RU2818361C1 - Strain of bacteria streptococcus dysgalactiae for making biopreparations for specific prevention of mastitis in cows - Google Patents
Strain of bacteria streptococcus dysgalactiae for making biopreparations for specific prevention of mastitis in cows Download PDFInfo
- Publication number
- RU2818361C1 RU2818361C1 RU2023133199A RU2023133199A RU2818361C1 RU 2818361 C1 RU2818361 C1 RU 2818361C1 RU 2023133199 A RU2023133199 A RU 2023133199A RU 2023133199 A RU2023133199 A RU 2023133199A RU 2818361 C1 RU2818361 C1 RU 2818361C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- dysgalactiae
- bacteria
- mastitis
- cows
- Prior art date
Links
- 241000194042 Streptococcus dysgalactiae Species 0.000 title claims abstract description 62
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title description 34
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 24
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 claims abstract description 4
- 244000037640 animal pathogen Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 abstract description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 abstract description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 abstract description 5
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 abstract description 5
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 5
- 241000194018 Streptococcaceae Species 0.000 abstract description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 208000007212 Foot-and-Mouth Disease Diseases 0.000 abstract 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 35
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 35
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 35
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 28
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 24
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 21
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 17
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 13
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 11
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 11
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 11
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N N-benzoylglycine Chemical compound OC(=O)CNC(=O)C1=CC=CC=C1 QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 4
- 241000194054 Streptococcus uberis Species 0.000 description 4
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 4
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 4
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 4
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 4
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 3
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 102000002704 Leucyl aminopeptidase Human genes 0.000 description 3
- 108010004098 Leucyl aminopeptidase Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 3
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 3
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 3
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 229940115920 streptococcus dysgalactiae Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 2
- PIFBMJMXJMZZRG-UHFFFAOYSA-N 2,2,4,6,6-pentamethyl-1,5-dihydropyrimidine Chemical compound CC1=NC(C)(C)NC(C)(C)C1 PIFBMJMXJMZZRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USSIQXCVUWKGNF-UHFFFAOYSA-N 6-(dimethylamino)-4,4-diphenylheptan-3-one Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(CC(C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 USSIQXCVUWKGNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150093511 GAPC gene Proteins 0.000 description 2
- 101150115724 GAPC1 gene Proteins 0.000 description 2
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 2
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 244000144980 herd Species 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 2
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 238000009304 pastoral farming Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZNBNBTIDJSKEAM-NISBWGIBSA-N (2s,3r,4r)-4-[(2s,5r,7s,8r,9s)-7-hydroxy-2-[(2r,5s)-5-[(2r,3s,5r)-5-[(2s,3s,5r,6r)-6-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-3,5-dimethyloxan-2-yl]-3-methyloxolan-2-yl]-5-methyloxolan-2-yl]-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspiro[4.5]decan-9-yl]-2-methyl-3-propanoyloxypentanoic a Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC(=O)CC)[C@H](C)C(O)=O)O[C@]11O[C@](C)([C@@H]2O[C@@](C)(CC2)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)CC1 ZNBNBTIDJSKEAM-NISBWGIBSA-N 0.000 description 1
- WINSLRIENGBHSH-ASZYJFLUSA-N 2-[(2r,3s,4s,5r,6s)-2,4-dihydroxy-6-[(1r)-1-[(2s,5r,7s,8r,9s)-7-hydroxy-2-[(2r,5s)-5-[(2r,3s,5r)-5-[(2s,3s,5r,6s)-6-hydroxy-3,5,6-trimethyloxan-2-yl]-3-[(2s,5s,6r)-5-methoxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxolan-2-yl]-5-methyloxolan-2-yl]-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspi Chemical compound O1[C@H](C)[C@@H](OC)CC[C@@H]1O[C@@H]1[C@H]([C@@]2(C)O[C@H](CC2)[C@@]2(C)O[C@]3(O[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)C3)[C@@H](C)[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](C)[C@@](O)(CC(O)=O)O3)OC)CC2)O[C@@H]([C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@@](C)(O)O2)C)C1 WINSLRIENGBHSH-ASZYJFLUSA-N 0.000 description 1
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N D-glucono-1,5-lactone Chemical compound OC[C@H]1OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O PHOQVHQSTUBQQK-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000004547 Glucosylceramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010017544 Glucosylceramidase Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- BPFYOAJNDMUVBL-UHFFFAOYSA-N LSM-5799 Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=C(F)C=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN3N(C)COC1=C32 BPFYOAJNDMUVBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWWSBGHRGAQGJE-UHFFFAOYSA-N Laidlomycin Natural products CC(C(CCC(=O)O)C(C)C(=O)O)C1OC2(CCC(C)(O2)C3CCC(C)(O3)C4OC(CC4C)C5OC(O)(CO)C(C)CC5C)CC(O)C1C RWWSBGHRGAQGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182504 Lasalocid Natural products 0.000 description 1
- 229930191564 Monensin Natural products 0.000 description 1
- GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N Monensin A Natural products O1C(CC)(C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CCC1C(O1)(C)CCC21CC(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHKXXVVRRDYCIK-CWCPJSEDSA-N Narasin Chemical compound C[C@H]1C[C@H](C)[C@H]([C@@H](CC)C(O)=O)O[C@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 VHKXXVVRRDYCIK-CWCPJSEDSA-N 0.000 description 1
- VHKXXVVRRDYCIK-UHFFFAOYSA-N Narasin Natural products CC1CC(C)C(C(CC)C(O)=O)OC1C(C)C(O)C(C)C(=O)C(CC)C1C(C)CC(C)C2(C=CC(O)C3(OC(C)(CC3)C3OC(C)C(O)(CC)CC3)O2)O1 VHKXXVVRRDYCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N Salinomycin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](CC)C(O)=O)CC[C@H](C)[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N 0.000 description 1
- 239000004189 Salinomycin Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000120569 Streptococcus equi subsp. zooepidemicus Species 0.000 description 1
- 241000194056 Streptococcus iniae Species 0.000 description 1
- 241000194055 Streptococcus parauberis Species 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000004026 adhesive bonding Methods 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 description 1
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 239000006781 columbia blood agar Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003977 dairy farming Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 description 1
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 244000000015 environmental pathogen Species 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 230000004090 etiopathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 235000012209 glucono delta-lactone Nutrition 0.000 description 1
- 229960003681 gluconolactone Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- -1 hydrogen ions Chemical class 0.000 description 1
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 description 1
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 229960004561 laidlomycin Drugs 0.000 description 1
- BBMULGJBVDDDNI-OWKLGTHSSA-N lasalocid Chemical compound C([C@@H]1[C@@]2(CC)O[C@@H]([C@H](C2)C)[C@@H](CC)C(=O)[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)CCC=2C(=C(O)C(C)=CC=2)C(O)=O)C[C@](O)(CC)[C@H](C)O1 BBMULGJBVDDDNI-OWKLGTHSSA-N 0.000 description 1
- 229960000320 lasalocid Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWVUEZAROXKXRT-VQLSFVLHSA-N maduramicin Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](OC)[C@@H](OC)C[C@H]1O[C@@H]1[C@H]([C@@]2(C)O[C@H](CC2)[C@@]2(C)O[C@]3(O[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)C3)[C@@H](C)[C@H]3[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](C)[C@@](O)(CC(O)=O)O3)OC)CC2)O[C@@H]([C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@@](C)(O)O2)C)C1 RWVUEZAROXKXRT-VQLSFVLHSA-N 0.000 description 1
- 229950006915 maduramicin Drugs 0.000 description 1
- 229960002531 marbofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940100630 metacresol Drugs 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 229960005358 monensin Drugs 0.000 description 1
- GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N monensin A Chemical compound C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N 0.000 description 1
- 229960001851 narasin Drugs 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 229940051027 pasteurella multocida Drugs 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004929 pyrrolidonyl group Chemical group N1(C(CCC1)=O)* 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N quercetin 3-O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009933 reproductive health Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960001548 salinomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000019378 salinomycin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 229960004388 semduramicin Drugs 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 108010010318 streptococcal M protein Proteins 0.000 description 1
- 229940115922 streptococcus uberis Drugs 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и биотехнологии, а именно к получению нового штамма «SD-21» бактерий Streptococcus dysgalactiae и может быть использовано при разработке и изготовлении средств специфической профилактики мастита коров.The invention relates to the field of veterinary microbiology and biotechnology, namely to the production of a new strain “SD-21” bacteriaStreptococcus dysgalactiae and can be used in the development and manufacture of means for the specific prevention of cow mastitis.
В результате перевода скотоводства на промышленную основу, автоматизации производственных процессов возникает ряд проблем, негативно сказывающихся на физиологическом состоянии животных.As a result of the transfer of livestock breeding to an industrial basis and the automation of production processes, a number of problems arise that negatively affect the physiological state of animals.
В современных условиях особое значение приобретает повышение качества молока, снижение себестоимости и обеспечение конкурентоспособности животноводческой продукции. Молоко является важным пищевым продуктом для людей и кормом для животных, что тем самым определяет его значимость. Выращивание полноценного молодняка зависит в значительной мере от состояния и функции молочной железы лактирующих коров [1, 2, 3].In modern conditions, improving the quality of milk, reducing costs and ensuring the competitiveness of livestock products is of particular importance. Milk is an important food product for humans and animal feed, thereby determining its importance. Raising healthy young animals depends largely on the condition and function of the mammary gland of lactating cows [1, 2, 3].
Одной из самых серьезных проблем в молочном животноводстве были и остаются маститы коров. Заболевание широко распространено по всей территории Российской Федерации среди коров разных пород. Клинической и скрытой формами мастита во всех странах мира животные болеют в среднем от 17 до 20% коров, а в отдельных регионах заболеваемость достигает 50% [4]. В результате роста продуктивности обостряются проблемы здоровья вымени и оплодотворяемости коров. У многих животных, переболевших клинической формой мастита, молочная продуктивность не восстанавливается, в 10% и более случаев молокообразование в пораженной четверти вымени прекращается и происходит ее атрофия. В среднем в хозяйствах ежегодно выбраковывают до 17% коров [4, 5].Cow mastitis has been and remains one of the most serious problems in dairy farming. The disease is widespread throughout the Russian Federation among cows of different breeds. In all countries of the world, animals suffer from clinical and latent forms of mastitis on average from 17 to 20% of cows, and in some regions the incidence reaches 50% [4]. As a result of increased productivity, the problems of udder health and cow fertility are becoming more acute. In many animals that have suffered from clinical mastitis, milk production is not restored; in 10% or more cases, milk production in the affected quarter of the udder stops and its atrophy occurs. On average, up to 17% of cows are culled annually on farms [4, 5].
