RU2819293C1 - Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты в качестве соединений с противоопухолевой активностью - Google Patents

Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты в качестве соединений с противоопухолевой активностью Download PDF

Info

Publication number
RU2819293C1
RU2819293C1 RU2023116449A RU2023116449A RU2819293C1 RU 2819293 C1 RU2819293 C1 RU 2819293C1 RU 2023116449 A RU2023116449 A RU 2023116449A RU 2023116449 A RU2023116449 A RU 2023116449A RU 2819293 C1 RU2819293 C1 RU 2819293C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
compounds
mannich bases
fusidic acid
cell lines
tumour activity
Prior art date
Application number
RU2023116449A
Other languages
English (en)
Inventor
Елена Викторовна Салимова
Людмила Вячеславовна Парфенова
Диана Валиевна Ишметова
Лиана Фанзилевна Зайнуллина
Юлия Венеровна Вахитова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук
Application granted granted Critical
Publication of RU2819293C1 publication Critical patent/RU2819293C1/ru

Links

Abstract

Изобретение относится к области медицины, и раскрывает применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты формулы (1) - (4) в качестве соединений, проявляющих высокую противоопухолевую активность in vitro в отношении пяти линий раковых клеток человека HepG2, HCT-116, SH-SY5Y, MCF-7 и A549. Техническим результатом изобретения является обеспечение высокой противоопухолевой активности in vitro в отношении пяти линий раковых клеток человека: HepG2, HCT-116, SH-SY5Y, MCF-7 и A549. 1 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к области медицинской химии, а именно к гетероциклическим производным фузидовой кислоты - основаниям Манниха - формулы (1) - (4), представляющим собой: 4-морфолинобут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (1), 4-(пирролидин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметил-гексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2), 4-(4-метилпиперазин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-цикло-пента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (3) и 4-(пиперидин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (4), проявляющим высокую противоопухолевую активность in vitro в отношении раковых клеточных линий человека HepG2, HCT-116, SH-SY5Y, MCF-7 и A-549.
Известны основания Манниха абиетановых дитерпеноидов, содержащие в своей структуре фрагменты морфолина (5), диэтиламина (6) или пирролидина (7) (схема 1). Изучение противоопухолевой активности полученных соединений в отношении 60 клеточных линий девяти различных типов рака человека (легкие, толстая кишка, центральная нервная система, яичники, почки, предстательная железа, опухоли молочной железы, лейкемия и меланома) показало, что данные производные не проявляют цитотоксического действия в отношении протестированных линий раковых клеток [Tret’yakova E.V., Salimova E.V., Parfenova L.V. Nat. Prod. Res. 2022, 36, 79-86].
Схема 1.
Известны основания Манниха 2,3-индолтритерпеновых кислот, содержащие N-метилпиперазиновый (20-22) или морфолиновый (23-25) фрагменты в молекуле (схема 2). Изучение цитотоксичности полученных соединений в отношении 60 клеточных линий девяти различных типов опухолей человека показало, что производные (20-22) были активны в отношении лейкемии, рака толстой кишки, немелкоклеточного рака легкого и клеток меланомы с процентом роста от -25,3% до 29,8% [Khusnutdinova E.F., Petrova A.V., Kukovinets O.S., Kazakova O.B. Nat. Prod. Commun. 2018, 13, 665-668].
Схема 2.
Известны основания Манниха природных стероидов - эстрона (Е), 17β-аминопроизводного эстрона (NHBn-E) и эстрадиола (Е2), содержащие в качестве заместителей аминометиленовые фрагменты с линейными и циклическими аминами (схема 3). Изучение противоопухолевого действия полученных соединений в отношении клеточных линий карциномы шейки матки, рака яичников и молочной железы показало, что производные NHBn-E (27, 30, 33, 36, 39, 42 и 45) проявляли высокую антипролиферативную активность в отношении всех исследованных линий раковых клеток (IC50 5,27-5,94 мкМ). Аналоги Е2 (28, 31, 37 и 46) ингибировали пролиферацию клеток карциномы шейки матки (IC50 = 5.09 - 5.34 мкМ), в то время как производные эстрона (26, 29, 32, 35 и 44) проявляли антипролиферативное действие (IC50 4,49-4,98 мкМ) в отношении клеточных линий рака шейки матки и яичников [Molnar B., Kinyua N.I., Motyan G., Leits P., Zupko I., Minorics R., Balogh G.T., Frank E. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2022, 219, 106064-106076].
