SA515361161B1 - العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري - Google Patents

العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري Download PDF

Info

Publication number
SA515361161B1
SA515361161B1 SA515361161A SA515361161A SA515361161B1 SA 515361161 B1 SA515361161 B1 SA 515361161B1 SA 515361161 A SA515361161 A SA 515361161A SA 515361161 A SA515361161 A SA 515361161A SA 515361161 B1 SA515361161 B1 SA 515361161B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
cells
islet
patients
transplantation
insulin
Prior art date
Application number
SA515361161A
Other languages
English (en)
Inventor
برويتمان فلاديسلاف
برويتمان نيكانور
سكاليتسكاي نيكولاي
Original Assignee
فيلدلفيا ميدكل ساينتفك سينتر، ال.ال.سي.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by فيلدلفيا ميدكل ساينتفك سينتر، ال.ال.سي. filed Critical فيلدلفيا ميدكل ساينتفك سينتر، ال.ال.سي.
Publication of SA515361161B1 publication Critical patent/SA515361161B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/37—Digestive system
    • A61K35/39—Pancreas; Islets of Langerhans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0676—Pancreatic cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2207/00—Modified animals
    • A01K2207/12—Animals modified by administration of exogenous cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
    • C12N2509/10—Mechanical dissociation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2527/00—Culture process characterised by the use of mechanical forces, e.g. strain, vibration

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بطريقة لزيادة الخلايا الجزيرية بيتاbeta-islet cells من بنكرياس الأرانب pancreases of rabbits و تركيبة لزرع الخلايا الجزيرية بيتا المعزولة beta-islet cells isolated والمستنبتة cultured من بنكرياس الأرانب لتعزيز إنتاج الإنسولين الطبيعي natural insulin لدى مرضى السكري diabetic patients.

