SA515361182B1

SA515361182B1 - مركب بيرازول-أميد والاستخدامات الدوائية الخاصة به

Info

Publication number: SA515361182B1
Application number: SA515361182A
Authority: SA
Inventors: موتومورا تاكاشيا; شومي جاكوجون
Original assignee: .جابان توباكو انك
Priority date: 2013-03-15
Filing date: 2015-09-15
Publication date: 2016-12-01
Also published as: NZ712292A; RU2018128304A3; RU2018128304A

Abstract

مركب ممثل بواسطة الصيغ التالية: حيث n عبارة عن 1 أو 2، أو ملح مقبول صيدلانيا منه، واستخدام صيدلاني له.

Description

١ ‏مركب بيرازول - أميد والاستخدامات الدوائية الخاصة به‎

Pyrazole-amide compound and medicinal uses therefor ‏الوصف الكامل‎ ‏خلفية الاختراع‎ ‏واستخدام طبي له. بشكل أكثر‎ pyrazole—amide ‏مركب بيرازول-أميد‎ Jad) ‏يقدم الاختراع‎ ‏تحديداء يتعلق الاختراع الحالي بمركب بيرازول-أميد أو ملح مقبول صيدلانيا منها له نشاط تثبيطي‎ ‏يلي ب‎ lad ‏(الذي سيتم اختصاره‎ dehydrogenase kinase ‏على بيروفات ديهروجيناز كيناز‎ ‏تركيبة صيدلانية تحتوي عليها؛ عامل وقائي أو علاجي يحتوي عليها للسكري‎ «(PDHK 0 resistance ‏إلخ.)؛ متلازمة مقاومة‎ ١ ‏من النوع ١٠؛ السكري من النوع‎ (Sul) diabetes ‏؛ مرض فرط‎ metabolic syndrome ‏؛ متلازمة أيضية‎ insulin ‏الإنسولين‎ syndrome « hyperlactacidemia ‏؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم‎ hyperglycemia ‏السكر في الدم‎ diabetic ‏(الاعتلال العصبي السكري‎ diabetic complications ‏مضاعفات مرض السكري‎ ‏؛ اعتلال الكلية السكري‎ diabetic retinopathy ‏؛ اعتلال الشبكية السكري‎ neuropathy ٠ cardiac failure ‏إلخ.)؛ قصور القلب‎ cataract ‏؛ اعتام العين‎ diabetic nephropathy chronic cardiac ‏؛ قصور مزمن في القلب‎ acute cardiac failure ‏(قصور حاد في القلب‎ myocardial ‏؛ إقفار عضلة القلب‎ cardiomyopathy ‏أعتلال عضلة القلب‎ «(failure « angina pectoris ‏؛ الخناق الصدري‎ myocardial infarction ‏الذبحة القلبية‎ ischemia ‏؛ انسداد‎ atherosclerosis ‏؛ التصلب العصيدي‎ dyslipidemia ‏ارتفاع الدهون في الدم‎ ٠ intermittent | ‏؛ العرج المتقطع‎ peripheral arterial disease ‏الشرايين المترقي‎ « chronic obstructive pulmonary disease ‏؛ الداء الرثوي المسد المزمن‎ claudication ‏؛ الأمراض المتقدرية‎ cerebral apoplexy ‏السكتة الدماغية‎ « brain ischemia ‏إقفار الدماغ‎ mitochondrial ‏اعتلال الدماغ والعضل المتقدري‎ » mitochondrial disease pulmonary ‏؛ فرط ضغط الدم الرئوي‎ cancer ‏؛ السرطان‎ encephalomyopathy ٠ ‏؛ وما شابه.‎ Alzheimer disease ull ‏أو مرض‎ » hypertension ه١‎

ا في ‎(dal)‏ للتفاعلات باستخدام الطاقة ‎Jie‏ التخليق الحيوي, النقل ‎dail)‏ تقلص العضلات وما شابه؛ يتم توفير الطاقة بواسطة تحليل تراي فوسفات أدينوسين ‎adenosine triphosphate‏ ‎(ATP)‏ يتم إنتاج ‎ATP‏ بواسطة أكسدة وقود أيضي ينتج الكثير من الطاقة؛ مثل الجلوكوز 9116056 وأحماض دهنية حرة ‎free fatty acid‏ . في الأنسجة ‎oxidative tissuessa.<idl‏ ‎Jie 0‏ العضلات ‎muscle‏ ؛ يتم إنتاج ‎ATP‏ غالبا من أسيتيل ‎Jay, CoA- acetyl‏ حلقة حمض سيتريك ‎citric acid‏ . يتم إنتاج أسيتيل -/60 بواسطة أكسدة الجلوكوز ‎oxidation of‏ ‎glucose‏ عبر مسار خالي من السكر أو أكسدة من النوع ‎B‏ للأحماض الدهنية الحرة. الإنزيم الذي يلعب دورا محوريا في التحكم في إنتاج أسيتيل-/060 من الجلوكوز هو بيروفات ديهيدروجيناز ‎pyruvate dehydrogenase‏ (المشار إليه اختصار هنا ب ‎(PDH‏ يقوم ‎PDH‏ ‎٠‏ بتحفيز اختزال نيكلوتيد ثنائي من نيكوتين أميد ادينين ‎nicotinamide adenine dinucleotide‏ ‎(NAD)‏ إلى ‎(NADH‏ بالتزامن مع أكسدة ‎oxidation‏ حمض بيروفيك ‎pyruvic acid‏ إلى أسيتيل ‎CoA-‏ وثاني أكسيد الكربون ‎(Jb) carbon dioxide‏ وثائق ليست براءات اختراع ٠؛‏ ". ‎PDH‏ عبارة عن معقد متعدد الإنزيم مكن من ثلاث مكونات إنزيمية ‎(ET)‏ 2ع ‎(E35‏ وبعض ‎Vo‏ الوحدات الفرعية الموجودة في المصفوفة المقدرية. 1]؛ ‎E2‏ و3 مسئولة عن نزع الكربوكسيل ‎decarboxylation‏ من حمض بيروفيك ‎pyruvic acid‏ وانتاج أسيتيل -0/8© واختزال ‎NAD‏ ‏إلى ‎«(NADH‏ على التوالي. ترتبط فئتان من الإنزيم تحتويان على وظيفة منظمة ب ‎alas) (PDH‏ هي ‎PDHK‏ والتي هي عبارة عن كيناز بروتين له انتقائية تجاه ‎(PDH‏ ودورها هو تثبيط الوحدة الفرعية ‎Ela‏ من المعقد ‎٠‏ بواسطة الفسفرة. ‎AV);‏ هو فوسفاتاز ‎PDH phosphatase‏ ؛ وهو بروتين فوسفاتاز ‎protein‏ ‎Sls) phosphatase‏ ينشط ‎PDH‏ عبر تفاعل نزع الفسفور ‎dephosphorylation‏ من الوحدة الفرعية ‎(Ela‏ يتم تحديد نسبة ‎PDH‏ في الحالة النشطة له (المنزوع ‎Leia‏ الفوسفور ‎(phosphor‏ بواسطة توازن نشاط كيناز ‎kinase‏ ونشاط فوسفاتاز ‎phosphatase‏ يتم تنظيم نشاط كيناز بواسطة التركيز النسبي للركائز الأيضية ‎lie Metabolic substrates‏ يتم تنشيط ‎Yo‏ نشاط الكيناز بواسطة الزيادة في نسب ‎NADH/NAD‏ ؛ أسيتيل ‎CoA/CoA-‏ و1 2//أدينوسين ١ه‏

مه ‎gla‏ فوسفات ‎diphosphate (ADP)‏ 806005106؛ ويتم التثبيط بواسطة حمض بيروفيك ‎pyruvic‏ (مثال؛ وثيقة ليست براءة اختراع ؟). في أنسجة الكائنات الثديية؛ يتم تعريف ؛ أنواع من نظائر إنزيم 0011. تحديداء يتم التعبير عن ‎PDHK2‏ في نطاق واسع من الأنسجة شاملة الكبد ‎liver‏ والعضل الهيكلي ‎skeletal muscles‏ ‎oo‏ والأنسجة الدهنية ‎adipose tissues‏ المتضمنة في أيض الجلوكوز ‎glucose metabolism‏ . علاوة على ‎cell‏ حيث ‎PDHK2 (gay‏ حساسية عالية تجاه التنشيط ‎NADH/NAD daily‏ أو أسيتيل ‎CoA/CoA-‏ الزائدة والتثبيط بواسطة حمض بيروفيك؛ يتم اقتراح التضمين في عملية تنظيم منخفضة ‎sad)‏ لأيض الجلوكوز ‎(Je)‏ وثيقة ليست براءة اختراع 4). علاوة على ذلك؛ يتم التعبير عن 00011161 بكميات كبير في العضلة القلبية والعضلة الهيكلية ‎٠‏ والخلايا ‎B‏ البنكرياسية وما شابه. علاوة على ذلك؛ حيث التعبير عن 1011161 محفز بواسطة تنشيط العامل المحرض على نقص الأكسجة ‎١ hypoxia inducible factor (HIF)‏ في حالة دماغية؛ ويقترح تضمينها في أمراض دماغية ‎ischemic diseases‏ والأمراض السرطانية ‎cancerous diseases‏ (مثال؛ وثيقة ليست براءة اختراع #). في الأمراض مثل السكري المعتمد على الإنسولين (النوع ١)؛‏ السكري غير المعتمد على الإنسولين ‎١‏ (النوع 7) وما شابه؛ تتم أكسدة الدهون بواسطة التقليل المتزامن في استخدام الجلوكوز. هذا التقليل في استخدام الجلوكوز هو أحد العوامل التي تسبب مرض فرط السكر في الدم. عندما يقل أيض الجلوكوز المؤكسد في السكري من النوع ‎١‏ و ؟ والسمنة؛ يقل نشاط ‎PDH‏ أيضا. وهي تقترح تضمين نشاط ‎PDH‏ المخفض في استخدام الجلوكوز المخفض في السكري من النوع ‎Yo)‏ ‏(مثال؛ وثائق ليست براءات اختراع 36 ‎.)١‏ ‎٠‏ على العكس؛ يتم تحسين استحداث السكر في الكبد في السكري من النوع ‎١‏ و والذي يشكل واحد أيضا من العوامل التي تسبب مرض فرط السكر في الدم. يوم نشاط ‎PDH‏ المخفض بتقليل تركيز حمض بيروفيك؛ والذي بدوره يزيد إتاحية حمض لاكتيك كركيزة لاستحداث السكر في الكبد. وتشير إلى التضمين الممكن لنشاط ‎PDH‏ المخفض في استحداث السكر المحسن في السكري من النوع ‎١‏ و7 (مثال؛ وثائق ليست براءات اختراع ‎cA‏ 9). عند تنشيط ‎PDH‏ بواسطة تثبيط

‎(PDHK‏ يتم اعتبار أكسدة الجلوكوز على أنها ترتفع. نتيجة لذلك؛ يتم تحسين استخدام الجلوكوز في الجسم ويتم قمع استحداث السكر في الكبد؛ وبالتالي يتوقع تطور مرض فرط السكر في الدم في السكري من النوع ‎١‏ و؟ ‎JE)‏ وثائق ليست براءات اختراع ‎.)١" ١ 0٠١‏ ثمة عامل آخر يؤدي إلى السكري وهو الإفراز الضعيف للإنسولين؛ والمعروف بارتباطه بنشاط ‎PDH‏ المخفض © في خلايا ‎f‏ البنكرياسية ‎pancreatic ]( cells‏ ¢ وإدخال 1011161 ‎١‏ و؛ (مثال؛ وثائق ليست براءات اختراع ‎(VE OT‏ علاوة على ذلك؛ مرض فرط السكر في الدم المستديم بسبب السكري معروف بأنه يؤدي إلى وجود مضاعفات ‎Jie‏ الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري وما شابه. يساهم الثيامين وحمض لايبويك ‎-lipoic acid a—‏ به في تنشيط ‎PDH‏ كإنزيمات مشاركة. ثيامين ‎Thiamine‏ وحمض لايبويك -0؛ أو تم توضيح أن ‎٠‏ مشتقات ثيامين ومشتقات حمض لايبويك ‎om‏ لها أثر واعد على علاج مضاعفات مرض السكري. بالتالي؛ يتوقع أن يقوم تنشيط ‎PDH‏ بتطوير مضاعفات مرض السكري (مثال؛ وثائق ليست

‏براءات اختراع ‎.)١١ Vo‏ في الظروف الإقفارية؛ يقلل الإمداد المحدود بالإكسجين أكسدة كل من الجلوكوز والحمض الدهني وتقلل كمية ‎ATP‏ الناتجة بواسطة ‎saul‏ المؤكسدة في الأنسجة. في غياب الأكسجين الكافي؛ يتم ‎١‏ الحفاظ على مستويات ‎ATP‏ بواسطة التحلل اللاهوائي المحسن. نتيجة لذلك؛ يزيد حمض لاكتيك ويقل الرقم الهيدروجيني داخل الخلايا. على الرغم من ذلك يحاول الجسم الحفاظ على توازن الأيون بواسطة استهلاك الطاقة؛ مستوى ‎ATP‏ المنخفض بشكل طبيعي وتؤدي الأسمولية الخلوية المضطربة إلى موت الخلية. علاوة على ذلك؛ يقوم كيناز تنشيط أدينوسين مونوفوسفات ‎adenosine monophosphate-—activating‏ ؛ المنشط أثناء ‎lay)‏ « بفسفرة وبالتاي يثبط ‎٠‏ كربوكسيلات أسيتيل ‎carboxylase CoA-‏ 0/8 -ا/80617. تقل مستويات ميلانويل -/60) في النسيج؛ وبالتالي يزيد نشاط كرانيتين بالميتويل ترانفيراز -ا ‎carnitine palmitoyltransferase—‏ ويتم تفضيل أكسدة الحمض الدهني على أكسدة الجلوكوز بواسطة السماح بنقل أسيل ‎CoA-‏ إلى متقدرات. أكسدة الجلوكوز قادرة على إنتاج قدر أكبر من 8075 في جزيء الأكسجين ‎oxygen‏ ‏مما يمكن لأكسدة الأحماض الدهنية أن تقوم به. في ظروف الافتقارء بالتالي؛ عندما يصبح أيضا

‎ه١‎

--

الطاقة مسيطر على أكسدة الجلوكوز بواسطة تنشيط ‎PDH‏ يمكن اعتبار أن القدرة على الحفاظ

على مستوى ‎ATP‏ على أنه محسن ‎(Jie)‏ وثيقة ليست براءة اختراع ‎(VY‏

علاوة على ذلك؛ حيث يؤدي تتشيط ‎PDH‏ إلى أكسدة حمض بيروفيك الناتجة بواسطة تحلل

الجلوكوز؛ وتقليل انتاج حمض لاكتيك ‎lactic acid‏ ؛ يعتبر حمل البروتون الصافي على أنه قد

"تم تقليله في الأنسجة الإقفارية. بالتالي؛ يتوقع أن يتم تنشيط ‎PDH‏ بواسطة تثبيط ‎PDHK‏ أن

يعمل بشكل وقائي في أمراض دماغية ‎Jie‏ افتقار العضلة القلبية ‎cardiac muscle ischemia‏

(مثال؛ وثائق ليست براءات اختراع ‎OA‏ ؟9١).‏

يعتبر العقار الذي يقوم بتنشيط ‎PDH‏ بواسطة تثبيط ‎PDHK‏ على أنه يقلل إنتاج اللاكتات

‎Cua lactate‏ أنه يحسن أيض البيروفات ‎pyruvate metabolism‏ بالتالي؛ هذا العقار سيكون ‎٠‏ مفيد في علاج مرض فرط حمض لاكتيك في الدم ‎Jie‏ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ

‏والعضل المتقدري والإنتان ‎sepsis‏ (مثال؛ وثيقة ليست براءة اختراع ‎.)٠١‏

‏في ‎WDA‏ السرطان؛ يزيد التعبير عن 0011161 أو . في خلايا السرطان؛ علاوة على ذلك؛ يقل

‏إنتاج ‎ATP‏ بواسطة الفسفرة المؤكسدة ‎phosphorylation‏ 016108176 في المتقدرات»؛ ويزيد إنتاج

‎ATP‏ عبر التحلل اللاهوائي في السيتوبلازما 07710018507. يتوقع أن يقوم تنشيط ‎PDH‏ بواسطة ‎Yo‏ تثبيط ‎PDHK‏ بتعزيز الفسفرة المؤكسدة في المتقدرات؛ ويزيد إنتاج الأكسجين النشط ‎active‏

‎PDH ‏بالتالي» تنشيط‎ .cancer cells ‏والذي سيحفز القتل المبرمج لخلايا السرطان‎ « OXygen

‏بواسطة تثبيط ‎PDHK‏ مفيد في علاج الأمراض ‎cancerous diseases dul ull‏ (مثال؛

‏وثيقة ليست براءة اختراع ‎(YY)‏

‏يتسم فرط ضغط الدم الرثوي ‎Pulmonary hypertension‏ بارتفاع ضغط ‎high blood ail‏ ‎٠‏ 6 بواسطة التضييق الفراغي للشريان الرئوي ‎partial narrowing of the‏

‎pulmonary artery‏ بسبب تكاثر الخلايا ‎cell proliferation‏ المعزز فيه. في فرط ضغط الدم

‏الرثوي؛ بالتالي؛ يتوقع أن يقوم تتشيط ‎PDH‏ في خلية الشريان الرئوي ‎pulmonary artery cell‏

‏بتعزز الفسفرة المؤكسدة في المتقدرات؛ ويزيد إنتاج الأكسجين النشط»؛ ويحفز القتل المبرمج لخلايا

‎ه١‎

—y— ‏بحيث يكون مفيد‎ PDHK ‏بواسطة تثبيط‎ PDH ‏تنشيط‎ of ‏الشريان الرئوي. بالتالي؛ يتم اعتبار‎ (YY ‏لعلاج فرط ضغط الدم الرثوي (مثال؛ وثيقة ليست براءة اختراع‎ ‏يقل إنتاج الطاقة وأيض الجلوكوز في المخ في مرض ألزهايمر؛ وأيضا؛ يتلاشى نشاط نشاط‎ ‏لإنتاج‎ CoA ‏يقل إنتاج أسيتيل 00/8. يتم استخدام أسيتيل‎ (PDH ‏عندما يتلاشى نشاط‎ PDH

CoA ‏أيضاء يكون أسيتيل‎ .01010 acid ‏في نظام نقل الإلكترون عبر حلقة حمض سيتريك‎ ATP © ‏المرسلات‎ saa) ‏؛ والتي هي‎ acetylcholine ‏عبارة عن مادة بادئة لتخليق أسيتيل كولين‎ ‏الدماغي المخفض في مرض‎ PDH ‏بالتالي؛ يتم اعتبار نشاط‎ .neurotransmitters ‏العصبية‎ ‏علاوة على ذلك؛ سيتم‎ JATP ‏بسبب نقص إنتاج‎ WAN ‏ألزهايمر على أنه يسبب الموت العصبي‎ ‏؛ قد‎ cholinergic nerve ‏اعتبار أن تخليق أسيتيل كولين؛ والتي هي المرسل للعصب الكوليني‎ ‏في الدماغ لتحسين إنتاج الطاقة‎ PDH ‏تتم تثبيطه لتحفيز تدهور الذاكرة وما شابه. يتوقع تنشيط‎ ٠ ‏بواسطة تثبيط‎ PDH ‏وتخليق أسيتيل كولين في مرض ألزهايمر. بالتالي؛ يتم اعتبار تنشيط‎ (YE YY ‏وثائق ليست براءات اختراع‎ (JB) ‏على أنه مفيد لعلاج مرض ألزهايمر‎ PDHK ‏؛ الذي هو عبارة عن عقار‎ dichloroacetic acid ‏تم توضيح أن حمض داي كلورو أسيتيك‎ myocardial ‏يعطي أثر واحد لعلاج السكريء إقفار عضلة القلب‎ (PDH ‏يتضمن أثر تنشيط‎ « angina pectoris ‏؛ الخناق الصدري‎ myocardial infarction ‏الذبحة القلبية‎ « ischemia Vo « hyperlactacidemia ‏؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم‎ cardiac failure ‏قصور القلب‎ ‏؛ انسداد الشرايين‎ cerebral apoplexy ‏؛ السكتة الدماغية‎ brain ischemia ‏إقفار الدماغ‎ chronic obstructive ‏الداء الرئوي المسد المزمن‎ « peripheral arterial disease ‏المترقي‎ ‏وفرط ضغط الدم‎ « cancerous disease ‏الأمراض السرطانية‎ » pulmonary disease

YY ‏مك حت‎ YY ‏تبت‎ ٠ ‏وثائق ليست براءات اختراع‎ (JB) ‏الرئوي‎ ٠ ‏على أنه مفيد للوقاية من أو علاج أمراض تتعلق‎ PDHK ‏من النتائج السابقة؛ يتم اعتبار متبط‎ ‏باضطراب استخدام الجلوكوز؛ مثلا؛ السكري (السكري من النوع ١؛ السكري من النوع ؟ إلخ.)؛‎ ‏متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك‎ ‏مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال‎ (all ‏في‎ ‏على أنه مفيد في‎ PDHK ‏الكلية السكري؛ اعتام العين إلخ.). علاوة على ذلك؛ يتم اعتبار متبط‎ Yo ه١‎

‎A —_‏ _ الوقاية من أو علاج أمراض ناتجة بواسطة التوفير المحدود لركيزة الطاقة إلى الأنسجة؛ مثلا؛ قصور القلب (قصو حاد في القلب ¢ ‎gad‏ ر مزمن في القلب) ‘ ‎Died‏ عضلة القلب إقفار عضلة ‎ca lal)‏ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرثوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ والسكتة الدماغية. © بالتالي؛ يتم اعتبار مثبط ‎PDHK‏ على أنه مفيد لعلاج أو الوقاية من السكري (السكري من النوع ‎٠‏ السكري من النوع 7 إلخ.)؛ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم ¢ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري » ‎Diet‏ الكلية السكري اعتام العين إلخ. ( قصور القلب (قصور حاد في القلب 3 قصور مزمن في القلب) 3 أعتلال عضلة القلب؛ إقفار عضلة القلب 3 الذبحة القلبية؛ الخناق ‏أ الصدري؛ ارتفاع الد هون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط الدم الرثوي أو مرض ألزهايمر. قائمة الوثائق وثائق ليست براءات اختراع ‎Reed LJ, Hackert ML. Structure-function :١ ‏وثقة ليست براءة اختراع‎ ١ relationships in dihydrolipoamide acyltransferases. J Biol Chem. 1990 Jun 5;265(16):8971-4.

Patel MS, Roche TE. Molecular biology and :Y ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ biochemistry of pyruvate dehydrogenase complexes. FASEB J. 1990 Nov; ‎4(14):3224-33. ٠

Sugden MC, Holness MJ. Recent advances in ‏وثيقة ليست براءة اختراع ؟:‎ mechanisms regulating glucose oxidation at the level of the pyruvate dehydrogenase complex by PDKs. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2003

May; 284(5):E855-62. ‎ه١‎

_ q —_

Bowker—Kinley MM, Davis WI, Wu P, Harris RA, ‏وثيقة ليست براءة اختراع ؛:‎

Popov KM. Evidence for existence of tissue-specific regulation of the mammalian pyruvate dehydrogenase complex. Biochem J. 1998 Jan 1; 329 (Pt 1):191-6.

Kim JW, Tchernyshyov I, Semenza GL, Dang CV. :0 ‏ليست براءة اختراع‎ dai, ©

HIF-1-mediated expression of pyruvate dehydrogenase kinase: a metabolic switch required for cellular adaptation to hypoxia. Cell Metab. 2006 Mar; 3(3):177-85.

Morino K, Petersen KF, Dufour S, Befroy ‏,نا‎ Frattini ‏وثيقة ليست براءة اختراع د:‎

J, Shatzkes N, et al. Reduced mitochondrial density and increased IRS-1 ٠٠ serine phosphorylation in muscle of insulin-resistant offspring of type 2 diabetic parents. J Clin Invest. 2005 Dec; 115(12):3587-93.

