RU2819522C1

RU2819522C1 - Способ цветовой диагностики фазы цикла яичников

Info

Publication number: RU2819522C1
Application number: RU2023131879A
Authority: RU
Inventors: Алексей Андреевич Селифонов; Екатерина Игоревна Селифонова; Валерий Викторович Тучин
Filing date: 2023-12-05
Publication date: 2024-05-21

Abstract

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и акушерству, и может быть использовано для цветовой диагностики фазы цикла яичников. Получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа. Анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB. При значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла. При значениях R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе. Способ обеспечивает упрощение и ускорение клинической диагностики фолликулярной фазы и лютеиновой фазы цикла яичников за счет определения параметров цвета в единицах RGB изображений цифровой камеры лапароскопа. 4 ил., 1 табл.

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к способу определения фазы цикла яичников с помощью измерения спектров полного пропускания и анализа цветовых изображений через приложения ColorPicker или аналогичных.

Уровень техники

Из уровня техники известен способ доклинической диагностики преждевременного истощения яичников у женщин репродуктивного возраста (см. патент РФ 2625723, МПК G01N33/48, опубл. 18.07.2017), включающий ультразвуковое исследование яичников и определение уровня антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови. При трансвагинальном ультразвуковом исследовании яичников на 5-7 день менструального цикла осуществляют подсчет антральных фолликулов, при выявлении суммарного количества антральных фолликулов в обоих яичниках 6 и менее дополнительно назначают исследование уровня АМГ иммуноферментным методом и на основании полученных данных вычисляют коэффициент P=(F*G):V, где Р - коэффициент преждевременного истощения яичников, F - число антральных фолликулов, G - концентрация АМГ в сыворотке крови в абсолютных единицах, V - возраст женщины в годах, при получении значения Р, равного 0,33 и менее, диагностируют преждевременное истощение яичников и осуществляют перевод пациентки в центры репродукции для проведения программ ВРТ.

Однако данный способ достаточно трудоемкий и дорогостоящий, требует наличие лаборатории с дорогостоящей аппаратурой, реактивами и высококвалифицированных специалистов для подсчета фолликулов (подразумевается фолликулярная фаза цикла). Данный способ не применим для определения других фаз цикла.

Известен способ отбора пациенток с синдромом слабого ответа яичников, нуждающихся в переводе на программу лечения с использованием донорских ооцитов , путем исследования гормонов крови (см. патент РФ 2565449, МПК G01N 33/53, G01N 33/74, опубл. 20.10.2015). У пациентки на 2-3-й дни менструального цикла, предшествующие проведению гонадотропной стимуляции, исследуют в сыворотке крови уровень антимюллерова гормона (АМГ) и, если уровень АМГ составит 0,1-0,5 нг/мл, дополнительно определяют концентрацию фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), выраженную в мМЕ/мл, рассчитывают соотношение ФСГ/АМГ и, если величина полученного соотношения равна или превышает 51, производят коррекцию лечения и перевод пациентки на программу лечения с использованием донорских ооцитов.

Однако данный способ дорогостоящий.

Известен способ эхографической диагностики недостаточности лютеиновой фазы менструального цикла (см. патент РФ 2238040, МПК A61B 8/00, опубл. 20.10.2004), в котором проводят ультразвуковое трансвагинальное исследование яичников в середину секреторной фазы менструального цикла. Определяют объем яичника и объем желтого тела. Вычисляют их отношение и при его значении 0,22 и менее диагностируют недостаточность лютеиновой фазы.

Недостатком предложенного способа является необходимость высокой квалификации и опыта специалиста УЗИ, поскольку полученные значения и относительная точность визуализируемых параметров достигаются глазами диагноста, наличие дорогостоящего аппарата УЗИ. Также, обследование проводится в определенный период фазы цикла, что может содержать потенциальную ошибку, т.к. фаза определяется со слов пациенток, также возможет сбой цикла и др.