Description

العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري ‎Cell Therapy: A Method and a Composition‏ الوصف الكامل خلفية الاخترا ‎slaty‏ الاختراع بطريقة علاج بالخلايا و تركيبة لزرع خلايا البيتا الجزيرية المعزولة ]5618-1516 ‎cells isolated‏ والمستنبتة ‎cultured‏ من بنكرياس الحيوانات لتعزيز الإنتاج الطبيعي للإنسولين ‎natural insulin‏ في أوساط المصابين بالسرطان. وصف الفن ذي الصلة يؤثر السكري ‎diabetes‏ من النوع الأول على حياة ما يربو على مليون أمريكي. ويعد السكري من النوع الأول الصورة الأشد حدة من المرض؛ حيث يهاجم الجهاز المناعي ‎immune system‏ للجسم الخلايا المنتجة للإنسولين ‎insulin—producing cells‏ اللازمة للحفاظ على مستويات السكر الطبيعية في الدم ‎blood sugar at normal levels‏ من المعروف أن الاتخفاض 0 الشديد في مستوى السكر في الدم يمكن أن ينتج عنه نويات مرضية ¢ القصور الإدراكي ‎impaired cognition‏ « أو فقدان الوعى 70005010050655. وفى أكثر الحالات ‎sas‏ لا يمكن للإنسولين التحكم في المضاعفات على نحو جيد. على نحو مثالي؛ يمكن لاستبدال الخلايا المنتجة للإنسولين في البنكرياس أن تكفي مرضى السكري مؤونة الحقن بالإنسولين مدى الحياة وأن يعالج المرض. ويمكن الآن زرع تلك الخلايا الجزيرية 5 بطريقتين» من خلال زرع كامل للبنكرياس أو من خلال عملية أقل توسعًا وكلفة تتمثل في مجرد حقن الخلايا الجزيرية. وقد ظهر أن الزرع الناجح للبنكرياس فعال في تحسين جودة حياة المصابين بالسكري على نحو ملحوظ» إذ يزيل الحاجة إلى إنسولين خارجي وإلى القيام بقياسات يومية مضطردة للجلوكوز ‎glucose‏ في الدم : ‎(Pancreas Transplantation for Patients with Type 1 Diabetes.
Diabetes‏ ‎(Care. 25(Supplement 1): S111. January 2002) 0‏ ومع ‎«ld‏ تتطلب عمليات زرع
البنكرياس علاج كابت للمناعة طوال الحياة لمنع رفض الطعم والمعاودة المحتملة لعملية المناعة الذاتية التي يمكن أن تدمر الخلايا الجزيرية البنكرياسية. الوصف العام للاختراع وقد ظهر أن زرع خلايا البيتا الجزيرية من بنكرياس ‎ile‏ يعزز الإنتاج الطبيعي للإنسولين بين
Sperling, M.A. Type Ll) ‏المرضى ممن يعانون من السكري من النوعين الأولى والثاني‎ 5 1 Diabetes: Etiology and Treatment. Totowa, NJ: Humana Press Inc.
Insulin Therapy. In: Edelman, S.V. and Henry, R.R. ¢2003. p. 529-552
Diagnosis and Management of Type 2 Diabetes. Caddo, OK: Professional ‏ويمكن القيام بزرع الخلايا الجزيرية في‎ (Communications, Inc. 2002. p. 121-148 0 صورة عملية مبضعية صغيرة عبر الجلد؛ يتم فيها دمج خلايا جزيرية داخل الكبد بواسطة الوريد البابي. مع ذلك؛ كسائر مرضى الزراعات؛ يتعين على مستقبلي الخلايا الجزيرية تعاطي أدوية كابحة للمناعة لمنع رفض الخلايا الأجنبية. وقد تمت دراسة الطعم الأجنبية أو الأجسام المزروعة الأجنبي للخلايا جزيرية المشتقة من لحم الخنزير أو اللحم البقري وظهر أنها تتطلب كبح المناعة. وقد ظهرت قدرة خلايا البيتا المستنبتة مسبقًا للبنكرياس الخاص بالأرانب حديثة الولادة على البقاء و العمل بفاعلية في كائن خاص بمستقبل أجنبي في تجارب أجريت على ‎of‏ مصابة بسكري محفز بفعل التجارب. )}4{ 1994 ‎.(Skaletsky N.N. and others.‏ وقد ظهر أثر مضاد للسكري واضح وطوير الأجل (8 أسابيع- مدة التجرية) للزراعة الأجنبية لمزارع خلايا جزيرية كما في حالة الإعطاء داخل التجويف البطني والطحال؛ ‎Lady‏ في حالات الإعطاء داخل العضلة 0 البطنية المستعرضة. بعد التجارب؛ تم إجراء التجارب الهيستولوجية في مكان إدخال الأجسام المزروعة الأجنبية اكتشفت خلايا جزيرية لها هيكل تم الاحتفاظ به ودون إشارات للتفاعل المناعي الخلوي. في الوقت ذاته؛ تم اكتشاف إشارات واضحة لإعادة توليد خلايا البيتا الخاصة بها في بنكرياس الحيوانات المستقبلة. بالإضافة إلى الأثر المقلل للسكر المحدد ‎ds‏ تمت ملاحظة أثر
طبي وقائي محدد جيدًا للزرع الأجنبي لمزارع الخلايا الجزيرية على المضاعفات الأخيرة المميزة للسكري -اعتلال ‎(al‏ خلال التجارب )}4{ 2005( ‎.(Skaletskaya G.N. and others‏ وتكشف ‎2135193RU‏ الخاصة ب ‎.Skaletsky at al‏ عن الحصول على خلايا بيتا جزيرية من بنكرياس أرنب حديث ولادة ولطرق الزرع. وبتم الحصول على ‎WIA‏ بيتا باستخدام الانتقال من شظايا بنكرياسية في طريقة استنبات تتطلب إضافة مصل إلى وسط استنبات.
على ذلك؛ على الرغم من التطورات الحالية؛ ثمة حاجة إلى ‎WIA‏ جزيرية من مصادر مختلفة لا تحتاج إلى كبح المناعة. ويتم دمج جميع المراجع المذكورة هنا على سبيل المرجع بكاملها. يوفر الاختراع تركيبة تضم خلايا جزيرية جديدة معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث تكون الخلايا
0 الجزيرية الجديدة معزولة بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة ‎tage‏ ‏إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في
5 وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37 درجة مئوية لمدة 5 إلى 12 يومًا عند صفر7 إلى 75 ثاني أكسيد الكربون لفترة احتضان ‎Jf‏ حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب ‎Led‏ المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى
0 يصبح على الأقل 780 من ‎WAY‏ المتبقية عبارة عن ‎WA‏ بيتا جزيرية؛ و خلايا جزيرية جديدة مشكلة بواسطة مجموعة ‎LIA‏ بيتا جزيرية طليقة ‎free floating 5618-1516] cells‏ يوفر الاختراع تركيبة تضم تجميعات خلايا بيتا جزيرية معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث يتم عزل تجميعات خلايا البيتا الجزيرية بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرباس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة ‎tage‏
إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة
‎dag jie‏ من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى حاوية وعائية؛ حيث
‏تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في وسط
‏خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37 درجة مئوية لمدة 5 إلى 12 ‎Lg‏ عند ‎jhe 5‏ إلى 75 ثاني أكسيد الكريون ‎Cus Carbon dioxide‏ يتم تدوير الحاوية الوعائية
‏باستخدام الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من
‏المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة
‏بصورة انسيابية ‎lly‏ تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى
‏يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن ‎WIA‏ بيتا جزيرية؛ تجميع عناقيد خلايا البيتا
‏0 الجزيرية؛ احتضان عناقيد خلايا البيتا الجزيرية في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 18 درجة مئوية إلى 28 درجة مئوية لمدة 4 إلى 10 أيام عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكريون؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛
‏5 و تجميع عناقيد خلايا البيتا الجزيرية ‎.collecting the beta-islet cell clusters‏ يوفر الاختراع تركيبة تضم خلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث تكون خلايا ‎Gall‏ الجزيرية والخلايا المولدة الأولية معزولة بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛
‏0 الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرباس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة ‎dag hall‏ إلى داخل حاوية ‎cles‏ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المغرومة في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37 درجة متوية لمدة 5 إلى 12 ‎lag‏ عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكريون؛ حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال
‏5 الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب
فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ تجميع الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة؛ احتضان الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة في وسط به 77 من مصل أرنبي عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37.2 درجة مئوية لمدة 5 إلى 10 أيام عند صفر ‎NT‏ 75 ثاني أكسيد الكريون؛ استبدال الوسط بصورة دورية بوسط طازج وإزالة ‎LIAN‏ غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يكون على الأقل 780 من الخلايا المتبقية خلايا مولدة أولية أو خلايا بيتا جزيرية؛ وتجميع الخلايا المولدة الأولية وخلايا البيتا الجزيرية. يوفر الاختراع طريقة للحصول على خلايا جزيرية جديدة معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث تضم 0 الطريقة: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ ‎All)‏ الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة ‎pancreatic micro‏ من البنكرباس المذكور ¢ نقل الشظايا ‎unl Sad)‏ الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرباسية الدقيقة 5 المفرومة في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة ‎Ligh‏ إلى 37 درجة متوية لمدة 5 إلى 12 يومًا عند صفر7 إلى 75 ثاني أكسيد الكربون لفترة احتضان أولى؛ حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة 0 حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ و خلايا جزيرية جديدة مشكلة بواسطة تجميع خلايا بيتا جزيرية طليقة. يوفر الاختراع طريقة للحصول على تجميعات خلايا بيتا جزيرية معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث تضم الطريقة: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من 5 البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل
الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية» حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة فى وسط خالى من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مثئوية إلى 37 درجة متوية لمدة 5 إلى 12 ‎lag‏ عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد ‎(Ga Sl‏ حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة استبد ال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة
‎LIAN)‏ غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ تجميع عناقيد خلايا البيتا الجزيرية؛ احتضان عناقيد خلايا البيتا الجزيرية في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 18 درجة مئوية إلى 28 درجة مئوبة لمدة 4 إلى 10 ‎abl‏ عند
‏0 صفر# إلى 75 ثانى أكسيد الكريون؛ استبدال الوسط الخالى من المصل بصورة دورية بوسط خالى من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ و تجميع عناقيد خلايا البيتا الجزيرية. يوفر الاختراع طريقة للحصول على تركيبة تضم خلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية معزولة
‏5 .من بنكرياس أرنب» حيث تضم الطريقة: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة و وضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة فى وسط خالى
‏20 من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مثوية إلى 37 درجة مثوية ‎saad‏ 5 إلى 12 ‎lag‏ عند صفر” إلى 75 ثاني أكسيد الكربون» حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة ¢ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا
‏5 المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ تجميع الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة؛ احتضان الأنسجة
المتبقية للشظايا الدقيقة في وسط به 77 من مصل أرنبي عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 2 درجة ‎gic‏ لمدة 5 إلى 10 أيام عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكريون؛ استبدال الوسط بصورة دورية بوسط طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يكون على الأقل 780 من الخلايا المتبقية خلايا مولدة أولية أو ‎WIA‏ بيتا جزيرية؛ وتجميع الخلايا مولدة أولية وخلايا البيتا
الجزيرية. يوفر الاختراع طريقة لعلاج السكري لدى مريض في حاجة إلى هذا العلاج من خلال إعطاء خلايا جزيرية جديدة معزولة من بنكرياس أرنب» حيث تكون الخلايا الجزيرية الجديدة معزولة بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح
0 يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة ‎Logie‏ إلى 37 درجة مئوية لمدة 5 إلى 12 ‎gy‏ عند صفر؛ إلى 75 ثاني أكسيد
5 الكربون لفترة احتضان أولى» حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ و خلايا جزيرية جديدة مشكلة بواسطة تجميع خلايا بيتا جزيرية
0 طليقة؛ وحيث ‎Loaf‏ يتم إعطاء الخلايا الجزيرية الجديدة إلى المريض لعلاج السكري. يوفر الاختراع خلايا جزيرية جديدة من بنكرياس الأرانب للاستخدام كعلاج للسكري. يوفر الاختراع استخدام خلايا جزيرية جديدة معزولة من بنكرياس أرنب لصنع تركيبة لعلاج السكري. يوفر الاختراع طريقة لعلاج السكري لدى مريض في حاجة إلى هذا العلاج من خلال إعطاء تجميعات ‎WIA‏ بيتا جزيرية معزولة من بنكرياس ‎coil‏ حيث يتم عزل تجميعات ‎LIS‏ البيتا
5 الجزيرية بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في
محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مئوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37 درجة مئوية لمدة 5 إلى 12 ‎lg‏ عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكربون» حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية 0 عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ تجميع عناقيد ‎LIA‏ البيتا الجزيرية؛ احتضان عناقيد خلايا البيتا الجزيرية في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 18 درجة مثوية إلى 28 درجة مئوية لمدة 4 إلى 10 أيام عند صفر” إلى 75 ثاني أكسيد الكربون؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 5 580 من الخلايا المتبقية عبارة عن ‎LIA‏ بيتا جزيرية؛ و تجميع عناقيد خلايا البيتا الجزيرية؛ و حيث أيضًا يتم إعطاء تجميعات خلايا بيتا جزيرية إلى المريض لعلاج السكري. يوفر الاختراع تجميعات خلايا بيتا جزيرية من بنكرياس الأرانب للاستخدام كعلاج للسكري. يوفر الاختراع استخدام تجميعات خلايا بيتا جزيرية معزولة من بنكرياس أرنب لصنع تركيبة لعلاج السكري. يوفر الاختراع طريقة لعلاج السكري لدى مريض في حاجة إلى هذا العلاج من خلال إعطاء خلايا 0 مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية معزولة من بنكرياس أرنب؛ حيث تكون ‎WIS‏ البيتا الجزيرية والخلايا المولدة الأولية معزولة بواسطة طريقة تضم: تجميع البنكرياس المذكور لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مئوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور؛ نقل الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى داخل حاوية وعائية؛ 5 حيث تكون الحاوية الوعائية مهيأة لجهاز دوار؛ احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في
وسط خالي من المصل عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37 درجة مئوية لمدة 5 إلى 12 يومًا عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكربون» حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوار بسرعة ثابتة تبلغ 2 إلى 6 دورة في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية بوسط خالي من المصل طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يصبح على الأقل 780 من الخلايا المتبقية عبارة عن خلايا بيتا جزيرية؛ تجميع الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة؛ احتضان الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة في وسط به 77 من مصل أرنبي عند درجة حرارة 36 درجة مئوية إلى 37.2 درجة مئوية لمدة 5 إلى 10 أيام عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكريون؛ استبدال الوسط بصورة دورية بوسط طازج وإزالة الخلايا غير المرغوب فيها المدمرة بصورة انسيابية 0 والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر الأنسجة الضامة حتى يكون على الأقل 0 من الخلايا المتبقية خلايا مولدة أولية أو ‎WIS‏ بيتا جزيرية؛ وتجميع الخلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية؛ و حيث أيضًا يتم إعطاء خلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية إلى المريض لعلاج السكري. يوفر الاختراع خلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية من بنكرياس الأرانب للاستخدام كعلاج للسكري. يوفر الاختراع استخدام خلايا مولدة أولية وخلايا البيتا الجزيرية 5 معزولة من بنكرباس أرنب لصنع تركيبة لعلاج السكري. يوفر الاختراع طريقة حيث يعاني المريض من السكري من النوع الأول. يوفر الاختراع طريقة حيث يكون الإعطاء داخل الغشاء البريتوني ‎«intraperitoneal‏ بالحقن ‎parenteral‏ داخل الوريد ‎intravenous‏ » داخل العضل ‎intramuscular‏ ¢ تحت الجلد ‎subcutaneous‏ « أو داخل القراب [101811808. يوفر الاختراع طريقة حيث يكون الإعطاء إلى داخل الكبد عبر الوريد 0 البابي» مباشرة إلى داخل لحمة ‎call‏ أو داخل الطحال. تجميع بنكرياسات لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة ‎tage‏ ‏إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛ الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور.
يتم ‎Ja‏ الشظايا الدقيقة ‎micro fragments‏ إلى داخل حاوية وعائية؛ ‎Jie‏ زجاجة طبية أو معملية إسطوانية؛ مهيأة لجهاز دوار» مع وسط خالي من المصل. ويتم احتضان الجاهز الدوار في يتم احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في الوسط الخالي من المصل في الجهاز الدوار بسرعة ثابتة عند درجة حرارة احتضان أولى تببلغ 36 إلى 37.2 درجة مئوية (على نحو مفضل 7 درجة ‎(sie‏ لمدة 5 إلى 12 يومًا ‎eo)‏ نحو مفضل 10-8 أيام ) عند صفر# إلى 75 ثاني أكسيد الكربون لفترة احتضان أولى. خلال فترة الاحتضان الأولى؛ ترتبط ‎WIA‏ البيتا الجزيرية الطليقة في صورة خلايا بيتا جزيرية جديدة أكثر كثافة تكون عبارة عن هياكل كروية. ويمكن استخدام الخلايا الجزيرية الجديدة التي تم 0 الحصول عليها بموجب هذا بصورة مباشرة في النقل إلى مريض سكري دون علاج كابح للمناعة حيث إن خلايا البيتا الجزيرية الجديدة تضم خلايا بيتا جزيرية غير مولدة للمناعة فقط. كما يتشكل أيضًا خلال فترة الاحتضان الأولى تجميعات ‎WAY‏ البيتا الجزيرية الأولى التي تصل إلى 1 مم من حيث القطر. يتم تجميع تجميعات خلايا البيتا الجزيرية واحتضانها بصورة إضافية لفترة احتضان ثانية. خلال فترة الاحتضان ‎dali)‏ يتم الاحتفاظ بالظروف التالية: درجة حرارة تبلغ 5 28-18 درجة مئوية(على نحو مفضل 24 درجة مثوية)؛ فترة تبلغ 10-4 أيام (على نحو مفضل 8-6 أيام )؛ وسط خالي من المصل (مثل وسط 199)؛ و صفر-75 ثاني أكسيد كربون. خلال فترة الاحتضان الثانية؛ يتم استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية (على سبيل المثال كل 4-3 أيام )» تتم إزالة جميع الخلايا غير المرغوب فيها التي يتم استبدالها بسلاسة والتي تضم خلايا إفراز خارجي؛ خلايا دموية وعناصر النسيج الضام؛ وتظل تجميعات خلايا البيتا الجزيرية 0 في 780 على الأقل. من المعروف أن المواد المنتجة لخلايا البيتا الخاصة الناضجة تقع في ظهارة القنوات المفرغة الدقيقة للبنكرياس. ويمكن أن تُنسب تلك الخلايا إلى الخلايا الجذعية الإقليمية أو ‎WAY‏ المولدة الأولية. وكمصدر لتلك ‎WAY‏ استخدمنا أنسجة للشظايا الدقيقة للبنكرياس أرانب حديثة الولادة بقيت بعد فترة الاحتضان الأولى كما ورد وصفه أعلاه. وخلال تلك ‎(al)‏ بصورة ‎dale‏ يحدث
— 2 1 — موت للخلايا الخارجية وإزالة لهاء وكذلك ‎Jas‏ لخلايا ‎ball‏ ويتم إخضاع بقايا الشظايا البنكرياسية؛ التى تتكون بصورة ‎dale‏ من القنوات المفرغة الدقيقة؛ إلى فترة احتضان ثالثة. خلال فترة الاحتضان الثالثة؛ يتم الإبقاء على الظروف التالية: عند درجة حرارة تبلغ 37.2-36 درجة مئوية (على نحو مفضل 37 درجة مئوية)؛ في وسط عبارة عن 77 من مصل الأرانب؛ 10-5 أيام (على نحو مفضل 8 أيام) 3 صفر -5 " ثاني أكسيد كربون . ويكون وسط مصل ‎f‏ لأرانب بصورة
دورية (على سبيل المثال كل 4-3 أيام )مستبدلاً. تتم إزالة جميع الخلايا غير المرغوب فيها التي يتم استبدالها بسلاسة والتى تضم خلايا إفراز خارجى 13 خلايا دموية وعناصر النسيج الضام . ‎das‏ لفترة الاحتضان ‎ASA‏ حصل المخترع على مزارع أحادية الطبقة تضم خلايا مولدة أولية - المواد المنتجة لخلايا البيتا الجزيرية. من المهم ملاحظة أن تلك الخلايا لديها القدرة على النمو
0 بكمية ‎dam‏ للانقسام الفتيلي. في فترتي الاحتضان الأولى والثانية؛ يمكن ملاحظة عملية ‎JS)‏ ‏نمو تلك الخلايا بتشكيل خلايا البيتا الجزيرية المنتجة للإنسولين خلال فترة الاحتضان الثالثة. وتضاعف الطريقة كما ورد وصفها أعلاه ناتج خلايا البيتا الجزيرية التي يمكن توليدها من بنكرياس الأرانب. وباستخدام الطرق التى تم تطوريرها بواسطة المخترعين» تتم مضاعفة خلايا البيتا الجزيرية وخلايا مولدة أولية المستخلصة.
5 ويمكن إعطاء مزارع الخلايا التي تم الحصول عليها إلى مرضى السكري دون استخدام عوامل كبح المناعة ‎.mmunosuppression agents‏ الوصف التفصيلى: كما هو مستخدم هناء يكون ‎"als‏ عبارة عن فرد وبتضمن المصطلح ‘ على سبيل المثال لا الحصرء ثديي ‎le)‏ سبيل ‎JE‏ إنسان 3 ‎(Olas‏ خنزير 3 ‎(ag HA cl 3 yl‏ ماعزء حيوان من
الرئيسيات غير بشري 1 بقرة ¢ قطة؛ خنزير غينيا أو قارض) » سمكة عصفور حيوان زاحف أو حيوان برمائي. ولا يشير المصطلح إلى عمر أو نوع محددين. على ذلك؛ لايقصد أن يتم تضمين الخواضع البالغة وحديثة الولادة؛ وكذلك الأجنة؛ سواء ذكر أو أنثى. ويكون " المريض" خاضع مصاب بالمرض أو الاضطراب ‎ee‏ سبيل المثال؛ السكري. ويتضمن المصطلح ‎anal’‏
الخواضع البشرية وبيطرية. كما هو مستخدم هناء يمكن أن يُستخدم المصطلح ‎pall‏ على نحو متبادل مع المصطلح "مريض". وللاستخدام في الطرق الموصوفة هناء يمكن إعطاء التركيبات بأي طريقة من المعروفين للمتمرسين في المجال؛ بما في ذلك؛ على سبيل المثال لا الحصرء داخل البيروتون» بالحقن؛ داخل الوريد؛
داخل العضل؛ تحت الجلد؛ أو داخل القراب. على ذلك يمكن صياغة التركيبات على نحو ملائم باعتبارها صياغة قابلة للحقن. ويبدو أن إعطاء التركيبات إلى خاضع ‎By‏ للاختراع يظهر ‎DBI‏ ‏مفيدة على نحو يعتمد على الجرعة. على ذلك؛ في أطر أوسع؛ يتوقع أن يحقق إعطاء جرعات أكبر من التركيبات آثار بيولوجية مفيدة زائدة عن إعطاء كمية أقل. على ذلك»؛ يتوقع تحقيق الكفاءة ‎Lad‏ في الجرعات الأقل من المستويات الذي تظهر فيه السمية.
0 ويقصد بالمصطلحات "يعالج" و'معالجة" أو "علاج” (أو المصطلحات المكافئة نحويًا) أن شدة ‎Ala‏ ‏الخاضع تقل أو تتحسن ‎Wa‏ على الأقل أو يتم تخفيفها و/أو أن ‎Gad‏ من التلطيف؛ أو التخفيف أو التقليل في عرض عيادي واحد على ‎BY)‏ يتم تحقيقه و/أو أن هناك تثبيط أو تأخير في تقدم الحالة و/أو وقاية أو تأخير في بدء مرض أو على؛ على سبيل ‎(JB‏ السكري. وتعني المصطلحات 'يعالج” ‎"dalled‏ أو "علاج” أيضًا التعامل مع مرض أو اضطراب مناعي ذاتي. على
5 ذلك؛ تشير المصطلحات 'يعالج” أو 'معالجة" أو "علاج” (أو المصطلحات المكافئة نحويًا) إلى كل من أنظمة العلاج الوقائية أو العلاجية. كما هو مستخدم هناء تشير عبارة تحقق 'كمية ‎"AAS‏ أو 'كمية كافية ل ' نتيجة محددة إلى عدد خلايا الاختراع التي تعد فعالة لإحراز أثر مرغوب ‎cad‏ والذي هو على نحو اختياري أثر علاجي (أي؛ من خلال إعطاء كمية فعالة علاجيًا). على سبيل المثال» يمكن أن تكون "كمية كافية" أو
0 "كمية كافية ل " كمية فعالة لتغيير شدة ‎dlls‏ خاضع. وتكون 'كمية فعالة علاجيًا" كما هو مستخدم هنا عبارة عن كمية توفر ‎Bad‏ من التحسن أو الاستفادة إلى الخاضع. على نحو ‎(diy‏ تكون "كمية فعالة علاجيًا" عبارة عن كمية توفر ‎Bad‏ من التلطيف؛ التخفيف و/أو التقليل لعرض عيادي واحد. وتكون الأعراض العيادية المصاحبة للإضطرابات التي يمكن علاجها بواسطة طرق الاختراع معروفة جيدًا للمتمرسين في المجال. علاوة
على ذلك؛ سيدرك المتمرسون في المجال أن الآثار العلاجية لا يجب أن تكون مكتملة أو شافية؛ طالما يتم توفير شيء من الاستفادة إلى الخاضع. تتضمن طرق الاستنبات وفقًا للاختراع استخدام نظام درجة حرارة مختار لاحتضان شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة تم الحصول عليها من أرنب واستنباتها في وسط خال من المصل. واتباعًا لطريقة الاختراع؛ يتم الحصول على مستحضر نقي لخلايا بيتا جزيرية صالحة ونشطة؛ ‎(Ally‏ يمكن زرعها بنجاح لدى مريض سكري دون استخدام أي كبح مناعي. وتوفر طريقة الاستنبات وفقًا للاختراع ظروف مستحبة لخلايا البيتا البنكرياسية وتخلق ظروف غير مستحبة لخلايا الموازنة وتوليد المناعة (وتسمى الخلايا المارة)مثل؛ على سبيل المثال؛ الخلايا خارجية ‎SLAY)‏ البطانية؛ متغصنة» والخلايا اللمفاوية. وتوفر إزالة جميع تلك الخلايا المارة تقليلاً 0 باررًا لتوليد المناعة للخلايا الجزيرية المستنبتة. وبخلاف المعتقد الشائع بأن الاستنبات طويل الأجل للخلايا تتطلب إضاةف ‎gale‏ مصلي إلى مائع الاستنبات؛ اكتشف المخترع أن استخدام وسط خال من المصل في الطريقة ‎Bg‏ للاختراع يصب في صالح نمو ‎LIS‏ البيتا الجزيرية المرغوب فيها وفي غير صالح نمو الخلايا المارة غير المرغوب فيها وبالتالي يوفر ‎WIA‏ بيتا جزيرية ‎dalla‏ ‏ونشطة بكمية قيمة ‎(Blas‏ حيث تكون تلك الخلايا خالية على نحو جوهري من الخلايا المارة غير 5 المرغوب فيها. دون التقيد بنظرية بعينها؛ يعتقد المخترعون أن عزل مولدات الضد السطحية يحدث في الخلايا التي يتم تحضيرها بواسطة طرق الاختراع» حيث ثمة حاجة بارزة إلى تفاعل مناعي على الرغم من غياب أي نوع من العلاج الكابح للمناعة سواءً قبل أو بعد ‎Jail)‏ العيادي للخلايا الجزيرية. وحيث إن الاستنبات المصقول بعناية لخلايا البيتا الخاصة بها التي يتم تحضيرها بواسطة طريقة الاختراع 0 لا يحتوي خلايا مرتبطة بنواقل المانح؛ على ذلك ليس ثمة رفض لخلايا البيتا المزروعة من الخارج. وكتوليفة متازلة للخلايا؛ تم اكتشاف محاليل وظروف بواسطة المخترعين. وقد تم تحقيق هذا بواسطة تغيير البيئة؛ على سبيل المثال» وضع المزرعة في حاضنة أكسجين مقابل حاضنة 75
من ثاني أكسيد الكريون» تغيير درجات الحرارة والفواصل الزمنية في الحاضنة على مدى فترة تبلغ 14-0 يوم. ولم يتم استخدام أي تعديلات جينية. وسيتم الآن وصف طريقة الاستنبات وطرق الزرع داخل العضلات لمزرعة خلية جزيرية تفصيلاً. تم تجميع الأرانب بالنقع في 796-40 من الإيثانول ‎«ethanol‏ على نحو مفضل 770 من الإيثانول حتى تسجيل الموت؛ على سبيل المثال؛ لما يصل إلى 10 دقائق؛ على نحو مفضل 7- 8 دقائق. في ظروف معقمة» يتم إزالة البنكرياس من تجويف البطن لأرنب حديث الولادة(المصطلح "حديث ‎"ssl‏ كما هو مستخدم هنا يتضمن الأرانب من ساعة الميلاد حتى عمر 5 أيام لم يتم إرضاعها من ثدي الأم؛ على نحو مفضل أرنب حديث الولادة حتى عمر 12 ساعة) ووضعها مباشرةً في طبق بتري مع وجود محلول ملح هانكس بارد (على سبيل المثال» 6-4 درجة مئوية أو 0 محلول فسيولوجي ‎(NaCl) physiological solution‏ ومضادات حيوية (على سبيل المثال؛ بنسيلين ‎penicillin‏ 1000 وحدة/مللي و ستريتوميسين ‎streptomycin‏ 000 [ملجم/مللي). بمساعدة ملاقيط عينية؛ تتم إزالة محفظة من البنكرياس؛ وتتم إزالة الأوعية والقنوات المفرغة. بعد ذلك؛ يتم قطع البنكرياس باستخدام مقصات عيون إلى شظايا دقيقة بحجم يبلغ حوالي 3-2 مم وبعد ذلك يتم نقله إلى زجاج ساعة خاص. وتتم مواصلة معالجة 20-18 بنكرياس بالطريقة التي 5 سلف وصفها. ويعد ذلك؛ يتم قطع الشظايا البنكرياسية الدقيقة باستخدام مقصات العيون ‎MEDAN‏ ‏قطع أصغرء أي الشظايا البنكرياسية الدقيقة ‎dag hall‏ ويتم ‎Jud‏ شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة التي تم الحصول عليها باستخدام محلول هانكس ‎Hb‏ وتوضع في قنينة مزرعة أو زجاجة (على سبيل المثال» مساحة 75 سم ‎(Corning—Costar (aye‏ مع توزيعها على سطح أسفل القنينية. وبعد ذلك ب 7-5 دقائق»؛ خلالها يتم إرفاق الشظايا الدقيقة بالبلاستيك؛ يتم صب وسط نمو خالي 0 -_من المصل ‎(Sigma Aldrich) 199 serum‏ دون ملحق مصلي إلى داخل القنينة(على سبيل المثال» 710 من حجم القنينة). ‎dag‏ ذلك توضع القنينية داخل حاضنة مع الإخضاع إلى صفر- 5 ثاني أكسيد ‎dug gS‏ احتضان النسيج البنكرياسي ‎pancreatic tissue‏ عند درجة حرارة 37.2-6 درجة مثوية (درجة حرارة الاحتضان الأولى)؛ على نحو مفضل 36.6 إلى 37 لمدة ‎all 10-6‏ على نحو مفضل 8-7 أيام (فترة الاحتضان الأولى). وكل يوم-يومين» تتم ملاحظة 5 القنينات ذات الخلايا المستنبتة من خلال الميكروسكوب المعكوس وتمت إزالة الخلايا خارجية
— 6 1 — ‎f‏ لإفراز للبنكرياس 13 خلايا دموية وعناصر النسيج الضام ¢ وتم استبدال وسط النمو 199 بوسط نمو طازج. ‎dam‏ لفترة الاحتضان الأولى؛ كانت عناقيد الخلايا الجزيرية التي تشكل أسفل القنينة وعلى الأقل 778 منها ‎Gg)‏ للألوان المحددة) عبارة عن ‎WIA‏ بيتا بنكرياسية ‎pancreatic beta‏ ‎.cells‏ ‏5 وللتنظيف النهائي للعناصر الخلوية الموازنة التي ‎fag‏ الاستجابة المناعية(على سبيل المثال؛ الخلايا المارة لخلايا الدم ‎(sland)‏ تم وضع قنينيات الاستنبات في حاضنة عند درجة حرارة تتراوح من 2 درجة مثوية إلى 29 درجة مئوية(درجة حرارة الاحتضان الثانية) لمدة 5-4 ‎all‏ (فترة الاحتضان الثانية). وقد لوحظ أن عند درجة حرارة الاحتضان الثانية التي تبلغ 24 درجة مئوية؛ تم تحقيق أفضل النتائج و احتوت خلايا البيتا أقل قدر من الخلايا المارة. وبعد ذلك لا يمكن سوى نقل 0 المزرعة التي تحتوي على الخلايا الجزيرية 790-78 من خلايا بيتا إلى مريض سكري. بالإضافة إلى الخلايا الجزيرية؛ وجدت أرومة ليفية مفردة فى المزرعة ولكن حصتهاء لا تتجاوز ‎sale‏ 1- 5. وعادة ما تكون ‎WAY‏ التي لها أصل ظهائري ‎WIA‏ متبقية في المزرعة وتصنع 7217-5 وهو ما تؤكده التلوين المناعي الهيستولوجي الكيميائي (مع وجود أجسام مضادة أحادية الأنسجة ضد بروتين ‎CytoKeratin‏ 18 ) ؛ولكنها ليست ‎LIA‏ بيتاء إذ لا تكشف الصيغ الخلوية تلك عن وجود إنسولين. ويمكن وضع جرعة واحدة لمزرعة خلية جزيرية على نحو مفضل تحتوي على 1.400.000- 0 خلية في معلق معقم في محلول ملح هانكس ‎pas)‏ 15-10 مللي؛ غير دماغي؛ يتم الحصول على جميع الخلايا) في أنبوب بلاستيكي معلم بطريقة مناسبة. وتكون لمزرعة خلية جزيرية مصنوعة ‎hg‏ لطريقة الاختراع (يشار إليها هنا أيضًا بخلايا بيتا من ‎Philadelphia Medical Scientific Center 0‏ أو ‎L,€,(BCPMSC‏ الخلية التالية: الإحصاء العام للخلايا: 1,500,000 +100,000 خلايا بيتا ‎Beta cells‏ 78+82 )750 على الأقل) ‎LIA‏ الجزيرية الأخرى +30 72+9
— 7 1 — ‎a.‏ الليفية ‎Fibroblasts‏ +30 71+2 الخلية السليفة (الجذعية) ‎LIAL‏ الجزيرية ‎Progenitor (stem) islet cells‏ +30 13+71 ودتم القيام بالاستنبات في وسط نمو خالي من المصل 99 1 . فترة تخزين ‎:f BOPMSC‏ في درجة حرارة ‎jaa‏ -4 درجة ‎Lighe‏ لمدة 72 ساعة في درجة حرارة 24-11 درجة مئوية لمدة 48 ساعة في درجة حرارة 37-30 درجة مئوية لمدة 12 ساعة. تم إعداد جرعة مزارع وسط الخلية الجزيرية من بنكريات 90 أرنب حديث الولادة يبلغ عمره 2-1 ‎Lag‏ ‏فترة الاستنبات-21-14 يوم 0 عيوشية الخلية -782 أو يفضل أكثر . في احتضان الضبط للخلايا الجزيرية المستنبتة؛ بلغ الإنتاج الأساسي للإنسولين 120028400 وحدة ميكروية/مللي لتر/الساعة؛ المحفز 2700216500 وحدة ميكروية/مللي لتر /الساعة واستبعدت طرق الاستنبات وفقًا للاختراع تلويث المزرعة بفعل الكائنات الدقيقة (على سبيل المثال» البكتريا ‎bacteria‏ « الفطريات ‎fungi‏ ؛ المايكويلازما ‎mycoplasma‏ والفيروسات ‎.(viruses‏ ‏5 وستكون كل جرعة مصحوية بشهادة تصف التحضير بها جميع المعلومات الضرورية حول ‎.BCPMSC‏ معايير عزل أو إزالة الحيوانات المصابة بالمرض؛ كما ذكرت؛ فى العلامة الأولى لأي أمراض يتم الحجر الصحي على المريض ولا تدم إعادته منها إلى المستعمرة أبدًا. ويمكن زرع المزرعة التي تم الحصول عليها لدى مستقبل؛ على سبيل المثال» مريض سكري ‎(DM) Diabetes Mellitus‏ ويمكن إعطاء النقيلة (الطعم الخارجي ) أو حقنة بعدة طرق»على 0 سيل ‎(Jal‏ بالحقن داخل الكبد (أي مباشرةً داخل المتن الكبدي ‎hepatic parenchyma‏ أو عبر الوريد البابي ‎«(portal vein‏ إلى ‎ol Jala‏ الطحال ‎pulp of the spleen‏ ¢ إلى ‎Jala‏
الشريان الطحالي ‎the splenic artery‏ 1010 ؛ في جيب ثرب كبير يتم أداؤه بطريقة خاصة باستخدام آلية تنظير البطن؛ وداخل العضل. وتكون الطريقة المفضلة لإدخال المزرعة هي إدخالها في العضلة المستقيمة البطنية للمستقبل ‎.rectus abdominis muscle of the recipient‏ من بين أهداف الاختراع هو تجميع ‎WIS‏ جزيرية من بنكرياس أرنب»؛ لا تحتوي على أي توليد
مناعة وبالتالي لا تتطلب كبح المناعة بعد نقل من نفس المصدر أو من مصدر أجنبي إلى مرضى يعانون من السكري. وتكم الجدة لهذا العلاج في أن جميع العلاجات الموجودة التي يتم فيها الحصول على خلايا جزيرية من بنكرياس مانح؛ تكون مولدة للمناعة (تحتوي على بطانة وعائية؛ وكذلك خلايا دموية ‎blood cells‏ إلخ) ويعد نقل تلك الخلاياء يكون كبح المناعة أمرًا ضروريًا. حديثًا؛ قمنا بمحاولات لتطبيق تلك المقاريات المنهجية؛ ومن شأن تلك المحاولات أن تتيح ‎Ul‏ تحقيق
نفس الأثر العلاجي (المضاد للسكري ‎(anti-diabetic‏ في حين تستخدم كميات أقل من بنكرياس المانح ‎.donor pancreases‏ لاحظ المخترعون أن في المزرعة التي تم الحصول عليها وفقًا للطريقة كما ورد وصفها أعلاه؛ تبلغ حيوية بعض ‎dl WIA‏ الجزيرية المفردة أو تجميعات خلايا البيتا الجزيرية الصغيرة المسؤولة عن حوالي نصف الكتلة الإجمالية للمزرعة تصل إلى 770-60 (استنادًا إلى التلوين الحيوي ‎vital‏
‎coloring 5‏ بواسطة ‎(Trypan Blue‏ بعد فترة احتضان طويلة نسبيًا (2-2 أسابيع) في المختبر. ومع نهاية ‎sae‏ الأسابيع الستة للاستنبات لا تتجاوز حيوية الخلايا 740. مع ذلك؛ في الوقت ذاته؛ في تجميعات أكبر لا تقل حيوية خلايا بيتا عن 780 حتى بعد 10-8 أسابيع من الاستنبات. ‎dam‏ لذلك» طور المخترعون طريقة لمضاعفة ناتج ‎WIS‏ البيتا الجزيرية من بنكرياس أرنب. وبتم وصف الطريقة تفصيلاً أدناه.
‏0 ويمكن أن يسبب تجميع مزرعة خلايا البيتا الجزيرية من بنكرياسات الأرانب حديثة الولادة التي تضم فقط خلايا البيتا الجزيرية وتكون خالية من البطانة الوعائية؛ خلايا الدم البيضاء ونواتج خلوية أخرى يمكنها أن تستحدث رفض المزارع المنقولة بواسطة الجهاز المناعي للمستقبل. وتكون عملية تحضير شظايا دقيقة من بنكرياس الأرنب حديث الولادة كما ورد وصفه أعلاه. على سبيل المثال؛ تجميع بنكرياسات لأرانب حديثة الولادة ووضع البنكرياس في محلول ملح يضم مضاد حيوي عند
درجة حرارة تبلغ 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة من البنكرياس المجمع؛
الحصول على شظايا بنكرياسية دقيقة مفرومة من البنكرياس المذكور.
يتم نقل الشظايا الدقيقة إلى داخل حاوية وعائية؛ مثل زجاجة طبية أو معملية إسطوانية؛ تكون
مكيفة لجهاز دوار؛ مع وسط خالي من المصل. ومن أمثلة الوسط الخالي من المصل يأتي وسط 199. ويتم احتضان الجاهز الدوار في محضن ‎incubator‏
يتم احتضان الشظايا البنكرياسية الدقيقة المفرومة في الوسط الخالي من المصل في الجهاز الدوار
بسرعة ثابتة تبلغ 10-2 دورة في الدقيقة (على نحو مفضل 2 إلى 6 دورة في الدقيقة ) عند درجة
حرارة احتضان أولى تبلغ 36 درجة مئوية إلى 37.2 درجة مئوية (على نحو مفضل 037") لمدة
5 إلى 12 يومًا (على نحو مفضل 10-8 أيام ) عند صفر 7 إلى 75 ثاني أكسيد الكريون لفترة
0 احتضان أولى. خلال فترة الاحتضان؛ يتم استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية (على سبيل المثال كل 4-3 أيام)؛ والخلايا غير المرغوب فيها التي يتم تدميرها بسلاسة والتي تضم خلايا خارجية الإفراز وخلايا دموية وعناصر النسيج الضام ‎elements of connective‏ ‎tissue‏ ‏وبعد أيام معدودة خلال فترة الاحتضان الأولى» تلتصق خلايا البيتا الجزيرية الطليقة داخل خلايا
5 بيتا جزيرية جديدة أكثر كثافة تكون عبارة عن هياكل كروية ‎Lely‏ قطر يبلغ 150-80 ميكرون. وتضم الخلايا الجزيرية الجديدة التي تشبه الجزيرة تلك حوالي 790-78 من ‎WIS‏ البيتا الجزيرية. ويمكن استخدام الخلايا الجزيرية الجديدة التي تم الحصول عليها بموجب هذا بصورة مباشرة في النقل إلى مريض سكري دون علاج كابح للمناعة حيث إن خلايا البيتا الجزيرية الجديدة تضم ‎WIA‏ بيتا جزيربة غير مولدة للمناعة فقط.
0 ويمكن إعطاء خلايا البيتا الجزيرية الجديدة بكمية مداوية طبيًا سواءًا تحت الجلد؛ داخل العضل؛ داخل البطن بواسطة المجموع العضلي البطني (العضلة المستقيمة أو غيرها من العضلات البطنية)؛ إلى داخل وريد مساريقي للأمعاء الدقيقة؛ إلى داخل الثرب الكبير؛ مباشرة داخل الكبد بواسطة الجهاز الكبدي الوعائي؛ الجهاز الشرياني أو الحقن المتني أو داخل الطحال عبر الشريان الطحالي ‎splenic artery‏ .
كما يتشكل أيضًا خلال فترة الاحتضان الأولى تجميعات ‎WAY‏ البيتا الجزيرية الأولى التي تصل إلى 1 مم من حيث القطر. يتم تجميع تجميعات خلايا البيتا الجزيرية واحتضانها بصورة إضافية لفترة احتضان ثانية. خلال فترة الاحتضان الثانية؛ يتم الإبقاء على الظروف التالية: درجة حرارة تبلغ 28-18 درجة مئوية ‎le)‏ نحو مفضل 24 درجة مثوية)؛ فترة تبلغ 10-4 أيام (على نحو مفضل 8-6 أيام )؛ وسط خالي من المصل ‎ie)‏ وسط 199)؛ و صفر-75 ثاني أكسيد كربون. خلال فترة الاحتضان الثانية؛ يتم استبدال الوسط الخالي من المصل بصورة دورية (على سبيل المثال كل 4-3 أيام )؛ تتم إزالة جميع الخلايا غير المرغوب فيها التي يتم استبدالها بسلاسة والتي تضم ‎WIA‏ إفراز خارجي؛ ‎LIA‏ دموية وعناصر النسيج الضام؛ وتظل تجميعات ‎LIA‏ البيتا الجزيرية في 780 على الأقل.
0 مثل الجزيرات الجديدة؛ يمكن أن يتم إعطاء تجميعات خلايا البيتا الجزيرية التي تم الحصول عليها بعد الاحتضان الثاني بكمية مداوية ‎Gada‏ إما تحت الجلد؛ داخل العضل؛ داخل البطن بواسطة المجموع العضلي البطني (العضلة المستقيمة ‎of Rectus‏ عضلة بطنية ‎abdominal muscle‏ أخرى)؛ إلى داخل وريد مساريقي للأمعاء الدقيقة؛ إلى داخل الثرب الكبير؛ مباشرةً داخل الكبد بواسطة الجهاز الكبدي الوعائي؛ الجهاز الشرياني أو الحقن المتني أو إلى داخل الطحال عبر
5 الشريان الطحالي. من المعروف أن المواد المنتجة لخلايا البيتا الخاصة الناضجة تقع في ظهارة القنوات المفرغة الدقيقة للبنكرياس. ويمكن أن تُنسب تلك الخلايا إلى الخلايا الجذعية الإقليمية أو ‎WAY‏ المولدة الأولية. وكمصدر لتلك الخلايا استخدمنا أنسجة للشظايا الدقيقة للبنكرياس أرانب حديثة الولادة التي ظلت بعد فترة الاحتضان الأولى كما ورد وصفه أعلاه. وخلال تلك ‎al‏ بصورة ‎dale‏ يحدث
0 موت للخلايا الخارجية وإزالة لها وكذلك نقل لخلايا ‎Lind)‏ وتكون بقايا الشظايا البنكرياسية؛ تضم بصورة عامة القنوات المفرغة الدقيقة؛ خاضعة إلى فترة احتضان ثالثة. خلال فترة الاحتضان الثالثة؛ يتم الإبقاء على الظروف التالية: عند درجة حرارة تبلغ 37.2-36 درجة مئوية (على نحو مفضل 37 درجة متوية)؛ في وسط عبارة عن 77 من مصل الأرانب؛ 10-5 ‎ald‏ (على نحو مفضل 8 أيام)؛ صفر-75 ثاني أكسيد كربون. ويتم استبدال وسط مصل الأرانب بصورة دورية
— 2 1 —
(على سبيل المثال كل 4-3 أيام ). تتم إزالة جميع الخلايا غير المرغوب فيها التي يتم استبدالها بسلاسة والتي تضم خلايا إفراز خارجي 4 خلايا دموية وعناصر النسيج الضام . ‎dam‏ لفترة الاحتضان الثالثة. حصل المخترع على مزارع أحادية الطبقة تضم خلايا مولدة ‎Ag‏ - المواد المنتجة لخلايا البيتا الجزيرية. من المهم ملاحظة أن تلك الخلايا لديها القدرة على النمو
بكمية نتيجة للانقسام الفتيلي. في فترتي الاحتضان الأولى والثانية؛ يمكن ملاحظة عملية اكتمال نمو تلك الخلايا بتشكيل ‎WIA‏ البيتا الجزيرية المنتجة للإنسولين خلال فترة الاحتضان ‎AEN‏ ‏تزيد الطريقة كما ورد وصفها أعلاه ناتج خلايا البيتا الجزيرية التي يمكن توليدها من بنكرياس الأراتب. وبتسبب الاحتصان الأول في: 1) ‎WIS‏ جزيرية جديدة صافية يمكن استخدامها مباشرة في الزرع؛ 2) تجميعات خلايا البيتا الجزيرية؛ و3) الأنسجة المتبقية للشظايا الدقيقة للبنكرياس
0 الأرانب حديثة الولادة. وتكون تجميعات خلايا البيتا الجزيرية خاضعة لاحتضان ثان يتم منه الحصول على ‎WIA‏ شديدة النقاء وحية بصورة كبيرة . ويتم احتضان أنسجة الشظايا الدقيقة للبنكرياس لإنتاج تركيبة تضم خلايا مولدة أولية (المواد المنتجة لخلايا البيتا الجزيرية ) وخلايا البيتا الجزيرية منتجة للأنسولين. وباستخدام الطرق التي تم تطوريرها بواسطة المخترعين؛ تتم مضاعفة خلايا البيتا الجزيرية وخلايا مولدة أولية المستخلصة.
5 وكما تظهر التحليلات الكمية والدراسات الشكلية؛ يمكن زيادة الكتلة الإجمالية للمزرعة بعد استخدام الاستنبات الإسطواني بمعدل حوالى ضعفين مقارنة بالطريقة الأصلية الموصوفة فى الطلب الأمريكي 094.721/12 (المنشور في 0267925/2008). وعلى ‎cold‏ يتيح استخدام تلك الطرق للحفاظ على خلايا البيتا وزيادة كميتها المنتجة من بنكرياس الأرانب تقليل عدد المانحين الحيوانات الذين توجد حاجة إليهم بمقدار النصف إلى الثلثين.
