RU73975U1 - Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами - Google Patents

Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами Download PDF

Info

Publication number
RU73975U1
RU73975U1 RU2007144733/22U RU2007144733U RU73975U1 RU 73975 U1 RU73975 U1 RU 73975U1 RU 2007144733/22 U RU2007144733/22 U RU 2007144733/22U RU 2007144733 U RU2007144733 U RU 2007144733U RU 73975 U1 RU73975 U1 RU 73975U1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
biosensor
arxula adeninivorans
organic substances
water pollution
yeast
Prior art date
Application number
RU2007144733/22U
Other languages
English (en)
Inventor
Татьяна Николаевна Кувичкина
Екатерина Александровна Воронова
Павел Владимирович Ильясов
Анна Евгеньевна Китова
Елена Викторовна Емельянова
Анатолий Николаевич Решетилов
Original Assignee
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН filed Critical Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН
Priority to RU2007144733/22U priority Critical patent/RU73975U1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU73975U1 publication Critical patent/RU73975U1/ru

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Полезная модель относится к области охраны окружающей среды и биотехнологии, а именно к устройствам для экспресс-анализа проб сточных вод (муниципальных и промышленных), образцов воды, полученных из объектов окружающей среды (реки, озера, водохранилища).
Предложен биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами на основе определения биологического (биохимического) потребления кислорода (БПК), включающий электрод Кларка, сопряженный с биорецептором, содержащим иммобилизованные на носителе клетки штамма дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или клетки штамма дрожжей Arxula adeninivorans ВГИ 78(6).