Экономический ущерб, причиняемый воспалением молочной железы, весьма значителен, что обусловлено потерей продуктивности животных, ухудшением биологических и технологических свойств молока, которое из-за содержания болезнетворных микробов становится к тому же опасным для человека и молодняка сельскохозяйственных животных. Подсчитано, что корова, перенесшая мастит, в текущую лактацию снижает удой примерно на 150-200 кг. С учетом массового охвата поголовья потери из-за мастита в молочной индустрии составляют 10-12% производимой продукции [4, 5, 6].The economic damage caused by inflammation of the mammary gland is very significant, which is due to the loss of animal productivity, deterioration of the biological and technological properties of milk, which, due to the content of pathogenic microbes, also becomes dangerous for humans and young farm animals. It is estimated that a cow that has suffered mastitis reduces its milk yield by approximately 150-200 kg during the current lactation. Taking into account the massive coverage of livestock, losses due to mastitis in the dairy industry amount to 10-12% of production [4, 5, 6].
Экономический ущерб при маститах можно разделить на убытки, связанные с сокращением удоев и качеством молока (66 %), выбраковкой продукции из-за снижения пищевых и технологических свойств (6 %), преждевременным выводом из стада высокопродуктивных коров из-за нарушения функции четвертей вымени (22 %), повышением расходов на медикаменты для лечения животных (5 %), а также увеличением затрат на оплату труда ветеринарных специалистов (1 %). Косвенный, но существенный ущерб наносит выпойка молозива телятам от больных маститом коров, что как правило, приводит к массовым желудочно-кишечным заболеваниям и является одной из причин их гибели в раннем постнатальном периоде [6, 7, 8].Economic damage due to mastitis can be divided into losses associated with a reduction in milk yield and milk quality (66%), culling of products due to a decrease in nutritional and technological properties (6%), premature withdrawal of highly productive cows from the herd due to dysfunction of the udder quarters ( 22%), increased costs of medicines for treating animals (5%), as well as increased costs of paying veterinary specialists (1%). Indirect but significant damage is caused by feeding colostrum to calves from cows with mastitis, which usually leads to widespread gastrointestinal diseases and is one of the reasons for their death in the early postnatal period [6, 7, 8].
Воспаление молочной железы является полиэтиологическим и полифакторным заболеванием, развивающимся вследствие воздействия на неё механических, термических, химических и биологических факторов. При этом основное значение придается проникновению в вымя патогенных микроорганизмов, что приводит к более тяжелым воспалительным процессам в тканях молочной железы [1]. Поэтому наряду с исключением воздействия на организм предрасполагающих факторов особенно важным является устранение микроорганизмов - возбудителей мастита [9, 10].Inflammation of the mammary gland is a polyetiological and multifactorial disease that develops as a result of exposure to mechanical, thermal, chemical and biological factors. In this case, the main importance is attached to the penetration of pathogenic microorganisms into the udder, which leads to more severe inflammatory processes in the tissues of the mammary gland [1]. Therefore, along with eliminating the impact of predisposing factors on the body, it is especially important to eliminate microorganisms that cause mastitis [9, 10].
Борьба с маститом может быть успешной лишь при своевременном обнаружении больных животных, а также оказании лечебной помощи на ранних стадиях воспалительного процесса вымени [11-15].The fight against mastitis can be successful only with timely detection of sick animals, as well as the provision of medical care in the early stages of the inflammatory process of the udder [11-15].
В настоящее время проведение традиционной профилактики и терапии осуществляется на основе использования химиотерапевтических средств. Однако повсеместное применение антибиотиков способствует появлению побочных явлений у людей и животных. Также установлено, что антимикробные препараты оказывают негативное влияние на иммунологическую реактивность организма, что может снижать эффективность лечения [16]. Кроме того, многие лекарства чрезвычайно дороги, и не нашли широкого применения в ветеринарной практике. Повсеместное и бессистемное использование большого количества препаратов, содержащих антибиотики, привело к тому, что образовались лекарственно устойчивые штаммы микроорганизмов, появился мастит грибковой этиологии [17-20].Currently, traditional prevention and therapy is carried out based on the use of chemotherapeutic agents. However, the widespread use of antibiotics contributes to the occurrence of side effects in humans and animals. It has also been established that antimicrobial drugs have a negative effect on the body’s immunological reactivity, which can reduce the effectiveness of treatment [16]. In addition, many drugs are extremely expensive and are not widely used in veterinary practice. The widespread and unsystematic use of a large number of drugs containing antibiotics has led to the formation of drug-resistant strains of microorganisms, and mastitis of fungal etiology has appeared [17-20].
В последние годы в нашей стране ведутся интенсивные работы по созданию новых, высокоэффективных противомаститных лекарственных средств антимикробного и противовоспалительного действия, допустимых к использованию в условиях современных животноводческих ферм. Однако их эффективность не всегда достаточно высокая и большинство препаратов имеют длительный период выведения.In recent years, intensive work has been carried out in our country to create new, highly effective anti-mastitis drugs with antimicrobial and anti-inflammatory effects, acceptable for use in modern livestock farms. However, their effectiveness is not always high enough and most drugs have a long elimination period.
Мастит - это инфекция молочной железы, обычно вызываемая бактериями или грибками. Среди видов бактерий, наиболее часто связанных с маститом, выделяют виды рода Streptococcus, в том числе Streptococcus uberis (далее по тексту - S. uberis) - нетипируемые, Streptococcus agalactie (далее по тексту - S. agalactiae)- группа Лансфилда B, Streptococcus dysgalactiae (далее по тексту - S. dysgalactiae) - группа Лансфилда C, Streptococcus zooepidemicus и группы Лансфилда Д, Г, Л и Н стрептококки. Некоторые из этих видов являются инфекционными (например, S. agalactiae), тогда как другие считаются патогенами окружающей среды (например, S. dysgalactiae и S. uberis) [9, 21, 22].Mastitis is an infection of the breast, usually caused by bacteria or fungi. Among the bacterial species most often associated with mastitis are species of the genus Streptococcus , including Streptococcus uberis (hereinafter referred to as S. uberis ) - nontypeable, Streptococcus agalactie (hereinafter referred to as S. agalactiae ) - Lancefield group B, Streptococcus dysgalactiae (hereinafter referred to as S. dysgalactiae ) - Lancefield group C, Streptococcus zooepidemicus and Lancefield groups D, G, L and N streptococci. Some of these species are infectious (e.g. S. agalactiae ), while others are considered environmental pathogens (e.g. S. dysgalactiae and S. uberis ) [9, 21, 22].
Возбудитель S. dysgalactiae серогруппы С обладает целым комплексом факторов вирулентности, к которым относят: О-стрептолизин, S-стрептолизин, М-белок, стрептококковый пирогенный экзотоксин и эндотоксин, стрептокиназа, эндопептидаза, адгезины и плазминогены. Поэтому эффективность специфической профилактики определяется наличием комбинации данных факторов в антигенном составе входящих в вакцину компонентов.The causative agent S. dysgalactiae serogroup C has a whole complex of virulence factors, which include: O-streptolysin, S-streptolysin, M-protein, streptococcal pyrogenic exotoxin and endotoxin, streptokinase, endopeptidase, adhesins and plasminogens. Therefore, the effectiveness of specific prevention is determined by the presence of a combination of these factors in the antigenic composition of the components included in the vaccine.
Известен штамм «ID9103» S. dysgalactiae, используемый для получения гиалуроновой кислоты, имеющей среднюю молекулярную массу 10 000 000 Да или более. Изобретение относится к технической области генной инженерии. Штамм S. dysgalactiae хранится в фармацевтической компании ILDONG PHARM CO LTD (США) под регистрационным номером KCTC11818BP. Штамм по изобретению может быть использован для получения гиалуроновой кислоты [23].The known strain "ID9103" of S. dysgalactiae is used to produce hyaluronic acid having an average molecular weight of 10,000,000 Da or more. The invention relates to the technical field of genetic engineering. The S. dysgalactiae strain is stored in the pharmaceutical company ILDONG PHARM CO LTD (USA) under registration number KCTC11818BP. The strain according to the invention can be used to obtain hyaluronic acid [23].
Известен вакцинный штамм «УР-16-ВБХ» стрептококкоза серогруппы С, используемый для изготовления поливалентной инактивированной вакцины против стрептококкозов свиней, способ ее получения и применения [24]. Способ получения вакцины включает культивирование производственных штаммов; инактивацию культуральной жидкости; концентрирование антигенов; определение полноты инактивации антигенов; составление серии вакцины; контроль стерильности и безвредности вакцины; определение иммуногенной и антигенной активности вакцины.The vaccine strain “UR-16-VBKh” of streptococcosis serogroup C is known, used for the production of a polyvalent inactivated vaccine against streptococcosis of pigs, a method for its preparation and use [24]. The method of obtaining the vaccine includes cultivating production strains; inactivation of culture fluid; concentration of antigens; determining the completeness of antigen inactivation; compilation of a vaccine series; control of the sterility and safety of the vaccine; determination of immunogenic and antigenic activity of the vaccine.
Известен штамм S. disgalactiae «SDS», который может быть использован для создания вакцинного препарата для специфической профилактики заболеваний рыб семейства лососевых [25]. Штамм с регистрационным номером CCTCC M 2018843 хранится в Уханьском университете с 2018 г.The S. disgalactiae “SDS” strain is known, which can be used to create a vaccine preparation for the specific prevention of diseases in fish of the salmon family [25]. The strain with registration number CCTCC M 2018843 has been stored at Wuhan University since 2018.
Известен способ лечения и предотвращения мастита у субъекта, к интрамаммарным противомикробным ветеринарным композициям, применяемым в таких способах, и интрамаммарным ветеринарным композициям, применяемым в таких способах [26]. Способ включает в себя лечение или предотвращение мастита, вызванного бактериальной инфекцией, посредством введения композиции, содержащей терапевтически эффективное количество полиэфирного ионофора, наразин; салиномицин; лазалоцид; монензин; семдурамицин; мадурамицин и лаидломицин в молочную железу субъекта (интрамаммарное введение).A method for treating and preventing mastitis in a subject is known, including intramammary antimicrobial veterinary compositions used in such methods and intramammary veterinary compositions used in such methods [26]. The method includes treating or preventing mastitis caused by a bacterial infection by administering a composition containing a therapeutically effective amount of a polyester ionophore, narasin; salinomycin; lasalocid; monensin; semduramicin; maduramicin and laidlomycin into the subject's mammary gland (intramammary administration).