Caterson ID, Fuller SJ, Randle PJ. Effect of the fatty :١ ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ acid oxidation inhibitor 2-tetradecylglycidic acid on pyruvate dehydrogenase complex activity in starved and alloxan -diabetic rats. Yo

Biochem J. 1982 Oct 15; 208(1):53-60.

Boden G, Chen X, Stein TP. Gluconeogenesis 10 :A ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ moderately and severely hyperglycemic patients with type 2 diabetes mellitus. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2001 Jan; 280(1):E23-30.

Shangraw RE, Fisher DM. Pharmacokinetics and :4 ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ ٠ pharmacodynamics of dichloroacetate in patients with cirrhosis.Clin

Pharmacol Ther. 1999 Oct; 66(4):380-90. ه١‎

-١ «=

Stacpoole PW, Moore GW, Kornhauser DM. :٠١ ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

Metabolic effects of dichloroacetate in patients with diabetes mellitus and hyperlipoproteinemia. N Engl J Med. 1978 Mar 9; 298(10):526-30.

Mayers RM, Leighton B, Kilgour E. PDH kinase :1١ ‏ليست براءة اختراع‎ 488 inhibitors: a novel therapy for Type ١١ diabetes? Biochem Soc Trans. 2005 ©

Apr; 33(Pt 2):367-70.

Jeoung NH, Rahimi Y, Wu P, Lee WN, Harris RA. :\Y ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

Fasting induces ketoacidosis and hypothermia in PDHK2 /PDHK4-double— knockout mice. Biochem J. 2012 May 1; 443(3):829-39.

Zhou YP, Berggren PO, Grill V. A fatty acid— :١١ ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ ٠ induced decrease in pyruvate dehydrogenase activity is an important determinant of beta-cell dysfunction in the obese diabetic db/db mouse.

Diabetes. 1996 May; 45(5):580-6.

Xu J, Han J, Epstein PN, Liu YQ. Regulation of :١6 ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

PDK mRNA by high fatty acid and glucose in pancreatic islets. Biochem \o

Biophys Res Commun. 2006 Jun 9; 344(3):827-33.

Benfotiamine. Monograph. Altern Med Rev. 2006 :١١ ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

Sep; 11(3):238-42.

Vallianou N, Evangelopoulos A, Koutalas P. V7 ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

Alpha-lipoic Acid and diabetic neuropathy. Rev Diabet Stud. 2009 Winter; ٠ 6(4):230-6. ه١‎

_ \ \ —_

Ussher JR, Lopaschuk GD. The malonyl CoA axis :VV ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ as a potential target for treating ischaemic heart disease. Cardiovasc Res. 2008 Jul 15; 79(2):259-68.

Wargovich TJ, MacDonald RG, Hill JA, Feldman :YA ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

RL, Stacpoole PW, Pepine CJ. Myocardial metabolic and hemodynamic © effects of dichloroacetate in coronary artery disease. Am J Cardiol. 1988

Jan 1; 61(1):65-70.

Taniguchi M, Wilson C, Hunter CA, Pehowich DJ, :%4 ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

Clanachan AS, Lopaschuk GD. Dichloroacetate improves cardiac ischemia independent of changes in mitochondrial proton efficiency ٠ leak. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2001 Apr; 280(4):H1762-9.

Stacpoole PW, Nagaraja NV, Hutson AD. Efficacy :¥. ‏ليست براءة اختراع‎ 488 of dichloroacetate as a lactate—lowering drug. J Clin Pharmacol. 2003 Jul; 43(7):683-91.

Bonnet 5, Archer SL, Allalunis—Turner J, Haromy :¥\ ‏وثقة ليست براءة اختراع‎ ٠

A, Beaulieu C, Thompson R, et al. A mitochondria—K+ channel axis is suppressed in cancer and its normalization promotes apoptosis and inhibits cancer growth. Cancer Cell. 2007 Jan; 11(1):37-51.

McMurtry MS, Bonnet 5, Wu X, Dyck JR, Haromy : 7 ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

A, Hashimoto ‏,كا‎ et al. Dichloroacetate prevents and reverses pulmonary ٠ hypertension by inducing pulmonary artery smooth muscle cell apoptosis.

Circ Res. 2004 Oct 15; 95(8):830-40. ه١‎

_ \ \ —_

Saxena U. Bioenergetics breakdown in Alzheimer's :¥Y ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ disease: targets for new therapies. Int J Physiol Pathophysiol Pharmacol. 2011; 3(2):133-9.

Marangos PJ, Turkel CC, Dziewanowska ZE, Fox :Yo ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎

AW. Dichloroacetate and cerebral ischaemia therapeutics. Expert Opin

Investig Drugs. 1999 Apr; 8(4):373-82.

Calvert LD, Shelley R, Singh SJ, Greenhaff PL, : ‏وثيقة ليست براءة اختراع‎ ٠

Bankart J, Morgan MD, et al. Dichloroacetate enhances performance and reduces blood lactate during maximal cycle exercise in chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 2008 May 15; 177(10):1090-4.

Flavin DF. Non-Hodgkin’s Lymphoma Reversal :YV ‏وثقة ليست براءة اختراع‎ Vo with Dichloroacetate. J Oncol. Hindawi Publishing Corporation Journal of

Oncology, Volume 2010, Article ID 414726, 4 pages doi:10.1155/2010/414726. ‏الوصف العام للاختراع‎ ‎Ye‏ الاختراع الحالي هو كما يلي. ‎]١[‏ مركب ممثل بواسطة الصيغة ]1 ‎CER!

HOE. US

Co,

HG M_ ‏ا‎ Py

Heo 8 ‏ل‎ ‎HG pa SY

Np ‏اك‎ ‎© NA x7

RE fox Ton

Fk ١ ‏ل ّآ‎ al ‏أو‎ ١ ‏عبارة عن‎ ro (Ala ‏أو ملح مقبول صيدلانيا‎ ‏مركب ممثل بواسطة الصيغة:‎ [Y] lo} lo}

H.C

Hye Ay 3 Hy ‏عم‎ N H.C N 3 1 ‏يغ‎ 3 1 “N

H,C OH : Hic OH we Lr 3 3

ALS

Foy Fo: H,0

A" OH ‏7ج‎ oH 2

FF F

(ny ‏ه (طاا)‎ 1] ‏الممثل بواسطة الصيغة‎ ([V] ‏[؟] المركب وفقا لما سبق‎ oO 1

HO LH

PUTA,

HG ‏ع‎ 1 <n

WH

He PH ;

HC ‏ا‎ |ّ FEN, Fa ‏أ :0 الحم‎ A oA NS

Fol

A OH

Fr 0

_— ¢ \ _ ]£[ المركب وفقا لما سبق ‎[VY]‏ الممثل بواسطة الصيغة ‎[Ih]‏ ‏1 ‏ ‎Lv AN‏ ‎H, xT TNH‏ ‎HC | H‏ ‎N‏ ع« ‎oo‏ ‎(Wi‏ ‎ne, PH J‏ ‎FN din‏ اي ابي ‎HG‏ ‏م 0 ‎Nga, i‏ ‎Pay‏ لاس ‎Foo‏ ‎OH «HOD‏ 232 ‎FL‏ ‎EB‏ ‎{lih}‏ ‏]©[ مركب ممثل بواسطة الصيغة ‎IN]‏ ‏3 ‎HC BN‏ ‎SS NH,‏ ‎HE ON‏ ‎N‏ 1 ‎Wo‏ ‎HC - / J‏ ‎Hey NENT =‏ ‎HO ote.

FN uz‏ نم مي ‎Nea‏ ‎Fo‏ ‎A oH‏ ‎F‏ ‎{ly‏ ‏3[ ‏0 [1] تركيبة صيدلانية تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء وناقل مقبول صيدلانياء ‎[V]‏ متبط ‎PDHK‏ تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها ‎[A]‏ متبط 0014/41 تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا ‎١٠‏ منها ‎FRE‏

اج \ — ]4[ مثبط ‎PDHK2‏ تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها ‎]٠١[‏ عامل خافض لسكر الدم تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها ¢ ‎[VV] 0‏ عامل خافض لحمض لاكتيك تتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها 3 ‎[VY]‏ عامل للوقاية من أو علاج السكري؛ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم ‎Uae‏ فرط حمض لاكتيك في الدم » مضاعفات مرض السكري قصور القلب ‎Died‏ عضلة القلب 3 إقفار عضلة القلب 3 الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفا ع الدهون في الدم؛ أ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن»؛ إقفار ‎of Leal‏ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري, السرطان أو فرط ضغط الدم الرثوي؛ الذي يتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها ¢ ‎[VY]‏ عامل للوقاية من أو علاج السكري؛ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض ‎Yo‏ فرط السكر في الدم ‎Uae‏ فرط حمض لاكتيك في الدم ¢ مضاعفات مرض السكري قصور القلب؛ ‎Died‏ عضلة ‎cla)‏ إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ‎la)‏ ع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرثوي المسد المزمن 3 إقفار الدماغ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط ‎pall‏ الرثوي أو مرض ألزهايمر؛ الذي يتضمن المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ ‎Yo‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء ‎[VY]‏ العامل الوقائي أو العلاجي وفقا لما سبق ‎[VY]‏ حيث السكري ‎is‏ السكري من النوع ‎١‏ أو السكري من النوع ل ‎CARY‏

‎]٠[‏ العامل الوقائي أو العلاجي وفقا لما سبق ‎[VY]‏ حيث يتم اختيار مضاعفات مرض السكري

‏من المجموعة التي تتكون من الاعتلال العصبي السكري » اعتلال الشبكية السكري « ‎Died‏ الكلية

‏واعتام العين السكري؛

‎[V0]‏ العامل الوقائي أو العلاجي وفقا لما سبق ‎[VY]‏ حيث قصور القلب 5أ قصور حاد في القلب

‏أو قصور مزمن في القلب؛

‏]11[ تركيبة صيدلانية تتضمن

‏(أ) المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء و

‏(ب) علاج واحد ‎AT‏ على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي

‏تتكون من السكري (السكري من النوع 3 السكري من النوع ‎Af‏ ( » متلازمة مقاومة الإنسولين ‘ ‎>٠٠‏ مثلازمة أيضية ‎٠‏ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎pall‏ مضاعفات

‏مرض السكري(الاعتلال العصبي السكري » اعتلال الشبكية السكري » اعتلال الكلية السكري اعتام

‏العين) قصور القلب (قصور حاد في القلب ¢ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة ‎call‏

‏إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛

‏انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع. الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماخ؛ السكتة ‎Vo‏ الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماخ والعضل المتقدري؛ السرطان وفرط ضغط الدم

‏الرثوي ‘

‏]11[ تركيبة صيدلانية تتضمن

‏(ب) علاج واحد آخر على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي ‎Yo‏ تتكون من السكري (السكري من النوع 3 السكري من النوع ‎Af‏ ( » متلازمة مقاومة الإنسولين ‘

‏متلازمة أيضية ‎٠‏ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎pall‏ مضاعفات

‎oy

إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماخ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط الدم ‎sh)‏ ‏ومرض ألزهايمر؛ ‎[VY] ١‏ توليفة عقار تتضمن (أ) المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء و (ب) علاج واحد آخر على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي تتكون من السكري (السكري من النوع 3 السكري من النوع أ ( متلازمة مقاومة الإنسولين متلازمة أيضية ‎٠‏ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎pall‏ مضاعفات أ مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري » ‎Ded‏ الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري اعتام العين) قصور القلب (قصور حاد في القلب ¢ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة ‎call‏ ‏إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماخ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان وفرط ضغط الدم ‎Vo‏ الرئويء التي يتم إعطاؤها بشكل متزامن أو منفصل أو مستمر. ‎[VV]‏ توليفة عار تتضمن (أ) المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء و (ب) علاج واحد آخر على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي تتكون من السكري (السكري من النوع 3 السكري من النوع أ ( متلازمة مقاومة الإنسولين ‎٠‏ متثلازمة أيضية مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري » ‎Ded‏ الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري اعتام العين) قصور القلب (قصور حاد في القلب ¢ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة ‎call‏ ‏إقفار عضلة القلب 3 الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفا ع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرثئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ؛ السكتة ١ه‏

-م١-‏ الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط الدم الرئوي ومرض ألزهايمر؛ التي يتم إعطاؤها بشكل متزامن أو منفصل أو مستمر. ‎[VA]‏ طريقة تثبيط ‎PDHK‏ في كائن ثديي؛ تتضمن إعطاء كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛ ‎[V4] ©‏ طريقة تثبيط 0014/41 في كائن ‎of‏ تتضمن إعطاء كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛ ‎]٠١[‏ طريقة تثبيط 0014/42 في كائن ثديي؛ تتضمن إعطاء كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛ ‎[YY]‏ طريقة للوقاية من أو علاج السكري (السكري من النوع ) السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة ‎٠‏ مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎call‏ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري؛ اعتام العين)؛ قصور القلب (قصور حاد في القلب؛ قصور مزمن في القلب)؛ أعتلال عضلة ‎(lal‏ إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد ‎Cadel)‏ إقفار ‎Vo‏ الدماخ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان أو فرط ضغط الدم الرئوي في كائن ثديي؛ تتضمن إعطاء كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [5]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن ‎OSA ofl‏ ‎[YY]‏ طريقة للوقاية من أو علاج السكري (السكري من النوع ١؛‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎٠‏ الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري؛ اعتام العين)؛ قصور القلب (قصور حاد في القلب؛ قصور مزمن في القلب)؛ أعتلال عضلة ‎(lal‏ إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد ‎Cadel)‏ إقفار ‎of Lal‏ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ‎CARY‏

‎q —_‏ \ _ ضغط الدم الرئوي أو مرض ألزهايمر في كائن ثديي؛ تتضمن إعطاء كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛ ‎[YY]‏ طريقة تقليل مستوى جلوكوز الدم في كاثن ‎(oS‏ تتضمن | ‎Uae‏ ¢ كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛ ‎[YY] 5‏ طريقة تقليل مستوى اللاكتات في كاثن ‎(ad‏ تتضمن إعطا ءِِ كمية فعالة علاجيا من المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها إلى الكائن الثديي المذكور؛

[7] استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [5]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج مثبط ‎«PDHK‏ ‎[Yo]‏ استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج مثبط ‎«PDHK1 ٠‏

[17] استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [5]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج مثبط 2ط ‎[YY]‏ استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج عامل خفض مستوى جلوكوز الدم ‎[YA] V0‏ استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى ]0[ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج عامل خفض لاكتات الدم؛ ]4[ استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج ‎a‏ ‏عامل وقائي أو علاجي للسكري (السكري من النوع ١؛‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ ‎٠‏ | مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري » ‎Died‏ الشبكية السكري » ‎ied‏ الكلية السكري اعتام العين) ¢ قصور القلب (قصور حاد في القلب ‎٠‏ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة القلب إقفار عضلة القلب الذبحة ‎canal)‏ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن»؛ ‎la)‏

=« \ — الدماخ» السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري السرطان أو فرط ضغط الدم الرثوي؛ ]774[ استخدام المركب وفقا لأي مما سبق ‎]١[‏ إلى [*]؛ أو ملح مقبول صيدلانيا منها لإنتاج ‎a‏ ‏عامل وقائي أو علاجي للسكري (السكري من النوع ١؛‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة 0 الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري » ‎Died‏ الشبكية السكري » ‎ied‏ الكلية السكري اعتام العين) ¢ قصور القلب (قصور حاد في القلب ‎٠‏ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة القلب ‘ إقفار عضلة القلب ‘ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن»؛ ‎la)‏ ‎A‏ الدماغ؛ ‎PRC‏ الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط الدم الرثوي أو مرض ألزهايمر ¢ ‎]3١[‏ الاستخدام وفقا لأي مما سبق ‎[YE]‏ إلى ‎[YA]‏ في توليفة مع علاج واحد ‎AT‏ على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي تتكون من السكري (السكري من النوع ‎٠‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في ‎Yo‏ الدم ¢ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري » ‎Diet‏ الكلية السكري اعتام العين) قصور القلب (قصور حاد في القلب؛ قصور مزمن في القلب) 3 ‎Died‏ عضلة القلب 3 إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الد هون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن» إقفار ‎of Lead)‏ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ ‎A)‏ والعضل المتقدري السرطان وفرط ضغط الدم الرثوي 6و [3”] الاستخدام وفقا لأي مما سبق ‎[VE]‏ إلى ‎YA]‏ في توليفة مع علاج واحد ‎HAT‏ على الأقل فعال للوقاية من أو علاج مرض تم اختياره من المجموعة التي تتكون من السكري (السكري من النوع ‎٠‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في الدم ¢ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛ ‎Yo‏ اعتلال الشبكية السكري » اعتلال الكلية السكري اعتام العين) قصور القلب (قصور حاد في ‎ARS‏

— \ \ — القلب؛ قصور مزمن في القلب) 3 ‎Died‏ عضلة القلب 3 إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الد هون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ ‎cla pull‏ فرط ضغط الدم الرثوي ومرض ألزهايمر؛ وما شابه. أثر الاختراع يقوم مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها بتثبيط نشاط 00111/6؛ وهو مفيد كعامل علاجي أو وقائي للسكري (السكري من النوع ١؛‏ السكري من النوع ‎oY‏ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية ‎٠‏ مرض فرط السكر في الدم؛ مرض فرط حمض لاكتيك في ‎pall‏ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري » ‎Ded‏ الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري اعتام ‎Ye‏ العين) قصور القلب (قصور حاد في القلب ¢ قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة ‎call‏ ‏إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ الداء الرثوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط ‎pall‏ الرثوي أو مرض ألزهايمر؛ وما شابه. ‎VO‏ شرح مختصر للرسومات الشكل ‎١‏ يبين أثر مركبات اختبارية على نشاط ‎PDH‏ في الكبد (نسبة نشاط ‎PDH‏ في الكبد النشط إلى إجمالي نشاط ‎PDH‏ في الكبد) في جرذان ‎SD(IGS)‏ غير صائمة (متوسط + اتحراف معياري (0-3)). الشكل ؟ يبين أثر مركبات اختبارية على نشاط ‎PDH‏ في نسيج أديبوز (نسبة نشاط ‎PDH‏ في ‎Yo‏ نسيج أديبوز النشط إلى نشاط ‎PDH‏ الكلي في نسيج أديبوز ‎(adipose tissue‏ في جرذان ‎SD(IGS)‏ غير صائمة (متوسط + انحراف معياري (0-3)). الوصف ‎١‏ لتفصيلي: تم شرح الاختراع الحالي بالتفصيل ‎lad‏ يلي. ‎CARS‏

مركب الاختراع الحالي عبارة عن مركب ممثل بواسطة الصيغة [ا]: 0 ‎HE A‏ ‎NH,‏ أ ‎HO N .‏ 0 ‎a‏ ع ‎EAN f= a)‏ ‎NA NJ‏ ا ‎a om‏ ‎PY‏ ‎Fg‏ ‏}1{ ‎JUN‏ عبارة عن ‎١‏ أو ؛ (المشار إليه فيما يلي أيضا بمركب (١))؛‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منها. © مركب الاختراع الحالي عبارة عن مركب ممثل بواسطة الصيغة ]1 ‎He ~~ 0‏ ‎NH,‏ اي :. عبن 0 رأ ال ‎OH‏ عي لهسلا ~~ ‎HE Nn‏ ‎CHENG A WW‏ ‎F al OH‏ ‎Fr‏ ‎{l)‏ ‎Spam d= (RAFT)‏ -7-(7-هيدروكسي ‎ar T=‏ بيوتيل ‎(nS‏ -(تراي فلورو ‎cyst HA (Je‏ -؛ -يل]-11-بيرازول-١-يل)-7-ميثيل‏ بروبان أميد) (المشار إليه أيضا فيما يلي بمركب )7( ‎٠‏ - مركب الاختراع الحالي عبارة عن مركب ممثل بواسطة الصيغة ‎:]1!١[‏ ‎ATS‏ o

Ha ‏الي‎ NH,

HE 0 8 ‏ال‎ ‎HG 88 ‏ال‎ ‎HC em ‏ل‎ \ or > ‏و تب‎

Fo ‏وير بيو“‎ ‏ع‎ ‏(اا)‎ ‎(2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—-(3-hydroxy-3-methylbutyloxy)-9-) ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2- ((hY) ‏(المشار إليه أيضا فيما يلي بمركب‎ (methylpropanamide monohydrate [IN] ‏مركب الاختراع الحالي عبارة عن مركب ممثل بواسطة الصيغة‎ © ‏ب‎ ‏ااه‎ ‎oY NH,

HE =.N 8 hy wo 8

He ETN ‏ا‎ 5 ae \

HG oN ‏تر ال‎

F x Vou

FE

00 (2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—-(4-hydroxy-4-methylpentyloxy)-9- (trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2- (7) ‏(المشار إليه أيضا فيما يلي بمركب‎ (methylpropanamide ‎٠‏ يمكن أن يكون الملح المقبول صيدلانيا من مركب الاختراع الحالي عبارة عن أي ملح طالما أنه ‎inorganic acids‏ ؛ أملاح مع أحماض عضوية ‎«organic acids‏ أملاح ذات أحماض أمينية ‎amino acids‏ وما شابه. ‏ال

— ¢ \ — تتضمن أمثلة الملح مع حمض غير عضوي ملح مع حمض هيدروكلوريك ‎hydrochloric acid‏ ‎٠‏ حمض نيتريك ‎acid‏ 01016 ؛ حمض كبريتيك ‎sulfuric acid‏ » حمض فوسفوريك ‎phosphoric acid‏ ء حمض هيدروبروميك ‎hydrobromic acid‏ وما شابه. تتضمن أمثلة الملح مع الحمض العضوي أملاح مع حمض أوكساليك ‎oxalic acid‏ ؛ حمض © ماليك ‎maleic acid‏ ؛ حمض سيتريك ‎«citric acid‏ حمض فيوماريك ‎fumaric acid‏ » حمض لاكتيك ‎lactic acid‏ ¢ حمض ‎dll‏ حمض سكسينيك ‎succinic acid‏ ؛ حمض طرطريك ‎«tartaric acid‏ حمض أسيتيك ‎acetic acid‏ ؛ حمض تراي فلورو أسيتيك ‎trifluoroacetic‏ ‏0 ؛ حمض جلوكونيك ‎gluconic acid‏ ؛ حمض أسكوربيك ‎ascorbic acid‏ حمض ميثان سلفونيك ‎methanesulfonic acid‏ ؛ حمض بنزين سلفونيك ‎benzenesulfonic acid‏ « ‎Vo‏ حمض ح-تولوين سلفونيك ‎p—toluenesulfonic acid‏ وما شابه. تتضمن أمثلة الملح مع الحمض الأميني أملاح مع ليسين وأرجنين وحمض أسبارتيك وجلوتاميك وما شابه. ملح مقبول صيدلانيا من مركب الاختراع الحالي بشكل مفضل عبارة عن ملح مع حمض غير ‎١‏ علاوة على ذلك؛ يمكن ترقيم مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها بنظير (مثال؛ ‎«14C 3H‏ 355 إلخ.). حيث يفضل أن يكون مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء مركب ‎)١(‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء كل منها منقى بشكل أساسي. بشكل أكثر تفضيلا عبارة عن مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء تتم تنقية كل منها إلى درجة نقاء لا تقل عن ‎oA‏ ‎٠‏ يمكن أن يتواجد مركب الصيغة [ا] أو ملح مقبول صيدلانيا منها كذوابة. يشير المصطلح 'ذوابة" إلى مركب الصيغة ‎[I]‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منها والتي يرتبط بها جزيء مذيب؛ وأيضا تتضمن هيدرات ‎hydrate‏ هذه الذويات بشكل مفضل عبارة عن ذوابات مقبولة صيدلانيا. هذه الذوبات تتضمن » مثلاء هيدرات ذوابة (يثانول ‎ethanol‏ « ذوابة د اي ميتيلل سلفوكسيد ‎dihydrochloride‏ وما شابه من مركب الصيغة [ا] أو ملح مقبول صيدلانيا منها. تتضمن ١ه‏

ه0١"‏ الأمثلة المحددة ذوابة نصف هيدرات ‎hemihydrate‏ ؛ مونو هيدرات ‎monohydrate‏ « داي هيدرات ‎dihydrate‏ أو مونو ‎mono‏ (إيثانول ‎(ethanol‏ من مركب الصيغة ‎[I]‏ أو مونو هيدرات من مركب الصيغة [ا]؛ ذوابة 7/؟(إيثانول) من دايهيدروكلوريد ‎dihydrochloride‏ منها وما شابه. يمكن إنتاج هذه الذوابات وفقا لطرق تقليدية. © تتضمن أمثلة 'تركيبة صيدلانية” مستحضرات فمية ‎Jie‏ قرص؛ كبسول؛ حبيبة؛ مسحوق؛ حبة؛

شراب ‎Syrup‏ ؛ مستحلب ‎emulsion‏ ؛ معلق ‎suspension‏ وما ‎call‏ وعوامل حقن ‎Jie parenteral‏ المستحضرات الخارجية؛ التحاميل ‎suppository‏ ؛ الحقن ‎injection‏ ¢ قطرات العين ‎drop‏ 6لا ؛ مستحضرات الأنف ‎nasal preparation‏ » المستحضرات الرثوية ‎pulmonary preparation‏ وما شابه.