Схема 3.
Известны гетероциклические производные фузидовой кислоты (ФК) (47, 48), содержащие в качестве заместителя радикал ТЕМПО (2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-ил)оксил) в линейной части молекулы (схема 4). Изучение цитотоксического действия синтезированных соединений на клеточные линии рака предстательной железы и рака толстой кишки показало, что производные (47, 48) проявляют высокую противоопухолевую активность в отношении обеих протестированных клеточных линий с IC50 6.00 мкМ и 6.98 мкМ, соответственно [Sultani H.N., Morgan I., Hussain H., Roos A.H., Haeri H.H., Kaluderovic' G.N., Hinderberger D., Westermann B. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 7125-7142].
Схема 4.
Таким образом, противоопухолевая активность гетероциклических производных фузидовой кислоты - оснований Манниха (1) - (4) в литературе не описана.
Задачей предлагаемого изобретения является изучение противоопухолевой активности in vitro 4-морфолинобут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (1), 4-(пирролидин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметил-гексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (2), 4-(4-метилпиперазин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-цикло-пента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (3) и 4-(пиперидин-1-ил)бут-2-ин-1-ил-(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноата (4) в отношении пяти линий раковых клеток человека: гепатоцеллюлярная карцинома (HepG2), рак толстой кишки (HCT-116), нейробластома (SH-SY5Y), аденокарцинома молочной железы (MCF-7) и карцинома легких (A549).
Синтез указанных соединений осуществляли по реакции аминометилирования, описанной в [Tret’yakova E.V., Salimova E.V., Parfenova L.V. Nat. Prod. Res. 2022, 36, 79-86]. Алкин (49) вовлекали во взаимодействие с вторичными аминами (морфолином, пирролидином, N-метилпиперазином, пиперидином) и формальдегидом в среде диоксана, в присутствии CuCl в качестве катализатора. В результате аминометилирования были выделены основания Манниха (1) - (4) с выходами 75-85% (схема 5). Структуры полученных соединений установлены с помощью 1D и 2D спектроскопии ЯМР 1Н и 13С и масс-спектрометрии. Анализ спектров NOESY показал, что в условиях реакции конфигурация атома С3 кольца А изменяется с α на β.
Схема 5.
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1. Смесь 1.0 ммоль (0.03 г) параформальдегида и 1.0 ммоль вторичного амина в 3 мл сухого 1,4-диоксана перемешивали 2 ч при 75°С. Затем добавляли 0.54 ммоль (0.3 г) соединения (49) и 0,1 ммоль (0,009 г) хлорида меди (I) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) к реакционной смеси добавляли хлороформ, а затем водный раствор аммиака. Смесь переносили в делительную воронку, разделяли, органический слой промывали водой до нейтральной реакции, сушили CaCl2. Растворитель удаляли в вакууме, остаток хроматографировали на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента смесь растворителей, хлороформ: метанол (40:1).
4-Морфолинобут-2-ин-1-ил(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента [a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (1). Белый порошок, выход 0.28 г (78%); т.пл. 85-87°C; [α]D 20 -1.5° (c 0.53, CHCl3). Спектр ЯМР 1H (500.17 MHz, CDCl3): 0.83 (с, 3H, CH3, Н-18), 0.84 (д, 3H, CH3, J 7.1 Hz, Н-28), 0.90 (с, 3H, CH3, Н-19), 0.92-1.07 (м, 1H, CH2, Н-6), 0.94-1.08 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.20 (д, 1H, CH2, J 14.2 Hz, Н-15), 1.31 (с, 3H, CH3, Н-30), 1.38-1.46 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.40-1.51 (м, 1H, CH, Н-5), 1.45-1.54 (м, 1H, CH, Н-9), 1.49-1.63 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.53 (с, 3H, CH3, Н-27), 1.56-1.71 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.58-1.80 (м, 2H, CH2, Н-2), 1.61 (с, 3H, CH3, Н-26), 1.69-1.79 (м, 1H, CH2, Н-12), 1.71-1.80 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.89 (с, 3H, OC(O)CH3), 1.95-2.19 (м, 3H, CH2, CH, Н-23, Н-4), 2.03-2.16 (м, 1H, CH2, Н-15), 2.23 (д, 1H, CH2, J 10.5 Hz, Н-12), 2.31-2.56 (м, 2H, CH2, Н-22), 2.45-2.56 (м, 4H, CH2, Н-5', Н-8'), 2.99 (д, 1H, CH, J 11.0 Hz, Н-13), 3.22-3.28 (м, 2H, CH2, Н-4'), 3.55-3.69 (м, 4H, CH2, Н-6', Н-7'), 3.58-3.68 (м, 1H, CH, Н-3), 4.20-4.30 (м, 1H, CH, Н-11), 4.56 (д, 1H, CH2, J 15.0 Hz, Н-1'), 4.65 (д, 1H, CH2, J 15.0 Hz, Н-1'), 5.02 (т, 1H, CH, J 6.5 Hz, Н-24), 5.74 (д, 1H, CH, J 7.0 Hz, Н-16). Спектр ЯМР 13C (125.78 MHz, СDCl3): 16.00 (C-28), 17.53 (C-18), 17.71 (C-27), 20.92 (OC(O)CH3), 21.10 (C-6), 23.32 (C-30), 23.57 (C-19), 25.70 (C-26), 28.37 (C-23), 28.89 (C-22), 29.82 (C-1, C-2), 31.39 (C-7), 35.27 (C-4), 35.54 (C-12), 36.53 (C-10), 36.82 (C-5), 38.89 (C-15), 39.41 (C-8), 44.12 (C-13), 47.37 (C-4'), 48.56 (C-14), 49.40 (C-9), 52.04 (C-1'), 52.22 (C-5', C-8'), 66.68 (C-6', C-7'), 67.90 (C-11), 71.27 (C-3), 74.38 (C-16), 79.29 (C-2'), 81.51 (C-3'), 123.04 (C-24), 129.38 (C-20), 132.44 (C-25), 149.55 (C-17), 169.18 (C-21), 170.21 (OC(O)CH3). Масс-спектр: m/z (Irel, %): 654.440 [M+H]+ (100); 676.422 [M+Na]+ (55); 692.396 [M+K]+ (47).
4-(Пирролидин-1-ил)бут-2-ин-1-ил(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-цтклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (2). Светло-желтый порошок, выход 0.28 г (80%); т.