Claims (1)
1. Конъюгат между а) суперантигеном дикого типа, который был модифицирован, и b) отыскивающей мишень частью молекулы; в котором модифицированный суперантиген содержит аминокислотную последовательность первого суперантигена дикого типа, в которой один или несколько аминокислотных остатков по меньшей мере в одном районе, i) который присутствует в аминокислотной последовательности первого суперантигена дикого типа и ii) который функционирует в определении связывания с TCR и активации субпопуляции Т-клеток,
заменены отличающимися аминокислотными остатками, причем модифицированный суперантиген сохраняет способность активации субпопуляции Т-клеток.1. The conjugate between a) a wild-type superantigen that has been modified, and b) a target-seeking portion of the molecule; in which the modified superantigen contains the amino acid sequence of the first wild-type superantigen in which one or more amino acid residues in at least one region, i) which is present in the amino acid sequence of the first wild-type superantigen and ii) which functions in determining TCR binding and activation of the subpopulation T cells
replaced by different amino acid residues, and the modified superantigen retains the ability to activate a subpopulation of T cells.
2. Конъюгат по п.1, где указанный по меньшей мере один район функционирует в определении связывания с TCRVβ.
3. Конъюгат по любому из пп. 1-2, где указанный суперантиген дикого типа представляет собой SEA, SED или SEE или аналогичные суперантигены.2. The conjugate of claim 1, wherein said at least one region functions in determining binding to TCRVβ.
3. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-2, wherein said wild-type superantigen is SEA, SED or SEE or similar superantigens.
4. Конъюгат по любому из пп. 1-3, где указанный суперантиген дикого типа представляет собой SEE и указанный по меньшей мере один район выбран из группы, состоящей из районов А, С, F и Н, определенных в SEQ ID 8. 4. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-3, wherein said wild-type superantigen is SEE and said at least one region is selected from the group consisting of regions A, C, F, and H defined in SEQ ID 8.
5. Конъюгат по любому из пп. 1-4, где указанный суперантиген дикого типа представляет собой SEE, в котором были сделаны следующие аминокислотные замены: R20G, N21T, S24G и R27K, где положения соответствуют положениям в SEQ ID 8 в фиг. 2. 5. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-4, wherein said wild-type superantigen is an SEE in which the following amino acid substitutions have been made: R20G, N21T, S24G and R27K, where the positions correspond to those in SEQ ID 8 in FIG. 2.
6. Конъюгат по любому из пп. 1-5, где модифицированный суперантиген является химерой между а) первым суперантигеном дикого типа и b) одним или несколькими дополнительными суперантигенами дикого типа, причем каждый указанный один или несколько аминокислотных остатков по меньшей мере в одном районе первого суперантигена дикого типа был заменен соответствующим аминокислотным остатком, присутствующим в соответствующем районе в одном или нескольких дополнительных суперантигенах дикого типа. 6. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-5, where the modified superantigen is a chimera between a) the first wild-type superantigen and b) one or more additional wild-type superantigens, each of which one or more amino acid residues in at least one region of the first wild-type superantigen has been replaced by a corresponding amino acid residue present in the corresponding region in one or more additional wild-type superantigens.
7. Конъюгат по п. 6, где первый и дополнительные суперантигены дикого типа выбраны из группы, состоящей из SEA, SED, SEE и аналогичных суперантигенов. 7. The conjugate of claim 6, wherein the first and additional wild-type superantigens are selected from the group consisting of SEA, SED, SEE and similar superantigens.
8. Конъюгат по п.7, где указанный по меньшей мере один район выбран из группы, состоящей из А, С, F и Н, определенных в SEQ ID 7 или 8 фиг. 2. 8. The conjugate of claim 7, wherein said at least one region is selected from the group consisting of A, C, F, and H, as defined in SEQ ID 7 or 8 of FIG. 2.
9. Конъюгат по п.8, где не менее одного аминокислотного остатка в положениях, соответствующих 20, 21, 24 и 27 в районе А, определенном в SEQ ID N7 и N8 фиг.2, заменены соответствующими аминокислотными остатками в районе А одного или нескольких дополнительных суперантигенов дикого типа. 9. The conjugate of claim 8, where at least one amino acid residue at positions corresponding to 20, 21, 24, and 27 in region A as defined in SEQ ID N7 and N8 of FIG. 2 is replaced by corresponding amino acid residues in region A of one or more additional wild type superantigens.
10. Конъюгат по любому из пп. 6-9, где первый суперантиген дикого типа представляет собой SEE и дополнительный суперантиген дикого типа представляет собой SEA. 10. The conjugate according to any one of paragraphs. 6-9, wherein the first wild-type superantigen is SEE and the additional wild-type superantigen is SEA.