يتم إنتاج التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي وفقا لطريقة معروفة بعينها في المجال خاصة بمستحضر صيدلاني؛ بواسطة خلط مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها مع كمية مناسبة من نوع واحد على الأقل من ناقل مقبول صيدلانيا وما شابه حسب الحاجة. في حين يختلف محتوى مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها في التركيبة الصيدلانية على أساس صورة الجرعة؛ وحجم الجرعة وما شابه؛ يكون؛ ‎١.١ lie‏ إلى ‎٠٠١‏ 96 بالوزن من التركيبة

‎yo‏ الكلية. تتضمن أمثلة "ناقل مقبول صيدلانيا” مواد عضوية أو غير عضوية مختلفة تستخدم بشكل تقليدي كمواد تحضير»؛ مثلا؛ سواغ ‎excipient‏ ؛ مفتت ‎disintegrant‏ ؛ مادة ربط ‎binder‏ ؛ مادة ‎aaa‏ ‎fluidizer‏ ؛ مزلق ‎lubricant‏ وما شابه للمستحضرات الصلبة ‎solid‏ ؛ ‎solvent cules‏ » عامل حل ‎solubilizing agent‏ ؛ عامل تعليق ‎suspending agent‏ « عامل مساواة توتر

‎isotonicity agent ٠٠‏ « عامل تنظيم ‎buffering agent‏ ؛ عامل تسكين ‎soothing agent‏ وما شابه للمستحضرات السائلة. عند ‎yy pall‏ علاوة على ذلك؛ يتم استخدام المواد المضافة مثل المواد الحافظة ‎preservative‏ ؛ مضادات الأكسدة ‎antioxidant‏ ؛ مواد إكساب اللون ‎colorant‏ « عوامل التحلية ‎sweetening agent‏ وما شابه.

‎ه١‎

— أ \ —

تتضمن أمثلة "السواخ” لاكتوز ‎lactose‏ ؛ سكروز ‎lactose‏ « 0-مانيتول ‎D-mannitol‏ ,«

‎Las ¢ cornstarch J giv sD‏ الذرة ‎dextrin‏ ؛ دكسترين ‎dextrin‏ ؛ سيليلوز بلورى دقيق

‎microcrystalline cellulose‏ « سيليلوز بلوري»؛ كارميلوز ‎carmellose‏ ؛ كارميلوز كالسيوم

‎« sodium carboxymethyl starch ‏نشا كربوكسي ميثيل صوديوم‎ « carmellose calcium gum ‏منخفض الاستبدال؛ لبان عربى‎ hydroxypropylcellulose ‏هيدروكسى بروبيل سيليلوز‎ ©

‎arabic‏ وما شابه.

‏تتضمن أمثلة "المفتت ‎disintegrant‏ كارميلوز» كارميلوز كالسيوم»؛ كارميلوز صوديوم

‎croscarmellose sodium‏ ؛ نشا كربوكسي ميثيل صوديوم؛ كروزكارميلوز صوديوم

‎croscarmellose sodium‏ ؛ كروسبوفيدون ‎crospovidone‏ ؛ هيدروكسى بروبيل سيليلوز

‎Vo‏ منخفض الاستبدال؛ هيدروكسي بروبيل ميثيل سيليلوز؛ سيليلوز بلوري وما شابه. تتضمن أمثلة 'مادة الربط ‎binder‏ " هيدروكسى بروبيل سيليلوز هيدروكسى بروبيل ميثيل سيليلوز» بوفيدون ‎povidone‏ ؛ سيليلوز بلورى ‎crystalline cellulose‏ « سكروز ‎sucrose‏ ¢ دكسترين ‎dextrin‏ » نشاء جيلاتين ‎gelatin‏ « كارميلوز صوديوم؛ لبان عربي وما شابه. تتضمن أمثلة 'مادة التمييع " حمض ساليسيك لامائي خفيف ‎light anhydrous silicic acid‏ ؛

‎Veo‏ ستيرات مغنيسيوم ‎magnesium stearate‏ وما شابه. تتضمن أمثلة "المزلق ‎lubricant‏ " ستيرات مغنيسيوم ‎magnesium stearate‏ ؛ ستيرات كالسيوم ‎calcium stearate‏ ؛ ‎talc‏ وما شابه. تتضمن أمثلة 'مذيب ‎solvent‏ " ماء نقى» إيثانول ‎ethanol‏ ؛ بروبيلين جليكول ‎propylene‏ ‎glycol‏ ؛ ماكروجول ‎Macrogol‏ ؛ زيت سمسم؛ زيت ذرة؛ زيت زيتون وما شابه.

‎« propylene glycol ‏بروبيلين جليكول‎ " solubilizing agents ‏تتضمن أمثلة "عوامل الحل‎ ٠ ‏؛ إيثانول» تراى إيثانول أمين‎ benzyl benzoate ‏؛ بنزيل بنزوات‎ mannitol ‏0-مانيتول‎ ‎sodium ‏؛ سيترات صوديوم‎ sodium carbonate ‏؛ كربونات صوديوم‎ triethanolamine ‏شابه.‎ Ly citrate

‎ه١‎

تتضمن أمثلة "عامل التعليق" كلوريد بنزالكونيوم ‎benzalkonium chloride‏ « كارميلوز ‎carmellose‏ « هيدروكسي بروبيل سيليلوز ‎hydroxypropylcellulose‏ ؛ بروبيلين جليكول ‎propylene glycol‏ ؛ بوفيدون ‎povidone‏ ؛ ميثيل سيليلوز ‎methylcellulose‏ ؛ جليسرول مونوستيرات ‎glycerol monostearate‏ وما شابه.

0 تتضمن أمثلة "العامل الصنوي ‎isotonic agent‏ " الجلوكوزء نا-سوربيتولا5010510 .ء كلوريد صوديوم ‎sodium chloride‏ ؛ لا-مانيتول وما شابه. تتضمن أمثلة "عامل التتظيم ‎"buffering agent‏ صوديوم هيدروجين فوسفات ‎sodium‏ ‎hydrogenphosphate‏ ؛ أسيتات صوديوم ‎sodium acetate‏ ؛ كربونات صوديوم ‎sodium‏ ‏06 ؛ سيترات صوديوم ‎sodium citrate‏ وما شابه.

‎٠‏ تتضمن أمثلة "عامل التسكين ‎soothing agent‏ " كحول بنزيلي ‎benzyl alcohol‏ وما شابه. تتضمن أمثلة "المواد الحافظة ‎preservative‏ إيثيل بارا هيدروكسي بنزوات ‎ethyl‏ ‎parahydroxybenzoate‏ ؛ كلورو بيوتاتول ‎chlorobutanol‏ ؛ كحول بنزيلي ‎benzyl‏ ‎alcohol‏ ؛ صوديوم ديهيدرو أسيتات ‎sodium dehydroacetate‏ « حمض سوربيك ‎sorbic‏ ‏0 وما شابه.

‎Yo‏ تتضمن أمثلة 'مضادات الأكسدة ‎antioxidant‏ " صوديوم سلفيت ‎sodium sulfite‏ ؛ حمض أسكوربيك ‎ascorbic acid‏ وما شابه. تتضمن أمثلة "مواد إكساب اللون ‎colorant‏ ألوان طعام (مثال؛ لون طعام أحمر رقم ؟ أو ‎OF‏ ‏لون طعام أصفر رقم ؛ أو © إلخ.)» 8]-كاروتين ‎B-carotene‏ وما شابه. تتضمن أمثلة "عوامل التحلية ‎sweetening agent‏ " سكارين صوديوم ‎saccharin sodium‏ «

‎Yo‏ داي بوتاسيوم جليسيريهيزينات ‎«dipotassium glycyrrhizinate‏ أسبارتام ‎aspartame‏ وما شابه. يمكن إعطاء التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي فميا أو بالحقن (مثال» موضعيا ‎topical‏ ‏أو في العضل ‎intramuscular‏ أو تحت الجلد ‎subcutaneous‏ أو عبر المستقيم ‎rectal‏ أو

‎ه١‎

‎A —_‏ \ _ في الوريد إلخ.) للبشر بالإضافة إلى كائنات ثديية أخرى غير البشر (مثال؛ الفأر والجرذ والهامستر والخنزير الغيني والأرنب والقط والكلب والخنزير والبقر والحصان والخروف والقرد إلخ.). تختلف الجرعة على أساس إعطاء الخاضع والمرض والأعراض وصورة الجرعة ومسار الإعطاء وما شابه. ‎Sle‏ تكون الجرعة اليومية بشكل عام للإعطاء الفمي إلى مريض بالغ (وزن الجسم: حوالي 0 10 كجم) بشكل عام في نطاق حوالي ‎١‏ ملجم إلى ‎١‏ جم؛ على أساس مركب ‎)١(‏ كمركب نشط. يمكن إعطاء هذه الكمية في جزء إلى عدة أجزاء. حيث يتضمن مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منه أثر تتثبيطي ل ‎PDHK‏ ‎PDHK)‏ و/أو 00/62)؛ سوف يتم اعتبار أنه من المفيد علاج أو الوقاية من الأمراض المتعلقة ‎(arian‏ استخدام الجلوكوز ‎+٠‏ مثلاء السكري (السكري من النوع 3 السكري من النوع ‎Y‏ ‎٠‏ إلخ.)؛ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في ‎all‏ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم « مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري « ‎Died‏ الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري؛ اعتام العين إلخ.). علاوة على ذلك؛ يعتبر متبط ‎PDHK‏ على أنه مفيد في علاج أو الوقاية من أمراض حيث يكون توفير ركيزة الطاقة إلى نسيج محدودا؛ ‎Sli‏ قصور القلب (قصور حاد في القلب قصور مزمن في القلب) أعتلال عضلة القلب إقفار عضلة القلب ‎Vo‏ الذبحة القلبية؛ الخناق الصدري؛ ‎gla)‏ الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع, الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماغ والسكتة الدماغية. علاوة على ذلك؛ يتم اعتبار متبط ‎PDHK‏ على أنها مفيد لعلاج أو الوقاية من الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ والعضل المتقدري؛ السرطان فرط ضغط الدم الرثوي أو مرض ألزهايمر؛ وما شابه. السكري عبارة عن؛ ‎Se‏ السكري من النوع ‎١‏ أو السكري من النوع 7. ‎Yo‏ تتضمن أمثلة مضاعفات مرض السكري الاعتلال العصبي السكري؛ اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية واعتام العين السكري. قصور القلب عبارةٍ عن؛ ‎Ole‏ قصور حاد في القلب أو قصور مزمن في القلب. ‎CARY‏

_ \ q —_

المصطلح "تثبيط ‎"PDHK‏ يعني تثبيط وظيفة ‎PDHK‏ ويستبعد أو يخفف النشاط. يفضل أن يكون

"تثبيط ‎PDHK‏ هو تثبيط ‎PDHK‏ البشري. ك 'مثبط ‎PDHK‏ يفضل أن يكون ‎PDHK Laid‏

البشري" .

يعني مصطلح "تثبيط ‎'PDHK]‏ تثبيط وظيفة 0014/61 واستبعاد أو تخفيف النشاط. ‎lie‏ يعني

المذكور أدناه ‎.١‏ من أجل 'تثبيط 0011/61" يتم تثبيط 0011/61 البشري بشكل مفضل. حيث

‎PDHK] Lid‏ يفضل أن يكون عبارة عن 'مثبط 00011141 البشري". بشكل أكثر تفضيلا هو

‏عبارة عن "متبط 0014441 لأعضاء بشرية مستهدفة".

‏يعني مصطلح "تثبيط ‎'PDHK2‏ تثبيط وظيفة ‎PDHK2‏ واستبعاد أو تخفيف النشاط. ‎lie‏ يعني ‎٠‏ تثبيط الوظيفة الخاصة ب 0011/62 القائمة على أساس الظروف المذكورة في المثال الاختباري

‏المذكور أدناه ‎.١‏ من أجل 'تثبيط 0011/62" يتم تثبيط 0011/62 البشري بشكل مفضل. حيث

‎'PDHK2 Laid‏ يفضل أن يكون عبارة عن ‎PDHK2 Lid‏ البشري". بشكل أكثر تفضيلا هو

‏عبارة عن "متبط ‎PDHK2‏ لأعضاء بشرية مستهدفة".

‏يعني ‎Lapis’‏ 0011" تنشيط ‎PDH‏ في عضو مستهدف (مثال. الكبد؛ العضلة الهيكلية؛ نسيج ‎Vo‏ دهنيء القلب؛ الدماغخ) وما شابه؛ السرطان أو ما شابه.

‏يعني 'تقليل مستوى جلوكوز ‎"andl‏ تقليل تركيز الجلوكوز في الدم (شاملا في المصل والبلازما)؛

‏بشكل مفضل لتقليل مستوى جلوكوز الدم العالي؛ بشكل أكثر تفضيلا»؛ لتقليل مستوى جلوكوز الدم

‏إلى مستوى طبيعي فعال علاجيا للبشر.

‏يعني 'تقليل مستوى حمض لاكتيك" تقليل تركيز حمض اللاكتيك في الدم (شاملا في المصل ‎A)‏ والبلازما ( يبشكل مفضل لتقليل مستوى حمض لاكتيك العالي » بشكل أكثر تفضيلاء لتقليل مستوى

‏حمض اللاكتيك لتقليل مستوى جلوكوز الدم إلى مستوى طبيعي فعال علاجيا للبشر.

‏يمكن استخدام مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها في توليفة مع واحد أو

‏مجموعة من علاجات أخرى (المشار إليه أيضا فيما يلي بعقار إضافي) وفقا لطريقة المستخدمة

‏بشكل عام في المجال الطبي (المشار إليه فيما يلي بالاستخدام المدمج).

‎CARY

ال

فترة الإعطاء لمركب الاختراع ‎all‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منهاء وعقار إضافي غير ‎Gade‏

ويمكن إعطاؤها إلى خاضع إعطاء كتوليفة مستحضر أو يمكن إعطاء مستحضرين بشكل متزامن

أو عند فواصل معينة. علاوة على ذلك؛ يمكن استخدام التركيبة الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي

ويمكن استخدام عقار إضافي كعلاج في صورة طقم. جرعة العقار الإضافي مشابهة للجرعة

الجرعة؛ مسار الإعطاء؛ وقت الإعطاء؛ التوليف وما شابه. صورة الإعطاء للعقار الإضافي غير

مقيدة تحديداء ولا تحتاج إلى أن يتم توليفها مع مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا

منها.

تتضمن أمثلة عقار التوليف عوامل علاجية و/أو عوامل وقائية للسكري (السكري من النوع ٠؛‏ ‎٠‏ السكري من النوع ؟ إلخ.)؛ متلازمة مقاومة الإنسولين؛ متلازمة أيضية؛ مرض فرط السكر في

‎col‏ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم؛ مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري؛

‏اعتلال الشبكية السكري؛ اعتلال الكلية السكري؛ اعتام العين)؛ قصور القلب (قصور حاد في

‏القلب؛ قصور مزمن في القلب)؛ أعتلال عضلة ‎(lil‏ إقفار عضلة القلب؛ الذبحة القلبية؛ الخناق

‏الصدري؛ ارتفاع الدهون في الدم؛ التصلب العصيدي؛ انسداد الشرايين المترقي؛ العرج المتقطع؛ ‎١‏ الداء الرئوي المسد المزمن؛ إقفار الدماخ؛ السكتة الدماغية؛ الأمراض المتقدرية؛ اعتلال الدماغ

‏والعضل المتقدري؛ السرطان؛ فرط ضغط ‎pal‏ الرثوي أو مرض ألزهايمر؛ وما شابه؛ وواحد أو أكثر

‏من العوامل الخاصة بها ومركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها والتي يمكن

‏استخدامها في توليفة.

‏تتضمن أمثلة "عامل لعلاج و/أو الوقاية من السكري" مستحضر إنسولين؛ عامل خافض لسكر ‎pl‏ ‎Yo‏ من سلفونيل يورياء ميتفورمين؛ مثبط 000-4؛ عامل تحسين مقاومة إنسولين (مثلا؛ مشتق

‏ثيازوليدين)؛ مساعد مستقبل 60-1 وما شابه.

‏الأمثلة

‏تم شرح طريقة إنتاج مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا منها تحديدا بواسطة الأمثلة.

‏مع ذلك؛ لم يتم تقييد الاختراع الحالي بواسطة هذه الأمثلة.

‎CARS!

“yy ‏حتى إذا لم يتم العثور على الوصف في طريقة الإنتاج الحالي؛ يمكن تعديل الخطوات من أجل‎ ‏الإنتاج الكافي؛ مثل تقديم مجموعة حماية في مجموعة وظيفية حيث نزع الحماية في خطوة تالية؛‎ ‏باستخدام مجموعة وظيفية كمادة بادئة في كل خطوة؛ متبوعة بالتحويل إلى مجموعة وظيفية‎ ‏مطلوبة عند مرحلة مناسبة؛ تغيير ترتيب طرق الانتاج والخطوات؛ وما شابه.‎ ‏العلاج بعد التفاعل في كل خطوة تم تنفيذها بواسطة طريقة تقليدية؛ حيث يمكن عزل وتنقية حسب‎ © ‏الضرورة وفقا لطريقة مناسبة تم اختياره من طرق تقليدية مثل التبلرء إعادة التبلرء التقطير؛‎ ‏تحضيري وما شابه؛ أو توليفة منها. كل العوامل‎ HPLC ‏التجزيء؛ كروماتوجراف جل سيليكا؛‎ ‏منتجات متاحة تجارياء وحيث يتم الاستخدام بدون تنقية.‎ Baga ‏والمذيبات تتضمن‎ Bab) ‏النسبة 96 تبين نسبة الوزن. سوف تعني الاختصارات الأخرى المستخدمة في المثال التالي.‎ ‏مفرد‎ :5 A ‏مزدوج‎ id ‏ثلاثي‎ :] ‏رباعي‎ : ‏متعدد‎ tM ‏واسع‎ sbr | ٠5 ‏ثنائي مزدوج‎ :0 ‏ثلاثي مزدوج‎ td ‏ثنائي مزدوج مزدوج‎ 0 ‏ل: ثابت إقران‎ deuterated ‏معالج بالديوتيريوم‎ chloroform ‏كلوروفورم‎ :00003 | ٠ deuterated ‏معالج بالديوتيريوم‎ dimethyl sulfoxide ‏داي ميثيل سلفوكسيد‎ :DMSO-D6 ه١‎

— \ اذ ‎1H NMR‏ : رنين مغناطيسي نووي بالبروتون ‎:HPLC‏ كروماتوجراف سائل عالي الأداء ‎:DPPA‏ داي فينيل فوسفوريل أزيد ‎diphenylphosphoryl azide‏ تم قياس طيف ‎ITH-NMR‏ في 60013 أو ‎DMSO-D6‏ باستخدام تترا ميقيل سيلان ‎tetramethylsilane ©‏ كمعيار داخلي؛ وتم توضيح قيم 5 في لفة/دقيقة. ‎٠١(‏ مل مولار محلول منظم فوسفات ‎phosphate buffer‏ (رقم هيدروجيني ‎))٠٠١‏ ‏تمت إذابة صوديوم داي هيدروجين فوسفات ‎Sodium dihydrogen phosphate‏ ( 7,10 جم) في ماء ‎(de Tov)‏ وتم التعديل إلى رقم هيدروجيني ‎٠٠١‏ مع حمض فوسفوريك ‎phosphoric‏ ‏0 لإعطاء المحلول المنظم المذكور في العنوان. ‎٠‏ ظروف تحليل ‎HPLC‏ ‏ظروف التحليل ‎١‏ ‏جهاز القياس: نظام ‎CORPORATION SHIMADZU HPLC‏ كروماتوجراف سائل عالي الأداء العمرد: 000-34 ‎DAICEL CHIRALCEL‏ 4,7 مم ‎٠٠١ XD‏ مم ‎٠‏ درجة حرارة العمود: 6 26م الطور الانتقالي : (محلول ‎٠١ (A‏ مل مولار محلول منظم فوسفات (رقم هيدروجيني ‎Y,e‏ ( 3 (محلول 8) أسيتونيتريل ثم تغيير تركيبة الطور الانتقالي (محلول /:محلول 8( خطيا من 567:56 إلى 8 على مدار ‎٠٠‏ دقيقة وبعد ذلك يتم الحفاظ على معدل ‎٠0:80‏ لمدة © دقائق. ‎Jae Yo‏ تدفق: 0,« مل/دقيقة الكشف: الأشعة فوق البنفسجية ‎YY)‏ نانومتر) ١ه‏

الناخ_ ظروف التحليل ؟ جهاز القياس: نظام ‎CORPORATION SHIMADZU HPLC‏ كروماتوجراف سائل عالي الأداء العمرد: ‎٠٠١ X Das 2,1 RH-0OJ CHIRALCEL DAICEL‏ مم © درجة حرارة العمود: 6 26م الطور الانتقالي : (محلول ‎٠١ (A‏ مل مولار محلول منظم فوسفات (رقم هيدروجيني ‎Y,e‏ ( 3 (محلول 8) أسيتونيتريل ‎acetonitrile‏ ‏ثم تغيير تركيبة الطور الانتقالي (محلول /:محلول 8( خطيا من ‎Ver¥e‏ إلى ‎gen‏ على مدار ‎٠١‏ دقيقة وبعد ذلك ثم الإبقاء عليها عند 560:16 لمدة ‎٠١‏ دقائق. ‎Yo‏ معدل تدفق: 0,« مل/دقيقة الكشف: الأشعة فوق البنفسجية ‎YY)‏ نانومتر) ظروف التحليل ؟ جهاز القياس: نظام ‎CORPORATION SHIMADZU HPLC‏ كروماتوجراف سائل عالي الأداء ‎٠‏ العمود: ‎DAICEL CHIRALPAK AD-3R‏ 2,1 مم © ‎٠٠١ X‏ مم درجة حرارة العمود: 66م الطور الانتقالي : (محلول ‎٠١ (A‏ مل مولار محلول منظم فوسفات (رقم هيدروجيني ‎Y,e‏ ( 3 (محلول 8) أسيتونيتريل ثم تغيير تركيبة الطور الانتقالي (محلول /:محلول 8( خطيا من 567:56 إلى 8 على مدار ‎٠١ Yo‏ دقيقة وبعد ذلك ثم ‎ay‏ ء عليها عند ‎٠٠0:86‏ لمدة 0 دقائق. معدل تدفق: ‎٠,50‏ مل/دقيقة ‎CARS‏

_ اذ الكشف: الأشعة فوق البنفسجية ‎YY)‏ نانومتر) ‎١ JEL‏ تخليق : ‎2-{4-[(9R)-9-hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2- ©‏ ‎methylpropanamide‏ ‏(مركب )7( الخطوة ‎١‏ ‎Ethyl 2°-chloro—4’-methoxybiphenyl-2-carboxylate‏ © رصم تت ‎Cl‏ ‎La‏ 0 أ “18 71 عي ‎Er.