Description

Полезная модель относится к области охраны окружающей среды и биотехнологии, а именно к устройствам для экспресс-анализа проб сточных вод (муниципальных и промышленных), образцов воды, полученных из объектов окружающей среды (реки, озера, водохранилища).
Известны биосенсоры, определяющие в водной среде органические соединения, относящиеся к поверхностно-активным веществам [RU 2092838, 1997.10.10, G01N 33/18]. Одним из параметров, определяющим общую загрязненность проб воды органическими веществами, является биологическое (биохимическое) потребление кислорода (БПК).
В настоящее время в России в лабораториях тепловодоканала используют метод определения БПК5. БПК - параметр качества воды, определяемый как количество кислорода, необходимое для биохимического окисления содержащихся в воде органических соединений. В стандартном случае БПК измеряют в течение 5 суток при температуре 20°С [Методика технологического контроля работы очистных сооружений городской канализации. Москва. Стройиздат 1977 г.].
Длительное время анализа является недостатком стандартного метода оценки БПК при определении загрязненности воды.
В случае, если БПК равна 2-3 г O2/л, то вода признается чистой и может быть сброшена в реку. При больших значениях БПК необходима дополнительная очистка воды.
В соответствии с мировой практикой эффективным подходом для оценки загрязненности воды является биосенсорный. За рубежом в анализаторах подобного типа в качестве биорецептора применяются дрожжевые штаммы Arxula adeninivorans для определения БПК. Так в работе [С.Chan, M.Lehmann, K.Chan, P.Chan, В.Gruendig, G.Kunze and R.Renneber. Designing an amperometric thick-film microbial BOD sensor //
Biosens. Bioelectron. 2000. V.15. №7-8. P.343-353] используют штамм Arxula adeninivorans LS3.
Однако чувствительность биосенсора с использованием указанного штамма к действию моноароматических соединений и ПАВ не известна.
Задача, на решение которой направлена заявляемая полезная модель - создание устройства для определения загрязненности воды органическими веществами.
Технический результат, который может быть получен при использовании полезной модели, заключается в том, что предлагаемый биосенсор обеспечивает быстрое определение загрязненности воды органическими веществами.
Сущность полезной модели заключается в том, что биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами включает кислородный электрод Кларка, сопряженный с биорецептором, содержащим иммобилизованные на носителе клетки штаммов дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или Arxula adeninivorans ВГИ 78(6).
Штамм дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 получен из Всероссийской коллекции культур (Catalogue of Microbial Cultures 2007. P.284, Pushchino 2007). Штамм дрожжей Arxula adeninivorans ВГИ 78(6) описан в работе В.И.Голубева: Таксонометрическая характеристика дрожжей, используемых в гидролизно-дрожжевых производствах // Прикл. биохимия и микробиология. 1994. Т.30. Вып.1. С.132-136.
Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами включает электрод Кларка 1, на котором размещен биорецептор 2, содержащий иммобилизованные на носителе клетки штаммов дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или Arxula adeninivorans ВГИ 78(6) с помощью фиксатора 3.
В экспериментах по созданию биосенсора в качестве контрольного раствора используют глюкозо-глутаматную смесь (ГГС). Концентрация ГГС
равная 0.15 г/л соответствует БПК 220 г О2/л [Stuart E. Strand, Dale A. Carlson. Rapid BOD measurement for municipal wastewater samples using a biofilm electrode // Journal Water Pollution Control Federation. 1984. V.56. №5].
Диапазон детекции БПК составляет 30-1000 мг/л, операционная стабильность 4 суток без потери активности, продолжительность анализа 10 мин, ошибка измерения не более 5%.
На фиг.1 представлена схема биосенсора для определения загрязненности воды органическими веществами путем определения биохимического (биологического) потребления кислорода (БПК). На фиг.2 представлены калибровочные зависимости ответа (нА/с) биосенсоров на основе дрожжевых клеток Arxula adeninivorans BKM Y-2676 и Arxula adeninivorans ВГИ 78(6) от концентрации БПК (мг/л). Диапазон детекции БПК составил 30-1000 мг/л.
В качестве носителя для клеток, используемых в биорецепторе, могут использоваться полисахаридные гели, поливиниловые спирты, целлюлозные мембраны, стекловолокна, в частности стеклобумага.
Для создания биорецептора используют штамм дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или Arxula adeninivorans ВГИ 78(6). Штаммы обладают широкой субстратной специфичностью при окислении органических соединений (фиг.3). Расширен спектр определяемых соединений: додецилсульфат натрия, бензоат и катехол.
Штаммы дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 и поддерживают на сусло-агаре при 4°С. Для засева используют 2-3-х суточные культуры на скошенном сусло-агаре. Для получения биомассы культивирование дрожжей проводят в жидкой среде следующего состава, г/л: глюкоза 5.0; пептон 2.5; дрожжевой экстракт 0.5 в витаминных пробирках по 10 мл среды при 37°С на качалке (220 об/мин) в течение 40 часов. Дрожжи отделяют центрифугированием при 12000 об/мин в течение 5 мин, дважды промывают 30 мМ натрий-фосфатным буфером (рН 7.6). Дрожжевые клетки ресуспендируют в том же буфере и иммобилизуют на носителе.
Иммобилизацию дрожжевых клеток проводят методом физической адсорбции на хроматографической бумаге Wathman GF/A (Великобритания). Клеточную суспензию (100 мг сырого веса/мл) наносят микропипеткой по 10 мкл на полоску стеклобумаги, формируя пятно диаметром 3-5 мм и высушивают на воздухе в течение 30 мин. Полученный биорецептор помещают на рабочую поверхность электрода и фиксируют.
Принцип определения загрязненности воды органическими веществами основан на измерении скорости потребления кислорода клетками штамма дрожжей в процессе окисления органических соединений, содержащихся в образце.
Биосенсор для определения работает следующим образом. Электрод Кларка 1 с размещенным на нем биорецептором 2, содержащим иммобилизованные клетки штамма дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или Arxula adeninivorans ВГИ 78(6), погружают в измерительную ячейку с 30 мМ натрий-фосфатным буферным раствором (рН 7.6) и регистрируют силу тока, отражающую содержание кислорода в среде (фоновое).
Добавляют аликвоту анализируемого образца и регистрируют потребление кислорода. Рассчитывают величину изменения максимальной скорости потребления кислорода (ответ сенсора, dI/dt, нА/с) и определяют содержание ВПК по предварительно построенной калибровочной кривой (фиг.2). БПК определяют, зная, что 0.15 г/л ГГС соответствует 220 г О2/л. Измерения проводят при комнатной температуре и постоянном перемешивании.
Таким образом, предлагаемый биосенсор на основе штаммов дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или Arxula adeninivorans ВГИ 78(6) обеспечивает быстрое определение загрязненности воды органическими веществами и не требует больших затрат на изготовление.
Кроме того, биосенсор может быть использован в полевых условиях.