Известен способ оценки состояния яичников при трансректальной комплексной трехмерной эхографии у девственниц пубертатного периода с синдромом поликистозных яичников (см. патент РФ 2574188, МПК A61B 8/08, A61B 8/06, опубл. 10.02.2016), включающий проведение комплексной трехмерной эхографии трансректальным доступом с вычислением размеров яичников, определением характера расположения фолликулов, диаметра фолликулов по данным 3D реконструкции. При увеличенных яичниках с наличием равновеликих фолликулов, расположенных по всему объему стромы, диагностируют диффузный равнокалиберный тип строения фолликулярного аппарата, а при увеличенных яичниках с наличием фолликулов разного диаметра, расположенных хаотично, диагностируют хаотический разнокалиберный тип строения фолликулярного аппарата.

Недостатком данного способа является относительная точность полученных результатов, поскольку при нарушении цикла возможно ошибочное определение дня цикла и соответственно соотнесение полученных результатов с нормой. Требуется повторное регулярное проведение дорогостоящего исследования - 3D эхографии. Результаты интерпретируются лично врачом, что напрямую зависит от его опыта, личных качеств (внимательности, качества зрения и т.д.), медицинской эрудиции и навыков

Раскрытие сущности

Техническая проблема, на решение которой направлено изобретение, состоит в разработке способа экспресс определения фазы яичника с помощью цифровой камеры лапароскопа. Для этого не требуется ожидание анализов крови на гормоны и специальной подготовки.

Технический результат заключается в упрощении и ускорении клинической диагностики фолликулярной фазы и лютеиновой фазы цикла яичников.

Технический результат достигается с тем, что в способе цветовой диагностики фазы цикла яичников, согласно решению, получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа, анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB, при этом при значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла, при R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется чертежами, где

- на фиг. 1 изображены фотографии исследуемых типичных светлых образцов яичников кошек,

- на фиг. 2 изображены фотографии исследуемых типичных темных образцов яичников кошек

- на фиг. 3 изображена фолликулярная фаза по результатам гистологического исследования

- на фиг. 4 изображена лютеиновая фаза по результатам гистологического исследования.

Осуществление изобретения

В заявляемом изобретении предложен способ экспресс определения фазы яичника с помощью цифровой камеры лапароскопа.

Способ цветовой диагностики фазы цикла яичников характеризуется тем, что получение цифрового изображения яичников происходит с помощью камеры лапороскопа, выполненной с возможностью определения параметров цвета в единицах RGB. При изучении изображения яичников, сравнивают цветовые значения характерные для светлых яичников (фолликулярная фаза) и для темных яичников (лютеиновая фаза) через приложение ColorPicker или аналогичные.

Яичники брали от беспородных кошек в возрасте от 1 года до 12 лет с диагнозом «клинически здорова» после лапароскопической овариэктомии и овариогистерэктомии. По данным визуального осмотра все запланированные к исследованию яичники были разделены на две группы: «светлые» (n=50) и «темные» (n=50) и исследованы гистологически (фиг. 1 и фиг. 2).

Гистологические исследования in vitro проводили с использованием половин каждого яичника, которые вручную разрезали скальпелем и фиксировали. Остальные половины яичников использовали для ex vivo измерения цвета. Для анализа цвета снимали показатель RGB (red, green, blue) в приложении ColorPicker для 15 точек различных областей каждого яичника, затем усредняли вручную и считали это параметром каждого образца (для 50 «светлых» и 50 «темных») (фиг. 1 и фиг. 2).

По результатам гистологического исследования доказано, что для исследования были выбраны здоровые, патологически неизмененные ткани, темные образцы содержат желтое тело и соответствуют лютеиновой фазе (фиг. 4), а светлые образцы содержат множественные фолликулы, что соответствует фолликулярной фазе цикла (фиг. 3).