AE + 1 A 0 CH3 _ Na‏ ‎CH EN J kL ee‏ حالم 1 1 0 ‎I‏ ‏ا >< 2# ‎oH 3 Hao‏ اد مج ‎pal H‏ ‎HaC‏ 3 وبر 3 وين 1 في جو أرجون ‎argon‏ تمت )413 ١-برومو ‎bromo‏ -7-كلورو ‎chloro‏ -4 -ميثوكسي بنزين ‎££,Y) methoxybenzene‏ جم) في تولوين ‎YY.) toluene‏ مل)ء -4,4,5,5)-2 ‎ethyl‏ ‎T+, A) tetramethyl[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)benzoate‏ جم)ء؛ ماء ‎YTY)‏ مل)؛ ‎Glin S‏ هيدروجين صوديوم ‎sodium hydrogen carbonate‏ (1,؟ ‎(pa‏ وتمت إضافة ‎¥,A) dichlorobis(triphenylphosphine)palladium(il) ١٠‏ جم)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة حرارة ‎ales‏ زيت بمقدار ١7١٠م‏ لمدة ‎١‏ ساعات. إلى خليط التفاعل تمت إضافة: ‎«(p> 0,Y) ethyl 2—(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolan—-2-yl)benzoate‏ وتم تقليب الخليط أيضا لمدة ساعتين. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ تمت إضافة تولوين ‎٠٠١( toluene‏ مل) وماء ‎Yoo)‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط طوال الليل. إلى خليط التفاعل ال

اج اذ تمت إضافة كربون منشط )7 جم)؛ وتم تقليب الخليط أيضا لمدة ساعة. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل خلال سيليت؛ وتم غسل المادة غير القابلة للحل بتولوين ‎٠٠١(‏ مل) وماء ‎٠٠١(‏ ‏مل). تم دمج نواتج الترشيح التي تم الحصول عليها للسماح بفصل الطبقات. تم غسل الطبقة العضوية التي ثم الحصول عليها مع ماء ) ‎Yoo‏ مل) وثم تبخير المذيب ‎s acy‏ المركب المذكور في العنوان (17,7 جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 56: 7.88-7.86 (1H, m), 7.63 (1H, td, J =‏ ‎Hz), 7.51 (1H, td, J = 7.6, 1.4 Hz), 7.27 (1H, dd, J = 7.6, 0.9‏ 1.4 ,1.6 ‎Hz), 7.18 (1H, d, J =8.6 Hz), 7.06 (1H, d, J = 2.6 Hz), 6.95 (1H, dd, J =‏ ‎Hz), 4.01 (2H, m), 3.80 (3H, s), 0.96 (3H, t, J = 7.1 Hz).‏ 2.6 ,8.6 ‎٠‏ الخطوة ‎Y‏ ‎2’—Chloro—4’-methoxybiphenyl-2—-carboxylic acid‏ 0 . ‎<٠ 0‏ ون 0 مخ صو< من ‎CH, CH,‏ تمت إذابة ‎1V,Y) Ethyl 2°—chloro-4’-methoxybiphenyl-2-carboxylate‏ جم) في إيثانول ‎٠٠١(‏ مل)؛ تمت ‎Ala)‏ ؛ عياري من هيدروكسيد صوديوم ‎sodium hydroxide‏ مائي ‎٠٠١( VO‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة حرارة حمام زيت بمقدار ١١٠٠م‏ لمدة ؛ساعات ونصف. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ تمت إضافة ماء ‎Yor)‏ مل) وتولوين ‎٠٠١(‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط طوال الليل. إلى خليط التفاعل تمت إضافة كربون منشط (6, جم)؛ وتم تقليب الخليط أيضا لمدة ساعة. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل خلال سيليت؛ وتم غسل المادة غير القابلة للحل بتولوين ‎(da To)‏ وماء ‎To)‏ مل). تم دمج نواتج الترشيح التي تم الحصول عليها ‎YL‏ للسماح بفصل الطبقات. تم غسل الطبقة المائية التي تم الحصول عليها بتولوين ‎٠٠١(‏ مل)؛ تم تحميض الطبقة المائية بحمض هيدروكلوريك ‎hydrochloric acid‏ مركز (50 مل)؛ وتم التقليب

© عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح. تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها لمدة ‎١‏ ساعات؛ وتم التجفيف تحت ضغط مخفض عند ٠م‏ طوال الليل لإعطاء المركب المذكور في العنوان (0,7 5 جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 12.57 (1H, s), 7.90-7.88 (1H, m),‏ ه ‎(1H, td, J = 7.6, 1.3 Hz), 7.49 (1H, td, J = 7.6, 1.3 Hz), 7.24 (1H,‏ 7.60 ‎dd,J = 17.6, 1.0 Hz), 7.19 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.06 (1H, d, J = 2.4 Hz),‏ ‎(1H, dd, J = 8.5, 2.4 Hz), 3.81 (3H, s).‏ 6.95 الخطوة ‎١‏ ‎4-Chloro-2-methoxy-9H-fluoren-9-one‏ ‏1 ‏0 0 و ون ‎CH‏ 0 ٍْ ‎CH, 3‏ في جو ‎2’—chloro-4’-methoxybiphenyl-2—carboxylic acid _l« argon sj‏ (15,4 جم) تمت إضافة عامل كاشف ‎Eaton‏ (بينتوكسيد فوسفوري ‎phosphorus pentoxide‏ - حمض ميثان سلفونيك ‎methanesulfonic acid‏ (نسبة الوزن + ‎(Ve)‏ محلول» ‎YY‏ مل)؛ ‎Vo‏ وتم تقليب الخليط عند درجة ‎ha‏ حمام زيت بمقدار ١٠٠لم‏ لمدة ساعة. تم تبريد خليط التفاعل ‎Cah Fant‏ إضافة ‎(Je 118 ) PR‏ ببطء على قطرات؛ وثم تقليب الخليط ‎an die‏ الحرارة الغرفة لمدة ساعة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل بماء ‎v)‏ 00 مل). تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها طوال الليل لإعطاء المركب المذكور في العنوان (47.0 جم). ال

— 7 اذ ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.01 (1H, d, J = 7.4 Hz), 7.64-7.60‏ ‎(2H, m), 7.36 )1 td, J = 7.4, 0.9 Hz), 7.17 (2H, dd, J = 8.4, 2.3 Hz),‏ ‎(3H, s).‏ 3.85 ‎35d)‏ ¢ ‎4-Chloro-2-hydroxy—-9H-fluoren-9-one ©‏ ‎Yas Qs‏ ‎OH‏ 0 ‎CH, 0‏ 0 في جو أرجون» إلى ‎AY, +) 4-chloro-2-methoxy—-9H-fluoren-9-one‏ جم) تمت إضافة ‎(Je VY +) N-methylpyrrolidone‏ وبيريدين هيدر وكلوريد ‎pyridine hydrochloride‏ ‎V ££)‏ جم). تم تقليب خليط التفاعل عند درجة حرارة حمام زيت بمقدار ٠٠٠7م‏ لمدة ؟ ساعات ‎Vo‏ مع إزالة ماء بواسطة جهاز ‎.Dean—Stark‏ تم تبريد خليط التفاعل إلى 0٠24م؛‏ تمت إضافة ماء ‎(Je Te)‏ على قطرات؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعتين. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل بماء (0 50 مل). تم تجفيف ‎sald)‏ الصلبة التي تم الحصول عليها ‎sad‏ أيام؛ تمت إضافة مذيب مخلوط من هكسان ‎Ji; hexane‏ أسيتات ‎ethyl acetate‏ (هكسان: إيثيل أسيتات ‎(Je 00 1:١‏ ؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة ‎Vo‏ الغرفة لمدة ساعة. تم جمع المادة الصلبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل مع مذيب مخلوط من هكسان وايثيل أسيتات (هكسان: إيثيل أسيتات- ‎58٠0 1:1١‏ مل). تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض عند ‎٠‏ 20م لمدة ‎١‏ ساعات لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎EAT)‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 10.56 (1H, s), 7.96 (1H, d, J = 8.4‏ ‎Hz), 7.61-7.57 (2H, m), 7.32 (1H, td, J = 7.4, 0.9 Hz), 6.97 (1H, d, J = ٠٠‏ ‎Hz), 6.94 (1H, d, J = 2.2 Hz).‏ 2.2

م اذ الخطوة © ‎Ethyl 4-(4-chloro-9-oxo-9H-fluoren-2-yloxy)butyrate‏ ‎cl Gl‏ ‎a 01‏ ما ‎Tes! goa‏ لائاس-0 7 0 ~~ 0 . 0 تمت إذابة ‎¢A,7) 4-Chloro-2-hydroxy-9H-fluoren-9-one‏ جم) في ‎N,N-‏ ‎Vo +) dimethylformamide o‏ مل)؛ كربونات بوتاسيوم ‎°A,Y) potassium carbonate‏

جم) و تمت إضافة ‎(Je YY, 0) ethyl 4-bromobutyrate‏ ¢ وتم تقليب الخليط عند ١٠71م‏

لمدة ساعتين . ثم تبريد خليط التفاعل إلى ‎ot ٠‏ و ثمت إضافة تولوين ) ‎Yeo‏ مل) وما ‎s‏ ) .7

مل) للسماح بفصل الطبقات. تم استخلاص الطبقة المائية التي تم الحصول عليها مرة أخرى

بتولوين ) ‎(Je ٠١‏ . تم دمج ‎laa)‏ العضوية التي ثم الحصول عليها 3 ثم الغسل مرتين بما عِِ ‎٠١١١ Ve‏ مل)؛ تمت إضافة سلفات صوديوم ‎anhydrous sodium sulfate ALY‏ وكربون

منشط ‎Y,0)‏ جم) ؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة © دقائق. تم ترشيح المادة غير

القابلة للحل خلال سيليت؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. إلى المادة المتبقية التي تم

الحصول عليها تمت إضافة هكسان )4 ‎YY‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط عند ‎٠‏ 22م لمدة ‎٠١‏ دقائق

وعند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل ‎VO‏ مع هكسان. تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض لإعطاء المركب

المذكور في العنوان ) 114 جم). علاوة على ذلك تم تبخير المذيب في ناتج الترشيح الذي تم

الحصول عليه؛ إلى المادة المتبقية تمت إضافة إيثيل أسيتات )0 مل) وهكسان ‎Yo)‏ مل)؛ وتم

تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة

الترشيح؛ وتم الغسل مع هكسان. تم تجفيف ‎sald)‏ الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط ‎Yo‏ مخفض أيضا لإعطاء المركب المذكور في العنوان (7,5 جم).

1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.01 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.65-7.61

(2H, my, 7.37 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.17-7.14 (2H, m), 4.13-4.05 (4H,

ه١‎

‎q —_‏ اذ ‎J = 7.3 Hz), 2.02-1.95 (2H, m), 1.19 (3H, td, J = 7.2,‏ ,ا ‎m), 2.47 (2H,‏ ‎Hz).‏ 0.7 الخطوة + ‎Ethyl 4-[(9R)-4-chloro-9-hydroxy-9-(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2-‏ ‎yloxy]butyrate ©‏ ‎Cl‏ 0 ‎rol — 0 CH‏ + ~~ ٍِ 1 والاا“.0 ‎TY ~~ i! - 3 "١‏ ; في جو أرجون؛ تمت إذابة: ‎ethyl 4-(4-chloro-9-oxo-9H-fluorene-2-yloxy)butyrate‏ (15,4 جم) في رباعي هيدروالفوران ‎٠٠١( Tetrahydrofuran (THF)‏ مل)؛ و تمت إضافة : ‎N=(4-tert-butylbenzyl)cinchonidium 4-methoxyphenoxide ٠٠‏ (4. جم). إلى خليط التفاعل تمت إضافة محلول بالتقطير من ‎oY, +) trimethyl(trifluoromethyl)silane‏ مل) في ‎(Je ١0( THE‏ عند -١١”م؛‏ وتم تقليب الخليط عند نفس درجة الحرارة لمدة ‎١١‏ دقيقة. إلى خليط التفاعل تمت الإضافة التتابعية لحمض أسيتيك ‎YY, +) acetic acid‏ مل) و١ ‎se‏ ‏من تترا بيوتيل أمونيوم ‎tetrabutylammonium‏ ؛ محلول فلورايد ‎YYY) THF/ fluoride‏ ‎VO‏ مل)ء وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعة. تم تبخير المذيب في خليط التفاعل؛ وإلى المادة المتبقية التي تم الحصول عليها تمت إضافة تولوين )00 مل) وكربونات هيدروجين صوديوم مشبعة مائية ) ‎Yoo‏ مل) للسما ‎Jad z‏ الطبقات . تم غسل الطبقة العضوية التي ثم الحصول عليها بالتتابع مع كربونات هيدروجين صوديوم مشبعة مائية ) ‎٠٠١‏ مل؛ مرتين) ‎Yo‏ ‏عياري من هيدروكسيد صوديوم مائي ‎٠٠١(‏ مل)؛ ماء ‎٠٠١(‏ مل)؛ ‎١‏ عياري من حمض ‎٠‏ مهيدروكلوريك ‎٠٠١( hydrochloric acid‏ مل)؛ ماء ‎(Je ٠٠١(‏ وبراين مشبع ‎٠٠١(‏ مل). إلى الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها تمت إضافة سلفات مغنيسيوم لامائي ‎anhydrous‏ ‎sulfate‏ 018908510000 وجل سيليكا ‎V0) silica gel‏ جم)؛ وتم تقليب الخليط لمدة ‎٠١‏ دقائق. ‎CER!‏

=« ¢ — تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم غسل المادة غير القابلة للحل بالتتابع بتولوين ‎(Je Yoo)‏ وايثيل أسيتات ‎Av)‏ مل). تم دمج ناتج الترشيح الذي تم الحصول عليه وناتج الغسل بالتولوين ‎As‏ تبخير المذيب ‎acy‏ 3 المركب المذكور في العنوان ) 7 جم) . أيضا ثم تبخير المذيب في ناتج الغسل ‎Jel‏ أسيتات ؛ إلى المادة المتبقية التي تم الحصول عليها تمت إضافة جل سيليكا © )£4 جم) ومذيب مخلوط من هكسان وايثيل أسيتات (إيثيل أسيتات:هكسان ‎٠٠١ 7:١‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم غسل المادة غير القابلة للحل مع مذيب مخلوط من هكسان وايثيل أسيتات (إيثيل أسيتات:هكسان-١:7؛ ‎(de ٠٠١‏ تم تبخير المذيب في ناتج الترشيح الذي تم الحصول عليه أيضا لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎A) ,١(‏ جم). 1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 8: 8.14 )1 d, J = 7.7 Hz), 7.66 (1H, 0, ٠

J =7.5Hz),7.53 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.42-7.38 (2H, m), 7.14 (2H, s), 4.11-4.05 (4H, m), 2.47 (2H, t, J = 7.5 Hz), 2.03-1.96 (2H, m), 1.19 (3H, td, J = 7.1, 0.8 Hz). ‏(تهيئة مطلقة)‎ ‎١‏ تحديد التهيئة المطلقة ل ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—9-ol‏ -9-الإ4-01010-2-008 في الخطوة المذكورة فيما يلي رقم ‎٠١‏ أكد على أن المركب المذكور في العنوان الذي تم الحصول عليه في هذه الخطوة ‎Blue‏ عن صيغة (4ا). كان النقاء البصري ‎optical purity‏ 6.69687,1. تم تحديد النقاء البصري تحت ظروف تحليل ‎.١ HPLC‏ وقت احتجاز الصورة | ‎Retention‏ ‏686 (5) 14,7 دقيقة؛ وقت احتجاز الصورة ‎77,١0 (R)‏ دقيقة. ‎٠‏ الخطوة لأ ‎4-[(9R)-4-Chloro—9-hydroxy-9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2-‏ ‎yloxy]butyric acid‏ ‎ه١‎

-١؛-‏ ‎cl 0‏

‎%e o_O, — © OH‏ ‎on 1) i 0 a‏ ‎F F‏ تمت إذابة: ‎Ethyl 4-[(9R)-4-chloro—-9-hydroxy—9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2-‏ ‎(a> 4Y,Y) yloxylbutyrate‏ في إيثانول ‎(Je ٠٠١( ethanol‏ تمت إضافة ؛ عياري من © هيدروكسيد صوديوم ماي ‎٠٠١( aqueous sodium hydroxide‏ مل)؛ وتم تقليب الخليط عند ٠م‏ طوال الليل. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ تمت إضافة ماء ‎Yor)‏ مل)؛ وتم غسل الخليط مرتين بتولوين ‎٠٠١(‏ مل). تمت معايرة الطبقة الماثئية التي تم الحصول عليها بحمض هيدروكلوريك مركز )£0 مل)؛ وتم الاستخلاص مرتين مع إيثيل أسيتات ‎Tov)‏ مل). تم غسل مستخلص إيثيل أسيتات الذي تم الحصول عليه بالتتابع بماء ‎ede ٠٠١(‏ مرتين)؛ وبراين ‎Ve‏ مشبع ‎٠٠١(‏ مل)؛ سلفات مغنيسيوم لامائي و تمت ‎Alia)‏ كربون منشط (4,7 جم) ؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ‎٠١‏ دقائق. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. إلى المادة المتبقية التي تم الحصول عليها تمت إضافة كلوروفورم ‎A)‏ ‏مل)؛ وتم تسخين الخليط إلى ٠*7م.‏ تمت إضافة هكسان )£00 ‎(Je‏ على قطرات؛ وتم تقليب الخليط عند نفس درجة الحرارة ‎Vo sad‏ دقيقة؛ وعند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعتين. تم جمع ‎Vo‏ _المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ تم الغسل مع مذيب مخلوط من هكسان وكلوروقورم 0 (هكسان:كلوروفورم <5:1؛ ‎٠‏ © مل)؛ وتم التجفيف تحت ضغط مخفض عند ٠م‏ لمدة ساعتين لإعطاء المركب المذكور في العنوان ( ‎١7,25‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 12.17 (1H, brs), 8.14 (1H, d, J = 7.7‏ ‎Hz), 7.66 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.54 (1H, td, J = 7.7, 1.2 Hz), 7.42-7.30‏ ‎(2H, m), 7.18-7.15 (2H, m), 4.09 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.41 2H, t, J = ¥.‏ ‎Hz), 2.00-1.93 (2H, ٠‏ 7.3 الخطوة ‎A‏

ملح : ‎(18)-1-(4-Methylphenyl)ethylamine salt of 4-[(9R)-4-chloro-9—hydroxy-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren-2-yloxy]butyric acid‏ -9 ‎Cl Cl‏ ‎FR ‘Hy SE H CH:‏ 3 6 صم 4 3 ‎cH‏ + ضر ‎TNH‏ ؟ ‎ae OH‏ انع ‎AA LOH 7 NH‏ ‎Le 2‏ 1 م 0 ‎NA‏ مر 2 ‎HA‏ 01 7 مرح ‎Fred‏ ‏و 0 0ع اد م 9 مم © في جو نيتروجين 0112098610 ؛ تمت إذابة : 00108 8الإطأ©( ال80|الا4-0081)-1-(15) )14,9( في إيثيل أسيتات ‎ethyl acetate‏ ‎77١(‏ مل)؛ و تمت إضافة : ‎ethyl acetate (720 ml), and 4-[(9R)-4-chloro-9-hydroxy-9-‏ ‎VY, 0) (trifluoromethyl) -9H-fluoren—2-yloxy]butyric acid‏ جم). تم تقليب خليط ‎٠‏ التفاعل عند ١٠م‏ لمدة ساعتين»؛ وعند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل مع إيثيل أسيتات ‎٠٠١(‏ مل). تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض عند ١٠م‏ لمدة © ساعات لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎TAT)‏ جم). علاوة على ذلك؛ يمكن الحصول على : ‎4-[(9S)-4~-chloro-9-hydroxy-9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2-‏ ‎yloxylbutyric 8610 Ye‏ من ناتج الترشيح. (النقاء ‎Optical purity gyal‏ ( ثم تحديد النقاء البصري : ‎4-[(9R)~4-chloro-9-hydroxy-9- (trifluoromethyl) -9H-fluoren-2-‏ ‎yloxylbutyric 0‏ في ظروف تحليل ‎١ HPLC‏ (النقاء ‎grad‏ 6.69690:7.). وقت ‎٠‏ | احتجاز الصورة ‎١,5 (R)‏ دقيقة؛ وقت احتجاز الصورة (5) ‎ALE) +E‏ ال

1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.14 (1H, d, J = 7.7 Hz), 7.66 (1H, ٠

J =7.7 Hz), 7.53 (1H, td, J = 7.6, 1.1 Hz), 7.40 (1H, td, J = 7.6, 1.0

Hz), 7.26 (2H, d, J = 7.9 Hz), 7.16-7.10 (4H, m), 4.08 (2H, t, J = 6.5

Hz), 4.01 (1H, q, J = 6.7 Hz), 2.32 (2H, t, J = 7.3 Hz), 2.26 (3H, s), 1.98-1.91 (2H, m), 1.26 (3H, d, J = 6.7 Hz). ه٠‎ 9 ‏الخطوة‎ ‎4-[(9R)-4-Chloro—9-hydroxy-9— (trifluoromethyl) -9H-fluoren-2- yloxy]butyric acid cl 0

GH,

Spr Sp i oH 0 HC i 5 OH 0

F

: ‏إلى ملح‎ ٠

To (1S)-1-(4-methylphenyljethylamine salt of 4-[(9R)-4-chloro-9- ‏جم) تمت‎ TAT) hydroxy -9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren—2-yloxyJbutyric acid ‏مل)؛ وتم تقليب الخليط عند‎ To) ‏حمض هيدروكلوريك‎ NY 5 ‏إضافة إيثيل أسيتات )+00 مل)‎ ‏دقائق. تم السماح بفصل طبقات. تم غسل الطبقة العضوية التي تم‎ ٠١ ‏درجة الحرارة الغرفة لمدة‎ ‏مل). تم‎ Yor) saturated brine ‏مل) وبراين مشبع‎ You) ‏الحصول عليها بالتتابع بماء‎ ١ ‏تجفيف الطبقة العضوية التي ثم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم لامائي ¢ ثم ترشيح المادة‎

Ter) ‏غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح لإعطاء المركب المذكور في العنوان‎ ‏جم).‎ ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 12.17 (1H, brs), 8.14 (1H, d, J - 7

Hz), 7.66 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.54 (1H, td, J = 7.7, 1.2 Hz), 7.42-7.30 ٠ (2H, my, 7.18-7.15 (2H, m), 4.09 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.41 (2H, t, J = 7.3 Hz), 2.00-1.93 (2H, ٠

IRS

_ _ الخطوة ‎٠١‏ ‏ا911-11101606-2,9-010- ‎(9R)—4-Chloro—9— (trifluoromethyl)‏ ‎cl 0)‏ خف — من 6 ‎oY ¢ 3 OH‏ ٍِ : ص 0 ‎OH‏ ‎FF F‏ إلى : ‎4-[(9R)-4-chloro-9-hydroxy—9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2- ٠‏ ‎(aa © +) yloxy]butyric acid‏ تمت إضافة ‎(Je Yoo) N-methylpyrrolidone‏ وبيريدين هيدروكلوريد ‎YA) pyridine hydrochloride‏ جم)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة حرارة حمام زيت بمقدار ١٠٠"م‏ لمدة يومين. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ تم التخفيف بإيثيل أسيتات )00 مل)؛ وتم الغسل مرتين بماء. تتم استخلاص الطبقة المائية التي تم الحصول عليها مرة أخرى بإيثيل أسيتات ‎Tov)‏ مل). تم غسل الطبقة العضوية بالتتابع بماء؛ ‎١‏ عياري من حمض هيدروكلوريك وبراين مشبع. إلى الطبقة وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل خلال سيليت. تم تبخير المذيب في الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها؛ تمت إضافة هكسان إلى المادة ‎١‏ المتبقية؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم التجفيف تحت ضغط مخفض عند درجة الحرارة الغرفة. تمت إذابة المادة الخام التي تم الحصول عليها في إيثيل أسيتات (500 مل)؛ تم الغسل ¥ مرات بماء؛ تم التجفيف على سلفات مغنيسيوم لامائي. تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. ‎CER!‏

اج _ إلى المادة المتبقية تمت إضافة هكسان » وثم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة. تم جمع المادة الصلبة المترسبة ‎dang‏ الترشيح؛ ثم التجفيف تحت ضغط مخفض عند درجة الحرارة الغرفة لإعطا 6 المركب المذكور في العنوان ) ‎YV,¢‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 10.37 (1H, br s), 8.09 (1H, dJ=17.5‏ ‎Hz), 7.63 (1H, d,J=17.5 Hz), 7.50 (1H, td, J =7.6, 1.0 Hz), 7.36 (1H, °‏ ‎td, J = 7.6, 1.0 Hz), 7.32 (1H, br s), 7.06 (1H, s), 6.91 (1H, brd, J = 0‏ ‎Hz) .‏ (تهيئة مطلقة) ثم تحديد التهيئة المطلقة للمركب المذكور في العنوان بواسطة تحليل ‎HPLC‏ باستخدام العمود ‎٠‏ النشط بصريا من مركب (١٠٠أ)‏ ومركب (١٠٠ب)‏ المحضرة في الخطوات التالية (الخطوة أ-١‏ إلى الخطوة أ-؟ والخطوة ب-١).‏ الخطوة أ-١‏ ‎Cl‏ ‎Cl 1) BrCH,CO,Et‏ ‎TMSCF PA)‏ )1 ‎2TBAF Ng OR‏ لمر ‎CU‏ ‎on‏ = نمت ‎FF‏ 0 ‎compound (100)‏ ‎racemic‏ ‎Cl CH, Cl‏ ( ممق »0 مق ‎ALS Jon, (TM‏ ا ا ‎(ron‏ ‎FA 0 FA 0 :‏ ‎FF “pO FF “pO‏ ‎OH OH‏ ‎compound (100AA)‏ ‎single crystal X-ray‏ ‎structural analysis‏

تم إخضاع ‎ 4-Chloro-2-methyl-9H-fluoren-9-one‏ لمعالجة بتراي فلورو ميثيل ‎trifluoromethylation‏ ؛ تفاعل ‎Jil‏ برومو أسيتات ‎ethyl bromoacetate‏ واماهة لإعطاء ‎H‏ ‎.[4-chloro—-2-methyl-9— (trifluoromethyl) -9H-fluorene-9-yloxylacetic acid‏ © تم حل المركب بصريا ‎Sg (IR)=1-phenylethylaminealaainl‏ تحديد التهيئة المطلقة لتكون ‎(R)‏ بواسطة التحليل البنيوي بالأشعة السينية البلورية الأحادية لملح: ‎using (1R)-1-phenylethylamine‏ الذي تم الحصول عليه )4 ‎(V+‏ ‏الخطوة أ-؟

‎HO NH 5‏ | حدم كر ايم ‎FT, he, : Ag hy TIHGE‏ 0 ‎as,‏ ص 1 بردمو ‎٠‏ 9 مر كا نع ‎Tr DEEL‏ ‎OH‏ اتج امور ‎yr st‏ 8 م 1 المركب ‎(RIE)‏ المركب (١٠٠١أأ)‏ ‎٠‏ تم تخليقا911-110160-9-0- (الط1111101010081)-9- الإ4-61610-2-00281- (4ا9) (مركب ‎))٠٠١(‏ من مركب ١٠٠أأ‏ بواسطة معالجة حمضية وما شابه. الخطوة ب-٠‏ ‎TH / iPHEL‏ )1 ‎Pd(PPh),‏ )2 ‎CH,‏ ‎Cl 0 B. 0 Cl‏ ا ‎CH,‏ يلا 0 ليا ‎oH‏ ‎FA OH FA 1‏ ‎FF FF‏ مركب ( ١٠٠ب)‏

— 7 ¢ — ‎4—chloro-9— (trifluoromethyl) -9H-fluorene-2,9—diol‏ الذي تم الحصول عليه في الخطوة ‎٠١‏ إلى مجموعة ميثيل بواسطة الطريقة المذكورة أعلاه لإعطاء : ‎4-chloro-2-methyl-9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-9-ol‏ (مركب (١٠٠ب)).‏ (تحليل ‎HPLC‏ باستخدام عمود نشط بصريا) ثم فصل كل من متشاكلات المركب ) يد ‎HPLC dail gs ( ١‏ باستخدام عمود نشط بصريا (ظروف تحليل ‎HPLC‏ 9). أكد تحليل ‎HPLC‏ من مركب (١٠٠أ)‏ أكد على أن وقت احتجاز الصورة ‎(R)‏ ‏كان ¢ ‎١ A,‏ دقيقة وكان وقت احتجاز الصورة ‎yt (S)‏ لف دقيقة. ثم تخليق مركب ) ‎ve‏ 0 ومركب ‎١ “ue )‏ ب تحث ظروف ‎HPLC‏ للوصول إلى أن وقت الاحتجاز . تم اعتبار أن التهيئة المطلقة للكربون المتناظر لا يقوم بالتحول أثناء إنتاج وفقا لما سبق مركب : ‏م“ 0 ومركب ) م“ ١اب). تؤكد النتائج على أن‎ ) Ye ‏الذي تم الحصول عليه في‎ 4—chloro-9— (trifluoromethyl) -9H-fluorene-2,9—diol

A(R) ‏له تهيئة مطلقة ل‎ ٠١ ‏الخطوة‎ ‎١١ ‏الخطوة‎ ‎(9R)-4-Chloro—-2-(3-hydroxy—3-methylbutyloxy)-9—(trifluoromethyl)-9H- ‎fluoren-9-ol ٠ 0 Cl

Oy 0 0 HC CH ‏لآ ب‎ HC, Of

F ay w Ty me ‏ع‎ 0 0

Fe Fr : ‏في جو نيتروجين؛ تمت إذابة‎ ‏ده جم) في‎ ©) (9R)—-4-chloro-9— (trifluoromethyl) -9H-fluorene-2,9-diol «(Je 00+) N,N-dimethylformamide ‏(1.1-داي ميثيل فورماميد‎

م _ ‎(ax £4,7) 3-hydroxy—3-methylbutyl 10١0606-4-036‏ وكربونات بوتاسيوم ‎T4,0) potassium carbonate‏ جم) تمت إضافة؛ وتم تقليب الخليط عند درجة حرارة حمام زيت بمقدار ١7م‏ طوال الليل. إلى خليط التفاعل تمت إضافة محلول من : ‎3-hydroxy—3-methylbutyl toluene-4-sulfonate‏ )+ .5 جم) في : ‎N,N-dimethylformamide ©‏ )© مل)؛ وتم تقليب الخليط أيضا عند نفس درجة الحرارة لمدة ساعات. تم تبريد خليط التفاعل بالثلج؛ تمت إضافة ماء ‎Avr)‏ مل)؛ وتم استخلاص الخليط ‎Jl‏ أسيتات )400 مل). تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بماء ‎0٠0(‏ 5 مل؛ ؟ مرات) وبراين مشبع ) 5.6 ‎(Je‏ . ثم تجفيف الطبقة العضوية التي ثم الحصول عليها على سلفات صوديوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. تمت ‎am Ye‏ المادة المتبقية التي تم الحصول عليها بواسطة عمود كروماتوجراف جل سيليكا (خليط من هكسان وايثيل أسيتات كشطافة مذيب؛ مشطوف أولا بخليط من (هكسان:إيثيل أسيتات) عند معدل خلط ١:3؛‏ وبعد ذلك مع الخليط عند معدل خلط ١:7؛‏ وأيضا مع الخليط عند معدل خلط 7:7) لإعطاء المركب المذكور في العنوان )£9,0 جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.12 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.64 (1H, d,‏ ‎J =7.4 Hz), 7.52 (1H, td, J = 7.6, 0.9 Hz), 7.40-7.36 (2H, m), 7.15- ١٠‏ ‎(2H, m), 4.41 (1H,s), 4.16 (2H, t, J = 7.1 Hz), 1.85 (2H, t, J = 7.1‏ 7.13 ‎Hz), 1.17 (6H, s).‏ الخطوة ‎VY‏ ‎Ethyl 2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—-(3-hydroxy-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionate ٠‏ ١ه‏

Hot: ‏ب‎ H3C.; ] 0

Cl Fe ‏لم ل‎

Pa Non N-N ‏وذ‎ ‎“#7 HC CHy | 0 La

Vd i ‏يس احص الي‎

FF Hae ‏و‎ For 27 07" OH ‏ولا‎ CH3 F goH

LY ‏في جو أرجون؛ تمت‎ atmosphere, (9R)—4-chloro-2-(3-hydroxy-3-methylbutyloxy)-9- (trifluoromethyl)-9H-fluoren-9-ol ‏(4.5؛ جم) في تولوين )£20 مل):‎ 0 ethyl 2-methyl-2-[4-(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolan—2-yl)-1H- ‏تراي بوتاسيوم فوسفات‎ o(J— VE) ‏جم)؛ ماء‎ ©4,Y) pyrazol-1-yl]propionate ‏جم)‎ ¥,4) palladium acetate ‏بالاديوم أسيتات‎ «(pa 0¢,Y) tripotassium phosphate 2—dicyclohexylphosphino-2’,6’-dimethoxybiphenyl (SPhos) ‏و تمت إضافة‎ ‏لمدة ؟ ساعات‎ 5 ٠٠١ ‏حرارة حمام زيت بمقدار‎ ia ‏جم) وتم تقليب الخليط عند‎ ٠١ ) Ye ‏تمت إضافة. تم ترشيح‎ (Je Ye) ‏ونصف. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ وماء‎ slog ‏مل)‎ Vor) ‏المادة غير القابلة للحل خلال سيليت؛ وتم غسل المادة غير القابلة للحل بتولوين‎ ‏مل). تم دمج نواتج الترشيح التي تم الحصول عليها للسماح بفصل الطبقات. تم غسل الطبقة‎ 00) ‏مل) . ثم تجفيف‎ Ou ) ‏مل) وبراين مشبع‎ Orn ) & ‏العضوية التي ثم الحصول عليها بالتتابع بما‎

ALE ‏الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات صوديوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير‎ Yo ‏للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. تمت تنقية المادة المتبقية التي تم الحصول عليها‎ ‏بواسطة عمود كروماتوجراف جل سيليكا (تم استخدام خليط من هكسان وايثيل أسيتات كشطافة‎ ‏وبعد ذلك مع‎ Vi) ‏بخليط من (هكسان:إيثيل أسيتات) عند معدل خلط‎ Ny ‏مذيب؛ مشطوف‎ ‏؛ وأيضا تمت التنقية بواسطة‎ (V:Y ‏وأيضا مع الخليط عند معدل خلط‎ 1:١ ‏الخليط عند معدل خلط‎ ‏عمود كروماتوجراف جل سيليكا (تم استخدام خليط من هكسان وأسيتون كشطافة مذيب؛ مشطوف‎ ٠ ‏ال‎

- ‏ير‎ ‏عند معدل خلط ١:7؛ وبعد ذلك مع الخليط عند‎ (acetone ‏أولا بخليط من (هكسان:أسيتون‎ ‏لإعطاء‎ (V:Y ‏وأيضا مع الخليط عند معدل خلط‎ 3:7 1:١ 7:١ oF) 4:١ ‏معدلات خلط‎ ‏جم).‎ TALE) ‏المركب المذكور في العنوان‎ 1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.18 (1H, s), 7.65 (1H, s), 7.59-7.57 (1H, m), 7.25-7.21 (4H, m), 7.13 (1H, brd, J = 1.6 Hz), 6.84 (1H, d, J © = 2.3 Hz), 4.38 (1H, s), 4.16-4.11 (4H, m), 1.86 (2H, t, J = 7.1 Hz), 1.84 (6H, s), 1.16 (6H, s), 1.13 (3H, t, J = 7.0 Hz). :١١ ‏الخطوة‎ ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9- ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionic ٠ acid

CH

CH ‏بس‎ 3 CH; OH

Ho] ® 0 HC at a / p yy

LJ HC. GH, Se HC. CH,

HL SAREE,

A Fr : ‏تمت إذابة‎

Ethyl 2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—-(3-hydroxy-3-methylbutyloxy)-9- (trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionate ٠١

VTA) ‏مل)؛ تمت إضافة § عياري من هيدروكسيد صوديوم مائي‎ YO) ‏جم) في إيثانول‎ TA, £) ‏مل) تمت إضافة؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ساعتين ونصف. تم تبريد خليط‎ ‏تمت‎ (Je YYY) hydrochloric acid ‏عياري من حمض هيدروكلوريك‎ ١ ‏التفاعل بالثلج؛‎ ‏الطبقة العضوية‎ Jug ‏إضافة على قطرات؛ وتم استخلاص الخليط بإيثيل أسيتات )+00 مل). تم‎ ‏ال‎

_— \ جم التي تم الحصول عليها بالتتابع بماء ‎Een)‏ مل؛ مرتين) وبراين مشبع ‎en)‏ مل). تم تجفيف الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات صوديوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ ‎As‏ تبخير المذيب في ناتج الترشيح لإعطاء المركب المذكور في العنوان ) ‎Yo,‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6:13.06 (1H, br s), 8.14 (1H, s), 7.62‏ ‎(1H, s), 7.57 (1H, dd, J = 6.4, 0.6 Hz), 7.27-7.19 (4H, m), 7.12 (1H, s), ©‏ ‎(1H, d, J = 2.3 Hz), 4.38 (1H, s), 4.14 (2H, t, J = 7.2 Hz), 1.85‏ 6.84 ‎(2H, t, J = 7.2 Hz), 1.82 (3H,s), 1.81 (3H, s), 1.16 (6H, s).‏ الخطوة 6 ‎١‏ ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2- ٠‏ ‎methylpropanamide‏ (مركب ‎((Y)‏ ‎oof? OH of NH,‏ ‎١‏ ا ‎N—N‏ ‎p yr‏ / ‎CJ HC.

CH, 2 ©" HC.

CH,‏ ‎ap oo F a‏ ‎Fon OH‏ ‎Fe FF‏ في جو نيتروجين؛ تمت إذابة : ‎2-{4-[(9R)-9-hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionic ٠٠‏ ‎717,Y) acid‏ جم) في لا:١-داي‏ ميثيل فورماميد ‎£A+) N,N-dimethylformamide‏ مل)؛ ‎YV,71) hydroxybenzotriazole (HOBt) 1 hydrate‏ >(« ‎1-ethyl-3~(3’~dimethylaminopropyl)carbodiimide (WSC) hydrochloride‏ ‎YE,7)‏ جم) و تمت إضافة ‎%YA‏ من أمونيا ‎ammonia‏ مائية ‎(Je Y£,0)‏ ¢ وتم تقليب الخليط ال

— \ جم عند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل. تم تبريد خليط التفاعل بالثلج؛ ‎TY) elo‏ مل) و تمت إضافة " عياري من حمض هيدروكلوريك 8610 ‎YY) hydrochloric‏ مل) على قطرات؛ وتم استخلاص الخليط بإيثيل أسيتات ‎Avo)‏ مل). تم استخلاص الطبقة المائية التي تم الحصول عليها مرة أخرى ‎Jil‏ أسيتات )000 مل). تم دمج الطبقات العضوية التي تم الحصول عليها؛ وتم د الغسل بالتتابع بماء )000 ‎cde‏ مرتين)؛ كربونات هيدروجين صوديوم مشبعة مائية (500 مل)؛ وبراين مشبع ) 5.6 ‎(J‏ . ثم تجفيف ‎Aaya)‏ العضوية التي ثم الحصول عليها على سلفات صوديوم ‎(WY‏ ثم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح لإعطا 6 المركب المذكور في العنوان ‎ve)‏ 1 جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 8: 8.08 (1H, s), 7.66 (1H, s), 7.58-7.56‏ ‎(1H, m), 7.32-7.30 (1H, m), 7.25-7.22 (4H, m), 7.12 (1H, br s), 6.96 ٠‏ ‎(1H, br s), 6.87 (1H, d, J = 2.3 Hz), 4.38 (1H, s), 4.14 (2H, t, J = 7.2‏ ‎Hz), 1.85 (2H, t, J = 7.2 Hz), 1.78 (3H, s), 1.78 (3H, s), 1.17 (6H, s).‏ الخطوة ‎١١‏ ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2- ٠‏ ‎methylpropanamide monohydrate‏ (مركب ‎((hY)‏ ‎CH CH‏ ‎H.C 3 HH, HC 3 NH,‏ ‎a a‏ ‎Ps . H20‏ 7 ‎Se HG.

CH, se HC.

CH,‏ ‎pS EN‏ وك ‎pS‏ ‎OH 2 OH‏ 2 تمت إذابة : ‎CER!‏

-." جم ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-‏ ‎methylpropanamide‏ ‏(مركب (7)) (1000 جم) الذي تم الحصول عليه في الخطوة السابقة في إيثيل أسيتات ‎Ved)‏ ‎(dw ©‏ ماء (؟ مل) تمت إضافة؛ وتم تسخين الخليط ‎٠‏ 2م. إلى هذا الخليط تمت الإضافة التتابعية على قطرات لهكسان ‎YY)‏ مل)؛ ومذيب مخلوط من هكسان وايثيل أسيتات (هكسان :إيثيل أسيتات ‎YOu (YD‏ مل)؛ وتم السماح للخليط ليبرد إلى درجة حرارة الغرفة وتم التقليب طوال الليل. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل مع مذيب مخلوط من هكسان وايثيل أسيتات (هكسان:إيثيل أسيتات-<١:7؛ ‎٠830‏ مل). تم تجفيف ‎sald)‏ الصلبة التي ‎Ve‏ تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض عند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل لإعطاء المركب المذكور في العنوان (, ‎ov‏ جم؛ النقاء البصري ‎A‏ 4م ).+ تم تحديد النقاء البصري تحث ظروف تحليل ‎HPLC‏ ؟. وقت احتجاز الصورة (6*ا) ‎١١,١‏ دقيقة؛ وقت احتجاز الصورة (5) ‎١4‏ دقيقة. الدوران البصري النسبي ناله] ‎(Yo MeOH ٠,١ Y=¢)°¥Y, a+‏ ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.08 (1H, s), 7.66 (1H, s), 7.58-7.56 ١٠‏ ‎(1H, m), 7.32-7.30 (1H, m), 7.25-7.22 (4H, m), 7.12 (1H, br s), 6.96‏ ‎(1H, brs), 6.87 (1H, d,J = 2.3 Hz), 4.38 (1H, s), 4.14 (2H, t, J = 7.2‏ ‎Hz), 1.85 (2H, t, J = 7.2 Hz), 1.78 (3H, s), 1.78 (3H, s), 1.17 (6H, s).‏ قياس التحليل العنصري ‎Ye‏ نتائج التحليل العنصري المتوافق جيدا مع القيمة النظرية من مركب (7ح) المحسوبة. محسوب: ‎«N¢o JA Heed AAC‏ الا (محسوب كمونو هيدرات) موجود: ‎«(Neo ve Heed AC‏ م الخطوة ‎١١‏ ‎CER!‏

_ جم ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-‏ ‎methylpropanamide‏ (مركب ‎((Y)‏ ‎GH CH‏ ‎he 3 Mh He] © NH‏ م ‎a‏ ‎H20 2‏ - 7 ‎vse HC.

CH, ve HC.

CH,‏ ‎ip IX SALA,‏ ‎OH OH‏ ‎FF FF‏ إلى: ‎2-{4-[(9R)-9-hydroxy—-2-(3-hydroxy—-3-methylbutyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-‏ ‎methylpropanamide monohydrate‏ (مركب ‎YV,TY) ((7Y)‏ جم) الذي تم الحصول عليه في الخطوة السابقة تمت إضافة تولوين (0٠؛؟‏ مل). تم تقليب خليط التفاعل عند درجة حرارة حمام ‎٠‏ | زيت بمقدار ١٠١٠م‏ لمدة ساعتين في جو نيتروجين مع إزالة ماء بواسطة جهاز ‎.Dean-Stark‏ ‏تم أيضا تقليب خليط التفاعل عند درجة حرارة حمام زيت بمقدار ١7م‏ لمدة ساعة ونصف؛ تم السماح بالتبريد إلى درجة حرارة الغرفة؛ وتم التقليب طوال الليل. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل بتولوين ‎٠٠١(‏ مل). تم تجفيف المادة الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ؟ أيام ؛ وأيضا تم التجفيف تحت ضغط مخفض ‎١‏ عند ١٠٠2م‏ لمدة يوم لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎7٠,9(‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 8: 8.08 (1H, s), 7.66 (1H, s), 7.58-7.56‏ ‎(1H, m), 7.32-7.30 (1H, m), 7.25-7.22 (4H, m), 7.12 (1H, br s), 6.96‏ ‎(1H, br s), 6.87 (1H, d, J = 2.3 Hz), 4.38 (1H, s), 4.14 (2H, t, J = 7.2‏ ‎Hz), 1.85 (2H, t, J = 7.2 Hz), 1.78 (3H, s), 1.78 (3H, s), 1.17 (6H, s).‏ ‎IRS‏

قياس التحليل العنصري نتائج التحليل العنصري المتوافق جيدا مع القيمة النظرية من مركب )7( المحسوب. محسوب: ‎C‏ زب ‎٠7‏ ديلا 0 ألم (محسوب كمركب لامائي) موجود: ‎A, ¢VN¢o 1 Hey ) v.C‏ ‎o‏ الخطوة ج-٠‏ تحضير ‎N-(4-tert-butylbenzyl)cinchonidium bromide‏ ‎Ng EN‏ ‎HO HO H‏ ‎ion Ho _‏ ‎J Topo‏ ‎LZ pe CH,‏ ‎N N‏ ‎on,‏ ‏تمت إذابة سينكونيدين ‎V+,7) Cinchonidine‏ جم) في تترا هيد روفيروان ‎tetrahydrofuran‏ ‎(aa ٠١١( 4-tert-butylbenzylbromide «(Je Y+ +)‏ و تمت إضافة تترا بيوتيل أمونيوم ‎٠‏ يوديد ‎tetrabutylammonium‏ (11, جم) ؛ وتم تقليب الخليط عند ‎٠‏ لام طوال الليل. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ تم جمع المادة الصلبة بواسطة الترشيح؛ وتم الغسل بإيثيل أسيتات )04 مل). تم تجفيف ‎sald)‏ الصلبة التي تم الحصول عليها تحت ضغط مخفض طوال الليل لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎١8,5(‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.99 (1H, d, J = 4.4 Hz), 8.27 (1H, ٠‏ ‎J =8.2 Hz), 8.11 (1H, dd, J = 8.5, 1.0 Hz), 7.89-7.79 (2H, m), 7.78- ١٠‏ ‎(1H, m), 7.63 (2H,d, J = 8.4 Hz), 7.59 (2H, t, J = 8.4 Hz), 6.72‏ 7.71 ‎(1H, d, J = 4.2 Hz), 6.57-6.51 (1H, brs), 5.67 (1H, ddd, J = 17.0, 10.4,‏ ‎Hz), 5.14 (1H, d, J = 17.2 Hz), 5.08 (1H, d, J = 12.6 Hz), 5.00-4.90‏ 6.4 ‎(2H, m), 4.30-4.18 (1H, m), 3.91 (1H, t, J = 8.7 Hz), 3.74-3.64 (1H,‏ ‎CARY‏

