RU2857373C1 - Применение сухого спирто-водного экстракта травы буквицы лекарственной в качестве гепатопротекторного средства - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтики и касается применения экстракта буквицы в качестве гепатопротекторного средства. Применение сухого спирто-водного экстракта травы буквицы лекарственной в качестве гепатопротекторного средства, используемого при состояниях, сопровождающихся метаболическими нарушениями, такими как жировой гепатоз. Заявленное изобретение обеспечивает расширение арсенала гепатопротекторов растительного происхождения, повышение эффективности применения с целью профилактики состояний, сопровождающихся метаболическими нарушениями, такими как жировой гепатоз, расширение функциональных возможностей существующих гепатопротекторов. 4 ил.

Description

Изобретение относится к области фармацевтики и касается применения экстракта буквицы в качестве гепатопротекторного средства.

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является применение препарата карсил, содержащего силимарин - действующее вещество расторопши пятнистой [1].

Недостатком его является недостаточная эффективность применения для в качестве средства метаболически защищающих печень от развития жирового гепатоза.

Технической задачей предлагаемого решения является повышение эффективности применения экстракта буквицы с целью уменьшения риска развития холестаза, улучшения метаболических процессов в печени, расширение возможности гепатопротекторного средства.

Для этого предлагается применение экстракта травы буквицы в качестве гепатопротекторного средства, снижающего риск развития холестаза, используемого при состояниях, сопровождающихся метаболическими нарушениями, такими как жировой гепатоз.

Отличительной особенностью предлагаемого технического решения является применение экстракта буквицы в качестве гепатопротекторного средства.

Экстракт буквицы обладает антиоксидантным и антигипоксическим действием [2].

Экстракт получали из травы буквицы лекарственной (Betonica officinalis L.), собранной во второй половине июле 2023 года в Кунгурском районе Пермского края. Сырье высушивали в хорошо проветриваемом помещении при комнатной температуре, защищено от прямого солнечного света, хранили отдельно от других видов сырья.

Для получения экстракта был выбран спирт этиловый, как экстрагент подходящий для извлечения фенольных соединений, в частности, флавоноидов, веществ, потенциально обладающих целевой активностью [3]. В предварительном исследовании установили, что оптимальным является спирт этиловый с концентрацией 60%.

Спиртовое извлечение получали из измельченного сырья (травы), проходящего сквозь сито 1 мм, экстрагент готовили из спирта этилового 96% (х.ч. ООО «Гиппократ», г. Самара). По 1 г травы буквицы лекарственной, измельченной до размера частиц 1 мм, помещали в конические колбы со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли по 100 мл 60% спирта, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 минут. Отгоняли экстрагент методом простой перегонки до вязкого состояния, переносили в выпарительные чашки и досушивали при комнатной температуре до сухого состояния. С выпарительных чашек экстракт соскабливали с помощью скальпелей и стеклянных палочек. Сухой экстракт измельчали в ступке пестиком.

Экстракт представляет собой аморфный порошок зелено-коричневого цвета со слабым запахом. Нерастворим в воде, растворим в 60% спирте этиловом, частично в этилацетате, хлороформе.

Большинство заболеваний печени связаны с изменением детоксицирующей и синтезирующей функций печени. Эти процессы проходят без особенных клинических проявлений и выражаются в усилении процессов жировой трансформации гепатоцитов, цитолиза с последующим воспалительным процессом [4].

Исследования были проведены модели жирового гепатоза, формирующегося под действием тетрахлорметана. Моделирование жирового гепатоза проводили на белых крысах линии Wistar, которые находились на стандартном полнорационном кормлении сухими кормами и имели свободный доступ к воде. Животные (общим числом 80) были разделены по методу пар-аналогов на 3 группы: 1 группа - интактные (20 крыс), 2 группа - получали карсил (20 крыс) и тетрахлорметан (ТХМ) в дозе 40 мг/кг веса животного, 3 группа - получали экстракт буквицы в дозе 150 мг/кг (20 крыс) и ТХМ в дозе 40 мг/кг веса животного, 4 группа (20 крыс) - получали только ТХМ в дозе 40 мг/кг. Крысам каждой группы, кроме интактных вводили тетрахлорметан в дозе 40 мг/кг в растворе вазелинового масла соотношении 1:1. Карсил и экстракт буквицы давали в течение 14 дней. В течение 14 дней животные получали карсил в дозе 3,15 мг/кг в пересчете на силибин (суточная доза была рассчитана в соответствии с инструкцией по применению) [5].

