SE469148B - PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSE - Google Patents
PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSEInfo
- Publication number
- SE469148B SE469148B SE9103483A SE9103483A SE469148B SE 469148 B SE469148 B SE 469148B SE 9103483 A SE9103483 A SE 9103483A SE 9103483 A SE9103483 A SE 9103483A SE 469148 B SE469148 B SE 469148B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- slides
- holder
- samples
- tissue samples
- preparing cell
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 15
- 210000002105 tongue Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012760 immunocytochemical staining Methods 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
- G01N1/31—Apparatus therefor
- G01N1/312—Apparatus therefor for samples mounted on planar substrates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
469 ífå-å 2 fylls och töms på reagens. Nackdelen med dessa system är att de är mycket dyra och att högre koncentration av antikropp ofta krävs än vid manuell färgning. 469 ífå-å 2 are filled and emptied of reagent. The disadvantage of these systems is that they are very expensive and that a higher concentration of antibody is often required than with manual staining.
När få patientprov ska prepareras sker'detta istället med manuell hantering av glasen individuellt eller i ett satsförfarande, varvid satsförfarandet består av gemensam doppning av objekt- glasen i olika bad, vilka har gemensamt att de består av billiga kemikalier. Vid denna doppning är objektlasen löst anordnade i en hållare. När dyra reagens ska anbringas tas objektglasen ut individuellt från hållaren och reagensen droppas för hand på objektglasen. Efter avslutande av detta steg sätts objektglasen tillbaka på plats i hållarna för att utföra ytterligare badsteg.When few patient samples are to be prepared, this is done instead by manual handling of the glasses individually or in a batch procedure, whereby the batch procedure consists of joint dipping of the slides in different baths, which have in common that they consist of cheap chemicals. In this dipping, the object load is loosely arranged in a holder. When expensive reagents are to be applied, the slides are removed individually from the holder and the reagents are dropped by hand on the slides. After completing this step, the slides are put back in place in the holders to perform additional bathing steps.
Dessa i och urplockningar i hållaren sker erfordrat antal gånger tills förloppet är avslutat och proven är redo att analyseras, t ex. genom mikroskopi. Detta förfarande har nackdelen att det är arbetsintensivt och följaktligen dyrt och tidskrävande.These in and pickings in the holder take place the required number of times until the process is completed and the samples are ready to be analyzed, e.g. by microscopy. This method has the disadvantage that it is labor intensive and consequently expensive and time consuming.
Det var därför föreliggande uppfinnings uppgift att skapa ett förfarande och en anordning för satsvis färgning av cell- eller vävnadsprov som är billigt och tids- och arbetsbesparande samt som genom sin princip innebär en standardisering av förfarandet.It was therefore the object of the present invention to create a method and a device for batch dyeing of cell or tissue samples which is inexpensive and time- and labor-saving and which by its principle entails a standardization of the method.
Föreliggande uppfinning löser detta genom de kännetecknande delarna till krav l respektive krav 5.The present invention solves this by the characterizing parts of claim 1 and claim 5, respectively.
För att beskriva uppfinningens fördelar kommer först ett ett representativt förfarande för immunohistokemisk färgning enligt konventionell teknik och därefter ett enligt föreliggande uppfinning att beskrivas.To describe the advantages of the invention, first a representative method of immunohistochemical staining according to conventional techniques and then one according to the present invention will be described.
Efter paraffininbäddning av vävnadsprovet, snittningen och påföringen på objektglas, sker, vid det konventionella för- farandet, först ett antal bad för att avlägsna paraffinet, vilka i tur och ordning innehåller: xylen, absolut alkohol, 96% alkohol, 80% alkohol, 50% alkohol, destillerat vatten. Samtliga dessa steg sker i dragskåp, varvid objektglasen är anordnade i .,_,,..H_..H¿.“,.. .App _ _'.»_-,.,_,,,_. _17:- OO 3 en hållare och doppas satsvis i baden efter en bestämd tidscykel.After paraffin embedding of the tissue sample, incision and application to slides, in the conventional procedure, a number of baths are first taken to remove the paraffin, which in turn contain: xylene, absolute alcohol, 96% alcohol, 80% alcohol, 50 % alcohol, distilled water. All these steps take place in a fume cupboard, the slides being arranged in., _ ,, .. H _ .. H¿. “, .. .App _ _ '.» _-,., _ ,,, _. _17: - OO 3 a holder and dipped batchwise in the baths after a certain time cycle.
Därefter följer tvâ gemensamma steg: O,3% IQOZ i PBS (fosfat- buffrad saltlösning) och 1% BSA (bovint serumalbumin) i PBS.This is followed by two common steps: 0.3% IQOZ in PBS (phosphate-buffered saline) and 1% BSA (bovine serum albumin) in PBS.