‎h —‏ جم ‎m), 3.35-3.18 (2H, m), 2.76-2.65 (1H, m), 2.18-1.94 (3H,m), 1.90-‏ ‎(1H, m), 1.40-1.22 (1H, m), 1.34 (9H, s).‏ 1.78 ‎Y—z shall‏ تحضير ‎N-(4-tert-butylbenzyl)cinchonidium 4-methoxyphenoxide‏ ‎Ny EN Pp .‏ ‎HO 1 HO +‏ ‎Ho : Ho‏ ب© ‎(oN ee‏ - ‎CH bz CH‏ 2 ‎N 3 N 3 0‏ ‎CH, oH, oH os 8‏ تمت إضافة ‎YA,©) N—(4-tert-Butylbenzyl)cinchonidium bromide‏ >=(« ‎AMBERLYST‏ (علامة مسجلة) ‎Yi‏ (راتنج تبادل أيوني قاعدي ‎basic ion exchange‏ ‎resin‏ قوي من ستيرين ‎«styrene‏ مصفوفة داي فينيل بنزين ‎divinylbenzene matrix‏ ) ‎YA, 0)‏ جم) ‎(Jo YAY) methanol gli‏ ؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة طوال أ الليل. ثم ترشيح المادة غير القابلة ‎Jall‏ خلال سيليت 3 ‎as‏ الغسل مع ميثانول ) ‎(Je ٠١‏ . إلى ناتج الترشيح تمت إضافة ‎4-methoxyphenol‏ (5,8 جم)؛ وتم تبخير المذيب. تم تبخير المادة المتبقية بشكل لا تقطيري ‏ مرات بتولوين ‎٠٠١(‏ مل)؛ وتولوين ‎Yo)‏ مل) تمت إضافة. بعد ذلك؛ تمت إضافة داي أيزو بروبيل إيثر ‎(Je Yo 0) diisopropyl ether‏ على قطرات؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة ‎Vaal‏ ساعات. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح؛ ‎Vo‏ تم الغسل مع داي أيزو بروبيل إيثر ‎(Je 5 ١(‏ وتم تجفيف الخليط تحت ضغط مخفض عند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎TVA)‏ جم). ‎1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.91 (1H, d, J = 4.4 Hz), 8.17 (1H, d,‏ ‎J = 8.2 Hz), 8.07 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.89 (1H, d, J = 4.4 Hz), 7.79‏ ‎(1H, t, J = 7.6 Hz), 7.64 (1H, t, J = 7.5 Hz), 7.57-7.52 (5H, m), 6.56~‏ ‎(2H, m), 6.43-6.42 (3H, m), 5.67-5.59 (1H, m), 5.28 (1H, d, J = ٠٠‏ 6.55 ‎Hz), 5.12 (1H, d, J = 17.2 Hz), 4.92 (1H, d, J = 10.6 Hz), 4‏ 12.1 ١ه‏

ل جم ‎(1H, d, J = 12.1 Hz), 4.65-4.53 (1H, m), 3.80 (1H, t, J = 8.8 Hz), 3.65-‏ ‎(1H, m), 3.57 (3H, s), 3.25 (1H, t, J = 11.6 Hz), 3.10-3.07 (1H,‏ 3.63 ‎m), 2.67 (1H, brs), 2.07-2.02 (2H, m), 1.95 (1H, brs), 1.79-1.76 (1H,‏ ‎br m), 1.33 (9H, s), 1.16-1.11 (1H, m).‏ © الخطوة د تحضير ‎3-hydroxy-3-methylbutyl toluene-4-sulfonate‏ ‎H.C ENP‏ : ,4 ‎Al me H3C CH3‏ “ع الح يا ‎I‏ ‏بن تسد صو حصي في جو نيتروجين؛ تمت إذابة ‎Yer) 3-methylbutane—1,3-diol‏ جم) في بيريدين ‎50٠١( pyridine‏ مل)؛ ومحلول من ‎of 4-methylbenzenesulfonyl chloride‏ )+ + © جم) ‎٠‏ في تولوين )400 ‎(Je‏ وأسيتونيتريل ‎(Je Y YO) acetonitrile‏ تمت إضافة على قطرات على مدار ساعتين. تم تقليب خليط التفاعل عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ؛ ساعات؛ وتولوين ‎ov)‏ ‏مل) وتمت إضافة ماء )+ ‎(Jo YA‏ للسماح بفصل الطبقات. تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع مع حمض كبريتيك مائي 8010 ‎sulfuric‏ 8006015 وماء (مرتين). تم تبخير المذيب في الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها؛ وتم تبخير المادة المتبقية بشكل لا ‎٠‏ تقطيري بتولوين )000 ‎(Jo‏ لإعطاء المركب المذكور في العنوان )270 جم). ‎1H-NMR (CDCI3) 8: 7.81-7.76 (2H, m), 7.36-7.31 (2H, m), 4.20 (2H,‏ ‎td, J = 6.8, 1.6 Hz), 2.44 (3H, s), 1.85 (2H, td, J = 6.8, 1.6 Hz), 1.33‏ ‎(1H, s), 1.21 (6H, s).‏ المثال ‎Y‏ ‎A Yo‏ تخليق : ١ه‏

م جم ‎2—-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—(4-hydroxy—-4-methylpentyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-‏ ‎methylpropanamide‏ (مركب )¥(( الخطوة ‎١‏ ‎Ethyl 4-[(9R)-4-chloro-9-hydroxy-9-(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2- ©‏ ‎yloxy]butyrate‏ ‎Cl Cl‏ والا# حا ‎OH 8 [> 0 Ny‏ 0 0 : ض : ‎OH e OH 0‏ ‎FF F‏ تم إذابة ‎Y + +) (9R)—-4-Chloro-9—(trifluoromethyl)-9H-fluorene-2,9—diol‏ ملجم) الذي تم الحصول عليه في الخطوة ‎٠١‏ وفقا للمتال ‎١‏ في ‎N,N-dimethylformamide‏ )¥ ‎Vo‏ مل)؛ كربونات بوتاسيوم ‎١85(‏ ملجم) وتمت إضافة ‎Veo) ethyl 4-bromobutyrate‏ ميكرو لتر)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ‎١‏ ساعات. إلى خليط التفاعل تمت إضافة ماء؛ وتم استخلاص الخليط مرتين بإيثيل أسيتات. تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع بماء (مرتين) وبراين مشبع. تم تجفيف الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم ‎(WY‏ ثم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وثم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. ‎١5‏ تمت تنقية المادة المتبقية التي تم الحصول عليها بواسطة عمود كروماتوجراف جل سيليكا (تم استخدام خليط من هكسان ‎ily‏ أسيتات كشطافة مذيب؛ مشطوف أولا مع خليط عند معدل خلط ‎5١‏ (هكسان:إيثيل أسيتات)؛ بعد ذلك بالتتابع مع خليط عند معدل خلط ١:؛‏ وأيضا مع خليط عند معدل خلط ‎(V2)‏ لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎YAY)‏ ملجم). ‎1H-NMR (400MHz, CDCI3) 6: 8.19 (1H, d, J = 7.7 Hz), 7.66 (1H, d, J =‏ ‎Hz), 7.46 (1H, td, J = 7.6, 1.0 Hz), 7.32 (1H, td, J = 7.6, 1.0 Hz), ٠‏ 7.7 ‎(1H, brs), 6.93 (1H, d, J = 2.1 Hz), 4.14 (2H, q, J = 7.1 Hz), 4.05‏ 7.16 ١ه‏

‎q —‏ جم ‎(2H, t, J = 7.1 Hz), 2.82 (1H, s), 2.50 (2H, t, J = 7.1 Hz), 2.15-2.06‏ ‎(2H, m), 1.25 (3H, t, J = 7.1 Hz).‏ الخطوة ‎Y‏ ‎(9R)-4-Chloro—2-(4-hydroxy—4-methylpentyloxy)-9—(trifluoromethyl)—‏ ‎9H-fluoren-9-ol ©‏ ‎ve oe‏ ‎gest ,‏ ما سه ‎C10)‏ ‎oY . 0 Sa‏ 3 1 ‎Fk FE‏ في جو نيتروجين؛ تمت إذابة : ‎ethyl 4-[(9R)-4-chloro-9-hydroxy-9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren-2-‏ ‎Y4V) yloxy]butyrate‏ ملجم) في ‎THE‏ )¥ مل)؛ وتمت إضافة محلول ميثيل ليثيوم ‎methyllithium | ٠‏ /داي (يثيل إيثر ‎٠,١7( diethyl ether‏ مولارء 7,7 ‎(Je‏ على قطرات عند ٠م.‏ تم تقليب خليط التفاعل عند نفس درجة الحرارة لمدة ساعتين» ماء تمت إضافة؛ وتم استخلاص الخليط بإيثيل أسيتات (مرتين). تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع بماء (مرتين) وبراين مشبع. تم تجفيف الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم ‎(WY‏ ثم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وثم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. ‎Vo‏ تمت تنقية ‎sald)‏ المتبقية التي تم الحصول عليها بواسطة عمود كروماتوجراف جل سيليكا (تم استخدام خليط من هكسان وإيثيل أسيتات كشطافة مذيب؛ مشطوف أولا مع خليط عند معدل خلط ‎Yi)‏ (هكسان:إيثيل أسيتات)؛ بعد ذلك مع خليط عند معدل خلط ‎)7:١‏ لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎١19(‏ ملجم). ‎1H-NMR (400MHz, CDCI3) &: 8.19 (1H, d, J = 7.7 Hz), 7.66 (1H, d, J =‏ ‎Hz), 7.47 (1H, td, J = 7.7, 1.0 Hz), 7.32 (1H, td, J = 7.7, 1.0 Hz), ٠‏ 7.7 ‎(1H, brs), 6.93 (1H, d, J = 2.3 Hz), 4.02 (2H, t, J = 6.4 Hz), 2.82‏ 7.17

‎-1١ «=‏ ‎(1H, s), 1.92-1.85 (2H, m), 1.65-1.62 (2H, m), 1.26 (3H, s), 1.25 (3H,‏ :)5 الخطوة ‎١‏ ‎Ethyl 2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—(4-hydroxy-4-methylpentyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionate ©‏ ‎CH‏ ‏لم ‎CH, OH‏ نه | ‎po Ho.‏ ول ‎Hej 0 3‏ م م من 7 / ‎a‏ ‏جيب + ‎eo) oN hy 58‏ ‎oi‏ ]2 م27 ‎CH‏ راز ان اسم ‎so oon Fy oT‏ ‎CH, CH, 2 001 HG CH,‏ في جو أرجون؛ تمت إذابة ‎(9R)-4~chloro-2~(4-hydroxy—4-methylpentyloxy)—9—‏ ‏ا0--911-100160-9- ‎(trifluoromethyl)‏ (5 5 ملجم) في ‎١ ©) 1,4-dioxane‏ مل)؛ ‎ethyl 2-methyl-2-[4—(4,4,5,5-tetramethyl[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-1H-‏ ‎(pak Y4¢) pyrazol-1-yl]propionate ٠‏ ماء )0+ مل)؛ ‎ghd‏ بوتاسيوم فوسفات ‎YYA) tripotassium phosphate‏ ملجم)؛ بالاديوم أسيتات )4 ملجم)؛ وتمت إضافة ‎SPhos‏ ‎YY)‏ ملجم)؛ وتم تقليب الخليط عند ١٠٠2م‏ لمدة ؛كساعات ونصف. تم تبريد خليط التفاعل إلى درجة حرارة الغرفة؛ ماء تمت إضافة؛ وتم استخلاص الخليط بإيثقيل أسيتات (مرتين). تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع بماء (مرتين) وبراين مشبع. تم تجفيف الطبقة ‎Vo‏ العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. تمت تنقية المادة المتبقية التي تم الحصول عليها بواسطة عمود كروماتوجراف جل سيليكا (تم استخدام خليط من هكسان وايثيل أسيتات عند معدل خلط ‎٠:١‏ ‏(هكسان:إيثيل أسيتات) كشطافة مذيب) لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎7١8(‏ ملجم). ‎1H-NMR (400MHz, CDCI3) &: 7.69 (1H, s), 7.63-7.62 (2H, m), 7.21-‏ ‎(4H, m), 6.81 (1H, d, J = 2.3 Hz), 4.21 (2H, q, J = 7.1 Hz), 4.04 ٠‏ 7.19 ‎IRS‏

‎h \ —_‏ _ ‎(2H, t, J = 6.3 Hz), 2.82 (1H, s), 1.92 (3H, s), 1.91 (3H, s), 1.89-1.88‏ ‎(2H, m), 1.66-1.64 (2H, m), 1.26 (6H, s), 1.26-1.23 (3H, m).‏ ‎35d)‏ ¢ ‎R)-9-Hydroxy—-2-(4-hydroxy—4-methylpentyloxy)-9-4)]-¢}-¥‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}~2-methylpropionic ©‏ ‎acid‏ ‏م “رن ‎H.C CH,‏ ‎a NH 0‏ ‎P Vi‏ / ‎Yeo 0 ay 0‏ ‎ST ١ CE‏ 3 3 ع ‎OH HL CH,‏ ع ‎F‏ ‏تمت إذابة : ‎Ethyl 2-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—(4-hydroxy-4-methylpentyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropionate ٠‏ ‎(pale TVA)‏ في إيثانول ‎Y,T)‏ مل)؛ تمت إضافة ؛ عياري من هيدروكسيد صوديوم مائي ‎YY)‏ ‏ميكرو لتر)ء وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل. تمت معايرة خليط التفاعل ب ‎١‏ عياري من حمض هيدروكلوريك؛ وتم الاستخلاص بإيثيل أسيتات (مرتين). تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع بماء (مرتين) وبراين مشبع. تم تجفيف الطبقة العضوية ‎Vo‏ التي تم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج ‎mud ill‏ لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎YY)‏ ملجم). ‎1H-NMR (400MHz, CDCI3) &: 7.73 (1H, s), 7.68 (1H, s), 7.63-7.62‏ ‎J =‏ ,ا ‎(1H, m), 7.23-7.09 (4H, m), 6.78 (1H, d, J = 2.6 Hz), 4.02 (2H,‏ ‎Hz), 1.93 (6H, s), 1.89-1.86 (2H, m), 1.65-1.61 (2H, m), 1.25 (6H,‏ 6.3 ‎Yo‏ . (5 ‎IRS‏

‎h \ —_‏ _ الخطوة © ‎2-{4-[(9R)-9-Hydroxy-2—-(4-hydroxy-4-methylpentyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl) -9H-fluoren—4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}-2-‏ ‎methylpropanamide‏ (مركب )¥(( ليا الي ‎ob‏ ‎ph 0‏ إل ب 0 / ‎oN (I) 0‏ بس ‎F—¢"% "A on HC CH‏ ‎OH HC CH, F 3 3‏ ‎F 8‏ اع في جو نيتروجين؛ تمت إذابة : ‎2—-{4-[(9R)-9-hydroxy-2—(4-hydroxy—-4-methylpentyloxy)-9-‏ ‎(trifluoromethyl)-9H-fluoren-4-yl]-1H-pyrazol-1-yl}~2-methylpropionic‏ ‎Ad) acid‏ ملجم) في ‎«(d= ١( N,N-dimethylformamide‏ أمونيوم كلوريد ‎ammonium‏ ‎YA) chloride ٠‏ ملجم)ء ‎١ £A) N,N-diisopropylethylamine‏ ميكرو لتر) و تمت إضافة -1 ‎[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3~triazolo[4,5-b]pyridin—1-ium 3-‏ ‎(oxide hexafluorophosphate (HATU‏ )44 ملجم)؛ وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة طوال الليل. إلى خليط التفاعل تمت إضافة ماء؛ وتم استخلاص الخليط بإيثيل أسيتات (مرتين). تم غسل الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها بالتتابع مع تم التخفيف براين (مرتين) ‎VO‏ وبراين مشبع. تم تجفيف الطبقة العضوية التي تم الحصول عليها على سلفات مغنيسيوم لامائي؛ تم ترشيح المادة غير القابلة للحل؛ وتم تبخير المذيب في ناتج الترشيح. تمت تنقية المادة المتبقية التي تم الحصول عليها بواسطة كروماتوجراف رقيق الطبقة من جل سيليكا (تم استخدام خليط من كلوروفورم وميثانول عند معدل خلط ‎9:١‏ (كلوروفورم ‎chloroform‏ : ميثانولا00610800 ( كشطافة مذيب) لإعطاء المركب المذكور في العنوان ‎£A)‏ ملجم؛ النقاء البصري 7,5 6.6969.). ال

م تم تحديد النقاء البصري تحت ظروف تحليل ‎HPLC‏ ؟. وقت احتجاز الصورة ‎١١١ (R)‏ دقيقة؛ وقت احتجاز الصورة (5) ‎١4,4‏ دقيقة. الدوران البصري النسبي 00[ه] +4-0(*97,5 ‎(Ye MeOH ٠.‏ 1H-NMR (400MHz, DMSO-D6) 6: 8.07 (1H, s), 7.66 (1H, s), 7.57-7.55 (IH, m), 7.34-7.31 (1H, m), 7.24-7.23 (3H, m), 7.18 (1H, s), 7.11 (1H, =» brs), 6.94 (1H, brs), 6.86 (1H, d, J = 2.3 Hz), 4.16 (1H, s), 4.03 (2H, ‏ا‎

J = 6.5 Hz), 1.80 (3H, s), 1.79 (3H, s), 1.80-1.75 (2H, m), 1.51-1.47 (2H, m), 1.11 (6H, s). )3( ‏التحضيري لبلور من مركب‎ Jil ‎٠‏ إلى مركب ‎(pale £4) (F)‏ مخلق بواسطة الخطوات المثالية المذكورة أعلاه تمت إضافة خليط من ‎MeOH‏ وماء (نسبة حجم ‎١:7‏ )0,+ مل)). بعد ذلك؛ إلى هذا المحلول تمت إضافة بلورة )1,0 ‎(pale‏ من مركب (7ح) وتم تقليب الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة ؟ أيام. تم جمع المادة الصلبة المترسبة بواسطة الترشيح لإعطاء بلور )£1 ملجم) من مركب )7( تحضير المركبات (أ)» (ب)» (ج) 93( ‎Vo‏ .تم الحصول على المركب ‎of)‏ المركب (ب)؛ المركب (ج) والمركب (د)؛ الممثلة بواسطة الصيغ التالية؛ تم الحصول عليها كصور نشطة بصريا وفقا لطريقة الإنتاج الموضحة في الطلب الدولي ‎٠١٠١ EVVEA‏ . ‎CARY

0 ‏ل‎ NH 1 ‏ل‎ +] 2 ay ‏ملا‎ ‎HO ped wh en

Ho ‏الست‎ ٍ 1 6.

AN wl

Foe

EN OH

F

() ‏مركب‎ ‎JKHJKH 2-(4-{(9R)-9-Hydroxy-2-[2—-(3-hydroxyadamantan—1- yl)ethoxy]-9—(trifluoromethyl)-9H-fluoren—4-yl}-1H-pyrazol-1- yl)acetamide °

Cris

M, MN 0 &

HO 0

H3C ‏آل امسج‎ =f) he ‏نا ادا‎ 3¢ ‏ال‎ ‎2 OH ‏ع‎ ‏مركب (ب)‎ (9R)—-2—(2-Hydroxy-2-methylpropoxy)—4—(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)- 9— (trifluoromethyl) -9H—-fluoren-9-ol

اج أ — ‎oH‏ ‎N >‏ ~~ و الاي ب ‎HO‏ ‎TY‏ ادا ال : ال 1 ‎TN MN‏ اطع ‎SN‏ باط ‎F "OH‏ 5ح مركب (ج) ‎(9R)-4-[1-(2-Hydroxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl]-2-(2-hydroxy-2-‏ ‎methylpropoxy)-9- (trifluoromethyl) -9H-fluoren-9-ol‏ 0 ‎H=C Ruy‏ ا مين ‎3C‏ ‎Noy 2‏ 36 ‎A‏ ‎J FN‏ فى ‎a‏ له م الع ‎F.o%‏ ‎Ho‏ ا ‎F F‏ ‎lo}‏ ‏مركب 3( ‎2—-{4-[(9R)-2-Fluoro-9-hydroxy-9—(trifluoromethyl)-9H—-fluoren—4-yl]-‏ ‎1H-pyrazol-1-yl}-2-methylpropanamide‏ ‎JES‏ على الصيغة وفقا للاختراع الحالي؛ يمكن ذكر المستحضر التالي. مع ذلك؛ لم يتم تقييد ‎٠‏ الاختراع الحالي بواسطة هذه الأمثلة الخاصة بالصيغ. الصيغة المثالية ‎١‏ (إنتاج كبسول) ‎)١‏ مركب وفقا للمثال ‎١‏ (مركب ‎pale Vo ))١(‏ ال

-؟؟- ") سيليلوز بلوري دقيق ‎pale ٠١‏ ‎)٠‏ لاكتوز ملجم ¢ ( ستيرات مغنيسيوم ‎١‏ ملجم يتم خلط ١)؛ ‎(V oY‏ £5( وملؤها في كبسول جيلاتين. © الصيغة المثالية ¥ (إنتاج قرص) ‎)١‏ مركب وفقا للمثال ‎١‏ (مركب ‎٠١ ))١(‏ جم ‎)١‏ لاكتوز ‎mor‏ ‏0 نشا الذرة ‎Yo‏ جم ؛) كارميلوز كالسيوم ‎carmellose calcium‏ ؛ ؛ جم أ 5 ( ستيرات مغنيسيوم ‎١‏ جم يتم عجن الكميات الكلية ل ‎oY 1 ١‏ ّ( و١٠‏ جم من ¢ ( بماء؛ ‎As‏ التجفيف بالتفريغ؛ ‎As‏ ‏النخل. يتم خلط المسحوق المنخول مع ‎VE‏ جم من 4) و١‏ جم من ©( ويتم ضغط الخليط ‎dad gs‏ ماكينة صنع أقراص . بهذه الطريقة يتم الحصول على ‎٠١‏ قرص كل منها يحتوي على ‎٠‏ ملجم من مركب المثال ‎١‏ (مركب ‎((Y)‏ لكل قرص يتم الحصول عليه. ‎١‏ التجربة المثالية ‎:١‏ الأثر التثبيطي لنشاط ‎PDHK‏ في المعمل تم تقييم الأثر التثبيطي لنشاط ‎PDHK‏ بشكل غير مباشر بواسطة قياس نشاط ‎PDH‏ المتبقي بعد تفاعل كيناز في وجود مركب اختباري. (الأثر التثبيطي لنشاط ‎(PDHK1‏ ‏في حالة 00011161 البشري ‎chPDHKI)‏ رقم الوصول إلى بنك الجينات رقم ‎¢(L42450.1‏ تم ‎Yo‏ عزل ‎٠,7‏ كيلو زوج قاعدي من شظية ترقم هذا البروتين من ‎CDNA‏ لكبد بشري بواسطة تفاعل سلسلة بوليمراز ‎cDNA hPDHK] .polymerase chain reaction (PCR)‏ المعدل ‎dua‏ ‏١ه‏

