (WN).Table 2. Reectance ratio achieved by different treatments Treatment * Reectance ratio% increase (3% mass) (Lux units) *** in reectance Untreated mass (control value) at RT 0.54 Mass treated with OF containing 1.04 48 starch ” incubated at RT Mass treated with OF containing 1.39 61 polyoxyethylene sorbitan monooleate * 532 395 13 incubated at RT Mass treated with oF containing 1.29 see starch + polyoxyethylene sorbitan monooleate incubated at RT Untreated (control value) incubated at 37 ° C 0.54 Mass treated with OF containing 1.19 54 starch "incubated at 37 ° C Pulp treated with OF containing 1.14 53 Polyoxyethylene sorbitan monooleate" incubated at 37 ° C Pulp treated with OF containing 1.09 51 starch + polyoxyethylene sorbitan monooleate incubated at 37 ° C C * Culture filtrate (OF) of the bacterium N10 / D1 / 32 grown in nutrient medium for 4 days was added to pulp of different concentrations (WN).

“Stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat tillsattes i mediet vid 1% koncentration.Starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate was added to the medium at 1% concentration.

***Reflektansförhållandet beräknades genom att dividera medelreflektansen för obehandlad eller behandlad massa vid olika våglängder med medelreflektansen för referens- (mål-) pappersmassa.*** The reflectance ratio was calculated by dividing the mean reflectance of untreated or treated pulp at different wavelengths by the mean reflectance of reference (target) pulp.

EXEMPEL 3 För att undvika direktkontakt med bakterieinokulumet, utfördes dugligheten för de immobiliserade bakterieisolatet NIO/DI/32 för att avfärga bläckstràleutskrifter enligt följande: Bakteriella celler immobiliserades i natriumalginat. l korthet involverade detta blandning av 8 ml celler (innehållande 108 celler m|") med 25 ml 2% alginsyra (Sigma Chemicals, USA). Droppama bereddes i 0,2 M kalciumkloridlösning och härdades över natten. Samma sats med immobiliserade bakteriella celler användes i två cykler för att åstadkomma avfärgning. Övriga förfarandena som användes var de samma som beskrevs i Exempel 1.EXAMPLE 3 To avoid direct contact with the bacterial inoculum, the ability of the immobilized bacterial isolate NIO / DI / 32 to decolorize inkjet prints was performed as follows: Bacterial cells were immobilized in sodium alginate. Briefly, this involved mixing 8 ml of cells (containing 108 cells m | ") with 25 ml of 2% alginic acid (Sigma Chemicals, USA). The droplets were prepared in 0.2 M calcium chloride solution and cured overnight. The same batch of immobilized bacterial cells was used in two cycles to effect decolorization.The other procedures used were the same as described in Example 1.

I enlighet med detta visas i figur 3 radiansen för blekt pappersmassa efter 72 timmars inkubation med två cykler av immobiliserade celler. Förhållandet för medelreflektansen i dessa två cykler av immobiliserade celler visas i tabell 3.Accordingly, Figure 3 shows the radiance of bleached pulp after 72 hours of incubation with two cycles of immobilized cells. The ratio of the mean reactance in these two cycles of immobilized cells is shown in Table 3.

Man kan dra slutsatsen att immobiliserade celler var lika effektiva vid 532 395 14 avfärgning som fria bakteriella celler. Den upprepade användningen av immobiliserade celler är ytterligare en fördel.It can be concluded that immobilized cells were as effective at decolorization as free bacterial cells. The repeated use of immobilized cells is another advantage.

Tabell 3. Reflektansförhållanden åstadkomna medelst olika behandlingar.Table 3. Re ectancy conditions achieved by means of different treatments.

Behandling * Reflektansförhållande % ökning i reflektans (3% massa) (Lux-enheter)*** Obehandlad 0,54 (kontrollvärde) vid RT Fria celler* 1,13 52 lmmobiliserade celler, 1,24 56 c kel l** lmmobiliserade celler, 1,09 50 cykel ll *lmmobiliserade celler/fria celler av bakterien Nl0/Dl/32 odlade i näringsmedium i 4 dagar tillsattes i pappersmassa av olika koncentrationer (WN)- “Samma sats immobiliserade celler användes itvà cykler.Treatment * Reflection ratio% increase in reflectance (3% mass) (Lux units) *** Untreated 0.54 (control value) at RT Free cells * 1.13 52 immobilized cells, 1.24 56 c cell l ** immobilized cells , 1.09 50 cycles 11 * immobilized cells / free cells of the bacterium N10 / D1 / 32 cultured in nutrient medium for 4 days were added to pulp of different concentrations (WN) - The same batch of immobilized cells was used in two cycles.

