RU38404U1 - Диагностический тест-набор для оценки состояния пищеварительной системы у детей - Google Patents

Description

2Q04102864мпк G oi N зз/48

. о . , о . . . .А 61 в 10/00

ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ТЕСТ - НАБОР ДЛЯ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ НИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ.

Нредлагаемая полезная модель относится к исследованию биологических жидкостей химическими способами и может быть использована в медицине для анализа слюны с целью оценки состояния пищеварительной системы у детей.

Оценка состояния пищеварительной системы у детей представляет актуальную проблему в связи с распространенностью и ростом гастроэнтерологической патологии и тенденцией к более раннему их возникновению в современной экологической ситуации. Известно, что чем раньше возникают гастроэнтерологические заболевания, тем тяжелее они протекают и тем чаще присоединяются осложнения. Ноэтому особенно важно их раннее выявление.

Носледними исследованиями установлено, что показателем состояния пищеварительной системы у ребенка может быть активность а-амилазы слюны.

Известно, что а-амилаза слюны - один из важнейших ферментов гидролиза углеводов (крахмала, декстринов, гликогена), являющихся главным источником энергии большинства клеток организма. Гидролиз углеводов начинается в ротовой полости. Слюнная амилаза составляет 40 % всей эндогенной амилазы, что свидетельствует о важном физиологическом значении амилазы, секретируемой слюнными железами.

и почти у половины (46%) детей дошкольного возраста при хронических дуоденитах, гастродуоденитах и сопровождается повышением антигенной нагрузки, нарушением баланса защитных факторов местного иммунитета (за счет снижения уровня IgA, повышения IgG, снижения лизоцимной активности), усилением дисбиотических нарушений, повреждением кишечного барьера и избыточным накоплением маркеров сенсибилизации (обшего IgE сыворотки и ЦИК). Снижение этого фермента требует назначения заместительной ферментотерапии.

В настояш;ее время в лабораторной диагностике используются две группы способов определения активности а-амилазы в биологических жидкостях.

Они основаны на различных принципах:

-сахарифицирующие - на определении образующихся из крахмала Сахаров (Энгельгардта - Герчука) (Асатиани B.C., Ферментные методы анализа. -М.: Наука, 1969. - 740с.);

-амилокластические (декстринирующие) - на определении остатка нерасщепленного крахмала по степени интенсивности его окраски с йодом (Смита - РОЭ, Самоги, Каравея). (Колб В.Г., Камыщников B.C. Справочник по клинической химии.Белорусь - 1982. - с. 126 - 134.)

Амилокластические способы более чувствительны и специфичны.

Оба способа используют для определения активности а-амилазы в крови и моче для выявления конкретных нарушений функции поджелудочной железы.

Известен способ определения амилолитической активности биологической жидкости («Декстринирующий метод определения активности амилазы в моче здоровых и больных острым панкреатитом Лабораторное дело, 1966, .№12 с. 744).

В пробирках готовят разведение мочи, затем добавляют буферный раствор и раствор крахмала. Смесь инкубируют при ЗТС в течении 20 минут. Реакцию гидролиза крахмала прекращают добавлением однонормального раствора НС1. Проводят индикацию рабочим раствором йода. Раствор в пробирках перемешивают и колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром. После чего проводят количественный расчет амилолитической активности мочи (в г/л ч), что отражает количество граммов крахмала гидролизуемого в одном литре за час. По данному показателю определяют наличие и степень выраженности панкреатита.

За прототип предлагаемого изобретения выбран способ определения активности амилазы слюны (Детская гастроэнтерология под редакцией А.А.Баранова, Е.В.Климанской, Г.В.Римарчук, - Москва, 2002,-с.18)., включающий использование стандартного набора лабораторного посуды и химических реагентов

Данный способ также основан на проведении количественного расчета амилолитической активности биологической жидкости (в г/л ч) и отражает состояние пищеварительной системы у детей. Способ трудоемкий, требует ежедневного приготовления реактивов, временных затрат, биохимического и специального лабораторного оборудования (термостат, ФЭК), предварительного центрифугирования при дополнительном разведении субстрата в 200 раз, что усложняет и снижает точность результатов.

Задачей предлагаемой полезной модели является упрощение и ускорение определения амилолитической активности слюны для оценки состояния пищеварительной системы у детей.

Для этого тест-система содержит набор лабораторной посуды и химических реактивов.

Полезную модель используют следующим образом:

1.На водяной бане готовят прозрачный 0,1% раствор растворимого крахмала.

2.Смачивают стандартные фильтры (обезволенные ФО-ФБ-03 белая лента средней фильтрации, диаметр фильтра 90 мм, ТУ 2642-00142624157-98) приготовленным раствором крахмала в чашках Петри по одному фильтру в чашке. Через 10 -15 минут после пропитывания фильтров избыток крахмала сливают и стряхивают до последней капли. Фильтры оставляют на сутки при комнатной температуре для высушивания. Их можно заготовить впрок и использовать в любое время.

3.На пропитанные и высушенные фильтры микродозатором наносят исследуемые образцы секрета ротовой полости по 20 мкл (0,02 мл). На одной чашке можно исследовать до 10 образцов.

4.Чашки Петри оставляют при комнатной температуре на 10 минут.

5.После экспозиции на поверхность фильтров наносят раствор йода в качестве индикатора до появления темно-синей окраски и в течении 3-5 минут регистрируют результаты исследования.

Оценивают степень гидролиза крахмала с использованием «шкалы оценки степени гидролиза по интенсивности окраски.

Предложенную скрининг - тест систему можно использовать для оценки состояния пиш;еварительной системы у детей начиная с периода новорожденности. При невозможности сплевывания слюны исследования осуществляют путем смачивания в полости рта стандартных дисков диаметром 10 мм. Смоченные слюной диски накладывают на фильтры, пропитанные раствором крахмала. После экспозиции и индикации йодным реактивом, диски снимают и регистрируют под ними степень гидролиза.

Результаты исследования верифицированы другими способами. При сравнении результатов исследования установлены совпадающие оценки у 97% обследованных.

Примеры конкретного иснользования.

1.В группе детского сада из 18 детей 4-5 лет проведено скрининговое обследование на амилолитическую активность слюны. У 7 детей выявлена сниженная амилолитическая активность слюны. Все дети прошли обследование в стационаре, где подтвердилось наличие гастродуоденальной патологии.

2.У 8 детей от 3 до 8 лет, впервые поступивших на обследование в гастроэнтерологическую клинику с жалобами на боли в животе, было проведено скрининговое обследование на амилолитическую активность слюны. У 4 детей на фоне спокойного аллергологического анамнеза выявлен дефицит амилазы слюны. В план обследования этих детей было включено аллергологическое консультирование. Диагноз подтвердился, у 2 из 4 больных гастродуоденальная патология протекала на фоне пищевой аллергии.

3.При обращении к гастроэнтерологу детской поликлиники 10 детьми с жалобами на боли в животе проведен скрининг-тест на амилолитическую активность слюны. У 3 детей при отсутствии данных за аллергию выявлен дефицит амилазы в слюне. В комплекс обследования этим детям включена консультация аллерголога. При углубленном обследовании выявлено, что у одного ребенка гастродуоденит протекал на фоне пищевой аллергии, у 2 детей имелась пищевая сенсибилизация. Всем детям назначена заместительная ферментотерапия препаратами, содержащими амилазу.

Преимущества полезной модели:

Предлагаемая полезная модель может быть использована для проведения скринингового обследования больших групп детского населения для выявления дефицита а-амилазы в слюне, что, наряду с анамнестическими данными, позволит отобрать больных для более глубокого обследования на предмет гастродуоденальной патологии и пищевой аллергии. По сравнению с лабораторно - диагностическим исследованием достигается следующий положительный эффект:

1.При достаточной информативности значительное упрощение исследования.

2.Сокращение времени исследования и возможность проведения массового обследования за короткий срок (до 100 исследований в течении трех часов) в любых условиях без термостата, центрифуги и ФЭК.

3.Отсутствие необходимости в специальной дорогостоящей лабораторной аппаратуре.

4.Простота в проведении и возможность использования на всех этапах медицинского обслуживания.

,,

Claims (1)

1. Диагностический тест-набор для оценки состояния пищеварительной системы у детей, включающий набор лабораторной посуды и химических реагентов, отличающийся тем, что набор содержит фильтровальный диск, флакон с йодным реактивом, микродозатор и бумажный диск - шкалу оценки степени гидролиза.