‎h 7 _‏ _ تمت إضافة متوالية ‎FLAG-Tag‏ إلى الطرف ‎N‏ والذي تم تحضيره بواسطة ‎PCR‏ وتم استنساخه إلى ناقل (01175-11078980). تم تحويل بنية ناتج عودة الارتباط الجيني إلى إشريكية قولونية ‎(DHS5a-TOYOBO)‏ .25 تحديد مستنسخات ناتج ‎sage‏ الارتباط الجيني»؛ وتم عزل ‎DNA‏ وتم إخضاعه إلى تحليل متوالية ‎DNA‏ تم اختبار مستنسخ كان متوقع أن يحتوي على 0 الحمض النووي للعمل الخاص بالتعبير. للتعبير عن نشاط 001011161؛ تم تحويل ‎WIA‏ إشريكية قولونية من السلالة ‎cells BL2I(DE3)‏ ‎(Novagen)‏ مع الناقل 01175 تحتوي على ‎hPDHK] cDNA‏ معدل. تم نمو الإشريكية القولونية إلى كثافة بصرية ,+ ) ‎Tew‏ نانو مول/لتر) عند + لم . ثم تحفيز التعبير عن البروتين بواسطة إضافة ‎٠0٠‏ ميكرو مول/لتر من أيزو بروبيل -]-ثيو جالاكتو بيرانوسيد-الام10م500أ ‎٠‏ 8005006/ا8-111098180100. تمت زراعة الإشريكية القولونية عند ١٠م‏ لمدة © ساعات وتم جمعها بواسطة الطرد المركزي. تم إضطراب محلول معاد تشتيته من معجون الإشريكية القولونية بواسطة مادة تمييع دقيقة. تمت تنقية البروتين المرقم ب ‎FLAG was‏ باستخدام جل ارتباط ‎FLAG‏ ‎.(Sigma)‏ ‏تم غسل الجل ب ‎٠١‏ مل مول/لتر من : ‎N-(2-hydroxyethyl)piperazine—-N’-2-ethanesulfonic acid-sodium ١٠‏ ‎,hydroxide (HEPES-NaOH)‏ 80 مل مول/لتر صوديوم كلوريد ‎96١ « sodium chloride‏ إيثيلين جليكول ‎ethylene‏ ‎glycol‏ ؛ و ‎700,١‏ من بوليمر مشترك كتلي من ‎polyoxyethylene—polyoxypropylene‏ ‎«Pluronic F-68)‏ رقم هيدروجيني ‎as «(A ٠‏ شطف بروثين الربط 2 ‎٠٠‏ مل مول/لتر من ‎٠٠١ 05-80 Yo‏ ميكرو جم/مل من ببثيد ‎Own peptide FLAG‏ مل مول/لتر من كلوريد صوديوم ‎90١ ¢ sodium chloride‏ إيثيلين ‎ethylene glycol Silas‏ و 760,1 ‎Pluronic F-68‏ (رقم هيدروجيني ‎(Av‏ ‏تم نقل الشظايا المشطوفة التي تحتوي على البروتين المرقم ب ‎(FLAG‏ وتمت ديلزتها في مقابل ‎Yo‏ ‏مل مول/لتر من ‎Yoo (HEPES-NaOH‏ مل مول/لتر كلوريد صوديوم» ‎٠١,5‏ مل مول/لتر من ‎CER!‏

“A 961١ «ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) ‏إيثيلين داي أمين تترا حمض أسيتيك‎ ‏عند‎ OA = ‏(رقم هيدروجيني ٠.8)؛ وتم الحفظ عند‎ Pluronic 7-68 960,١ se Sila ‏إيثيلين‎ ‏من نشاط تثبيط‎ 964٠ ‏الفحعض»؛ تم تحديد تركيز إنزيم 700441 عند أقل تركيز محدد على‎ .PDH ‏وتم‎ (porcine heart PDH complex, Sigma P7032) PDH ‏تم خلط 00 + وحدة/مل‎ © 3- ‏مل مول/لتر من‎ 50١( ‏ميكرو جم/مل 7000111641 في محلول منظم‎ ٠,١ ‏خلط‎ ‏مل مول/لتر من داي‎ ٠١ ؛)7.٠ ‏(رقم هيدروجيني‎ morpholinopropane sulfonic acid ‏مل مول/لتر‎ ٠١ « dipotassium hydrogen phosphate ‏بوتاسيوم هيدروجين فوسفات‎ magnesium ‏؛ ¥ مل مول/لتر من كلوريد مغنيسيوم‎ potassium chloride ‏بوتاسيوم كلوريد‎ ‏؟ مل مول/لتر داي ثيو‎ Pluronic F-68 960,7 (EDTA ‏مل مولالتر‎ +,¢ « chloride ٠ ‏)؛ وتمت حضانة الخليط عند ؛"م طوال الليل للحصول على معقد‎ dithiothreitol ‏ثريتول‎ ‎.PDH/hPDHK1 ‏تمت‎ dimethyl sulfoxide (DMSO) ‏تم تخفيف المركبات الاختبارية بداي ميثيل سلفوكسيد‎ ‏ميكرو لتر) و 7؟*5,؟‎ ١,*( ‏ميكرو لتر)؛ المركب الاختباري‎ Yo) 1011/701011161 ‏إضافة معقد‎ 16 ‏ميكرو لتر) إلى طبق دقيق به‎ AO ‏(تم التخفيف مع محلول منظم؛‎ ATP ‏ميكرو مول/لتر‎ 10 ‏وتم إجراء تفاعل‎ (Corning 3679( ‏عين شفاف 22330 فوق البنفسجية له نصف مساحة‎ ‏ميكرو لتر) إلى‎ 1,0) DMSO ‏دقيقة. تمت إضافة‎ £0 saa ‏عند درجة الحرارة الغرفة‎ PDHK ‏تمت‎ PDH ‏أعين المقارنة بدلا من المركب الاختباري. من أجل تحديد أقصى معدل لتفاعل‎ ‏ميكرو لتر) إلى أعين نموذجية بدلا من المركب الاختباري في غياب‎ ٠,5( DMSO ‏إضافة‎ ‎.hPDHK1 ٠ sodium ‏ميكرو لتر من الركائز )© مل مول/لتر صوديوم بيروفات‎ ٠١ ‏بعد ذلك؛ تمت إضافة‎ ‏مل مول/لتر ثيامين‎ © (NAD ‏مل مول/لتر‎ VY (A ‏مل مول/لتر إنزيم مشترك‎ © » pyruvate ‏مخفف بمحلول منظم). تمت حضانة الخليط عند‎ ¢ thiamin pyrophosphate ‏بيروفوسفات‎ ‏المتبقي.‎ PDH ‏درجة الحرارة الغرفة لمدة 0 دقيقة؛ وتم قياس نشاط‎ ه١‎

‎h q —_‏ _ تم قياس الامتصاص عند ‎TE‏ نانومتر قبل وبعد تفاعل ‎PDH‏ باستخدام قارئ طبق دقيق للكشف عن ‎NADH‏ ناتج بواسطة تفاعل ‎.PDH‏ تم حساب معدل تثبيط 01011161 )%( للمركب الاختباري من الصيغة [((نشاط ‎PDH‏ للمركب الاختباري - نشاط ‎PDH‏ للعينة الضابطة) / نشاط ‎PDH‏ للعين النموذجية - نشاط ‎PDH‏ للعينة الضابطة)) ‎.]٠٠١ x‏ تم حساب قيمة 1050 من © تركيزات المركب الاختباري عند نقطتين تتضمن ‎٠‏ %0 من تثبيط نشاط 55011161. ثم توضيح النتائج التي ثم الحصول عليها باستخد ‎a‏ مركب ) ‎Y‏ ( ؛ مركب ) ‎Y‏ ح ومركب )7( كمركبات اختبارية في الجدول التالي ‎.١‏ ‏الأثر التثبيطي لنشاط ‎PDHK?2‏ ‏في حالة ‎PDHK2‏ البشري ‎chPDHK2)‏ رقم الوصول إلى بنك الجينات رقم 580040478.1)؛ ‎٠‏ تتم تعديل ‎cDNA hPDHK2‏ حيث تمت إضافة متوالية ‎FLAG-Tag‏ إلى الطرف لا لمستنسخ ‎(pPReceiver-MO1/PDK2-GeneCopoeia) cDNA hPDHK2‏ المحضر بواسطة ‎PCR‏ ‏وتم الاستنساخ إلى ناقل ‎L(PET17b—-Novagen)‏ تم تحول بنية ناتج عودة الارتباط الجيني إلى الإشريكية القولونية ((001150-1©070860). تم تحديد مستنسخات ناتج عودة الارتباط الجيني؛ وتم عزل بلازميد ‎DNA‏ وتم إخضاعه إلى تحليل متوالية ‎DNA‏ تم اختيار أحد المستسخات التي ‎Vo‏ تضمنت متوالية الحمض النووي المتوقعة لعمل التعبير. للتعبير عن نشاط ‎chPDHK2‏ تم تحويل خلايا إشريكية قولونية من السلالة ‎BL2I(DE3)‏ ‎(Novagen)‏ بناقل 01175 يحتوي على ‎cDNA‏ 701011162 معدل. تم نمو الإشريكية القولونية إلى كثافة بصرية ,+ ) ‎Tew‏ نانو مول/لتر) عند ‎٠ ١‏ 5 . ثم تحفيز التعبير عن البروتين بواسطة إضافة ‎5.٠‏ ميكرو مول/لتر ‎isopropyl—p-thiogalactopyranoside‏ . تمت زراعة ‎٠‏ . الإشريكية القولونية ‎Escherichia coli‏ عند ٠7م‏ لمدة © ساعات وتم جمعها بواسطة الطرد المركزي. تم إضطراب محلول معاد تشتيته من معجون الإشريكية القولونية بواسطة مادة تمييع دقيقة. تمت تنقية البروتين المرقم ب ‎FLAG‏ باستخدام جل ارتباط ‎FLAG‏ تم ‎Jue‏ الجل مع ‎٠١‏ ‏مل مول/لتر ‎Owe «HEPES-NaOH‏ مل مول/لتر كلوريد صوديوم؛ ‎١‏ % إيثيلين جليكول؛ و 721 ‎Pluronic F-68‏ (رقم هيدروجيني ‎ahd As «(A ٠‏ بروثين الربط 2 ‎Yo‏ مل مول/لتر ‎CER!‏

Vm 76١ ‏مل مول/لتر كلوريد صوديوم»؛‎ 5٠٠ FLAG ‏ميكرو جم/مل ببتيد‎ ٠٠١ (HEPES-NaOH ‏تم نقع الشظايا المشطوفة‎ (Ar ‏(رقم هيدروجيني‎ Pluronic 7-68 960,١ ‏إيثيلين جليكول»؛ و‎

HEPES— ‏مل مول/لتر‎ ٠١ ‏وتمت ديلزتها في مقابل‎ FLAG ‏تحتوي على البروتين المرقم ب‎ ‏إيثيلين جليكول؛‎ 96١ EDTA ‏مل مول/لتر كلوريد صوديوم؛ 0,+ مل مول/لتر‎ Yor (NaOH ‏عند الفحص؛‎ LOA ‏وتم الإبقاء عليها عند‎ (Ar ‏(رقم هيدروجيني‎ Pluronic F-68 960.,١و‎ © تم ضبط تركيز إنزيم ‎hPDHK2‏ على ‎Ji‏ تركيز يعطي ‎969٠0‏ من نشاط التثبيط ‎PDH‏ ‏تم خلط 0.05 وحدة/مل من ‎+A PDH‏ ميكرو جم/مل 01011162 في محلول منظم )0 مل مول/لتر من ‎L 3-morpholinopropanesulfonic acid‏ (رقم هيدروجيني ‎Yo (Vr‏ مل مول/لتر من داي بوتاسيوم هيدروجين فوسفات ‎1٠١ « dipotassium hydrogen phosphate‏ ‎٠‏ مل مول/لتر بوتاسيوم كلوريد؛ ¥ مل مول/لتر من كلوريد مغنيسيوم؛ ‎+f‏ مل مول/لتر ‎EDTA‏ ‏و 960.7 ‎Pluronic F-68‏ ؟ مل مول/لتر من داي ‎of‏ ثريتول ‎(dithiothreitol‏ وتمت حضانة الخليط عند ؛*م طوال الليل للحصول على معقد 1011/01011162. تم تخفيف المركبات الاختبارية ب ‎.DMSO‏ تمت إضافة معقد ‎Yo) PDH/WPDHK2Y‏ ميكرو لتر)؛ المركب الاختباري )58,9 لتر) و 3,5 ميكرو مول/لتر ‎ATP‏ (تم التخفيف بمحلول منظم؛ 4,5 ميكرو لتر) ‎٠‏ إلى طبق دقيق به 976 عين شفاف للآشعة فوق البنفسجية له نصف مساحة» وتم إجراء تفاعل ‎PDHK‏ عند درجة الحرارة الغرفة لمدة £0 دقيقة. تمت إضافة ‎DMSO‏ )1,0 ميكرو لتر) إلى أعين المقارنة بدلا من المركب الاختباري. من أجل تحديد أقصى معدل لتفاعل ‎PDH‏ ؛ تمت إضافة ‎DMSO‏ )0,) ميكرو لتر) إلى أعين نموذجية بدلا من من مركب في غياب ‎.١0014/62‏ ‏بعد ذلك؛ ‎٠١‏ ميكرو لتر من ركيزة )© مل مول/لتر صوديوم ‎lisp‏ © مل مول/لتر من إنزيم ‎٠‏ مشترك ‎١١ (A‏ مل مول/لتر ‎(NAD‏ 5 © مل مول/لتر ثيامين بيروفوسفات؛ تم التخفيف مع محلول منظم). تمت حضانة الخليط عند درجة الحرارة الغرفة لمدة 0 دقيقة؛ وتم قياس نشاط ‎PDH‏ ‏المتبقي. تم قياس الامتصاص عند ‎Viv‏ نانومتر قبل وبعد تفاعل ‎PDH‏ باستخدام قارئ طبق دقيق للكشف عن ‎NADH‏ ناتج بواسطة لتفاعل ‎PDH‏ . تم حساب معدل نشاط ‎hPDHK2‏ )%( للمركب الاختباري من الصيغة [((نشاط ‎PDH‏ للمركب الاختباري - نشاط ‎PDH‏ للعينة الضابطة) ه١‎

/ نشاط ‎PDH‏ للعين النموذجية — نشاط ‎PDH‏ للعينة الضابطة)) ‎.]٠٠١ x‏ تم حساب ‎dad‏ ‎1C50‏ من تركيزات المركب الاختباري عند نقطتين تتضمن ‎٠‏ 965 من تثبيط النشاط 0011/62. ثم توضيح النتائج التي ثم الحصول عليه باستخدام مركب ) ‎(Y‏ ؛ مركب ) "ح)؛ مركب )7( ؛ مركب (أ)» مركب (ب)؛ مركب (ج) ومركب (د) كمركبات اختبارية في الجدول التالي ‎.١‏ ‏الجدول ‎١‏ ‎IC50 hPDHK2 IC50 hPDHK1‏ مركب (ميكرومول/لتر) (ميكرومول/لتر) التجربة المثالية ‎oY‏ فحص تنشيط ‎PDH‏ خارج الكائن الحي طريقة اختبارية تم تقييم ‎il‏ المركب الاختباري على نشاط ‎PDH‏ على النسيج. تم الكشف عن إنتاج ‎NADH‏ عبر نظام مقترن ب م-يودو نيترو تترا زوليوم فيوليت ‎iodonitrotetrazolium violet (INT)‏ لقياس

PDH Lia ٠ ه١‎

‏ذكور طبيعية إلى المجموعة الناقلة ومجموعة المركب‎ Dawley—Sprague ‏تم تعيين جرذان‎ ‏؛ © مل/كجم) أو‎ methylcellulose ‏من ميثيل سيليلوز‎ Sle ‏الاختباري. الناقل (960,5 محلول‎ ‏ساعة بعد الإعطاء؛ تم تعقيم الجرذان‎ Yoo ‏تم إعطاء المركب الاختباري إلى الجرذان. بعد © أو‎ ‏ملجم/كجم)؛‎ T+) sodium pentobarbital ‏بحقة في الغشاء البريتوني من صوديوم بنتوباربيتول‎ . epididymal adipose tissues, ll ‏وتم جمع شرائح الكبد والأنسجة الدهنية‎ ©

إلى شرائح الكبد تمت بسرعة إضافة 4 أحجام من محلول منظم متجانس مبردٍ بالتلج (*7,؛ مول/ل سكروز؛ © مل مول/لتزر ‎tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride‏ (رقم هيدروجيني 7,5" ‎١‏ مل مول/لتر . حمض ثنائي امين ايثيلين رباعي حمض الاسيتيك ‎«(EDTA)ethlene diamine tetra acetic acid‏ وتم تجانس الخليط باستخدام مجانس

‎٠‏ - بوليترون ‎Polytron homogenizer‏ تم طرد نواتج التجانس مركزيا عند 68٠<جم؛‏ 4م لمدة ‎٠‏ دقائق للحصول على المواد الطافية. تم طرد المواد الطافية مركزيا ‎١(‏ مل) عند ‎٠6٠٠٠٠0‏ تجم؛ ؛ثم لمدة ‎٠١‏ دقائق لجمع نواتج الترسيب. تم غسل نواتج الترسيب بواسطة ‎sale)‏ التعليق في المحلول المنظم للتجانس ‎١(‏ مل) وتم الطرد مركزيا بنفس الطريقة. تم تجميد نواتج الترسيب بنيتروجين سائل ‎liquid nitrogen‏ وتم التخزين عند -<0+ 28م كشظايا كبدية متقدرية.

‎١‏ إلى الأنسجة الدهنية؛ تمت بسرعة إضافة © أحجام من محلول تجانس منظم مبرد بالثلج؛ وتم تجانس الخليط باستخدام مجانس بوليترون. تم طرد نواتج التجانس مركزيا عند ‎٠٠١‏ تجم؛ ‎pf‏ ‏لمدة ‎٠١‏ دقائق للحصول على المواد الطافية. تم طرد المواد الطافية مركزيا ‎١(‏ مل) عند ‎Tew‏ كتجم؛ 24م لمدة ‎٠١‏ دقاثئق لجمع نواتج الترسيب. تم غسل نواتج الترسيب بواسطة إعادة التعليق في المحلول المنظم للتجانس ‎١(‏ مل) وتم الطرد مركزيا بنفس الطريقة. تم تجميد نواتج

‎Ye‏ الترسيب مع نيتروجين سائل وتم التخزين عند ‎PA‏ كشظايا نسيج دهني متقدري. تم تذويب الشظايا المتقدرة وتم تعليقها في المحلول المنظم للعينة ‎Yo)‏ ,+ مول/ل سكروز ‎٠١ 686‏ مل مول /لتر ‎tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride‏ (رقم هيدروجيني ‎ov (V,0‏ مل مول/لتر بوتاسيوم كلوريد ‎Vy potassium chloride‏ مل/لتر ‎Triton X=) 4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl-polyethylene glycol‏

‎ه١‎

اسل نشاط ‎PDH‏ لقياس نشاط ‎(PDH‏ تم خلط كميات متساوية من المعلق المتقدري ومحلول منظم تنشيط )° ‎A‏ مول/ل سكروزء ‎Yo‏ مل مول/لتر ‎tris(hydroxymethyl)aminomethane‏ ‏(رقم هيدروجيني ‎¢(V,0‏ © مل مول/لتر بوتاسيوم كلوريد ‎١ « potassium chloride‏ مل/لتر ‎(Triton 26-100‏ 4 مل مول/لتر كالسيوم كلوريد ‎«calcium chloride‏ 56 مل مول/لتر © كلوريد مغنيسيوم ‎٠١ « magnesium chloride‏ مل مول/لتر صوديوم داي كلورو أسيتات ‎(Sodium dichloroacetate‏ وتمت حضانة الخلائط عند ‎PTY‏ لمدة ‎٠١‏ دقائق. تم تخفيف أربعين ميكرولتر من المعلقات المتقدرية بعينة محلول منظم مضافة إلى طبق دقيق ذو ‎AT‏ عيت لقياس النشاط وقياس العين النموذجية. بعد ذلك تمت إضافة ‎YAY‏ ميكرو لتر من خليط التفاعل (057 مل مول/لتر بوتاسيوم محلول منظم فوسفات (رقم هيدروجيني 5,)؛ 5,1 مل مول/لتر ‎Y,A ¢ carnitine-DL ٠‏ مل مول/لتر ‎7١ (NAD‏ مل مول/لتر ثيامين بيروفوسفات ‎thiamin‏ ‎١,١١ « pyrophosphate‏ مل مول/لتر إنزيم مشترك ‎٠,١ A‏ مل/لتر 2-100 ‎٠١ Triton‏ مل مول/لتر كلوريد مغنيسيوم؛ ‎٠١‏ 9/لتر مصل ألبومين بقري» 17,» مل مول/لتر ‎VY INT‏ ميكرو مول/لتر فينازين ‎YA lil fie‏ مل مول/لتر صوديوم أوكسامات ‎sodium oxamate‏ ( إلى كل عين؛ وبعد ذلك تمت حضانة ‎٠١0‏ ميكرو لتر من ‎٠٠‏ مل مول/لتر من صوديوم بيروفات ‎sodium pyruvate Vo‏ لقياس النشاط أو ماء للقياس النموذجي. تمت حضانة الخلائط عند درجة الحرارة الغرفة في ظل. تم قياس الامتصاص عند ‎150-5٠٠١‏ نانومتر؛ والذي كان ناتج عن تقليل آلا تم قياس مستقبل الإلكترون الأخير؛ باستخدام قارئ طبق دقيق على مدار الوقت وتم حساب التغير في الامتصاص. تم حساب نشاط ‎PDH‏ بواسطة طرح التغير في امتصاص العين النموذجية من قياس نشاط العين. تم حساب نسبة نشاط ‎PDHa‏ إلى نشاط ‎PDHE‏ وتم اعتبارها ‎٠‏ كمؤشر لتنشيط ‎PDH‏ ‏يتم توضيح النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مركب (7ح)؛ مركب (©)» مركب ‎fl)‏ مركب (ب)» مركب ‎(C)‏ ومركب (لا) كمركبات اختبارية في الجدول التالي ‎oY‏ الشكل ‎١‏ (الكبد) والشكل ؟ (نسيج دهني). علاوة على ذلك؛ يتم توضيح النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مركب (7) في الجدول التالي 7. ‎Yo‏ الجدول ‎Y‏ ‏١ه‏

نشاط ‎PDHa‏ )% من نشاط ‎PDHt‏ ( © ساعات ‎Yo‏ ساعة © ساعات ‎Yo‏ ساعة مركب v ‏مجه وح‎ ‏مجم/‎ 7 ES PRADA ‏مجم/‎ 7 ES ‏مجم/ مجمو‎ 7 ES ‏مجمو‎ ‏الناقلة كم‎ aad ‏لمجم النقلة‎ asf الناقلة مركب ١+: YoY] ‏كمه‎ ٠١+١١ oY ‏احم اجا‎ YEHVY (cY) ‏مركب‎ + YoY] AY «| ١ ‏أجلي أجج+ء‎ +١ ‏احملم‎ ١ (0 ‏مركب‎ + اداج ‎١٠.+ ١١ ١+ ١١.١ YoY] ١‏ 4 جلا 0 مركب

SEY of ‏أت ءا‎ ood YAY FEY YEVY] ‏ا‎ +٠ ‏(ب)‎ ‏مركب‎

VEYA ١٠.١١ ‏جمد+؛‎ ١٠.١١ +١١١ ‏:مه ا‎ + (z) ‏مركب‎ + ١٠١.١١ + ١١+ VEY +١7 ١0+61 +٠ 8 0 =n) ‏متوسط 5 +.لا.‎

FRE

اج 7 — الجدول ؟ نشاط ‎PDHa‏ )% من نشاط ‎PDHt‏ ( ~ ‎[a as Fie sand‏ لجموعة | ؟ ‎Tic gand [a as‏ مجم | المجموعة؟ مجم/ الناقلة كد الناقلة . الناقلة . الناقلة ‎aq‏ ‏مركب ‎EY] Video TEYA YYEVE TEVA‏ الميعدرذ ‎EEN‏ الس )7( متوسط 5 ‎(n=3) .D.+£‏ المثال التجريبي ©: تأثير الإعطاء المتكرر لمركب الاختبار على 116/810 في فثران ‎ZDF‏ ‏الطريقة الاختبارية فثران ‎Zucker‏ التي تعاني من السمنة وداء السكري (ذكور؛ عمرها ‎١‏ أسابيع؛ ‎CHARLES‏ ‎(.RIVER LABORATORIES JAPAN INC‏ نموذج حيواني للسكري من النوع 7؛ بعد وضعها على نظام غذائي تمت تنقيته )%0,4 من نظام غذائي في صورة دهون؛ ‎Oriental‏ ‎(Yeast Co., Ltd.‏ تم تخصيص للمجموعة الناقلة والمجموعات التي تم إعطائها مركب الاختبار كي لا يحدث أي ميل في الجولوكوز بالبلازما ومستويات الإنسولين» مستويات ‎HPALC‏ وأوزان ‎٠‏ الجسم. تم إعطاء جرعات متكررة عن طريق الفم من مركب الاختبار ‎١(‏ مجم/ كجم/# مل) إلى ‎ol‏ مرة ‎las‏ قبل ؟ ساعات من الظلام. تم إعطاء 960,5 محلول ميثيل سيليلوز ‎Al‏ عن طريق الفم بنفس الطريقة إلى الفئران من المجموعة الناقلة. باليوم ‎VE‏ من الإعطاء؛ تم تجميع عينات الدم من وريد يوجد بالذيل وتم قياس مستوى ‎a3. (%) HbAlc‏ إجراء التحليل الإحصائي بواسطة اختبار ‎Dunnett‏ قيم ‎v0>p‏ ,+ تم اعتبارها ذات دلالة إحصائية.