пл. 93-95°C; [α]D 20 -2.1° (c 1.12, CHCl3). Спектр ЯМР 1H (500.17 MHz, CDCl3): 0.85 (д, 3H, CH3, J 6.5 Hz, Н-28), 0.86 (с, 3H, CH3, Н-18), 0.93 (с, 3H, CH3, Н-19), 0.95-1.05 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.00-1.09 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.23 (д, 1H, CH2, J 14.0 Hz, Н-15), 1.34 (с, 3H, CH3, Н-30), 1.39-1.47 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.43-1.52 (м, 1H, CH, Н-5), 1.46-1.54 (м, 1H, CH, Н-9), 1.50-1.59 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.56 (с, 3H, CH3, Н-27), 1.58-1.67 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.60-1.71 (м, 1H, CH2, Н-2), 1.63 (с, 3H, CH3, Н-26), 1.70-1.79 (м, 1H, CH2, Н-12), 1.71-1.86 (м, 4H, CH2, Н-6', Н-7'), 1.73-1.80 (м, 1H, CH2, Н-2), 1.92 (с, 3H, OC(O)CH3), 1.97-2.05 (м, 1H, CH2, Н-23), 1.99-2.12 (м, 1H, CH, Н-4), 2.05-2.17 (м, 1H, CH2, Н-15), 2.06-2.15 (м, 1H, CH2, Н-1), 2.07-2.18 (м, 1H, CH2, Н-23), 2.26 (д, 1H, CH2, J 10.5 Hz, Н-12), 2.33-2.51 (м, 2H, CH2, Н-22), 2.51-2.63 (м, 4H, CH2, Н-5', Н-8'), 3.01 (д, 1H, CH, J 11.0 Hz, Н-13), 3.37-3.44 (м, 2H, CH2, Н-4'), 3.58-3.69 (м, 1H, CH, Н-3), 4.20-4.32 (м, 1H, CH, Н-11), 4.57 (д, 1H, CH2, J 15.3 Hz, Н-1'), 4.69 (д, 1H, CH2, J 15.3 Hz, Н-1'), 5.04 (т, 1H, CH, J 6.5 Hz, Н-24), 5.78 (д, 1H, CH, J 6.5 Hz, Н-16). Спектр ЯМР 13C (125.78 MHz, СDCl3): 15.99 (C-28), 17.57 (C-18), 17.71 (C-27), 20.91 (OC(O)CH3), 21.07 (C-6), 23.41 (C-30), 23.48 (C-19), 23.72 (C-6', 7'), 25.70 (C-26), 28.38 (C-23), 28.90 (C-22), 29.87 (C-1, C-2), 31.51 (C-7), 35.37 (C-4), 35.55 (C-12), 36.59 (C-10), 36.77 (C-5), 38.91 (C-15), 39.42 (C-8), 43.10 (C-4'), 44.10 (C-13), 48.58 (C-14), 49.39 (C-9), 52.14 (C-1'), 52.43 (C-5', 8'), 67.94 (C-11), 71.28 (C-3), 74.38 (C-16), 78.25 (C-2'), 82.52 (C-3'), 123.06 (C-24), 129.49 (C-20), 132.45 (C-25), 149.44 (C-17), 169.21 (C-21), 170.22 (OC(O)CH3). Масс-спектр: m/z (Irel, %): 638.445 [M+H]+ (100); 660.427 [M+Na]+ (27); 676.402 [M+K]+ (27).
4-(4-Метилпиперазин-1-ил)бут-2-ин-1-ил(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (3). Светло-желтый порошок, выход 0.31 г (85%); т.пл. 108-110°C; [α]D 20 -1.8° (c 0.95, CHCl3). Спектр ЯМР 1H (500.17 MHz, CDCl3): 0.86 (т, 3H, CH3, J 7.3 Hz, Н-28), 0.86 (с, 3H, CH3, Н-18), 0.93 (с, 3H, CH3, Н-19), 0.94-1.09 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.02-1.10 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.23 (д, 1H, CH2, J 14.0 Hz, Н-15), 1.33 (с, 3H, CH3, Н-30), 1.35-1.48 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.43-1.52 (м, 1H, CH, Н-5), 1.46-1.53 (м, 1H, CH, Н-9), 1.48-1.64 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.56 (с, 3H, CH3, Н-27), 1.58-1.71 (м, 1H, CH2, Н-2), 1.60-1.72 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.63 (с, 3H, CH3, Н-26), 1.71-1.81 (м, 1H, CH2, Н-12), 1.72-1.83 