Claims (1)

  1. Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами, включающий электрод Кларка, сопряженный с биорецептором, содержащим иммобилизованные на носителе клетки дрожжей вида Arxula adeninivorans, отличающийся тем, что клетками дрожжей являются клетки штамма дрожжей Arxula adeninivorans BKM Y-2676 или клетки штамма дрожжей Arxula adeninivorans ВГИ 78(6).
    Figure 00000001
RU2007144733/22U 2007-12-05 2007-12-05 Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами RU73975U1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007144733/22U RU73975U1 (ru) 2007-12-05 2007-12-05 Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007144733/22U RU73975U1 (ru) 2007-12-05 2007-12-05 Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU73975U1 true RU73975U1 (ru) 2008-06-10

Family

ID=39581746

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007144733/22U RU73975U1 (ru) 2007-12-05 2007-12-05 Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU73975U1 (ru)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2650634C1 (ru) * 2017-06-20 2018-04-16 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВО "КубГУ") Биосенсор для определения наличия органических веществ в воде
RU205304U1 (ru) * 2021-04-12 2021-07-08 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) Устройство для экспресс-анализа загрязненности воды биоразлогаемыми органическими соединениями
RU210524U1 (ru) * 2021-11-08 2022-04-19 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) Устройство для экспресс-определения токсичности поверхностных вод

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2650634C1 (ru) * 2017-06-20 2018-04-16 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВО "КубГУ") Биосенсор для определения наличия органических веществ в воде
RU205304U1 (ru) * 2021-04-12 2021-07-08 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) Устройство для экспресс-анализа загрязненности воды биоразлогаемыми органическими соединениями
RU210524U1 (ru) * 2021-11-08 2022-04-19 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тульский государственный университет" (ТулГУ) Устройство для экспресс-определения токсичности поверхностных вод

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Arlyapov et al. BOD biosensor based on the yeast Debaryomyces hansenii immobilized in poly (vinyl alcohol) modified by N-vinylpyrrolidone
Wang et al. An innovative reactor-type biosensor for BOD rapid measurement
Niyomdecha et al. A novel BOD biosensor based on entrapped activated sludge in a porous chitosan-albumin cryogel incorporated with graphene and methylene blue
CN110146580A (zh) 一种基于柿单宁复合纳米材料检测l,5-脱水葡萄糖醇的方法
Chen et al. A BOD biosensor based on a microorganism immobilized on an Al 2 O 3 sol–gel matrix
RU73975U1 (ru) Биосенсор для определения загрязненности воды органическими веществами
Lawal et al. Polypyrrole-based potentiometric phosphate biosensor
Velling et al. Non-steady response of BOD biosensor for the determination of biochemical oxygen demand in wastewater
RU129930U1 (ru) Биосенсор для определения органических веществ на основе адаптированных клеток gluconobacter oxydans вкм в-1280 и кислородного электрода типа кларка
RU106898U1 (ru) Устройство для экспресс-определения биохимического потребления кислорода
RU225914U1 (ru) Устройство для быстрого анализа биоразлагаемых органических соединений в водных объектах
RU2800373C1 (ru) Устройство для экспресс-оценки количества легкоокисляемых органических веществ по индексу биохимического потребления кислорода
RU101037U1 (ru) Биосенсор для оценки загрязненности сточных вод производства синтетических моющих средств
RU66815U1 (ru) Устройство для определения олиго- и полисахаридов
Chen et al. A novel biosensor for the rapid determination of biochemical oxygen demand
RU2823522C1 (ru) Штамм Rhodococcus fascians ВКМ Ac-2996 биорецепторный элемент биосенсора для определения биохимического потребления кислорода
Puri et al. An amperometric biosensor developed for detection of limonin levels in kinnow mandarin juices
RU217965U1 (ru) Устройство для определения фенольного индекса в водных средах
RU133126U1 (ru) Биосенсор для определения метиламина, диметиламина и триметиламина в водной среде
Mascini et al. Electrochemical biosensors for determination of nystatin activity
Hussin et al. A BOD Sensor Using Immobilized Microbial Consortium in Alginate–Based Matrix for Rapid Detection of River Water Pollution
RU134531U1 (ru) Устройство для определения содержания метанола и формальдегида на основе бактериального штамма methylobacterium dichloromethanicum дм 4 вкм в-2191
RU2823520C1 (ru) Штамм Arthrobacter halodurans ВКМ Ac-2997 биорецепторный элемент биосенсора для определения биохимического потребления кислорода
RU2086652C1 (ru) Способ количественного определения l-пролина
RU117918U1 (ru) Устройство для определения степени загрязнения воды биоразлогаемыми органическими веществами

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Utility model has become invalid (non-payment of fees)

Effective date: 20151206