0 ويمكن تجميع الخلايا الجزيرية الجديدة؛ تجميعات ‎LIA‏ البيتا الجزيرية؛ والتركيبة التي تضم خلايا مولدة أولية (المواد المنتجة لخلايا البيتا الجزيرية ) وخلايا البيتا الجزيرية المنتجة للإنسولين التى تم الحصول عليها معًا قبل الإعطاء . آلية الزرع : باستخدام إبرة الحقن» على نحو مفضل لا تقل عن اسم من حيث الطول ولا تقل عن 1 مم من حيث القطر ؛ يتم تجميع معلق الخلية الجزيرية في محقنة وحقنها »على سبيل المثال؛
داخل العضلة المستقيمة البطنية بعد التخدير الموضعي. على نحو مفضل» يتم إغلاق موقع الحقن باستخدام ضمادة معقمة. يوفر الاختراع طريقة حيث يكون الإعطاء »على سبيل المثال» داخل البيروتون» بالحقن» داخل الوريد؛ داخل العضل» تحت الجلد» أو داخل القراب. يوفر الاختراع طريقة ‎Cun‏ يكون الإعطاء»على سبيل المثال؛ داخل الكبد عبر الوريد البابي؛ مباشرةً داخل لحمة الكبد؛
أو داخل الطحال.
الدليل على تقليل توليد مناعة لمزارع الخلايا الجزيرية الدليل في المختبر: أظهرت العديد من تجارب الهستولوجية بما في ذلك الفحص بالميكروسكوب الضوئي والفحص بالميكروسكوب الإلكتروني؛ الكيمياء الهيستولوجية المناعية؛ كما يظهر أعلاه؛ أنه في المزرعة النقية ليس ثمة ما يُسمى بكرات الدم البيضاء المارة (الخلايا اللمفاوية
‎lymphocytes 0‏ ؛ البلاعم الكبيرة ‎macrophages‏ و إلخ) القادرة على إحداث تفاعل مناعي بعد الإجراء (12-9 شهر). الدليل في الجسم الحي: يؤدي الزرع الخارجي لمزرعة الخلية الجزيرية داخل الفئران باستخدام سكري تجريبي إلى خمود ‎dlls‏ السكري لمدة تبلغ على الأقل 30 يومًا. ولأغراض دراسة توليد المناعة للخلايا التي تحتويها المزرعة التي تم الحصول عليها بواسطة الطريقة الموصوفة أعلاه من البنكرياس الخاص بأرانب حديثة الولادة؛ تم إجراء تجارب لتحديد
‏5 ثثبيت الجلوبينات المناعية لمصل الدم البشري عليها. ‎(DAD‏ بعد أن تم احتضانها مع العديد من أمصال الدم البشربة قد تم تلوينها بواسطة أجسام مضادة أحادية النسيلة ضد الجلويينات المناعية البشرية وتحليلها على مقياس تدفق الخلايا. وقد بدا أن الخلايا التي تحتويها المزرعة قادرة على الثبات على الجلويينات المناعية ‎immunoglobulins‏ الخاصة ‎(Mg‏ ولكن لم يكن ثمة تثبيت جلويين مناعي ‎G immunoglobulin‏ تم اكتشافه.
‏0 وينصح بتحضير جيد لمريض السكري لزرع مزرعة خلية جزيرية. وقبل العلاج بالزرع؛ يتعين أن يحقق مريض السكري أفضل ‎Alla‏ ممكنة من ‎Alls‏ ضبط السكري باستخدام العلاج المكثف بالإنسولين. وينبغي ألا يتلقى مرضى السكري أي علاجات بالتطعيمات والأمصال لمدة 4 أسابيع قبل زرع الخلايا. وينبغي أن يتضمن البحث العيادي استشارات لأخصائي العيون؛ أطباء الكلى؛
— 3 2 — أطباء الأعصاب؛ الجراحين الوعائيين» أطباء الجلدية؛ أطباء السكري؛ واستشارات مع إخصائيين آخرين فيما يخص المضاعفات الثانوية للسكري. ويمكن تحضير مريض لزرع خلايا جزيرية خارجية بالطريقة التالية: 1. إزالة الحمض الكيتوني؛ نقص السكر المتكرر أو التناضح الزائد بالإقامة في المستشفى؛ بحيث يتم ضبط الحالة العيادية للمريض بأقصى قدر ممكن؛ 2. الضبط الأقصى لحالة السكري؛ إحداث استقرار في سكر الدم بحيث يكون في المستويات الطبيعية أو القريبة من الطبيعية باستخدام العلاج الكافي بالإنسولين في ظل تحكم ذاتي محكم في سكر الدم؛ ‎Cains .3‏ التطعيمات أو العلاج بالمصل لمدة 4 أسابيع قبل زرع الخلايا. 0 سيتم إتباع المتغيرات التالية مع المرضى قبل ويعد الزراعة الخارجية للخلية الجزيرية؛ بالوتيرة التالية: بصورة عامة: 1. مستوى 18/16" (الهيموغلويين المرتبط بالجليكوزيل ‎(clycosylated hemoglobin‏ كل 3 أشهر ¢ 5 2. مستوى ببتيد ‎peptide‏ © (الأساسي والمحفز) كل 3 أشهر؛ 3. الكشف عن الأجسام المضاد الذاتية؛ الأجسام المضادة ‎(GAD J‏ الأجسام المضادة للأنسولين» الأجسام المضادة ل ‎(ICA‏ ‏4 كوليسترول المصل والجلسريدات الثلاثية ‎triglycerides‏ كل 3 أشهر؛ 5. الرصد الذاتي المنزلي لمستويات الجلوكوز في الدم (باستخدام مفكرة) عدة مرات يوميًا؛ 0 6. تصحيح متطلبات الإنسولين (باستخدام مفكرة). ‎sald‏ .
اعتلال الشبكية السكري: 1. تقييم مجال قاعي شبكي معياري ‎sterofundoscopic‏ بواسطة تصوير منظر قاع العين ‎dually‏ الفلورية ‎fluorescent‏ كل 3 أشهر؛ ‎sas .2‏ الإبصار ‎Visual acuity‏ كل 3 أشهر . ‎Pel 5‏ الكلية السكري ‎Diabetic nephropathy‏ :
1.سلس البول ‎[Proteinuria‏ 24 ساعة مرة واحدة شهرتًا؛ 2. لال الألبيومين الدقيق ‎Microalbuminuria‏ كل 3 أشهر؛ 3. مصل كيرياتين ‎Serum creatinine‏ كل 3 أشهر؛ 4. تصفية ‎Creatinine clearance (il SI‏ كل 60-3 شهر؛
0 5. ضغط الدم مرة واحدة أسبوعيًا. الاعتلال العصبي السكري ‎:Blood pressure once‏ ‎KEMG .1‏ 3 أشهر؛ 2. دراسات التوصيل العصبي للعصب الظنبوبي ‎Nerve Conduction studies of tibial‏ 06 ؛ العصب الريلي 706376 ‎sural‏ ؛ العصب المتوسط ‎median nerve‏ -كل 3
شههور )6( 3. المقياس التناظري للألم مرة واحدة شهربًا؛ 4 التغيرات الانتصابية -مرة واحدة شهريًا؛ 5. 6 >اع-تغير +-تكل 3 أشهر . الاعتلال الوعائي السكري:
0 1. موجات دوبلر فوق صوتية ‎Doppler ultrasound‏ كل 3 )6( أشهر؛
— 5 2 — 2. مسبار دوبلر ‎Doppler probe‏ ¢ 3. دويلر لضغط الدم ‎Doppler Blood pressure ankle asl‏ /الذراع ‎arm‏ ¢ 4 دويلر لضغط الدم القطعي ‎Doppler segmental blood pressure‏ ¢ تغير صورة الموجة لتخطيط التحجم .
5 وكما يظهر البحث الكيميائي الحيوي والمورفولجي ؛ تعالج مزارع الخلايا البنكرياسية الجزيرية التي يتم إنتاجها بواسطة الطرق المذكورة النشاط الإفرازي العالي وقللت بصورة كبيرة توليد المناعية (الفاعلية المناعية). ويفضل أن تكون شهادة الجودة مرفقة بكل ‎ohn‏ من الخلايا المصممة للعلاج بالخلايا. مؤشرات والتناقضات للزرع الخارجي للمزارع الجزيرية
0 المؤشرات المذكورة كمثال (أ) المسار المتقلقل للشكري المعتمد على الإنسولين ‎insulin‏ ‎(IDDM) dependent Diabetes Mellitus‏ مع وجود ميل في اتجاه ‎Als‏ اتجاه نقص السكر في ‎hypoglycemic statusaall‏ و/أو الحمض ‎ketoacidosis gill‏ ؛ (ب) عدم القدرة على الوصول إلى تعوبض مرضى 1 ‎IDDM‏ باستخدام الطرق العادية 3 مقاومة ‎J‏ لإنسولين 3 ‎(z)‏ ‏المضاعفات الثانوية للسكري لدى المرضى ممن يعانون ‎NIDDM (IDDM‏ (الاعتلال العصبيء؛ 5 اعتلال الكلية؛ اعتلال الشبكية؛ الاعتلال الوعائى للأطراف السفلي؛ إلخ)؛ باستثناء الدراسات الطرفية؛ و (د) ‎IDDM‏ (المعتمد على الإنسولين) و ‎NIDDM‏ (غير المعتمد على الإنسولين) دون الكشف عن المضاعفات الثانوية - ولأغراض المعالجة الوقائية. ب-التناقضات : العدوى الحادة والأمراض الالتهابية ‎inflammatory diseases‏ » أو تفاقم الأمراض المزمنة؛ أمراض الأورام01568565 ‎chronic‏ . 0 الإشراف على المرضى بعد زرع لمزرعة خلية جزيرية خلال العام الأول بعد الزرع؛ يوصى بالفحص المذكور أعلاه بعد 3؛ 6 9 و12 شهر. يبدي معظم مستقبلي العلاج في 3-1 أشهر بعد الزرع الخارجي التغيرات التالية:
— 6 2 — 1. في الوقت الحالي أو قبل ‎—XT‏ يتم احداث استقرار في السكري المتقلقل من النوع الأول؛ 2. يختفى ميل المرضى لوجود إزدياد تولد الأجسام الكيتونية ‎ketosis‏ ؛ 3. تحسن متغيرات تبادل الكريوهيدرات ©00809«© ‎carbohydrate‏ (يقل ‎Leg‏ متوسط سكر الدم -خلال 2-1 شهر؛ انخفاض محتوى الهموغلويين ‎hemoglobin‏ المعالج بالجليسول ‎glycosylated 5‏ -3 أشهر)؛ ‎ard 4‏ (بمعدل 230-20( الحاجة إلى تلقي إنسولين خارجي ¢ 5. تتسحن متغيرات استقلاب الشحم ‎lipid metabolism‏ : 6» لدى المستقبلين ممن يعانون غياب الفرز المتبقي للإنسولين بواسطة خلايا بيتا الخاصة بهم(غير محدد فيما يخص ببتيد 060106 ) يظهر إنتاج المريض للإنسولين (-ببتيد ).
0 7. لدى المرضى ممن يعانون الاعتلال العصبي الحسي الحركي؛ يختفي الألم والتنمل؛ تتحسن متغيرات الحساسية والتوصيل بالنسبة للألياف الموجودة فى العصب الطرفى. لدى المرضى ممن يعانون الاعتلال العصبي المستقل؛ ممن يعانون لمراقبة السكر في الدم؛ انخفاض الضغط الوضعي؛ الشلل المعدي؛ والاعتلال المعوي (الإسهال ‎o(diarrhea‏ تتم معادلة متغيرات التبض وضغط الدم؛ كما تمت معادلة وظائف المعدة والقناة الهضمية أيضًا.
8. لدى مرضى السكري من النوع الأول ممن لديهم اعتلال الكلية السكري معبرة عنه بصورة مرحلية (التصنيف على ‎(C.Morgensen‏ تقل وتختفي البول البروتيني؛ يقل ضغط الدم المرتفع وتتم معادلته. لدى المرضى ممن لديهم مرحلة ثالثة من اعتلال الكلية السكري؛ يقل زلال الألبيومين الدقيق ‎microalbuminuria‏ أو يصبح طبيعيًا (أقل من 30ملجم/اليوم).
9. لدى المرضى ممن يعانون الحالات غير المنتشرة وما قبل المنتشرة لاعتلال الشبكية السكري
‎diabetic retinopathy 0‏ « وتستقر الصورة العيادية لقاع ‎call‏ وبحظى الجزء البارز للمستقبلين بتحسن: تبرأ حالات النزيف» ويقل ركود الشبكية.
— 2 7 —
وينتج استقرار مسار السكري وتقليل الإنسولين الخارجي المطلوب عن العمل الكافي للخلايا
الجزيرية المزروعة والتعافي الجزئي أو الوظيفة الزائدة للخلايا الجزيرية لبنكرياس المستقبل.
ويعتقد أن الأثر العلاجي لمزارع الخلايا المزروعة على المضاعفات المتأخرة للسكري تكون مفسرة
بصورة جلية بواسطة استعادة أو تقوية الإفراز بواسطة كل من خلايا البيتا المزرعة وخلايا البيتا الموجودة لدى المريض نفسه ل ببتيد ©؛ والتي يتم إنتاجها مع الإنسولين ولها أثر وقائي وعائي
بارز.
‎Udy‏ لفرضية أن تطور اعتلال الأوعية الدقيقة؛ والذي يعد ركيزة جميع مضاعفات السكري؛ يحدث
‎days‏ لنقص الببتيد © ويعض العناصر الأخرى المشابهة للهرمونات التي يتم إنتاجها بواسطة
‏خلايا البيتاء ‎lly‏ تغيب لدى الأغلبية الساحقة من مرضى السكري من النوع الأول.
‏0 وينتج عن حقن ببتيد © لدى المرضى ممن يعانون مضاعفات السكري من النوع الأول تراجع المضاعفات الثانوية للسكري؛ مثل اعتلال الكلية ‎nephropathy‏ « اعتلال الشبكية ‎retinopathy‏ ‏والاعتلال العصبى ‎neuropathy‏ . وتنتج خلايا البيتا الأرنبية المزروعة ببتيد © طبيعي؛ له أثر فسيولوجي على مضاعفات السكري المتأخرة.
‏5 يظهر الجدول 1 تحسن فى التحكم في سكر الدم وانخفاض في الحاجة إلى إنسولين بعد ‎ICCXT‏ ‏(112 حالة موثقة جيدًا). الجدول 1
‏المؤشر قبل بعد 3 أشهر | بعد 6 أشهر | بعد 9 أشهر | بعد 12 شهرًا ‎Ut XT‏ المتوسط اليومي | 41+198 |52+158 |23+129 |30+133 | 34+142 لسكر الدم؛ ملجم/يوميًا
— 8 2 — 1.249.1]2.1+10.1 |1.9+7.7 |1.146.9 |1.9+7.5 جرعة 6 |15+38 12+25 9+32 8+40 ‎f‏ لإنسولين ‎IU:‏ ‏يظهر الجدول 2 الحاجة إلى إنسولين (لا1/يوميًا) ومستوى زلال الألبيومين الدقيق (ملجم/يوميًا) بعد ‎XT‏ المكرر لدى مريض 15.5 (33 سنة؛ ‎lay‏ من 18 سنة من النوع الأول السكري) الجدول 2 ‎XT‏ | المؤشر قبل ‎XT‏ يعد 3 بعد 6 بعد 9 بعد 12 ‎Hed‏ ‏أشهر أشهر أشهر الأول | جرعة 64 33 38 40 48 الإنسولين زلال 936 680 348 330 496 الألبيومين الدقيق الثاني | جرعة 52 38 24 26 38 الإنسولين زلال 277 189 199 16 الألبيومين الدقيق الثالث | جرعة 42 38 25 32 40 الإنسولين
— 9 2 — زلال 330 145 112 88 الألبيومين الدقيق الرابع | جرعة 40 34 20 16 16 الإنسولين زلال 45 34 40 39 الألبيومين الدقيق وتكون الميزة الرئيسية لزرع الخلايا الجزيرية مقارنة بالعلاج المعتاد للسكري من النوع الأول؛ كما وبسبب الزرع الذي يتم بصورة منتظمة؛ أبدى جميع المستقبلين انخفاضًا في تطور الاعتلال الوعائي السكري؛ وارتداد المراحل الاولى للمضاعفات السكرية الأخيرة (اعتلال الشبكية؛ اعتلال الكلية؛ الاعتلال العصبي؛ والاعتلال الوعائي ‎(@ngiopathy‏ والذي يستحيل تحقيقه بمساعدة العلاج الاعتيادي (حقن الإنسولين فور التحكم الذاتي في سكر الدم؛ والعلاج التقليدي للاعتلال الوعائي). وبحدث هذا في معظم الأحيان بسبب بدء ‎WA‏ البيتا الخاصة المزروعةبعد أخذ الخلايا المزرعة (قبولها) في إنتاج داخل جسم المستقبل ببتيد © به مادة واقية للاوعية؛ حُرم منها المريض جراء 0 انهيار خلايا البيتا الخاصة به (جراء هجوم ‎cls‏ ذاتي ‎.(self-control of glycemia‏ وقد أظهرنا قدرة الخلايا البنكرياسية الجزيرية؛ التي يتم استلامها عبر الطريقة الأصلية من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة؛ على البقاء والعمل في بيئة الجسم الحي؛ في تجارب للزرع الخارجي لتلك المزارع على حيوانات لديها سكري تجريبي. تم استخدام ‎Gl)‏ ذكور من سلالة ‎Vistar‏ لها كتلة جسم تبلغ 220-180 جرام؛ تم تغذيتها بانتظام 6 باعتبارها حيوانات تجريبية .
تم تحفيز السكري التجريبي بواسطة الاستخدام تحت الجلد ل ألوكسان ‎Alloxan‏ (الجرعة 200 مللي لتر لكل 1 كجم من وزن الجسم) أو بالاستخدام تحت الجلد ل ستريتوزوتوسين ‎Streptozotocini‏ (الجرعة 60 ‎Al‏ لتر/كجم ). خلال التجارب ومسبارات التحكم ‎control probes‏ لم نستخدم إلا ‎hall‏ التي لها سكري محفز بواسطة ألوكسان أو ستريتوزوتوسين؛ ممن لديهم مستوى انخفاض سكر الدم على معدة خاوية يبلغ 0 مللي مول/لتر وأعلى. أشارت اختبارات سبق إجراؤها أن تلك الحيوانات لم يكن لديها ارتداد سلس للسكري التجريبي. بعد زرع مزارع خلية بيتا جزيرية بنكرياسية ‎«(-P.1.C) pancreatic islet cell‏ 8 من أصل 4 فأر لديهم سكري ‎Sine‏ بواسطة ألوكسان مستقر أو حاد(حوالي 785) أبدوا خمودًا ‎Gl‏ لحالة 0 السكري حتى نهاية الفترة التجريبية )20 أسبوعًا). وقد تم تسجيل نقص ثابت في مستويات السكر في الدم بلغ إلى ما يقرب من المستويات الطبيعية في دم الحيوانات المستقبلة. في الوقت ذاته؛ كما كانت خصائص الأعراض العيادية للسكري تتلاشى أيضًا(مثل فقدان الوزن ‎weight loss‏ ؛ العطاش ‎polydipsia‏ ¢ البوال ‎(polyuria‏ وقد ظهر الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي بوضوح في كل من حالات استخدام المزارع داخل الكبد (عبر الوريد البابي أو ‎Bale‏ داخل النسيج 5 الحشوي الكبدي ‎(directly into liver’s parenchyma‏ وأيضًا داخل الطحال (تم جلب المزارع في داخل اللب ‎«(intra—pulp‏ وأيضًا من خلال العضلات البطنية. وحتى بعد 8 أسابيع بعد الزرع الخارجي؛ تم الكشف عن ‎PLLC‏ لها هيكل تم الاحتفاظ به لها علامات نشاط إفرازي في أماكن الزرع لدى ‎GLE‏ تعاني من تراجع السكري التجرببي. وخلال سلسلة خاصة من تجارب دور الاستنبات الأولي ل ©.0.1. في المختبر كان بوضوح في بقاء الخلايا في الكائنات المستقبلة للتكوين الخارجي. ولذلك الغرض؛ قمنا بتحليل مقارن لنتائج الزرع الخارجي لمزارع ©.0.1. للبنكرياس لأجنة بشرية وزرع خارجي لنسيج جزيري جنيني غير مستنبت لدى ‎Gl‏ تعاني من سكري تجرببي. وقد تم الكشف عن أن الأثر المقلل للسكر يتم التعبير عنه بصورة أكبر ويكون ‎igh‏ الأمد لدى حالات زرع ‎PLC‏ مسبق الاستنبات مقارنة بزرع نسيج غير مستنبت للبنكرياس»؛ وهو ما ينتج ‎die‏ فقط تراجع قصير العمر لحالة السكري.
‎og‏ ذلك؛ النتيجة المضمنة للمناعة للاستنبات في المختبر قد ثبت عياديًا بأنها تزيد بصورة كبيرة مدة القابلية للبقاء في كائن لمستقبل غريب. وقد خضع بنكرياس الفئران المستقبلة ‎AU)‏ عددها 18( ‎ally‏ أجري عليها زرع خارجي ناجح لمزارع بنكرياس أرانب حديثة الولادة؛ إلى اختبار هستولوجي في 8 أسابيع بعد زرع. ولذلك الغرض تم تثبيت شظية من البنكرياس في محلول ‎Buena‏ وتم غمرها في بارافين. وقد تم تلوين الشرائح
(السمك 7-5 ‎(Mkm‏ باستخدام هيماتوكسيلين ‎hematoxilin‏ وأيوسين ‎Laas ¢ alloxan‏ بواسطة ‎Aldegid—Fuxin‏ للكشف عن خلايا بيتا ‎B-cells‏ في الوقت ذاته؛ تم عن ‎IS‏ فحص بنكرياس لحيوانات عينة الضبط البالغ عددها 6والتي تعاني من سكري محفز بواسطة الألوكسان 0 غير معالج وكذلك بنكرياس الفتران الصحيحة البالغ عددها 6(مع عدم استخدام
0 ألوكسان). وأثتاء فحص بنكرياس ‎hall‏ الصحيحة السليمة؛ وجد أن حوالي 776-45 من ‎WIA‏ بيتاء كما هو متوقع» في جزر "لانجرهانس ‎Langerhans‏ ". وقد كان ‎OA‏ ممن يعانون من سكري محفز بواسطة الألوكسان غير معالج كمية قليلة بصورة كبيرة من خلايا بيتا في الجزر -في المتوسط ‎J1.1+8.3‏
5 وقد تم اكتشاف كمية أكبر بكثير من خلايا بيتا في الجزر لدى ‎hal‏ المستقبلة. ولدى الحيوانات؛ التي تم إخضاعها إلى الزرع الخارجي ل مزارع ‎PLLC‏ وقد ظهر أن البنكرياس الخاص بها خلايا بيتا نموذجية وقد بلغ نصبيها من بين الخلايا "الجزيرية' من 10 إلى 755 (حوالي من 7 إلى 1) (لمتوسط 8.8+23.5). فيما يخص تلك التجارب؛ يمكننا أن نفترض أن الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي ل مزارع ‎OK‏
0 على تطورات السكري التجريبي لدى فتران يحدث بطريقتين عامتين: أ)تشغيل خلايا البيتا المزروعة؛ التي تم تأكيدها بالإضافة إلى الأثر المقلل للسكر الذي تم التعبير عنه؛أيضًا بالكشف عن مجموعات من ‎PC‏ المزروعة في لب الطحال للحيوانات المستقبلة ب) تحفيز أثر لزرع مزارع ‎PLLC‏ على معدات الجزيرة للبنكرياس لدى الفئران المستقبلة؛ وقد تأكدت إمكانية هذا بواسطة الفحوص الهيستولوجية للبيانات التي تكشف عن وجود جزر مضطردة لها خلايا بيتا
— 2 3 — طبيعية وحصة أكبر منها في الجزر للبنكرياس للفئران المستقبلة أكثر من الفئران التي تعاني من سكري محفز بواسطة ألوكسان غير معالج. وقد أصبح البحث التجريبي الناجح ‎BS)‏ لأداء زرع عيادي لمزارع بنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى مرضى السكري من النوع الأول.
زرع عيادي لمزارع ©.0.1. المنتجة من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة .
وقد خضع إجمالي 112 مرضى يعانون من السكري من النوع الأول ‎Diabetes Mellitus‏ ‎(IDDM)‏ لإشراف ديناميكي ‎dynamic‏ موثق جيدًا. ومن بين المرضى البالغ عددهم 2 مرضى كان هناك 58 ‎Shay‏ و54 امرأة. وقد تفاوتت أعمار المرضى لحظة الزرع من 16 إلى 53 -المتوسط 35 سنة.
0 من المعروف أن شدة ظهور المضاعفات الثانوية للسكري تعتمد بصورة كبيرة عن مدة مريض ‎IDDM‏ على نحو مفترض؛ يحدث تدمير خلايا البيتا الخاصة بالمريض ‎Tah‏ لعملية مناعية ذاتية في حوالي العام الخامس بعد ظهور المرض. وتظهر المضاعفات الثانوية للسكري نفسها ‎Bale‏ لدى المرضى ممن بلغت مدة المرض لديهم ما يزيد على 10 سنوات. وبسبب ذلك؛ تم تقسيم جميع مرضى ‎IDDM‏ إلى 3 مجموعات بالإشارة إلى مدة المرض: أ) 1 إلى 5 سنوات - 16
5 شخصًا؛ ب)6 إلى 10 سنوات - 43 شخصًا ج) ما يزيد على 10 سنوات - 53 مريضًا. وقد تم فحص جميع المرضى بهدف تحديد طبيعة تطور مرض ‎IDDM‏ وإرساء وجود مضاعفات السكري . ‎Bole‏ تم استخدام المزارع المستلمة من خلال الطرق الموصوفة أعلاه من بين 60-50 بنكرياس أرانب حديثة الولادة عمرها 2-1 يوم للزرع لدى مريض واحد. ‎Bales‏ ما يتم توصيل المعلق إلى داخل العضلة البطنية المستعرضة في ظل تخدير موضعي. ولم يتم استخدام أي كبح مناعي.
0 وتعد أهم حقيقة تؤكد وجود أثر مضاد للسكري في الخلايا الجزيرية المزروعة لمجرد تشغيل خلايا البيتا المزروعة؛ هي حقيقة اكتشاف في موقع إعطاء خلايا الزرع. وإذا كان بعد الزرع ‎Jala‏ الغشاء البريتوني يبدو شبه خيال تحديد موقع الخلايا المستخدم في التجويف البطني؛ فبعد الإعطاء داخل الطحال يكون ممكن ؛ حتى وإن كان شديد الصعوية .
— 3 3 — وقد تم الحصول على صورة مجهرية لمقطع هستولوجي ملون من خلال لب الطحال والذي يظهر بوضوح خلية مزروعة يتم تمثيلها بواسطة مجموعة من الخلايا الظهارية في منتصف الصورة . ويستند تأكيد أن تلك الخلايا تعد بالفعل خلية مزروعة»؛ ‎Wika‏ على أساس أن الهياكل الظهارية على ‎cll‏ يحمل وجود ‎LAY‏ الظهارية فى اللب المباشر فى طياته الدليل على 'داخل من الخارج” ويكون فى هذه الحالة خلية مزروعة . استنادًا إلى نتائج البحث العلمي التجريبي؛ يمكن الخروج بالنتائج المتعددة التالية: 1. يحدث ستربتوزوتوسين 5160102010010 (52) أثرًا مدمرًا عامًا على خلايا البيتا الخاصة للخلايا جزيرية للبنكرياس» ولكن في الوقت ‎cil‏ يؤدي بصورة مباشرة أو غير مباشرة إلى فقدان ‎DIAL 0‏ الجزيرية الأخرى. 2. يظهر أن عملية ‎sale]‏ توليد في خلايا لانجرهانس الجزيرية المتأثرة تحدث بصورةٍ رئيسية نتيجة لاسترداد مجموعة خلايا البيتا الخاصة. 3. وتتكون مزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة من خلال الطريقة الأصلية بصورة ‎dale‏ من خلايا البيتا الخاصة المنقاة من عناصر الموازنة الخلوية ولها 5 تشاط منتج للإنسولين عالٍ جدّا. 4 ويوفر الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية داخل الغشاء ‎gull‏ ¢ وكذلك داخل الطحال لدى فئران تعاني من سكري تجريبي تم تحفيزه بواسطة ستريتوزوتوسين» في أغلب الحالات؛ تراجع ثابت لحالة السكري لمدة تبلغ على الأقل 8 أسابيع. ‎ag .5‏ تأمين الأثر المقلل للسكر في مرحلة ما بعد الزرع بواسطة تشغيل خلايا البيتا المزروعة؛ 0 أيضًا بواسطة الأنشطة المنتجة للإنسولين ‎ed‏ إلى درجة ‎le‏ المجموعة التي تم استردادها من خلايا البيتا الخاصة في الخلايا الجزيرية للبنكرباس للفئران المستقبلة. ويتأكد هذا من خلال نتائج قياس تركيزات الإنسولين الخارجي (الخاص بالأرانب) والإنسولين الأصلي(الخاص بالفأران) في دم حيوانات تجريبية.
— 4 3 — 6. وقد أكدت الفحوصات الهستولوجية للبنكرباس للفتران التجريبية التحفيز الذي تم التعبير عنه للعمليات التجديدية في الخلايا الجزيرية للفئران التي تعاني من سكري ستريتوزوتوسيني بعد إعطائها الزرع الخارجي للمزارع الخلايا الجزيرية . من الممكن أن إعادة تجديد خلايا البيتا الخاصة لا يحدث فقط في هوامش تحديد مواضع خلايا الانجرهانس الجزيرية ولكن أيضًا في بعض الهياكل خارج النسيج البنكرياسي الجزيري. سيتم توضيح الاختراع بمزيدٍ من التفصيل بالإشارة إلى الأمثلة التالية؛ ولكن ينبغي أن يُفهم أن الاختراع الحالي لا يعتبر مقتصرًا عليها. الأمثلة المثال 1
0 في المرحلة الأولية من اعمال البحث ‎alll‏ استخدام المخترعون ‎hi‏ من سلالة ‎Vistar‏ لها كتلة جسم مقدارها 250-220 جرام يتم تلقيها من حاضنة خاصة لحيوانات المختبر باعتبارها حيوانات تجريبية. ولإزالة التأثيرات الحلقية الهرمونية على تغير متغيرات استقلاب الكريوهيدرات
. ‏؛ قررنا الاستمرار فى تجارب على ذكور بالغة زغباء‎ carbohydrate ‏تجارب تم تصميم‎ Oh ‏وللحصول على نتائج موضوعية أثناء إجراء العلاج المضاد للسكري لدى‎
نموذج للسكر ‎S‏ المستقر . تم تحفيز الأمراض في حيوانات بواسطة إدخال إعطاء تجزيئ داخل الغشاء البريتوني لمحلول مرتجل قابل للاشتقاق للستريتوزوتوسين - جرعة إجمالية قدرها ‎BO‏ ملجم لكل 1 كجم من وزن الجسم. وقد تم ‎glad)‏ إجمالي 90 من حيوانات لأثر الستربتوزوتوسين 50601020100107. وفي وقت لاحق طورت أغلبية الحيوانات علامات مميزة لحالة السكري: العطشء تعدد التبول(جلوكوز
0 الدم الزائد)؛ الشره(التناول الزائد للطعام)؛ تساقط الشعر؛ بطء الزيادة في كتلة جسم أو تراجعها. وعند هذه النقطة؛ تم تسجيل سكر دم مرتفع تم التعبير ‎die‏ لدى 58 فأراء أي احتفظ 22 آخرين بسكر دم طبيعي أو ارتفع تركيز الجلوكوز بصورة غير ملحوظة. ويانقضاء مدة الأسابيع الأربعة بعد تحفيز السكري تم انتقاء 32 حيوانًا له مستويات ارتفاع سكر الدم أكثر ثباثًا . تم تأكيد الثبات
— 5 3 — بواقع أنه خلال الملاحظة لمدة تقرب من الشهرء لم ينخفض تركيز سكر الدم إلى مستوى أقل من 6 مللي مول/لتر. ولا يعد اختيار سكر الدم الأولى في هذا النطاق أمرًا عشوائيًا كما يفسره ما يلى. كما أظهرت تجارب سابقة؛ في سكر الدم الذي يبلغ مستواه 16 مللي مول وأعلى؛ كما تم تسجيله فيما لا يقل عن 4 أسابيع بعد إعطاء سكري محفز بالستريتوزوتوسين ‎streptozotocin‏ » لا تبدي هذه الفئران
تراجعًا إنسيابيًا في المستقبل وكذلك ارتداد للحالة السكرية. في الوقت ذاته يتيح حتى مستوى عال جدًا من سكر الدم (في ظل 30 مللي مول/لتر )لأغلبية حيوانات التجارب المصابة بالسكري البقاء لمدد طويلة(شهرين أو اكثر)؛ مما يسمح ‎shal‏ تجارب أكثر استمرارية دون أي مخاوف حقيقية فيما يخص موت تلك الحيوانات فى غير أوانها. وقد تأكدت تلك الفرضيات بملاحظة مجموعة
0 الضبط ‎All)‏ لا تتلقى علاج) من ‎Glad‏ المصابة بالسكري. أدناه النتائج التي تخص أثر الزرع الخارجي داخل التخاع لمزارع خلايا جزيرية لأراتب حديثة الولادة على طول السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين لدى 8 فثران تعاني من السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين ثابت. وقد تم إعطاء كل حيوان من الحيوانات المستقبلة؛ على خلفية تخدير هيكسينى داخل الغشاء البريتوني» تم إعطاء 800.000-700.00 ‎WIA‏ جزيرية للبنكرياس ‎Cull‏ حديثة الولادة عن ‎Gob‏
إعطاء ها عبر الوخز في الجدار البطني باستخدام إبرة لها قطر كبير . أدناه نتائج فيما يتعلق بالتغير في شدة حالة السكري في كل حيوان من حيوانات التجارب الثمانية لهذه المجموعة. المجموعة الأولى: 8 فئران تعاني من ارتفاع سكر الدم؛ تم إعطاء ها الزرع الخارجي لمزارع
0 خلايا جزيرية داخل التجويف البطنى؛ المجموعة الثانية: 8 ‎ol‏ تعاني من ارتفاع سكر الدم؛ تم إعطاؤها الزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية داخل لب الطحال؛
— 6 3 — المجموعة الثالثة: 8 فئران تعاني من ارتفاع سكر الدم؛ لم يتم إخضاعها لأي علاج(الضبط). الجدول 3 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين 512(51601020100(7)ويعد زرع ‎(TX)‏ مزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة داخل الغشاء البريتوني لدى الفأر رقم 1 ‎Stz‏ ل ‎Tx‏ ‏أس 1 ]2 |3 ]4 50 7 ابيع بعد ‎Stz‏ ‏سكر الدم |20.|6.7 |.24 |.12 |.12 |.12 ).12 .12 .11 .14 .14 نانومولار/ © |1 |2 ‎o| 8 9| 2| 5 4| of‏ لتر ‎as‏ 22 170/175 | 180 230200 250 | 290 )340330 ‎[oud‏ ,0 جرام
الجدول 4 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين ‎(STZ)‏ وما يعقب ذلك من زرع ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة داخل الغشاء البريتوني في ‎DW‏ ‏رقم 2
— 7 3 — ‎Stz‏ ل ‎Tx‏ ‏أسابي 1 2 3 ]4 (5 7 جح بعد ‎Stz‏ ‏السكر في ]6.4 ].18 |.16 .13 7.4]|6.7| 7.015564 الدم 7 6 0 نانومولار/ل تر كتلة 0 | 180 |170 |180 |21 |23 |24 25 27 +29 321 الجسم/جرام ‎of Of 0 02 OF Of 0 0 ١‏ الجدول 5 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الغشاء البريتوني ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 3 ‎Stz‏ ل ‎Tx‏ ‏أس 1 2 3 4 5 7 ابيع بعد ‎Stz‏ ‏السكر في |.5 | .20 |.29 |.16 |.22 |.16 |.12 |.14 |.17 | .16 .15 الدم 4 |8 0 1 2 5 5 1 7 5 9 نانومولار/ لتر
— 8 3 — ‎as‏ 20 | 180 |160 |210|200|170|160 ]240220 ]250 | 290 الجسم/جر ]0 ام الجدول 6 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الغشاء البريتوني زرع ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 4. ‎Stz‏ ل ‎Tx‏ ‏أساب 1 2 3 4 5 7 & بعد ‎Stz‏ ‏السكر في .19 |.21 |.12 |.13 .14 ]7919.2 2 8.3 الدم 7 2 2 0 1 نانومولار/ل تر كتلة 4 |210 |200 ]190 |210 250 ا26 27 31 32 35 الجسم/جرام ‎Of Of 0| 0 0 ١‏ 0 الجدول 7 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك داخل الغشاء البريتوني زرع ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 5
“اس | ]1 ]2 ]3 ‎a]‏ أو 7 ابيع بعد
Stz 14.1 16. | 15. 15. 15.| 14. | 15. 15. | 17.| 18. | 4.| ‏السكر في‎ 6 8 2 0 9 0 9 5 9 91 9 ‏الدم‎ ‏نانومولار/‎ ‏لتر‎ ‎300280270250240 220200180) 1701180 20 ‏كتلة‎ ‎0 ‏الجسم/جر‎ ‏ا‎ ‏الجدول 8. تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع‎ ‏لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم‎ (TX) ‏داخل الغشاء البريتوني‎ .6 7 sT a] 3] 2] 1] [ou “ يع بعد
Stz
‎Sul‏ في | 5.9 ا.22 |.21 14.2 .11 |7.07.8 8.18.4 7.47.8 الدم 3 |9 22 ‎1١‏ ‏نانومولار/ل ‏تر ‏كتلة 4 |210 ]210 |200 240 24 |26 +29 |32 35 |36 الجسم/جرام ‎of 0] of 0| 0 0 ١‏ 0 الجدول 9. تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (51) وما تلا ذلك من زرع داخل الغشاء البريتوني ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم ‎J‏ ‎Stz‏ ل ‎Tx‏ أسابي 1 2 ]3 4 5 7 ج بعد
Stz 6.4(51/6.1|54]6.4]8.1|79]| 11. 17.| 18.|5.9] ‏في‎ <ul 11 0 ‏الدم‎ ‏نانومولار/ل‎ ‏تر‎ ‎30+ 28 27+ 25 ‏ا‎ 24| 22| 20180170 180١ 20 ‏كتلة‎ ‎0 0١ of 0] 0] 0١ 0 0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‎:10 ‏الجدول‎ 5 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الغشاء البريتوني ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 8.
— 4 1 —
Tx ‏ل‎ Stz أس 1 ]2 3 4 50 7 ابيع بعد
Stz 20.018. 17. 18. 21.| 20.| 18. 17. 25.| 24.| ‏في ا.6‎ Sul 9 8 8 6 8 0 8 7 6 0+ 3 ‏الدم‎ ‏نانومولار/‎ ‏لتر‎ ‎300 290270260250220) 200 | 190| 170 | 190 | 25 as 0] ‏الجسم/جر‎ ‎al المتال 2 تم إخضاع ثمانية )8( 08 تعاني من السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين ثابت إلى زرع خارجي داخل الطحال لمزارع خلايا جزيرية. وقد تم إجراء إعطاء مزارع خلايا جزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة على خلفية ‎pads‏ هيكسيني. ‎dag‏ فتح جدار بطني وجلب لطحال داخل جرح عملية؛ تم إدخال معلق خلوي مباشرةً داخل لب العضو عبر محقنة قطرها 1.2 مم. تم الضغط على مكان الحقن باستخدام سدادة من الشاشة؛ وبهذا يتم الإبطاء من النزيف المتني واغلاقه 0 باستخدام قطرات من صمغ طبي خاص. تمت خياطة الجدار البطني باستخدام غرز إلى أعلى
— 2 4 — طبقة بطبقة. وفيما يلي أدناه النتائج العامة لعمليات الزرع تلك؛ وتحديدًا ديناميكيات مؤشرات سكر الدم وكتلة الجسم للحيوانات المستقبلة. الجدول 11. تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع ‎LAY‏ الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 17.
عاد ل ‎Tx‏ ‏أس 1 |2 |3 ]4 5 7 ابيع بعد ‎Stz‏ ‏سكر .5 |.16 |.17 |.16 |.12 |.10 |.10 .11 .8 الدم/نانومولار/ ‎T| 3١‏ |1 |8 +2 ]2 0 21 1 لتر ‎al‏ الجسم/ |22 |32|280|250|240|200|190|200|200 |34 36 جرام 0 © ‎0١‏ 0 الجدول 12. تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع ‎LAY‏ الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 18. ‎Tx — Stz‏ أس 1 |2 ]3 ]4 !51 7 ابيع بعد ‎Stz‏
سكر .24 |.22 .19 .7.12.18 .6 |.5 |.7 .10 ‎pl‏ /ناتومولار/ 0 1 |5 0 66 ‎4١‏ 5 |7 0 22 لتر ‎als‏ الجسم |22 | 180 | 170 )170 )180 24/200 29 |32 |33 | 360 جرام 0 © ‎0١ 0١‏ 0 الجدول 13: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع ‎LAY‏ الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 19. عاد ل ‎Tx‏ أس 1 ]2 |3 4 5 7 ابيع بعد
Stz 7.110. 9.11. 11.| 10.| 14. | 17. 21.| 21.| S. ‏سكر‎ ‎41 5 1 4 ‏الدم/نانومولار/ ا 3 ا2 |2 ]6 |04 5 ا2‎ ‏لتر‎ ‎35) 310 30270 | 250210200190 |210|220| 25| ‏الجسم‎ als 0 0 0 ‏جرام‎ ‏الجدول 14: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من‎ .20 ‏الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم‎ LAY ‏لمزارع‎ (TX) ‏زرع داخل الطحال‎ ‏امك ال اللو‎
قبل اأس ‎Jda|‏ ا1 |2 ا3 4 50 7 ‎Stz‏ ابيع ‎Tx‏ ‏بعد ‎Stz‏ ‏سكر 24.7 |.26 |.14 |.12 |.13 .8 |.8 .7 ‎pl‏ /ناتومولار/ 5 |9 |2 8 ‎of‏ |8 41 4 لتر كتلة الجسم/ 1 ا170) 180180170 22200 +24 |27 +29 331 جرام 0 © 0 |0 ‎of‏ 0 الجدول 15: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين ‎(SZ)‏ وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 21. عاد ل ‎Tx‏ ‏أس 1 ]2 |3 ]4 5 7 ابيع بعد ‎Stz‏ ‏سكر .22 |.21 |.15 |.15 |.14 |.13 |.15 |.13 |.17 .15 الدم/نانومولار 0 9 |5 9 0 |5 |1 8 ‎0١‏ 5 /لتر كتلة الجسم +25 ا18 |17 20/18/17 +22 23 23 24 27 جرام 0 +0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
— 5 4 — الجدول 16: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستريتوزوتوسين ‎streptozotocin‏ ‎(Stz)‏ وما تلا ذلك من زرع ‎Jada‏ الطحال ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 22 ‎Tx — Stz‏ أس 1 2 3 4 5 7 ابيع بعد ‎Stz‏ ‏سكر .7 |.31 | .28 |.24 |.25 |.22 |.17 |.17 | .18 |.16 .15 الدم/نانومولار | 1 ‎4١‏ 8 2 9 7 0 9 1 7 8 ‎A‏ ‏كتلة الجسم ]22 |17 |17 16 ]16 20+18 22 ]23 25 27 جرام 0 ‎Of‏ 0 0 0 0 0 0 0 0 0 الجدول 17: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 23. عا ل ‎Tx‏ ‏أساب 1 2 ]3 |4 !51 7 & بعد ‎Stz‏
سكر 6 .16 ].15 |.11 9.7 5 5.6 9 5.1 الدم/نانومولار/ 0 ]5 5 لتر كتلة الجسم/ 4 270260 290 ا30 ا32 |35 ا37 37 |40 41 جرام 0 ‎of of 002 Of 0 Of O‏ الجدول 18: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين (512) وما تلا ذلك من زرع داخل الطحال ‎(TX)‏ لمزارع ‎LAY‏ الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى الفأر رقم 24. عاد ل ‎Tx‏ أس 1 ]2 ا3 |4 5 7 ابيع بعد
Stz 19.| 19. | 17. | 18.| 21.| 14.| 15.| 17.| 22.| 21.| 6. ‏سكر‎ ‎7] 1] 8] 66 8| 2| 8 11 6] 0| 4] ‏الدم/نانومولار‎ ‏/لتر‎ ‎36 28 27] 24 23] 22| 20| 21 ‏كتلة الجسم ا 25 ا23 ا22‎ 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0+ 0 ‏جرام‎ ‏تم تأكيد تلك البيانات بعد ذلك بواسطة الملاحظات فيما يخص مجموعة الضبط (السكري دون‎ ‏علاج) المتشكلة من فئران مصابة بالسكري.‎ المثال 3 تم تقسيم 26 حيوائًا إلى 3 مجموعات من 8 ‎Old‏ لكل مجموعة: المجموعة الاولى- 8 فثران تعاني من ارتفاع سكر الدم خضعت للزرع الخارجي للخلايا الجزيرية المزرعة من خلال ‎f‏ لإعطاء
— 7 4 — داخل الغشاء البربتوني . المجموعة الثانية- 8 فئران تعاني من ارتفاع سكر الدم؛ تم إخضاعها إلى الزرع الخارجي عبر ‎f‏ لإعطاء داخل الطحال . المجموعة الثالثة -- 0 1 فثران تعاني من ارتفاع سكر ‎call‏ لم يتم علاجها على الإطلاق(الضبط). وقد تم تفسير عدد أكبر من تلك الحيوانات بواسطة ظهور موتها المحتمل على مدار تجرية .
ويظهر أدناه بيانات حول أثر الزرع الخارجي داخل الغشاء البريتوني للخلايا الجزيرية المزرعة لأرانب حديثة الولادة على مدار السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين لدى 7 فئران تعاني من السكري المحفز الذي تم التعبير عنه بواسطة الستريتوزوتوسين. وقد تم إدخال على كل مستقبل ‎(Olgas‏ على خلفية تخدير هيكسيني داخل الغشاء البريتوني 800.000-700.000 خلية جزيرية لخلايا البنكرياس أرانب حديثة الولادة عبر وخز البربتون
0 والإطلاق داخل التجويف البطني. أدناه نتائج تخص تحولات في شدة ‎Alla‏ السكري في كل فأر من الفئران البالغ عددها 8 لهذه تم إعطاؤها إما الزرع داخل الغشاء البريتوني أو داخل الطحال مزارع الخلايا الجزيرية أرانب حديثة الولادة؛ ‎Ol‏ تعاني من نفس شدة حالة السكري لم يتم إخضاعها لأي علاج(الضبط)؛ بقي مستوى 5 مكر الدم ثابثًا على ارتفاع خلال فترة هذه التجرية كاملة. بالإضافة إلى ذلك؛ لم يمت أي واحد من المستقبلين من الفأران» ولكن فى مجموعة ضبط؛ على خلفية ‎Alls‏ سكرية حادة مات 2 من الحيوانات؛ مما يجعل نسبة المتوفين 5/1 حيوانات المجموعة. أدناه؛ يتم ذكر نتائج تخص تغيرات مستوى سكر الدم وكتلة الجسم لدى ‎Ol‏ تعاني من سكري تجريبي غير معالج. 0 الجدول 19: تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد استخدام ستربتوزوتوسين لدى الفأر رقم 9 لم يتم إخضاعه إلى زرع (الضبط).
قبل ‎١‏ بعد ‎1١4‏ 2 3 4 5 7 2 | أسابي ع من ‎Stz‏ ‎Sa‏ الدم 6.4 |.25 |.23 |.23 |.26 |.24 |.23 |.24 .22 .24 ‎Jf Nols‏ 8 |9 |4 |6 |7 |3 |4 |6 31 ‎i‏ ‏كتلة الجسم؛ 25 | 230 |210 | 200 | 200 | 180 | 170 | 170 180 | 180 جرام 0 الجدول 20 تغير سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستربتوزوتوسين لدى الفأر رقم 10 الذي لم يتم إخضاعه للزرع: ‎Stz‏ | أسا ‎s| 4] 3] 2| 1|‏ 7 من ‎Stz‏ ‏سكر الدم 1 |28.7 27.9 <33 29.9 2868.4 <33ا31.2 | ‎el.*‏ ‏نانومولار/لتر ‏كتلة 200 ‎180١‏ +170 160160 | 150 130150 الجسم/جرام ‎—e.l. *‏ الوفاة الجدول 21 تغير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى الفأر رقم 11 لم يتم إخضاعه إلى زرع (الضبط)
Ll | Stz 7 51 4] 3| 2 1 ع من
Stz 23.| 25.| 24.| 27.| 25.| 26.| 23.| 24.| 26.|6.4| ‏سكر لدم‎ 71 5 9 3| 171! e6| 4| 9| 8 Jf ‏نانومولا‎ ‏تر‎ ‎180 180] 180 | 170| 1180| 190| 200| 210| 220| 22 ‏كتلة‎ ‎0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‏رقم 12 الذي‎ Sl ‏الجدول 22 التغير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى‎ ‏لم يتم إخضاعه إلى زرع (الضبط)‎ ‎١ Stz‏ أسا ‎7 51 4 3] 2 1 ‏ع من ‎Stz ‎23.| 22.| 24.| 25. 24.| 27.| 23.| 21.| 22.| 6.4] ‏سكر لدم‎ 71 5 7| 3 1 6! 4| 3| 8 Jf ‏نانومولا‎ ‏تر‎ ‎210| 210] 200] 190 | 180] 190| 210| 210] 200| 22 ‏كتلة‎ ‎0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‏رقم 13 لم يتم‎ SU ‏الجدول 23 تغير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى‎ ‏إخضاعه إلى زرع (الضبط)‎
‏أسا‎ | Stz 7 5 4 3] 2] 1|¥ ع من
Stz 23.] 25.| 24.| 28.| 23.| 24.| 23.| 23.| 21.| 6.4] ‏سكر لدم‎ 8 0 8 3 6 6 7 0 8 ‏نانومولار/ل‎ ‏تر‎ ‎200 190 180 | 190 200 | 210| 220 230 240| 22 ‏كتلة‎ ‎0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‏رقم 14 لم‎ JU ‏الجدول 24: التغيير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى‎ ‏يتم إخضاعه للزرع (الضبط)‎ ‎Stz‏ | أسا ‎7 5 4] 3] 2 1 ‏ع من ‎Stz ‎28. 27.| 25.| 25.| 23.| 27.| 25.| 24.| 26.| 4.9] ‏سكر لدم‎ 8 2 0 9 6 7 6 5 6 ‏نانومولار/ل‎ ‏تر‎ ‎160١ 160| 170,180 | 170| 180+ 200210 200| 20 ‏كتلة‎ ‎0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‏رقم 15 الذي‎ Sl ‏الجدول 25: التغيير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى‎ ‏لم يتم إخضاعه للزرع (الضبط)‎
-1 5- عا | أسا 2 3 4 5 7 ع من ‎Stz‏ ‏سكر الدم .19 |.19 |.19 |.20 |.18 |.18 |.19 |.19 |.20 نانومولار/ل 4 5 6 0 7 7 7 7 3 تر كتلة 0 |220 200210 |210 |210 220210 |220 230 الجسم/جرام ‎١‏ 0 الجدول 26: التغيير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى ‎SU‏ رقم 16 الذي لم يتم إخضاعه للزرع (الضبط) ‎١ 2‏ أسا ‎s| 04| 3] 22 1] ©‏ 7 من ‎Stz‏ ‏سكر الدم 6.7 ]25.1 |.25 |.27 .027 .22.25 .225 .22 .24 نانومولار/لتر 5 6 66 66 ا9 +0 +2 1 كتلة الجسمو | 230 | 220 210 200 |20|190 |19 |18 ]18 18 ‎of 0| 0 0١ O‏ الجدول 27: التغيير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى ‎Sl‏ رقم 25 الذي لم يتم إخضاعه للزرع (الضبط) كلتك أ
‎٠ 5 2 —‏ قبل بعد 4 1 2 3 4 5 7 ‎Stz‏ أسابيع من ‎Stz‏ ‏سكر الدم 6.4 |27.3 ‎22.624.5١١‏ 27.9126.1,27.7 نانومولار/لتر كتلة 210 220 200 +190 +190 +180 180 الجسم/جرام الجدول 28: التغيير في سكر الدم وكتلة الجسم بعد إعطاء ستريتوزوتوسين إلى الفأر رقم 26 لم يتم إخضاعه للزرع (الضبط) ‎١ 2‏ أسا 1 2 |3 4 5 7
‏ع من
‎Stz ‎17. 19. 18. 19.| 21.| 22.| 18.| 17.| 17.] 5.8 ‏الدم‎ Sa 77 7! 3 9 3| 9 3| 3| 1 ‏نانومولار/ل‎ ‏تر‎ ‎300+ 280+ 280 280 270 250١ 260 260 250 23 ‏كتلة‎ ‎0 ١ ‏الجسم/جرام‎ ‎4 ‏المثال‎ ‏مزارع الخلايا الجزيرية‎
‏5 تم الحصول على مزارع خلايا جزيرية وفقًا لأسلوينا المصمم من بنكرياس أرانب حديثة الولادة عمرها 2-1 يوم. ولكل عملية زرع؛ تم استخدام مزرعة تحتوي على حوالي 200.000-
— 3 5 — 300.000 خلايا البيتا الخاصة. وعلى الفور قبل عملية الزرع؛ تمت تنفية المزرعة من المصل الجنيني لوسط النمو الذي سلفت إضافته وتجميعه داخل أنابيب اختبار بلاستيكية معقمة؛ تبلغ سعة كل واحدة منها 5 مللى لتر. وتمت إزالة الشظية المرفقة لمزرعة بمساعدة كاشط خلوي خاص (شركة ‎(Corning—Costar‏ .5 فصل الشظية الطافية باستخدام الطرد المركزي لمرق المزرعة الذي يغطي قاع الزجاجة حيث تقع الشظية المرفقة. وناظر الحجم النهائي للمعلق الخلوي عدد
عمليات الزرع الخارجيالمجدول لليوم؛ وينبغي أن ‎(ging‏ كل مللي متر من المعلق على حوالي 0 خلية جزيرية (بصورة عامة خلايا بيتا) . ‎Judi‏ 5 العلاج بالإنسولين
0 فيما يخص الحقن تحت الجلد استخدمنا الإنسولين النوعي ‎Aktrapid HM‏ الذي تم إعطاؤه مرتين يوميًا : 9:00 و9:00 1 تم اختيار ‎de yall‏ بصورة فردية. وكانت معايير نجاح العلاج المستخدم بالإنسولين انخفاض ارتفاع سكر الدم بما يصل إلى 10 مللي مول/لتر وأقل. المتال 6 إعطاء مزارع خلايا جزيرية
5 .تم إعطاء معلق خلوي بواسطة محقنة عبر إبرة حقن لها قطر كبير؛ بحقن الجدار البطني دون تخدير. ولتجنب حدوث إصابات فى الأعضاء والأوعية الباطنية ‎lal‏ تم قلب الفأرء وبذلك تم ضمان عدم ‎dal)‏ الأعضاء الباطنية وتشكيل مساحة حرة. ‎dag‏ حقن البربتون تم حقن الزرع الخلوي إلى داخل هذه المساحة الحرة. وتوجد حاجة إلى عملية تجويفية للإعطاء داخل الطحال؛ وعلى ذلك للتخدير باستخدام طرق الحقن
0 داخل الغشاء البريتوني استخدمنا محلول هيكسيني ارتجالي استنادًا إلى نسبة تبلغ 60-50 ملجم لكل 1 كجم من وزن الجسم. وقد تم القيام بالزرع داخل لب الطحال كما يلي: فتح قطع متوسط على طول خط بطني أبيض التجويف البطني. تم سحب الطحال إلى داخل جرح العملية وإحاطته بمناديل معقمة. وقد تم سحب معلق خلوي تم جمعه في اليوم السابق إلى داخل المحقنة(الحجم 2
