Claims (1)
Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для проверки токсических свойств коклюшных вакцинных препаратов, выпускаемых в серийное производство. Цель изобретения - повышение информативности и достоверности, а также ускорение и упрощение способа оценки токсичности коклюшных препаратов. Способ осуществляется следующим образом. К 1,0 мл взвеси перевиваемой моноцитоподобной линии клеток человека И 937 (4•106кл/мл) добавляют коклюшные препараты в разных дозировках (0,1 - 10,0 МОЕ для корпускулярных препаратов и 1,0 - 100,0 мкг по белку для отдельных антигенов коклюшного микроба или их комплексов) и через 5-7 ч совместного культивирования в термостате при 37°С на покровных стеклах в пенициллиновых флаконах с 1 мл среды 199, содержащей 20% сыворотки крупного рогатого скота, покровные стекла извлекают из пенициллиновых флаконов, промывают в растворе Хэнкса, фиксируют в смеси Никифорова, окрашивают по Романовскому-Гимзе, просматривают 300 клеток в световом микроскопе, определяют процент поврежденных клеток и по увеличению процента поврежденных клеток по сравнению с контролем оценивают токсичность коклюшных препаратов: 10-20% - слабо токсичен; 20-40% - токсичен; более 40% - очень токсичен. Предлагаемый cпособ более информативен, экономичен, сокращает сроки исследования токсичности коклюшных препаратов в 20 раз, не требует лабораторных животных, отличается высокой чувствительностью и хорошей воспроизводимостью.The invention relates to medical microbiology and can be used to test the toxic properties of pertussis vaccine preparations produced in mass production. The purpose of the invention is to increase the information content and reliability, as well as accelerating and simplifying the method for assessing the toxicity of pertussis drugs. The method is as follows. To 1.0 ml of the suspension of the transplanted monocyte-like human cell line And 937 (4 • 10 6 cells / ml), pertussis preparations are added in different dosages (0.1 - 10.0 MOU for corpuscular preparations and 1.0 - 100.0 μg per protein for individual pertussis microbial antigens or their complexes) and after 5-7 hours of co-cultivation in an incubator at 37 ° C on coverslips in penicillin vials with 1 ml of medium 199 containing 20% cattle serum, coverslips are removed from penicillin vials washed in Hanks solution, fixed in a mixture of Nikiforov , Stained according to Romanovsky-Gimza, scan cells 300 in the light microscope, the percentage of damaged cells and by an increase in percent of injured cells compared with the control evaluate the toxicity of pertussis preparations: 10-20% - slightly toxic; 20-40% - toxic; more than 40% - very toxic. The proposed method is more informative, economical, reduces the time of the study of the toxicity of pertussis drugs by 20 times, does not require laboratory animals, is highly sensitive and has good reproducibility.