Крысы 3 группы в течение 14 дней получали экстракт буквицы в дозе 150 мг/кг.

Технический результат, получаемый при реализации настоящего изобретения, состоит в расширении арсенала гепатопротекторов растительного происхождения и в отличие от прототипа более эффективно восстанавливает метаболические нарушения, индуцируемые тетрахлорметаном, включая холестаз. Известно, что холестаз усугубляет метаболические нарушения, а детергентное действие компонентов желчи усиливает некробиоз гепатоцитов [6]. Техническим результатом предлагаемого решения является расширение спектра гепатотропных средств, повышение эффективности применения с целью профилактики состояний, сопровождающихся метаболическими нарушениями (жировой гепатоз), расширение функциональных возможностей существующих гепатопротекторов.

Преимущества экстракта буквицы: обладает широким спектром гепатопротекторного действия без увеличения объема секретируемой желчи, что уменьшает риск возникновения холестаза, наличие противовоспалительной активности способствует уменьшению процессов цитолиза, который вызывают провоспалительные цитокины, препятствует развитие воспалительной реакции. В образцах печени крыс, получавших ТХМ обнаружены множественные изменения, соответствующие развитию жирового гепатоза. Дольковая и балочная структура печени сохранена. Печеночные балки шириной 2-3 гепатоцита. Гепатоциты с признаками выраженной крупнокапельной жировой дистрофии (объем поражения ~ 90%; индекс стеатоза - 4). Синусоиды слабого кровенаполнения, содержат единичные мононуклеары. Портальные тракты равно удалены друг от друга, не фиброзированы, содержат артериолы, венулы и желчные капилляры типичного строения. В портальных трактах выявляются единичные мононуклеары. Пространства Диссе значительны расширены, синусоидные капилляры с неравномерным полнокровием. Центральные венулы полнокровные. В печени наблюдается гистологическая картина хронического стеатогепатита с выраженной инфильтрацией портальных трактов и долек лимфоцитами и лейкоцитами, некрозами гепатоцитов, в сочетании с нарушением дольковой гистоархитектоники органов за счет неполного мостовидного порто-портального фиброза (фиг.1).

Фиг.1. Гистологический срез печени крыс, получавших тетрахлорметан. Окраска гематоксилином и эозином, ×100.

В отличие от изменений в гистологической картине печень крыс, получавших ТХМ и экстракт буквицы (группа 2) дольковая и балочная структура печени сохранена. Гепатоциты нормальных размеров с эухромным ядром, в центральных отделах в состоянии микровезикулярной жировой дистрофии. Отдельные гепатоциты на периферии с признаками крупнокапельной жировой дистрофии (объем поражения ~ 50%; индекс стеатоза - 2). Синусоиды слабого кровенаполнения, содержат единичные мононуклеары. Портальные тракты равно удалены друг от друга, не фиброзированы, содержат артериолы, венулы и желчные капилляры типичного строения. В портальных трактах выявляются единичные мононуклеары. Пространства Диссе расширены, синусоидные капилляры с неравномерным полнокровием. Центральные венулы очагово полнокровные (фиг.2).

Фиг.2. Гистологический срез печени крыс, получавших тетрахлорметан + экстракт буквицы. Окраска гематоксилином и эозином, ×100.