— 4 5 — مللي لتر) ومن خلال إبرة حقن (قطرها 0.5 مللي) تم إعطاؤه داخل لب الطحال وإلى داخل منطقة ما تحت المحفظة. ولتجنب النزيف تم إغلاق علامة الحقن بواسطة صمغ طبي ‎OMK=‏ ‏المثال 7 الفحص/١‏ لاختبار المعملي تم تحديد جلوكوز الدم الشعيري لدى الحيوانات التجريبية باستخدام ‎Glucometr Smart Scan‏
من مرتين إلى ثلاثة أسبوعيًا. تم الكشف عن إنسولين المصل من خلال طريقة الإنزيم المناعي؛ باستخدام مجموعات لإنسولين الأرنب (البشر) ومجموعات مهيأة للكشف عن النوعي عن إنسولين الفأران. المتال 8
0 البحث الهستولوجي لدراسة ديناميكيات التحولات المورفولوجية التي تحدث في الخلايا الجزيرية تحت تأثير أنواع مختلفة من علاج السكري التجريبي؛ تم تثبيت بنكرياس حيوانات مقتولة في أوقات محددة خلال التجرية خليط ‎Buena‏ مصنوع ‎Gos‏ وبعد إجراءات هستولوجية محددة (الغسل السطحي للمثبت ‎washing off fixative‏ ؛ التجفيف ‎dehydration‏ ؛ إلخ) تم إحكام غلق شظايا النسيج
5 البنكرياسي إلى داخل بارافين ‎paraffin‏ . بعد ذلك؛ تمت إزالة الشمع عن المقاطع الميكروسكوبية المصنوعة بواسطة مقطعة شرائح دقيقة (سمكها ‎m km7-5‏ ( وتلوينها باستخدام هيماتوكسيلين وأيوسين وكذلك بواسطة ألدهيد-فوكسين ‎aldehyde—fuchsine‏ ؛ ولأغراض ‎WIA Jie‏ البيتا ‎.isolation of beta—cells‏ ولتحديد مصير خلايا البيتا الخاصة التي تم زرعها داخل لب الطحال للفئران المصاب بالسكري؛
خلال أوقات محددة بعد الزرع؛ تم استتصال طحال الحيوانات الميتة وشظايا منهاء التي؛ الحكم من مخطط العملية وبعض العلامات الخارجية 6 يمكنها 6 على نحو مفترض تحتوي على مواد مزروعة؛ وعلى الفور تثبيتها في ‎Buena dads‏ وعلى التوالي كما ورد وصفه أعلاه؛ تم تحضير مقاطع بارافين وتلوينها بطريقة محددة.
— 5 5 — المثال 9 نتائج البحث . خصائقص المزرعة وقد اتسقت مزارع الخلايا الجزيرية التي تم الحصول عليها لعمليات الزرع اللاحقة مع المعايير الوظيفية المقبولة. ‎coli‏ أظهرت الدراسة تحت ميكروسكوب ثلاثى العدسات العينية أنه بحلول مدة الاستنبات البالغ أسبوعين لم تكن المزرعة التي تم الحصول عليها تحتوي على نسيج خلايا خارجية الإفراز للبنكرياس وأن عناصر الموازنة الخلوية كانت غائبة بما في ذلك خلايا الدم البيضاء -"المارة" - التى تسيب حفن الخلايا الجزيرية يعد الزرع الخارجى . وتطمئنا هذه البيانات؛ والتجرية السابقة لزرع علاج للسكري التجريبي؛ أنه لم تكن ثمة حاجة لإعطاء أي نوع من كبح المناعة. وقد أظهرت اختبارات الضبط لمحتوى الإنسولين فى مرق استنبات أن خلايا البيتا الخاصة 0 1 الموجودة لها نشاط إنتاج إنسولين عالي (الجدول 29( .
الجدول 29: مؤشرات إفراز الإنسولين الأساسي والمحفز (25 ‎a‏ مول/لتر جلوكوز ‎(glucose‏ ‏(التركيز ‎/mKUNIT‏ مللي لتر) في مزرعة الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس الأراتب حديثة الولادة:
13450| 0
شي 8800 12300
— 6 5 — المثال 10 نتائج العلاج بالإنسولين كما ذكر في أعمال سابقة؛ اختيار جرعات فعالة للإنسولين في علاج ‎Ol‏ تعاني من سكري محفز بواسطة ستريتوزوتوسين 0000860188057 يعد أمرًا ‎clan‏ وطويل الأمد (في بعض الأحيان يكون بلا نهاية من الناحية العملية) ويكون العمل بلا مردود. وغالبًا ما يتم الكشف عن مقاومة الإنسولين في ذلك. مع ذلك» لدى أغلبية حيوانات مجموعة الاختبار الأولى (5 من 8) نجحنا عن طريق إعطاء جرعات عالية من الإنسولين في خفض ارتفاع سكر الدم إلى مستويات تصل إلى أقل من 10 مللي مول/لتر وفي الإبقاء على تعويض للعطب في استقلاب الكريوهيدرات خلال فترة الأسابيع الثمانية(الجدول 30). 0 الجدول 30: التغييرات في سكر الدم لدى فتران التي تعاني من سكري محفز بفعل التجارب (المجموعة الأولى)تحت تأثير العلاج اليومي بالإنسولين. طول مدة العلاج بالإنسولين (بالأيام) ‎EEEEEEEEEEE‏ ‏.17 |.15 |7.9/10.0|11.9|10.8|12.1 |85 |6.7 |6.4 7 5 10 .28 |.29 |18.4|15.5|24.9|22.8|23.3|27.8|22.4|26.7 7 0 11 .18 .18 |9.7)11.0/15.9 11.512.3 6 9.7 6 9
12 .16 ].12 ]8711.1 6.7 54 8.1 ]6.3 |6.3 1 0 13 .29 |.26 |18.820.3|14.6|18.5|16.9|14.5|13.4|22.8 7 7 14 .24 |.22 |14.318.8|14.817.7|19.1|18.3|22.1|18.0 4 2 15 .19 ].18 | 14.3 ]11.2 10.8 7.7 0 7 16 .24 |.18 ]13.8 0 10.2 9.7 |6.7 2 8 متوسط 4 12 ]16 |13.3|11.9(17.6|12.8|14.1 جرعة (وحدات) الإنسولي ن نقص التفاعل الكافي استجابةً لإدخال جرعات ضخم من الإنسولين (تصل إلى 30-20 وحدة ‎(Les‏ بالكشف عن الميل إلى معادلة سكر الدم والإقرار بوجود مقاومة فردية عالية للإنسولين لدى تلك الحيوانات؛ وأن إمكانية إعادة التجديد البارزة لجهاز الخلايا الجزيرية ريما تكون مستبعدة؛ أكثر من ذلك أنه بعد التوقف عن إعطاء الإنسولين كان لجميع الفئران من المجموعة الأولى عانت من ارتداد سريع لارتفاع سكر الدم يقرب من المستوى الأولي. المثال 11 نتائج الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية
— 8 5 — وقد تمت ملاحظة الأثر المضاد للسكري الذي تم التعبير عنه للزرع الخارجي لمزارع ‎WA‏ جزيرية في كلتا حالات حقن الزرع داخل الغشاء البريتوني (المجموعة الثانية لفثران التجارب)؛ وفي حقنها داخل لب الطحال (المجموعة الثالثة). يظهر الأثر في تقليل الظهور العيادي لحالة السكري وأيضًا في النضوب الذي تم التعبير عنه لمستوى ارتفاع سكر ‎pall‏ . وكما تظهر البيانات في الجداول؛
تختلف سمة نضوب سكر الدم على مدار كل من طريقتي إعطاء الزرع الخارجي إلى حد ما » عن بعضها البعض. وتتضمن تلك الاختلافات فيما يتعلق بظهور الأثر الخافض للسكر؛ شدته؛ واستمراره (ثباته). الجدول 31: تغييرات سكر الدم لدى ‎ly‏ تعاني من سكري تجرببي بعد الزرع الخارجي داخل الغشاء البريتوني لمزارع خلايا جزيرية (المجموعة الثانية)
الفأ الز 2 66ل كا صقا ف 68 90 37 67 91 4 )2 نت )130 )130 )10 )122 )105 نتن قن ناته لقن أن لذن لغ قن 7 تا 66ل بحلا 98 70 39 64 81 86 8# 256 23 7ت تر )188 207 86 22 )200
الجدول 32. تغييرات سكر الدم لدى ‎hi‏ تعاني من سكري تجريبي بعد الزرع الخارجي ‎daly‏ ‏الغشاء البريتوني لمزارع خلايا جزيرية (المجموعة الثانية)- تتمة ~ الفأر 1 )132 39 ]125 )144 168 ]122 158 120 118 ‎oa] 55 67 Ta) To] 74 2‏ 64 ]39 55 3 )172 )148 )123 )147 ]1411136 168 161 177 4 لك لم ون هم )79 لق ‎BT)‏ نك فخا ما )135 ]124 ]147 ]150 )143 ]138 ]152 ‎EERE‏ 67 ادتا4ة ‎EEE‏ ‎or] 38] 49) 56 63] 51 ed) 14) 87 7‏ ‎U8) 206 188) 8‏ )22 ]192 ]186 )212 ]00 ]178 ‎NOL 117 116 116] 120] 119s‏ )124 113 ]1 الجدول 3: تغييرات سكر الدم لدى فثران تعاني من سكري تجريبي بعد الزرع الخارجي ‎daly‏ ‏5 الغشاء البريتوني لمزارع خلايا جزيرية (المجموعة الثانية) ~ الفأر 1 نكن قن تم تن لفن ‎rer]‏ أن ان
— 6 0 —
BEER EEE
BEEN 92 00 EE
BEER EEE
BEER EEE
‏اننم نان‎ ras] 122] aa 123] ‏تكن اه‎ بعد تحليل النتائج التي تم الحصول عليها لقياس سكر الدم لدى فئران تعاني من سكري تجرببي تم لها ‎shal‏ زرع خارجي داخل الغشاء البريتوني لمزارع ‎WIA‏ جزيرية؛ يسهل الانتهاء إلى أن تحقيق الأثر المضاد الذي تم التعبير عنه لدى غالبية الحيوانات المستقبلة. ويذلك» شهدت الفئران أرقام 4642 7 تراجع الأمراض التي ظهر في إحداث استقرار في مكر الدم عند مستوى طبيعي أو شبه طبيعي. وقد أبدت الفئران أرقام 1 و 3 انخفاضًا غير كبير للدرجة في مستوى سكر الدم؛ على الرغم من أن البيانات الإحصائية غير موثوقة. في تلك الحالات لا يمكننا التحدث إلا عن ترجاع كسري لحالة انخفاض السكر في الدم؛ بدرجة غير مسبوقة لدرجة أن الفأر رقم 1 خلال الأسابيع الأخيرة للملاحظة كشفت عن ميل إلى نمو ارتفاع سكر الدم كان معتدلاً فيما سبق. 0 لدى حيوانات أخرى ‎obi)‏ 5 و 8) لم يكن انخفاض سكر الدم باررًا وكان غير ثابت؛ وهو ما يحمل في طياته الدليل على فشل تلك الزراعات لمزارع الخلايا الجزيرية. الجدول 34. تغييرات سكر الدم لدى ‎OL‏ تعاني من سكري تجريبي بعد زرع خارجي داخل الطحال لمزارع خلايا جزيرية (المجموعة ‎(an‏
نك ‎a‏ ‏قل ساسا اح يه ‎a‏
الجدول 35. تغييرات سكر ‎pall‏ لدى ‎Ol‏ تعاني من سكري تجريبي بعد الزرع خارجي داخل الطحال لمزارع ‎WIA‏ جزيرية (المجموعة الثالثة)- تتمة و سا ‎a a a a‏ يك كات نكا اها اها سا اضة افك ‎i‏ ان نلا شا اف مك ‎a‏ ان ‎a‏ ‎a a a a‏
نغ اغا افك افا اك ‎i‏ امك ‎i‏ ‏الجدول 35 تتمة:
هن مدا تتا تك تنك نكا نكا انك 5 ناا اق ئشنا لضا كا نشكا افك ‎[Le‏ ‏نضا تك نكا فك تهنا ‎i‏ ‏ا نشنة ك نشنا نفك افا افك ات لت 5 تا نضا فك نفك لفقا لقنا افك تك ‎I‏ ‏تالفنا تفن نا ‎i‏ ‏اشنا تا اشنا اش لقنا اما ‎i‏ ‏تاتشك تك 1 ‎i‏ ‏كا اق لقنا لق اتا لشن نت ‎dd‏ ‏مانت نض ‎Fd‏ ‏بعد الزرع الخارجي للخلايا الجزيرية المزرعة داخل لب الطحال»؛ تمت ملاحظة الانحراف الذي تم التعبير عن لارتفاع سكر الدم لدى أغلبية الحيوانات (7 من بين 8). وعند تلك النقطة؛ حدثت
— 3 6 — المعادلة العملية لسكر الدم لدى 5 ‎GHB‏ تعاني من سكري تجريبي (رقم 20-17 23) ‎٠‏ وأيضًاء لدى مستقبل واحد إضافي (الفأر رقم 21) انخفض مستوى جلوكوز الدم بصورة بارزة؛ ولكن مستواه ظل عند متوسط مستوى ارتفاع السكر فى الدم 3 وفى التصف ‎Sal‏ من ‎Bla‏ الملاحظة لوحظت زيادة تدريجية في سكر الدم ¢ وهو ما يمكن تقييم باعتباره ارتداد قطعي لارتفاع سكر الدم المرتفع. لدى اثنين من مجموعات الحيوانات (رقم 22 و 24) لم يتم تحقيق أثر كبيرة مضاد للسكري؛ على الرغم من أن الفأر رقم 22 وصل إلى نقص موثوق إحصائيًا في سكر الدم؛ ولكن لا ‎(Sa‏ تصنيف باعتباره تراجع سكري ‎remission of diabetes‏ . ‎WS‏ ولحظ سلقًاء نتوقع تباعد في تغييرات سكر الدم ‎Ale‏ بين الطرق داخل الغشاء البريتوني وداخل الطحال للزرع الخارجي؛ ولكنها تبدو غير جذرية بدرجة كبيرة. ولأغراض بساطة المقارنة؛ 0 دمجنا مؤشرات سكر الدم في المجموعة الثانية والمجموعة الثالثة للحيوانات في الديناميكيات في جدول واحد (رقم 34). الجدول 36: ديناميكيات التغييرات في سكر الدم ‎Dynamics of changes in glycemia‏ (متوسط» ‎(M‏ لدى فئران المجموعة الثانية (زرع خارجي داخل الغشاء البربتوني ) ‎Ag‏ المجموعة الثالثة (الزرع داخل الطحال) لدى الفثران المستقبلة:
رقم قبل الزرع | الآيام بعد الزرع المجموعة ض الثانية 217 .9 ‎14.١‏ |.13 |.13 .12 ).12 .11 .12 0 1 9 3 9 3 9 3 الثالثة 19.3 .20 |.17 |.16 |.15 ا.13 |.14 |.13 .12 1 1 2 2 6 0 3 5
— 4 6 — رقم 24 26 28 |30 |32 35 |37 40 421 المجموعة الثانية 11.9 12 |.11 |.11 ].11 |.11 ا.12 .11 .11 0 6 6 7 0 4 3 4 الثالثة 13.8 .12 |.12 .12 ].11 |.11 .11 .12 .11 1 2 2 1 8 9 0 1 ~ المجموعة ض ‎BEEEEEEEEE‏ ‏الثانية 11.6 .11 |.12 ].13 |.12 .12 .11 .11 3 1 2 5 9 4 الثالثة 12.5 .10 ‎11.١ 11.} 11.١‏ .11 .11 10.2 3 5 7 9 2 0 9 بعد اكتمال ‎eal)‏ الفسيولوجي للبحث؛ تم قتل الحيوانات المدرجة في هذه التجرية؛ دون ألم. وعند هذه النقطة؛ تم أخذ عينات دم من حيوانات تجريبية؛ وتم اختبار المصل المعالج للإنسولين (أيضًا أمصال الأرنب؛ والفأر). وتظهر أدناه نتائج تحليل الإنزيم المناعي (الاختبار المناعي للإنزيم) لمصل دم ‎(hi‏ العينات المستقبلة؛ وقد تم أداء تلك التحليلات باستخدام تجارب خاصة 5 متعددة.(الجدول 35). الجدول 37. محتوى الإنسولين الأجنبي(أرنب) والإنسولين الخاص في مصل الدم لفئران خضعت لزرع لمزارع ‎WIS‏ جزيرية للبنكرياس الخاص بأرانب حديثة الولادة : * لم يتم الحصول على نتيجة متغيرة بسبب تحليل الدم الموسع ليس من السهل تحليل النتائج التي تم الحصول عليها. تمت تهيأة تعقيد التحليل؛ ‎Yl‏ من خلال 0 أن البيانات المعروضة في الجداول تعكس؛ على نحو خاص» وظيفة منتجة للإنسولين لزرع خلايا
بيتا أجنبية للأرنب والخلايا الخاصة (فأر) (الجدول 8)؛ أو للإنسولين البشري الذي تم حقنه والإنسولين الخاص لدى الفئران (الجدول 9) لحظة اكتمال التجربة متعددة الأيام فقط. وبالقطع؛ سيكون من الجيد الحصول على بيانات حول ديناميكيات محتوى أنواع مختلفة من الإنسولين في فترات مختلفة أثناء التجارب. بيد أن الصعوبة البالغة في الحصول على دم غير محلل من حيوانات المختبر الصغيرة بكميات تكفي لتحضير الحجم المطلوب من المصل دون التسبب في
إصابة بالغة للحيوانات؛ لم تسمح بتنفيذ ذلك دون مخاطرة فقدان حيوانات المختبر القيمة تلك. وعلى ذلك؛ يمكننا التصرف على أساس البيانات المتوفرة لدينا. يبدو أنه في أغلب الحالات (11 من بين 13) تم التأكد من وجود إنسولين أراتب في دم الفئران ‎alii‏ وهو دليل لا ريب فيه على أنه يوجد في دم الحيوانات خلايا بيتا أرنبية مزروعة وتقوم
0 بالإفراز إلى داخل "دم المالك الجديد" إنسولين مرتبط بالمانح. ويتقلب تركيزه بصورة كبيرة من 4 إلى 57 بيكومول/لتر. ويكون مقطع الفئران المستقبلة الذي يتم فيه الكشف عن أنواعها الخاصة من الإنسولين ريما أكبر(12 من بين 13). وتكون تقلبات محتواها كبيرة جدًا - من 7 إلى 134 بيكومول/لتر . وبصورة متمايزة عن تفسير وجود إنسولين أجنبي لدى حيوانات التي خضعت للزرع الخارجي
للخلايا الجزيرية؛ يعد من المستحيل إعطاء تقدير أحادي القيمة للكشف عن تركيز أو آخر للإنسولين الذي تفرزه خلايا البيتا الخاصة ‎Olas‏ المختبرات التي تعاني من السكري التجريبي. من الممكن التقييم بصورة أكثر او أقل موضوعية للبيانات التي تم الحصول ‎gle‏ عند الأخذ في الاعتبار نسبة العديد من البيانات الكمية المتصلة؛ أي: تداخل مستوى سكر الدم وإجمالي وجود الإنسولين في الدم» نسبة إنسولين الفئران وإنسولين الأراتب (لدى الفئران المستقبلة ) أو الإنسولين
0 البشري (لدى ‎Ghd‏ التي خضعت لحقن المستحضر الخاص به)؛ وأيضًا محاولة ربط ديناميكيات سكر الدم من بدء الملاحظة حتى نهايتها بنسب مختلفة من وجود الإنسولين في الدم (من حيث أصل النوع(النوعي)). تم إجراء تحليل بترتيب انتقائي؛ ولكنه يتعلق بأنماط متسقة شائعة؛ وتم إجراء مراجعات للعديد من ارتباطات مؤشرات سكر الدم وتركيز الإنسولين لدى مصل الدم لحيوانات المختبر. من كل
— 6 6 — مجموعة تم اختيار 3 فئران لها نتائج تكون ممثلة بصورة أكبر لاختبارات المختبرات؛ وتبويب جميع البيانات في جدول واحد(الجدول رقم 37). الجدول 39: مؤشرات سكر الدم ووجود الإنسولين في الدم لدى بعض ‎Gh‏ المجموعات الأولى والثانية والثالثة من الفئران التجريبية التي لديها سكري تجريبي. رقم الفأر | سكر الدم ‎Oise | Al Su]‏ إنسولين | ‎eal‏
الأولي ‎Ale‏ | النهائي مللي | (البشري) الفئران ‎Oleh‏
مول/لتر مول/لتر بيكومول/لتر بيكومول/لتر | بيكومول/لتر ‎١‏ نس الس ا تان سان سر نس ‎ep‏ نان نا ان ‎EEE‏ ‎er] me‏ ل ‎eye] ma‏ نا ‎ow‏ ‎a ow] me] wae‏
تم إجراء تحليل النتائج المسحوية في المجموعة التجريبية الثانية(الزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية داخل الغشاء البربتوني ). وفي ‎WIS‏ الحالتين الناجحتين (فتران رقم 2 ورقم 4) صاحب تراجع حالة السكري انخفاض ملحوظ لسكر الدم - من 16.6 و 21.2 مللي مول/لتر إلى 5.7 و ‎le 4‏ مول/لتر على الترتيب. عند هذه النقطة» وفي نهاية فترة الملاحظة التي تبلغ شهرين معادلة مستويات وجود الإنسولين في الدم (على الترتيب ما يصل إلى 68 و 73 بيكومول/لتر )
بصورة رئيسية نتيجةٌ لاستعادة الأنشطة المنتجة للإنسولين لخلايا البيتا الخاصة للفتران المستقبلة (52 و 50 بيكومول/لتر على ‎(isl‏ على الرغم من أن حصة الإنسولين التي تفرزها خلايا البيتا المزروعة من الخارج للأرانب حديثة الولادة تبدو كافية ‎Gans‏ (16 و 23 بيكومول/لتر على الترتيب). وقد أبدى الحيوان الثالث من تلك المجموعة(الفأر رقم 8) الذي له مستويات ‎del‏ بصورة أوليى من ارتفاع سكر الدم )25.6 بيكومول/لتر ‎o‏ تشغيل ‎WA‏ البيتا المزروعة (تركيز إنسولين الأرانب 9 بيكومول/لتر ) إلى جانب ‎td) WIA‏ الخاصة (تركيز إنسولين الفئران -20 بيكومول/لتر ). وقد ضمن (بصورة أساسية نتيجةٌ لللجهود الخاصة للخلايا الجزيرية لبنكرياس المستقبل) إنتاج الإنسولين انخفاض ذو مغزى إحصائي في ارتفاع سكر الدم (يصل إلى 17.8 بيكومول/لتر )؛ مع ذلك؛ لم يكن كافيًا لتحقيق تراجع لحالة السكري.
0 في المجموعة التجريبية الثالثة (زرع خارجي داخل الطحال للخلايا الجزيرية ) تم اختيار فئران رقم 7و 19 كأمثلة؛ كان لديها مستوى أولي ونهائي لسكر الدم مشابه لنفس المستوى لدى فتران رقم 2 من المجموعة الثانية. مع ذلك؛ إذا كانت البيانات فيما يخص سكر الدم ووجود الإنسولين في الدم لدى فئران رقم 2 و 17 ظهر أنها متقارية جدّا(على الترتيب: سكر الدم الأولي 16.6 و 1 ملي مول/لترء سكر الدم النهائي- 5.7 و 4.9 ‎(Me‏ مول/لترء إنسولين ‎Ohl‏ -52 و
5 60 بيكومول/لتر )؛ بعد ذلك لدى فتران رقم 4 ورقم 19 فور تحديد سكر الدم الأولي (21.2 و 2 ملي مول/لتر ) وتشابه سكر الدم النهائي (9.4 و 9.1 مللي مول/لتر )؛ وقد حدث أن الوجود الإجمالي للإنسولين في الدم متمايز جدًا(أكثر من ضعفين على الترتيب 73 و 151 بيكومول/لتر ). وبذلك؛ كان هذا التمايز؛ بصورة ‎dale‏ ناتجًا عن الاختلاف في تركيز إنسولين الفئران ‎Je)‏ الترتيب 50 و 134 بيكومول/لتر ).
لدى فتران المجموعة الأولى؛ وبسبب العلاج بالإنسولين الموسع بشدة؛ كان من الممكن تحقيق محتوى طبيعي أو قريب من الطبيعي للجلوكوز في الدم. على ما يبدو؛ جراء استعادة أيض موزع قابل للتطبيق» ظهرت ظروف للاستعادة الجزئية لمجموعة من ‎WIA‏ البيتا الخاصة لدى حيوانات التجارب. مع ذلك؛ بدا أن درجة التجديد التي تم تحقيقها قاصرة فيما يخص هذه الكمية من خلايا البيتا الخاصة المتولدة بها لإنتاج كميات من الإنسولين تكفي لإحداث تطور سكري تجريبي بصورة
5 بارزة.
— 8 6 — لدى ‎Gla Gans‏ التي خضعت للزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية والتي أبدت تراجع لحالة السكري؛ لم تتم ملاحظة سوى إعادة تجديد جزئية لخلايا البيتا (الصورة 6). مع ذلك؛ تم توفير الأثر المضاد للسكري؛ على نحو ‎caine‏ بواسطة النشاط المنتج للإنسولين لخلايا البيتا لأرانب حديثة الولادة تمت زراعته بنجاح ‎(gal‏ الفتران المستقبلة. ونُشار إلى هذا بواسطة نتائج البحث ‎Lad‏ ‏5 يخص محتوى الإنسولين الخارجي (الأرنب) والإنسولين الخاص (الفأر) في الدم. (الجدول 8). وقد كشفت أبحاث البنكرياس للفئران التي تعاني من سكري تجريبي؛ التي تمت فيها ملاحظة الأثر الكبير المضاد للسكري بعد الزرع الخارجي للخلية الجزيرية مزارع لأرانب حديثة الولادة؛ عن إعادة تجديد خلايا بيتا. ويذلك؛ تمت ملاحظة العملية المجددة المذكورة؛ ‎sac eS‏ بالضبط فى خلايا لانجرهانس الجزيرية؛ على وجه الدقة في أماكن تموضعها.
0 وقد أظهر التلوين الخاصة لأنسجة البنكرياس للفئران المستقبلة التي خضعت لزرع خارجي ناجح لمزارع الخلايا الجزيرية أن هياكل إعادة تجديد خلايا لانجرهانس الجزيرية حدثت؛ بصورة عامة؛ ‎am‏ لخلايا بيتا. في الوقت ذاته تتم ملاحظة ظهور خلايا بيتا أحادية النقطة (يتم تلوينها باستخدام فوكسين الألدهيد)خارج موقع الجزيرة؛ والتي يمكنها أن تشير بصورة غير مباشرة إلى إمكانية توليد خلايا بيتا من بين الهياكل الخارجة عن ‎pial‏ على نحو ‎(Kas‏ ظهارة القنوات.
على ذلك؛ استنادًا إلى نتائج التجارب العلمية التى تم إجراؤهاء من الممكن الانتهاء إلى عدة نتائج: يسبب الستربتوزوتوسين تدميرًا عامًا للأثر على ‎WIA‏ البيتا للخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ ولكن في الوقت ‎cil‏ يؤدي بصورة مباشرة أو بصورة غير مباشرة؛ إلى فقد خلايا أخرى. يبدو أن العملية التجديدية في خلايا لانجرهانس الجزيرية ‎sill‏ يحدث؛ بصورة أساسية؛ جراء استعادة ‎de gana‏ خلايا البيتا.
0 لا يعد العلاج المكثف بالإنسولين ذو قدرة فقط بسبب معادلة ‎Alls‏ السكر في الدم لتوفير عملية إعادة تأهيل تجديدية يتم التعبير عنها بلطف في الخلايا الجزيرية البنكرباسية للفئران التي تعاني من السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين.
— 9 6 — وتتكون مزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة باستخدام طريقة أصلية؛ بصورة أساسية؛ من خلايا تمت تنقيتها من عناصر الموازنة الخلوية ولها نشاط منتج للإنسولين ‎Jaa dle‏ ويضمن كل من الزرع د اخل الغشاء البريتوني والزرع الخارجي د اخل الطحال لمزارع الخلايا الجزيرية لدى ‎Ol‏ تعاني من سكري تجريبي محفز بواسطة الستربتوزوتوسين؛ في أغلب الحالات؛
تراجع ثابت لحالة السكري خلال على الأقل 8 أسابيع. ويتم ضمان الأثر المقلل للسكر لما بعد الزرع عن طريق كل ‎ce‏ تشغيل خلايا البيتا المزروعة والنشاط المنتج للإنسولين الخاص بالمجموعة التي تم استردادها إلى حد ما من خلايا البيتا في ‎LA)‏ الجزيرية للبنكرياس للفئران المستقبلة . وبدعم هذا النتائج الخاصة بتقلبات تركيزات
0 الإنسولين الخارجي (إنسولين ‎(Qh)‏ والإنسولين الداخلي (الفأران) في دم حيوانات تجريبية. وقد أكدت الفحوصات الهستولوجية للبنكرياس للفئران التجريبية على وجود دور غير بارز للعلاج المركز بالإنسولين والتحفيز الذي يتم التعبير عنه للعمليات التجديدية في الخلايا الجزيرية للفئران التي تعاني من السكري المحفز بواسطة الستريتوزوتوسين بعد الزرع الخارجي للمزارع الخلايا الجزيرية.
5 على نحو ممكن؛ تحدث إعادة تجديد خلايا البيتا ليس فقط في حدود موقع خلايا لانجرهانس الجزيرية؛ ولكن ‎Load‏ في بعض الهياكل الموجودة خارج النسيج البنكرياسي الجزيري. من الصعب إعطاء تفسير ‎Si‏ النتائج . ولا يمكن سوى تقديم نسخة واحدة عاملة - وجود حساسية ‎Allie‏ لمستقبلات الإنسولين لدى الفأر رقم 19 في اتجاه الإنسولين الموجود لديه. ويمكن تفسير الزيادة غير الملحوظة في ارتفاع سكر الدم لدى الفأر رقم 24 بواسطة ‎(al‏ على ما يبدو؛ خلايا
0 البيتا المزروعة الخارجية غير المستقر (أو المرفوضة جراء عدم الاتساق المناعي؛ أو عدم وجود النشاط المنتج للإنسولين الخاص بها ‎dais‏ لظاهرة تلاشي الخلايا) (إنسولين أرانب -صفر) والنشاط الهرموني الضعيف لخلايا البيتا الخاصة بالحيوان (إنسولين الفئران -7 بيكومول/لتر ). ويمكن أن تفسر بالتحديد الحساسية لمستقبلات الإنسولين المقللة المذكورة أعلاه (ولكن بالتحديد تجاه ما تم إدخاله من الخارج (الإنسولين البشري المخلق) المستويات العالية لوجود الإنسولين في
الدم (على الترتيب 194 331 و 261 بيكومول/لتر ) لدى فئران المجموعة الأولى (رقم 9< 14 و 16) التي خضعت للعلاج اليومي بالإنسولين. وعند تلك النقطة؛ كان تركيز الإنسولين الخاص في تلك الحيوانات منخفضًا (لدى ‎old‏ 9 و 14) أو لم يتم الكشف عنها على الإطلاق.(الفأر رقم 16(
ومن الممكن أن يكون وجود كميات كبيرة من الإنسولين الخارجي في الدم قد منع مزيدًا من النشاط البارز لخلايا البيتا لخلايا جزيرية للبنكرياس لفئران المجموعة الأولى. وقد سهل التركيز العالي للإنسولين الخارجي؛ جراء دور التغذية الراجعة؛ الضمور الخاص لجهاز الخلايا الجزيرية 'ضمور عدم الاستخدام”. ويدون استثناء أنه على خلفية العلاج المكثف الفائق بالإنسولين» والذي لا يمكن لنظامه التنافس مع الفرز الطبيعي للإنسولين بواسطة البنكرياس الصماوي الصحيء أبدت الفئران
0 نويات انخفاض في سكر الدم يتم التعبير عنهاء تم خفضها بواسطة التناول المفرط للطعام (كانت التغذية غير محدودة)؛ وهو ما زاد في حد ذاته المتطلبات الخاصة بالإنسولين الذي تم إعطاؤه. ويمكننا أن نعتبر» بصورة طبيعية؛ الأثر المحفز للسكري للمجموعة الكاملة من الهرمونات ويزيد هذا التركيز بصورة كبيرة في عملية تطوير حالة انخفاض السكر في الدم؛ وأثر مجموعة من المواقف المحفزة بالإجهاد؛. ‎Jie‏ سحب الدم؛ وعمليات التدخل الجراحي؛ والخ.
5 في مقابل العلاج المكثف بالإنسولين» وبصورة أكثر تحديدًا - العلاج بفرط الإنسولين؛ الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي لدورات مزارع الخلايا الجزيرية عن الإفراز داخل دم الحيوانات المستقبلة بكميات إنسولين يتم إفرازها بواسطة خلايا البيتا المزروعة الكافية بشكل أو ‎AL‏ لمستوى سكر الدم. بالإضافة إلى ذلك؛ يحدث إفراز الإنسولين في التجويف البطني أو في الطحال؛ مما ينتج عنه دخول الهرمون إلى نظام الوريد البابي؛ الذي يمكن اعتباره فسيولوجيًا من الناحية العملية؛
0 أي الطريق الطبيعية للكائن. وقد سمحت الأبحاث التجريبية الناجحة التي أظهرت أثرًا عاليًا مضادًا للسكري لطعم الخلايا الجزيرية التي تم الحصول عليها من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة؛ باستخدام تلك المزارع في الممارسة العيادية. المثال 12
— 1 7 — الزراعات الخارجية داخل العضل لمزارع الخلايا الجزيرية وقد خضع إجمالي 112 مريضًا يعاني من السكري من النوع الأول لملاحظة ديناميكية موثقة جيدًا. ومن بين 112 مريض؛ كان هناك 58 ‎Slay‏ و 54 امرأة. ‎dls‏ عمر المرضى لحظة الزرع من 16 إلى 53 - متوسط 33.5 عامًا.
من المعروف أن شدة ظهور المضاعفات الثانوية للسكري تعتمد على طول المرض. على نحو مفترض؛ يحدث تدمير الخلايا الخاصة بالمريض نتيجة لعملية مناعية ذاتية في العام الخامس بعد ظهور المرض. وتظهر المضاعفات الثانوية للسكري نفسها ‎Bale‏ لدى مرضى ممن يعانون الطول لما يزيد على 10 سنوات ‎٠‏ ولسبب ذلك ثم تقسيم جميع المرضى إلى 3 مجموعات بالإشارة إلى طول المرض أ) 1 إلى 5 سنوات - 16 شخصًا؛ ب) 6 إلى 10 سنوات - 43 ‎Ladd‏ ج) ما
0 1 يزيد على 0 1 سنوات - 53 مريضًا . تم فحص جميع المرضى لتحديد سمة تطور للسكري وإرساء وجود مضاعفات السكري. على النحو المعتاد» تم استخدام مزارع الخلايا الجزيرية التي تم تلقيها عبر الطرق الموصوفة ‎hel‏ ‏من بين 60-50 بنكرياس في أرانب حديثة الولادة يبلغ عمرها يوم أو اثنان لزرع جرعة ل 1 مريض.
5 1 وقد احتوت كل جرعة للمزرعة على 5 .1- 0 .2 مليون من خلايا بيتا . ودعد أن تم جمعها مباشرة قبل الزرع تم حقن مزارع الخلايا الجزيرية عبر محقنة إلى داخل عضلات العضلة المستقيمة البطنية في ظل تخدير موضعي. ولم يتم استخدام أي كبح مناعي. وفيما يلي وصف لطريقة لزرع مزارع الخلايا الجزيرية. تمثل جرعة واحدة لمزارع خلايا جزيرية معلق معقم في محلول ملح هانكس (حجم 15-10 مللي (
0 موضوع في أنبوب بلاستيكي معلم بطريقة مناسبة. وباستخدام إبرة حقن لا تقل عن 7 سم من حيث الطول وما يزيد على 1 مم من حيث القطر ؛ يتم تجميع معلق الخلية الجزيرية إلى داخل محقنة
وعلى يمين سرة المرضى في منطقة البروز للعضلة المستقيمة البطنية باستخدام محقنة منفصلة وإبرة حقن مناظرة يتم القيام بالتخدير الترشيحي الموضعي للجدار البطني الأمامي(بواسطة ‎Novocain‏ أو مخدر آخر). وبعد التخدير نستخدم إبرة حقن للقيام بوخز مساحة ما تحت الصفاق للعضلة المستقيمة البطنية؛ ومعلق لمزارع خلايا جزيرية. ويتم غلق موضع الحقن باستخدام ضمادة معقمة. بالإضافة إلى الإعطاء التقليدي للمزارع الخلايا الجزيرية إلى داخل العضلة البطنية المستعرضة؛ وجدت طريقة أكثر تعقيدًا وأكثر فسيولوجية على حد سواء للزرع طريقها إلى التطبيق- ألا وهي الزرع عبر الوريد البابي؛ وبتم تحقيق الوصول إليها عبر توسيع كشط الوريد السري. ثمة أسس ينبغي أخذها في الاعتبار (حوالي 20 من عمليات الزرع هذه قد تم تحليلها بصورة كاملة) وهي أنه 0 بسبب طريقة الإعطاء هذه؛ يتم تحقيق العمل المقلل للسكر بصورة أسرع وأكثر وضوحًا للزرع؛ وكذلك يحدث تقليل كبير في الحاجة إلى استخدام إنسولين خارجي. ‎(Shumakov et al.,‏ ).}16{ 1993. مع ذلك»؛ تكون درجة الأثر العلاجي عبر الوريد البابي لزرع مزارع الخلايا الجزيرية لبنكرياس الأرانب حديثة الولادة على المضاعفات الثانوية للسكري غير قابل للتمييز من الناحية العملية من آثار الزرع داخل العضل . وبسبب التعقيدات التقنية المحددة والمخاطر 5 الجراحية الممكنة لهذه الطريقة؛ تم هجرهاء ويتم إجراء جميع عمليات الزرع تقريبًا باستخدام طريقة آمنة وسيطة لحقن ‎LA Glee‏ تحت صفاق العضلة البطنية المستعرضة. في الوقت ذاته؛ وأثناء أداء سلسلة من عمليات الزرع عبر الوريد البابي؛ فحصنا قدرة خلايا البيتا التي تحتويها مزارع خلايا الجزيرية لأرانب حديثة الولادة على الاستجابة للتحفيز المناظر بواسطة اإفراز في الجسم الحي- أي في كائن لدى مريض سكري من النوع الاول. وخضع خمسة مرضى من الذكور لهذا البحث» واختلفت أعمارهم من 25 إلى 45 ‎ile‏ وبلغ تاريخ الأمراض = من 12 إلى 25 عامًا. وعلى طول الدليل؛ التحكم في جهاز شاشة الأشعة السينية البصري التلفازي؛ وعبر الوريد تحت الترقوة تم وضع القسطرة في الشريان الكبدي الأيمن. وتم أخذ ‎die‏ الدم (5 مللي لتر) بصورة آنية من بين الوريد الكبدي والوريد البابي(عبر قسطرة بين سرية تم وضعها أثناء عملية زرع مزرعة للخلايا الجزيرية سابقة. وبعد ذلك» ولأغراض التحفيز الموضعي لمزارع الخلايا الجزيرية 5 للبنكرباس الأرانب حديثة الولادة التي تم حقنها داخل الوريد البابي؛ تم حقن حوالي 20 مللي من
— 3 7 — محلول به 720 جلوكوز داخل الوريد البابي» بالتوازي مع معدل يبلغ 1 جرام من الجلوكوز لكل 1 كيلو جرام من وزن الجسم للمريض» الذي تم استخدامه داخل اختبار حمل الوريد. وقد تم إجراء مسودة دم من الوربدين البابي والكبدي خلال 1 دقيقة؛ خلال 5 دقائق؛ خلال 15 دقيقة؛ خلال 30 ‎(dad)‏ وخلال 60 دقيقة بعد إعطاء الجلوكوز . وكما أظهر اختبار الدم لمحتوى ‎f‏ لإنسولين ¢ وقبل التحفيز؛ كان هناك بالفعل فرق بين تركيزات الإنسولين في الوريد البابي وفي الوريد الكبدي (على
الترتيب 0.644.9 و 1.06.1 وحدة ‎le/mk‏ لتر). وخلال ‎dads‏ بعد إعطاء الإنسولين لوحظ أن التركيز زاد بمقدار 1.5 ضعف في الوريد الكبدي (من 1.06.1 إلى 1.3+9.1 وحدة اللي لتر ؛ ‎p‏ <0.05)؛ والذي يزيد بضعفين على تركيزه في الوريد البابي (0.5+4.2 وحدة 06/مللي لتر). وبحلول الدقيقة الخامسة بعد التحفيز؛ كان تركيز الإنسولين في الوريد الكبدي يعود
0 إلى المستوى الاول» ومن الدقيقة الخامسة عشر كان يقل بصورة بارزة؛ ‎lly‏ يفترض أن تشير إلى نضوب ما بعد التحفيز للوظيفة المنتجة للإنسولين لمزارع الخلايا الجزيرية لأرانب حديثة الولادة المزروعة في النظام البابي للكبد. وتظهر تلك النتائج أن القدرة الجوهرية على إنتاج الإنسولين (في استجابة إلى التحفيز بواسطة الجلوكوز) لخلايا البيتا الموجودة في مزارع الخلايا الجزيرية المزروعة خارجيًا داخل كبد المستقبل
5 وقدرتها الممكنة على العمل بناءً على ‎Jeli fase‏ التغذية الراجعة". وقد ظهر الدليل على تشغيل خلايا البيتا المزروعة للبنكرياس في أرانب حديثة الولادة باستخدام هذه الطريقة الأصلية (المتفردة) حيث إنه ما ‎Jf‏ من المستحيل الكشف عن إنتاج إنسولين بواسطة الخلية المزروعة استنادًا إلى إفراز ببتيد © « وبسبب نقص الوجود فى ‎alle‏ مجموعات التحديد المناعى الإشعاعى والتحديد المناعى المتخمر بببتيد © لدى الأرانب.
0 المثال 13 النتائح العامة للزرع الخارجي للخلايا البنكرياسية الجزيرية لدى فئران تعاني من السكري التجريبي وقد ظهرت قدرة الخلايا البنكرياسية الجزيرية؛ التي تم استقبالها من خلال الطريقة الأصلية من بتكرياس الأرانب حديثة الولادة؛ البقاء والعمل في بيئة الجسم الحي؛ من جانبنا في تجارب للزرع الخارجي لتلك المزارع لدى حيوانات تعاني من سكري تجرببي .
تم استخدام فئران ذكور من سلالة ‎Vistar‏ لها كتلة جسم تبلغ 220-180 جرام؛ تم تغذيتها بانتظام» كحيوانات تجريبية. تم تحفيز السكري التجرببي بالاستخدام تحت الجلد للألوكسان (الجرعة تبلغ 200 مللي لكل 1 كجم من وزن الجسم) أو بالاستخدام تحت الجلد للستريتوزوتوسين (الجرعة ‎Ae 60‏ لتر/كجم ). خلال التجارب ومسبارات التحكم لم نستخدم إلا الفئران التي لديها سكري محفز بواسطة ألوكسان أو ستربتوزوتوسين ؛ ممن لديهم مستوى انخفاض سكر الدم على معدة
خاوية بلغ 20 مللي مول/لتر وأعلى. أشارت اختبارات سبق إجراؤها أن تلك الحيوانات لم يكن لديها ارتداد سلس للسكري التجرببي. بعد زرع مزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ أبدى 88 من أصل 104 فأر لديهم سكري ثابت أو شديد محفز بواسطة الألوكسان (حوالي 85 7( خمودًا ‎Bl‏ لحالة السكري حتى نهاية الفترة
0 التجريبية (20 أسبوعًا). وقد تم تسجيل نقص ثابت لمستويات السكر في الدم يصل إلى ما يقرب من المستويات الطبيعية في دم الحيوانات المستقبلة. في الوقت ‎easly‏ كان الأعراض العيادية الرئيسية للسكري تتلاشى أيضًا (مثل فقدان الوزن؛ العطاشء البوال). وكان الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي ظاهرًا بوضوح في كل من حالات استخدام المزارع داخل الكبد (عبر الوريد البابي أو مباشرةً داخل النسيج الحشوي الكبدي ) وأيضًا ‎dads‏ الطحال (تم جلب المزارع داخل اللب)؛
‎Lady 5‏ عبر العضلات البطنية. وحتى بعد 8 أسابيع من الزرع الخارجي؛ تم الكشف عن الخلايا الجزيرية البنكرياسية التي لها هيكل تم الاحتفاظ به ومع وجود علامات على نشاط إفرازي في أماكن الزرع ‎gal‏ فئران التي لديها تراجع السكري التجرببي. وخلال سلسلة خاصة من التجارب ظهر دور الاستنبات الأولي للخلايا الجزيرية البنكرياسية في المختبر بوضوح في بقاء الخلايا في الكائنات المستقبلة للتكوين الخارجي. ولذلك الغرض؛ قمنا
‏0 بتحليلات مقارنة لنتائج الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية للبنكرياس لأجنة بشرية وزرع خارجي لنسيج جزيري جنيني غير مستنبت لدى ‎OE‏ تعاني من سكري ‎nad‏ وقد تم الكشف عن أن الأثر المقلل للسكر يتم التعبير عنه بصورة أكبر ويكون طويل الأمد لدى حالات زرع للخلايا الجزيرية مسبقة الستنبات البنكرياسية مقارنة بزرع نسيج غير مستنبت للبنكرياس؛ وتتمثل النتائج فقط في تراجع قصير العمر لحالة السكري. وعلى ذلك» تمت البرهنة تجريبيًا على
النتيجة المضمنة للمناعة لاستنبات في المختبر والتي تتمثل في الزيادة الكبيرة في مدة القابلية للبقاء
في كائن لمستقبل أجنبي.
خضع بنكرياس الفئران المستقبلة البالغ عددها 18( ‎(Ally‏ اجري لها زرع خارجي ناجح لمزارع
بنكرياس أرانب حديثة الولادة؛ إلى اختبار هستولوجي في الأسبوع الثامن بعد زرع. ولذلك الغرض تم تثبيت شظية من البنكرياس في محلول ‎Buena‏ وغمرها في بارافين. تم تلوين الشرائح (يبلغ
سمكها ‎(MKmM7-5‏ باستخدام هيماتوكسيلين وأيوسين؛ ‎Lally‏ بواسطة ألدهيد فوكسين للكشف عن
خلايا بيتا. في الوقت ذاته؛ تم فحص بنكرياس لحيوانات عينة الضبط البالغ عددها 6 والتي لديها
سكري غير معالج محفز بواسطة الألوكسان وكذلك بنكرياس الفئران الصحيحة البالغ عددها 6(لم
يستخدم ألوكسان) عن كثب.
0 وأثناء فحص بنكرياس ‎Gh‏ صحيحة وسليمة؛ وجد أن حوالي 45 إلى 776 من خلايا البيتاء كما هو متوقع؛ في جزر "لانجرهانس". وكان لدى الفئران التي لديها سكري محفز غير معالج بواسطة الألوكسان كمية مقللة بشدة من خلايا البيتا في الجزر - في المتوسط 8.3+ -71.1. وقد تم اكتشاف كمية أكبر بكثير من خلايا البيتا في الجزر لدى ‎ll‏ المستقبلة. ولدى الحيوانات» التي خضعت للزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ أبدى البنكرياس
5 الخاص بهم ‎WIA‏ بيتا اعتيادية و بلغت حصتها بين ‎"sill WIA‏ من 10 إلى 755 (حوالي من 7 إلى 21 7) (المتوسط 23.5 18.8). فيما يخص تلك التجارب؛ يمكننا أن نفترض أن الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي لمزارع ‎OK‏ ‏على تطورات السكري التجريبي لدى فئران يحدث بأحد الطريقين : أ) تأكد تشغيل خلايا البيتا المزروعة؛ بالإضافة إلى الأثر المقلل للسكر الذي تم التعبير ‎aie‏ ؛أيضًا بواسطة الكشف عن
0 مجموعات من الخلايا المزروعة الجزيرية البنكرياسية في لب الطحال للحيوانات المستقبلة؛ ب)الأثر التحفيزي لزرع للخلايا الجزيرية البنكرياسية المزارع على معدات الجزيرة للبنكرياس للفئران ‎(Alina‏ وهي إمكانية تأكدت بواقع بيانات الفحص الهستولوجي الذي يبدي وجود جزر مضطردة بصورة بارزة مع وجود خلايا البيتا طبيعية وحصة أكبر في الجزر للبنكرياس للفئران المستقبلة مما هي عليه في الفئران التي تعاني من سكري محفز بواسطة ألوكسان غير معالج. وأصبح البحث
— 6 7 — التجريبي الناجح أساسًا لأداء زرع عيادي للخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى مرضى السكري من النوع الأول. المثال 14 زرع عيادي لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة. خضع إجمالي 112 مريضًا لديه سكري من النوع الأول (السكري المعتمد على الإنسولين- ‎(IDDM‏ لملاحظة ديناميكية موثقة جيدًا + ومن بين ‎ea)‏ 112 مريضًا كان هناك 58 ‎Ola)‏ ‏و54 امرأة. وتفاوت عمر المرضى لحظة الزرع من 16 إلى 53 - المتوسط 35 سنة. من المعروف أن شدة ظهور المضاعفات الثانوية للسكري تعتمد بصورة بارزة على مدة السكري المعتمد على الإنسوين. على نحو مفترض؛ يحدث تدمير خلايا البيتا الخاصة بالمريض نتيجة 0 لمملية مناعية ذاتية في حوالي العام الخامس بعد ظهور المرض. وتظهر المضاعفات الثانوية للسكري نفسها ‎Bale‏ لدى مرضصى لديهم ‎Ble‏ مرض تزيد على 10 سنوات ‎٠‏ ولسبب ذلك تم تقسيم جميع مرضى السكري المعتمد على الإنسولين إلى 3 مجموعات بالإشارة إلى مدة المرض: أ)1 إلى 5 سنوات - 16 شخصًا؛ ب) 6 إلى 10 أعوام.- 43 شخصًاء ج) ما يزيد على 10 سنوات - 53 مريضًا . تم فحص جميع المرضى بهدف تحديد سمة تطور للسكري المعتمد على ‎f‏ لإنسولين وإرساء 5 1 وجود مضاعفات السكري . ‎Bale‏ ما تم استخدام مزارع ‎OK‏ المستلمة عبر الطرق الموصوفة أعلاه من بين 60-50 بنكرياس ‎Cul‏ حديثة الولادة يبلغ عمرها يوم أو اثنان للزرع لمريض واحد. ‎Balog‏ ما يتم توصيل المعلق إلى داخل العضلة البطنية المستعرضة في ظل تخدير موضعي. ولم يتم استخدام أي كبح مناعي. وفيما يلي نتائج للزرع الخارجي للخلايا الجزيرية البنكرياسية المزارع على مسار نشأة السكري 0 المعتمد على الإنسولين؛ على التعبير على مضاعفاته لدى مرضى لديهم مدد مختلفة من المرض. زرع لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرباسية لأرانب حديثة الولادة إلى مرضى لديهم السكري المعتمد على الإنسولين من 1 عام إلى 5 أعوام.
كان لدى 5 من بين 16 مريضًا من هذه المجموعة السكري المعتمد على الإنسولين مع سمة متقلقلة بدرجة كبيرة. وكان لدى 2 منهم حالات انخفاض سكر الدم مضطردة (تحدث عدة مرات أسبوعيًا) وانسيابية (دون أسباب استثارة معروفة)؛ تسبب في محاولات متعددة لعلاج المريض؛ بيد أن جميع محاولات إحداث استقرار في مسار الأمراض او تحديد جرعة الإنسولين باءت بالفشل. وكان لدى 3 مرضى سكري متقلقل المعتمد على الإنسولين مع إمكانية تطوير حالات سكر كيتوني
تصعب إزالتها؛ ولم تسفر محاولات الوصول إلى تعويض أيضي إلا عن أثر قصير الأمد. وقد أبدى ثلاثة مرضى (2 منهم لديه سكري متقلقل) أعراض اعتلال عصبي حسي-حركي وألم التنمل وإجهادفي عضلات بطن الساق. وبعد الزرع الخارجي داخل العضل لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ لاحظت أغلبية المرضى نقصًا في المتوسط اليومي الذي ‎Bale‏ ما يكون مرتفعًا
0 ا لمستويات السكر في الدم خلال 4-2أسابيع. وقد لوحظ الاحتفاظ بقيمتها داخل النطاق المناظر للتعويض الجيد لاستقلاب الكريوهيدرات (المتوسط 7.8 إلى 9.9 مللي مول/كجم) علاوة على ذلك خلال على الأقل 12 شهرًا من الإشراف في مرحلة ما بعد الزرع. وعند هذه النقطة؛ لدى المرضى الخمسة جميعًا ممن يعانون ‎IDDM‏ متقلقل تطلب مسار المرض طبيعة مستقرة: اختفت القابلية لوجود حالات انخفاض السكر في الدم وفرط كيتون الدم. ويؤكد تحسين التحكم الجليكوني بعد زرع
5 لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية لأرانب حديثة الولادة على المعلومات التي تخص تحديد الهوموجلوبين المعالج بالجليكوزيل في دم المستقبلين (ينقص عن مرحلة ما قبل الزرع 712.4 إلى 6 8.3 و 710.1 بالنسبة إلى 6» 9 - و 12 شهرًا بعد زرع . وقد سمح لنا ارتفاع تعويض السكري المعتمد على الإنسولين و الميل الواضح إلى تقليل المتوسط اليومي لمستوى سكر الدم لنا مع نهاية الشهر الأول بان نقلل إلى حد ما من جرعة الإنسولين التي تم إعطاؤها (المتوسط 712)؛
0 والتي ظلت إلى درجة ما مقللة خلال 3 6 9 و 12 ‎Hed‏ بعد زرع - نسبيًا بنسبة 731.5 2.» 4725.5 718.4 وعند هذه النقطة ؛ قلت ‎dala‏ المرضى الثلاثة إلى الإنسولين الخارجي بين الشهر الرابع وما تلاه بعد الزرع بنسبة تزيد على 750 (من 754 إلى 786)؛ في الوقت ذاته بالنسبة إلى اثنين من المرضى زادت جرعة الإنسولين الذي تم إعطاؤه بحلول الشهر 3-1 لفترة ما بعد الزرع بصورة مؤقت (لمدة أسبوعين- أريعة) بنسبة 713 و712.
ولأنه لدى المرضى ممن لديهم تاريخ من السكري المعتمد على الإنسولين يقل عن 5 أعوام توجد إمكانية وجود ‎LIS‏ بيتا خاصة؛ يمكننا أن نتوقع تقييمًا للفرز المتبقي لببتيد © قبل الزرع (تم ‎shal‏ ‏التحليلات بصورة آلية بمساعدة طريقة المناعة-التخمرء والتي تكون متغيرات محتوى ببتيد © المعتادة في مصل الدم بالنسقب لها 3.5-0.5 نانوجرام/مللي). وقد بدى أنه قبل زرع لم يكن إلا لدى 3 من بين 6 مرضى )119( أي إفراز لببتيد © سواءً أساسي (على معدة خاوية) أو محفز (بعد إفطار معياري). وكانت مدة تاريخ السكري المعتمد على الإنسولين لديهم أطول من 3 أعوام. وقد كان المستوى المتوسط للببتيد © الأساسي والمحفز في مرضى ممن لديهم مدة مرض من 1 إلى 5 أعوام (بما في ذلك الأس الصفري لدى 4 مهم)معللاً نسبيًا ل 0.12 و 0.36 نانوجرام/ ‎le‏ لتر. بعد الزرع ‎al‏ 2 من بين 3 "المستقبلين السلبيين لببتيد ©" تم تسجيل التركيز :
0 المحفز أولاً؛ بعد ذلك (مع حلول الشهر الثالث)- إفراز أساسي لببتيد ©« والذي أشار إلى استرداد إفراز الإنسولين بواسطة خلايا البيتا الخاصة للمريض. وقد أبدى "المستقبلون الإيجابيون لببتيد ‎'C‏ ‏زيادة جوهرية في محتوى ببتيد © في مصل الدم؛ والذي وصل لدى 5 مرضى إلى العامل الطبيعي. ومن المهم الإشارة إلى أنه مع نهاية العام الأول من الملاحظة لم يكن ثمة ميل واضح إلى نضوب ببتيد © في دم المستقبلين. وكانت هذه هي التغييرات التي تمت ملاحظتها خلال ال
5 12 شهرًا بعد الزرع الأول لدى مرضى السكري المعتمد على الإنسولين ممن لديهم مدة تاريخ من الأمراض يبلغ من 1 عام إلى 5 أعوام. وقد خضع تسعة مرضى من هذه المجموعة بفاصل زمني يبلغ 13.3 + 1.8 أشهر إلى عمليات زرع داخل العضل لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية لأرانب حديثة الولادة: 1 مريض ثلاث مرات؛ 3 مرضى - مرتين» و 5 مرضى - مرة واحدة. ‎aly‏ يبدي أي من هؤلاء المرضى علامات سواء
0 موضعية أو عامة برفض/ انفصال الخلية المزروعة؛ ولا أي تفاعلات حساسية. وقد أبدى ثمانية من بين المرضى التسعة؛ الذين خضعوا لزرع متكرر أثرًا علاجيًا لا تقل قيمته عما كانت عليه في الزرع الأولي. ولدى 3 من بين المرضى الأربعة؛ الذين خضعوا لمزارع الزرع الخارجي للخلايا الجزيرية البنكرياسية ثلاث مرات (أي +2 مرات مكررة) تم ملاحظة زبادة في الأثر العيادي؛ مثل الزيادة في كتلة العضلة والتحسن البارز في الحيوية. وعند هذه النقطة؛ استمر
5 المسار المستقر للسكري المعتمد على الإنسولين» وغابت أعراض المضاعفات الثانوية للسكري. ‎als‏
يبدي المريض الوحيد في هذه المجموعة الذي صمد أمام 4 عمليات زرع (ومع نهاية هذه التجرية تاريخ من الأمراض التي عانى منها كان يبلغ ما يزيد على 9 أعوام) خلال ال 5,5 عامًا من الملاحظة أي علامات لتزعزع استقرار مسار المرض ‎J)‏ الزرع الاول كانت متقلقلاً بدرجة كبيرة)؛ وكذلك لم يبدي أي علامات للاعتلال الوعائي السكري. وببدو أن الأثر المستحق لعمليات الزرع المتكررة يكون محكومًا بالزيادة في النشاط الإفرازي للجهاز الجزيري الخاص بالمستقبلين ويتأكد
بالزيادة في تركيز ‎JS‏ من ببتيد © البشري الأساسي والمحفز مع كل عملية زرع. زرع لمزارع الخلايا البنكرياسية الجزيرية لأرانب حديثة الولادة إلى مرضى لديهم تاريخ أمراض من 6 إلى 10 أعوام. وقد خضع إجمالي 43 مريض من مرضى السكري المعتمد على الإنسولين ممن لديهم فترة
0 الأمراض من 6 أعوام فما فوق للإشراف (متوسط الفترة 7.8 عامًا)؛ 24 رجلاً و 19 امرأة. وكان عمر مرضى في لحظة الزرع الاول في النطاق من 15 إلى 43 ‎le‏ (المتوسط 28.3). وكان لدى 12 مريضًا سمة متقلقلة شديدة الوضوح للمرض» لم تستقر أثناء محاولات متعددة لعلاج المريض. وكان لدى 16 مريضًا أعراض ثانوية لمضاعفات السكري المعتمد على الإنسولين؛ وكان لدى 9 منهم اعتلال عصبي حسي -حركي فقط واعتلال كلية متنامي ‎Mogensen)‏ المرحلة 3)؛
5 وكان لدى 2من المرضى - اعتلال عصبي مستقل (القابلية لتسارع نبضات القلب)؛ وطور 2 من المستقبلين اعتلال الشبكية غير تكائري. ‎Ded 2-1 Play‏ بعد الزرع الخارجي تغيرت ‎Alla‏ المرضى البالغ عددهم 12 ممن يعانون من سكري متقلقل سابق المعتمد على الإنسولين إلى حالة أكثر تحكمًا وتوجد إمكانية للتحكم بها. على ‎gail‏ المعتاد؛ يحدث أيضًا إحداث استقرار في مؤشرات لاستقلاب الكربوهيدرات. وبذلك؛ قبل
0 الزرع؛ شهد المتوسط اليومي لمستوى الجلوكوز في دم المستقبلين تقلبًا بين 9.6 إلى 14.1 مللي مول/لترء ولكن في خلال شهر بعد زرع بلغ سكر الدم اليومي 6.6. إلى 11.2 (المتوسط 8.6 مللي مول/لتر ). وقد لوحظ الانخفاض الأقصى بهذا المؤشر بحلول مدة الثلاثة أشهر (7.8 مللي مول/لتر )؛ ولكن ومع نهاية المدة البالغة عام ظلت مرضية -عند مستوى 8.8 مللي مول/لتر ).
وقد تأكد التحسن في تعويض استقلاب الكريوهيدرات بواسطة تغير كمية الهموغلوبين المعالج بالجليسول في دم المرضى من 712 قبل الزرع (المتوسط ) ‎hig‏ مستواه بعد 3 أشهر بالفعل 8. في 6 أشهر -729.4,؛ في 9 أشهر - زاد بعض الشيء (إلى 10.9 7)؛ ولكن مع حلول نهاية العام قل مجددًا حتى وصل إلى 79.8. وأيضًاء لدى أغلبية مرضى هذه المجموعة حدث انخفاض قسري في جرعة الإنسولين اليومية التي
تم إعطاؤها مقارنة بمستوى ما قبل الزرع: في 3 أشهر بعد زرع قلت في المتوسط بنسبة 715.22 في 6 أشهر -بنسبة 730.1 في 9 أشهر -727.0, في 12 شهرًا -725.1. وعلى الرغم من التاريخ البارز للسكري المعتمد على الإنسولين لدى هذه المجموعة من المرضى(من 6 إلى 10 أعوام = في المتوسط 7.8)؛ لم يكن سوى لدى حوالي 775 )32 مريضًا)
0 قبل الزرع إفراز إنسولين خاص بهم(غاب ببتيد © بالكامل). ولأن المرضى الآخرين في هذه المجموعة كان لديهم مستوى أساسي من ببتيد © تنوع من 0.05 إلى 0.2 نانوجرام/ ‎A Ale‏ ومحفز - من 0.1 إلى 0.3 نانوجرام/ مللي ‎al‏ كان متوسط تركيزه في المجموعة قبل زرع على معدة خاوية - 0.07 وبعد التحفيز -0.08 نانوجرام/ مللي لتر. بعد زرع؛» حدثت ‎sab)‏ ثابتة في تركيز ببتيد © في الدم - في 3 أشهر بلغ المستوى الأساسي في المتوسط نفس 0.07 وبلغ
5 المستوى المحفز - بالفعل 0.11 نانوجرام/ مللي لتر؛ وفي 6 أشهر - زيادة أكثر من 3 أضعاف - نسبيًا ما يصل إلى 0.38 و 0.43 نانوجرام/ مللي لترء ولكن بحلول الشهر التاسع- بلغ ‎pal‏ ‏ما يصل إلى 0.09 و 0.13 نانوجرام/ مللي لتر. وخلال فترة ما بعد الزرع؛ كانت هناك إشارات إلى مسار أكثر إيجابية للمضاعفات الثانوية لدى مستقبلي هذه المجموعة. ويدات أعراض كل من الاعتلال العصبي الحسي الحركي والاعتلال
0 العصبي المستقل في ان تضعف بالفعل ومع نهاية 1.5-1 ‎Bed‏ بعد الزرع الخارجي؛ وشبه توقفت تمامًا عن إزعاج المرضى بحلول الشهر الثالث. أيضًاء لدى ‎JS‏ من المرضى ممن لديهم اعتلال الكلية السكري اختفى البول البروتيني بالكامل بحلول الشهرين الثاني والرابع بعد زرع؛ ‎alg‏ يعاود الظهور لما يقرب من عام بعد الزرع. ولم يسجل مرضى اعتلال الشبكية السكري زيادة في التغيرات المرضية في قاع العين.
وتم أداء عمليات زرع متكررة (في 13-7 أشهر بعد الزرع الاول) على 14 مريضًا: مرة واحدة على 5 مرضى؛ مرتين على 5 مرضى؛ ثلاث مرات على 4 مرضى؛ و 4 عمليات زرع متكررة - على مريض واحد. في أغلب الحالات أسهم عمليات زرع متكررة لخلايا الإنسولين البنكرياسية؛ على الأقل؛ في الحفاظ على تغييرات إيجابية في حالة المرضى التي كانت قد حدثت بعد الزرع الاول. وستولى عناية خاصة بملاحظة نتيجة عمليات الزرع الممتالية (الفاصل الزمني 9-7
أشهر) لدى 5 مرضى لديهم اعتلال عصبي حسي-حركي حاد؛ مما أدى إلى زوال تكيف حاد (تعطل/عدم القدرة على العمل) لدى رجل عمره 48 سنة (لديه تاريخ السكري المعتمد على الإنسولين يبلغ 8 سنوات) جراء الألم الشديد في الأطراف والضمور العضلي البارز؛ وخصوصًا في الأطراف السفلى. وبعد الزرع الأول قل الألم في الأطراف؛ وبعد ذلك بعد الزرع الثاني زال الألم
‎cla 0‏ وبعد ذلك بدأت ‎sale)‏ تجدد التوتر العضلي والحجم في التجدد. نتيجةٌ للزرع الذي تم القيام به؛ خلال 4.5 عامًا من الملاحظة تمدد الحجم العضلي للمريض بمقدار 23 كجم تعادل التوتر العضلي لديه؛ وكذلك أداء الدفع العصبي عبر الأعصاب الحركية . وأيضًاء تطلب السكري ‎Bluse‏ ‏ثابنًا؛ قلت جرعة الإنسولين المدخلة بمعدل 750. ومن الممكن أن يكون تقليل الإنسولين الخارجي ‎Je Gal‏ نحو بارز بواسطة الإحياء البارز لخلايا البيتا الخاصة ‎anally‏ حيث أصبح محتوى
‏5 ببتيد © البشري في دم المستقبل = 0.1 نانوجرام/مللي(معدة فارغة) و 0.1 نانوجرام/مللي(المحفز) قبل ذلك ‎Gas‏ 0.36 و 0.55 نانوجرام/مللي مع نهاية فترة السنوات الأريعة لمرحلة ما بعد الزرع. زرع مزارع ‎WIA‏ البنكرياسية الجزيرية ‎ah‏ حديثة الولادة إلى مرضى لديهم تاريخ أمراض يزيد على 10 سنوات. تكونت هذه المجموعة من 53 ‎Lads‏ : 32 امرأة و 21 ‎Slay‏ واختلف عمر المرضى لحظة
‏0 الدزرع الأول من 21 إلى 53 -المتوسط 33.4. واختلفت مدة الأمراض من 11 إلى 27 سنة (المتوسط 14.8). وكان لدى 9 مرضى مسارًا متقلقلاً بحق للسكري: ظروف انخفاض مكر الدم انسيابية ‎Ge‏ ما تتبدل مع نويات من الحمض الكيتوني.
-7ع8- وكان ثمة مضاعفات ثانوية للسكري مكتشفة لدى 38 من المرضى: عانى 11 من اعتلال عصبي حسي-حركي؛ عانى 1 ‎pane‏ من اعتلال عصبي حسي حركي وإعتام عدسة العين السكري؛ وعانى 5 مرضى من الاعتلال العصبي الحسي الحركي؛ واعتلال الكلية الأولي (في 007 ) واعتلال الشبكية السكري غير الانتشاري؛ وعانى 8 مرضى من اعتلال الكلية المتزايدة واعتلال الشبكية غير الانتشاري؛ 6 مرضى من اعتلال الكلية البارز واعتلال الشبكية قبل الانتشاري؛ وعانى مربضان من اعتلال الكلية المتزايد واعتلال الشبكية الانتشاري؛ وعانى مريضان من اعتلال الكلية البارز واعتلال الشبكية الانتشاري؛ وعانى مريضان من الاعتلال العصبي الحسي الحركي؛ والاعتلال العصبي المستقل؛ اعتلال الكلية البارز اعتلال الشبكية قبل الانتشاري؛ وكان لدى مربض واحد والاعتلال العصبي الحسي الحركي والاعتلال العصبي المستقل؛ اعتلال 0 الكلية السكري في المرحلة اليوريمية واعتلال الشبكية الانتشاري. وبذلك؛ تم الكشف عن الاعتلال العصبي السكري لدى 23 مريضًاء ‎Lay‏ في ذلك 20 لديهم اعتلال عصبي-حركي و 3 = لديهم اعتلال مستقل. وتم الكشف عن اعتلال الكلية السكري لدى 24 مريضًاء بما في ذلك اعتلال الكلية المتصاعد لدى 15 مريضًاء ‎Hb‏ = لدى 8 مرضى؛ ومرحلة يوريمية لدى مستقبل 1. وتم الكشف عن اعتلال الشبكية السكري لدى 26 مريضًاء؛ بما في ذلك 5 المرحلة غير الإنتشارية- لدى 13 مريضًا؛ المرحلة قبل الإنتشارية- لدى 8 مرضى,ء والمرحلة الإنتشارية - لدى 5 مستقبلي. ويهدف تقليل خطر نشأة أحوال انخفاض سكر ‎alll‏ تم لدى مرضى في المراحل البارزة من اعتلال الشبكية السكري واعتلال الكلية زرعة جرعة من مزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية التي تم استقبالها مما لا يزيد على 40 بنكرياس من الأرانب حديثة الولادة. وكان لدى جميع المستقبلين ممن هم في 0 المسار المتقلقل ‎Gl‏ ل ‎IDDM‏ استقرار سريع نسبيًا ‎PA)‏ 3-1 أشهر) في مستوى سكر الدم؛ وتم اختيار نظام ملام بصورة اكبر من العلاج بالإنسولين. كان ثمة انخفاض جوهري في متوسط مستوى سكر الدم اليوم لدى مرضى لهذه المجموعة: من 8 ملي مول/لتر قبل الزرع إلى 9.8 ‎Me‏ مول/لتر خلال 3 أشهر بعد زرع؛ و 10.1 ‎Ale‏ ‏مول/لتر في 9 أشهر بعد زرع. وبالتناظر مع التغييرات في سكر الدم انخفض تركيز الهوموغلوبني 5 المعالج بالجليكوزيل أيضًا في دم المستقبلين من 13.1 إلى 710.0.
وقد كانت الزيادة الكبيرة لدرجة تعويض ‎IDDM‏ مصحوية بنقص في احتياج المستقبلين إلى إنسولين خارجي. ويحلول الشهر الثالث بعد الزرع الخارجي؛ تم تقليل جرعة الإنسولين الذي تم إعطاؤه لمرضى لهذه المجموعة في المتوسط بنسبة 712.5؛ في 6 أشهر - بنسبة 726.6 في 9 أشهر - بنسبة 725.0؛ في 12 شهرًا - فقط بنسبة 79.8؛ مما أظهر ان الحاجة إلى إنسولين خارجي لمستوى ما قبل الزرع. وتمت ملاحظة الحد الأقصى من التقليل لدى المريض© : (أنثى) ‎lle 26)‏ مدة /1001- 20 عامًا؛ المضاعفات الثانوية - اعتلال عصبي حسي حركي؛ اعتلال كلية بارزء اعتلال الشبكية قبل انتشاري). وبالفعل في أسبوعين بعد زرع مزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية المستقبلة من بين 40 بنكرياس الأرانب حديثة الولادة داخل العضلات؛ كان النقص في الحاجة إلى الإنسولين الذي كما يلي: انخفض من 36 إلى 24 وحدة/اليوم؛ في 6أسابيع - إلى 0 16 وحدة/اليوم»؛ في 10 أسابيع إلى 4 وحدات/اليوم (أي نقص بنسبة 790). في الوقت ذاته على خلفية الحالة الثابتة؛ لم يتجاوز مستوى المتوسط اليومي لسكر الدم 9 مللي مول/لتر. وقد قل محتوى ©1161 في 4 أشهر بعد زرع إلى 78.7 ولم يتجاوز 790 خلال الفترة التي تبلغ على الأقل 1.5 عام. في الوقت ‎atid‏ حدث نقص جوهري في بروز المضاعفات السكرية الثانوية ‎Ala‏ ‏5 وقد أبدى 4 مرضى؛ على الرغم من التاريخ الطويل لديهم من ‎IDDM‏ (من 10.2 إلى 13.5 ‎ile‏ المتوسط 11.1 عامًا)؛ الفرز المتبقي لببتيد © (في المتوسط 0.05 نانوجرام/مللي على معدة فارغة؛ غير محفز. مع ذلك؛ بحلول الشهر الثالث بعد زرع تضاعفت كمية المرضى ممن لديهم الببتيد © إيجابي- وبلغ تركيز الببتيد لدى أولئك المرضى الثمانية (متوسط الفترة للسكري - 6 عامًا) تركيز ببتيد © على معدة خاوية في المتوسط 0.09 نانوجرام/ مللي لترء و محفز- 0 0.12.نانوجرام/ مللي لتر. وقد اعتمد أثر /تأثير الزرع على درجة ظهور مضاعفات سكرية في أغلب الحالات على أنواعها والمرحلة العيادية 5(التقدم). وعلى ذلك؛ إذا شهد جميع المرضى ممن لديهم اعتلال عصبي حسي- حركي تحسين جوهريًا في مسار هذه المضاعفات بالفعل بعد الزرع الأول لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ ولكن لدى 2 من بين 3 مرضى لديهم اعتلال عصبي مستقل لم يكن هناك أي أثر 5 إيجابي إلا للزرع الثاني.
— 8 4 —
وقد شهر 12 من بين 15 مرضى لديهم مرحلة أولية من اعتلال الكلية السكري اختفاءً واضحًا
للبولي البروتيني الميكروي واختفاء الميل إلى وجود ارتفاع ضغط شرياني. وقد تمت ملاحظة أثر
إيجابي في مرحلة ما بعد الزرع لدى مرضى لديهم اعتلال الكلية بارز فيما يقرب من 763 من
الحالات- لدى 5 من 8 مستقبلين. في الوقت ذاته؛ قل إفراز البروتين مع البول بدرجة كبيرة: تم
تبديل البول البروتيني الماكروي إلى بول بروتيني ميكروبي (أقل من 0.3 جرام/اليوم) ومع وجود
ميل إلى تقليل ومعادلة ‎Jara‏ الدم المرتفع » مما سمح بالتقليل البارز لجرعات علاجات الضغط
المرتفع أو حتى التوقف عن إعطاءها. ولدى 2 من بين 3 مستقبلين آخرين خلال فترة الملاحظة
(نسبيًا 2 و 2.5 عامًا) لم تكن ثمة علامات على وجود اعتلال الكلية السكري التقدمي.
وفي الوقت ذاته لم يكن لدى مربض في المرحلة النهائية من اعتلال الكلية السكري إلا أثرًا إيجابيًا 0 قصير العمر: لمدة 5-4أسابيع بعد الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية اقترات
المستوى المرتفع نسبيًا لديه من خلق الدم واليوريا إلى الحد الأعلى من المؤشرات الطبيعية؛ والتي
يحدث بعدها تقدم قصير نسبيًا ولكن ثابت في القصور المزمن في الكلى.
وقد خضع 10 مستقبلين في المراحل المتقدمة والبارزة من اعتلال الكلية السكري لعمليات زرع
متكررة لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ وأصبح 4 من المرضى ممن لديهم اعتلال كلية بارز 5 مستقلبين لثلاث مرات خلال فترة السنوات 4-3. وقد تمت ملاحظة 9 من بين 10 مرضى
خضعوا لإعادة الزرع للتأكد على ‎BY)‏ من عدم حدوث مزيد من التقدم في مشكلات وظائف
الكلى.
تم فحص مربض لديه إعتام عدسة العين السكري (عمره 22 ‎lle‏ /1001|)والمدة - 11 ‎(We‏
بحلول الشهر الخامس بعد الزرع بواسطة أطباء العيون الذين توقفوا عن ملاحظة نقاط من التعتيم 0 لللعدسات البلورية؛ فقد قيموا هذا التغيير في الصورة العيادية فى صورة "ارتشاف إعتام العدسة".
التغييرات المرضية التي لوحظت خلال فترة الملاحظة بأكملها (من 1 إلى 6 سنوات)؛ مع تحسن
في صورة قاع العين؛ لدى 5 مستقبلين (غياب انفصال الشبكية؛ نقص في كمية أنورسما
الميكروي.) مع ذلك؛ لدى 3 مرضى ممن لديهم اعتلال الشبكية غير انتشاري كانت هناك زيادة في كمية الأنورسما وحدثت حالات نزيف موضعي. من بين 8 من المرضى الذين تمت ملاحظتهم ممن لديهم اعتلال شبكية قبل انتشاري؛ لدى 3 حالات بعد 4-2 أعوام بعد الزرع الخارجي الوحيد لمزارع الخلايا الجزيرية البنكرياسية؛ تمت ملاحظة عملية انتشار. في الوقت ذاته لم يحتج 3 مرضى من المجموعة ذاتها (763)؛ الذين قبل
الزرع خضعوا لعملية تخثر ليزر؛ إلى تكرار العلاج بالليزر خلال فترة الملاحظة الكاملة ما بعد الزرع - من 1 إلى 6 عامًا. وعند هذه ‎chai)‏ خضع 3 مرضى لهذه المجموعة ‎Goi‏ 1؛ 2 و 3 عمليات زرع متكررة بفواصل زمنية من 9 أشهر إلى عام ونصف. وبعد الزرع الخارجي لمزارع ‎PLLC‏ كان لاثنين من بين 5 مرضى لديهم مرحلة انتشارية لاعتلال
0 الشبكية السكري إحداث استقرار نسبي (الفترة 1 و 1.5 عامًا) تمت إحداث استقرار في الصورة العيادية لقاع العين مع زيادة معتدلة للوظائف البصرية (على نحو ‎caine‏ بسبب ارتشاف حالات النزيف)؛ وعلاوة على ذلك لوحظ تقدم عملية ‎«GLY‏ وصحبه عودة النزيف لدى مريض واحد (أنثى) في الجسم الزجاجي مع تدهور جوهري في الوظائف البصرية. وقد بدا أن استخدام زرع لخلايا جزيرية مزروعة التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة
5 شديد الفاعلية فيما يتعلق بعلاج السكري لدى الاطفال. وقد تم البحث عن النتائج الأخيرة للزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية لدى الأطفال المصابين بالسكري من النوع الأول عبر ملاحظة 20 مريضًا قبل الزرع وفي 5 سنوات بعد الزرع الأول )}1{ 2005 ‎(Volkov,‏ وقد تكونت مجموعة المقارنة (عينة الضبط دون الزرع) من 20 طفلاً تم اختيارهم بناءة على ‎Tae‏ 'الحدوث-الضبط" مع التسامح مع العمرء النوع؛ طول المرض؛ مستوى التعوبض» الحاجة إلى الإنسولين ونشأة
0 المضاعفات. وقد أظهر تحليل المتابعة بعد الإخراج أن الزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية له أثر إيجابي على متطلبات الإنسولين. على ذلك؛ بحلول الشهر الثالث بالفعل بعد الزرع انخفضت جرعة الإنسولين التي تم إعطاؤها لدى نصف المستقبلين» مقارنة بالمستوى الأولي؛ ومع نهاية العام الأول- كان لدى 743 من المرضى حاجة أقل إلى الإنسولين. ولم تكن هذه التغييرات موجودة في مجموعة
المقارنة. وتمت ملاحظة أثر استجابة للجرعة: وقد تمت ملاحظة الانخفاض ‎SY)‏ في متطلبات
الإنسولين بعد إعطاء المزرعة التي تحتوي على حوالي 5 مليون من ‎vey Lindl WIA‏ هذه النقطة؛
في فترة ما بعد الزرع حدث تعويض أكثر ‎BLE‏ وأكثر بروزًا لاستقلاب الكربوهيدرات» والذي تم
تأكيده بواسطة ديناميكيات المتوسط اليومي لسكر ‎pall‏ مقارنة بمجموعة الضبط. ويالفعل في خلال 3 أشعر بعد الزرع الخارجي؛ انخفض مستوى سكر الدم اليومي من 0.55+10.78 مللي مول/لتر
إلى 0.4+8.6 مللي مول/لتر مقابل 0.72+9.15 ‎Ae‏ مول/لتر (بصورة أولية 0.79+10.65
مللي مول/لتر ). في فترة عام واحد بعد الزرع أصبحت تلك الاختلافات أكثر معقولية: في
مجموعة الملاحظة يبلغ المتوسط اليومي لسكر الدم 0.39+8.5 مللي مول/لتر مقابل
0-4 مللي مول/لتر في مجموعة الضبط. وظل نفس الميول في حالات عمليات الزرع
0 المتكررة. وقد ثبت أن الأثر العلاجي لزرع مزارع خلايا جزيرية على مسار المضاعفات السكرية شديد الأهمية. وقد أظهرت الملاحظات العيادية طويلة الأمد أنه؛ مقارنة بمجموعة ‎canal‏ كانت هناك حالات حدوث أقل اضطرادًا لاعتلال الكلية السكري؛ اعتلال الشبكية؛ واضطرابات النمو (كمظهر لمتلازمة مورياك) لدى الأطفال الذين يعانون من السكري من النوع الأول بعد زرع العلاج. على
5 ذلك؛ حدث نقص في حدوث اعتلال الشبكية من 725 إلى 711 (الزيادة في هذا المؤشر من 3 إلى 725 في مجموعة الضبط). وقد قل فقدان الألبومين مع البول بصورة كبيرة- من 4 إلى 78.7 ملجم/اليوم لدى المرضى ممن يعانون اعتلال الكلية السكري بعد الزرع الخارجي؛ في حين أنه في مجموعة المقارنة تواصل نمو هذا المؤشر - من 220.67 إلى 1 ملجم/ اليوم.
0 وتعد المضاعفات على شاكلة متلازمة مورياك أحد خصائص مرض السكري لدى الأطفال والمراهقين» بما في ذلك تضمين اضطرابات النمو في هيكلها. ويؤدي استخدام المستحضرات ‎dla)‏ لعلاج المرض المذكور إلى أثر قصير الأجل؛ حتى التقدم في غلق مناطق النمو وفي تقليل الطول النهائي للجسم(النمو). على مدار الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية؛ تم الكشف عن سرعة النمو ‎(Sly‏ دون سرعة التغير في غلق مناطق النمو. ‎(ling‏ انخفضت حصة المرضى ممن
5 يقل طولهم عن 75 (التقزم الأصيل)؛ من 718 إلى 714 خلال العام الأول من الملاحظة.
وخلال متابعة المرض التي بلغت 5 سنوات؛ لم يتم العثور على مريض واحد يقل طوله عن 5 شريحة مئوية بين أطفال مجموعة الملاحظة. في مجموعة المقارنة زادت حصة الأطفال ممن هم ‎Jil‏ من الحجم الطبيعي من 720 إلى 722 خلال العام الأول من الملاحظة. خلال فترة الملاحظة التي استمرات 5 سنوات؛ انخفضت حصة لمرضى ممن يقل طولهم على 5 مئوية إلى 710 جراء استخدام العلاج المكثف بالإنسولين. وقد أظهرت الابحاث المناعية أن زرع الخارجي لمزارع ‎WIA‏ جزيرية لا يسبب تنشيطًا جوهيًا او طويل الأمد لعملية ‎de lial)‏ الذاتية؛ وهو ما يعد أمرًا ‎lage‏ في استخدام هذا النوع من العلاج لدى المرضى ممن يعانون وظيفة إنسولين محفوظة جزثيًا. ولم تكشف الملاحظة الدقيقة للمرضى من مجموعة الملاحظة (مع وجود فحص داخلي سنوي) تلوثًا بعدوى حيوانية؛ ولو حتى لدى حالة 0 واحدة. أثر للزرع الخارجي لمزارع ‎WIA‏ جزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة على مؤشرات المناعة لدى المرضى ممن لديهم السكري من النوع الأول. وقد تم إجراء فحص مناعي معقد لدى 20 مريضًا ممن لديهم سكري من النوع الأول بعد استكمال الزرع الأولي داخل العضل لمزارع خلايا جزيرية للبنكرياس الخاص بأرانب حديثة الولادة؛ ولدى 12 5 مريضًا ممن لديهم سكري من النوع الأول بعد الزراعات الخارجية المتكررة لمزارع ‎WAY‏ الجزيرية. وقد تم استخدام 17 اختبار معياري للمناعة الخلوية والخلطية في البحث المناعي؛ وأنظمة البلاعم والمتممات؛ بما في ذلك عيار يبلغ أجسام مضادة مثبتة للمكملات في اتجاه خلايا جزيرية للبنكرياس الخاص بأرانب حديثة الولادة. وقد ثبت أنه دلى المرضى ممن يعانون السكري من النوع الأول تمت ملاحظة تنشيط قبل الزرع 0 لمزارع الخلايا الجزيرية لموصلات مناعة خلايا ‎(T‏ وكذلك وجود عدم توازن في المجموعة الفرعية المنظمة للمناعة في خلايا ‎T‏ اللمفاوية؛ وتفعيل عوامل الحماية غير النوعية. بعد الزرع أظهر 8من المستقبلين (أي 740( بعد الزرع الاولي لمزارع ‎OK‏ معيار ‎KFA‏ منخفض للاجسام المضادة في اتجاه إنسولين إجمالي ومولد ضد 6ا0؛ وأبدى 10 مرضى (750) زيادة متوسطة في عداد خلايا البيتا اللمفاوية في الشهرين الثاني-الثالث؛ مع التقليل المتوالي.
وعند تحديد المجموعات الفرعية لخلايا ‎T‏ اللمفاوية في ديناميكيات ما بعد الزرع الخارجي؛ كان ثمة ميل الميل إلى معادلة محتوى خلايا ‎T‏ اللمفاوية بحلول اليوم 10-7. وقد واصلت كمية خلايا 4 الانخفاض؛ وتواصل كمية ‎WIA‏ 0003 الزيادة. ويحلول اليوم 20-14 بلغ مقياس عدد خلايا 1 المساعدة ما يصل إلى الطبيعي. ويحلول الشهر الثاني أو الثالث بعد زرع؛ كانت المعادلة المستمرة لمؤشرات المناعة الخلوية مترافقة مع تحقيق تعويض جيد للمرض. ولم تكشف فحوصات الحالة المناعية لدى المرضى ممن خضعوا لعمليات زرع متكررة لمزارع خلايا جزيرية ‎uh‏ حديثة الولادة أي علامات للاستجابة المناعية للزرع الخارجي. وكانت المؤشرات الكمية والوظيفية للمناعة قابلة للمقارنة مع المؤشرات الموجودة في الزرع الخارجي الأولي. الزرع الخارجي لمزارع ‎WIS‏ جزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة إلى مرضى لديهم سكري معتمد 0 على الإنسولين مشخص حديدًا. ‎Bale‏ ما يصبح مرضى السكري من النوع الأول ممن لديهم تاريخ من الأمراض يزبد على 5 سنوات استقبلين لمزارع ‎(OK‏ فهم يعوزوهم من الناحية العملية النشاط المنتج للإنسولين للجهاز الجزيري في البنكرياس لديهم؛ وفي أغلب الحالات تكون المضاعفات الثانوية للسكري متقدمة في مراحل مختلفة. 5 مع ذلك؛ تم تحقيق نتائج تبعث على الأمل أيضًا بعد الزرع داخل العضل لمزارع خلايا جزيرية لبنكرياس أرانب حديثة الولادة إلى مرضى لديهم سكري من النوع الأول مشخص ‎Las‏ ‏تمت ملاحظة 10 أشخاص شباب (متوسط العمر 02+18عامًا) مع متوسط تاريخ من السكري المشخص )0.246 شهرًا). وتمت ملاحظة نتائج إيجابية لضبط سكر الدم لدى جميع المرضى خلال 8-6 أشهر بعد الزرع الخارجي (سكر الدم أثناء الصيام 5.2+ 0.2 ‎(Ae‏ مول/لترء بعد 0 تناول الطعام-0.15+7.0 ‎Ale‏ مول/لترء البول السكري اليومي-0.03+0.25 جرام؛ ‎~HbAL‏ ‏8 ملي مول/لتر ). تم تقليل جرعة الإنسولين الخارجي اليومية من 0.11+0.62 إلى 8 00.2 وحدة بمعدل 1 كيلوجرام من وزن الجسم. وكان لدى 7 مرضى (أي 770 من الحالات) خلال فترة ما بعد الزرع تراجع جزئي لحالة السكري ولدى 2 من المستقبلين (أي 720 من الحالات) تراجع كامل لحالة السكري (محفز بواسطة "الفترة الذهبية" للزرع للسكري من النوع
— 9 8 — الأول)؛ والذي استمر لمدة 8-4 أشهر. وعند هذه النقطة؛ تمت معادلة المستويات التي كانت مرتفعة في مرحلة ما قبل الزرع من الجلوكاجونات وهرمون النمو في دم المستقبلين (قل تركيز الجلوكاجونات من 112.0 +2.1 إلى 1.2+69.7 نانوجرام/ ‎Me‏ لترء 0.05<0؛ هرمون النمو : من 0.0448.9 إلى 0.02+5.6 نانوجرام/ مللي لترء 0.05<0) دون سمة يومية للمعادلة المتتابعة لهرمون النمو. وزاد تركيز ببتيد © البشري في مصل المرضى من 0.01+0.3 إلى 026 تنانوجرام/ مللي لتر ؛ م<5؛ وهو ما يبرهن على الزيادة الكبيرة في إفراز الإنسولين الخاص لدى المستقبلين تحت تأثير الزرع الذي تم القيام به للخلايا الجزيرية الخارجية. وعند هذه النقطة؛ أبدى المرضى معادلة لمؤشرات المناعة الخلوية والخلطية؛ التي تحولت باثولوجيًا قبل الزرع (الجدول 40( 0 الجدول 40. مؤشرات الحالة المناعية لدى المرضى ممن لديهم ‎IDDM‏ مشخص حديثًا بعد الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية الأشهر ‎IgG IgM IgA | OKla| OK| OK | OKT4 | OKT3 | Tx‏ ‎BT| T8 : :‏ |, : : : ‎A A A‏ ملجم |ملجم ‎Taale|‏ ‎JA JA‏ رقم اص |80+ 2150 |£30 | £18 |2+14 |1250 |1221 | 2415008 المس فر 5* 73* 3 2* * 3** ** 2* تقبل
1 3+0 | 2+51 | 29+ ا|16+ |2+12 | 94212 1212 | 14£1472 * * 4 3 * (0)* % * ‎+30١ 436 2+66 3‏ |1[1+ ا3+8 1174 | 1+169 13937 4 3 2 0
— 0 9 — 6 | 2+48 | 26+ | 14+ |2+12 | 1217 | 1224 | 1241461 * * 3 3 * 3 9 % * الض | ‎yall‏ | 4468 | 5438 | 30+ ا10+ | 247 |£162 |8+151 | 124910 بط | ‎za‏ 4 21 16 3-خلايا ‎—OKT4 ¢T‏ خلايا 1 مساعدة؛ ‎~OKT8‏ كوابح آ؛ 487ا0- خلايا ‎B‏ ‏اللمفاوية ‎—OKla‏ مضاد ‎—Ig tHLA-DR‏ الجلويينات المناعية؛ م0.05<*0؛ م **>0.001 - مقارنة بالضبط ويعد ملاحظات التغييرات العامة بعد الزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية إلى ‎(a‏ السكري من النوع الأول : - حدث استقرار في مساار الصور المتقلقلة للمرض » وهو ما نتج عن ‎f‏ لاختيار الناجح للعلاج الكافي بالإنسولين؛ والزيادة الكبيرة في درجة التعويض عن استقلاب الكريوهيدرات المعطوب؛ - نقص في الحاجة إلى إنسولين خارجي بنسبة 730-20 في 3/2 من المستقبلين؛ 0 - تقدم في المضاعفات السكرية الأخيرة يعلق الاعتلال العصبي؛ اعتلال الكلية؛ اعتلال الشبكية)؛ النكوص في المراحل الأولية لدى ما يزيد على 780 من الحالات. من المنطقي تقديم شروح فيما يخص الآليات الممكنة للأثر المضاد للسكري لزرع لمزارع خلايا جزيرية للأرانب حديثة الولادة. وعلى الرغم من التأقلم الواسع داخل ممارسة تعليم مرضى السكري من النوع الأول مع منهجية التحكم الذاتي لسكر الدم وآلية اختيار جرعات كافية للإنسولين المزمع 5 إعطاوؤه؛ تم ملاحظة مجموعة واسعة من الأمراض لدى بعض المرضى. وغالبًا ما يتم تبديل الظهور المضطرد الانسيابي (أي يحدث دون أي أسباب ظاهرة)لأحوال انخفاض سكر الدم بنشأة فرط كيتون الدم؛ ولا تفضي جميع المحاولات للوصول إلى تعويض أيضي لدى أولتئك المرضى إلا في تخفيف قصير الأجل. مع ذلك؛ في خلال 3-2 أشهر بعد الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية؛ لدى جميع الحالات من الناحية العملية يكتسب مسار السكري المتقلقل سمة أكثر قابلية
للتحكم فيها وإدارتها. في الوقت ذاته؛ يحدث ‎Bale‏ إحداث استقرار في مؤشرات لاستقلاب الكريوهيدرات واستئصال للقابلية لحدوث فرط كيتون الدم. على ما يبدوء يكون إحداث استقرار في الصور غير المستقرة للسكري وتحقيق تعويض لاستقلاب الكربوهيدرات؛ ‎Nol‏ بواسطة إفراز الإنسولين بواسطة خلايا البيتا المزروعة. خلال ‎id‏ ما بعد الزرع؛ تضمن الجرعة التي يتم إعطاؤها من الإنسولين الخارجي ‎Bale)‏ مقللة مقارنة بمستوى ما قبل
الزرع)؛ إلى حد ما تحقيق المتطلب الرئيسي في هذا الهرمون. وبالتالي؛ يذهب الإنسولين الذي تم إفرازه بواسطة خلايا البيتا المزروعة إلى دم المستقبل وعلى نحو أكثر احتمالية بما يتصل مع تقلبات مستوى سكر الدم؛ وبذلك يتم تسهيل مسار أكثر استقرارًا للمرض. ولأن التركيز البارز للببتيد © البشري يقع بعد 2-1 شهر من الزرع الخارجي لدى جزءِ من المستقبلين مع نقص علامات
0 تشغيل ‎dl WA‏ الخاصة (ببتيد ©- السلبية)؛ يمكننا أن نفترض أن الجهاز الجزيري للمريض الذي تم استرداده بصورة جزئية يندرج في عملية تنظيم استقلاب الكريوهيدرات. وسبب ذلك؛ لدى مرضى مما يعانون من مسار متقطع سابق للسكري تصبح حالة اتجاه نقص السكر في الدم أقل ظهورًا؛ وعلى نحو أكثر اضطرادًا- تختفي تمامًا بسبب أن الخلايا البيتا المزروعة أو المسترد تتوقف عن إفراز الإنسولين في المواقف التي يقترب فيها سكر الدم من المستوى الطبيعي. ويظهر
5 أن إحداث استقرار في مستوى سكر الدم بعد زرع لمزارع خلايا جزيرية يكون مشروطًا باسترداد؛ إلى حد ماء آلية التغذية الراجعة بين مستوى سكر الدم وإفراز الإنسولين» وهي تغذية راجعة كانت غائبة لدى المرضى ممن يعانون من السكري من النوع الأول بسبب موت الخلايا الذي تسببه عملية مناعية ذاتية في الجزر للبنكرياس. كما أنه من الممكن أيضًاء أنه يمكن إرجاع شيء من الدور في إحداث استقرار في ‎IDDM‏ وفي
0 تقليل متطلبات المستقبل من الإنسولين خارجي إلى تكييف امستقبلات الإنسولين في الأنسجة الطرفية بعد زرع الخلايا الجزيرية للمزرعة. وحيث إنه لم يكن ثمة تقليل بارز لمتطلبات الإنسولين الخارجي بنسبة معتبرة لدى المستقبلين ممن شهدوا أثر إيجابيًا لزرع للخلايا الجزيرية على الاعتلال الوعائي السكري» يبدو أنه تقليل جرعة الإنسولين التي تم إعطاؤها لا يمكن اعتباره علامة أساسية وتحديدًا علامة وحيدة لفاعلية زرع
5 العلاج. لو وضعنا هدقًا لتحقيق استقلالاً كاملاً عن الإنسولين كنهاية في حد ذاتهاء يمكن أن تكون
— 2 9 — هذه المنهجية مفعمة بمخاطر تطوير مواقف عيادية خطرة على مريض. وكما يبدو من تجريتناء يمكن أن يحفز الإعطاء أحادي المرحلة الزائد بصورة بارزة من أقسام مزارع خلايا جزيرية الأجنبية التي تتكون على نحو عملي فقط من خلايا بيتاء تطور ‎dlls‏ نقص شديد في سكر الدم؛ ولكن حالات الزرع المضطردة (كل 1.5-1 ‎(Led‏ لأجزاء ‎"dle‏ داخل الكبد (عبر قسطرة دائمة إلى الوريد البابي)؛ في النهاية؛ يمكن أن تؤدي إلى جرعة زائدة يصعب التكهن بها من كمية خلايا البيتا المزروعة. ‎(Sas‏ أن يؤدي غياب الإنتاج الكافي للإنسولين بواسطة خلايا البيتا الخاصة الذي يحدث؛ على نحو مرجح؛ بسبب قدرته على إفراز الإنسولين بناءً على ‎Tine‏ صارم من التغذية الراجعة؛ إلى نشأة حالات انخفاض حادة في سكر الدم؛ حتى فور سحب حقن الإنسولين. نتيجةً لذلك» يؤدي هزال 0 المخزونات الجليكونية لدى المستقبلين وتكوين الجلوكوز عن طريق التكوين الجديد للجلوكوز إلى تراكم الأجسام الكيتونية والأحماض الكيتونية. ويتم اعتبار بقاء وتراجع المضاعفات السكرية الأخيرة باعتبارها ذات مغزى عملي ‎Sl‏ ذات أهمية إنذارية؛ وأكثر قابلية للتحقيق لنتائج لزرع لمزارع الخلايا الجزيرية. ومن الامور ذات الأهمية الخاصة أثر الزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية على ما هو مخصص 5 لعجز السكري في الأوعية- الاعتلال الوعائي إذ يمكن أن تكون السبب الرئيسي لفقدان البصر (اعتلال الشبكية السكري). أثر زرع الخلايا الجزيرية على مضاعفات السكري المتأخرة. من المعروف أن تشكيل الاعتلال الوعائي السكري ممكن جدًَا حتى في حالات التعويض المثالي لاستقلاب الكريوهيدرات (سكر الدم الاعتيادي؛ البول السكري؛ التركيز الطبيعي للهوموجلوبين 0 المعالج بالجليكوزيل ) يتم تحقيقه بمساعدة العلاج المكثف بالإنسولين. في الوقت ذاته؛ بعد زرع مزارع الخلايا الجزيرية»؛ وعلى الرغم من الاحتفاظ بتركيز مرتفع من الهوموجلوبين المعالج بالجليكوزيل في دم عدد ملحوظ من المرضى؛ في أغلب الحالات شهدنا إبطاء تقدم وتراجع جزئي لمضاعفات السكري المتأخرة. ولهذا السبب لا يمكن تفسير الأثر الإيجابي لزرع الخلايا الجزيرية؛ أي عن طريق تحسين مؤشرات لاستقلاب الكربوهيدرات.
لدى مرضى ممن يعانون من مضاعفات السكري المعتمد على الإنسولين بواسطة اعتلال الشبكية تكون تغيرات الشدة على قاع العين متزايدة مع تناقص إفراز الإنسولين بواسطة بنكرياس المريض. وقد تم الحكم على إفراز الإنسولين الداخلي؛ بالقطع؛ على تركيد ببتيد ‎C‏ الذي تم إفرازه داخل دم المريض بصورة متعادلة موليًا مع كميات الإنسولين. وقد أشرنا إلى أن تقدم اعتلال الشبكية كان
محكومًا ليس فقط بتقليل إفراز الإنسولين؛ ولكن ‎Load‏ بانخفاض تركيز ببتيد ©. وبعد الزرع الداخلي أو الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية لدى مستقبل بعاني من الاعتماد على الإنسولين الناشئ عن موت خلايا البيتا الخاصة للبنكرياس الخاص به؛ بدأت خلايا البيتا المزروعة في إطلاق ببتيد © داخل دم المريض (بالقطع؛ بصورة متصلة مع الإنسولين) الذي حرم منه على مدى أعوام متعددة؛ عندماء تم حقنه فيما يسمى بالطب البديل بمستحضرات الإنسولين فقط. بالإضافة
0 إلى ذلك؛ لدى أغلبية المرضى في فترة ما بعد الزرع يحدث إعادة تجديد جزئي لمجموعة خلايا البيتا الخاصة للمستقبل(.(6) 1994 ‎«Ally "5 (Skaletskyy N.N., and others,‏ بصورة طبيعية؛ ‎Tas‏ إفراز الإنسولين ويبتيد ©. نتيجة لذلك؛ يتم تصحيح العجز الذي يستمر لسنين في ببتيد © في الجسم؛ وأن العجز يمكن أن يكون مسؤولاً عن نشأة العجز النوعي المتأخر في الأوعية والأعصاب.
5 ويكون افتراض دور فسيولوجي للببتيد © مختلقًا مع الرأي المقبول على نطاق واسع الذي يفيد ‎Ob‏ ‏الدور الرئيسي للببتيد © يكون هيكيلاً بصورة صرفة؛ وموصل؛ ويظهر في تسهيل طي جزئيات طليعة الإنسولين بحيث يريط الداي سلفيد بين بقايا حمض الأمين للسلسلتين ‎A‏ و8 لجزيئات الإنسولين المشكلة؛ وأن ببتيد كليس له أي إمكانية بيولوجية؛ وبذلك يكون جزيئ موازن في سياق فسيولوجي.
0 وبدعم فرضيتنا الباحثون السوبديون )]15{ 1991 ‎et al.,‏ ل ‎.(Wahren‏ فقد أظهروا ان ببتيد © يحول الأثر التحفيزي على استخدام الجلوكوز بواسطة كائن مريض بالسكري المعتمد على الإنسولين» على الرغم من أنه تثبيط الأثر على إنتاج الجلوكوز بواسطة الكبد غير مستثنى. ‎Garang‏ الإعطاء المطول )4 أسابيع) إعطاء لببتيد © إلى مرضى السكري من النوع الأول تحكم أفضل في سكر الدم (يتم التقرير من تركيز الجلوكوز في الدم الصائم وعلى محتوى الهوموجلوبين
5 المعالج بالجليكوزيل مقارنة بمرضى المعالجين بالإنسولين فقط. ومن الأهمية بمكان البيانات التي
تظهر أن إعطاء ببتيد © بشري له أثر إيجابي على المضاعفات المتأخرة للسكري المعتمد على الإنسولين. ‎cling‏ يشهد المرضى ممن يعانون اعتلال الكلية السكري تحسدًا في وظائف الكلى الخاصة ‎ogy‏ ويظهر هذا التحسن في تقليل إفراز الألبومين وتقليل الترشيح الكبيبي؛ لدى المرضى ممن يعانون اعتلال الشبكية السكري تتحرك نفاذية الحاجز الدموي الشبكي إلى الأعلى؛ لدى
مرضى ممن يعانون الاعتلال العصبي المستقل فقد شهدوا إبطاءً للمعدل القلبي في الشهيق والزفير. بالإضافة إلى ذلك؛ تحت تأثير إعطاء ببتيد ©؛ يتحسن تدفق الدم في العضلات الهيكلية العاملة لدى مرضى السكري. وتكون آلية هذا الأثر الواقي من الناحية العصبية والوعائية لببتيد © غير واضح. وحيث إن الأثر الفسيولوجي للببتيد © يتم تحقيق من خلال تعزيز وظيفة غشاء الخلية؛ بعد ذلك؛ على ما يبدو؛ يتعلق بتنشيط ‎(aaa) Na+K+H—ATF‏ الأدينوسين تراي
0 فوسفوريك )- المتصل بأغشية خلايا مختلفة. في الختام» تجدر الإشارة إلى أن الخلايا الجزيرية المزروعة في السكري من النوع الأول طريقة بالغة الأهمية؛ ولكنها مساعدة لعلاج السكري من النوع الأول. وينبغي تكميل العلاج المضاد للسكري. ويمكن أن تكون التوليفة الصحيحة من النظام الغذائي المعقول؛ والنشاط البدني المتدرج؛ والعلاج المقلل للسكر الملائم أمرًا ضروريًا للنجاح. ويكون زرع الأعضاء للبنكرياس أو توفير طعم
5 بخلايا جزيرية مستخرجة من البنكرياس» أمرًا مبررًا بصورة كاملة لتوفير المساعدة الطبية إلى المرضى الذي يعانون اعتلال الكلية السكري في مرحلته النهائية حيث توجد حاجة لزرع كلية جليبة النشأة. في المراحل الأولى من اعتلال الكلية؛ وأيضًا في حالات اعتلال الكلية السكري؛ اعتلال الشبكية (باستثناء مراحله المتأخرة)؛ يعد استخدام الزرع الخارجي لخلايا جزيرية مزروعة متولدة من ‎ub Sy‏ أرانب حديثة الولادة ‎Fel‏ شديد الفاعلية.
0 ويمكن أن يؤثر الاستخدام المضبوط للخلايا الجزيرية المزروعة في علاج مركب (متكامل) للسكري من النوع الأول بصورة جوهرية على التكهن بمآلات الأمراض الخطيرة. ويمكن أن تحيل الوقاية من وإبطاء المضاعفات الثانوية للسكري الذي يتم تحقيقه؛ بمساعدة الزرع المتكرر المنتظم؛ ليس فقط الأثر الطبي الذي له أصداء اقتصادية واجتماعية بالوقاية من أو اقتلاع الإعاقة لدى مرضى السكري وزبادة متوسط العمر وطول أمد حياتهم.
وقد تم استخدام الطريقة الكلاسيكية لتولين الخلايا على ‎Mallori‏ وبواسطة ألدهيد فوكسين للكشف عن خلايا بيتا. ولتحقيق كشف أكثر دقة عن الخلايا التي تحتوي على إنسولين (خلايا بيتا) نستخدم ‎Ga‏ طريقة مفلورة ‎Geli‏ للتحليل المورفولوجي. ويذكر أدناه وصف المكونات الأساسية والأطوار فيما يخص هذه الطريقة. التلوين الهيستوكيميائي المناعي لمزارع الخلايا الجزيرية من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة .
فيما يخص تحديد خلايا البيتا نستخدم المزارع التي يتم تسلمها خلال احتضان الشظايا الميكروية البنكرياسية في أطباق بتري استنباتية بلاستيكية ‎.(Corning—Costar)‏ ويتم غسل ‎Glee‏ الخلايا المستنبتة والتجميعات الخلوية ثلاث مرات في وسط نمو بمساعدة محلول دافئ من الفوسفات المنظم (085). بعد ذلك؛ يتم تثبيت المزارع باستخدام 70.5 من محلول الفورمالين خلال 20
0 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك؛ يتم حقن المزارع باستخدام محلول ‎PBS‏ مع إضافة مصل جنيني (بقرة) حتى يصل التركيز إلى 71 ويتم احتضانه خلال 60 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة لمنع الامتزاز غير النوعي للأجسام المضادة. ويعد الغسل لثلاثة مرات باستخدام محلول ‎PBS‏ ‏أجسام مضادة فأرية أحادية النسيلة للإنسولين ‎(Sigma)‏ تمت تصفيتها تتابعيًا بواسطة محلول 5 مع 75 من المصل البقري الجنيني» على مزارع. وبعد ذلك تم احتضان أطباق بتري مع
5 مزارع مدروسة لمدة 120 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك؛ تم الغسل 3 مرات في محلول 5 والأجسام المضادة الثانية على المزارع (الأجسام المضادة للفئران المرمزة ب ‎«(FITC‏ مع الإبقاء على العرض لمدة 45 دقيقة. وبعد ذلك؛ تم غسل المزارع ثلاث مرات في ‎PBS‏ بعد ذلك؛ تم وضع 760 من محلول الجلسرين 5 ‎PBS‏ على ‎glial)‏ وتم وضعه تحت زجاج غطاء. يتم فحص المستحضرات الجاهزة باستخدام ميكروسكوب مفلور ويتم تصوريها باستخدام كاميرا رقمية.
0 وتظهر السلاسل التي يتم أداؤها من التحليل الكيميائي المناعي الهستولوجي للخلايا الجزيرية المستنبة من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة أن حصة الخلايا التي تحتوي على إنسولين في المزارع تضم من 778 إلى 790 (متوسط -782.2). تم حساب النسبة عن طريقة عد الخلايا في تحليلها في التباين الطوري وبعد ذلك فور تحليل مقارن في ميكروسكوب متألق.بالإضافة إلى الخلايا الجزيرية؛ وجدت أرومة ليفية مفردة في المزرعة ولكن حصتهاء لا تتجاوز ‎sale‏ 75-1. عادة ما
5 تتكون ‎DAN‏ التي لها أصل ظهائري خلايا متبقية في المزرعة وتصنع 717-5 وهي حقيقة يؤكدها
التلوين المناعي الهيستولوجي الكيميائي (مع وجود أجسام مضادة أحادية الأنسجة ضد بروتين سيتوكيرياتين 18)؛ ولكنها ليست ‎lin LIA‏ إذ لا تكشف الصيغ الخلوية تلك عن وجود إنسولين. على نحو محتمل» ما هي إلا أنواع أخرى للخلايا الجزيرية التي ينبغي اعتبار وجودها في المزرعة فسيولوجيًا بدرجة كبيرة حيث تعد (خلايا ألفاء خلايا دلتاء خليا جاما) محيطات طبيعية لخلايا بيتاء التي تضم في الظروف الطبيعية؛ إلى حد ‎cle‏ هيكل موروفوفسيولوجي مستقل - جزر لانجرهانس. بالإضافة إلى دراسة التركيبة الخلوية للمزرعة؛ حددنا الكمية الإجمالية للخلايا فيها. وعن طريق العد المنهجي فيما يزيد على 20 مزرعة؛ والذي تم إجراؤه في وقت التحليل تحت ميكروسكوب ثلاثي العدسات العينية ‎(Japan (Nikon)‏ نجحنا في تحديد أن المزرعة التي تم تلقيها من بين 0 بنكرياس أرانب يبلغ عمرها 2-1 يومًا تحتوي على من 451600 إلى 568900 خلايا 0 جزيرية (متوسط- 500,521). وتمثل جرعة واحدة لمزرعة ‎LAY‏ الجزيرية اندماجًا ل 4 مزارع ‎WA‏ جزيرية يتم استلامها من 80 بنكرياس أرانب تبلغ من العمر 2-1 يومًا. ولا تقل كمية الخلايا الجزيرية التي تحتويها تلك الجرعة؛ في المتوسط عن 000,000,2؛ على الأقل 780 منها عبارة عن خلايا بيتا. ولا تعد ‎ep lial)‏ التي يتم إنتاجها من خلال الطريقة الموصوفة أعلاه مستحضرًا خلويًا له خصائص 5 كمية محددة بدقة؛ مثل النسبة الدقيقة لخلايا البيتا في كل مزرعة. ولا يعد هذا مستحضرًا ‎dais‏ ‏للتخليق الكيميائي المنظم بصرامة أو إعدادات المعالجة الجينية. ويمثل المستحضر الخلوي المستخدم للزرع» صهارة من مزارع الخلايا الجزيرية يتم إنباتها على نحو متواز؛ ‎(Ally‏ تكون؛ بصورة طبيعية متمايزة عن بعضها البعض إلى درجة ما. ويظهر تحليل ركيبة الخلية التالية؛ بصورة أساسية الذي ينقل فكرة مشاركة خلايا البيتا في المزرعة أنها تصنع؛ على سبيل المثال؛ 0 حوالي 794-80 في حين يكون تنوع تلك الخلايا من؛ على سبيل ‎«Jal‏ حوالي 777 إلى 785. وللتحضير البيولوجي يكون هذا التغير في الرقم؛ في رأيناء غير ذي بال. وفور زيادة كمية المزارع المستخدمة ل 1 زرع يمكن تقليل هذا الاختلاف. وعلى الفور قبل زرع عيادي مخطط له(النقل) لمزرعة خلايا جزيرية؛ ثمة اختيارللمزارع مع التركيز على طول الاستنبات؛ نتائج الملاحظة الميكروسكوبية؛ وتحليل التعبير للتعقيم والتنوع. ويتم إجراء 5 تجميع المزارع للزرع في ظروف صندوق صفائحي ‎lay‏ يضمن توفير هواء معقم يدور بثبات. ويتم