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.73-1.83 (м, 1H, CH2, Н-2), 1.92 (с, 3H, OC(O)CH3), 1.95-2.20 (м, 2H, CH2, Н-23), 2.01-2.11 (м, 1H, CH, Н-4), 2.07-2.17 (м, 1H, CH2, Н-15), 2.19-2.29 (м, 1H, CH2, Н-12), 2.26 (с, 3H, CH3, Н-9'), 2.31-2.58 (м, 2H, CH2, Н-22), 2.33-2.49 (м, 4H, CH2, Н-6', Н-7'), 2.46-2.72 (м, 4H, CH2, Н-5', Н-8'), 3.01 (д, 1H, CH, J 10.5 Hz, Н-13), 3.24-3.35 (м, 2H, CH2, Н-4'), 3.61-3.69 (м, 1H, CH, Н-3), 4.20-4.31 (м, 1H, CH, Н-11), 4.57 (д, 1H, CH2, J 14.3 Hz, Н-1'), 4.67 (д, 1H, CH2, J 14.3 Hz, Н-1'), 5.05 (т, 1H, CH, J 6.5 Hz, Н-24), 5.78 (д, 1H, CH, J 8.5 Hz, Н-16). Спектр ЯМР 13C (125.78 MHz, СDCl3): 15.99 (C-28), 17.66 (C-18), 17.74 (C-27), 20.94 (OC(O)CH3), 20.97 (C-6), 23.28 (C-19), 23.63 (C-30), 25.71 (C-26), 28.35 (C-23), 28.90 (C-22), 29.90 (C-2), 29.98 (C-1), 31.77 (C-7), 35.56 (C-12), 35.61 (C-4), 36.61 (C-5), 36.72 (C-10), 38.92 (C-15), 39.42 (C-8), 44.09 (C-13), 45.86 (C-9'), 47.02 (C-4'), 48.60 (C-14), 49.33 (C-9), 51.79 (C-5', 8'), 52.13 (C-1'), 54.83 (C-6', 7'), 68.01 (C-11), 71.25 (C-3), 74.38 (C-16), 79.01 (C-2'), 81.92 (C-3'), 123.07 (C-24), 129.53 (C-20), 132.47 (C-25), 149.44 (C-17), 169.19 (C-21), 170.23 (OC(O)CH3). Масс-спектр: m/z (Irel, %): 667.472 [M+H]+ (100); 689.454 [M+Na]+ (11); 705.429 [M+K]+ (18).
4-(Пиперидин-1-ил)бут2-ин-1-ил(Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат (4). Светло-желтый порошок, выход 0.26 г (75%); т.пл. 97-99°C; [α]D 20 -2.5° (c 1.21, CHCl3). Спектр ЯМР 1H (500.17 MHz, CDCl3): 0.85 (т, 3H, CH3, J 6.5 Hz, Н-28), 0.85 (с, 3H, CH3, Н-18), 0.92 (с, 3H, CH3, Н-19), 0.99-1.09 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.02-1.11 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.18-1.26 (м, 1H, CH2, Н-15), 1.32 (с, 3H, CH3, Н-30), 1.35-1.40 (м, 2H, CH2, Н-7'), 1.39-1.47 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.42-1.52 (м, 1H, CH, Н-5), 1.50-1.55 (м, 1H, CH, Н-9), 1.52-1.61 (м, 1H, CH2, Н-6), 1.53-1.59 (м, 4H, CH2, Н-6', Н-8'), 1.55 (с, 3H, CH3, Н-27), 1.59-1.69 (м, 1H, CH2, Н-7), 1.62 (с, 3H, CH3, Н-26), 1.63-1.82 (м, 2H, CH2, Н-2), 1.71-1.82 (м, 1H, CH2, Н-1), 1.76 (т, 1H, CH2, J 12.4 Hz, Н-12), 1.91 (с, 3H, OC(O)CH3), 1.93-2.16 (м, 2H, CH2, Н-23), 2.01-2.12 (м, 1H, CH, Н-4), 2.07-2.17 (м, 1H, CH2, Н-15), 2.25 (д, 1H, CH2, J 12.4 Hz, Н-12), 2.32-2.47 (м, 2H, CH2, Н-22), 2.40-2.48 (м, 4H, CH2, Н-5', Н-9'), 3.00 (д, 1H, CH, J 11.6 Hz, Н-13), 3.21-3.28 (м, 2H, CH2, Н-4'), 3.63-3.68 (м, 1H, CH, Н-3), 4.26-4.31 (м, 1H, CH, Н-11), 4.57 (д, 1H, CH2, J 15.2 Hz, Н-1'), 4.68 (д, 1H, CH2, J 15.2 Hz, Н-1'), 5.04 (т, 1H, CH, J 6.4 Hz, Н-24), 5.77 (д, 1H, CH, J 8.1 Hz, Н-16). Спектр ЯМР 13C (125.78 MHz, СDCl3): 16.00 (C-28), 17.57 (C-18), 17.72 (C-27), 20.93 (OC(O)CH3), 21.06 (C-6), 23.46 (C-19), 23.47 (C-30), 23.68 (C-7'), 25.70 (C-26), 25.72 (C-6', 8'), 28.38 (C-23), 28.90 (C-22), 29.84 (C-1, C-2), 31.52 (C-7), 35.39 (C-4), 35.53 (C-12), 36.60 (C-10), 36.75 (C-5), 38.90 (C-15), 39.42 (C-8), 44.10 (C-13), 47.75 (C-4'), 48.58 (C-14), 49.38 (C-9), 52.16 (C-1'), 53.17 (C-5', 9'), 67.97 (C-11), 71.30 (C-3), 74.37 (C-16), 78.92 (C-2'), 82.09 (C-3'), 123.05 (C-24), 129.50 (C-20), 132.47 (C-25), 149.45 (C-17), 169.22 (C-21), 170.24 (OC(O)CH3). Масс-спектр: m/z (Irel, %): 652.461 [M+H]+ (100); 674.443 [M+Na]+ (22); 690.418 [M+K]+ (32).
Контроль реакции осуществляли методом ТСХ на пластинах Sorbfil (Сорбполимер, Краснодар, Россия), проявляли 10% раствором серной кислоты. Для колоночной хроматографии использовали силикагель L (50-160 мкм) марки КСКГ. Температура плавления определена на приборе РНМК 80/2617. Спектры ЯМР 1D (1Н, 13С) и 2D (COSY, NOESY, HSQC, HMBC) сняты на спектрометре Bruker Avance 500 (125.78 МГц для 13С и 500.17 МГц для 1Н) с использованием стандартных импульсных последовательностей фирмы Bruker, внутренний стандарт Me4Si, растворитель - СDCl3. Оптические углы измерены на поляриметре Perkin-Elmer 341. Масс-спектры получены на спектрометре Bruker Autoflex TM III Smartbeam с использованием матрицы 3-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)проп-2-еновой кислоты (синапиновая кислота).
Пример 2. Изучение противоопухолевой активности. Клеточные линии A549 (карцинома легкого человека), MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека), SH-SY5Y (нейробластома человека), HepG2 (гепатоцеллюлярная карцинома человека) и HCT116 (рак толстой кишки человека) были приобретены в Российской коллекции клеточных культур в Институте цитологии РАН (Санкт-Петербург, Россия). Клетки A-549, MCF-7, HepG2, HCT116 и SH-SY5Y культивировали в среде Игла, модифицированной по Дульбекко (DMEM) (Invitrogen, США) с добавлением 2 мМ L-глутамина (Sigma-Aldrich, Великобритания), 10% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS; Invitrogen, США), 50 мкг/мл сульфата гентамицина (Invitrogen, США) при 37°С в 5% СО2 и 95% влажности. Соединения растворяли в 100% ДМСО (Sigma-Aldrich, Великобритания), получая рабочие растворы тестируемых веществ одинаковой концентрации - 100 мМ, которые разбавляли в заполненных DMEM планшетах непосредственно перед анализом. ДМСО поддерживали в конечной концентрации 0.1%.
