RU97113723A - Мутантные люциферазы - Google Patents
Мутантные люциферазыInfo
- Publication number
- RU97113723A RU97113723A RU97113723/13A RU97113723A RU97113723A RU 97113723 A RU97113723 A RU 97113723A RU 97113723/13 A RU97113723/13 A RU 97113723/13A RU 97113723 A RU97113723 A RU 97113723A RU 97113723 A RU97113723 A RU 97113723A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- amino acid
- luciola
- residue
- luciferase
- paragraphs
- Prior art date
Links
- 108060001084 Luciferase family Proteins 0.000 title claims 17
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 claims 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 15
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 8
- 241000254060 Aquatica lateralis Species 0.000 claims 7
- 241000254054 Luciola cruciata Species 0.000 claims 6
- 241001124207 Luciola mingrelica Species 0.000 claims 6
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims 5
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 claims 5
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 claims 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 4
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 claims 4
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims 2
- 229960000310 ISOLEUCINE Drugs 0.000 claims 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 2
- 241000254056 Luciola Species 0.000 claims 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 claims 2
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 1
- 241000254058 Photinus Species 0.000 claims 1
- 241001340896 Pyralis Species 0.000 claims 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 230000002209 hydrophobic Effects 0.000 claims 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 claims 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 1
Claims (24)
1. Белок, обладающий люциферазной активностью и имеющий примерно 60% гомологию аминокислотной последовательности с люциферазой из Photinus pyralis, Luciola mingrelica, Luciola cruciata или Luciola lateralis, отличающийся тем, что аминокислотный остаток, соответствующий остатку 270 в Photinus pyrolis люциферазе или остатку 272 в Luciola mingrelica, Luciola cruciata и Luciola lateralis люциферазах представляет собой аминокислоту, отличную от глютамата.
2. Белок по п. 1, отличающийся тем, что он содержит аминокислотную последовательность F/1/XE/2/FL, в которой (1) представляет собой Д или Е, (2) представляет собой Т или L, а Х представляет собой аминокислотный остаток, отличный от глютамата.
3. Белок по п. 2, отличающийся тем, что он содержит аминокислотную последовательность ТРХGДДКРGА, в которой Х представляет собой аминокислотный остаток, отличный от глютамата.
4. Белок по пп. 1, 2 или 3, отличающийся тем, что аминокислотный остаток Х представляет собой лизин.
5. Белок по любому из пп. 1-4, в котором аминокислотный остаток, соответствующий остатку 215 в Photinus pyralis люциферазе или остатку 217 в Luciola mingrelica, Luciola cruсiаtа или Luciola lateralis люциферазах представляет собой остаток гидрофобной аминокислоты.
6. Белок по п. 5, в котором остаток, соответствующий остатку 215 Photinus pyralis люциферазы или остатку 217 Luciola mingrelica, Luciola cruciata или Luciola lateralis люцифераз представляет собой один из остатков выбранных из изолейцина, лейцина или валина, или аналог любого из них.
7. Белок по любому из пп. 1-6, в котором аминокислотный остаток, соответствующий остатку 354 Photinus pyralis люциферазы или остатку 356 Luciola mingrelica, Luciola cruciata или Luciola lateralis люцифераз представляет собой аминокислотный остаток, отличный от глютамата.
8. Белок по п. 7, в котором остаток, соответствующий остатку 354 Photinus pyralis люциферазы или остатку 356 Luciola mingrelica, Luciola cruciata или Luciola lateralis люцифераз представляет собой один из остатков, выбранный из лизина, аргинина, лейцина, изолейцина, или гистидина или аналог любого из них.
9. Белок, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ 1Д 2, в которой Хаа представляет собой лизин.
10. ДНК, кодирующая белок по любому из пп. 1-9.
11. ДНК по п. 10, содержащая нуклеотидную последовательность, описанную в SEQ 1Д 1, в которой три основания N в положениях 811-813 образуют кодон, кодирующий аминокислоту, отличную от глютамата.
12. ДНК по п. 11, в которой кодон кодирует лизин.
13. Вектор, содержащий luc ген, кодирующий белок по любому из пп. 1-9.
14. Вектор по п. 13, получаемый в результате обработки вектора, содержащего luc ген дикого типа или рекомбинантный luc ген путем сайт-направленного мутагенеза для замены кодона, ответственного за кодирование глютамата в положении 270 Photalis pyralis люциферазы или глютамата в положении 270 Luciola mingrelica, Luciola cruciata или Luciola lateralis люцифераз на другую аминокислоту.
15. Вектор по п. 14, в котором другая аминокислота представляет собой лизин.
16. Вектор по любому из пп. 13-15, выбранный из рКК223-3, рДR540 и рТ7-7, в которые лигирован luc ген.
17. Клетка, способная к экспрессии белка по любому из пп. 1-9, содержащего ДНК или вектор по любому из пунктов 10-16.
18. Клетка по п. 17, представляющая собой E.coli или S.cerevisiae.
19. Тест-набор для выполнения анализа посредством измерения АТФ, отличающийся тем, что он содержит белок по любому из пп. 1-9, находящийся в люминесцентном реагенте.
20. Способ анализа, в котором АТФ измеряют с использованием люциферина и люциферазы с целью генерации света, количество которого связано с количеством АТФ, отличающийся тем, что люцифераза представляет собой белок по любому из пп. 1-9.
21. Метод анализа по п. 20, в котором анализ проводят при 30 - 70oС.
22. Метод анализа по п. 20, в котором анализ проводят при 37 - 60oС.
23. Метод анализа по п. 20, в котором анализ проводят при 40 - 50oС.
24. Белок, содержащий аминокислотную последовательность, описанную в SEQ 1Д 2, в которой Хаа выбирают из аргинина, глютамина и аланина.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9501172.2A GB9501172D0 (en) | 1995-01-20 | 1995-01-20 | Luciferases |
| GB9501172.2 | 1995-04-24 | ||
| GB9508301.0 | 1995-04-24 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU97113723A true RU97113723A (ru) | 1999-06-20 |
| RU2210594C2 RU2210594C2 (ru) | 2003-08-20 |
Family
ID=10768344
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU97113723A RU2210594C2 (ru) | 1995-01-20 | 1996-01-19 | Мутантная люцифераза (варианты), днк, кодирующая указанную люциферазу, и вектор для экспрессии указанного белка |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| GB (1) | GB9501172D0 (ru) |
| RU (1) | RU2210594C2 (ru) |
| ZA (1) | ZA96453B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2757736C1 (ru) * | 2020-08-17 | 2021-10-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук" (ФИЦ КНЦ СО РАН, КНЦ СО РАН) | Мутантная копеподная люцифераза для применения в качестве биолюминесцентного репортера in vitro и in vivo |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2639539C2 (ru) * | 2015-12-29 | 2017-12-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Репортерная система на основе лентивирусных репортерных конструкций для изучения белок-белковых взаимодействий |
-
1995
- 1995-01-20 GB GBGB9501172.2A patent/GB9501172D0/en active Pending
-
1996
- 1996-01-19 RU RU97113723A patent/RU2210594C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-01-19 ZA ZA96453A patent/ZA96453B/xx unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2757736C1 (ru) * | 2020-08-17 | 2021-10-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук" (ФИЦ КНЦ СО РАН, КНЦ СО РАН) | Мутантная копеподная люцифераза для применения в качестве биолюминесцентного репортера in vitro и in vivo |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU96119246A (ru) | Люциферазы | |
| CA2186144A1 (en) | Luciferases | |
| US11365436B2 (en) | Synthetic oplophorus luciferases with enhanced light output | |
| US6552179B1 (en) | Mutant luciferases | |
| US6171808B1 (en) | Mutant luciferases | |
| JP4999341B2 (ja) | 変異型ホタルルシフェラーゼ、遺伝子、組換えベクター、形質転換体、及び変異型ホタルルシフェラーゼの製造方法 | |
| JP2003512071A5 (ru) | ||
| CA2283287A1 (en) | Enzyme assays | |
| GB9925162D0 (en) | Novel enzyme | |
| RU2002113653A (ru) | Новый фермент | |
| WO2011058767A1 (ja) | ホタルルシフェラーゼ、その遺伝子、およびホタルルシフェラーゼの製造法 | |
| US6387675B1 (en) | Mutant luciferases | |
| RU97113723A (ru) | Мутантные люциферазы | |
| RU2210594C2 (ru) | Мутантная люцифераза (варианты), днк, кодирующая указанную люциферазу, и вектор для экспрессии указанного белка | |
| JP2011050257A (ja) | 安定化赤色発光ルシフェラーゼ変異体 | |
| MXPA96004194A (en) | Lucifera |