تجميع المزارع المختارة -بمعدل 4 المزارع لجرعة خلايا مزروعة واحدة بمساعدة كاشط خلوي خاص ‎.(Corning-Costar (Cell scraper)‏ ويتم طرد المعلق الخلوي المجمع ‎Bie‏ في أنابيب اختبار بلاستيكية خاصة تبلغ سعتها 50 مللي لتر (800 دورة للدقيقة لمدة 10 دقائق). بعد ذلك يتم نقل الترسب الخلوي إلى أنبوب اختبار بلاستيكي معقم تبلغ سعته 15مم وبتم تعليقه في محلول هانكس ملحي. وبعد ذلك يوضع أنبوب الاختبار المرقم الذي يحتوي على مستحضر خلوي في أنبوب اختبار تبلغ سعته 50 مللي لتر ويتم إغلاقه بإحكام بغطاء يثبته باستخدام غشاء ‎.(Parafilm) als‏ وفي حين تم وصف الاختراع تفصيلاً وبالإشارة إلى الأمثلة المحددة ‎cal‏ سيكون جليًا للمتمرسين في المجال أن العديد من التغييرات والتعديلات يمكن أن يتم إدخالها فيه دون الإخلال بروح الاختراع 0 ومجاله. المثال 15 أثر لزرع لمزارع ‎WIA‏ جزيرية على مسار السكري التجريبي لدى الفأران؛ التي خضعت نظام غذائي بمحتوى بروتين متعدد؛ وحالة الخلايا الجزيرية البنكرياسية في حيوانات تجريبية تم إجراء التجارب على فتئران ذكور من سلالة وستار لها كتلة جسم أولية تبلغ 120-100 جرام. 5 وبعد فترة تكيف قصيرة من المكوث في وسط مربى أحيائي؛ وتم إعطاء 60 من الحيوانات التي لها كتلة جسم تبلغ ما لا يقل عن 160 جرام تحت الجلد أوكسان بجرعة تبلغ 200 ملجم/كلجم ولأغراض استحثاث السكري. وبعد ذلك؛ تم تقسيم الفئران إلى ثلاث مجموعات متساوية (20 حيوان لكل مجموعة) وتم نقلها إلى حصة تخليقية منخفض السعرات لها محتوى بروتين عادي (718 - المجموعة 1)؛ متخفضة (9 7 -المجموعة 2)؛ ومرتفعة (750 = المجموعة 3) (بروتين صويا 0 معزول ‎M‏ *08). وعند هذه النقطة؛ تم تأمين محتوي حصة طعام متساوي السعرات لمجموعة الفئران الثانية عن طريق زيادة حصة الدهون والإبقاء على حصة الكريوهيدرات. وخلال أسبوعين بعد إعطاء ألوكسان ‎Tag‏ إعطاء النظام الغذائي؛ تم إعطاء 24 من الحيوانات التي أظهرت حالة سكرية حادة وثابتة ( أظهرت أغلبية الحيوانات سكر الدم يبلغ أكثر من 20مللي مول/لتر ) الزرع الخارجي ل ‎CC‏ من مزارع بنكرباس الأرانب حديثة الولادة. وأصبح 8 فئران من
كل مجموعة مستقبلين للزرع الخارجي. وتم حقن معلق ‎CC‏ المستنبت في محلول هانكس داخل لب طحال حيوانات بواسطة محقنة عبر إبرة حقن. وخلال أسبوعين بعد الزرع الخارجي داخل النخاع ‎og fall‏ تمت ملاحظة انخفاض شيد التأكيد (0.05<0) في ‎Su‏ الدم لدى مجموعات الفئران المستقبلة الثلاثة جميعها؛ ولكن بدا أنه يتم التعبير عنه بصورة أقل في المجموعة الثانية من الحيوانات (20.4 2.4 إلى 15.0 3.1 مللي مول/لتر )؛ و يتم التعبير عنها بأقصى درجة لدى
حيوانات المجموعة الثالثة(من 20.3 3.5 إلى 12.0 2.6 مللي مول/لتر ). في الوقت ذاته؛ في مجموعات الضبط للحيوانات الموضوعة لتلقي نظام له محتوى بروتين متعدد ولكن لم يتم ‎Lge liad)‏ للزرع الخارجي لمزارع ‎(CC‏ لم يتغير مستوى الجلوكوز بصورة بارزة خلال المسار الكامل لهذه الملاحظة؛ باستثناء الفئران التي بقيت تتلقى حصة تبلغ 750 من البروتين (حدث
0 انخفاض سلس في سكر الدم من 19.8 1.9 إلى 17.1 1.9 مللي مول/لتر ). وفور الفحص الهستولوجي للطحال الذي يحتوي على مزارع ‎CC‏ مستنبتة؛ كنا قادرين على الكشف عن ‎CC‏ غير تالف في المجموعة الأولى لدى 6 من بين 8 حيوانات» في المجموعة الثانية - في 3 من بين 8 حيوانات؛ وفي المجموعة الثالثة - في جميع الحيوانات. ولم يكن حتى ثمة حدوث واحد لعلامات ارتشاح الخلايا اللمفاوية للخلايا المزروعة. وعلى ما يبدوء يؤثر هذا النظام الغذائي الذي يحتوي
5 على محتوى ‎dle‏ من البروتين على نحو مفضل في مسار السكري التجرببي لدى الفأران؛ وبعد الزرع الخارجي لمزارع ‎«CC‏ تضمن حصة تبلغ 750 من البروتين أثر خافض للسكر أكثر وضوحًا وديمومة للخلايا المزروعة لدى الفئران المستقبلة. وفي نفس سلسلة التجارب» تمت دراسة حالة مورفولوجية للخلايا الجزيرية البنكرياسية لدى الفئران المستقبلة ولدى حيوانات الضبط.
0 ويمكن استخدام الطريقة المعروضة أيضًا على ثدييات ‎gal‏ لعلاج السكري. تم فحص بنكرياس 8 من ‎hall‏ المستقبلة التي خضعت لزرع خارجي ناجح لمزارع ‎CC‏ لبنكرياس ‎ill‏ حديثة الولادة؛ هيستولوجيًا بعد 4أسابيع من الزرع. ولذلك الغرض؛ تم تثبيت أجزاء من الأعضاء في خليط ‎Bueno‏ وتصريفها في شمع. تم تلوين الشرائح التي يبلغ طولها ‎Mkm7-5‏ ‏بهيماتوكسيلين ‎«ously‏ وأيضًا باستخدام ‎Aldehyde—Fuxin‏ للكشف عن ‎WIA‏ البيتا. في الوقت
‎cal‏ تم فحص بنكرياس لحيوانات ‎die‏ الضبط البالغ عددها 6 والتي لديها سكري محفز بواسطة الألوكسان غير معالج؛ وكذلك 6 ‎(i‏ صحيحة لم تتلقى ألوكسان. وعند دراسة بنكرياس لفئران صحيحة وسليمة؛ كما هو متوقع؛ كانت هناك في خلايا لانجرجانت الجزيرية 45 إلى 776 من خلايا البيتا. ولدى ‎hall‏ التي تعاني من سكري محفز بواسطة ألوكسان غير معالج؛ يقل محتوى خلايا البيتا في الخلايا الجزيرية المحفوظة بصورة كبيرة؛ بيد ان
مستوى الانخفاض؛ على نحو محتمل؛ اعتمد على محتوى البروتين في حصة الحيوانات. ‎lig‏ ‏إذا كان لدى الحيوانات غير المعالجة في المجموعتين الأولى والثانية؛ كانت حصة خلايا البيتا في جزيرة؛ على الترتيب» 6.2 1.7 و 8.3 721.1؛ ولكن في المجموعة الثانية تم الكشف عن خلايا جزيرية لها على الأقل خلايا بيتا مبعثزة فقط في 2 من بين 6 فأران. وقد تمت ملاحظة محتوى
0 خلايا البيتا أعلى بكثير في الخلايا الجزيرية لدى الفئران المستقبلة. وبذلك؛ في 4 من بين 8 حيوانات للمجموعة الأولى التي خضعت الزرع الخارجي داخل النخاع لمزارع ‎«CC‏ وجد في البنكرياس الخاص بها خلايا البيتا الاعتيادية؛ ويلغت حصتها بين خلايا جزيرية من 7 إلى 21 7# (في المتوسط 13.0 72.1). في ‎Gall Coat‏ المستقبلة للمجموعة الثانية؛ وجد في البنكرياس خلايا جزيرية لها محتوى خلايا بيتا يبلغ 7 إلى 717 (في المتوسط 12.2 71.4)؛ فيما يشابه
5 تقريبًا الخلايا الجزيرية للبنكرياس لدى حيوانات المجموعة الأولى. وبين الفئران المستقبلة للمجموعة الثالثة. كانت الخلايا الجزيرية التي لها خلايا بيتا طبيعية تبلغ ‎drills‏ من 10 إلى 755 (في المتوسط 23.5 78.8). ‎leg‏ ذلك؛ تم الكشف عن التجمع الاكبر لخلايا البيتاء التي تم استردادها تحت تأثير الزرع الخارجي لمزارع ‎CC‏ للأرانب حديثة ‎ssl‏ في بنكرياس الفئران المستقبلة التي تلقت حصة بها محتوى بروتين زائد.
0 وفيما يتصل بالتجارب المكتملة؛ من الممكن التقرير أن الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي لمزارع ‎WIS‏ جزيرية على مسار السكري ‎nail)‏ لدى ‎ol‏ يتم نقله إلى أثر بطريقين: أ) تشغيل خلايا البيتا المزروعة؛ المتأكدة بالإضافة إلى أثر خفض السكر الذي تم التعبير عنه ‎Wall‏ ‏المزروعة؛ عن طريق إيجاد مجموعات من ‎WIAD‏ الجزيرية المزروعة في لب الطحال للحيوانات المستقبلة؛ ب) الأثر التحفيزي لزرع للخلايا الجزيرية المزرعة لدى جهاز الجزيرة للبنكرياس الفئران
5 المستقبلة؛ وتشهد بيانات الفحص الهستولوجي ترددًا أعلى بكثير لتحديد موقع خلايا جزيرية بخلايا
بيتا طبيعية وحصة أكبر في ‎WAY‏ الجزيرية للبنكرياس للفئران المستقبلة مما هي عليه لدى ‎Ol‏ ‏تعاني من سكري غير معالج محفز بواسطة ألوكسان. المثال 16 إظهار الأثر الوقائي الوعائي لزرع مزارع خلايا جزيرية على عينة من اعتلال الكلية السكري التجريبي
كان الهدف من البحث التجريبي المكتمل هو دراسة أثر للزرع الخارجي ‎BCCI‏ البنكرياس على مسار اعتلال الكلية السكري. بمساعدة حقن داخل البطن للستربتوزوتوسين ‎Gas)‏ بجرعة 10 ملجم/كجم على ‎Jae‏ الأسبوع)جرى التسبب في أن تعاني سلالة ويستار من الفئران من السكري. وخلال 3-2 أشهر بعد ظهور لحالة
0 السكري؛ تم اختيار 24 ‎Glos‏ لديهم بول زلالي ميكروي واضح؛ وتم تقسيمهم إلى 3 مجموعات. وقد تم أداء لفئران المجموعة الأولى (8 حيوانات) زرع داخل البطن لمزارع ‎CC‏ التي يتم تلقيها من بنكرياس ‎cul)‏ حديثة الولادة باستخدام طريقة أصلية. تم إعطاء كل مستقبل 50000-300000 من ‎LCC‏ وتمت معالجة ثمانية حيوانات من المجموعة الثانية باستخدام العلاج بالإنسولين في صورة جرعات مناسبة لمستوى سكر الدم الخاص بها. وقد تألفت المجموعة الثالثة من 8 ‎Ob‏
5 تعاني من سكري تجريبي غير معالج. وقد تم قياس سكر الدم كل أسبوع؛ وكذلك البول الزلالي الميكروي. النتائج: كان لدى 7 من بين 8 فتئران للمجموعة الأولى في 2-1أسابيع بعد زرع مزارع ‎CC‏ نقص في مستويات السكر في الدم لديهم وصلت إلى حد الطبيعي أو شبه الطبيعى وظلت كذلك حتى نهاية مدة الملاحظة(12أسابيع ). وعند هذه النقطة؛ وقد تمت ملاحظة نقص بارز في إفراز
0 الألبومينات مع البول؛ بما يصل إلى مستوى شبه الطبيعي لدى 4 مستقبل. في الوقت ذاته؛ كان لدى جميع حيوانات المجموعة الثانية التى خضعت للعلاج با لإنسولين 6 زيادة ثابتة فى تركيز الألبومين في البول. ولدى ‎of‏ مجموعة الضبط (التي لم تتلقى علاج للسكري) استمر مستوى مرتفع لسكر الدم خلال فترة التجربة بأكملها؛ وزاد البول الزلالي الميكروي بما يصل إلى مستوى
البول البروتيني المرتفع. بالإضافة إلى ذلك» كان لدى 3 حيوانات من مجموعة الضبط مياه بيضاء سكرية لم يتم الكشف عنها لدى حيوانات المجموعتين الأولى والثانية. وعلى أساس النتائج التي تم الحصول عليهاء انتهينا إلى أن الزرع الخارجي لمزارع ‎CC‏ يوفر ‎Gl‏ ‎Ladle‏ على مسار اعتلال الكلية السكري التجريبي؛ والذي يرتبطء كما هو ‎dane‏ بأثر ‎Ses‏ ‏5 وقائي لببتيد © الذي يتم إفرازه بواسطة ‎CC‏ المزروع.
وتجدر الملاحظة أن الأثر المضاد للسكري والمطول لمزارع ‎CC‏ المزروع من أجنة بشرية؛ وأيضًا أجنة حيوانية وحيوانات حديثة الولادة؛ قد تم تحقيقه دون استخدام العزل المناعي للخلايا المزروعة؛ ودون استخدام علاج كابح للمناعة. وقد ثبت على نحو كافٍ أن بقاء ‎CC‏ في الكائنات الخاصة بالحيوانات المستقبلة الأجنبية قد تم توفيرها بواسطة الاستنبات طويل الأجل للنسيج البنكرياسي
0 للمانح. وتم خلق ظروف الاحتضان تلك (درجة الحرارة ونظام الغاز للاستنبات؛ الصيغة الخاصة لوسط الاستنبات)؛ والموت وإزالة نسيج البنكرباس العدائي مناعيًا خارجي الإفراز للبنكرياس؛ وأيضًا للعناصر الخلوية (البطانة؛ وما يسمى بخلايا الدم البيضاء الناقلة) القادرة على ابتداء رفض للخلايا الأجنبية. والأكثر أهمية هو نقص البطانة الوعائية الأجنبية في الخلية المزروعة. وباعتبارها كربوهيدرات تعد الهياكل التي يتم التعبير عنها على الأخيرة؛ الهدف الأساسي للأجسام المضادة
السابقة أو الطبيعية المسؤولة عن بدا الرفض الحادة الفائق للزرع الخارجي. ولأغراض دراسة توليد مناعة للخلايا تضم المزارع التي تم الحصول عليها من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة؛ في مختبر ‎Transplantation Immunology‏ الموجود في ‎Scientific )N.I.I.‏ ‎Abramov ) of Transplantology and Artificial Organs (Research Institute‏ ‎(.Bogdanova N.B «.V.U‏ كانت ثمة تجارب تم إجرائها لتحديد تثبيت ‎CC‏ للجلويين المناعي
0 لمصل الدم البشري. وقد تم صبغ ‎(DAY‏ التي تم احتضانها مع مصل مختلف للدم البشري؛ باستخدام أجسام مضادة أحادية النسيلة مضاد للجلويين المناعي البشري؛ وتم تحليلها عند مقياس الخلايا الذي يعمل بالعملات. وكما بداء تكون الخلايا التي تضم المزرعة قادرة على تثبيت جلويين ‎Mol‏ على سطحهاء؛ ولكن عند تلك النقطة لم نجد أي تثبيت جلويين مناعي 6. على نحو ‎«Jaina‏ لا يكون للتثبيت بواسطة خلايا جزيرية مستنبتة للجلويين مناعي ‎M‏ أي مغزى مناعي
مرضي؛ ‎Cus‏ لم تؤدي المدد المحددة لاحتضان الخلايا مع مصل وتركيزات مختلفة من المكملات البشرية إلى تحللات مرتفعة (مقارنة بعينة الضبط) للخلايا الجزيرية . ويرسي البحث التجريبي الناجح أسسًا لتنفيذ زرع عيادي لمزارع ‎CC‏ لبنكرياس الاجنة وحديثي الولادة إلى مرضى يعانون من السكري من النوع الأول. منذ 1999؛ يكون المصدر الأساسي للمزارع هو بنكرياس أرانب حديثة الولادة يتم توفيرها بواسطة ‎(Russian Academy of Science)Vivarium RAMN‏ خاصة. وقد تم تدعيم اختيار هذه المادة المائحة بواسطة معلومات تفيد بأن إنسولين الأرنب شديدة القرب الإنسولين البشري من حيث الهيكل» ‎Waly‏ بوجود فرصة لإحداث تجميع غزير لتلك الحيوانات. من المهم ‎Load 13a‏ معرفة أنه لم يكن ثمة بيانات في المؤلفات العالمية الخاصة بمزارع الأرانب حول وجود أي إمكانية لنشر
0 العدوى الحيوانية من الأرانب إلى البشر. وتتيح هذه المعلومات استثناء؛ على نحو عملي؛ نشر الفيروسات وغير ذلك من العوامل المعدية من الأرانب إلى البشر بصحبة الخلايا المزروعة؛ وخصوصًا مع الأخذ في الاعتبار أن الجهاز المناعي للمستقبل؛ عند عدم كبحه بواسطة علاج كابح للمناعة؛ يكون ‎Hala‏ على تدمير تلك العوامل المعدية الخارجية التى يمكنهاء من الناحية التظرية؛ أن تنتقل إلى البشر عند زرع خلايا حيوانية.
5 المثال 17 النتائح العامة للزرع الخارجي لمزارع خلايا جزيرية للبنكرياس لدى ‎Oh‏ تعاني من سكري محفز وقد عرضنا قدرة مزارع الخلايا الجزيرية ‎(CC)‏ التي يتم إنتاجها من بنكرياس أجنة بشرية؛ وأيضًا إذا كانت أجنة لحيوانات حديث الولادة؛ البقاء و العمل في ظروف في الجسم الحي؛ في تجارب في الزرع الخارجي لتلك المزارع ‎dal‏ حيوانات تعاني من سكري تجريبي.
0 تتم استخدام فثران ذكور من سلالة ويستار لها وزن جسم يبلغ 220-180 جرام كحيوانات تجريبية؛ والتي تم إبقاء ها في مادة تغذية مربى إحيائي وأيضًا (بالإشارة إلى التجرية الخاصة) على حصة لمحتوى متعدد البروتين.
وقد تم تحفيز السكري التجريبي لدى الفئران بواسطة إدخال محلول أولكسان تحت الجلد بجرعة
مقدارها 200 ملجم بمعدل 1 كيلوجرام لكتلة الجسم؛ أو بواسطة الإدخال داخل الجلد لمحلول
الستريتوزوتوسين بجرعة تبلغ 60 ملجم/كجم.
خلال التجارب (في كل من الفثران التجريبية وفثران الضبط) لم يتم استخدام سوى ‎Ol‏ تعاني من مكري محفز بواسطة ألوكسان أو ستريتوزوتوسين؛ بلغ سكر الدم لديها عند الصيام 20 مللي
مول/لتر وأكثر بعد أسبوعين من إعطاء المستحضرات المحفزة للسكري. وقد أظهرت التجارب التي
تم إجراءها في وقت سابق أن تلك الحيوانات لا تبدي ارتدادًا سلسلًا للسكري التجرببي.
وقد أبدى 88 من أصل 104 فأر لديهم سكري ألوكسان ثابت أو حرج (فيما يقرب من 785)؛ بعد
زرع للخلايا الجزيرية المزرعة (66)؛ خمودًا ‎G6‏ لحالة السكري قبل نهاية ‎Lal‏ )20 أسبوعًا).
0 وقد بدى الأثر المضاد للسكري للزرع الخارجي بوضوح فور إعطاء المزارع داخل الكبد (عبر الوريد البابي أو مباشرةً داخل النسيج الحشوي للعضو)؛ داخل الطحال (تم إدخال المزارع داخل اللب)؛ وكذلك داخل عضلات الجدار البطني الأمامي. لدى ‎lis‏ التي تعاني من تراجع السكري التجريبي؛ في أماكن الزرع تم الكشف عن ‎CC‏ لها هيكل تم الاحتفاظ به وعلامات النشاط الإفرازي وحتى بعد 8 أسابيع بعد الزرع الأجنبي.
5 وفي سلسلة من الأبحاث أظهرنا قدرة الحفاظ على الخلايا التي تمتلكها ‎CC‏ للبنكرياس لأجنة بشرية واستعادة حيوبتها بعد إزالة التجمد ‎sale)‏ الاستنبات. كما أجربنا ‎Wad‏ تجارب في معايرة النشاط الوظيفي للمزارع التي أزيل التجمد منها ل ‎CC‏ الخاصة ب ‎PZh‏ لأجنة بشرية في ظروف في المختبر. ولذلك الغرض؛ تم زرع0©6- مزال تجمديها ومنقاة من الواقي المبرد(جليسرين أو داي ميثيل سلفوكسيد) والتي تم الحصول عليها من بنكرياس 4 أجنة بشرية؛ لدى 8 فأر بالغ (كتلة جسم
‎(aha 220-200 0‏ بواسطة سكري تجريبي ( محفز بواسطة ألوكسان)؛ وكان مستوى سكر الدم لدى تلك الفئران ليلة زرع (قبل أسبوعين) 32-24 مللي مول/لتر (في المتوسط 27.4 مللي مول/لتر ). تم إدخال المعلق ‎Bile‏ إلى متن ‎AS‏ الفئران» وتمت تغطية موقع الحقن باستخدام 2-1 قطرات من صمغ طبي (6-1416). وقد أبدى 6 حيوانات من بين 8 خلال 2-1أسابيع بعد الزرع الخارجي تراجعًا في مستوى سكر ‎pall‏ لديها إلى مستوى لا يزيد على 15 ‎Ae‏ مول/لترء؛ ومع نهاية الشهر
بلغ تركيز الجلوكوز في دم الحيوانات من 11 إلى 16 مللي مول/لتر (في المتوسط 13.1 2.2 مللى مول/لتر ). عند تلك النقطة؛ كانت العلامات العيادية للسكري تتلاشى(فقدان كتلة الجسم؛ تساقط الشعرء العطش الشديد؛ البوال). وظل تراجع ‎Ala‏ السكري طوال فترة الملاحظة (5- 7أسابيع ). في سلسلة خاصة من التجارب؛ تم إظهار دور للاستنبات الأولى ل ‎ACC‏ المختبر في بقاءه في الكائن خارجي المنشاً للمستقبل. ولذلك الغرض؛ تم إجراء تحليل مقارن لنتائج الزرع الخارجي ل 6 من البنكرياس لأجنة بشرية والزرع الخارجي لنسيج جزيري جنيني غير مستنبت لدى فئران تعاني من سكري تجريبي. وقد وجد أثر ‎AST‏ وضوحًا لزرع ‎CC‏ مسبق الاستنبات في مقابل زرع النسيج البنكرياسي غير المستنبت الذي لم يتسبب إلا في تراجع قصير الأجل في حالة السكري. 0 وبذلك»؛ على سبيل التجرية؛ تم ‎i ash‏ تحوير ‎elie‏ للاستنبات في المختبر بما يؤدي إلى زبادة كبيرة فيما يتعلق ببقاءه في كائن لدى مستقبل أجنبي. وقد تم الحصول على نتائج مشابهة في الزرع الخارجي التجرببي لمزارع الخلية الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس إجنة الخنازير والماشية؛ وأيضًا من أرانب حديثة الولادة. في تجارب لزرع داخل النخاع لمزارع خلايا جزيرية تم الحصول عليها من بنكرياس الأرانب حديثة 5 الولادة؛ تم تحديد هدفين علميين. الأول هو دراسة أثر النظام الغذائي الذي يتضمن ‎(Sine‏ بروتين متعدد على مسار السكري التجريبي لدى الفئران» وشدة الأثر الخافض للسكر لزرع مزرعة خلية بيتا جزيرية بنكرياسية. أما الهدف الثاني؛ والذي لم يسبق أبدًا تناوله؛ فيتمثل في دراسة أثر زرع خارجي ‎mals‏ لمزارع ‎CC‏ على ‎dla‏ الجهاز الجزيري لبنكرباس الفئران المستقبلة. المثال 18 الزرع العيادي لمزارع الخلايا الجزيرية إلى مرضى يعانون من السكري وقد أجبرنا الطلب الشديد على زرع لمزارع الخلايا الجزيرية إلى مرضى يعانون من السكري من النوع الأول بسبب النقص الواضح في مواد المانح المنقولة (الأجنة البشرية)؛ على استخدام مزارع
خلايا جزيرية خارجية للزرع العيادي. وكانت أسس عمليات الزرع هذه تتمثل في النقل الخارجي الناجح لمزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى فئران تعاني من سكري تجريبي. ويتيح لنا استخدام عمليات الزرع الخارجية؛ بفضل ‎dal)‏ مواد المانح؛ أن نجري على نطاق واسع عمليات زرع مزرعة خلية جزيرية متكررة. بالإضافة إلى ذلك» أظهر نتائج عمليات زرع مزارع الخلايا الجزيرية للأرانب حديثة الولادةإلى
حيوانات مصابة باعتلال الكلية السكري التجريبى ‎Bab Wale‏ شديدًا. 1. الزرع العيادي لمزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة. إجمالي عمليات الزرع المجراة: 3.500. ‎cola‏ تظهر نتائج الملاحظة الديناميكية طويلة الأجل (أطول من 5 إلى 20 عامًا)ذ 1200
0 مرضى يعاني من السكري من النوع الأول. كان هناك 680 رجلاً و 520 امرأة في مجموعة 1200 مريض. وبلغ عمر المرضى لحظة الزرع من 16 إلى 42 عامّاء المتوسط- 28.1 ‎ale‏ ‏من المعروف أن شدة ظهور المضاعفات الثانوية للسكري تعتمد بصورة بارزة ‎a‏ على طول المريض. على نحو مفترض؛ يحدث موت الخلايا الخاصة (الخلايا الجزيرية ) في العام الثالث-
5 الخامس بعد ظهور المرض. وتبدي المضاعفات الثانوية للسكري نفسها ‎Bale‏ لدى المرضى ممن لديهم تاريخ من المرض يزيد على 10 سنوات. ويسبب ذلك؛ تم تقسيم جميع المرضى إلى 3 مجموعات فيما يتعلق بطول المرض: أ) من 2 إلى 10 سنوات - 124 مربض؛ ب) من 11 إلى 20 عام- 344 مريض؛
0 ج) 20 ‎fle‏ أكثر - 732 مريض. ‎Lads‏ 3 تم أداء عمليات ‎SY)‏ متكرر بتاريخ ‎Uae‏ يبلغ 20 ‎Le‏ وأكثر على 267 مريضًا ¢
تم أداء 10-9 عمليات زرع بفواصل زمنية تبلغ 11-6 شهرًا على 11 مريضًا؛ تم أداء 8-7 عملية ‎SY)‏ على 26 مريضًا ¢ تم أداء 6-5 عملية ‎SY)‏ على 33 مريضًا ¢ تم إجراء 4-3 عملية زرع -على 80 مريضًا؛ 2 عملية زرع على -117 مريضًا. تم فحص المرضى لتحديد سمة تطور السكري من النوع الأول و الكشف عن المضاعفات.
فيما يخص الزرع ‎gal‏ مريض واحد» استخدمنا ‎Bale‏ مزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من 40-3 بنكرياس أرانب حديثة الولادة عمرها 2-1 يوم. تم إدخال مستحلب لمزرعة ‎LIAN‏ الجزيرية التى تم تجميعها قبل زرع؛ ‎sac aS‏ داخل العضلة البطنية المستقيمة فى ظل تخدير موضعى. لم تستخدم الكبح المناعي. طريقة زرع مزارع الخلايا الجزيرية
0 تكون جرعة واحدة لمزرعة الخلايا الجزيرية مستحلب خلوي معقم في محلول هانكس ملحي مقداره 15-0 مللي لترء وتم الإبقاء عليها في أنابيب اختبار بلاستيكية معلمة بصورة خاصة. باستخدام إبرة حقن مقدارها لا يقل عن 7 سم من حيث الطول ولا يقل عن 1 ملم من حيث القطرء ملا محتوى أنبوب الاختبار المحقنة؛ وبتم إعطاؤه داخل العضلة البطنية المستقيمة في ظل تخدير موضعي . يتم إغلاق نقطة الحقن باستخدام ضمادة معقمة.
5 أدناه؛ يتم ذكر قائمة بنتائج الزرع الخارجي لمزارع الخلايا الجزيرية وأثره على خصائص تطور السكري من النوع الأول وعلى مستوى التعويض عن الأيض المعيب ومستوى الظهور لدى مرضى يعانون من تاريخ متنوع للمرض. من المهم ملاحظة أنه لم يكن من ضمن أهدافنا على أي مستوى؛ معادلة محتوى الهموجلوبين المعالج بالجليكول؛ والذي يُنصح به بشدة من جانب العلم الرسمي للسكري. وبعد الانخفاض الشديد
0 في بكر الدم خطيرًا وله مضاعفات وعائية شديدة؛ وعلى ذلك» بمساعدة زرع مزارع الخلايا الجزيرية والعلاج المتوسط بالإنسولين 6 حاولنا تأمين تحسن تدريجي للتعويض عن استقلاب الكريوهيدرات؛ ولتقييم تغييرات ما بعد الزرع في ظهور لمضاعفات السكري المتأخرة.
1. رع لمزارع الخلايا الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى مرضى السكري من النوع الأول ممن لديهم تاريخ بالأمراض من 2 إلى 10 أعوام. إجمالي عدد المرضى تحت الملاحظة : 124 مريض سكري من النوع الأول له تاريخ من 2 إلى 10 سنوات . 75 رجلاً و 49 امرأة. عمر المرضى وقت الزرع الأول ؛: من 18 إلى 43 ‎Le‏ ‏5 (المتوسط 24.3 ‎(ple‏ ‏كان لدى 16 من بين 124 مريض من هذه المجموعة سمة قوية متقلقلة لمسار الأمراض. وبذلك؛ لوحظ أن 9 مرضى يعانون من حالات انخفاض سكر الدم متكررة(عدة مرات أسبوعيًا) انسيابية (أي تظهر دون أسباب واضحة)؛ تم معالجتها بصورة متكررة لدى المريض دون إحداث استقرار في مسار المرض ودون الاختيار الناجح لجرعة الإنسولين التي تم إعطاءها. وعانى 4 مرضى من 0 سكري متقلقل من النوع الأول مع وجود ميل إلى تطوير حالة حادة من فرط الكيتون؛ ولم تسفر محاولات تحقيق تعويض أيضي لأولئك المرضى إلا عن أثر مؤقت. وقد أبدى 27 مريضًا (11 منهم يعانون من سمة متقلقلة للسكري) أعراض الاعتلال العصبي ‎(Sam ua‏ - ألم على صورة تنميل ونبضات في عضلات الكاحل ‎Bale‏ أثناء الليل. وقد كشف 2 مريضًا بدايات مرحلة عيادية من اعتلال الكلية السكري (المرحلة 3 في ‎«(Mogensen‏ وقد عبر 5 مرضى - عن مرحلة اعتلال الكلية (المرحلة 4 في ‎(Mogensen‏ و11 مريضًا عن اعتلال الشبكية غير منتشر . بعد الزرع الخارجي داخل العضل لمزارع الخلايا الجزيرية؛ لاحظت أغلبية المستقبلين خلال 2-1 أشهر انخفاضًا في متوسط يومي لمستوى سكر الدم زاد بصورة ملحوظة فيما قبل. وقد لوحظ استقرار مؤشراته فى المعدلات المناظرة للتعووض المرضي أو الجيد عن استقلاب الكريوهيدرات 0 علاوة على ذلك ‎(Dla‏ على الأقل؛ 12 شهر لملاحظة ما بعد الزرع. وبذلك؛ في 15 من بين 16 مريض سكري متقلقل من النوع الأول؛ كان لمسار المرض سمة ثابتة : مع اختفاء الميل إلى انخفاض سكر الدم؛ وكذلك الميل إلى فرط كيتون الدم. ويؤكد تحسين التحكم في سكر الدم بعد زرع لمزارع ‎LIAN‏ الجزيرية للبنكرياس لأرانب حديثة الولادة بيانات الهموجلوبين المعالج بالجليكول
في دم المستقبلين(انخفاض مما قبل الزرع 711.0 إلى 79.1؛ إلى 78.7 وإلى 79.6 على الترتيب في 6؛ 9 و 12 ‎Ded‏ بعد زرع ). وقد سمحت الزيادة في مستويات التعويض للسكري والميل الواضح إلى خفض المتوسط اليومي لمستوى سكر الدم» بتقليل جرعة الإنسولين المستخدم ومع نهاية فترة الشهر - الشهرين (في المتوسط بنسبة 712) ظل هذا مقللاً نسبيًا في الأشهر 3؛ 6؛ 9 و 12 بعد زرع - على الترتيب بنسبة 720.5 722.2 718.5 و ‎J11.9‏ ‎Allg‏ عانى جميع المرضى البالغ عددهم 27 ممن يعانون من اعتلال عصبي حسي ‎ESAT‏ في 1 إلى 3 أشهر بعد زرع مزارع الخلايا الجزيرية؛ أي علامات عيادية بارزة لهذه المضاعفة من مضاعفات السكري. وقد كان لدى 7 من بين 12 مريض في المرحلة الاولى من اعتلال الكلية 0 إفراز ألبومينات مع معادلة البول (أصبح 30 ‎Gag Me‏ أو أقل)؛ ‎Sle‏ 4 من بين 5 مرضى يعانون من اعتلال كلية بارز من ثر ألبوميني مقلل بما يصل إلى مستوى مرحلة ابتدائية لهذه المضاعفة من المضاعفات. ولم يبدي جميع المرضى البالغ عددهم 11 ممن يعانون اعتلال الشبكية السكري سوء في حالة العين الخاملة؛ وأبدى 4 منهم نقصًا في الأوديما الشبكية؛ وقدرًا أقل من الأورام الوعائية الميكروية والأوعية الجديدة. 5 كانت هذه هي التغييرات التي تمت ملاحظتها خلال فترة 12 شهرًا بعد الزرع الأول لمرضى السكري من النوع الأول ممن لديهم تاريخ من المرض من 2 إلى 10 ‎le‏ ‏وفي وقت لاحق ؛ تم إعطاء 87 مريضًا من هذه المجموعة خلايا مزروع متكررة داخل العضل لمزارع الخلايا الجزيرية التي يتم إنتاجها من بنكرياس أرانب حديثة الولادة: ‎(a a 1 2‏ -7 حالات زرع؛ 21 مريض -6-5 حالات زرع؛ 1 4 مريضًا -4-3 حالات زرع؛ 13 مستقبل -2 ‎Als‏ زرع لكل واحد. ولم أي من هؤلاء المرضى علاوة على ذلك علامات موضعية أو عامة لرفض الخلية المزروعة أو أي رد فعل مثير للحساسية بعد عمليات الزرع المتكررة. وقد سمحت عمليات الزرع المتكررة بالاحتفاظ بصورة بارزة ‎AL‏ إيجابي للزرع الأول لمزارع الخلايا الجزيرية خلال فترة الملاحظة
بأكملها. ولم يبد أي مريبض واحد أي علامات لتقدم المضاعفات الثانوية للسكري من النوع الأول؛ مثل الاعتلال العصبى ¢ اعتلال الشبكية؛ أو اعتلال الكلية. 1 . زرع لمزارع ‎WIA‏ الجزيرية للبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى مرضى السكري من النوع
وكان إجمالي 731 من مرضى السكري من النوع الأول ممن لديهم تاريخ من الأمراض من 11 إلة سنة تحت الملاحظة. وكان 354 منهم من الرجال؛ 9 377 من النساء . وقد بلغ عمر المرضى وقت الزرع الأول من 18 إلى 49 عامًا (متوسط العمر -2.3 عامًا). وقد كان لدى 37 مريضًا سمة في غاية التقلقل من الأمراض التي لا يمكنها أن تستقر مع التلقي المتكرر لعلاجات المريض.
0 وكان لدى 568 مرضى علامات لمضاعفات السكري الثانوية: 119 مريض - الاعتلال العصبي )88 - الصورة الحسية الحركية فقط و 31 بالإضافة إلى الاعتلال العصبي الذاتي؛ مرحلة البدء لاعتلال الكلية (المرحلة 3 على ‎—(Mogensen‏ 204 مرضى. ولم يتم قبول المرضى ممن يعانون القصور المزمن في الكلى (المرحلة 5 على ‎(Mogensen‏ لمزرعة الخلايا الجزيرية بسبب نقص المنظور. وقد أبدى 361 مريضًا علامات اعتلال الشبكية السكري: المرحلة غير التكائرية
5 1 لدى 190 ‎Uae‏ » مرحلة ما قبل التكائر - لدى 213 ‎np‏ و 42 مريضًا في مرحلة التكاثر. بعد 3-1 أشهر من الزرع الخارجي لدى 32 مريضًا بسكري متقلقل من النوع ‎f‏ لأول تتطلب مسار المرض سمة ‎GUE ST‏ وخاضعة للتحكم. عند هذه النقطة؛ كقاعدة؛ تمت ملاحظة حدوث استقرار في مؤشرات أيض الكربوهيدرات. وتم تأكيد تحسين تعويض الأيض بواسطة التغييرات في محتوى الهموجلوبين المعالج بالجليكول في دم مرضى هذه المجموعة: من 712.0 (متوسط المؤشر ) قبل
20 الزرع؛ وقد تم تقليل مستواها في الأشهر الثلاثة بالفعل ‎dead‏ إلى 710.8؛ خلال 6 أشهر -إلى 4 . 79 3 خلال 9 أشهر — زيادة طفيفة تصل إلى 9. 0 1 ‎A‏ 3 ومع نهاية العام - قلت حتى وصلت إلى 79.8
في الوقت ذاته؛ كان لدى أولئك المرضى نقص قسري في جرعة الإنسولين اليومية التي تم إعطاؤها مقارنة بمستويات ما قبل الزرع: خلال 3 أشهر بعد زرع في المتوسط لنسبة 712.2؛ خلال 6 أشهر -بنسبة 719.1 خلال 9 أشهر - لمدة 17.0 وخلال 12 شهرًا - لمدة ‎J12.4‏ ‏خلال فترة ما بعد الزرع؛ تمت ملاحظة علامات نشأة حميدة بصورة أكبر للمضاعفات الثانوية في المستقبلين من هذه المجموعة. ‎clay‏ أعراض ‎IS‏ من الاعتلال العصبي الحسي الحركي والاعتلال العصبي المستقل أن تبدي انخفاضًا بالفعل ومع نهاية الفترة من 1.5-1 شهر بعد الزرع؛ ويحلول الشهر الثالث توقفت تلك العلامات عن إزعاج ما يقرب من نصف هؤلاء المرضى. أيضًاء أبدت غالبية المرضى ممن يعانون اعتلال الكلية السكري مع نهاية 4-2 أشهر بعد الزرع الخارجي ‎Guay‏ كبيرًا طوال فترة تلك المضاعفات الخطيرة. وعلى ذلك؛ أبدى 99 من بين 112 مرضى 0 مرحلة أولية نقصًا باررًا في فقدان الألبومين مع البول؛ وأبدى 68 مريضًا معادلة الثر الألبوميني الميكروي. وكان ل 157 مريضًا من بين 204 ممن يمرون بمرحلة واضحة من هذه المضاعفات من سلس بول منخفض؛ ولدى 39 مريض حدث ارتداد إلى مرحلة الثر الألبوميني الميكروي. وعند هذه النقطة» لاحظ جميع المستقبلين ممن يعانون ارتفاع ضغط شرياني ميلاً ‎GL‏ معادلة مؤشرات الضغط الشرياني. وكان لدى المرضى ممن يعانون اعتلال الشبكية السكري أثرًا إيجابيًا 5 أقل: من بين 213 مريضًا ممن هم في مرحلة ما قبل الانتشار» لم تتم ملاحظة تراجع في التغيرات المرضية للشبكية إلا لدى 31 مريضًا. مع ذلك؛ لدى مجموعة المستقبلين ممن يعانون اعتلال شبكية غير تكاثري وكذلك ممن يعانون اعتلال شبكية قبل تكاثري؛ لم تتم ملاحظة أي سوء في الحالة العيادية لهبوط العين. ويحدث استقرار قطعي في المسار العيادي أيضًا في أكثر مجموعات المرضى صعوبة - ممن يعانون اعتلال شبكية انتشاري. ‎aly‏ يظهر سوى 7 من بين 42 من 0 المستقبلين علاوة على ذلك تقدم في التغيرات السكري في الشبكية. وقد تم إعطاء عينات زرع مكررة (خلال 12-6 شهرًا بعد الزرع الأول) لعدد 541 مريضًا: 8-7 مرات إلى 75 مريضًا؛ 6-5 مرات إلى 167 مريضًاء 4-3 مرات إلى 122 مريضًاء مرتين - إلى 150 مريضًا. في أغلب الحالات؛ وفر الزرع المتكرر لمزارع الخلايا الجزيرية؛ كحد أدنى؛ حفظًا للديناميكيات الإيجابية في حالة المرضى التي حدثت بعد الزرع الأول. وعند هذه النقطة؛ في 5 بعض الحالات حدث تجميع للأثر العلاجي. على سبيل المثال؛ نود أن نعرض ‎dais‏ لخمسة زروع
يتم إعطاءها على نحو متزامن(بفاصل زمني يبلغ 9-7 أشهر) 5 (خمسة) إلى مريض يعاني من اعتلال عصبي حسي-حركي متقدم؛ تسبب في فقدان هذا المريض الذي لديه تاريخ من الأمراض يبلغ 8 أعوام لقدرته على العمل بسبب الألم الشديد في الأطراف والضمور العصبي الواضح؛ وخصوصًا في عضلات الأطراف السفلى. وبعد الزرع الأول ضعف الألم في قدميه؛ وبعد الزرع الثاني اختفى الألم تمامّاء ‎ana Tag‏ وتوتر العضلات في العودة. نتيجة للزرع الذي تم القيام به؛
كبرت الكتلة العضلية للمستقبل خلال 4.5 عام مقابل 23 كيلوجرام؛ وتعادل التوتر العضلي وكذلك نقل الدفعة العصبية على طول الأعصاب الحركية. وعن هذه النقطة؛ أصبح تطور السكري ‎Gls‏ ‏وقلت الجرعة التي تم تلقيها من الإنسولين بحوالي 750. ومن الممكن أن يكون النقص في طلب الإنسولين الخارجي مشروطًا إلى درجة ما بالاستعادة ‎salad)‏ لإفراز الإنسولين بواسطة خلايا البيتا
0 الخاصة بالمستقبل» حيث يكون معدل الببتيد © البشري في دم المستقبل عبارة عن 0.1 نانوجرام/مللي في وضع الصيام» و 0.1 نانوجرام/مللي (تم تحفيزه بواسطة ‎(sumsstakal‏ بما يصل إلى؛ على الترتيب 0.36 و 0.55 نانوجرام/مللي ومع نهاية مدة السنوات الأربعة لملاحظة ما بعد الزرع. 1 3 زرع لمزارع ‎WAY‏ الجزيرية لبنكرياس أرانب حديثة الولادة لدى مرضى السكري من النوع
5 الأول ممن لديهم تاريخ من الأمراض لمدة 20 عامًا وأكثر. ‎lea‏ عدد المرضى في هذه المجموعة - 345: 161 رجلاً و 184 امرأة. عمر مرضى وقت الزرع الأول: من 25 إلى 56 عامًا (المتوسط 33.4 عامًا). تاريخ المرض: من 21 إلى 37 عامًا(المتوسط 25.1 عامًا). عانى 17 مريضًا من تقلقل حقيقي لنشأة السكري: انخفاض انسيابي في حالات سكر الدم تبعه
0 غالبًا مع وجود حلقات من الإحمضاض الكيتوني. أبدى 328 مريضًا مضاعفات السكري الثانوية: عانى 111 مريضًا من الاعتلال العصبي؛ بما في ذلك 47 حالة من اعتلال عصبي حسي-حركي؛ وكان لدى 54 مريض توليفة من الاعتلال العصبي الحسي-الحركي والاعتلال العصبي المستقل وقد تم تشخيص 275 مريضًا باعتلال الكلية السكري؛ بما في ذلك اعتلال الكلية التمهيدي (المرحلة الثالثة على ‎(Mogensen‏ لدى 52 مريضًاء
والمرحلة الظاهرة - لدى 223 مريضًا. وقد تم تشخيص اعتلال الشبكية السكري لدى 24 مريضًاء
المرحلة غير التكاثرية - لدى 18 مريضًا 3 قبل ‎Asal‏ - لدى 155 مريضًا ‘ وتكائرية لدى 61
مريضًا.
كان لجميع المستقبلين ممن يعانون نشأة أولية متقلقلة للمرض حالة استقرار سريعة (خلال 3-1 أشهر) في مستوى سكر الدم؛ وتم القيام باختيار أكثر ملائمة للعلاج بالإنسولين.
لدى مرضى هذه المجموعة؛ تقليل المستوى المتوسط للمتوسط اليومي لسكر الدم من 10.7 مللي
مول/لتر قبل زرع إلى 8.8 ‎Me‏ مول/لتر قبل 3 أشهر؛ إلى 8.5 ‎Me‏ مول/لتر - في 6 أشهر؛
ومع زيادة بسيطة إلى 8.9 ‎Ale‏ مول/لتر في 9 أشهرء وإلى 79.1 مللي مول/لتر - في 12
0 وف للتغييرات في سكر الدم؛ بعد ذلك؛ نقص محتوى الهموجلوبين المعالج بالجليكول في دم المستقبلين في المتوسط من 711.1 قبل زرع إلى 79.0 في 12 شهرًا بعد زرع. وقد صحبت الزيادة في مستوى التعويض في استقلاب الكريوهيدرات بعض النقص في الطلب على ‎J‏ لإنسولين الخارجي في مرضى. ويحلول الشهر الثالث بعد الزرع الخارجي 3 تم خفض جرعة الإنسولين التي تم إعطاؤها لدى هؤلاء المرضلا في المتوسط بنسبة 11.2 ‎J‏ لمدة 6 أشهر -
5 بنسبة 221.6 لمدة 9 أشهر - بنسبة 718.5؛ وفي 12 شهرًا - فقط بنسبة 710.8؛ التي تثبت عودة الطلب على الإنسولين الخارجي إلى مستويات ما قبل الزرع. وقد تمت ملاحظة الحد الأقصى من النقص لدى المرضى من السيدات .(العمر 26 سنة؛ تاريخ من السكري من النوع الأول - 22 ‎(le‏ المضاعفات الثانوية: الاعتلال العصبى الحسى- الحركى؛ اعتلال الكلية البارزء اعتلال الشبكية ما قبل الانتشاري). بالفعل ومع نهاية الأسبوع الثاني بعد زرع مزرعة
0 الخلايا الجزيرية التي تم إنتاجها من بنكرياس الأرانب حديثة الولادة؛ قل الطلب على الإنسولين الذي تم إعطاؤه من 36 إلى 24 وحدة/اليوم؛ في 6أسابيع -إلى 16 وحدة/اليوم؛ وفي 0 1أسابيع — إلى 4 وحدة/اليوم» أي بنسبة 790). وعند هذه النقطة؛ على خلفية الحالة الثابتة؛ ‎alg‏ يزد مستوى المتوسط اليومي لسكر الدم عن 9 ‎Ale‏ مول/لتر. وقل ‎(gine‏ 110/1010 بعد 4 أشهر بعد الزرع
حتى وصل إلى 78.7 وم يزد عن 79 امتداد يبلغ على الأقل 1.5 عامًا. وعند هذه النقطة؛ حدث نقصض بارز فى شدة المضاعفات الثانوية للسكري . اعتمد أثر عمليات الزرع على مستوى شدة مضاعفات السكري؛ في أغلب الحالات على نوعه والمرحلة العيادية. وعلى ذلك إذا شهد جميع المرضى ممن يعانون اعتلال عصبي حسي ‎ESAT‏ تحسدًا بارزًا مباشرة
بعد الزرع الأول لمزرعة الخلايا الجزيرية؛ شهد أغلبية المرضى ممن يعانون اعتلال عصبي مستقل أثرًا إيجابيًا فقط بعد الزرع الثاني أو الثالث. وقد شهد جميع المرضى البالغ عددهم 52 ممن لديهم المرحلة الابتدائية لاعتلال الكلية السكري الذين تمت ملاحظتهم بعد زرع تراجعًا في البول البروتيني الميكرويي؛ بما في ذلك 21 مريضًا-
0 وتمت معادلته لديهم. وقد شهد 187 من بين 223 مريضًا لديه مرحلة ظاهرة من اعتلال الكلية السكري مستوى من البروتين مع البول؛ و 67 من أولئك المرضى كان لديهم بول بروتيني مكروبي تغير إلى بول بروتيني ميكرويي. بعد إعطاء الزرع المتكرر لمزارع ‎LIA‏ الجزيرية إلى أولئك المستقبلين» بدا أن هناك أسسًا لإحالة مستوى التلف السكري الحادث فى الكلى إلى المرحلة ‎Ludo)‏ ‏من اعتلال الكلية. وقد كان تحسين قدرة الترشيح للكلى مصحويًا بتخفيض الضغط الشرياني
5 والمعادلة. ولم يبدي جميع المرضى ممن لديهم اعتلال شبكية غير انتشاري أي تقدم ملحوظ في التغييرات المرضية خلال فترة الملاحظة باكملهاء مع تحسين تدني العين لد 5 مستقبلين (إزالة الإيديما في الشبكية؛ مع نقص في كمية الأورام الوعائية الميكروية والأوعية الجديدة). لدى أغلبية المرضى المستقبلين ممن لديهم اعتلال الشبكية ما قبل الانتشاري(في 130 مريض من
0 بين 155)؛ لم يكن ‎dd‏ تقدم في التلف السكري للشبكية. وعند هذه النقطة؛ لم يكن لدى جميع المرضى من الناحية العملية؛ ممن كان لديهم تخثر بالليزر ‎dd‏ عمليات زرع ‎WA‏ جزيرية؛ حاجة إلى الاستمرار في علاج التخثر بالليزر. في الوقت ذاته؛ أثناء إعطاء عمليات زرع متكررة لمزارع الخلايا الجزيرية إلى مرضى ممن لديهم اعتلال شبكية انتشاري؛ ممن ليست لديهم حساسية دائمة للتغيرات الإيجابية الرئيسية في الشبكية
التي حدث بها تلف بيولوجي . ولم يبدي سوى 9 من بين 61 مريضًا تطور ارتد ادي ‎SR‏ لعملية الانتشار. وعند هذه النقطة؛ لدى 3 مرضى حدث تخفيف بارز للأنسجة الليفية التى شاركت فى انفصال الشبكية؛ مما يؤدي إلى إضعاف سحب الشبكية ‎sale)‏ إرفاقها الجزئي. ويؤدي هذا إلى استعادة حتمية للوظائف البصرية المفقودة. مع ذلك؛ يمكن اعتبار توقف العملية الانتشارية والحفاظط على الوظائف البصرية الموجودة لدى 22 من المستقبلين لمدة سنوات متعددة؛ نتيجة إيجابية واضحة لعلاج الزرع المتكررة . الخاتمة تسمح نتائج عمليات الزرع المتكررة الموصوفة اعلاه لمزارع الخلايا الجزيرية المجموعة من أرانب حديثة الولادة؛ باعتبار هذا النوع من علاج الزرع طريقة فعالة للوقاية والعلاج من المضاعفات 0 الثانوية للسكري من النوع الأول وخصوصًا في المراحل الأولية والمراحل التي يتم التعبير ‎lie‏ بصورة معتدلة. المصادر/المؤلفات 1. Volkov ٠... Skaletskyy N.N., Schenev S.V. [Preliminary results of xenogeneic transplantation of cultures of islet cells of pancreas of rabbit to children with insulin-dependent diabetes mellitus. // Bulletin of 5
Experimental Biology © Medicine. — 1998. —No3. Volume 126. P.105 - 108 2. Gavrilova N.A., Skeltskyy N.N. / Effect of xenotransplantation of pancreatic islet cells on pathogenic mechanisms of development and course of diabetic retinopathy. // Reporter of Transplantology & Artificial ~~ 20
Organs. — 2004. - Nel - ©. 30-36. 3. Skaletskaya G.N., Kirsanova L.A., Skaletskyy N.N., and others. /
Change of course of experimental diabetic nephropathy under influence of xenotransplantation of islet cells cultures. Materials of the Ill All-Russian
Conference on Transplantology & Artificial Organs. // Reporter on
Transplantology & Artificial Organs. — 2005. — Ne3. — P. 47. 4. Skaletskyy N.N., Kirsanova L.A., Blyumkin V.N. / Producing cultures of islet cells of pancreases and its transplantation. // Issues of
Transplantology & Artificial Organs. — M., 1994. — P. 73-80. 5 5. Skaletskyy N.N., Shumakov V.I. / Transplantation of islet cells in treatment of diabetes mellitus // Transplantation of fetalissues and cells. /
Bulletin of Experimental Biology & Medicine. — 1998. — T.126. — Suppl. 1. -P. 109-114. 6. Shumakov V.l., Blyumkin V.N., Skaletskyy N.N., and others. 10
Transplantation of pancreatic islet cells. — M. Canon , 1995. — ©. 384. 7. Shumakov V.I., Skaletskyy N.N. / Regulation of carbohydrate metabolism and correction of impairment of carbohydrate metabolism at diabetes Mellitus. // Essay on physiological problems of transplantology and use of artificial organs / Under edition of Academician V.I. 5
Shumakov. — Tula: Repronix Ltd., 1998. — P. 93-118. 8. Shumakov V.l., Skaletskyy N.N. Transplantation of islet and other endocrine cells. // Transplantology (under edition of Academician V.I.
Shumakov). — M: Medicine, 1995. — ©. 317-331. 9. Gill R.G., The Immunology of Pancreatic Islet Transplantation. —in 20 book “Type 1 Diabetes”, Oxford University Press, 1996. — P.118-133
10. Shapiro A.M.J., Lakey J.R.T., Paty B.W., et al. / Strategic opportunities in clinical islet transplantation // Transplantation. — 2005. -
Vol. 79. — P. 1304-1307. 11. Shapiro A.M.J., Lakey J.R.T., Ryan E.A., et al. / Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus usinga 5 glucocorticoid—free regimen // New England J. of Medicine. —2000.
V..343. — P. 230-238. 12. Wabhren J., Johansson B.-L., Wallberg—Henriksson H. / Does C- peptide have a physiological role? // Diabetologia. — 1994. — 37, suppl.2. - P.99-107. 10 13. Shumakov V.I., Skaletskyy N.N., Evseev Yu.N. et al. / Intraportal xenotransplantation of islet cell cultures in diabetic patients // Biomaterial
Living System Interactions. — 1993. Vol. 1. - N4. — P.179-184. 14. George S. Eizenbarth, Kevin J. Lafferty. Type | Diabetes — Molecular,
Cellular & Clinical Immunology. — Oxford University press. 15

