Claims (1)
Изобретение относится к области микробиологии и касается методов быстрого и достоверного выявления сальмонелл в пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды, медицинских объектах. Известные методы индикации сальмонелл основаны на использовании сальмонеллезных поливалентных О- и Н-сывороток, характеризующихся недостаточной специфичностью из-за наличия перекрестных антигенных связей сальмонелл с другими энтеробактериями, кроме того известные методы характеризуются длительным сроком исследования (5 - 7 сут). Задача изобретения заключалась в разработке способа получения поливалентной сальмонеллезной Н-сыворотки более высокой специфичности и чувствительности, позволяющей выявлять сальмонеллы при минимальной длительности анализа, большей объективности результатов, минимальной трудоемкости и стоимости анализа. Технический результат достигается разработкой полиантигена оптимального состава, обеспечивающего спектр из 31 Н-антигена, охватывающего весь род сальмонелл при максимальном снижении титра сопутствующих неспецифических О-антигенов. Полученным полиантигеном производится гипериммунизация кроликов при внутривенном заражении двумя циклами в возрастающих объемах антигенов (0,3 - 3,0) мл с 4 - 5 дневными интервалами. Н-сыворотка, характеризующаяся практическим отсутствием примеси О-антител, имеет титр 1 : 3200 - 1 : 12800, что позволяет ее использовать как родоспецифическую. Сыворотка позволяет выявлять сальмонеллы в количестве 1 клетки на 50 г продукта, а также в смешанной культуре без дополнительного биохимического тестирования. Индикация сальмонелл осуществляется с помощью разработанной поливалентной Н-сыворотки в реакции агглютанации с чистой или смешанной культурой сальмонелл на плотных селективных средах. При этом накопительную культуру на жидких средах получают в условиях премешивания (порядка 150 - 180 оборотов в мин). Продолжительность анализа 1 - 2 сут. Метод апробирован на продуктах микробиологической промышленности, объектах медицинских и окружающей среды с получением положительных результатов.The invention relates to the field of microbiology and relates to methods for the rapid and reliable detection of Salmonella in food, feed, environmental objects, medical facilities. The known methods of indication of Salmonella are based on the use of Salmonella polyvalent O- and H-sera, characterized by a lack of specificity due to the presence of cross-antigenic bonds of Salmonella with other enterobacteria, besides the known methods are characterized by a long study period (5-7 days). The objective of the invention was to develop a method of obtaining polyvalent Salmonella H-serum of higher specificity and sensitivity, allowing to identify Salmonella with a minimum duration of analysis, greater objectivity of the results, the minimum complexity and cost of analysis. The technical result is achieved by the development of a polyantigen of optimal composition, providing a spectrum of 31 H-antigens covering the entire genus of Salmonella while minimizing the titer of the associated nonspecific O-antigens. The resulting polyantigene produces hyperimmunization of rabbits during intravenous infection with two cycles in increasing volumes of antigens (0.3–3.0) ml with 4–5 day intervals. H-serum, characterized by the practical absence of admixture of O-antibodies, has a titer of 1: 3200 - 1: 12800, which allows its use as genus-specific. Serum allows you to identify Salmonella in the amount of 1 cell per 50 g of the product, as well as in a mixed culture without additional biochemical testing. Salmonella is indicated by the developed polyvalent H-serum in the agglutination reaction with a pure or mixed Salmonella culture in dense selective media. In this case, an accumulative culture in liquid media is obtained under mixing conditions (about 150 - 180 revolutions per minute). The duration of the analysis is 1 - 2 days. The method is tested on products of the microbiological industry, medical and environmental objects with obtaining positive results.