Для анализа жизнеспособности клеток их культивировали при соответствующей плотности в 96-луночных планшетах (1.2×104 клеток/лунку для A-549; 1.2×104 клеток/лунку для MCF-7; 3×104 клеток/лунку для SH-SY5Y; 1.5×104 клеток/лунку для HepG2; 1×104 клеток/лунку для HCT116) и оставляли для роста на 24 часа. После этого клетки обрабатывали соединениями (1) - (4) в конечных концентрациях 1, 10, 100 мкМ в течение 48 ч и определяли жизнеспособность клеток с помощью стандартного МТТ-анализа по инструкции производителя (Thermo Fisher Scientific) измерением поглощения при 590 нм с использованием микропланшетного ридера «2300 EnSpire® Multimode Plate Reader» (Perkin-Elmer). Концентрацию соединений, подавляющих на 50% жизнеспособность клеток (значение IC50), рассчитывали с помощью нелинейного регрессионного анализа (GraphPad Prism v.5.02; GraphPad Software Inc.). Жизнеспособность контрольной группы (клетки, обработанные 0.1% ДМСО) принимали за 100%, а жизнеспособность обработанных групп определяли путем сравнения ее оптической плотности с контролем. Данные были выражены как среднее ± S.E.M., рассчитанное на основе двух независимых экспериментов, проведенных в трех повторах. В аналогичных условиях обрабатывали клетки фторурацила в качестве положительного контроля для анализа МТТ. Результаты исследований приведены в табл. 1.
Таблица 1. Цитотоксическая активность соединений (1)-(4) и фузидовой кислоты.
Comp. IC50, мкM
HepG2 SH-SY5Y MCF-7 A549 HCT-116
1 12.66±0.34 19.01±0.69 16.08±0.41 12.97±0.75 9.98±0.49
2 4.27±0.72 11.62±0.25 12.32±0.04 4.47±0.25 6.74±0.07
3 5.85±0.53 11.46±0.01 8.85±0.24 8.44±0.07 6.35±0.30
4 11.28±0.29 13.33±0.19 15.28±0.58 9.40±1.29 9.47±0.08
Fusidic acid >100 >100 >100 >100 >100
Fluorouracil 4.31±0.3 2.56±0.46 3.32±0.28 2.29±0.08 3.48±0.76
Анализ результатов противоопухолевого скрининга показал, что производные фузидовой кислоты (1) - (4) обладали выраженной цитотоксической активностью в отношении тестируемых клеточных линий со значениями IC50 в пределах 4,2 - 19 мкМ, в то время как у самой ФК такая активность отсутствовала. Как следует из табл. 1, соединения по способности ингибировать выживание клеток можно расположить в следующем порядке: (2) × (3) × (4) × (1). Среди синтезированных производных аналог ФК с пирролидинметиленовым заместителем (2) проявлял выраженную цитотоксичность по отношению к клеткам HepG2, HCT-116 и A549 со средними значениями IC50 ниже 7 мкМ и близкими к значениям эталонного соединения фторурацила. Основания Манниха с фрагментами морфолина (1), N-метилпиперазина (3) и пиперидина (4) были менее эффективны, хотя все еще активны, со значениями IC50 в диапазоне 5.8-19 мкМ, в зависимости от клеточной линии.
Таким образом, основания Манниха (1) - (4) продемонстрировали высокую противоопухолевую активность in vitro в отношении пяти линий раковых клеток человека: HepG2, HCT-116, SH-SY5Y, MCF-7 и A549.

Claims (3)

  1. Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты формулы (1) - (4) в качестве соединений, проявляющих высокую противоопухолевую активность in vitro в отношении пяти линий раковых клеток человека HepG2, HCT-116, SH-SY5Y, MCF-7 и A549.