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- طريقة للحصول على تركيبة تشتمل على خلايا وليدة ‎Way progenic cells‏ بيتا-جزيرية ‎cells‏ 0618-5161 معزولة ‎isolated‏ من بنكرياسات ‎rabbit pancreases uly!‏ ؛ حيث تشتمل الطريقة على: حصد بتكرياسات الأرانب ‎rabbit pancreases‏ المولودة حديئًا ووضع هذه البنكرياسات 0800168568 في محلول ملح يشتمل على مضاد حيوي ‎antibiotic‏ عند درجة حرارة من 10-4 درجة مثوية؛ إزالة الأوعية والقنوات المفرغة ‎removing vessels and excretory ducts‏ من البنكرياسات المحصودة ‎harvested pancreases‏ ؛ الحصول على أجزاء بنكرياسية دقيقة مفرومة ‎pancreatic micro fragments‏ من البنكرياسات ‎pancreases 0‏ المذكورة؛ نقل الأجزاء البنكرياسية الدقيقة المفرومة إلى حاوية وعائية ‎receptacle container‏ ؛ حيث يتم تهيئة الحاوية الوعائية لجهاز دوار ‎rotating device‏ ؛ تحضين ‎incubating‏ ¢ في محضن ‎incubation‏ أول؛ الأجزاء البنكرياسية الدقيقة المفرومة ‎pancreatic micro fragments‏ في وسط خالي من المصل عند درجة حرارة من 36 إلى 37 5 درجة ‎Lg‏ لمدة من 5 إلى 12 يوم عند نسبة ‎CO2‏ من صفر % إلى ‎(BS‏ حيث يتم تدوير الحاوية الوعائية بواسطة الجهاز الدوران بسرعة ثابتة من 2 إلى 6 دورات في الدقيقة؛ استبدال الوسط الخالي من المصل بشكل دوري بوسط جديد خالي من المصل وإزالة الخلايا غير المطلوية التي تدمر ‎ES‏ التي تشتمل على ‎WDA‏ خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر النسيج الضام ‎Ja‏ تصبح 9680 على الأقل من الخلايا الباقية عبارة عن خلايا بيتا-جزيرية؛ 0 تجميع الأنسجة المتبقية للأجزاء الدقيقة من المحضن الأول؛ تحضين؛ في محضن ‎(OB‏ الأنسجة المتبقية للأجزاء الدقيقة في 967 من وسط مصلي أرنبي عند درجة حرارة من 36 إلى 37 درجة مئوية لمدة من 5 إلى 10 يوم عند نسبة 002 من صفر % إلى 965؛
    استبدال الوسط بشكل دوري بوسط جديد وإزالة الخلايا غير المطلوية التي تدمر تلقائيًا التي تشتمل على خلايا خارجية الإفراز وخلايا الدم وعناصر النسيج الضام حتى تصبح 9680 على الأقل من الخلايا الباقية عبارة عن خلايا وليدة أو خلايا بيتا-جزيرية ‎cells‏ ]5618-1516 ؛ و تجميع الخلايا الوليدة ‎progenic cells‏ وخلايا بيتا-جزيرية ‎cells‏ ]0618-1516 من المحضن ‎incubation 5‏ الأول والمحضن الثاني.
    لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا ‎Sued Authority for intallentual Property‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § 8 ‎Ss o‏ + < م ‎SNE‏ اج > عي كي الج ‎TE I UN BE Ca‏ ‎a‏ ةا ‎ww‏ جيثة > ‎Ld Ed H Ed - 2 Ld‏ وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. ‎Ad‏ ‏صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ v=‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA515361161A 2013-03-15 2015-09-15 العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري SA515361161B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361798890P 2013-03-15 2013-03-15
PCT/US2014/025246 WO2014151229A1 (en) 2013-03-15 2014-03-13 Cell therapy: a method and a composition for treating diabetes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA515361161B1 true SA515361161B1 (ar) 2020-09-17