Известен способ лечения мастита у коров [27]. Способ лечения включает в себя внутримышечное введение препарата, содержащего вещества при следующем соотношении компонентов, мас. %: Марбофлоксацин - 9,5-10,5; Триметоприм - 2,375-2,625; Глюконолактон - 7,6-8,4; Маннитол - 2,85-3,15; Метилпирролидон - 9,5-10,5; Метакрезол - 0,04-0,06; ЭДТА - 0,002-0,003; Вода для инъекций - до 100. Причем препарат вводят один раз в сутки в течение 2-4 дней в дозе 10 мл. Способ позволяет повысить эффективность и сократить сроки лечения субклинического, катарального и гнойно-катарального мастита у коров.There is a known method for treating mastitis in cows [27]. The treatment method involves intramuscular administration of a drug containing substances in the following ratio of components, wt. %: Marbofloxacin - 9.5-10.5; Trimethoprim - 2.375-2.625; Gluconolactone - 7.6-8.4; Mannitol - 2.85-3.15; Methylpyrrolidone - 9.5-10.5; Metacresol - 0.04-0.06; EDTA - 0.002-0.003; Water for injection - up to 100. Moreover, the drug is administered once a day for 2-4 days at a dose of 10 ml. The method allows to increase the efficiency and reduce the time of treatment of subclinical, catarrhal and purulent-catarrhal mastitis in cows.
Известен способ лечения маститов крупного рогатого скота [28]. Способ лечения включает в себя применение биологически активного препарата. Согласно изобретению, в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи. Раствор биотинилированного производного окисленного декстрана в дозе 0,05 мг/кг вводят внутримышечно каждые 72 часа, 3 инъекции, дополнительно к основной схеме лечения маститов. Технический результат заключается в сокращении срока лечения маститов крупного рогатого скота и обеспечении снижения количества соматических клеток в молоке.There is a known method for treating mastitis in cattle [28]. The treatment method includes the use of a biologically active drug. According to the invention, the drug used is a biotinylated derivative of oxidized dextran, which is a conjugate obtained by the reaction of biotin hydroside and oxidized dextran with a molecular weight of 40-70 kDa to form an azomethine bond. A solution of a biotinylated derivative of oxidized dextran at a dose of 0.05 mg/kg is administered intramuscularly every 72 hours, 3 injections, in addition to the main treatment regimen for mastitis. The technical result consists in reducing the treatment period for mastitis in cattle and ensuring a reduction in the number of somatic cells in milk.
Известна иммунизация молочного КРС белком GAPC против стрептококковой инфекции [29]. Настоящее изобретение относится к клонированию, экспрессии и характеристике плазмин-связывающих белков GAPC из S. dysgalactiae, S. agalactiae, S. uberis, Streptococcus parauberis и Streptococcus iniae и их применение в вакцинных композициях.Immunization of dairy cattle with the GAPC protein against streptococcal infection is known [29]. The present invention relates to the cloning, expression and characterization of plasmin-binding proteins GAPC from S. dysgalactiae, S. agalactiae, S. uberis, Streptococcus parauberis and Streptococcus iniae and their use in vaccine compositions.
В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие штамм микроорганизма S. dysgalactiae «SD-21» аналогичное заявляемому, т.е. предложение соответствует критерию «новизны».In the patent and scientific and technical literature there are no known technical solutions containing a strain of the microorganism S. dysgalactiae “SD-21” similar to the claimed one, i.e. the proposal meets the criterion of “novelty”.
Выделение штамма микроорганизма при мастите коров, и использование его в качестве производственного штамма, способствующего формированию иммунитета к циркулирующим патогенам, вызывающих мастит, который не влиял бы на качество молока и оказывал положительный экономический эффект, является актуальным направлением и будет способствовать обеспечению страны безопасной продукцией, снижению применения антибактериальных препаратов в животноводстве и за счет этого возможным выходом продукции на экспорт.Isolation of a microorganism strain during cow mastitis, and its use as a production strain that promotes the formation of immunity to circulating pathogens that cause mastitis, which would not affect the quality of milk and have a positive economic effect, is a current direction and will help provide the country with safe products, reduce the use of antibacterial drugs in livestock farming and, due to this, the possible export of products.
Технический результат заключается в расширении арсенала актуальных производственных штаммов бактерий вида S. dysgalactiae, обладающих новыми биологическими характеристиками, и пригодных для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита крупного рогатого скота.The technical result consists in expanding the arsenal of current production strains of bacteria of the species S. dysgalactiae , which have new biological characteristics and are suitable for the production of biological products for the specific prevention of mastitis in cattle.
Указанная проблема решена путем получения штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae, который может использоваться для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров.This problem was solved by obtaining the “SD-21” strain of bacteria S. dysgalactiae , which can be used for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows.
Изолят S. dysgalactiae, послуживший источником для получения штамма «SD-21», был выделен в ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2021 г. при проведении бактериологических исследований проб молока, от коров из хозяйства Владимирской области.The S. dysgalactiae isolate, which served as the source for obtaining the “SD-21” strain, was isolated at the Federal State Budgetary Institution “ARRIAH” in 2021 during bacteriological studies of milk samples from cows from a farm in the Vladimir region.
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae семейства Streptococcaceae рода Streptococcus вида Streptococcus dysgalactiae, депонирован во Всероссийскую государственную коллекцию экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером: №389 - деп / 22-23- ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ».Strain “SD-21” of bacteria S. dysgalactiae of the family Streptococcaceae of the genus Streptococcus species Streptococcus dysgalactiae , deposited in the All-Russian State Collection of Exotic Types of Foot-and-Mouth Disease Virus and other Animal Pathogens (FMDV) of the Federal State Budgetary Institution "ARRIAH" under registration number: No. 389 - dep / 22-23 - GKShM FSBI "ARRIAH".
Экспериментально подтверждена возможность использования штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики, экспериментально показана выработка антител на введение моновакцины, изготовленной из антигена данного штамма, лабораторным животным.The possibility of using the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria for the production of biological products for specific prevention has been experimentally confirmed; the production of antibodies to the administration of a monovaccine made from the antigen of this strain to laboratory animals has been experimentally shown.
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae характеризуется следующими признаками и свойствами.Strain "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae characterized by the following features and properties.
Морфологическая характеристикаMorphological characteristics
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae относится к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus, виду Streptococcus dysgalactiae и обладает морфологическими признаками, характерными для бактерий рода Streptococcus.The “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria belongs to the family Streptococcaceae , genus Streptococcus, species Streptococcus dysgalactiae and has morphological characteristics characteristic of bacteria of the genus Streptococcus .
Это грамположительные кокки, располагающиеся преимущественно в виде цепочек разной длины. S. dysgalactiae наиболее часто формирует длинные цепочки состоящие 6-10 фрагментов. При окраске по Циль-Нильсону видны кокки синего цвета, без капсул.These are gram-positive cocci, located mainly in the form of chains of different lengths. S. dysgalactiae most often forms long chains consisting of 6-10 fragments. When stained according to Ziehl-Nielson, blue cocci are visible, without capsules.
Бактерии формируют круглые с ровными краями, выпуклые с гладкой поверхностью (S-форма), полупрозрачные с сероватым оттенком колонии диаметром до 1,0 мм. На кровяном агаре рост возбудителя может сопровождаться образованием зоной неполного гемолиза (неполное обесцвечивание питательной среды, зона вокруг колоний зеленоватого цвета) - α-гемолиз, а также гемолиз может полностью отсутствовать.The bacteria form round colonies with smooth edges, convex with a smooth surface (S-shape), translucent colonies with a grayish tint, up to 1.0 mm in diameter. On blood agar, the growth of the pathogen may be accompanied by the formation of a zone of incomplete hemolysis (incomplete discoloration of the nutrient medium, the area around the colonies is greenish) - α-hemolysis, and hemolysis may be completely absent.
Культуральные свойстваCultural properties
- неподвижный факультативный анаэроб, оптимальная температура роста (37,0±0,5)°С;- non-motile facultative anaerobe, optimal growth temperature (37.0±0.5)°C;
- на сердечно-мозговом агаре (далее по тексту - СМА) с добавлением сыворотки крови лошади в количестве 5% растет в виде мелких до 1 мм, серовато-прозрачных колоний с ровными краями;- on heart-brain agar (hereinafter referred to as SMA) with the addition of horse blood serum in an amount of 5%, it grows in the form of small, up to 1 mm, grayish-transparent colonies with smooth edges;
- на агаре с кровью образует круглые прозрачные колонии с сероватым оттенком, без зоны просветления питательной среды - отсутствие гемолиза или окруженные зоной неполного просветления - α-гемолиза;- on blood agar it forms round transparent colonies with a grayish tint, without a zone of clearing of the nutrient medium - no hemolysis or surrounded by a zone of incomplete clearing - α-hemolysis;
- на жидкой среде- сердечно-мозговой бульон (далее по тексту - СМБ) - дает придонный осадок с диффузным помутнением среды, который при встряхивании полностью разбивается.- in a liquid medium - heart-brain broth (hereinafter referred to as CMB) - gives a bottom sediment with diffuse turbidity of the medium, which completely breaks up when shaken.
Бактерии рода Streptococcus обладают зависимостью от наличия сыворотки крови лошади в питательной среде. Без сыворотки отмечен слабый рост на поверхности агаровой среды в виде напыления, видимый только при рассмотрении под лупой. Общепринятыми средами для выращивания стрептококков являются мясо-пептонный агар (МПА) и бульон (МПБ) с добавлением 5% дефибринированной крови барана и 1% глюкозы, рН 7,2-7,6.Bacteria of the genus Streptococcus are dependent on the presence of horse blood serum in the nutrient medium. Without serum, weak growth was observed on the surface of the agar medium in the form of a dusting, visible only when viewed under a magnifying glass. Common media for growing streptococci are meat peptone agar (MPA) and broth (MPB) with the addition of 5% defibrinated sheep blood and 1% glucose, pH 7.2-7.6.
Хорошо сохраняется при условии лиофильного высушивания с сахарозо-желатиновой средой, а также при быстром замораживании и хранении при - 40°С.It is well preserved under the condition of freeze-drying with sucrose-gelatin medium, as well as with rapid freezing and storage at - 40 ° C.
Биохимические свойстваBiochemical properties
При посеве на среды Гисса или коммерческую тест-систему API Strept проявляет следующие биохимические свойства, представленные в таблице 1, не продуцирует ацетонин; отсутствие ферментов: пирролидонариламидазы, α-галактозидазы, β-галактозидазы; наличие ферментов: β-глюкуронидызы, щелочной фосфатазы, лейцинаминопептидазы, аргинидегидролазы; отсутствие гидролиза гиппуровой кислоты и β-глюкозидзы; подкисление: рибозы, лактозы, трегалозы, амидона и отсутствие подкисления: маннит, инулин, рафинозы.When inoculated on Hiss media or a commercial test system API Strept exhibits the following biochemical properties presented in Table 1 , does not produce acetonin; lack of enzymes: pyrrolidonarylamidase, α-galactosidase, β-galactosidase; presence of enzymes: β-glucuronidase, alkaline phosphatase, leucine aminopeptidase, arginide hydrolase; lack of hydrolysis of hippuric acid and β-glucosidase; acidification: ribose, lactose, trehalose, amidone and lack of acidification: mannitol, inulin, raffinose.
Антигенные свойства Antigenic properties
При постановке реакции агглютинации (РА) с группоспецифическими сыворотками штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae по капсульному антигену принадлежит к серогруппе С.When performing an agglutination reaction (RA) with group-specific sera, the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria belongs to serogroup C according to the capsular antigen.
Инактивированный штамм индуцирует выработку антител, выявляемые методами реакции агглютинации (РА) и иммуноферментным анализом (ИФА) и обладающих защитным действием против стрептококкоза.The inactivated strain induces the production of antibodies, detected by the agglutination test (RA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and having a protective effect against streptococcosis.
Биотехнологические свойстваBiotechnological properties
Оптимальными условиями культивирования штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae являются следующие:The optimal conditions for cultivating the SD-21 strain of S. dysgalactiae bacteria are as follows:
- чашки Петри с питательными средами: сывороточный агар Колумбия, кровяной агар Колумбия; посевы инкубируют в течение 24 ч при температуре (37,0±0,5)°С;- Petri dishes with nutrient media: Columbia serum agar, Columbia blood agar; crops are incubated for 24 hours at a temperature of (37.0±0.5)°C;
- флаконы с жидкой питательной средой (сывороточный сердечно-мозговой бульон (СМБ)); посев инкубируют при температуре (37,0±0,5)°С в течение 18-24 ч. - bottles with liquid nutrient medium (whey brain heart broth (WMB)); the crop is incubated at a temperature of (37.0±0.5)°C for 18-24 hours.
Чистоту культуры проверяют методом световой микроскопии мазков, окрашенных по Граму.The purity of the culture is checked by light microscopy of Gram-stained smears.
По завершении культивирования агаровую культуру штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae смывают стерильным физиологическим раствором в объеме 5,0 см3 на одну чашку, определяют концентрацию бактериальной суспензии по оптическому стандарту мутности. По результатам визуальной стандартизации доводят концентрацию исходной бактериальной суспензии до 109 м.к./см3.Upon completion of cultivation, the agar culture of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria is washed off with sterile physiological solution in a volume of 5.0 cm 3 per cup, and the concentration of the bacterial suspension is determined using the optical turbidity standard. Based on the results of visual standardization, the concentration of the initial bacterial suspension is adjusted to 10 9 mc/cm 3 .
Устойчивость к внешним факторамResistance to external factors
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae чувствителен к ампициллину с клавулановой кислотой, цефалоспоринам, гентамицину.The “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria is sensitive to ampicillin with clavulanic acid, cephalosporins, and gentamicin.
Дополнительные признаки и свойстваAdditional characteristics and properties
Иммуногенная активность - иммуногенен в составе инактивированной вакцины.Immunogenic activity - immunogenic as part of an inactivated vaccine.
Реактогенность - реактогенными свойствами в составе инактивированной вакцины не обладает. Иммунизация кроликов в удвоенной терапевтической дозе вакцины, в соответствии с ГОСТ 31926, не вызывает местной-раздражительной и воспалительной реакций после инъекции.Reactogenicity - does not have reactogenic properties as part of an inactivated vaccine. Immunization of rabbits with a double therapeutic dose of the vaccine, in accordance with GOST 31926, does not cause local irritant and inflammatory reactions after injection.
Патогенные свойства - штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae патогенен для белых мышей.Pathogenic properties - the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria is pathogenic for white mice.
Вирулентность - высоковирулентен.Virulence - highly virulent.
Контаминация бактериями, грибами, микоплазмами - штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae не контаминирован бактериями, грибами, микоплазмами.Contamination with bacteria, fungi, mycoplasmas - the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria is not contaminated with bacteria, fungi, mycoplasmas.
Условия хранения.Storage conditions.
При хранении штамма в нативном состоянии при температуре минус (70,0±5,0)°С допустимая длительность хранения без освежения составляет 12 мес., а при хранении в лиофилизированном состоянии при той же температуре - 10 лет.When storing the strain in its native state at a temperature of minus (70.0 ± 5.0) ° C, the permissible duration of storage without refreshment is 12 months, and when stored in a lyophilized state at the same temperature - 10 years.
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его использования, которые не ограничивают объем изобретения.The essence of the proposed invention is illustrated by examples of its use, which do not limit the scope of the invention.
Пример 1. Культивирование штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae, с целью получение антигена данного штамма. Example 1. Cultivation of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria in order to obtain the antigen of this strain.
Для культивирования штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae использовали питательную среду - сердечно-мозговой бульон с добавлением 5% сыворотки крови лошади.To cultivate the SD-21 strain of S. dysgalactiae bacteria, a nutrient medium was used - brain heart broth with the addition of 5% horse blood serum.
Для получения бактериальной массы был использован ферментер «Biotron LiFlus GX», оснащенный системами регистрации и регулирования основных параметров культивирования: температуры, концентрации водородных ионов, скорости вращения мешалки и расхода кислорода для аэрации. Объем питательной среды в аппарате составлял 7,0 л с добавлением сыворотки крови лошади в количестве 0,35 л. Культивирование проводили в течение 24 часов при температуре (37,0±0,5)°C с постоянной подачей кислорода в количестве 1 л/ч.To obtain the bacterial mass, a Biotron LiFlus GX fermenter was used, equipped with systems for recording and regulating the main cultivation parameters: temperature, concentration of hydrogen ions, stirrer rotation speed and oxygen consumption for aeration. The volume of the nutrient medium in the apparatus was 7.0 l with the addition of horse blood serum in the amount of 0.35 l. Cultivation was carried out for 24 hours at a temperature of (37.0±0.5)°C with a constant supply of oxygen in the amount of 1 l/h.
Через 24 ч культивирования в бактериальную суспензию добавляли 0,2% формалина по объему. Инактивацию проводили 24 часа при непрерывном перемешивании (100 об/мин) и поддержании температуры в диапазоне 37,0-37,5°С. Для определения полноты инактивации через 24 часа после внесения формалина бактериальную суспензию высевали «газоном» в количестве 1,0 см3 на чашку Петри с сывороточным СМА. Инкубацию чашек Петри проводили в течение 48 часов при температуре (37,0±0,5)°С в условиях обычной атмосферы. При просмотре чашек Петри с сывороточным СМА рост культур бактерий S. dysgalactiae отсутствовал, что характеризовало положительное проведение инактивации.After 24 h of cultivation, 0.2% formaldehyde by volume was added to the bacterial suspension. Inactivation was carried out for 24 hours with continuous stirring (100 rpm) and maintaining the temperature in the range of 37.0-37.5°C. To determine the completeness of inactivation, 24 hours after the addition of formalin, the bacterial suspension was sown as a “lawn” in an amount of 1.0 cm 3 per Petri dish with serum SMA. Petri dishes were incubated for 48 hours at a temperature of (37.0±0.5)°C under normal atmosphere conditions. When viewing Petri dishes with serum SMA, there was no growth of bacterial cultures of S. dysgalactiae , which characterized positive inactivation.
Таким образом, получен инактивированный антигенный бактериальный материал из штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae, используемый для дальнейшей работы.Thus, inactivated antigenic bacterial material was obtained from the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria, which was used for further work.
Пример 2. Определение патогенных свойств штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae проводили на белых мышах. Для заражения были использованы 18-20 часовые бульонные культуры стрептококка, выращенного на СМБ с добавлением 5% сыворотки крови лошади. В опыте использовали 10 белых мышей (5 голов на заражение и 5 голов контрольная группа). Культуру стрептококка вводили животным внутрибрюшинно в дозе 0,5 см3. Наблюдение за подопытными животными вели в течение 5 сут. Культуру признают патогенной при гибели не менее четырех белых мышей в группе. Для подтверждения специфической гибели белых мышей делали посевы на сывороточный СМА образцов материала из спинного мозга, крови, сердца, печени и селезенки.Example 2.Determination of the pathogenic properties of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteriacarried out on white mice. For infection, 18-20 hour broth cultures of streptococcus grown on SMB with the addition of 5% horse blood serum were used. 10 white mice were used in the experiment (5 heads per infection and 5 heads control group). Streptococcus culture was administered to animals intraperitoneally at a dose of 0.5 cm3. The experimental animals were observed for 5 days. A culture is considered pathogenic when at least four white mice in a group die. To confirm the specific death of white mice, samples of material from the spinal cord, blood, heart, liver and spleen were cultured for serum SMA.
В ходе установления специфичности гибели при проведении бактериологического исследования проб от всех павших животных была выделена чистая культура стрептококка.In order to establish the specificity of death, a pure culture of streptococcus was isolated during bacteriological examination of samples from all dead animals.
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae патогенен для белых мышей. Вирулентность штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae - высокая. Летальность в группе составила 100% в течение 48 ч.Strain "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae pathogenic for white mice. Virulence of strain "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae - high. Mortality in the group was 100% within 48 hours.
Пример 3. Определение стабильности штамма «SD-21» бактерий
S. dysgalactiae при хранении. Example 3. Determination of the stability of the bacteria strain “SD-21”
S. dysgalactiae during storage.
Для получения бактериальной массы штамм «SD-21» бактерий
S. dysgalactiae высевали на чашки Петри с сывороточным СМА. Посевы инкубировали при температуре (37,0±0,5)°С в течение 24 ч. По завершению инкубирования агаровую культуру смывали стерильной сахарозо-желатозной средой (стабилизирующая среда) в объеме 5,0 см3 на одну чашку. Определяли концентрацию бактериальной суспензии по стандартному образцу мутности бактерийных взвесей «ОРМЕТ». По результатам визуальной стандартизации доводили концентрацию исходной бактериальной суспензии до 109 м.к./см3.To obtain bacterial mass, strain “SD-21” bacteria
S. dysgalactiae sown on Petri dishes with serum SMA. The crops were incubated at a temperature of (37.0±0.5)°C for 24 hours. Upon completion of incubation, the agar culture was washed off with a sterile sucrose-gelatose medium (stabilizing medium) in a volume of 5.0 cm3 for one cup. The concentration of the bacterial suspension was determined using the standard turbidity sample for bacterial suspensions “ORMET”. Based on the results of visual standardization, the concentration of the initial bacterial suspension was adjusted to 109 m.k./cm3.
Бактериальную суспензию фасовали по 0,5 см3 в ампулы соответствующей вместимости.The bacterial suspension was packaged in 0.5 cm 3 ampoules of appropriate capacity.
Процесс лиофилизации после внесения стабилизаторов сушки включает стадии замораживания, высушивания, досушивания и запаивания ампул.The lyophilization process after adding drying stabilizers includes the stages of freezing, drying, drying and sealing the ampoules.
Замораживание: бактериальную суспензию перед лиофилизацией промораживали. Для этого устанавливали три датчика контроля температуры материала в процессе сушки. При достижении температуры в материале минус (60±1)°С его выдерживали при внешней температуре не выше минус (70±1)°С в течение 24 ч, после чего процесс замораживания бактериальной суспензии считали законченным. Холодильную камеру сублиматора перед постановкой кассет с замороженным материалом дезинфицировали 70%-ным этиловым спиртом и охлаждали до температуры не выше минус (50±1)°С.Freezing: The bacterial suspension was frozen before lyophilization. For this purpose, three sensors were installed to control the temperature of the material during the drying process. When the temperature in the material reached minus (60±1)°C, it was kept at an external temperature no higher than minus (70±1)°C for 24 hours, after which the process of freezing the bacterial suspension was considered complete. Before placing cassettes with frozen material, the refrigerating chamber of the sublimator was disinfected with 70% ethyl alcohol and cooled to a temperature not higher than minus (50±1)°C.
Высушивание: замороженный материал незамедлительно перегружали в камеру сублиматора. Сублимационная установка перед загрузкой должна находиться в режиме:Drying: the frozen material was immediately transferred to the sublimator chamber. Before loading, the sublimation unit must be in the following mode:
- температура полок - минус (50±1)°С;- shelf temperature - minus (50±1)°C;
- температура конденсора - минус (60±1)°С;- condenser temperature - minus (60±1)°С;
- вакуум-насос - в рабочем состоянии, отключен.- vacuum pump - in working condition, disabled.
После загрузки камеры подключали вмороженные в материал датчики контроля температуры, камеру герметизировали и вакуумировали до остаточного давления 80-90 мм рт.ст., проводили процесс высушивания согласно установленному режиму: температура конденсора - минус 50-80°С, вакуум в камере - 80-90 мм рт.ст., время сушки - до 48 ч.After loading the chamber, temperature control sensors frozen into the material were connected, the chamber was sealed and evacuated to a residual pressure of 80-90 mm Hg, the drying process was carried out according to the established regime: condenser temperature - minus 50-80 ° C, vacuum in the chamber - 80-80 90 mm Hg, drying time - up to 48 hours.
Досушивание: проводили при температуре материала 24-27°С в течение 12-16 ч. Давление в камере не должно быть выше 90 мм рт.ст. Общее время сушки с досушиванием составляет 60-64 ч.Final drying: carried out at a material temperature of 24-27°C for 12-16 hours. The pressure in the chamber should not be higher than 90 mm Hg. The total drying time with additional drying is 60-64 hours.
Запаивание ампул: после завершения процесса сублимационного высушивания камеру сублиматора через стерилизующий фильтр заполняли стерильным воздухом, открывали и ампулы с материалом быстро перекладывали в эксикатор с осушенным силикагелем. Ампулы с материалом запаивали незамедлительно в день разгрузки в условиях стерильного бокса.Sealing of ampoules: after completion of the freeze-drying process, the sublimator chamber was filled with sterile air through a sterilizing filter, opened, and the ampoules with the material were quickly transferred to a desiccator with dried silica gel. Ampoules with the material were sealed immediately on the day of unloading in a sterile box.
Датой изготовления штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae считают дату проведения лиофилизации.Date of production of the strain "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae consider the date of lyophilization.
Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae хранят в лиофилизированном виде в запаянных ампулах, упакованных в коробки из картона и металлические контейнеры, при температуре минус 40-70°С. Срок хранения штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae с даты лиофилизации составляет 5 лет.Strain "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae stored in lyophilized form in sealed ampoules, packed in cardboard boxes and metal containers, at a temperature of minus 40-70°C. Strain shelf life "SD-21" bacteriaS. dysgalactiae from the date of lyophilization is 5 years.
По истечении 6 месяцев хранения проводили вскрытие 5 ампул с лиофилизированной культурой штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae и определяли физико-химические и биологические показатели штамма. Все показатели соответствовали требуемым нормам, т.е. штамм при хранении в течение 6 месяцев не изменил свои свойства.After 6 months of storage, 5 ampoules with a lyophilized culture of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria were opened and the physicochemical and biological parameters of the strain were determined. All indicators met the required standards, i.e. the strain did not change its properties when stored for 6 months.
Пример 4. Определение биохимических свойств штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae. Example 4. Determination of the biochemical properties of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria.
Биохимические свойства предлагаемого штамма определяли с помощью набора API Strep (BioMerieux) для идентификации бактерий семейства Streptococcaceae и родственных микроорганизмов по продукции ацетоина, гидролизу гиппуровой кислоты, гидролизу эскулина, продукции: пирролидонилариламидазы, α-галактозидазы, β-глюкуронидазы, щелочной фосфатазы, лейцинаминопептидазы, аргининдегидролазы, подкислению: D-рибозы, арабинозы, маннита, сорбита, лактозы, трегаллозы, инулина, рафиннозы, рафиннозы, амидона и гликогена.The biochemical properties of the proposed strain were determined using the API Strep kit (BioMerieux) to identify bacteria of the Streptococcaceae family and related microorganisms by the production of acetoin, hydrolysis of hippuric acid, hydrolysis of esculin, production of: pyrrolidonyl arylamidase, α-galactosidase, β-glucuronidase, alkaline phosphatase, leucine aminopeptidase, arginine dehydrolase , acidification: D-ribose, arabinose, mannitol, sorbitol, lactose, trehalose, inulin, raffinose, raffinose, amidone and glycogen.
В контейнер для инкубации (поднос и крышку) вносят 5 см3 очищенной воды для создания влажной атмосферы. Помещали стрип в контейнер для инкубации. В пробирку, содержащую 5 см3 стерильного физиологического раствора с помощью бактериологической петли вносили 2-3 изолированных колонии предлагаемого штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae и тщательно растирали в пробирке. Пипеткой распределяли суспензию по лункам стрипа, избегая образования пузырьков. Поднос накрывали крышкой и инкубировали при температуре (37,0±0,5)°С в течение 18-24 ч.5 cm 3 of purified water is added to the incubation container (tray and lid) to create a humid atmosphere. The strip was placed in a container for incubation. 2-3 isolated colonies of the proposed strain “SD-21” of S. dysgalactiae bacteria were introduced into a test tube containing 5 cm 3 of sterile saline using a bacteriological loop and thoroughly ground in the test tube. Using a pipette, the suspension was distributed among the wells of the strip, avoiding the formation of bubbles. The tray was covered with a lid and incubated at a temperature of (37.0±0.5)°C for 18-24 hours.
Продукцию каталазы определяли в тесте с 3%-ным раствором перекиси водорода.Catalase production was determined in a test with a 3% hydrogen peroxide solution.
Биохимические свойства штамма представлены в таблице 1, которые соответствуют свойствам представленным в определителе Берджи. По результатам проведенных исследований штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae относится к роду Streptococcus, виду S. dysgalactiae. The biochemical properties of the strain are presented in Table 1, which correspond to the properties presented in Bergey’s determinant. According to the results of the studies, the “SD-21” strain of bacteria S. dysgalactiae belongs to the genus Streptococcus, species S. dysgalactiae.
Пример 5. Определение серогрупповой принадлежности штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae, по капсульному антигену проводили с помощью набора группоспецифических сывороток в реакции латексной агглютинации Pastorex Strep (BIORAD). Латексные частицы реагентов набора индивидуально сенсибилизированы кроличьими антителами, специфичными для одного из углеводных стрептококковых антигенов групп A, B, C, D, F, G.Example 5. Determination of the serogroup affiliation of the strain “SD-21” of bacteria S. dysgalactiae by capsular antigen was carried out using a set of group-specific sera in the Pastorex Strep latex agglutination reaction (BIORAD). The latex particles of the kit reagents are individually sensitized with rabbit antibodies specific for one of the carbohydrate streptococcal antigens of groups A, B, C, D, F, G.
Отбирали отдельные колонии штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae с питательной среды и ресуспендировали в ферментном растворе для экстракции антигенов. Экстракцию проводили в течение 15 мин при комнатной температуре. Готовый экстракт тестировали на реакционном слайде с шестью суспензиями латексных частиц, покрытых антителами, каждая из которых специфична для одной из групп стрептококков (A, B, C, D, F, G).Individual colonies of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria were selected from the nutrient medium and resuspended in an enzyme solution for antigen extraction. Extraction was carried out for 15 min at room temperature. The finished extract was tested on a reaction slide with six suspensions of latex particles coated with antibodies, each of which is specific for one of the groups of streptococci (A, B, C, D, F, G).
В присутствии гомологичного антигена латексные частицы суспензий агрегируют, давая видимую невооруженным глазом агглютинацию. Положительный контроль содержит инактивированные поливалентные экстракты для групп A, B, C, D, F, G стрептококков.In the presence of a homologous antigen, latex particles of suspensions aggregate, producing agglutination visible to the naked eye. Positive control contains inactivated polyvalent extracts for groups A, B, C, D, F, G streptococci.
Результат теста (бихроматическое окрашивание) оценивали визуально через 1-2 мин. Проявилась красная агглютинация на зеленом фоне в пробирке с экстрактом группы С - что указывает на положительную реакцию. Штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae принадлежит к серогруппе С.The test result (bichromatic staining) was assessed visually after 1-2 minutes. Red agglutination appeared on a green background in a test tube with group C extract, which indicates a positive reaction. The “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria belongs to serogroup C.
Пример 6. Определение агглютинирующей активности антигена штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae. Example 6. Determination of the agglutinating activity of the antigen of the strain “SD-21” of the bacteria S. dysgalactiae.
Полученные препараты антигена, как описано в примере 1, исследовали в реакции агглютинации (РА) микрометодом для выявления агглютинирующей активности антигена.The resulting antigen preparations, as described in example 1, were examined in an agglutination reaction (RA) using a micromethod to detect the agglutinating activity of the antigen.
Принцип предлагаемого варианта реакции агглютинации на планшете микрометодом заключается в склеивании и выпадении в осадок антигенов S. dysgalactiae под действием специфических антител (агглютининов) в специфической сыворотке крови кролика в присутствии солей электролитов, что визуально регистрировали образованием четко оформленного зонтика на дне лунки планшета. При отрицательной реакции агглютинации антиген оседает на дно в виде точки.The principle of the proposed variant of the micromethod agglutination reaction on a plate is the gluing and precipitation of S. dysgalactiae antigens under the influence of specific antibodies (agglutinins) in specific rabbit blood serum in the presence of electrolyte salts, which was visually recorded by the formation of a clearly defined umbrella at the bottom of the well of the plate. With a negative agglutination reaction, the antigen settles to the bottom in the form of a point.
Для постановки реакции использовали иммуноспецифические компоненты:To stage the reaction, immunospecific components were used:
- специфическая сыворотка крови кролика, однократно иммунизированных антигеном бактерий S. dysgalactiae серогруппы С (положительный контроль);- specific blood serum of a rabbit immunized once with the antigen of bacteria S. dysgalactiae serogroup C (positive control);
- нормальная сыворотка крови кролика, не содержащая антител к S. dysgalactiae серогруппы С (отрицательный контроль);- normal rabbit blood serum that does not contain antibodies to S. dysgalactiae serogroup C (negative control);
- исследуемый антиген штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae (бактериальная суспензия, полученная методом культивирования в жидкой питательной среде, инактивированная формалином). Общую концентрацию микробных клеток в бактериальной суспензии определяют визуально по стандарту (эталону) мутности. Для постановки РА использовали инактивированный антиген из штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae с концентрацией микробных клеток 1×109 в см3.- the studied antigen of the strain “SD-21” of the bacteria S. dysgalactiae (bacterial suspension obtained by cultivation in a liquid nutrient medium, inactivated by formaldehyde). The total concentration of microbial cells in the bacterial suspension is determined visually using a turbidity standard. To stage RA, we used an inactivated antigen from the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria with a microbial cell concentration of 1×10 9 per cm 3 .
Для постановки РА готовили двукратные разведения антигена от 1:2 до 1:4096. Для этого во все лунки планшета вносили фосфатно-солевой буферный раствор (ФСБР) - (рН 7,2-7,4) в объеме 0,05 см3. В первую лунку добавляли подготовленные пробы антигена штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae в объёме 0,05 см3, трехкратно пипетировали и переносили 0,05 см3 во вторую лунку и т.д. Из последней лунки после трехкратного пипетирования 0,05 см3 испытуемого материала удаляли в 2%-ый раствор едкого натрия или другой подобный дезинфектант.To stage RA, twofold dilutions of the antigen were prepared from 1:2 to 1:4096. To do this, a phosphate-buffered saline solution (PBS) - (pH 7.2-7.4) in a volume of 0.05 cm 3 was added to all wells of the plate. Prepared antigen samples of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria were added to the first well in a volume of 0.05 cm3 , pipetted three times and 0.05 cm3 was transferred to the second well, etc. From the last well, after pipetting three times, 0.05 cm 3 of the test material was removed into a 2% solution of sodium hydroxide or another similar disinfectant.
Готовили рабочее разведение положительной и отрицательной контрольных сывороток (1:100) и вносили их во все лунки планшета с разведениями антигена в объёме 0,05 см3. Одновременно ставили контроли реакции:A working dilution of positive and negative control sera (1:100) was prepared and added to all wells of the plate with antigen dilutions in a volume of 0.05 cm 3 . At the same time, reaction controls were set:
- контроль антигена - в две лунки планшета вносили по 0,05 см3 ФСБР разведения антигена. Агглютинация антигена должна полностью отсутствовать;- antigen control - 0.05 cm 3 of PBS antigen dilution was added to two wells of the plate. Antigen agglutination should be completely absent;
- контроль сывороток на спонтанную агглютинацию - к 0,05 см3 контрольной сыворотки крови добавляли 0,05 см3 ФСБР. Спонтанная агглютинация сывороток должна отсутствовать.- control of sera for spontaneous agglutination - 0.05 cm 3 of PBS was added to 0.05 cm 3 of control blood serum. Spontaneous agglutination of sera should be absent.
Планшеты с компонентами реакции инкубировали в течение 18 часов при температуре (37±0,5)°С в статическом состоянии в шейкере-инкубаторе, затем выдерживали в бытовом холодильнике при температуре 4°С в течение 1 часа, после чего производили визуальный учет реакции.The plates with the reaction components were incubated for 18 hours at a temperature of (37±0.5)°C in a static state in an incubator shaker, then kept in a household refrigerator at a temperature of 4°C for 1 hour, after which the reaction was visually recorded.
Реакцию учитывали после полного оседания бактериальных клеток в лунках с контролем антигена.The reaction was taken into account after complete sedimentation of bacterial cells in the wells with antigen control.
Титром исследуемого антигена считали его наибольшее разведение, которое дает чёткую видимую агглютинацию («зонтик»).The titer of the test antigen was considered to be its highest dilution, which gives a clearly visible agglutination (“umbrella”).
Результат реакции считали положительным, если в лунке наблюдали четко выраженную агглютинацию в виде «зонтика», с титром в РА≥1:16 (4 log2).The reaction result was considered positive if a clearly defined agglutination in the form of an “umbrella” was observed in the well, with a titer of PA≥1:16 (4 log 2 ).
Результат считали отрицательным, если антиген оседал на дно лунки в виде точки («пуговки»), с титром в РА<1:16 (4 log2).The result was considered negative if the antigen settled to the bottom of the well in the form of a point (“button”), with a titer in PA <1:16 (4 log 2 ).
Агглютинирующий титр бактериальной суспензии штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae составил 1:1024 (10 log2).The agglutinating titer of the bacterial suspension of the SD-21 strain of S. dysgalactiae bacteria was 1:1024 (10 log 2 ).
Пример 7. Получение экспериментальной модели вакцины на основе антигена штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae. Example 7. Preparation of an experimental vaccine model based on the antigen of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria.
В качестве антигена при изготовлении вакцины против мастита коров использовали бактериальную суспензию штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae, полученную по примеру 1.A bacterial suspension of the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria, obtained according to example 1, was used as an antigen in the preparation of a vaccine against cow mastitis.
Для получения клеточного антигена из бактериальной суспензии - использовали высокоскоростную проточную центрифугу BR 105BRLL, скорость подачи бактериальной суспензии составляла 1 л/час при вращении ротора 14000 об/мин. Общее время центрифугирования составило 15 мин. По окончанию работы ротор извлекали и перемещали в зону чистоты класса А.To obtain cell antigen from a bacterial suspension, a high-speed flow centrifuge BR 105BRLL was used; the bacterial suspension feed rate was 1 l/hour with a rotor rotation of 14,000 rpm. The total centrifugation time was 15 minutes. At the end of the work, the rotor was removed and moved to a class A cleanliness area.
Работу по стерильному извлечению бактериальной массы проводили в локальной чистой зоне 3W. Бактериальную массу снимали с внутренних стенок ротора центрифуги стерильным металлическим шпателем и погружали в стерильный стеклянный стакан. Предварительно в стакан был внесен стерильный фосфатно-солевой буферный раствор в объеме 0,05 л. После снятия всей бактериальной массы суспензию гомогенизировали в лабораторном гомогенизаторе Silverson L4R при комнатной температуре в течение 15 мин при частоте вращения мешалки 2500-2700 об/мин.Work on the sterile extraction of the bacterial mass was carried out in a local clean zone 3W. The bacterial mass was removed from the inner walls of the centrifuge rotor with a sterile metal spatula and immersed in a sterile glass beaker. Previously, a sterile phosphate-buffered saline solution in a volume of 0.05 l was added to the glass. After removing the entire bacterial mass, the suspension was homogenized in a Silverson L4R laboratory homogenizer at room temperature for 15 minutes at a stirrer speed of 2500-2700 rpm.
Полученную бактериальную суспензию фильтровали через стерильный многослойный марлевый фильтр в стерильную бутыль и определяли концентрацию клеток. При постоянном перемешивании бактериальную суспензию разбавляли стерильным фосфатно-буферным раствором до концентрации 1000 ОЕ/см3 (по стандартному образцу мутности бактерийных взвесей «ОРМЕТ»). Готовую суспензию клеточного антигена из штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae до компоновки вакцины хранили в стеклянной бутыли под резиновой пробкой в комнате-рефрижераторе при температуре плюс 4-8°С. Перед перемещением на хранение антиген отбирали в количестве 5,0 см3 и проверяли на стерильность в соответствии с ГФ XIV, т.1, стр. 1201-1222 (ОФС.1.2.4.0003.15).The resulting bacterial suspension was filtered through a sterile multilayer gauze filter into a sterile bottle and the cell concentration was determined. With constant stirring, the bacterial suspension was diluted with a sterile phosphate-buffered solution to a concentration of 1000 FU/ cm3 (according to the standard ORMET turbidity sample for bacterial suspensions). The prepared suspension of cellular antigen from the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria was stored in a glass bottle under a rubber stopper in a refrigerator room at a temperature of plus 4-8°C before the vaccine was assembled. Before moving for storage, the antigen was selected in an amount of 5.0 cm 3 and tested for sterility in accordance with the Global Fund XIV, vol. 1, pp. 1201-1222 (OFS.1.2.4.0003.15).
Для создания экспериментальной серии препарата в количестве 1,0 тыс. доз было использовано:To create an experimental series of the drug in the amount of 1.0 thousand doses, the following was used:
- инактивированный антиген из штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae в количестве - 0,02 дм3;- inactivated antigen from the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria in an amount of 0.02 dm 3 ;
- стерильный физиологический раствор, в количестве - 0,48 дм3;- sterile physiological solution, in an amount of 0.48 dm 3 ;
- адъювант Montanide ISA 206 VG, в количестве - 0,5 кг;- adjuvant Montanide ISA 206 VG, in an amount of 0.5 kg;
- тиомерсал, в количестве - 0,002 дм3.- thiomersal, in an amount of 0.002 dm 3 .
С целью получения эмульсионного препарата, специфический иммуностимулятор (антиген) соединяли со стерильным физиологическим раствором, заявленное выше количество антигена сопоставимо с 2×109 м.к./доза. Масло предварительно было перелито в стеклянную бутыль. Данный адъювант не пригоден для автоклавирования, поэтому перед эмульгированием подвергался холодной стерилизации через капсульный фильтр (0,22 мкм). Все компоненты вакцины были нагреты до 35,0°С. Адъювант соединяли с антигеном при низких оборотах мешалки (250 об/мин) в течение 15 мин. Для получения стабильной эмульсии полуфабрикат вакцины охлаждали до 12°С и проводили повторное эмульгирование в течение 15 мин.In order to obtain an emulsion preparation, a specific immunostimulant (antigen) was combined with a sterile physiological solution; the amount of antigen stated above is comparable to 2×10 9 mc/dose. The oil was previously poured into a glass bottle. This adjuvant is not suitable for autoclaving, so before emulsification it was cold sterilized through a capsule filter (0.22 µm). All vaccine components were heated to 35.0°C. The adjuvant was combined with the antigen at low stirrer speed (250 rpm) for 15 minutes. To obtain a stable emulsion, the semi-finished vaccine was cooled to 12°C and re-emulsified for 15 minutes.
Данной вакциной было иммунизировано 5 кроликов внутримышечно прививной дозой 1,0 см3. У кроликов до иммунизации и через 21 день после вакцинации были отобраны пробы сыворотки крови. Данные сыворотки проверили на наличие антител к бактериям штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae в РА и ИФА. Результаты исследований представлены в таблице 2.5 rabbits were immunized with this vaccine intramuscularly with a vaccination dose of 1.0 cm 3 . Blood serum samples were taken from rabbits before immunization and 21 days after vaccination. These sera were tested for the presence of antibodies to the bacteria strain “SD-21” of S. dysgalactiae bacteria in RA and ELISA. The research results are presented in Table 2.
Установлено, что через 21 сутки после однократной иммунизации кроликов инактивированной цельной вакциной, изготовленной из штамма «SD-21» бактерий S. dysgalactiae в сыворотке крови кроликов обнаружены антитела к S. dysgalactiae в ИФА в диапазоне титров от 8,64 до 10,64. log2 (1:400-1:1600) и РА - 8 log2 (1:256). Показано, что полученный штамм «SD-21» бактерий S. dysgalactiae обладает иммуногенными свойствами.It was established that 21 days after a single immunization of rabbits with an inactivated whole vaccine made from the “SD-21” strain of S. dysgalactiae bacteria, antibodies to S. dysgalactiae were detected in the blood serum of rabbits in ELISA in the titer range from 8.64 to 10.64 . log 2 (1:400-1:1600) and RA - 8 log 2 (1:256). It was shown that the resulting strain “SD-21” of S. dysgalactiae bacteria has immunogenic properties.
Таким образом, заявляемый штамм «SD-21» рода Streptococcus вида S. dysgalactiae может быть использован для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров.Thus, the claimed strain “SD-21” of the genus Streptococcus of the species S. dysgalactiae can be used for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows.
Источники информации, принятые во внимание при составлении описания изобретения к заявке на выдачу патента РФ на изобретение «Штамм «SD-21» бактерий Streptococcus dysgalactiae для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров»:Sources of information taken into account when drawing up the description of the invention for the application for a RF patent for the invention “Strain “SD-21” of Streptococcus dysgalactiae bacteria for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows”:
1. Анюлис, Э.В. Изменение возбудителей субклинического мастита у коров при лечении антимаститными препаратами / Э.В. Анюлис, С. Япертас, Ю. Рудеевне, Р. Мишейкене //Матер. Межд. научно-практич конф., «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных» посвященной 100-летию В.А. Акатова. Воронеж, 2009. с. 49-53.1. Anyulis, E.V. Changes in pathogens of subclinical mastitis in cows during treatment with antimastitis drugs / E.V. Anyulis, S. Japertas, J. Rudeevne, R. Misheikiene // Mater. Int. scientific and practical conference, “Modern problems of veterinary provision of reproductive health of animals” dedicated to the 100th anniversary of V.A. Akatova. Voronezh, 2009. p. 49-53.
2. Балдина И.В. Оценка терапевтической эффективности разных схем лечения субклинического мастита в условиях молочно-товарной фермы // Молодежь и наука. №5. 2022.2. Baldina I.V. Evaluation of the therapeutic effectiveness of different treatment regimens for subclinical mastitis in a dairy farm // Youth and Science. No. 5. 2022.
3. Ивашкевич, О.П. Проблемы воспроизводства скота и маститов на промышленных комплексах / О.П. Ивашкевич // Ученые записки: сб. науч. тр. по материалам Межд. науч.-практич. конф. «Инновационное развитие ветеринарного акушерства, гинекологии и биотехнологии размножения животных в условиях интенсификации животноводства» 2-5 ноября 2011 года Витебск. Витебск, 2011. Т. 47. С. 53-55.3. Ivashkevich, O.P. Problems of reproduction of livestock and mastitis in industrial complexes / O.P. Ivashkevich // Scientific notes: collection. scientific tr. based on materials from Int. scientific-practical conf. “Innovative development of veterinary obstetrics, gynecology and biotechnology of animal reproduction in conditions of intensification of livestock production” November 2-5, 2011 Vitebsk. Vitebsk, 2011. T. 47. P. 53-55.
4. Авдуевская Н.Н. Золотистый стафилококк - один из главных возбудителей мастита лактирующих коров//Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2020. № 2 (34). с. 245-249.4. Avduevskaya N.N. Staphylococcus aureus is one of the main causative agents of mastitis in lactating cows // Problems of veterinary sanitation, hygiene and ecology. 2020. No. 2 (34). With. 245-249.
5. Полянцев Н. И., Подберезный В. В. Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных: учебное пособие. Ростов н/Д: Феникс; 2001. 480 с.5. Polyantsev N.I., Podberezny V.V. Veterinary obstetrics and biotechnology of animal reproduction: textbook. Rostov n/a: Phoenix; 2001. 480 p.
6. Кузьминский, И. И. Профилактика мастита у коров/И. И. Кузьминский, А. А. Богуш, В. Е. Иванов // Ветеринарное дело. 2015. № 2. С. 29-32.6. Kuzminsky, I. I. Prevention of mastitis in cows/I. I. Kuzminsky, A. A. Bogush, V. E. Ivanov // Veterinary Affairs. 2015. No. 2. P. 29-32.
7. Некрасов, Г. Д. Акушерство, гинекология и биотехника воспроизводства животных / Г. Д. Некрасов, И. А. Суманова. Барнаул: АГАУ, 2007. 204 с.7. Nekrasov, G. D. Obstetrics, gynecology and biotechnology of animal reproduction / G. D. Nekrasov, I. A. Sumanova. Barnaul: AGAU, 2007. 204 p.
8. Argaw, Amare. Review on Epidemiology of Clinical and Subclinical Mastitis on Dairy Cows // Food Science and Quality Management 2016 Vol 52. P. 56-65.8. Argaw, Amare. Review on Epidemiology of Clinical and Subclinical Mastitis on Dairy Cows // Food Science and Quality Management 2016 Vol 52. P. 56-65.
9. Белкин Б.Л. Диагностика и нетрадиционные методы лечения субклинического мастита коров / Белкин Б.Л., Черепахина Л.А., Попкова Т.В., Скребнева Е.Н. // Вестник ОрелГАУ 1’06. 2020.9. Belkin B.L. Diagnosis and non-traditional methods of treating subclinical mastitis of cows / Belkin B.L., Cherepakhina L.A., Popkova T.V., Skrebneva E.N. // Bulletin of OrelGAU 1’06. 2020.
10. Белявский В.Н. Токсикологическая оценка и терапевтическая эффективность препарата "Цефолакт" при мастите и эндометрите у коров / Белявский В.Н., Лучко И.Т., Будько Ю.С. // Сборник научных трудов: Сельское хозяйство - проблемы и перспективы. Т. 48. 2020. с. 18-31.10. Belyavsky V.N. Toxicological assessment and therapeutic effectiveness of the drug "Cefolact" for mastitis and endometritis in cows / Belyavsky V.N., Luchko I.T., Budko Yu.S. // Collection of scientific papers: Agriculture - problems and prospects. T. 48. 2020. p. 18-31.
11. Богуш, А.А. Терапевтическая эффективность противомаститного препарата фитодисульфан / А.А. Богуш [и др.] // Ветеринарная наука Минск, 2005. Т. 38. с. 127-128.11. Bogush, A.A. Therapeutic effectiveness of the antimastitis drug phytodisulfan / A.A. Bogush [et al.] // Veterinary science Minsk, 2005. T. 38. p. 127-128.
12. Климов, Н.Т. Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите у коров: Автореф. дисс. доктора вет. наук / Н.Т. Климов / Воронеж. 2009. 32 с.12. Klimov, N.T. Experimental and clinical pharmacology of drugs based on dioxidine and doxycycline and their effectiveness for mastitis in cows: Abstract of thesis. diss. vet doctors Sciences / N.T. Klimov / Voronezh. 2009. 32 p.
13. Летунович, А.А. Разработка новых средств и способов диагностики, лечения и профилактики маститов у коров: автореф. дис. канд. вет. наук: 16. 00. 07 / А.А. Летунович; УО «Витебская ордена «Знак Почёта» государственная академия ветеринарной медицины». Витебск, 2006. 27 с.13. Letunovich, A.A. Development of new tools and methods for diagnosing, treating and preventing mastitis in cows: abstract of thesis. dis. Ph.D. vet. Sciences: 16.00.07 / A.A. Letunovich; EE "Vitebsk Order of the Badge of Honor" State Academy of Veterinary Medicine." Vitebsk, 2006. 27 p.
14. Надточий, О.О. Этиопатогенез и разработка эффективного лечения мастита у коров и острых расстройств пищеварения у телят / О.О. Надточий // Эффективность ветеринарных мероприятий в промышленном животноводстве Кубани. Краснодар: КСХИ. - 1989. - с. 20-25.14. Nadtochiy, O.O. Etiopathogenesis and development of effective treatment for mastitis in cows and acute digestive disorders in calves / O.O. Nadtochiy // Efficiency of veterinary measures in industrial livestock farming of Kuban. Krasnodar: KSHI. - 1989. - p. 20-25.
15. Париков, В.А. Маститы у коров (профилактика и лечение) / В.А. Париков, Н.Т. Климов, А.И. Романенко и [др] // Ветеринария. - 2000. № 11. с. 34-37.15. Parikov, V.A. Mastitis in cows (prevention and treatment) / V.A. Parikov, N.T. Klimov, A.I. Romanenko and [others] // Veterinary medicine. - 2000. No. 11. p. 34-37.
16. Горлов, И.Ф. Комплексное лечение коров при маститах / И.Ф.Горлов, О.С. Юрина, М.И. Сложенкина // Ветеринария. 2008. № 2. с. 37-39.16. Gorlov, I.F. Complex treatment of cows with mastitis / I.F. Gorlov, O.S. Yurina, M.I. Slozhenkina // Veterinary medicine. 2008. No. 2. p. 37-39.
17. Ковальчук, С.Н. Маститы у коров (этиология, профилактика, лечение). Автореферат дисс. кандидата вет. наук / С.Н. Ковальчук. Витебск. 2006. 18 с.17. Kovalchuk, S.N. Mastitis in cows (etiology, prevention, treatment). Abstract of dissertation. veterinary candidate Sciences / S.N. Kovalchuk. Vitebsk. 2006. 18 p.
18. Филиппова, О.В. Эффективность нетрадиционных способов лечения маститов у коров / О. Филиппова [и др.] // Молочное и мясное скотоводство. 2001. № 7. с. 26-29.18. Filippova, O.V. The effectiveness of non-traditional methods of treating mastitis in cows / O. Filippova [et al.] // Dairy and beef cattle breeding. 2001. No. 7. p. 26-29.
19. Ходаков, А.В. Эффективность различных препаратов при лечении скрытого мастита у коров / А.В. Ходаков // Диагностика и терапия незаразных болезней с- х. животных: Сб. науч. работ. Воронеж, 1986. с. 23-25.19. Khodakov, A.V. The effectiveness of various drugs in the treatment of latent mastitis in cows / A.V. Khodakov // Diagnostics and therapy of non-communicable agricultural diseases. animals: Sat. scientific works Voronezh, 1986. p. 23-25.
20. Vaarst, M. Patterns of clinical mastitis manifestation in Danish organic dairy herds. / M. Vaarst, C. Eneroedsen // v. Dairy Res. 1997. V. 64. № 1. Р. 23-27.20. Vaarst, M. Patterns of clinical mastitis manifestation in Danish organic dairy herds. / M. Vaarst, C. Eneroedsen // v. Dairy Res. 1997. V. 64. No. 1. R. 23-27.
21. Авдуевская Н.Н. Сравнительный анализ видового состава и количественное соотношение микрофлоры при субклиническом и клиническом мастите коров / Авдуевская Н.Н. и др. // Ветеринария сегодня, Владимир, 2022. с. 296-302.21. Avduevskaya N.N. Comparative analysis of species composition and quantitative ratio of microflora in subclinical and clinical mastitis of cows / Avduevskaya N.N. and others // Veterinary Science Today, Vladimir, 2022. p. 296-302.
22. Галкин А.В. О выявлении возбудителей мастита и их чувствительности к антибиотикам / Галкин А.В., Трепалина Е. // Эффективное животноводство. 2017. № 7 (137). с. 22-23.22. Galkin A.V. On the identification of mastitis pathogens and their sensitivity to antibiotics / Galkin A.V., Trepalina E. // Effective animal husbandry. 2017. No. 7 (137). With. 22-23.
23. Патент US 8 986 973 B2, 26.03.2014 г.23. Patent US 8,986,973 B2, 03/26/2014
24. Патент RU 2 761 379 C1, 23.04.2021 г.24. Patent RU 2 761 379 C1, 04/23/2021
25. Патент CN 109 519 768 А, от 22.01.2022 г.25. Patent CN 109 519 768 A, dated 01/22/2022
26. Патент RU 2 662 300 C2, от 10.02.2010 г.26. Patent RU 2 662 300 C2, dated 02/10/2010
27. Патент RU 2 762 088 C1, от 05.05.2021 г.27. Patent RU 2 762 088 C1, dated 05/05/2021
28. Патент RU 2 787 754 C1, от 20.07.2022 г.28. Patent RU 2 787 754 C1, dated July 20, 2022.
29. Патент WO 01/96381 А2, от 20.12.2001 г.29. Patent WO 01/96381 A2, dated December 20, 2001
Таблица 1Table 1
Биохимические свойства штамма S. dysgalactiae «SD-21»Biochemical properties of the S. dysgalactiae strain “SD-21”
(предлагаемое изобретение)(proposed invention)
«-» - отрицательный результат.Note: “+” is a positive result,
"-" - negative result.
Таблица 2table 2
Результаты исследований проб сывороток крови кроликов на наличие антител в непрямом варианте ИФА и РА к штамму «SD-21» бактерий Streptococcus dysgalactiae Results of studies of rabbit blood serum samples for the presence of antibodies in indirect ELISA and RA to the “SD-21” strain of Streptococcus dysgalactiae bacteria
+/-Matching results
+/-
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2818361C1 true RU2818361C1 (en) | 2024-05-02 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103800899B (en) * | 2014-01-27 | 2015-08-26 | 内蒙古华希生物科技有限公司 | A kind of mammitis of cow vaccine |
| RU2723711C1 (en) * | 2019-07-02 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) | Method for preparing vaccine with aluminium hydroxide against mastitis of cows streptococcal aetiology |
| US20220288135A1 (en) * | 2019-07-08 | 2022-09-15 | BioPlx, Inc. | Live biotherapeutic compositions and methods |
| RU2799603C1 (en) * | 2022-10-18 | 2023-07-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Sa-21 strain of bacteria of streptococcus genus of streptococcus agalactiae species for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103800899B (en) * | 2014-01-27 | 2015-08-26 | 内蒙古华希生物科技有限公司 | A kind of mammitis of cow vaccine |
| RU2723711C1 (en) * | 2019-07-02 | 2020-06-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" (ФГБНУ ВНИТИБП) | Method for preparing vaccine with aluminium hydroxide against mastitis of cows streptococcal aetiology |
| US20220288135A1 (en) * | 2019-07-08 | 2022-09-15 | BioPlx, Inc. | Live biotherapeutic compositions and methods |
| RU2799603C1 (en) * | 2022-10-18 | 2023-07-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Sa-21 strain of bacteria of streptococcus genus of streptococcus agalactiae species for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КАПУСТИН А.В. и др. Профилактика инфекционных маститов у коров, Труды Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко, 2020, Том 81, Номер 2, стр. 32-37. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2429012C1 (en) | Method of manufacturing associated vaccine against colibacteriosis, streptococcosis and enterococcal infection of calves and piglets | |
| Adlam et al. | Natural and experimental staphylococcal mastitis in rabbits | |
| RU2672589C2 (en) | Vaccine for intrauterine disease | |
| RU2818361C1 (en) | Strain of bacteria streptococcus dysgalactiae for making biopreparations for specific prevention of mastitis in cows | |
| Leigh et al. | Killing of Streptococcus uberis by bovine neutrophils following growth in chemically defined media | |
| RU2428202C1 (en) | Associated vaccine against anaerobic enterotoxemia and colibacillosis diarrhea in calves | |
| RU2799603C1 (en) | Sa-21 strain of bacteria of streptococcus genus of streptococcus agalactiae species for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows | |
| RU2538158C1 (en) | Method of production of vaccine associated against colibacillosis, streptococcosis and staphylococcosis of cattle | |
| RU2818959C1 (en) | Pasteurella multocida "pm - b" bacterium strain for manufacture of biopreparations for specific prevention of pasteurellosis (hemorrhagic septicemia) in cattle caused by serogroup b pasteurella | |
| KR101210082B1 (en) | Vaccine composition for swine polyserositis and manufacturing method thereof | |
| RU2316345C1 (en) | Method for manufacturing associated vaccione against colibacteriosis, salmonellosis, streptococcosis and enterococcal infection in nutrias | |
| KR101209964B1 (en) | Vaccine composition for swine polyserositis and manufacturing method thereof | |
| RU2406532C1 (en) | Method of producing associated vaccine against streptococcosis and staphylococcosis of cattle | |
| RU2288002C1 (en) | Method for preparing vaccine against enterococcus infection in nutrias | |
| RU2761379C1 (en) | Polyvalent inactivated vaccine against swine streptococcosis, method for its production and use | |
| RU2815387C1 (en) | Corynebacterium pseudotuberculosis bacteria strain, intended for producing mono- or polyvalent immunogenic compositions, aimed at specific prevention of caseous lymphadenitis (pseudotuberculosis) of small cattle | |
| RU2221864C2 (en) | Bacterium strain klebsiella pneumoniae deposited in vgnki at = 23 mgavmib-dep for producing vaccine against klebsiellosis in agriculture young stock | |
| RU2790481C1 (en) | Antibacterial composition based on endolysins and drugs in form of gel or spray, using it | |
| RU2741643C1 (en) | Associated vaccine against myxomatosis, pasteurellosis and viral haemorrhagic disease 1 and type 2 of rabbits | |
| RU2744744C1 (en) | Vaccine against manchemiosis, bibershteiniosis and pasterelosis of large and small cattle associated inactivated, method for its preparation | |
| RU2521651C1 (en) | STRAINS OF BACTERIA Moraxella bovoculi "SH-CH6 N-DEP" USED TO MANUFACTURE DIAGNOSTIC PREPARATIONS AND VACCINES AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE | |
| RU2224019C2 (en) | Strain of bacterium klebsiella pneumoniae = 24 mgavmib-dep for producing vaccine against klebsiellosis in agriculture young stock | |
| RU2787392C1 (en) | Bacterial strain gallibacterium anatis intended for obtaining mono- and polyvalent immunogenic compositions aimed for the specific prevention of gallibacterium anatis in farm poultry | |
| KR102464115B1 (en) | Vaccine composition of novel inactivated Actinobacillus pleuroneumoniae bacteria (serotypes 1, 2, 5, 7, 10, 12 and 15) | |
| RU2217163C2 (en) | Vaccine against candidosis in agriculture animals |