Efter dessa steg ska den primära antikroppen tillsättas, vilket sker genom droppning på objektglasen. För detta ändamål måste objektglasen tas ut ur hållaren.och torkas torrt runt preparatet.After these steps, the primary antibody should be added, which is done by dripping on the slides. For this purpose, the slides must be removed from the holder and dried dry around the preparation.
Flera snitt som härstammar från en enda patient vill man ofta testa på olika sätt genom att tillsätta olika primära antikroppar på varje individuellt objektglas. Om det handlar om snitt från flera patienter tillsätts samma primära antikropp till flera objektglas. Det behöver inte påpekas att noggrannheten.:i det förra fallet är mycket viktig eftersom varje objektglas ges en separat behandling.Multiple sections derived from a single patient are often tested in different ways by adding different primary antibodies to each individual slide. In the case of sections from several patients, the same primary antibody is added to several slides. Needless to say, accuracy in the former case is very important because each slide is given a separate treatment.
Efter dessa steg sätts objektglasen tillbaka i hållaren och utsätts för en PBS-tvätt. Därefter tas glasen ur hållaren, torkas enligt tidigare beskrivning och förses med biotinylerad antikropp som droppas på snittet. När ytterligare ett PBS-bad har ge- nomförts tas objektglasen återigen ut ur hållaren och torkas, denna gång för att förses med droppar av ABC (avidin biotin)- komplex, och sedan in i hållaren för en ny PBS-tvätt.After these steps, the slides are put back in the holder and subjected to a PBS wash. The tubes are then removed from the holder, dried as previously described and provided with biotinylated antibody which is dropped onto the incision. When another PBS bath has been performed, the slides are again taken out of the holder and dried, this time to be added with drops of ABC (avidin biotin) complex, and then into the holder for a new PBS wash.
Slutligen sker enzymframkallningen i dragskåp. Först plockas objektglasen ut ur hållarna och förses med enzymsubstrat, därefter in i hållarna igen för PBS-tvätt. De tre sista stegen, motfärgning, PBS-blåfärgning, PBS-tvätt, sker likaså med objektglasen på plats i hållarna. Efter detta är proven redo för analys.Finally, the enzyme development takes place in fume cupboards. First, the slides are removed from the holders and provided with enzyme substrate, then into the holders again for PBS washing. The last three steps, counter-staining, PBS blue staining, PBS washing, are also done with the slides in place in the holders. After this, the samples are ready for analysis.
Vid det konventionella förfarandet måste objektglasen plockas ur och in i hållarna sammanlagt tre till fyra gånger. Förutom de tids- och arbetskrävande aspekterna på detta kommer även risken för sammanblandning av objektglasen.In the conventional procedure, the slides must be picked out and into the holders a total of three to four times. In addition to the time- and labor-intensive aspects of this, there is also the risk of mixing the slides.
Vid förfarandet enligt föreliggande uppfinning används en speciellt utformad anordning. Anordningen visas i de bifogade ritningarna, i vilka 469 'šffä 4.In the method according to the present invention, a specially designed device is used. The device is shown in the accompanying drawings, in which 469 'šffä 4.
Fig. 1 är en stående sidovy av hållaren försedd med instuckna obj ektglas; Fig. 2 är en planvy av en hållare för objektglas eller andra provunderlag ; och Fig. 3 är en liggande sidovy av anordningen där ett kilformat element är infört i hållaren för att anordna objektglasen i trappstegs form.Fig. 1 is a standing side view of the holder provided with inserted slides; Fig. 2 is a plan view of a slide or other specimen holder; and Fig. 3 is a horizontal side view of the device where a wedge-shaped element is inserted into the holder for arranging the slides in the form of steps.
En hållare 1 enligt uppfinningen är på insidan försedd med tungor 3 för parallell anordning av provförsedda objektglas 2 tätt intill varandra. Objektglasen hålls fast genom fjädring hos de tungor som formar spåren i vilka glasen skjuts in. Avstånden mellan de individuella glasen är litet och konstant, vilket minimerar reagensvolymerna. Hållaren l är öppen i båda ändarna och är i den ena änden försedd med tungorna 3. Vid samtliga badsteg, dvs. där rikligt med reagens används, är hållarna i det i Fig. 1 visade läget, dvs. samtliga objektglas skjuter ut lika långt från hållaren .A holder 1 according to the invention is provided on the inside with tongues 3 for parallel arrangement of test-provided slides 2 close to each other. The slides are held in place by suspension of the tongues that form the grooves into which the slides are inserted. The distances between the individual tubes are small and constant, which minimizes reagent volumes. The holder 1 is open at both ends and is provided at one end with the tongues 3. At all bathing steps, ie. where plenty of reagent is used, the holders are in the position shown in Fig. 1, i.e. all slides protrude equally far from the holder.