“Reflektansförhållandet beräknades genom att dividera medelreflektansen för obehandlad eller behandlad massa vid olika våglängder med medelreflektansen för referens- (mål-) pappersmassa.“The reflectance ratio was calculated by dividing the mean reflectance of untreated or treated pulp at different wavelengths by the mean reflectance of reference (target) pulp.

EXEMPEL 4 Avfärgning av bläckstråleutskrifter genomfördes medelst värmedödade bakteriella celler och supematant från värmeinaktiverad odling (innehållande stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat). De bakteriella cellema och supernatantema från odling autoklaverades för detta syfte vid 121 °C i 15 minuter vid 15 lb. Framställningen av massan, inokulum och experimentuppsättningen och inkubationen var likadan som i tidigare exempel.EXAMPLE 4 Dyeing of ink jet prints was performed by heat-killed bacterial cells and supernatant from heat-inactivated culture (containing starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate). The bacterial cells and supernatants from culture were autoclaved for this purpose at 121 ° C for 15 minutes at 15 lb. The preparation of the mass, inoculum and the experimental set-up and incubation were the same as in previous examples.

I enlighet med detta visar figur 4 att vid dag 3 kunde ingen avfärgning åstadkommas genom användning av dödade bakteriella celler och supematant från värmeinaktiverad odling vilket indikerar att den aktiva bestândsdelen som är ansvarig för avfärgningen är värmekänslig.Accordingly, Figure 4 shows that at day 3, no decolorization could be achieved using killed bacterial cells and supernatant from heat-inactivated culture, indicating that the active ingredient responsible for the decolorization is heat sensitive.

EXENIPEL 5 Effekten av lagring av supematant från odling är en av de viktiga kriterierna för dess effektiva användning. Därför användes supernatant från odling i naturligt tillstånd, vilken lagrats i 2 dagar i rumstemperatur, för att avfärga massan. I jämförande syfte användes färskt odlingsfiltrat för avfärgning av 532 338 massan. Förfarandet för avfärgning var det samma som beskrivet i exempel 1 - 4. l enlighet med detta visar figurema 5A och 5B att de lagrade supernatantema förlorade sin effektivitet i jämförelse med färskt odlingsfiltrat i avfärgning, vilket indikerar att den aktiva beståndsdelen som är inblandad i avfärgning ej är stabil vid lagring i rumstemperatur.EXAMPLE 5 The effect of storing supernatant from culture is one of the important criteria for its efficient use. Therefore, supernatant from culture in a natural state, which was stored for 2 days at room temperature, was used to decolorize the mass. For comparative purposes, fresh culture filtrate was used to decolorize the 532,338 pulp. The decolorization procedure was the same as described in Examples 1-4. Accordingly, Figures 5A and 5B show that the stored supernatants lost their effectiveness compared to fresh culture filtrate in decolorization, indicating that the active ingredient involved in decolorization is not is stable when stored at room temperature.

W jämförde också effektiviteten för de frystorkade odlingsfiltraten vid avfärgning. I enlighet med detta visar tabell 4 att det frystorkade odlingsfiltratet från medium som innehåller stärkelse eller polyoxietylensorbitanmonooleat effektivt kunde avfärga massan.W also compared the efficiency of the freeze-dried culture filtrates during decolorization. Accordingly, Table 4 shows that the lyophilized culture filtrate from medium containing starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate could effectively decolorize the pulp.

Tabell 4. Reflektansförhållande i massa som behandlats med supernatant från frystorkad odling.Table 4. Re ectane ratio in pulp treated with supernatant from lyophilized culture.

Behandling* Reflektansförhållande % ökning i (3K% massa) (Lux-enheteryf" reflektans Obehandlad (kontrollvärde) vid 0,54 RT Massa behandlad med 1,25 57 frystorkad OF som innehåller stärkelse Massa behandlad med 1,25 57 frystorkad OF som innehåller polyoxietylensorbitanmonooleat Det frystorkade odlingsfiltratet (OF) tinades upp och utspäddes till den ursprungliga volymen med 50% utspätt havsvatten och inkuberades med massa. Kontrollmassan inkuberades med 50% utspätt havsvatten.Treatment * Reectance ratio% increase in (3K% pulp) (Lux unit rate Reectance Untreated (control value) at 0.54 RT Pulp treated with 1.25 57 lyophilized OF containing starch Mass treated with 1.25 57 lyophilized OF containing polyoxyethylene sorbitan monooleate The lyophilized culture filtrate (OF) was thawed and diluted to the original volume with 50% diluted seawater and incubated with pulp.The control mass was incubated with 50% diluted seawater.

EXEMPEL 6 Den aktiva beståndsdelen som är involverad i avfärgning av massan medelst användning av supernatant från odling som innehåller stärkelse eller polyoxietyiensorbitanmonooleat undersöktes. I enlighet med detta uppmättes amylas- och lípasaktivitet i dessa supernatanter. Amylasaktivitet uppmättes medelst 1% stärkelse, jod och kaliumjodid (Medda och Chandra 1980).EXAMPLE 6 The active ingredient involved in decolorizing the pulp using supernatant from culture containing starch or polyoxyethylene sorbitan monooleate was examined. Accordingly, amylase and lipase activity in these supernatants were measured. Amylase activity was measured by 1% starch, iodine and potassium iodide (Medda and Chandra 1980).

Lipasaktivitet uppmättes medelst modeilsubstrat 4-metylumbelliferyl-butyrat (Sigma Chemicals, USA). Den fluorescerande MUF-produkten som frigörs 532 356 16 mäts upp vid excitations- och emissionsvåglängd 364 respektive 445 nm (Hoppe H-G. 1993). Användningen av polyoxietylensorbitanmonooleat i mediet kommer att inducera såväl esteras- som lipasaktivitet (Gupta et al. 2003). l enlighet med detta visade det 5 dagar gamla odlingsfiltratet som innehöll stärkelse och polyoxietylensorbitanmonooleat 49 respektive 33 U ml* aktivitet. Detta var de lägsta koncentrationerna som krävdes för effektiv avfärgning på grund av att utspädning av enzymlösningen inte visade resultat på effektiv avfärgning. Figur 6 visar den obehandlade kontrollmassan och enzymbehandlad massa.Lipase activity was measured by modile substrate 4-methylumbelliferyl butyrate (Sigma Chemicals, USA). The fluorescent MUF product released 532 356 16 is measured at excitation and emission wavelengths 364 and 445 nm, respectively (Hoppe H-G. 1993). The use of polyoxyethylene sorbitan monooleate in the medium will induce both esterase and lipase activity (Gupta et al. 2003). Accordingly, the 5-day-old culture filtrate containing starch and polyoxyethylene sorbitan monooleate showed 49 and 33 U ml * activity, respectively. These were the lowest concentrations required for effective decolorization because dilution of the enzyme solution did not show results in effective decolorization. Figure 6 shows the untreated control mass and enzyme treated mass.

Fördelar: De huvudsakliga fördelarna med föreliggande uppfinning är: 1. Cellfri supematant kan återanvändas för avfärgning av pappersavfall från kontor vilket papper inbegriper xeroxkopior och pappersutskrifter från bläckstråleskrivare som är trycka med ej dispergerbar tryckfärg för anslagsfria skrivare. 2. Ingen enzymrening behövs i föreliggande process. 3. Ingen temperatur- eller pH-justering krävs.Advantages: The main advantages of the present invention are: 1. Cell-free supernatant can be reused for coloring paper waste from offices which paper includes xerox copies and paper prints from ink jet printers printed with non-dispersible ink for non-impact printers. 2. No enzyme purification is required in the present process. No temperature or pH adjustment required.

Claims (7)