В гистологической картине печени крыс, получавших карсил и тетрахлорметан наблюдаются изменения, характерные для развития как стеатоза, так и фиброза. Дольковая и балочная структура печени сохранена. Печеночные балки шириной 1-2 гепатоцита. Гепатоциты с признаками выраженной крупнокапельной жировой дистрофии (объем поражения ~ 70%; индекс стеатоза - 3). Синусоиды слабого кровенаполнения, содержат единичные мононуклеары. Портальные тракты равно удалены друг от друга, в единичных очагах отмечается очаговый фиброз портальных трактов с инфильтрацией их лимфоцитами и лейкоцитами. Кровеносные сосуды портальных трактов умеренного кровенаполнения. Центральные венулы полнокровные (фиг.3).

Фиг.3. Гистологический срез печени крыс, получавших тетрахлорметан + карсил. Окраска гематоксилином и эозином, ×100.

Фиг.4. Гистологический срез печени интактных крыс. Окраска гематоксилином и эозином, ×100.

В результате применения обнаружено, что карсил способен оказать гепатопротекторное действие, однако не способен защитить от перерождения гепатоцитов вызывает явление холестаза и воспаления: наличие в срезах инфильтационно-воспалительных изменений. В отдельных случаях при лекарственном поражении печени, вызываемом статинами, антибиотиками, холестаз значительно повышает смертность пациентов [6].

Экстракт буквицы оказывает гепатопротекторное действие, которое связано с восстановлением печеночного обмена, снижением риска развития воспаления, а явления холестаза в случае применения экстракта не наблюдаются. При применении экстракта буквицы наблюдается противовоспалительное действие, что также служит восстановлению структурной целостности гепатоцитов.

LD₅₀ экстракта буквицы составляет 10500 мг/кг массы тела, поэтому он классифицируется как малотоксичный и по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относится к малоопасным веществам (4 класс опасности). Это значение коррелирует со значением LD₅₀ силимарина, которое составляет 10300 мг/кг [7].

Экстракт буквицы вызывает стабилизацию клеточной мембраны гепатоцитов, препятствует цитолизу и выходу из клетки ферментов трансаминаз, обладает противовоспалительным действием. Также экстракт стимулирует синтез белка, ускоряет регенерацию клеток печени и его детоксицирующую функцию. Недостаток прототипа карсила: отмечена недостаточность метаболических факторов, препятствующих развитию гепатоза.

Литература

1. Куркин В. А. Расторопша пятнистая - источник лекарственных средств (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т. 37. - №4. - С. 27-41.

2. Sliumpaite I. Antioxidant properties and phenolic composition of wood betony (Betonica officinalis L., syn. Stachys officinalis L.) / I. Sliumpaite // Industrial Crops and Products. - 2013. - №50. - P. 715-722.

3. Синютина C.E., Романцова С.В., Савельева В.Ю. Экстракция флавоноидов из растительного сырья и изучение их антиоксидантных свойств // Вестник ТГУ. - 2011. - Т. 16, вып. 1. - С. 345-347.

4. Саратиков, А.С. Эффективность ферментиндуцирующих средств при экспериментальном поражении печени тетрахлорметаном / А.С. Саратиков, Т.П. Новожеева, А.И. Венгеровский // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2003. - Т. 66, №4. - С. 47-49.

5. Инструкция к препарату Карсил рег. №: П N014839/01 от 09.04.08 / Электронный ресурс:<а href="https://www.vidal.ru/drugs/carsil_2997"target="_blank"><b>Карсил<SUP>®</SUP></b> (дата обращения: 11.01.2022).

6. Пиманов С.И., Макаренко Е.В. Идиосинкразические лекарственные поражения печени: диагностика и лечение // Медицинский Совет. 2017. №5. С.100-107. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/idiosinkrazicheskie-lekarstvennye-porazheniya-pecheni-diagnostika-i-lechenie (дата обращения: 11.01.2022).

Claims (1)

1. Применение сухого спирто-водного экстракта травы буквицы лекарственной в качестве гепатопротекторного средства, используемого при состояниях, сопровождающихся метаболическими нарушениями, такими как жировой гепатоз.