11. Конъюгат по любому из пп. 7-10, где замены одной или нескольких аминокислот находятся в положениях, соответствующих положениям 20, 21, 24, 27 (для района А) и/или 60, 62 (для района С) и/или 11, 114, 115, 117, 118, 124, 126 (для района F) b.bkb 200, 206, 207, (для района Н), определенных в SEQ ID N7 и N8 фиг.2, причем предпочтительно, чтобы остаток был замещен во всех 4 положениях в районе А в случае, когда первый суперантиген представляет собой SEE, а один или более дополнительных суперантигенов представляют собой SEA. 11. The conjugate according to any one of paragraphs. 7-10, where the substitutions of one or more amino acids are in the positions corresponding to the provisions of 20, 21, 24, 27 (for region A) and / or 60, 62 (for region C) and / or 11, 114, 115, 117, 118, 124, 126 (for region F) b.bkb 200, 206, 207, (for region H) defined in SEQ ID N7 and N8 of FIG. 2, and it is preferred that the residue is substituted in all 4 positions in region A in the case where the first superantigen is SEE and one or more additional superantigens are SEA.
12. Конъюгат по любому из пп. 1-11, где суперантигены дикого типа выбраны из суперантигенов, требующих иона цинка для связывания антигенов МНС Класса II, и где первый суперантиген дикого типа в случае его присутствия в конъюгате имеет последовательность, в которой аминокислотный остаток в положении, участвующем в связывании с ионом цинка, заменен для снижения этой способности связывания, с предпочтением положений 225 и/или 227, как показано в SEQ ID N7 и N8 в фиг.2. 12. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-11, where the wild-type superantigens are selected from superantigens that require a zinc ion to bind MHC Class II antigens, and where the first wild-type superantigen, if present in the conjugate, has a sequence in which the amino acid residue at the position involved in binding to the zinc ion replaced to reduce this binding ability, with preference being given to positions 225 and / or 227, as shown in SEQ ID N7 and N8 in FIG. 2.
13. Конъюгат по любому из пп. 1-12, где отыскивающая мишень часть молекулы является антителом, в частности, активным фрагментом антитела. 13. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-12, where the target part of the molecule is an antibody, in particular, an active fragment of an antibody.
14. Конъюгат по любому из пп. 1-13, где указанная отыскивающая мишень часть молекулы представляет собой фрагмент Fab. 14. The conjugate according to any one of paragraphs. 1-13, where the specified target-seeking part of the molecule is a Fab fragment.
15. Способ лечения заболевания млекопитающего путем активации его иммунной системы, предусматривающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества суперантигена, содержащего первый суперантиген дикого типа, который был модифицирован заменой одного или нескольких аминокислотных остатков по меньшей мере в одном районе, который i. присутствует в аминокислотной последовательности первого суперантигена дикого типа и ii. функционирует в определении связывания с TCR и последующей активации субпопуляции Т-клеток. 15. A method of treating a disease of a mammal by activating its immune system, comprising administering to the mammal a therapeutically effective amount of a superantigen containing a first wild-type superantigen that has been modified by replacing one or more amino acid residues in at least one region that i. present in the amino acid sequence of the first wild-type superantigen and ii. functions in determining binding to TCR and subsequent activation of a subpopulation of T cells.
16. Способ по п.16, где модифицированный суперантиген представляет собой химерный суперантиген между первым суперантигеном дикого типа и одним или несколькими дополнительными суперантигенами дикого типа, в том смысле, что один или каждый из нескольких аминокислотных остатков по меньшей мере в одном районе первого суперантигена дикого типа был заменен соответствующим аминокислотным остатком, присутствующим в соответствующем районе одного или нескольких дополнительных суперантигенов дикого типа. 16. The method according to clause 16, where the modified superantigen is a chimeric superantigen between the first wild-type superantigen and one or more additional wild-type superantigens, in the sense that one or each of several amino acid residues in at least one region of the first wild-type superantigen type was replaced by the corresponding amino acid residue present in the corresponding region of one or more additional wild-type superantigens.
17. Способ по любому из пп. 15-16, где заболевание связано с клетками, экспрессирующими структуру-мишень поверхности, которая связывается с суперантигеном в эпитопе, структурно отличающемся от эпитопа, связывающегося с TCR с последующей активацией Т-клеток. 17. The method according to any one of paragraphs. 15-16, where the disease is associated with cells expressing a target structure of a surface that binds to a superantigen in an epitope structurally different from an epitope that binds to TCR followed by activation of T cells.
18. Способ по любому из пп. 15-17, где заболевание выбрано из группы, состоящей из раковых заболеваний, вирусных инфекций, паразитарных инвазий и аутоиммунных заболеваний. 18. The method according to any one of paragraphs. 15-17, where the disease is selected from the group consisting of cancer, viral infections, parasitic infestations and autoimmune diseases.
19. Способ по любому из пп. 15-18, где суперантигены дикого типа выбраны из группы, состоящей из SEA, SED, SEE и аналогичных суперантигенов. 19. The method according to any one of paragraphs. 15-18, where wild-type superantigens are selected from the group consisting of SEA, SED, SEE and similar superantigens.
20. Способ по п. 19, где по меньшей мере один район выбран из группы, состоящей из районов, соответствующих районам А, С, F или Н, определенных в SEQ ID N7 и N8 фиг.2. 20. The method of claim 19, wherein at least one region is selected from the group consisting of regions corresponding to regions A, C, F, or H defined in SEQ ID N7 and N8 of FIG. 2.
21. Способ по любому из пп. 15-20, где первый суперантиген дикого типа представляет собой SEE и по меньшей мере один район выбран из группы состоящих из районов А, С, F и Н, определенных в SEQ ID N8 фиг.2. 21. The method according to any one of paragraphs. 15-20, where the first wild-type superantigen is SEE and at least one region is selected from the group consisting of regions A, C, F, and H defined in SEQ ID N8 of FIG. 2.
22. Способ по п. 21, где по меньшей мере один район представляет район А и где были сделаны следующие замены аминокислотных остатков: R20G, N21T, S24G и R27K, где положения соответствуют положениям, определенным в SEQ ID N8 в фиг.2. 22. The method according to p. 21, where at least one region represents region A and where the following substitutions of amino acid residues were made: R20G, N21T, S24G and R27K, where the positions correspond to the positions defined in SEQ ID N8 in figure 2.
23. Способ по любому из пп. 15-22, где по меньшей мере один суперантиген дикого типа представляет собой SEA. 23. The method according to any one of paragraphs. 15-22, where at least one wild-type superantigen is SEA.
24. Способ по пп. 15-23, где суперантиген представляет собой конъюгат по любому из пп. 1-14. 24. The method according to PP. 15-23, where the superantigen is a conjugate according to any one of paragraphs. 1-14.
25. Способ по п. 24, где суперантигены дикого типа были выбраны среди суперантигенов, которые требуют связывания с ионами цинка для связывания с МНС Класса II, и аминокислотный остаток последовательности первого суперантигена дикого типа был заменен в положении, участвующим в связывании с цинком, для снижения способности связывания МНС Класса II. 25. The method of claim 24, wherein the wild-type superantigens were selected among superantigens that require binding to zinc ions to bind to MHC Class II, and the amino acid residue of the sequence of the first wild-type superantigen was replaced at the position involved in zinc binding, for decreased ability to bind MHC Class II.
26. Способ по п. 25, где указанное положение соответствует положению 227, определенному в SEQ ID N7 и N8, с предпочтением мутации D227A. 26. The method of claim 25, wherein said position corresponds to position 227 defined in SEQ ID N7 and N8, with preference for mutation D227A.
27. Способ по любому из пп. 24-26, где отыскивающая мишень часть молекулы представляет собой фрагмент Fab, в котором каждый остаток цистеина, обеспечивающий связь между цепями, был заменен аминокислотным остатком, не допускающим образование связи между цепями, с предпочтением, отдаваемым серину в качестве заменяющего аминокислотного остатка. 27. The method according to any one of paragraphs. 24-26, where the target-searching portion of the molecule is a Fab fragment in which each cysteine residue providing a link between the chains has been replaced by an amino acid residue that does not allow linking between the chains, with serine being preferred as a substitute amino acid residue.
28. Фармацевтическая композиция, содержащая модифицированное антитело, в котором цистеины, обеспечивающие межцепочечные цистиновые связи в нативном антителе, были заменены для прекращения образования цистина. 28. A pharmaceutical composition comprising a modified antibody in which cysteines providing interchain cystine bonds in a native antibody have been replaced to stop cystine formation.
29. Фармацевтическая композиция по п. 28, где заменяющим остатком является остаток серина. 29. The pharmaceutical composition according to p. 28, where the replacement residue is a serine residue.
30. Фармацевтическая композиция по п. 29, где антитело представляет собой фрагмент Fab. 30. The pharmaceutical composition of claim 29, wherein the antibody is a Fab fragment.
31. Фармацевтическая композиция по п. 30, где антитело слито с пептидной частью, обеспечивающий активацию Т-клеток Vβ-специфическим образом. 31. The pharmaceutical composition according to p. 30, where the antibody is fused to the peptide portion, providing for the activation of T cells in a Vβ-specific manner.