5 10 15 20 25 30 35 532 335 17 PATENTKRAV5 10 15 20 25 30 35 532 335 17 PATENT REQUIREMENTS 1. Process för enzymatisk avfärgning av tryckt papper vilket inbegriper xerografiskt kopierade och bläckstråleutskrivna papper tryckta med e] dispergerbar tryckfärg för anslagsfria skrivare innefattande: a) odling av bakterieisolat l/ibrio alginolyticus med accessionsnummer NIO/DI/32, vilken kultur är deponerad vid ARS Patent Culture Collection under NRRL-nummer NRRL-B-30638, i ett odlingsmedium framställt i havsvatten med salthalten utspädd till 50% och som kompletterats med polyoxietylensorbitanmonooleat eller 1% stärkelse eller båda i ett temperaturomrâde från 27°C till 37°C i 3 - 4 dagar, b) avlägsnande av bakteriella celler genom centrifugering under sterila förhållanden för att erhålla cellkulturfri supernatant, c) inkubering av massa av xerografiskt kopierade och bläckstråleutskrivna papper, vilken massa är utspädd till 3 - 12 % konsistensgrad i havsvatten med salthalten utspädd till 50% med den i steg (b) erhållna cellkulturfria supematanten vid 20% koncentration i åtminstone 72 timmar vid rumstemperatur följt av utspädning av massan tiofalt i vatten för att erhålla fullständigt blekt massa utan spår av tryckfärg i supernatanten, d) filtrering av den från steg (c) erhållna resulterande massan vid undertryck för att erhålla önskat avfärgat papper.A process for enzymatic decolorization of printed paper which includes xerographically copied and ink jet printed paper printed with a dispersible ink for non-impact printers comprising: a) culturing bacterial isolate l / ibrio alginolyticus with accession number NIO / DI / 32, which culture is ARS Patent Culture Collection under NRRL number NRRL-B-30638, in a culture medium prepared in seawater with a salinity diluted to 50% and supplemented with polyoxyethylene sorbitan monooleate or 1% starch or both in a temperature range from 27 ° C to 37 ° C in 3 - 4 days, b) removal of bacterial cells by centrifugation under sterile conditions to obtain cell culture-free supernatant, c) incubation of pulp of xerographically copied and inkjet paper, which pulp is diluted to 3 - 12% consistency in seawater with salinity diluted to 50% with the cell culture-free supernatant obtained in step (b) at 20% concentration in at least 72 hours at room temperature followed by diluting the mass tenfold in water to obtain completely bleached mass without traces of ink in the supernatant, d) filtering the resulting mass obtained from step (c) under reduced pressure to obtain the desired discolored paper. 2. Process enligt patentkrav 1, varvid den använda stammen har följande karakteristika: a) den är en gramnegativ bakterie; b) den är en coccoid bakterie som isolerats från kustmarina sediment från Dona Paula, Goa.The process of claim 1, wherein the strain used has the following characteristics: a) it is a gram-negative bacterium; b) it is a coccoid bacterium isolated from coastal marine sediments from Dona Paula, Goa. 3. Process enligt patentkrav 1, varvid natriumklorid vid en minsta koncentration av 1,5% kan användas i stället för havsvatten för odling av nämnda bakterie.A process according to claim 1, wherein sodium chloride at a minimum concentration of 1.5% can be used instead of seawater for culturing said bacterium. 4. Process enligt patentkrav 1, varvid nämnda xerografiskt kopierade eller biäckstråleutskrivna papper blötläggs i varmt vatten i 1 - 2 timmar efter komplettering med 1% ytaktiva substanser följt av macerering av massan. 10 532 355 18The process of claim 1, wherein said xerographically copied or inkjet printed papers are soaked in hot water for 1-2 hours after supplementation with 1% surfactants followed by maceration of the pulp. 10 532 355 18 5. Process enligt patentkrav 1, varvid massmattan pressas för att göra den jämntjock föijt av torkning inom ett temperaturomrâde som sträcker sig från 25°C till 70°C under en tidsperiod av 4 - 5 timmar.The process of claim 1, wherein the pulp mat is pressed to make it evenly thick by drying within a temperature range ranging from 25 ° C to 70 ° C for a period of 4-5 hours. 6. Process enligt patentkrav 1, varvid samma sats av cellkulturfri supernatant kan användas effektivt i två -tre cykler av avfärgning av massa från xerografiskt kopierade papper/bläckstråIeutskrivna papper.The process of claim 1, wherein the same batch of cell culture-free supernatant can be used effectively in two to three cycles of mass decolorization from xerographically copied paper / inkjet paper. 7. Process enligt patentkrav 1, varvid supernatanten från frystorkad odling även kan användas för effektiv avfärgning av nämnda massa.A process according to claim 1, wherein the supernatant from lyophilized culture can also be used for efficient decolorization of said pulp.
SE0800051A 2005-08-05 2005-12-09 Process for enzymatic decolorization of printed paper SE532396C2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IN2090DE2005 2005-08-05
PCT/IN2005/000403 WO2007017889A1 (en) 2005-08-05 2005-12-09 A process for enzymatic deinking of printed papers

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SE0800051L SE0800051L (en) 2008-01-10
SE532396C2 true SE532396C2 (en) 2010-01-12

Family

ID=36128496

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE0800051A SE532396C2 (en) 2005-08-05 2005-12-09 Process for enzymatic decolorization of printed paper

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20080073042A1 (en)
DK (1) DK177025B1 (en)
NO (1) NO20076441L (en)
SE (1) SE532396C2 (en)
WO (1) WO2007017889A1 (en)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7645358B2 (en) * 2002-03-25 2010-01-12 Council Of Scientific And Industrial Research Process for biological deinking of office waste paper
IL210497A0 (en) 2011-01-06 2011-03-31 Freeink Ltd A method and composition for deinking a printed substrate