يتم توضيح النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مركب (7) ومركب (7) كمركبات اختبارية في الجدول التالي 6. ‎sal‏ ؛ ‎HbAlc‏ )%( مركب المجبوعة | ‎JER‏ ‏الناقلة كجم اليوم ‎VE‏ من الإعطاء ‎)٠١ 0 -( .0.+ 5 hug o‏ (Dunnett ‏في مقابل المجموعة الناقلة (اختبار‎ +, 0>%p ‏(جين مرتبط ب 8-90-90 إيثر بشري) اختبار تشبيك دفعة الخلايا‎ hERG ‏التجريبي ؛:‎ JE ‏كاملة‎ ‏الطريقة الاختبارية‎ —(hERG) ‏بشري‎ fi) 8-90-9060 ‏تم نقل العدوى لها لجين مرتبط ب‎ HEK293 ‏باستخدام خلايا‎ ٠ ‏وفقا لتقنية تشبيك دفعة الخلايا كاملة.‎ hERG ‏تم فحص تأثير على تيار‎ «(Cytomyx Limited)

BNA-) CO2 ‏باستخدام حضانة بها‎ hERGL ‏العدوى لها‎ Jas ‏تم‎ HEK293 ‏تم إمرار خلايا‎ ‏رطوبة‎ % CO20 (YY ‏هي‎ shige ‏في ظل ظروف‎ )111, TABAI ESPEC CORP. ١ ‏سم ؟ به كولاجين من النوع‎ VO ‏مشبعة. حاويات المزرعة المستخدمة كانت دورق مغلف حجمه‎ ‎(AGC TECHNO GLASS CO., Ltd. ٠0-؛977( ١٠‏ وطبق مزرعة مغلف طوله #8 ؟ مم به كولاجين من النوع ‎TECHNO GLASS CO., Ltd. ٠0-4600 60( ١‏ 60ظ). وسط المزرعة المستخدم كان ‎MEM-E‏ (وسط أساسي أدنى ‎Eagled‏ (أملاح ‎Nikken (Earle‏

١/7

BioWest, ‏مضاف مع 0 % (مصل بقري جنيني؛‎ (biomedical laboratory

Invitrogen «NEAA) MEM ‏محلول أحماض أمينية غير أساسية‎ "0١و‎ (L.L.C. hERG ‏التعبير عن جين‎ WIA ‏لاختيار‎ Geneticin ‏تمت إضافة جينيتيسين‎ (Corporation ‏من خلايا‎ 4 ٠١7١ ‏ميكرو جم/ مل. كخلايا للقياس» تم وضع‎ 408١0 ‏إليه إلى تركيز يساوي‎ ‏أيام قبل قياس‎ V ‏مم 4 إلى‎ Vo ‏على طبق مزرعة طوله‎ hERGS ‏تم نقل العدوى لها‎ HEK293 © ‏المذكور أعلاه دون‎ deal ‏طبق المزرعة المنتج للقياس احتوى على وسط‎ hERG ‏تيار‎ ‎.(Invitrogen Corporation) ‏جينيتيسين‎ ‏تم تحديد تركيز التقييم الأعلى لكل مركب من التركيز الأعلى الذي عنده لم يوجد ترسيب في المائع‎

Y :MgCl2 ‏ملي مول/ لترء‎ ¥,0 :KCl ‏ملي مول/ لترء‎ ٠4٠0 :NaCl) ‏خارج الخلايا القياسي‎ ‏ملي‎ ٠١ ‏الجلوكوز:‎ AY ‏ملي مول/‎ ٠١ :15085 ‏ملي مول/ لترء 08012: ؟ ملي مول/ لترء؛‎ Ve ‏مع قاعدة تريس)). كطريقة تطبيق؛ تم لفظ كل‎ VE ‏مول/ لتر (تم التعديل إلى رقم هيدروجيني‎ ‏محلول يتم وضعه من أنبوب 7 له قطر طرفي يساوي حوالي 0,75 مم؛ مجاور (حوالي ؟ مم)‎ ‏دقيقة.‎ [de vf ‏للخلايا؛ ويتم تطبيقه على الخلايا. معدل اللفظ كان حوالي‎ ‏تم إجراء التجربة عند درجة الحرارة الغرفة تحت ميكروسكوب لعكس الطور. تمت تهيئة طبق‎ ‏مم وضعت به الخلايا .على جهاز القياس؛ وتم تطبيق المائع خارج الخلايا‎ TO ‏مزرعة طوله‎ ٠5 ‏القياسي باستمرار على الخلايا من أنبوب 7. تم ملء إلكترود زجاجي للقياس مع مائع داخل‎ ‏ملي‎ ٠١ KCl ‏ملي مول/ لترء‎ ١١١ : Potassium Gluconate ‏الخلايا (جلوكونات بوتاسيوم‎ ‏ملي مول/‎ V0 (EGTA ‏ملي مول/ 1 ¢ 1/-1/09: © ملي مول/ لترء‎ ١ :1/09012 ‏مول/ لترء‎ ‏مع قاعدة تريس)). يتم‎ ١7,7 ‏ملي مول/ لتر (تم التعديل إلى رقم هيدروجيني‎ ٠١ (HEPES ‏لتر‎ ‏التقليدية على الخلاياء وتمت تهيئة الجهد الكهربي للصيانة‎ ALIS ‏تطبيق طريقة تشبيك دفعة الخلايا‎ Ye ‏ملي فولت. في ظل جهد كهربي ثابت؛ تم تضخيم تيار الخلايا الكامل بواسطة مضخم‎ Ave ‏إلى‎ ‏وتم تحميل البيانات‎ «(Axon Instruments, Inc. ¢(AXOPATCH-200B) ‏للتشبيك الدفعي‎ ‏باستخدام برمجيات تحليل‎ (Intermedical ©0., Ltd. (MC-P642400) ‏على حاسوب‎ .(PCLAMP 9.2, Axon Instruments, Inc.) ‏للحصول على البيانات‎ ه١‎

‎A —_‏ 7 _ تم إجراء قياس تيار ‎hERG‏ في الخطوتين التاليتين. في ‎WIS‏ الحالتين» تم بدء تيار ‎hERG‏ ‏بواسطة إعطاء الجهد الأساسي (الجهد الكهربي للصيانة ‎Av‏ ملي فولت؛ النبض السابق+ ‎Yo‏ ‏ملي فولت؛ ‎٠5‏ ثانية نبض الاختبار .مه ملي فولت؛ ‎٠‏ ثانية). الخطوة ‎:)١(‏ تم تسليط الجهد الأساسي المذكور أعلاه عند ‎١١‏ هرتز لمدة دقيقتين. © الخطوة (7): تم تعريض الجهد الأساسي المذكور أعلاه لطرح 5/3 ل9.2 ‎pCLAMP‏ لإزالة تيار

‏التسريب . ثم تكرار ذلك ثلاث مرات ‎As‏ اعتبار متوسطه كتيار 6 . بعد الخطوة (١)؛‏ تم إجراء الخطوة (7) (حوالي ؟ دقائق)؛ وتم اعتبار التيار الذيلي الأقصى الذي تم الحصول عليه بواسطة تسليط نبض الاختبار على تيار ‎HERG‏ الذي تم الحصول عليه بواسطة طريقة الخطوة ‎(Y)‏ كقيمة تيار 0546. ‎Led‏ يلي؛ تم تكرار عمليات ‎)١(‏ و(7) بشكل تبادلي حتى

‎ERG ‏انتهاء التجربة وتم قياس قيمة تيار‎ > ٠ ‏دقائق)؛ وتم تبادل المائع خارج‎ Yo ‏ثابتة ثلاث مرات (حوالي‎ hERG ‏تيار‎ dad ‏ثم تسجيل‎ ‏الخلايا القياسي بشكل فوري مع كل مائع تطبيق. تم قياس قيمة تيار 5886 ثلاث مرات (حوالي‎ ‏دقائق) بنفس الطريقة أثناء إرواء مائع التطبيق؛ وتم اعتبار قيمة التيار التي تم الحصول عليها‎ ٠ ‏بعد إرواء مائع التطبيق.‎ hERG ‏بواسطة القياس الثالث كقيمة تيار‎

‎٠‏ تم تحويل بيانات كل خلية إلى قيمة نسبية بمتوسط ثلاث قيم لتيار 1788465 مسجلة في حوالي ‎٠‏ دقائق قبل إرواء مائع التطبيق (القيمة السابقة) على أنها ‎.96٠0٠0‏ تم قياس هذا لاثنين من الخلايا وثم حساب متوسطها كتيار نسبي )%( . التيار النسبي )%(= ‎xA+BY‏ ‎:A‏ قيمة تيار ‎hERG‏ بعد إرواء مائع التطبيق

‎Yo‏ 8: متوسط ثلاث قيم لتيار ‎hERGs‏ مسجلة في حوالي ‎٠١‏ دقائق قبل إرواء مائع التطبيق (القيمة السابقة) علاوة على ذلك؛ تم حساب معدل الكبت بمجموعة ‎Gy DMSO‏ للصيغ التالية.

‎CARY

‎q —_‏ 7 _ معدل الكبت )%(= ‎١.١ x(C+D)- Yeo‏ ©: متوسط التيار النسبي (96) للمجموعات المناظرة التي تم إعطائها مركب الاختبار ‎:D‏ متوسط التيار النسبي (96) لمجموعة ‎DMSO‏ ‏يتم توضيح النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مركب (7)؛ مركب )7( مركب (أ)؛ مركب © (ب)» مركب (ج) ومركب (د) كمركبات اختبارية في الجدول التالي #. الجدول © التركيز ‎(a‏ قيمة ‎IC50‏ ‏مركب الاختبار معدل التثبيط (96) (ميكرو مول/ لتر) (ميكرو مول/ لتر) مركب (ب) ‎١‏ لا أن ‎٠٠١‏ 7 مركب ‎١٠5 Y (z)‏ ‎ARIA‏ ‎q y * Y ٠‏ 1 مركب (د) ؟ ,4 ‎١٠١‏ ‎Ye‏ ماي أ): تمت تهيئة تركيز التقييم الأعلى لكل مركب من التركيز الأعلى الذي عنده لم يوجد ترسيب في المائع خارج الخلايا القياسي. 1ه

‎A «=‏ — المثال التجريبي ‎ro‏ اختبار الاستقرار الأيضي في جسيم مجهري بالكبد الطريقة الاختبارية تم تعليق جسيم مجهري بشري بالكبد (تم تصنيعه بواسطة ‎Xenotech‏ 10620 التركيز النهائي ( بعد التخفيف)؛ ‎١7‏ ملجم بروتين/ مل) في ‎٠٠١‏ مل مولار من محلول منظم من فوسفات بوتاسيوم (رقم هيدروجيني 7,4 يحتوي ‎Je‏ -نيكلوتيد ثنائي ‎oe J nicotinamide‏ نيكوتين أميد ادينين فوسفات ‎٠,7 : dinucleotide phosphate‏ مل مولانء ‎D-glucose—-6-‏ ‎7,١ phosphate‏ مل مولارء كلوريد ماغنيسيوم: 7,7 مل مولارء؛ ‎glucose—-6-phosphate‏ ‎dehydrogenase‏ £0 ,+ وحدة/ مل)؛ وأيضا خلطه مع مركب الاختبار المذاب في ‎MeCN/DMSO‏ )0/40( (التركيز النهائي © ميكرو مولار). تمت حضانة الخليط عند ‎ATV‏ ‎A‏ لمدة ‎٠‏ دقائق ‎Tes‏ دقيقة » ثمت إضافة حمض فورميك يحتوي على أسيتو نيتريل (التركيز النهائي 96671 ( ؛» وثمتث معالجة الخليط بالطرد المركزي . ثم قياس مركب الاختبار (غير معدل) في ‎sale‏ ‏طافية للمزرحة بواسطة كروماتوجراف سائل عالي الأداء/إقياس طيفي للكتلة ‎(LC/MS)‏ (تم تصنيعه ‎(Waters daly‏ عا: ‎(Acquity UPLC‏ 015/ا:كاشف ‎SQ‏ أو كاشف ‎(TQ‏ تم حساب نسبة المادة المتبقية )%( من قيمة القياس التي تم الحصول عليها. 5 "تم توضيح النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مركب ‎oF)‏ مركب )7( مركب (أ)؛ مركب (ب)»؛ مركب (ج) ومركب (د) كمركبات اختبارية في الجدول التالي 6. الجدول 6 الثبات في ميكروسوم الكبد (نسبة المادة المتبقية 96) بشري جرد ا لاختباري

— \ - ‎BE‏ ‏القابلية للتطبيق الصناعي حيث أن مركب الاختراع الحالي أو ملح مقبول صيدلانيا ‎aie‏ له نشاط متبط ‎(PDHKY‏ سوف يكون من المفيد كمكون نشط للعلاج والوقاية من أو علاج السكري (السكري من النوع ‎OV‏ السكري من النوع ‎١‏ إلخ.)؛ متلازمة مقاومة الإنسولين ‎insulin resistance syndrome‏ ؛ متلازمة © أيضية ‎metabolic syndrome‏ « مرض فرط السكر في الدم ‎hyperglycemia‏ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم ‎hyperlactacidemia‏ « مضاعفات مرض السكري (الاعتلال العصبي السكري ‎diabetic neuropathy‏ ؛ اعتلال الشبكية السكري ‎diabetic retinopathy‏ ؛ اعتلال الكلية السكري ‎diabetic nephropathy‏ ؛ اعتام العين ‎cataract‏ إلخ.)؛ قصور القلب (قصور ‎als‏ في القلب ‎acute cardiac failure‏ ؛ قصور مزمن في القلب ‎chronic cardiac‏ ‎Puel(failure ٠٠‏ عضلة القلب ‎cardiomyopathy‏ ؛ إقفار عضلة القلب ‎myocardial‏ ‎ischemia‏ الذبحة القلبية ‎myocardial infarction‏ ؛ الخناق الصدري ‎angina pectoris‏ « ارتفاع الدهون في الدم ‎dyslipidemia‏ « التصلب العصيدي ‎atherosclerosis‏ ؛ انسداد الشرايين المترقي ‎peripheral arterial disease‏ ؛ العرج المتقطع | ‎intermittent‏ ‎claudication‏ « الداء الرثوي المسد المزمن ‎chronic obstructive pulmonary disease‏ « ‎Veo‏ إققار الدماغ ‎brain ischemia‏ » السكتة الدماغية ‎cerebral apoplexy‏ ؛ الأمراض المتقدرية ‎mitochondrial disease‏ » اعتلال الدماغ والعضل المتقدري ‎mitochondrial‏ ‎encephalomyopathy‏ ؛ السرطان ‎cancer‏ ؛ فرط ضغط الدم الرثئوي ‎pulmonary‏ ‎hypertension‏ » أىو مرض ‎Alzheimer disease ull‏ . ١ه‏

Claims

_ A \ —_ ‏عناصر الحمابة‎ ‏مركب ممثل بواسطة الصيغة [ا]:‎ .١ Q

HE. A 3 ‏اا‎ ‎HE ® A A» neo OH / H LB a . eas ) SAT 3 en / Py 1 of Nz ING ‏ل‎ ‎Foo Von A 3 3 F 0 ‏أو ل أو ملح مقبول صيد لانياً منه.‎ ١ ‏عبارة عن‎ n ‏حيث‎ ‏الصيغة:‎ dad gs ‏مركب ممثل‎ . o 0 0

' H.C HC ‏بير‎ 3 SH ‏حم‎ N_ H.C N_ 3 Con 3 CON ! / HyC OH HyC OH Lae s VE vo NA NA F ‏ب‎ F =~ H ) 0 A OH A oH "2 FF FF {in {llh)

[1] ‏الممثل بواسطة الصيغة‎ oY ‏المركب وفقاً لعنصر الحماية‎ ."

‎in, PR .‏ لد ‎NH,‏ ا ‎He Nn‏ ال 0 امسر ‎GH‏ ‎HC 0 0‏ الحا ‎HO =, FIN‏ ‎١‏ م ‎SEE GE‏ ‎Ps‏ ل 7 ب 0 ‎St nn oo rena?‏ ‎Kon‏ ع ‎F AT‏ 2 ‎{Il}‏

‏؛. المركب وفقاً لعنصر الحماية ‎oF‏ الممثل بواسطة الصيغة ‎[lI]‏ ‏1 ‏امم ‎NH,‏ > 3 ‎HC wn‏ ‎ON‏ & الأ ‎He OH =‏ ال ! ب ب ‎H.C‏ ‏ل ‎Pan‏ { العا قا ‎oH Po‏ ‎F as SS 1‏ ‎A OH ٠ 0‏ با اط 8 (ااا) ° مركب ممثل بواسطة الصيغة [ا!!]: ‎CARS]‏

‎A ¢ —_‏ _

‎HO. dL‏ ‎TNH,‏ > 83 ‎HC nN‏ ‎ON‏ ‎J‏ \

‎HC. 1 1‏ ‎IN pra JESS‏ ‎To)‏ اسح ‎eT‏ ‎HO ANT OW 4‏ ‎F “ou, oS y‏ ‎A 98‏ ‎Fr‏ ‎{In‏ ‏11 تركيبة صيدلانية تتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ©؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منهاء وناقل مقبول صيدلانياً. ‎o‏ ‎LV‏ مثبط ‎PDHK‏ يتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى © أو ملح مقبول صيدلانياً منها. ‎A‏ مثبط 0011141 يتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ©؛ أو ملح مقبول ‎١ ٠‏ صيدلانياً منها .

4. مثبط 0011/42 يتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ©؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منها.

‎.٠١ 9‏ عامل خافض لسكر الدم ‎hypoglycemic agent‏ تتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ©؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منها. ‎CARS‏

—Ao— ‏تتضمن المركب وفقاً لأي‎ lactic acid—lowering agent ‏عامل خافض لحمض لاكتيك‎ .١١ ‏إلى ©؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منها.‎ ١ ‏من عناصر الحماية‎ resistance syndrome ‏؛ متلازمة مقاومة‎ diabetes ‏عامل للوقاية من أو علاج السكري‎ LY ‏؛ مرض فرط السكر في الدم‎ metabolic syndrome ‏الإنسولين 105110 » متلازمة أيضية‎ ©

‎hyperglycemia‏ ؛ مرض فرط حمض لاكتيك في الدم ‎hyperlactacidemia‏ « مضاعفات مرض السكري ‎cdiabetic complications‏ قصور القلب ‎Pel ¢ cardiac failure‏ عضلة القلب ‎cardiomyopathy‏ ؛ إقفار عضلة القلب ‎myocardial ischemia‏ ؛ الذبحة القلبية ‎myocardial infarction‏ » الخناق الصدري ‎angina pectoris‏ ؛ ارتفاع الدهون في الدم

‎peripheral ‏؛ انسداد الشرايين المترقي‎ atherosclerosis ‏؛ التصلب العصيدي‎ dyslipidemia ٠ ‏؛ الداء الرثوي المسد المزمن‎ intermittent claudication ‏؛ العرج المتقطع‎ arterial disease ‏؛ السكتة‎ brain ischemia ‏إقفار الدماغ‎ « chronic obstructive pulmonary disease ‏اعتلال‎ « mitochondrial disease ‏الأمراض المتقدرية‎ « cerebral apoplexy ‏الدماغية‎ ‏أو‎ cancer ‏السرطان‎ » mitochondrial encephalomyopathy ‏الدماغ والعضل المتقدري‎

‎١‏ فرط ضغط الدم الرثوي ‎pulmonary hypertension‏ ؛ الذي يتضمن المركب وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ©؛ أو ملح مقبول صيدلانياً منها . ‎NY‏ العامل الوقائي أو العلاجي وفقاً لعنصر الحماية ‎OY‏ حيث السكري عبارة عن السكري من النوع ‎١‏ أو السكري من ‎Yoel‏

‎٠ ‏حيث يتم اختيار مضاعفات مرض‎ OY ‏العامل الوقائي أو العلاجي وفقاً لعنصر الحماية‎ LV ‏السكري من المجموعة التي تتكون من الاعتلال العصبي السكري الاعتلال العصبي السكري‎ diabetic ‏؛ اعتلال الشبكية السكري اعتلال الشبكية السكري‎ diabetic neuropathy ‏السكري.‎ cataract ‏؛ اعتلال الكلية واعتام العين اعتام العين‎ retinopathy

‎Yo ‏حيث قصور القلب عبارة عن قصور‎ OY ‏العامل الوقائي أو العلاجي وفقاً لعنصر الحماية‎ Yo

‎ه١‎

‎h —‏ - حاد فى القلب ‎acute cardiac failure‏ ؛ أو قصور مزمن فى القلب ‎chronic cardiac‏ ‎failure‏ .

شكل )1( ج * ب ««< ; ‎i‏ ‎i i wa‏ : ? ده ل ا 1 1 ; : & ‎EEE ;‏ الي ‎Lm‏ اذ ‎NN a‏ - سس : 0 لا ‎To N‏ 4 ا 1 ! | ‎xi NX \ NN‏ 4 ا ا ا ا ا د آم ده ‎3a 8 YN‏ ا - 0 ‎NN‏ ج 0 ا - 0 | نا امه 4 ‎Ws =‏ ب ‎WW... L AL‏ ي ‎RW‏ نه الا د ‎get H‏ { 3 : 0 3 د ‎FACE‏ ‎i‏ المركبا ‎ACL‏ اج زر وا ‎A‏ با وجب 1 اطبا ‎١ CCIE‏ !كباج اهيدي بل 0 : ؟ مجم كجم : مهما كجم إ : ْ + ساعة #إماعات ‎bss‏

{Y) ‏شكل‎ ‎Sop ‎3 ‏عد‎ : A ‏أل‎ : = A v SH 8 ‏ما‎ 1 . a jt ‏إْ‎ NN = | : 1 - 7 >» 3 Bro X N ‏ل : ا لا‎ © ‏ال‎ = 88 xX BE a.

Bu a.

E EE AN Sa He 1 8 N 8" Sas Bs 3 Ti | \ yl . | - ‏ا‎ 0 N ‏ا ب‎ | A SPAREN I NE TN OE WE HR Oh ‏له لآ‎ WT Wm ‏ع‎ ‏تقل‎ ERR EE NR NRT IDNR + ‏هوب‎ EE CONE PR TNE NE ‏مرب م‎ : ‏مدا هم إْ‎ # ٍْ 85 fag ¥ TT ١ ١ LACHER ‏مباعةٌ‎ + Eke CARY

مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