Family

ID=51580910

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA515361161A SA515361161B1 (ar) 2013-03-15 2015-09-15 العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري

Country Status (3)

Country Link
US (1) US10507220B2 (ar)
SA (1) SA515361161B1 (ar)
WO (1) WO2014151229A1 (ar)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11617832B2 (en) 2016-08-17 2023-04-04 International Business Machines Corporation Portal system-based bionic pancreas
US11951136B2 (en) * 2017-12-12 2024-04-09 The Regents Of The University Of California Preservation of pancreatic islet grafts in the extrahepatic space
WO2023227068A1 (en) * 2022-05-25 2023-11-30 Hangzhou Reprogenix Bioscience, Inc. A new site for transplantation

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2069563C1 (ru) * 1993-03-04 1996-11-27 Шилкин Герман Алексеевич Способ лечения диабетической ретинопатии
RU2135193C1 (ru) 1997-10-28 1999-08-27 Скалецкий Николай Николаевич Способ получения материала, содержащего бета-клетки поджелудочной железы, для трансплантации больным сахарным диабетом с использованием феномена миграции клеток, материал, содержащий бета-клетки поджелудочной железы, для трансплантации больным сахарным диабетом и способ лечения сахарного диабета методом его трансплантации
US20030082155A1 (en) * 1999-12-06 2003-05-01 Habener Joel F. Stem cells of the islets of langerhans and their use in treating diabetes mellitus
WO2007121438A2 (en) * 2006-04-17 2007-10-25 Philadelphia Medical Scientific Center, L.L.C. Cell therapy: a method and a composition for treating diabetes
EP2087101A2 (en) 2006-11-24 2009-08-12 Regents of the University of Minnesota Endodermal progenitor cells
US8895048B2 (en) * 2010-04-06 2014-11-25 The University Of Kansas Templated islet cells and small islet cell clusters for diabetes treatment

Also Published As

Publication number Publication date
US20160015756A1 (en) 2016-01-21
US10507220B2 (en) 2019-12-17
WO2014151229A1 (en) 2014-09-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Posselt et al. Islet transplantation in type 1 diabetics using an immunosuppressive protocol based on the anti-LFA-1 antibody efalizumab
CN104546912B (zh) 用于治疗胰功能异常的方法
US20150284687A1 (en) Cell therapy: a method and a composition for treating diabetes
KR19990063788A (ko) 면역억제제로서 히알루론산을 이용하는 방법
Dufour et al. Harnessing the immunomodulatory properties of Sertoli cells to enable xenotransplantation in type I diabetes
CN109844093A (zh) 通过降低t细胞区室中的自身反应性来治疗免疫病症相关疾病的方法
Yang et al. The eye as a novel imaging site in diabetes research
SA515361161B1 (ar) العلاج بالخلايا: طريقة وتركيبة لعلاج السكري
Rajab et al. Comparison of the portal vein and kidney subcapsule as sites for primate islet autotransplantation
US9957287B2 (en) Methods and compositions to treat type-1 and type-2 diabetes
Bertera et al. Pig-to-macaque islet xenotransplantation
Park et al. Simultaneous subtotal pancreatectomy and streptozotocin injection for diabetes modeling in cynomolgus monkeys
US20180318357A1 (en) Pharmaceutical composition for treating diabetes, comprising pancreatic islet cells and elastin-like artificial extracellular matrix
Karl et al. Transplantation of insulin-secreting tissues.
PT1928249E (pt) Macrocontas contendo células secretoras compreendendo agarose seakem gold e utilizações destas
Tun The Anterior Chamber of the eye as an Islet Transplantation site in Type-2 Diabetes
Zhang Studies on the effects of short-chain fatty acids on beta cell differentiation and maturation in neonatal porcine islet-like cell clusters
Brown Immunohistological Observations on Foetal Pancreas and Isolated Pancreatic Islet Transplantation in Rats
Anderson et al. Islet transplantation as a treatment for type 1 insulin-dependent diabetes mellitus for patients who experience severe hypoglycaemia unawareness
Ajima et al. P. 17: Replaceable transplant device encapsulating porcine islets improves glycemic control in wild type diabetic mice without immunosuppressant
Flatt et al. Reversal of diabetes by syngeneic transplantation of a radiation-induced rat insulinoma
Schechtman et al. Culture of Brown-Pearce carcinoma in the embryonated egg
Strautz Untersuchung der obob Maus nach Implantation von Langerhans' schen Inseln in Milliporekammern
Mötz MASTERARBEIT/MASTER’S THESIS
Khryshchanovich et al. Clinical results of parathyroid cells allotransplantation