Till anordningen hör också en trappstegsformerare eller kilformat element 4, som visas i Fig. 3. Det kilformade elementet skjuts in från hållarens tungfria ände för att anordna obj ektglasen i trappstegsform vid de steg där reagensen ska droppas på de individuella glasen. Det är även tänkbart att ha en fast anordnad kilform i botten på hållaren.The device also includes a step former or wedge-shaped element 4, as shown in Fig. 3. The wedge-shaped element is pushed in from the tongue-free end of the holder to arrange the slide slides at the steps where the reagents are to be dropped on the individual tubes. It is also conceivable to have a fixedly arranged wedge shape in the bottom of the holder.
Vid förfarandet enligt uppfinningen anordnas objektglasen 2 växelvis i rak form, dvs. en enhetlig längd av varje objektglas skjuter ut ur hållaren, och i trappstegsform, dvs. olika längd av varje objektglas skjuter ut ur hållaren, varvid den raka formen används vid doppning av objektglasen i olika bad och trappstegsformen, i vilken hållaren är vriden 90° i förhållande till den raka formen, används för påföring av små mängder reagens till proven på objektglasen. Proven är anordnade på ovansidan av 5 objektglasen vid trappstegsformen, lämpligen nära den främre kanten av respektive objektglas.In the method according to the invention, the slides 2 are arranged alternately in straight form, i.e. a uniform length of each slide protrudes from the holder, and in step form, i.e. different lengths of each slide protrude from the holder, the straight shape being used for dipping the slides in different baths and the step shape, in which the holder is rotated 90 ° relative to the straight shape, being used to apply small amounts of reagents to the slides on the slides. . The samples are arranged on the upper side of the slides at the step shape, suitably near the front edge of the respective slides.
Enligt ytterligare ett särdrag av uppfinningen kan hållaren 1 vara sammankopplingsbar med en eller flera andra hållare. Vidare är det möjligt att utforma hållarna så att de är upphängningsbara i kyvetter eller andra.behållare för reagens- eller tvättlösning, t ex genom att en stång anbringas på hållarens tungfria ände, vilken stång skjuter ut från hållarens kanter och kan vila på en reagensbehållare så att objektglasen hänger ner i behållaren.According to a further feature of the invention, the holder 1 can be connectable to one or more other holders. Furthermore, it is possible to design the holders so that they can be suspended in cuvettes or other containers for reagent or washing solution, for example by placing a rod on the tongue-free end of the holder, which rod projects from the edges of the holder and can rest on a reagent container so that the slides hang down in the container.
Dessutom är det tänkbart att utforma hållarna så att de är upphängningsbara i en robotarm. Kyvetter kan i sin tur vara fastsättbara. på en underlagsplatta på valfri plats för att möjliggöra sammansättning av en valfri reaktions- och tvättkedja.In addition, it is conceivable to design the holders so that they can be suspended in a robot arm. Cuvettes can in turn be attachable. on a backing plate in any location to enable the assembly of an optional reaction and wash chain.
När hållare med tvâ öppna ändar används kan underlagsplattan förses med en monterad trappstegsformerare.When holders with two open ends are used, the base plate can be fitted with a mounted step former.
Vid ovan nämnda steg i det konventionella förfarandet, i vilka objektglasen måste plockas ut ur hållaren för att förses med en droppe reagens och därefter föras in i hållaren igen, är det enligt föreliggande uppfinning möjligt att låta objektglasen vara kvar i hållaren genom att anordna dessa i trappstegsform. Genom trappstegsformen blir det möjligt att nå varje individuellt objektglas för att droppa på reagens på proven samtidigt som objektglasen sitter kvar i hållaren. När droppsteget är avslutat anordnas objektglasen återigen till utgångsläget enligt Fig. 1, där objektglasen är anordnade i rak form, dvs. de skjuter ut lika långt från hållares främre ände. Således sitter'objektglasen kvar på samma plats i hållaren såväl i början av förfarandet som i slutet därav, vilket minimerar risken för sammanblandning.In the above-mentioned steps of the conventional method, in which the slides must be removed from the holder to be provided with a drop of reagent and then re-inserted into the holder, it is possible according to the present invention to leave the slides in the holder by arranging them in step shape. The step shape makes it possible to reach each individual slide to drip reagent on the samples while the slides remain in the holder. When the drip step is completed, the slides are again arranged to the initial position according to Fig. 1, where the slides are arranged in a straight shape, i.e. they protrude equally far from the front end of the holder. Thus, the slides remain in the same place in the holder both at the beginning of the process and at the end thereof, which minimizes the risk of mixing.
Eftersom i cmh urplockandet i hållarna bortfaller blir för- farandet dessutom ^tids- och. arbetsbesparande och. kräver' ett minimum av reagens.Since in cmh the picking out in the holders is omitted, the procedure also becomes time and. labor saving and. requires a minimum of reagents.
Hållaren och dess tungor tillverkas företrädesvis av plast med deformeringszoner eller gummi eller annat material som har 469 'M8 6 förmåga att ta upp olika toleranser av objektglasen eller andra provunderlag.The holder and its tongues are preferably made of plastic with deformation zones or rubber or other material which has the ability to absorb different tolerances of the slides or other test substrates.
Förutom ovan beskrivna immunohistokemiska färgning lämpar sig anordningen och förfarandet enligt uppfinningen för alla typer av färgningar, t ex immunocytokemiskt färgning, enzymhistokemisk färgning och in situ hybridisering. . me”. =.~.w.'»n~.v*e=vxflsn.~.z:-e m4» v. .... In addition to the immunohistochemical staining described above, the device and method of the invention are suitable for all types of staining, eg immunocytochemical staining, enzyme histochemical staining and in situ hybridization. . me ”. =. ~ .w. '»n ~ .v * e = vx fl sn. ~ .z: -e m4» v. ....
Claims (4)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9103483A SE9103483L (en) | 1991-11-25 | 1991-11-25 | PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSE |
| PCT/SE1992/000813 WO1993011419A1 (en) | 1991-11-25 | 1992-11-25 | Method and device for preparing cell and tissue samples |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9103483A SE9103483L (en) | 1991-11-25 | 1991-11-25 | PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSE |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE9103483D0 SE9103483D0 (en) | 1991-11-25 |
| SE469148B true SE469148B (en) | 1993-05-17 |
| SE9103483L SE9103483L (en) | 1993-05-17 |
Family
ID=20384421
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE9103483A SE9103483L (en) | 1991-11-25 | 1991-11-25 | PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSE |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| SE (1) | SE9103483L (en) |
| WO (1) | WO1993011419A1 (en) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2058128A (en) * | 1934-10-08 | 1936-10-20 | Howard F Brubach | Slide holder |
| DE3313127A1 (en) * | 1982-04-28 | 1983-11-03 | Bio-Innovations, Camp Hill, Pa. | DEVICE FOR COLORING BIOLOGICAL SAMPLES |
| US4838423A (en) * | 1987-04-30 | 1989-06-13 | Manufacturers Hanover Trust Company | Container for thin glass plates |
| US4975250A (en) * | 1989-08-21 | 1990-12-04 | Fisher Scientific Co. | Aligned slideholder and assembly |
-
1991
- 1991-11-25 SE SE9103483A patent/SE9103483L/en not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-11-25 WO PCT/SE1992/000813 patent/WO1993011419A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE9103483L (en) | 1993-05-17 |
| SE9103483D0 (en) | 1991-11-25 |
| WO1993011419A1 (en) | 1993-06-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20220288786A1 (en) | Biological reaction apparatus with draining mechanism | |
| US7303725B2 (en) | Automated high volume slide staining system | |
| US6214626B1 (en) | Apparatus (cuvette) for taking up and storing liquids and for carrying out optical measurements | |
| JP6479663B2 (en) | Prefilled test substrate for testing LAL reactive materials, method of use and method of preparation | |
| EP2523003B1 (en) | Biological reaction apparatus | |
| JP6603237B2 (en) | Automatic specimen processing system and multi-step processing of microscope slides | |
| US6723568B1 (en) | Method and apparatus for cascade impactor testing of inhalable drug therapies recovery for chemical analysis | |
| US20070005169A1 (en) | Device and method for automatically carrying out laboratory procedure steps | |
| US20160195512A1 (en) | Method for determining the cleaning performance of formulations | |
| SE469148B (en) | PROCEDURE AND DEVICE FOR PREPARING CELL OR TISSUE SAMPLES FOR ANALYTICAL PURPOSE | |
| KR102659900B1 (en) | Sample container for receiving small-volume liquid samples | |
| WO2000002660A1 (en) | Reagent vial for automated processing apparatus | |
| US20040115099A1 (en) | Reagent vial for automated processing apparatus | |
| GB2371861A (en) | Sample recovery from a cascade impactor | |
| CN221351275U (en) | Raw milk freezing point detection device and raw milk detection system | |
| US20170328821A1 (en) | Automated batch stainer for immunohistochemistry | |
| Kavanagh et al. | Microbiological assays for antibiotics and vitamins: Considerations for assuring accuracy | |
| MINIPETTE | Minipette System: A Simple and Convenient Ultramicro Technique for Routine Clinical Chemistry (Part I) | |
| JPH02251761A (en) | Method and apparatus for automatic analysis of liquid resin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 9103483-5 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 9103483-5 Format of ref document f/p: F |