RU2023116449A 2023-06-22 Применение оснований Манниха на основе фузидовой кислоты в качестве соединений с противоопухолевой активностью RU2819293C1 (ru)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2819293C1 true RU2819293C1 (ru) 2024-05-16

Family

ID=

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2735665C1 (ru) * 2019-10-09 2020-11-05 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук Новые аминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие противоопухолевую активность
RU2780014C1 (ru) * 2021-09-13 2022-09-19 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2735665C1 (ru) * 2019-10-09 2020-11-05 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук Новые аминопроизводные фузидовой кислоты, проявляющие противоопухолевую активность
RU2780014C1 (ru) * 2021-09-13 2022-09-19 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук ПРОП-2-ИН-1-ИЛ-(2Z)-2-[(3-альфа, 4-альфа, 8-альфа, 11-альфа, 14-бета, 16-бета)-16-(АЦЕТИЛОКСИ)-3,11-ДИГИДРОКСИ-4,8,10,14-ТЕТРАМЕТИЛГОНАН-17-ИЛИДЕН]-6-МЕТИЛГЕПТ-5-ЕНОАТ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
RU2784215C1 (ru) * 2022-07-13 2022-11-23 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Уфимский федеральный исследовательский центр Российской академии наук (1-Бензил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил (Z)-2-((3S,4S,8S,10S,11R,14S,16S)-16-ацетокси-3,11-дигидрокси-4,8,10,14-тетраметилгексадекагидро-17H-циклопента[a]фенантрен-17-илиден)-6-метилгепт-5-еноат, проявляющий антибактериальную и фунгицидную активность

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ELENA V. TRET’YAKOVA, et al. Synthesis, modification, and biological activity of propargylated methyl dihydroquinopimarates, Natural Product Research, 2020. NI J, et al. Discovery, synthesis of novel fusidic acid derivatives possessed amino-terminal groups at the 3-hydroxyl position with anticancer activity. Eur J Med Chem. 2019, 162, 122-131. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100400941B1 (ko) 축합6환화합물및그의제조방법
Fernández-Herrera et al. Probing the selective antitumor activity of 22-oxo-26-selenocyanocholestane derivatives
Wolfram et al. Homopiperazine-rhodamine B adducts of triterpenoic acids are strong mitocans
Kuramoto et al. Structure-Activity Relationship of Norzoanthamine Exhibiting Significant Inhibition of Osteoporosis.
Xu et al. Design, synthesis and anticancer activity evaluation of novel C14 heterocycle substituted epi-triptolide
Májer et al. New highly toxic bile acids derived from deoxycholic acid, chenodeoxycholic acid and lithocholic acid
Ajduković et al. Synthesis, structural analysis and antitumor activity of novel 17α-picolyl and 17 (E)-picolinylidene A-modified androstane derivatives
EP3999490A1 (en) Cannabinoid derivatives
DE69703228T2 (de) Neue 6-Hydroxy und 6-Oxo-Androstan Verbindungen mit Kardioaktivität und pharmazeutische Präparate davon
US5633393A (en) Estradiol derivative-alkylating agent conjugate with reduced hormonal activity, process for preparing the same, compounds useful for the preparation thereof, and growth inhibiting compositon containing the conjugate or estradiol derivative.
Kvasnica et al. Biological activities of new monohydroxylated brassinosteroid analogues with a carboxylic group in the side chain
Kahnt et al. Platanic acid-derived methyl 20-amino-30-norlupan-28-oates are potent cytotoxic agents acting by apoptosis
Mayorquín-Torres et al. Palladium catalyzed synthesis of benzannulated steroid spiroketals
Chatterjee et al. Crotocaudin; a rearranged labdane type norditerpene from Croton caudatus Geisel
Li et al. Synthesis and Anti‐tumor Evaluation of Novel C‐37 Modified Derivatives of Gambogic Acid
Ure et al. Synthesis of 12β-methyl-18-nor-avicholic acid analogues as potential TGR5 agonists
CN111393500B (zh) 具有共轭二烯结构c环的齐墩果酸衍生物及其制备方法和应用
Wu et al. Synthesis of gypsogenin and gypsogenic acid derivatives with antitumor activity by damaging cell membranes
Brehm et al. Glycine antagonists. Synthesis, structure, and biological effects of some bicyclic 5-isoxazolol zwitterions
Rether et al. Imidazo [1, 2-a] pyridine derivatives as inhibitors of TNF-α expression in T cells
Afza et al. Cyclocaducinol, a cycloartane type triterpene from Euphorbia caducifolia
Srećo et al. Heteroannelated (+)-muricatacin mimics: synthesis, antiproliferative properties and structure–activity relationships
US20170240588A1 (en) Amphiphilic compounds with neuroprotective properties
Torres-Gómez et al. Stereoselective synthesis and pharmacological evaluation of [4.3. 3] propellan-8-amines as analogs of adamantanamines
Khanam et al. Synthesis, growth, spectral, thermal and crystallographic studies of 5α, 6α-epoxycholestane single crystals