Claims (11)
1. Способ электрохимической индикации иммунохимически активных макромолекул в исследуемых растворах, предусматривающий формирование иммуночувствительного сенсора с мембраной с иммобилизованными в нее специфическими рецепторами, составление электрохимической измерительной ячейки из связанных измерительным прибором иммуночувствительного сенсора и электрода сравнения, помещение последних в рабочий раствор и определение смещения значения изоэлектрической точки мембраны в зависимости от содержания определяемых макромолекул в исследуемом растворе путем измерения напряжения на ячейке при ступенчатом изменении ионной силы рабочего раствора, отличающийся тем, что мембрану формируют из электропроводящего полимера путем электрохимического синтеза из раствора мономера с помещенными в последний специфическими рецепторами на поверхности электрода для потенциометрических измерений, при этом для определения смещения изоэлектрической точки мембраны добавляют в рабочий раствор исследуемый раствор с большей, чем у рабочего раствора ионной силой при постоянном значении pH рабочего раствора.1. A method for the electrochemical indication of immunochemically active macromolecules in the studied solutions, providing for the formation of an immunosensitive sensor with a membrane with specific receptors immobilized into it, compiling an electrochemical measuring cell from an immunosensitive sensor and a reference electrode connected by a measuring device, placing the latter in the working solution and determining the bias of the value of the isoelectric point membranes depending on the content of determined macromolecules in an edible solution by measuring the voltage on the cell with a stepwise change in the ionic strength of the working solution, characterized in that the membrane is formed from an electrically conductive polymer by electrochemical synthesis from a monomer solution with specific receptors placed on the electrode surface for potentiometric measurements, while determining the isoelectric point displacement membranes add the test solution with greater ionic strength than the working solution with a constant and pH of the working solution.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве мономера для электрохимического синтеза мембраны используют анилин, тиофен, фуран, пиррол. 2. The method according to claim 1, characterized in that aniline, thiophene, furan, pyrrole are used as a monomer for the electrochemical synthesis of the membrane.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве специфических рецепторов используют моноклональные и поликлональные антитела, вирусные лизаты, рекомбинантные белки, синтетические пептиды, гормоны, однонитиевые молекулы ДНК, фрагменты микробных, растительных и животных клеток, целые микробные клетки, различные химические соединения, коньюгированные с инертными белками (гаптены). 3. The method according to claim 1, characterized in that monoclonal and polyclonal antibodies, viral lysates, recombinant proteins, synthetic peptides, hormones, single-stranded DNA molecules, fragments of microbial, plant and animal cells, whole microbial cells, are used as specific receptors chemical compounds conjugated with inert proteins (haptens).
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве исследуемого раствора с большей чем у рабочего раствора ионной силой используют биологические жидкости, такие как сыворотки крови, лимфа, моча, слюна, сперма. 4. The method according to claim 1, characterized in that biological fluids, such as blood serum, lymph, urine, saliva, sperm, are used as the test solution with greater ionic strength than the working solution.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что введение исследуемого раствора с большей чем у рабочего раствора ионной силой в электрохимическую ячейку осуществляют путем добавления непосредственно в емкость с рабочим раствором. 5. The method according to claim 1, characterized in that the introduction of the test solution with a greater ionic strength than the working solution in the electrochemical cell is carried out by adding directly to the container with the working solution.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что введение исследуемого раствора с большей чем у рабочего раствора ионной силой в электрохимическую ячейку осуществляют путем переноса иммуночувствительного сенсора и электрода сравнения из емкости с чистым рабочим раствором в емкость, содержащую рабочий раствор и раствор с большей ионной силой. 6. The method according to claim 1, characterized in that the introduction of the test solution with a greater ionic strength than the working solution in the electrochemical cell is carried out by transferring an immunosensitive sensor and a reference electrode from a container with a clean working solution to a container containing a working solution and a solution with a larger ionic strength.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что для количественной оценки характера изменения величины напряжения на электрохимической ячейке используют разность между величинами фонового и конечного напряжений на электрохимической ячейке. 7. The method according to claim 1, characterized in that for the quantitative assessment of the nature of the change in the magnitude of the voltage on the electrochemical cell, the difference between the values of the background and final voltages on the electrochemical cell is used.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что для количественной оценки характера изменения величины напряжения на электрохимической ячейке используют разность между максимальной величиной напряжения на электрохимической ячейке, зарегистрированной при контакте иммуночувствительного сенсора с исследуемым раствором и величиной фонового напряжения на электрохимической ячейке. 8. The method according to claim 1, characterized in that for the quantitative assessment of the nature of the change in the magnitude of the voltage across the electrochemical cell, the difference between the maximum magnitude of the voltage across the electrochemical cell recorded upon contact of the immunosensitive sensor with the test solution and the value of the background voltage across the electrochemical cell is used.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что для количественной оценки характера изменения величины напряжения на электрохимической ячейке используют разность между максимальной величиной напряжения на электрохимической ячейке, зарегистрированной при контакте иммуночувствительного сенсора с исследуемым раствором и величиной конечного напряжения на электрохимической ячейке. 9. The method according to claim 1, characterized in that for the quantitative assessment of the nature of the change in the magnitude of the voltage across the electrochemical cell, the difference between the maximum magnitude of the voltage across the electrochemical cell recorded upon contact of the immunosensitive sensor with the test solution and the magnitude of the final voltage across the electrochemical cell is used.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что для количественной оценки характера изменения величины напряжения на электрохимической ячейке используют величину (в условных единицах) площади под кривой изменения во времени величины напряжения на электрохимической ячейке, полученной при контакте иммуночувствительного сенсора с исследуемым раствором. 10. The method according to claim 1, characterized in that for the quantitative assessment of the nature of the change in the magnitude of the voltage on the electrochemical cell, use (in arbitrary units) the area under the curve of the change in time of the magnitude of the voltage on the electrochemical cell obtained by contact of the immunosensitive sensor with the test solution.
11. Способ по п.1, отличающийся тем, что для количественной оценки характера изменения величины напряжения на электрохимической ячейке используют начальную, конечную, среднюю или максимальную скорости изменения величины напряжения на электрохимической ячейке при контакте иммуночувствительного сенсора с исследуемым раствором. 11. The method according to claim 1, characterized in that for the quantitative assessment of the nature of the change in the magnitude of the voltage on the electrochemical cell, the initial, final, average or maximum rate of change in the magnitude of the voltage on the electrochemical cell is used when the immunosensitive sensor contacts the test solution.