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02160984A (en) * 1988-12-09 1990-06-20 Novo Ind As Deinking method of waste paper
JP2859393B2 (en) * 1990-07-24 1999-02-17 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Cellulase and method for producing the same
JPH06346390A (en) * 1993-06-02 1994-12-20 Mitsubishi Heavy Ind Ltd Method for deinking waste paper
US5503709A (en) * 1994-07-27 1996-04-02 Burton; Steven W. Environmentally improved process for preparing recycled lignocellulosic materials for bleaching
US5739019A (en) * 1994-08-08 1998-04-14 Walker; Harrell L. Method of isolating and propagating microorganisms and viruses
US5525193A (en) * 1994-10-26 1996-06-11 Novo Nordisk A/S Use of monocomponent cellulase for removing inks, coatings, and toners from printed paper
CA2165251A1 (en) * 1994-12-15 1996-06-16 Jill Marie Jobbins Deinking composition and process
GB2304741A (en) * 1995-08-30 1997-03-26 Allied Colloids Ltd Enzyme deinking of paper
US6022423A (en) * 1996-05-23 2000-02-08 Imagex Technologies, Inc. Method for deinking paper
DE19620952C2 (en) * 1996-05-24 2001-05-23 Bk Giulini Chem Gmbh & Co Ohg Process for increasing the degree of whiteness in the deinking process
US6576083B2 (en) * 2001-04-05 2003-06-10 Novozymes A/S Deinking of waste paper
US20030178162A1 (en) * 2002-03-25 2003-09-25 Chandralata Raghukumar Process for biological deinking of office waste paper
EP1574567A1 (en) * 2004-03-11 2005-09-14 Puratos Naamloze Vennootschap Novel xylanases and their use

Also Published As

Publication number Publication date
SE0800051L (en) 2008-01-10
US20080073042A1 (en) 2008-03-27
NO20076441L (en) 2007-12-13
WO2007017889A1 (en) 2007-02-15
DK177025B1 (en) 2011-01-31
DK200800304A (en) 2008-02-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hasanin et al. Green ecofriendly bio-deinking of mixed office waste paper using various enzymes from Rhizopus microsporus AH3: efficiency and characteristics
Saxena et al. Role of various enzymes for deinking paper: a review
Sridevi et al. Biobleaching of paper pulp with xylanase produced by Trichoderma asperellum
Lee et al. Enzymatic deinking of laser printed office waste papers: some governing parameters on deinking efficiency
Maity et al. Xylanase isozymes from the newly isolated Bacillus sp. CKBx1D and optimization of its deinking potentiality
YEŞİLADA et al. Reactive dye decolorization activity of crude laccase enzyme from repeated-batch culture of Funalia trogii
Kumar et al. Production of endoxylanase with enhanced thermostability by a novel polyextremophilic Bacillus halodurans TSEV1 and its applicability in waste paper deinking
Kumar et al. Thermo-alkali-stable xylanase of a novel polyextremophilic Bacillus halodurans TSEV1 and its application in biobleaching
Singh et al. An efficient eco-friendly approach for recycling of newspaper waste
Singh et al. Xylanase production by a hyperxylanolytic mutant of Fusarium oxysporum
Mohandass et al. Biological deinking of inkjet-printed paper using Vibrio alginolyticus and its enzymes
SE532396C2 (en) Process for enzymatic decolorization of printed paper
Selvam et al. Decolourization of azo dyes and dye industry effluents by lignin degrading fungus Trametes versicolor
US7645358B2 (en) Process for biological deinking of office waste paper
Yakubu et al. Microbial enzymes and their application in pulp and paper industry
Madhushika et al. Decolourization of reactive red EXF dye by isolated strain proteus mirabilis
Kumar et al. Biodeinking: an eco-friendly alternative for chemicals based recycled fiber processing
US20040099385A1 (en) Neutral deinking with a deinking composition comprising a lipase and a fatty acid ester
US20030178162A1 (en) Process for biological deinking of office waste paper
Pathak et al. Fungal enzymes application for recycling of waste papers
Kamble et al. Optimization and scale up of cellulase-free xylanase production in solid state fermentation on wheat bran by Cellulosimicrobium sp. MTCC 10645
WO2000053843A1 (en) A process and an enzyme preparation with steryl esterase activity for controlling pitch during paper manufacture
Bajpai et al. Biodeinking
Prabhu et al. Enhanced production of laccase by microparticle induced cultivation of Basidiomycetes and evaluation of its efficiency as deinking agent
OWS BIOREMOVAL OF INKJET INK AND BIOD