Таблица 1.Цветовые параметры образцов яичников кошек

№ образца	Светлые			Темные
№ образца	R	G	B	R	G	B
1	124	70	74	54	7	6
2	126	72	70	60	8	6
3	126	61	57	58	10	11
4	133	70	68	70	7	5
5	122	68	63	70	11	8
6	127	71	60	52	6	6
7	121	67	62	74	6	6
8	116	68	63	76	12	9
9	124	69	62	63	13	13
10	112	69	61	87	13	12
11	125	70	56	75	11	6
12	130	69	54	54	10	11
13	119	74	54	66	14	11
14	114	67	49	68	13	7
15	136	66	52	60	8	6
16	111	68	48	55	10	4
17	113	66	51	71	9	5
18	127	71	55	67	13	9
19	135	59	55	55	8	7
20	118	73	68	69	11	9
21	114	64	59	58	12	8
22	123	69	63	72	9	4
23	131	71	69	64	12	9
24	114	78	72	54	7	5
25	139	54	51	61	14	6
26	128	58	49	68	6	6
27	121	73	66	65	9	7
28	119	65	58	73	8	8
29	115	76	70	57	12	10
30	132	68	61	79	10	8
31	138	62	55	84	11	9
32	122	60	52	65	13	11
33	114	73	68	63	6	5
34	125	77	71	59	8	7
35	128	68	63	70	11	10
36	117	69	60	62	9	5
37	131	81	72	56	10	8
38	135	78	70	78	14	9
39	115	63	54	64	12	12
40	123	75	64	81	13	11
41	140	79	71	72	9	7
42	128	69	60	57	8	5
43	139	70	62	65	6	4
44	132	75	69	53	6	5
45	110	62	55	82	13	9
46	119	74	60	54	7	7
47	116	68	59	60	10	8
48	127	62	54	54	11	7
49	129	61	49	65	8	6
50	136	65	51	74	10	5
Среднее	124±3	69±2	60±2	65±2	10±0.7	8±0.7

По данным визуального осмотра все запланированные к исследованию яичники были разделены на две группы: «светлые» (фиг. 1) и «темные» (фиг. 2).

Для гистологического исследования фиксировали 10 светлых и 10 темных образцов от разных кошек. Для фиксации использовали 10% забуференный формалин. Для получения гистологических сканов использовали цифровой слайд-конвертер Aperio AT2 (экранный диагностический сканер), оснащенный светодиодным источником света и средствами калибровки. Толщина срезов тканей для сканирования составляла 2-3 мкм. Для гистологического исследования всех образцов использовали метод окраски гематоксилин-эозином. Здоровую ткань яичников брали от беспородных кошек в возрасте от 1 года до 12 лет с диагнозом «клинически здоровая».

При гистологическом исследовании светлых и темных образцов выявлены корковое и мозговое вещество; также была обнаружена капсула яичника, включающая зародышевый эпителий (однослойный кубовидный эпителий) и белочную оболочку (субэпителиальный эпителий). В строении яичников определяется четкое деление на мозговой сосудисто-фиброзный и кортикальный слои.

В светлых яичниках выявлены многочисленные группы примордиальных фолликулов с близлежащими первичными и вторичными фолликулами (фиг. 3). Примордиальные фолликулы состоят из первичного ооцита, окруженного одним слоем уплощенных фолликулярных клеток. Первичные фолликулы включают более крупный ооцит и сформированный вокруг него слой или слои кубовидных гранулезных клеток и блестящую кожуру фолликула (фиг. 4). Вторичные фолликулы имеют полость, отделяющую ооцит с прилежащими к нему гранулезными клетками (лучистой коронкой) от слоев гранулезных клеток, выстилающих фолликул с внутренней стороны базальной мембраны. Вне таких фолликулов слои тека-клеток визуализируются плохо. Фолликулы коркового слоя расположены в гиперклеточной тощей волокнистой соединительной ткани, среди которой встречаются единичные рубцовоподобные структуры.

В темных экземплярах яичников корковое вещество хорошо развито, доминирует над стромой, хорошо визуализируется интерстициальная соединительная ткань и желтое тело (фиг. 4). В некоторых образцах обнаруживается гиперплазия желтого тела без атипии. Строма представлена типичной тканью теки без отека, развита умеренно, капиллярная сеть множественная, отмечаются мелкоочаговые свежие кровоизлияния, в некоторых пробах множественные. Визуализируются разбросанные атретические фолликулы с внутренней и наружной фолликулярной текой с обилием кровеносных сосудов.

По результатам гистологического исследования доказано, что выбранные «нормальные, неизмененные» ткани у темных образцов содержат желтое тело и соответствуют лютеиновой фазе, а у светлых образцов содержат множество фолликулов, что соответствует фолликулярной фазе, что имеет важное практическое применение при криоконсервации, новых репродуктивных технологиях и имплантации яичников.

Claims

Способ цветовой диагностики фазы цикла яичников, характеризующийся тем, что получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа, анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB, при этом при значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла, при R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе.