RU2816703C1 - Method of producing fermented velvet antlers extract by three-step treatment - Google Patents

Method of producing fermented velvet antlers extract by three-step treatment Download PDF

Info

Publication number
RU2816703C1
RU2816703C1 RU2023117059A RU2023117059A RU2816703C1 RU 2816703 C1 RU2816703 C1 RU 2816703C1 RU 2023117059 A RU2023117059 A RU 2023117059A RU 2023117059 A RU2023117059 A RU 2023117059A RU 2816703 C1 RU2816703 C1 RU 2816703C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
antlers
extract
fermented
minutes
solution
Prior art date
Application number
RU2023117059A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ёнк Чин ЧОНК
Чиын О
Чэ Хён СИН
Original Assignee
Атоми Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Атоми Ко., Лтд. filed Critical Атоми Ко., Лтд.
Application granted granted Critical
Publication of RU2816703C1 publication Critical patent/RU2816703C1/en

Links

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: disclosed is a method for producing an extract of fermented antlers, a water-soluble powder of the extract obtained using the disclosed method, and a method of increasing sulphated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the fermented antlers extract when implementing the disclosed method. Claimed method of producing an extract of fermented velvet antlers involves treatment of milled velvet antlers at 115–125 °C and pressure of 2.5–3.5 bar for 50–70 minutes; addition of water with subsequent addition of proteinase and enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to velvet antler solution; velvet antler solution sterilization, inoculation thereof with a culture of Bacillus coagulans for subsequent fermentation and filtration; then filtered solution is pasteurized with subsequent concentration and drying.
EFFECT: inventions provide a wider range of methods for producing an extract of fermented velvet antlers and increased content of sulphated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in fermented velvet antlers extract.
4 cl, 1 dwg, 6 tbl, 11 ex

Description

Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates

Настоящее изобретение относится к способу получения экстракта ферментированных пантов с повышенным содержанием эффективных компонентов путем трехстадийной обработки, включающей обработку при высокой температуре и высоком давлении, ферментативную обработку и ферментацию. Настоящее изобретение также относится к экстракту ферментированных пантов, полученному вышеуказанным способом, и к способу повышения содержания сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов.The present invention relates to a method for producing fermented antlers extract with an increased content of effective components through a three-stage processing, including processing at high temperature and high pressure, enzymatic processing and fermentation. The present invention also relates to an extract of fermented antlers obtained by the above method, and to a method for increasing the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the extract of fermented antlers.

Предшествующий уровень техникиPrior Art

Панты (Cervi Parvum Cornu) относятся к неокостеневшим молодым рогам оленя и, наряду с женьшенем, уже давно признаны наиболее представительным тонизирующим материалом и поэтому широко используется в Корее, Китае и Японии. Фармакологическое свойство природного лекарственного средства с таким тонизирующим действием характеризуется комплексной эффективностью, проявляющейся во всем организме, а не избирательным проявлением активности и действием на отдельные органы. Фармакологическая активность пантов включает стимуляцию синтеза белков и нуклеиновых кислот, стимуляцию кроветворения, усиление иммунитета, воздействие на сердечно-сосудистую систему, антистрессовые эффекты, омолаживающие эффекты и противоязвенную активность. В качестве фармакологически активных компонентов пантов известны ганглиозиды, пантокрин, аминокислоты, фосфат кальция, карбонат кальция, коллаген, фосфолипиды, хондроитин, глюкозамин, гиалуроновая кислота и др. Antlers (Cervi Parvum Cornu) refer to the unossified young antlers of deer and, along with ginseng, have long been recognized as the most representative tonic material and are therefore widely used in Korea, China and Japan. The pharmacological property of a natural medicine with such a tonic effect is characterized by complex effectiveness, manifested throughout the body, and not by selective manifestation of activity and effect on individual organs. The pharmacological activity of antlers includes stimulation of the synthesis of proteins and nucleic acids, stimulation of hematopoiesis, strengthening of the immune system, effects on the cardiovascular system, anti-stress effects, anti-aging effects and anti-ulcer activity. Gangliosides, pantocrine, amino acids, calcium phosphate, calcium carbonate, collagen, phospholipids, chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, etc. are known as pharmacologically active components of antlers.

Сиаловая кислота, известная как маркерный материал пантов, показывающий активность, представляет собой моносахарид, который присоединяется в форме сахарной цепи к клетке или растворимому белку. Это конституциональный материал, играющий важную роль в нейронной передаче, формировании ганглиозных клеток в головном мозге, а также в поддержании структуры и функции ганглиозидов. Наиболее типичным примером сиаловой кислоты является N-ацетилнейраминовая кислота. Sialic acid, known as the activity marker material of antlers, is a monosaccharide that attaches in the form of a sugar chain to a cell or soluble protein. It is a constitutional material that plays an important role in neuronal transmission, the formation of ganglion cells in the brain, and the maintenance of ganglioside structure and function. The most common example of sialic acid is N-acetylneuraminic acid.

Гликозаминогликаны (GAG) представляют собой мукополисахариды, имеющие скелет, в котором уроновая кислота и глюкозамин повторяются с частичным сульфатированием. GAG существуют в организме в форме протеогликанов. S-GAG являются основным компонентом хряща в суставах, студенистого ядра диска и т.п., и известно, что они обладают терапевтическими эффектами при артрите, мощными противовоспалительными эффектами и влагоудерживающими эффектами. Glycosaminoglycans (GAGs) are mucopolysaccharides having a skeleton in which uronic acid and glucosamine are repeated with partial sulfation. GAGs exist in the body in the form of proteoglycans. S-GAGs are the main component of cartilage in joints, nucleus pulposus of discs, etc., and are known to have therapeutic effects on arthritis, potent anti-inflammatory effects, and water-retaining effects.

Bacillus coagulans представляет собой грамположительную факультативную анаэробную бактерию, растущую в диапазоне температур 30-55°С, при этом оптимальная температура для роста составляет 50°С. Она обладает характеристиками обоих родов Bacillus и Lactobacillus, демонстрируя формирование спор и выработку молочной кислоты. Bacillus coagulans привлекла внимание как штамм, который может продуцировать L-молочную кислоту, термоустойчивые ферменты и противомикробный пептид коагулин. Способность продуцировать биоматериалы при высоких температурах также обладает преимуществом, состоящим в сведении к минимуму проблем, связанных с заражением.Bacillus coagulans is a Gram-positive facultative anaerobic bacterium that grows in the temperature range of 30-55°C, with an optimal temperature for growth of 50°C. It exhibits characteristics of both Bacillus and Lactobacillus genera, exhibiting spore formation and lactic acid production. Bacillus coagulans has attracted attention as a strain that can produce L-lactic acid, heat-stable enzymes, and the antimicrobial peptide coagulin. The ability to produce biomaterials at high temperatures also has the advantage of minimizing contamination problems.

В настоящее время проводятся различные исследования пантов. Имеются сообщения о многих исследованиях, нацеленных на экстракцию с использованием водорастворимого и органического растворителя (спирт, хлороформ, этанол и т.п.), экстракцию полезных компонентов из ферментированных пантов с использованием белковых гидролитических ферментов и микроорганизмов, а также на анализ и исследование различных маркерных материалов, присутствующих в пантах. Various studies on antlers are currently being conducted. There are reports of many studies aimed at extraction using water-soluble and organic solvent (alcohol, chloroform, ethanol, etc.), extraction of useful components from fermented antlers using protein hydrolytic enzymes and microorganisms, as well as analysis and research of various markers materials present in antlers.

В корейском патенте KR 1776686 описан способ получения твердого препарата из ферментированного продукта пантов, а в корейском патенте KR 1336292 описан способ извлечения эффективных компонентов из пантов с использованием процесса экстракции при сверхвысоком давлении и низкой температуре. Однако эти способы отличаются от способа по настоящему изобретению, в котором экстракт ферментированных пантов получают путем трехстадийной обработки. Korean patent KR 1776686 describes a method for preparing a solid preparation from a fermented antler product, and Korean patent KR 1336292 describes a method for extracting effective components from antlers using an ultra-high pressure, low temperature extraction process. However, these methods differ from the method of the present invention, in which the extract of fermented antlers is obtained by three-step processing.

Раскрытие изобретенияDisclosure of the Invention

Технические проблемы, которые необходимо решить Technical problems that need to be solved

Настоящее изобретение разработано в связи с вышеописанными обстоятельствами, и его целью является обеспечение способа получения экстракта ферментированных пантов с повышенным содержанием эффективных компонентов, при этом экстракт ферментированных пантов содержит большое количество сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот, за счет оптимизации условий получения, таких как обработка при высокой температуре и высоком давлении, ферментативная обработка и ферментация. The present invention was developed in connection with the above-described circumstances, and its purpose is to provide a method for producing fermented antlers extract with a high content of effective components, while the fermented antlers extract contains a large amount of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids, by optimizing the production conditions, such as high temperature and high pressure processing, enzymatic processing and fermentation.

Технические средства для решения задач Technical means for solving problems

Для решения описанных выше задач в настоящем изобретении предлагается способ получения экстракта ферментированных пантов, включающий: (1) обработку измельченных пантов при высокой температуре и высоком давлении; (2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции; (3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans с последующей ферментацией и фильтрацией; и (4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), с последующим концентрированием и сушкой. To solve the problems described above, the present invention provides a method for producing fermented antlers extract, including: (1) processing crushed antlers at high temperature and high pressure; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur; (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2), and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture, followed by fermentation and filtration; and (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3), followed by concentration and drying.

В настоящем изобретении дополнительно предлагается экстракт ферментированных пантов, полученный вышеупомянутым способом. The present invention further provides an extract of fermented antlers obtained by the above-mentioned method.

В настоящем изобретении дополнительно предлагается способ повышения содержания сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов, включающий: (1) обработку измельченных пантов при высокой температуре и высоком давлении; (2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции; (3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans с последующей ферментацией и фильтрацией; и (4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), с последующим концентрированием и сушкой.The present invention further provides a method for increasing the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the extract of fermented antlers, including: (1) processing the crushed antlers at high temperature and high pressure; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur; (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2), and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture, followed by fermentation and filtration; and (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3), followed by concentration and drying.

Положительный эффект изобретения Positive effect of the invention

В соответствии с настоящим изобретением экстракт ферментированных пантов получают путем предварительной обработки, ферментативной обработки и ферментации таким образом, что повышается содержание сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в качестве полезных компонентов для организма человека. Соответственно, преимущество настоящего изобретения состоит в том, что за счет повышенного содержания полезных компонентов может быть обеспечен полезный для здоровья функциональный продукт питания в новой форме с получением продукта, отличающегося от традиционных продуктов из пантов, а также он может быть выгодно использован для различных функциональных продуктов здорового питания. According to the present invention, the fermented antlers extract is obtained by pre-treatment, enzymatic treatment and fermentation in such a way that the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids as beneficial components for the human body is increased. Accordingly, the advantage of the present invention is that by increasing the content of beneficial components, a healthy functional food product can be provided in a new form to obtain a product different from traditional antler products, and it can also be advantageously used for various functional foods healthy eating.

Краткое описание чертежей Brief description of drawings

На фиг. 1 показано фотографическое изображение для сравнения степени растворения порошка экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению после добавления порошка в химический стакан, содержащий дистиллированную воду.In fig. 1 is a photographic image to compare the dissolution rate of the fermented antlers extract powder of the present invention after adding the powder to a beaker containing distilled water.

Наилучший способ(ы) осуществления изобретения Best method(s) for carrying out the invention

Для достижения цели настоящего изобретения в настоящем изобретении предлагается способ получения экстракта ферментированных пантов, включающий: To achieve the object of the present invention, the present invention provides a method for producing fermented antlers extract, comprising:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре и высоком давлении; (1) processing of crushed antlers at high temperature and high pressure;

(2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans с последующей ферментацией и фильтрацией; и (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2), and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture, followed by fermentation and filtration; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), с последующим концентрированием и сушкой. (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3), followed by concentration and drying.

В соответствии со способом получения экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению, на описанной выше стадии (1) измельченные панты предпочтительно могут быть обработаны при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 минут. Более предпочтительно измельченные панты могут быть обработаны при высокой температуре 121°С и высоком давлении 3 бар в течение 60 минут. Когда обработка при высокой температуре и высоком давлении проводится в вышеуказанных условиях перед ферментативной обработкой, достигается более высокое содержание эффективных компонентов, благодаря чему может быть получен экстракт ферментированных пантов высокого качества. According to the method for producing fermented antlers extract of the present invention, in the above step (1), the crushed antlers can preferably be treated at a high temperature of 115-125°C and a high pressure of 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes . More preferably, the crushed antlers can be processed at a high temperature of 121°C and a high pressure of 3 bar for 60 minutes. When high temperature and high pressure treatment is carried out under the above conditions before enzymatic treatment, a higher content of effective components is achieved, so that high quality fermented antlers extract can be obtained.

Кроме того, в соответствии со способом получения экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению, на вышеуказанной стадии (2) предпочтительно добавлять 0,4-0,6% (масса/объем) протеиназы и 0,4-0,6% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 4-6-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечить возможность протекания реакции в течение 4-6 часов при 55-65°С. Более предпочтительно, 0,5% (масса/объем) протеиназы и 0,5% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы добавляют к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечивают возможность протекания реакции в течение 5 часов при 60°С. Путем обеспечения возможности протекания реакции с использованием описанных выше ферментов можно значительно увеличить содержание сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот. Moreover, according to the method for producing fermented antlers extract of the present invention, in the above step (2), it is preferable to add 0.4-0.6% (w/v) proteinase and 0.4-0.6% (w/v ) enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water in 4-6 times the amount (volume/weight) to the antlers treated in step (1), and allow the reaction to proceed for 4-6 hours at 55-65°C. More preferably, 0.5% (w/v) proteinase and 0.5% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex are added to the antler solution prepared by adding 5 times (v/w) water ) to antlers treated in step (1), and allow the reaction to proceed for 5 hours at 60°C. By allowing the reaction to proceed using the enzymes described above, the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids can be significantly increased.

Кроме того, в соответствии со способом получения экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению, на вышеописанной стадии (3) предпочтительно полученный после реакции раствор пантов стерилизуют в течение 10-20 минут при 110-130°С и стерилизованный раствор пантов инокулируют культурой Bacillus coagulans в количестве 1,5-2,5% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в течение 20-28 часов при 34-40°С и фильтрацией. Более предпочтительно полученный после реакции раствор пантов стерилизуют в течение 15 минут при 121°С, и стерилизованный раствор пантов инокулируют культурой Bacillus coagulans в количестве 2% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в течение 24 часов при 37°С и фильтрацией. Когда ферментацию обработанных ферментами пантов проводят с использованием бактериального штамма вышеуказанного типа, может быть получено высокое содержание эффективных компонентов, а также может быть еще больше усилен мягкий вкус и аромат пантов.In addition, according to the method for producing fermented antlers extract of the present invention, in the above-described step (3), preferably the antlers solution obtained after the reaction is sterilized for 10-20 minutes at 110-130°C, and the sterilized antlers solution is inoculated with a Bacillus coagulans culture in an amount 1.5-2.5% (vol/vol) in relation to the sterilized antlers solution, followed by fermentation for 20-28 hours at 34-40°C and filtration. More preferably, the resulting antler solution is sterilized for 15 minutes at 121°C, and the sterilized antler solution is inoculated with a Bacillus coagulans culture in an amount of 2% (v/v) relative to the sterilized antler solution, followed by fermentation for 24 hours at 37°C. With and filtration. When the fermentation of enzyme-treated antlers is carried out using a bacterial strain of the above type, a high content of effective components can be obtained, and the mild taste and aroma of the antlers can be further enhanced.

Более того, в соответствии со способом получения экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению, на вышеописанной стадии (4) предпочтительно отфильтрованный раствор стерилизовать в течение 5-15 минут при 90-100°С с последующим концентрированием и сушкой. Более предпочтительно стерилизовать отфильтрованный раствор в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием и сушкой. Moreover, according to the method for producing fermented antlers extract of the present invention, in the above-described step (4), it is preferable to sterilize the filtered solution for 5-15 minutes at 90-100°C, followed by concentration and drying. It is more preferable to sterilize the filtered solution for 10 minutes at 95°C, followed by concentration and drying.

Более конкретно, способ получения экстракта ферментированных пантов по настоящему изобретению может включать следующие стадии: More specifically, the method for producing the fermented antlers extract of the present invention may include the following steps:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 минут; (1) processing of crushed antlers at high temperature 115-125°C and high pressure 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes;

(2) добавление 0,4-0,6% (масса/объем) протеиназы и 0,4-0,6% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 4-6-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции в течение 4-6 часов при 55-65°С; (2) adding 0.4-0.6% (w/v) proteinase and 0.4-0.6% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex to the antler solution obtained by adding water to 4-6 times the amount (volume/weight) to the antlers treated in stage (1), and allowing the reaction to proceed for 4-6 hours at 55-65°C;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 10-20 минут при 110-130°С и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 1,5-2,5% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в течение 20-28 часов при 34-40°С; и (3) sterilization of the antler solution obtained after the reaction in step (2) for 10-20 minutes at 110-130°C and inoculation of the sterilized antler solution with a culture of Bacillus coagulans in an amount of 1.5-2.5% (vol/vol ) in relation to a sterilized solution of antlers, followed by fermentation for 20-28 hours at 34-40°C; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 5-15 минут при 90-100°С с последующим концентрированием и сушкой. (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 5-15 minutes at 90-100°C, followed by concentration and drying.

Еще более конкретно, способ может включать следующие стадии: More specifically, the method may include the following steps:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 121°С и высоком давлении 3 бар в течение 60 минут; (1) processing the crushed antlers at a high temperature of 121°C and a high pressure of 3 bar for 60 minutes;

(2) добавление 0,5% (масса/объем) протеиназы и 0,5% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции в течение 5 часов при 60°С; (2) adding 0.5% (w/v) proteinase and 0.5% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex to the antler solution prepared by adding 5 times (v/w) water ) to antlers treated in step (1), and allowing the reaction to proceed for 5 hours at 60°C;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 15 минут при 121°С, и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 2% (объем/объем) по сравнению со стерилизованным раствором пантов с последующей ферментацией в течение 24 часов при 37°С; и (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2) for 15 minutes at 121°C, and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture in an amount of 2% (vol/vol) compared to the sterilized antler solution, followed by fermentation for 24 hours at 37°C; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием и сушкой. (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 10 minutes at 95°C, followed by concentration and drying.

В настоящем изобретении дополнительно предлагается экстракт ферментированных пантов, полученный вышеупомянутым способом.The present invention further provides an extract of fermented antlers obtained by the above-mentioned method.

В настоящем изобретении дополнительно предлагается способ повышения содержания сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов, включающий: The present invention further provides a method for increasing the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the extract of fermented antlers, including:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре и высоком давлении; (1) processing of crushed antlers at high temperature and high pressure;

(2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans с последующей ферментацией и фильтрацией; и (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2), and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture, followed by fermentation and filtration; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), с последующим концентрированием и сушкой. (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3), followed by concentration and drying.

В частности, способ повышения содержания сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов по настоящему изобретению может включать следующие стадии: In particular, the method of increasing the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the extract of fermented antlers of the present invention may include the following steps:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 минут; (1) processing of crushed antlers at high temperature 115-125°C and high pressure 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes;

(2) добавление 0,4-0,6% (масса/объем) протеиназы и 0,4-0,6% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 4-6-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции в течение 4-6 часов при 55-65°С; (2) adding 0.4-0.6% (w/v) proteinase and 0.4-0.6% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex to the antler solution obtained by adding water to 4-6 times the amount (volume/weight) to the antlers treated in stage (1), and allowing the reaction to proceed for 4-6 hours at 55-65°C;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 10-20 минут при 110-130°С и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 1,5-2,5% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в течение 20–28 часов при 34-40°С; и (3) sterilization of the antler solution obtained after the reaction in step (2) for 10-20 minutes at 110-130°C and inoculation of the sterilized antler solution with a culture of Bacillus coagulans in an amount of 1.5-2.5% (vol/vol ) in relation to a sterilized solution of antlers, followed by fermentation for 20–28 hours at 34-40°C; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 5-15 минут при 90-100°С с последующим концентрированием и сушкой. (4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 5-15 minutes at 90-100°C, followed by concentration and drying.

Более конкретно, способ может включать следующие стадии: More specifically, the method may include the following steps:

(1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 121°С и высоком давлении 3 бар в течение 60 минут; (1) processing the crushed antlers at a high temperature of 121°C and a high pressure of 3 bar for 60 minutes;

(2) добавление 0,5% (масса/объем) протеиназы и 0,5% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции в течение 5 часов при 60°С; (2) adding 0.5% (w/v) proteinase and 0.5% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex to the antler solution prepared by adding 5 times (v/w) water ) to antlers treated in step (1), and allowing the reaction to proceed for 5 hours at 60°C;

(3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 15 минут при 121°С и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 2% (объем/объем) по сравнению со стерилизованным раствором пантов с последующей ферментацией в течение 24 часов при 37°С; и (3) sterilizing the antler solution obtained after the reaction in step (2) for 15 minutes at 121°C and inoculating the sterilized antler solution with a Bacillus coagulans culture in an amount of 2% (v/v) compared to the sterilized antler solution, followed by fermentation for 24 hours at 37°C; And

(4) стерилизацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием и сушкой.(4) sterilizing the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 10 minutes at 95°C, followed by concentration and drying.

Ниже настоящее изобретение поясняется более подробно при рассмотрении разделов «Примеры получения» и «Примеры». Однако следующие разделы «Примеры получения» и «Примеры» представлены только для конкретного пояснения настоящего изобретения, и очевидно, что объем настоящего изобретения ими не ограничивается. Below, the present invention is explained in more detail by considering the sections “Preparation Examples” and “Examples”. However, the following sections "Preparation Examples" and "Examples" are presented only to specifically explain the present invention, and it is obvious that the scope of the present invention is not limited thereto.

Примеры Examples

Пример получения 1. Экстракт ферментированных пантов Preparation example 1. Fermented antlers extract

(1) После получения высушенных фрагментов пантов их измельчали в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см с помощью дробилки, а затем подвергали в течение 1 часа обработке при высокой температуре и высоком давлении при 121°C и 3 бар. (1) After obtaining the dried antler fragments, they were crushed into powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm using a crusher, and then subjected to high temperature and high pressure treatment at 121°C and 3 bar for 1 hour.

(2) 0,5% (масса/объем) Protese (ProteAX) в качестве протеиназы и 0,5% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы добавляли к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. (2) 0.5% (w/v) Protese (ProteAX) as proteinase and 0.5% (w/v) cellulase, beta-glucanase and hemicellulase enzyme complex were added to the antler solution prepared by adding water in 5- multiple (volume/weight) to the antlers treated in step (1), and then allowed the reaction to proceed for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

(3) Раствор пантов, полученный после реакции на стадии (2), стерилизовали в течение 15 минут при 121°C с последующим охлаждением до комнатной температуры, и полученный стерилизованный раствор пантов инокулировали культурой Bacillus coagulans (107-8 КОЕ/мл) в количестве 2% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С и фильтрацией через фильтровальную бумагу. (3) The antler solution obtained after the reaction in step (2) was sterilized for 15 minutes at 121°C followed by cooling to room temperature, and the resulting sterilized antler solution was inoculated with a Bacillus coagulans culture (10 7-8 CFU/ml) in in an amount of 2% (vol/vol) relative to the sterilized antler solution, followed by fermentation in an incubator for 24 hours at 37°C and filtration through filter paper.

(4) Отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации на стадии (3), стерилизовали в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием с использованием роторного концентратора, а затем подвергали сушке вымораживанием.(4) The filtered solution obtained by filtration in step (3) was sterilized for 10 minutes at 95°C, followed by concentration using a rotary concentrator, and then freeze-dried.

Сравнительный пример 1. Экстракт ферментированных пантов Comparative Example 1: Fermented Antler Extract

(1) После получения высушенных фрагментов пантов их измельчали в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см с помощью дробилки, а затем 0,5% (масса/объем) Protese (ProteAX) в качестве протеиназы и 0,5% (масса/объем) ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы добавляли к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к раствору пантов, и затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. (1) After obtaining the dried antlers fragments, they were ground into powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm using a crusher, followed by 0.5% (w/v) Protese (ProteAX) as proteinase and 0.5 % (w/v) enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase was added to the antler solution obtained by adding 5 times (v/w) water to the antler solution and then allowed to react for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

(2) Раствор пантов, полученный после реакции на стадии (1), стерилизовали в течение 15 минут при 121°C с последующим охлаждением до комнатной температуры, и полученный стерилизованный раствор пантов инокулировали культурой Bacillus coagulans (107-8 КОЕ/мл) в количестве 2% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующей ферментацией в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С и фильтрацией через фильтровальную бумагу. (2) The antler solution obtained after the reaction in step (1) was sterilized for 15 minutes at 121°C followed by cooling to room temperature, and the resulting sterilized antler solution was inoculated with a Bacillus coagulans culture (10 7-8 CFU/ml) in in an amount of 2% (vol/vol) relative to the sterilized antler solution, followed by fermentation in an incubator for 24 hours at 37°C and filtration through filter paper.

(3) Отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации на стадии (2), стерилизовали в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием с использованием роторного концентратора, а затем подвергали сушке вымораживанием.(3) The filtered solution obtained by filtration in step (2) was sterilized for 10 minutes at 95°C, followed by concentration using a rotary concentrator, and then freeze-dried.

Сравнительный пример 2. Экстракт ферментированных пантов Comparative Example 2: Fermented Antler Extract

(1) После получения высушенных фрагментов пантов их измельчали в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см с помощью дробилки. (1) After obtaining the dried antler fragments, they were ground into powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm using a crusher.

(2) 0,5% (масса/объем) Protese (ProteAX) в качестве протеиназы и 0,5% (масса/объем) фермента KFEN2® (глюкоамилаза) добавляли к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. (2) 0.5% (w/v) Protese (ProteAX) as proteinase and 0.5% (w/v) KFEN2® enzyme (glucoamylase) were added to the antler solution prepared by adding 5 times the amount of water ( volume/weight) to the antlers treated in step (1), and then allowed the reaction to proceed for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

(3) Раствор пантов, полученный после реакции на стадии (2), стерилизовали в течение 15 минут при 121°C с последующим охлаждением до комнатной температуры, и полученный стерилизованный раствор пантов инокулировали культурой Bacillus subtilis (107-8 КОЕ/ мл) в количестве 2% (объем/объем) по отношению к раствору пантов с последующей ферментацией в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С и фильтрацией через фильтровальную бумагу.(3) The antler solution obtained after the reaction in step (2) was sterilized for 15 minutes at 121°C followed by cooling to room temperature, and the resulting sterilized antler solution was inoculated with a Bacillus subtilis culture (10 7-8 CFU/ml) in amount of 2% (vol/vol) relative to the antlers solution, followed by fermentation in an incubator for 24 hours at 37°C and filtration through filter paper.

(4) Отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации на стадии (3), стерилизовали в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием с использованием роторного концентратора, а затем подвергали сушке вымораживанием. (4) The filtered solution obtained by filtration in step (3) was sterilized for 10 minutes at 95°C, followed by concentration using a rotary concentrator, and then freeze-dried.

Сравнительный пример 3. Экстракт ферментированных пантов Comparative Example 3: Fermented Antler Extract

(1) После получения высушенных фрагментов пантов их измельчали в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см с помощью дробилки, а затем подвергали в течение 1 часа обработке при высокой температуре и высоком давлении при 121°C и 3 бар. (1) After obtaining the dried antler fragments, they were crushed into powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm using a crusher, and then subjected to high temperature and high pressure treatment at 121°C and 3 bar for 1 hour.

(2) 1% (масса/объем) ферментного комплекса пектиназы и целлюлозы добавляли к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) к раствору пантов, обработанному на стадии (1), и затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. (2) 1% (w/v) pectinase cellulose enzyme complex was added to the antler solution obtained by adding 5 times (v/w) water to the antler solution treated in step (1), and then allowed to flow reaction for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

(3) Раствор пантов, полученный после реакции на стадии (2), стерилизовали в течение 15 минут при 121°C с последующим охлаждением до комнатной температуры, и полученный стерилизованный раствор пантов инокулировали культурой смешанных лактобацилл (107-8 КОЕ/мл), содержащих Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum и Lactobacillus longum, в количестве 2% (объем/объем) по отношению к раствору пантов с последующей ферментацией в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С и фильтрацией через фильтровальную бумагу. (3) The antler solution obtained after the reaction in step (2) was sterilized for 15 minutes at 121°C followed by cooling to room temperature, and the resulting sterilized antler solution was inoculated with a mixed lactobacilli culture (10 7-8 CFU/ml), containing Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus longum, in an amount of 2% (vol/vol) relative to the antlers solution, followed by fermentation in an incubator for 24 hours at 37°C and filtration through filter paper.

(4) Отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации на стадии (3), стерилизовали в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием с использованием роторного концентратора, а затем подвергали сушке вымораживанием.(4) The filtered solution obtained by filtration in step (3) was sterilized for 10 minutes at 95°C, followed by concentration using a rotary concentrator, and then freeze-dried.

Сравнительный пример 4. Экстракт пантов Comparative Example 4: Antler Extract

(1) После получения высушенных фрагментов пантов их измельчали в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см с помощью дробилки, а затем подвергали в течение 1 часа обработке при высокой температуре и высоком давлении при 121°С и 3 бар. (1) After obtaining the dried antlers fragments, they were crushed into powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm using a crusher, and then subjected to high temperature and high pressure treatment at 121°C and 3 bar for 1 hour.

(2) К раствору пантов, полученному после реакции на стадии (1), добавляли Protamex (Novozymes), который составлял 1% (масса/объем) по отношению к раствору пантов, полученному после добавления воды в 5-кратном количестве (объем/масса) в раствор пантов, а затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. (2) To the antler solution obtained after the reaction in step (1), Protamex (Novozymes) was added, which was 1% (w/v) relative to the antler solution obtained after adding water 5 times (v/w ) into the antlers solution, and then allowed the reaction to proceed for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

(3) Отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации на стадии (2), стерилизовали в течение 10 минут при 95°С с последующим концентрированием с использованием роторного концентратора, а затем подвергали сушке вымораживанием. (3) The filtered solution obtained by filtration in step (2) was sterilized for 10 minutes at 95°C, followed by concentration using a rotary concentrator, and then freeze-dried.

Материалы и способы Materials and methods

1. Тестовые материалы 1. Test materials

Что касается пантов, то российские сушеные фрагменты пантов закупали и использовали после их измельчения с помощью дробилки в порошок с приблизительным размером 0,5 см × 0,5 см. В качестве ферментного препарата использовали протеиназный фермент ProteAX (1400 ЕД/г) и ферментный комплекс сумизим (200 GAU/г). As for antlers, Russian dried antler fragments were purchased and used after they were crushed using a crusher into a powder with an approximate size of 0.5 cm × 0.5 cm. ProteAX proteinase enzyme (1400 U/g) and an enzyme complex were used as an enzyme preparation sumizim (200 GAU/g).

2. Выделение бактериальных штаммов для использования и культуральная среда2. Isolation of bacterial strains for use and culture medium

Что касается бактериального штамма, используемого для ферментированных пантов, использовали Bacillus coagulans (ATCC 7050), полученный из Корейской коллекции типовых культур. Bacillus coagulans сначала культивировали в течение 24 часов при 37°С в бульоне MRS, который является исключительной культуральной средой для лактобацилл, а затем хранили при 4°С до использования. Regarding the bacterial strain used for fermented antlers, Bacillus coagulans (ATCC 7050) obtained from the Korean Type Culture Collection was used. Bacillus coagulans was first cultured for 24 hours at 37°C in MRS broth, which is an exclusive culture medium for lactobacilli, and then stored at 4°C until use.

3. Приготовление экстракта ферментированных пантов 3. Preparation of fermented antlers extract

1) Способ обработки при высокой температуре и высоком давлении1) High temperature and high pressure processing method

Измельченные панты подвергали обработке при высоком давлении в различных условиях с разным временем обработки.The crushed antlers were processed at high pressure under different conditions with different processing times.

2) Обработка ферментным препаратом 2) Treatment with an enzyme preparation

К пантам, полученным после обработки при высокой температуре и высоком давлении, добавляли очищенную воду в количестве, которое в 5 раз превышало количество пантов (масса/масса), а затем добавляли ферментный препарат ProteAX и сумизим, каждого в количестве 0,5% (масса/объем). Затем обеспечивали возможность протекания реакции в течение 5 часов в термостатической водяной бане при 60°С. To the antlers obtained after treatment at high temperature and high pressure, purified water was added in an amount that was 5 times the amount of antlers (wt/wt), and then the enzyme preparation ProteAX and sumizim were added, each in an amount of 0.5% (wt). /volume). The reaction was then allowed to proceed for 5 hours in a thermostatic water bath at 60°C.

3) Приготовление экстракта ферментированных пантов на основе ферментации3) Preparation of fermented antlers extract based on fermentation

Обработанный ферментами раствор пантов стерилизовали при 121°С в течение 15 минут и охлаждали до комнатной температуры. Затем раствор инокулировали 2% (объем/объем) культурой Bacillus coagulans и культивирование проводили при 37оС в течение 24 часов в инкубаторе с постоянной температурой (HB-102L, Korea). После культивирования раствор фильтровали с использованием фильтровальной бумаги Whatman № 3 (Whatman Co., Maidstone, England). Часть отфильтрованного раствора использовали для тестирования в качестве экстракта ферментированных пантов, а оставшийся отфильтрованный раствор стерилизовали при 95°С в течение 10 минут, а затем концентрировали с использованием роторного концентратора (N-1000VW, Eyela Co., Tokyo, Japan) и сушили вымораживанием (NB-504, Ilshin Co., Dongducheon, Korea) с получением порошкообразной формы, которую хранили при комнатной температуре. The enzyme-treated antler solution was sterilized at 121°C for 15 minutes and cooled to room temperature. The solution was then inoculated with 2% (v/v) Bacillus coagulans culture and culture was carried out at 37 ° C for 24 hours in a constant temperature incubator (HB-102L, Korea). After culture, the solution was filtered using Whatman No. 3 filter paper (Whatman Co., Maidstone, England). Part of the filtered solution was used for testing as fermented antlers extract, and the remaining filtered solution was sterilized at 95°C for 10 minutes and then concentrated using a rotary concentrator (N-1000VW, Eyela Co., Tokyo, Japan) and freeze-dried ( NB-504, Ilshin Co., Dongducheon, Korea) to obtain a powder form, which was stored at room temperature.

4. Анализируемые параметры 4. Analyzed parameters

1) pH, сладковатость и цвет 1) pH, sweetness and color

Значение рН измеряли с помощью рН-метра (Orion star A111, Thermo Scientific, USA), сладковатость измеряли с помощью сахарного рефрактометра (PR-101, Atage Co. Ltd., Japan), цвет измеряли с помощью УФ-видимого спектрометра (UV-1601, Shimadzu, Japan).The pH value was measured using a pH meter (Orion star A111, Thermo Scientific, USA), sweetness was measured using a sugar refractometer (PR-101, Atage Co. Ltd., Japan), color was measured using a UV-visible spectrometer (UV- 1601, Shimadzu, Japan).

2) Содержание растворимых твердых веществ 2) Soluble solids content

Содержание растворимых твердых веществ определяли путем взятия 1 г тестируемого образца, его выпаривания и сушки при 105°C, и с использованием анализатора влажности (FD-660, Kett, Korea) измерения массы тестируемого образца с целью ее представления в виде сухой массы (%) по отношению к массе образца. Soluble solids content was determined by taking 1 g of the test sample, evaporating and drying it at 105°C, and using a moisture analyzer (FD-660, Kett, Korea) to measure the mass of the test sample to report it as dry weight (%) relative to the mass of the sample.

3) Содержание свободных аминокислот 3) Content of free amino acids

К 10 г тестируемого образца добавляли 5% раствор TCA (трихлоруксусной кислоты) в том же количестве, что и тестируемый образец, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После этого смесь центрифугировали при 10000 об/мин в течение 10 минут для удаления белков и собирали супернатант. К супернатанту добавляли 100 мл диэтилового эфира и затем проводили экстракцию в повторяющемся режиме, т.е. три раза, для удаления липидов, пигментов и других липофильных материалов. Полученный в результате водный слой концентрировали при пониженном давлении при 40°С и растворяли в 10 мл 0,2 N литий-цитратного буфера (рН 2,2). Затем его фильтровали через мембранный фильтр (размер пор 0,2 мкм, Advantec MFS, Japan) и анализировали на автоматическом аминокислотном анализаторе (Biochem 20, Pharmacia Biotech. Ltd., England). Результаты представлены в единицах мг% по отношению к экстракту. To 10 g of the test sample, 5% TCA (trichloroacetic acid) solution was added in the same amount as the test sample, and the mixture was stirred for 1 hour. The mixture was then centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes to remove proteins, and the supernatant was collected. 100 ml of diethyl ether was added to the supernatant and then extraction was carried out in a repeating mode, i.e. three times to remove lipids, pigments and other lipophilic materials. The resulting aqueous layer was concentrated under reduced pressure at 40°C and dissolved in 10 ml of 0.2 N lithium citrate buffer (pH 2.2). It was then filtered through a membrane filter (pore size 0.2 μm, Advantec MFS, Japan) and analyzed on an automatic amino acid analyzer (Biochem 20, Pharmacia Biotech. Ltd., England). The results are presented in units of mg% relative to the extract.

4) Содержание сульфатированных гликозаминогликанов (сульфатированных GAG) 4) Content of sulfated glycosaminoglycans (sulfated GAGs)

Для измерения содержания сульфатированных GAG готовили раствор красителя DMB (диметилметиленовый синий) сначала путем растворения 1,185 г NaCl, 1,52 г глицина, 0,008 г DMB и 0,47 мл 36% HCl в 500 мл дистиллированной воды. Приготовленный раствор имел величину поглощения приблизительно 0,34 при 525 нм. Для анализа 0,2 мл тестируемого образца смешивали с 8 мл раствора DMB и измеряли поглощение при 525 нм. Содержание сульфатированных GAG в образце рассчитывали, используя калибровочную кривую с хондроитин-4-сульфатом в качестве стандарта, и результаты выражали в единицах мг% по отношению к экстракту.To measure sulfated GAG content, a DMB (dimethylmethylene blue) dye solution was prepared by first dissolving 1.185 g NaCl, 1.52 g glycine, 0.008 g DMB, and 0.47 mL 36% HCl in 500 mL distilled water. The prepared solution had an absorbance value of approximately 0.34 at 525 nm. For analysis, 0.2 ml of the test sample was mixed with 8 ml of DMB solution and the absorbance was measured at 525 nm. The content of sulfated GAGs in the sample was calculated using a calibration curve with chondroitin-4-sulfate as a standard, and the results were expressed in units of mg% relative to the extract.

5) Содержание N-ацетилнейраминовой кислоты 5) N-acetylneuraminic acid content

Для определения содержания N-ацетилнейраминовой кислоты тестируемый образец подвергали гидролизу путем добавления 15 мМ раствора хлористоводородной кислоты и инкубации смеси в термостатической водяной бане при 80°С в течение 3 часов. В результате гидролиза произошло образование сиаловой кислоты в свободной форме. После реакции отфильтрованный раствор, полученный путем фильтрации реакционной смеси через шприцевой фильтр с размером пор 0,45 мкм, анализировали с помощью HPLC (высокоэффективной жидкостной хроматографии). To determine the N-acetylneuraminic acid content, the test sample was hydrolyzed by adding 15 mM hydrochloric acid solution and incubating the mixture in a thermostatic water bath at 80°C for 3 hours. As a result of hydrolysis, sialic acid was formed in free form. After the reaction, the filtered solution obtained by filtering the reaction mixture through a syringe filter with a pore size of 0.45 μm was analyzed using HPLC (high performance liquid chromatography).

6) Растворение порошка экстракта ферментированных пантов 6) Dissolving fermented antlers extract powder

После взвешивания 0,5 г порошка экстракта ферментированных пантов, полученного путем вышеописанной предварительной обработки при высокой температуре и высоком давлении, его помещали в химический стакан на 100 мл. Затем в химический стакан добавляли 80 мл дистиллированной воды и измеряли время растворения порошка для определения растворимости в воде. After weighing 0.5 g of fermented antler extract powder obtained by the above-described high temperature and high pressure pretreatment, it was placed into a 100 ml beaker. Then 80 ml of distilled water was added to the beaker and the dissolution time of the powder was measured to determine the solubility in water.

7) Стабильность при хранении порошка экстракта ферментированных пантов 7) Storage stability of fermented antlers extract powder

Для определения стабильности при хранении порошка экстракта ферментированных пантов, полученного после предварительной обработки при высокой температуре и высоком давлении, проводили ускоренное тестирование. В частности, порошок сначала хранили при 50°C в течение 6 месяцев и измеряли количество микроорганизмов и pH. Количество микроорганизмов определяли путем измерения уровней общих бактерий и Escherichia coli (E. coli), а рН измеряли с помощью рН-метра после добавления определенного количества воды к порошку экстракта ферментированных пантов. Accelerated testing was carried out to determine the storage stability of fermented antlers extract powder obtained after pretreatment at high temperature and high pressure. Specifically, the powder was first stored at 50°C for 6 months and the number of microorganisms and pH were measured. The number of microorganisms was determined by measuring the levels of total bacteria and Escherichia coli (E. coli), and the pH was measured using a pH meter after adding a certain amount of water to the fermented antler extract powder.

Пример 1. Характеристики экстракта ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки при высокой температуре и высоком давленииExample 1 Characteristics of fermented antlers extract depending on various processing conditions at high temperature and high pressure

В следующей далее таблице 1 показаны результаты сравнения физико-химических характеристик экстракта ферментированных пантов, приготовленного в соответствии с условиями обработки при высокой температуре и высоком давлении на стадии (1) для получения экстракта ферментированных пантов в Примере получения 1. The following Table 1 shows the results of comparison of the physicochemical characteristics of the fermented antlers extract prepared in accordance with the high temperature and high pressure processing conditions in step (1) to obtain the fermented antlers extract in Preparation Example 1.

Таблица 1Table 1

Физико-химические характеристики экстракта ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки при высокой температуре и высоком давлении Physico-chemical characteristics of fermented antlers extract depending on various processing conditions at high temperature and high pressure

Физико-химические характеристикиPhysico-chemical characteristics Время обработкиTime of processing 1 бар1 bar 2 бар2 bar 3 бар3 bar pHpH 0,5 ч0.5 h 7,167.16 7,217.21 7,047.04 1 ч1 hour 7,147.14 6,486.48 6,616.61 2 ч2 hours 7,157.15 6,506.50 6,586.58 Сладковатость (Bx°)Sweetness (Bx°) 0,5 ч0.5 h 7,37.3 7,77.7 8,68.6 1 ч1 hour 8,78.7 9,39.3 11eleven 2 ч2 hours 8,88.8 9,59.5 11,311.3 Содержание растворимых твердых веществ (%)Soluble solids content (%) 0,5 ч0.5 h 7,37.3 8,08.0 8,88.8 1 ч1 hour 7,87.8 8,48.4 1010 2 ч2 hours 8,08.0 8,58.5 10,110.1 ЦветColor 0,5 ч0.5 h LL 46,9446.94 46,7746.77 45,3745.37 aa 15,2115.21 15,4115.41 20,2420.24 bb 35,0235.02 34,7534.75 32,3832.38 1 ч1 hour LL 48,2548.25 48,4948.49 47,4747.47 aa 15,6615.66 17,4117.41 22,2422.24 bb 34,2534.25 31,7531.75 31,9331.93 2 ч2 hours LL 45,3345.33 44,5144.51 43,6943.69 aa 16,1116.11 18,8418.84 22,8022.80 bb 33,5433.54 30,9230.92 30,4430.44

Существует тенденция к снижению рН по мере увеличения давления и времени обработки. Это может быть связано с изменением физических свойств сырья при обработке при высокой температуре и высоком давлении, что приводит к большему извлечению кислых компонентов среди извлекаемых эффективных компонентов. Сладковатость и содержание растворимых твердых веществ также увеличилось при более высоком давлении и более длительном времени обработки. Что касается цвета, L представляет яркость, a представляет красноту, а b представляет желтизну. Краснота имеет тенденцию к увеличению при более высоком давлении и длительности обработки. There is a tendency for pH to decrease as pressure and processing time increase. This may be due to changes in the physical properties of the raw material when processed at high temperature and high pressure, which leads to greater recovery of acidic components among the effective components recovered. Sweetness and soluble solids content also increased at higher pressure and longer processing time. In terms of color, L represents brightness, a represents redness, and b represents yellowness. Redness tends to increase with higher pressure and duration of treatment.

Пример 2. Содержание эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки при высокой температуре и высоком давлении Example 2. Content of effective components in the extract of fermented antlers depending on various processing conditions at high temperature and high pressure

В следующей далее таблице 2 приведены результаты сравнения содержания сульфатированных гликозаминогликанов (s-GAG) и N-ацетилнейраминовой кислоты между экстрактом ферментированных пантов по Примеру получения 1 и экстрактом ферментированных пантов, полученном в соответствии со способом по Примеру получения 1, но при условии обработки при высокой температуре и высоком давлении на стадии (1).The following Table 2 shows the results of comparison of the content of sulfated glycosaminoglycans (s-GAG) and N-acetylneuraminic acid between the fermented antlers extract of Preparation Example 1 and the fermented antlers extract obtained in accordance with the method of Preparation Example 1, but subject to processing at high temperature and high pressure in stage (1).

s-GAG относится к гликозаминогликанам с добавленными сульфатными группами. Гликозаминогликаны представляют собой мукополисахариды, состоящие из повторяющихся структур аминосахаров и уроновой кислоты или галактозы, и они известны как незаменимые компоненты в тканях животных и соединительных тканях. В частности, сульфатированные гликозаминогликаны играют роль основного компонента хрящей в суставах и помогают поддерживать влажность в суставах, тем самым являясь эффективными при лечении таких заболеваний, как артрит. Они образуют протеогликаны путем связывания с белками и присутствуют в различных соединительных тканях, таких как кожа и пуповина, регулируя их структуру и функцию для поддержания целостности каждой ткани. s-GAG refers to glycosaminoglycans with added sulfate groups. Glycosaminoglycans are mucopolysaccharides composed of repeating structures of amino sugars and uronic acid or galactose, and they are known to be essential components in animal tissues and connective tissues. In particular, sulfated glycosaminoglycans play a role as a major component of cartilage in joints and help maintain joint moisture, thereby being effective in treating diseases such as arthritis. They form proteoglycans by binding to proteins and are present in various connective tissues such as skin and umbilical cord, regulating their structure and function to maintain the integrity of each tissue.

N-Ацетилнейраминовая кислота представляет собой моносахарид и содержится в гликопротеинах клеток, клеточных мембранах и слизи, а также в гликолипидах, таких как ганглиозид, в качестве основного конституционального компонента мембраны головного мозга и нервных клеток. N-Ацетилнейраминовая кислота является репрезентативным соединением сиаловой кислоты. N-Acetylneuraminic acid is a monosaccharide and is found in cell glycoproteins, cell membranes and mucus, as well as glycolipids such as ganglioside, as a major constitutional component of the membrane of the brain and nerve cells. N-Acetylneuraminic acid is a representative compound of sialic acid.

Таблица 2 table 2

Содержание эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки при высокой температуре и высоком давленииContent of effective components in fermented antlers extract depending on various processing conditions at high temperature and high pressure

Высокая температураHeat Содержание s-GAG (мг%)s-GAG content (mg%) Содержание N-Ацетилнейраминовой кислоты (частей на миллион, ppm)N-Acetylneuraminic acid content (parts per million, ppm) 121°C, 3 бар в течение 1 ч121°C, 3 bar for 1 hour 34,1334.13 100,04100.04 110°C, 4 бар в течение 2 ч110°C, 4 bar for 2 hours 28,4228.42 84,5684.56 130°C, 2 бар в течение 0,5 ч130°C, 2 bar for 0.5 h 22,0822.08 70,3970.39

В результате наибольшее содержание эффективных компонентов было получено при проведении обработки при температуре 121°С и давлении 3 бар в течение 1 ч. As a result, the highest content of effective components was obtained when processing was carried out at a temperature of 121°C and a pressure of 3 bar for 1 hour.

Пример 3. Содержание эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки Example 3. Content of effective components in the extract of fermented antlers depending on various processing conditions

В таблице 4 ниже представлены результаты сравнения содержания эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от наличия или отсутствия обработки при высокой температуре и высоком давлении, типа фермента и вида бактериального штамма. Table 4 below presents the results of a comparison of the content of effective components in the extract of fermented antlers depending on the presence or absence of processing at high temperature and high pressure, type of enzyme and type of bacterial strain.

Таблица 3Table 3

Сравнение различных условий обработки экстракта ферментированных пантов Comparison of different processing conditions for fermented antlers extract

Тип экстрактаExtract type Обработка при высокой температуре и высоком давленииHigh temperature and high pressure processing Тип ферментаEnzyme type Тип бактериального штаммаType of bacterial strain Пример получения 1Receipt example 1 Протеаза, целлюлаза, бета-глюканаза, гемицеллюлазаProtease, cellulase, beta-glucanase, hemicellulase Bacillus coagulansBacillus coagulans Сравнительный пример 1Comparative example 1 ×× Протеаза, целлюлаза, бета-глюканаза, гемицеллюлазаProtease, cellulase, beta-glucanase, hemicellulase Bacillus coagulansBacillus coagulans Сравнительный пример 2Comparative example 2 ×× Протеаза, глюкоамилазаProtease, glucoamylase Bacillus subtilusBacillus subtilus Сравнительный пример 3Comparative example 3 Петиназа, целлюлазаPetinase, cellulase Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum и Lactobacillus longumLactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum and Lactobacillus longum Сравнительный пример 4Comparative example 4 ПротеазаProtease ××

В результате экстракт ферментированных пантов из Примера получения 1 показал самое высокое содержание s-GAG и N-ацетилнейраминовой кислоты по сравнению с экстрактами ферментированных пантов из Сравнительных примеров. В частности, самое низкое содержание показал экстракт ферментированных пантов из Сравнительного примера 1. As a result, the fermented antlers extract from Preparation Example 1 showed the highest content of s-GAG and N-acetylneuraminic acid compared to the fermented antlers extracts from Comparative Examples. In particular, the fermented antlers extract from Comparative Example 1 showed the lowest content.

Таблица 4 Table 4

Содержание эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки Content of effective components in fermented antlers extract depending on various processing conditions

КатегорияCategory Содержание s-GAG (мг%)s-GAG content (mg%) Содержание N-Ацетилнейраминовой кислоты (частей на миллион, ppm)N-Acetylneuraminic acid content (parts per million, ppm) Пример получения 1Receipt example 1 34,1334.13 100,04100.04 Сравнительный пример 1Comparative example 1 16,8716.87 38,9938.99 Сравнительный пример 2Comparative example 2 13,2013.20 35,4035.40 Сравнительный пример 3Comparative example 3 20,1520.15 44,7844.78 Сравнительный пример 4Comparative example 4 18,0018.00 39,2039.20

Пример 4. Содержание свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки Example 4. Content of free amino acids in the extract of fermented antlers depending on various processing conditions

В таблице 5 ниже представлены результаты сравнения содержания свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработки. Table 5 below presents the results of a comparison of the free amino acid content of fermented antlers extract depending on various processing conditions.

Таблица 5. Содержание эффективных компонентов в экстракте ферментированных пантов в зависимости от различных условий обработкиTable 5. Content of effective components in the extract of fermented antlers depending on various processing conditions

Свободная аминокислота (мг%)Free amino acid (mg%) Тип примераExample type Пример получения 1Receipt example 1 Сравни-тельный пример 1Comparative example 1 Сравни-тельный пример 2Comparative example 2 Сравни-тельный пример 3Comparative example 3 Сравни-тельный пример 4Comparative example 4 Фосфо-L-серинPhospho-L-serine 1212 8,58.5 1,71.7 9,29.2 4,24.2 ТауринTaurine 2121 12,612.6 3,43.4 18,218.2 6,96.9 МочевинаUrea -- -- 1,91.9 -- 0,20.2 Аспарагиновая кислотаAspartic acid 30thirty 2121 1,01.0 2626 1313 Гидрокси-L-пролинHydroxy-L-proline 77 55 0,60.6 5,35.3 0,90.9 СеринSerin 6262 48,348.3 4,04.0 51,251.2 6,26.2 АспарагинAsparagine -- -- -- -- -- Глутаминовая кислотаGlutamic acid 5252 25,825.8 18,918.9 32,632.6 20,120.1 СаркозинSarcosine -- -- 1,41.4 -- -- α-Аминоадипиновая кислотаα-Aminoadipic acid -- -- 1,11.1 -- -- ГлицинGlycine 5151 4242 15,315.3 40,340.3 12,012.0 АланинAlanin 107107 6969 9,09.0 8787 8,38.3 ЦитруллинCitrulline 1010 55 0,20.2 77 -- ЦистинCystine 1212 44 3,13.1 66 2,52.5 ЦистатионинCystathionine 88 77 1,11.1 5,65.6 2,82.8 ТирозинTyrosine 6969 2727 5,55.5 3636 20,520.5 β-Аланинβ-Alanine 1313 1010 -- 11eleven -- α-Амино-n-масляная кислотаα-Amino-n-butyric acid 55 33 -- 22 -- β-Аминоизомаляная кислота β-Aminoisomalyic acid 5555 2323 0,30.3 4646 10,510.5 γ-Амино-n-масляная кислотаγ-Amino-n-butyric acid 1616 1212 9,69.6 1313 6,86.8 ЭтаноламинEthanolamine 55 44 0,30.3 3,93.9 2,02.0 АммонийAmmonium 1919 1313 3,13.1 15,615.6 6,46.4 δ-Гидроксилизинδ-Hydroxylysine -- -- 0,10.1 -- -- ОрнитинOrnithine 77 33 0,90.9 44 -- ГистидинHistidine 3737 30thirty 6,86.8 3333 2626 3-Метил-гистидин3-Methyl-histidine -- -- 0,40.4 -- -- АнсеринAnserine -- -- 7,67.6 -- -- КарнозинCarnosine 44 33 0,30.3 3,43.4 2,32.3 АргининArginine 104104 5656 9,79.7 8787 2828 ПролинProline 1414 1010 1,61.6 1212 4,34.3 ТреонинThreonine 5959 3232 9,49.4 3434 2626 ВалинValin 9797 4545 16,616.6 6262 2323 МетионинMethionine 2727 2121 12,312.3 2222 14,714.7 ИзолейцинIsoleucine 5050 4242 33,733.7 4444 39,339.3 ЛейцинLeucine 158158 123123 40,540.5 138138 68,968.9 ФенилаланинPhenylalanine 105105 6969 13,813.8 8080 2020 ТриптофанTryptophan -- -- 0,10.1 -- -- ЛизинLysine 122122 3535 5,85.8 4949 2828 Всего свободных аминокислотTotal free amino acids 13381338 807,2807.2 240,9240.9 984,3984.3 403,8403.8 Незаменимые аминокислотыEssential amino acids 618618 367367 132,2132.2 429429 219,9219.9

В результате экстракт ферментированных пантов из Сравнительного примера 2 показал самое низкое содержание, в то время как экстракт ферментированных пантов из Примера получения 1 показал самое высокое содержание. Общее количество незаменимых аминокислот (треонин, валин, метионин, изолейцин, лейцин, фенилаланин, триптофан и лизин) также показало самое высокое значение в экстракте ферментированных пантов из Примера получения 1. As a result, the fermented antler extract from Comparative Example 2 showed the lowest content, while the fermented antler extract from Preparation Example 1 showed the highest content. The total essential amino acids (threonine, valine, methionine, isoleucine, leucine, phenylalanine, tryptophan and lysine) also showed the highest value in the fermented antlers extract from Preparation Example 1.

Незаменимые аминокислоты не могут синтезироваться в организме человека и должны поступать с пищей или добавками. Среди незаменимых аминокислот лейцин играет роль в стимулировании синтеза белков, способствуя росту мышечной ткани и укреплению скелетных мышц и т.д. Лизин участвует в метаболизме кальция, помогая поддерживать усвоение кальция и баланс азота, тем самым способствуя росту и развитию костей. При употреблении вместе с витамином С лизин способствует синтезу коллагена, который является необходимым компонентом для поддержания эластичности кожи и кровеносных сосудов, формирования хрящей. Фенилаланин является необходимым веществом для производства нейротрансмиттеров, таких как тирозин, дофамин, адреналин и норадреналин. Известно, что он помогает в регенерации клеток головного мозга и синтезе белка. Экстракт ферментированных пантов из Примера получения 1 демонстрирует высокое содержание этих аминокислот, что позволяет предположить, что он может способствовать росту тела и развитию головного мозга.Essential amino acids cannot be synthesized in the human body and must be obtained from food or supplements. Among the essential amino acids, leucine plays a role in stimulating protein synthesis, promoting the growth of muscle tissue and strengthening skeletal muscles, etc. Lysine is involved in calcium metabolism, helping to maintain calcium absorption and nitrogen balance, thereby promoting bone growth and development. When consumed together with vitamin C, lysine promotes the synthesis of collagen, which is a necessary component for maintaining the elasticity of the skin and blood vessels, and the formation of cartilage. Phenylalanine is an essential substance for the production of neurotransmitters such as tyrosine, dopamine, epinephrine and norepinephrine. It is known to help with brain cell regeneration and protein synthesis. The fermented antler extract from Preparation Example 1 exhibits high levels of these amino acids, suggesting that it may promote body growth and brain development.

Пример 5. Растворимость экстракта ферментированных пантов в водеExample 5. Solubility of fermented antlers extract in water

На фиг. 1 показан уровень растворимости в воде порошка экстракта ферментированных пантов из Примера получения 1. Используя порошок экстракта ферментированных пантов, полученный в результате предварительной обработки при высокой температуре и высоком давлении, определяли уровень растворимости порошка с 30-секундным интервалом, т.е. сразу после добавления до 1 минуты и 30 секунд после добавления. В результате было показано, что порошок начинает слегка растворяться сразу после добавления, а через 30 секунд после добавления растворяется примерно половина объема порошка. Большая часть порошка растворялась примерно через 1 минуту, и в последнюю 1 минуту и 30 секунд происходило полное растворение, что приводило к разделению слоев из-за липидных компонентов экстракта пантов. Таким образом, следует признать, что благодаря быстрой растворимости в воде порошка экстракта ферментированных пантов, предварительно обработанного при высокой температуре и высоком давлении, его можно применять в различных продуктах и составах, и при этом полезные компоненты с низкой молекулярной массой, полученные в результате обработки при высоком давлении, будут легко поглощаться в организме человека. In fig. 1 shows the water solubility level of the fermented antlers extract powder from Preparation Example 1. Using the fermented antlers extract powder obtained by pre-treatment at high temperature and high pressure, the solubility level of the powder was determined at 30 second intervals, i.e. immediately after adding to 1 minute and 30 seconds after adding. The results showed that the powder began to dissolve slightly immediately after addition, and that approximately half the volume of the powder had dissolved within 30 seconds of addition. Most of the powder dissolved after about 1 minute, and in the last 1 minute and 30 seconds complete dissolution occurred, causing the layers to separate due to the lipid components of the antler extract. Thus, it should be recognized that due to the rapid solubility in water of fermented antlers extract powder pre-treated at high temperature and high pressure, it can be used in various products and formulations, and at the same time useful components with low molecular weight obtained as a result of processing at high pressure, will be easily absorbed in the human body.

Пример 6. Стабильность при хранении экстракта ферментированных пантовExample 6. Storage stability of fermented antlers extract

В следующей таблице 6 приведены результаты исследования стабильности при хранении порошка экстракта ферментированных пантов, полученного в Примере получения 1. После различных периодов хранения суммарная численность бактерий оставалось отрицательной или составляла 1 КОЕ/г на протяжении всего периода хранения, и все количество Escherichia coli оказалось отрицательным. При этом значения рН находились в диапазоне от 5,71 до 5,78 в течение периода хранения, и, таким образом, считается, что порошкообразный продукт остается стабильным в течение всего периода хранения. The following Table 6 shows the results of a storage stability study of the fermented antler extract powder obtained in Preparation Example 1. After various storage periods, the total bacterial count remained negative or 1 CFU/g throughout the storage period, and the entire Escherichia coli count was negative. However, the pH values ranged from 5.71 to 5.78 during the storage period, and thus the powdered product is considered to remain stable throughout the storage period.

Таблица 6. Стабильность при хранении экстракта ферментированных пантовTable 6. Storage stability of fermented antlers extract

КатегорияCategory Период хранения (месяцы)Storage period (months) 00 33 66 Общее количество бактерий (КОЕ/г)Total bacteria count (CFU/g) -* - * 11 -- Количество E. coli (КОЕ/г)E. coli count (CFU/g) -- -- -- pHpH 5,785.78 5,735.73 5,715.71

*: Не обнаружено * : Not detected

Claims (16)

1. Способ получения экстракта ферментированных пантов, включающий: 1. A method for obtaining an extract of fermented antlers, including: (1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 мин; (1) processing of crushed antlers at high temperature 115-125°C and high pressure 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes; (2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding water to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur; (3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), при 110-130°С и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans с последующей ферментацией и фильтрацией; и (3) sterilization of the antlers solution obtained after the reaction in stage (2) at 110-130°C and inoculation of the sterilized antlers solution with a culture of Bacillus coagulans, followed by fermentation and filtration; And (4) пастеризация отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), при 90-100°C с последующим концентрированием и сушкой. (4) pasteurization of the filtered solution obtained by filtration in step (3) at 90-100°C, followed by concentration and drying. 2. Способ по п. 1, в котором получение осуществляется в несколько стадий: 2. The method according to claim 1, in which the production is carried out in several stages: (1) обработка измельченных пантов при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 мин; (1) processing of crushed antlers at high temperature 115-125°C and high pressure 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes; (2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 4-6-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение протекания реакции в течение 4-6 ч при температуре 55-65°С; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding 4-6 times the amount of water (volume/weight) to the antlers treated in step (1), and allowing the reaction to proceed in for 4-6 hours at a temperature of 55-65°C; (3) стерилизация раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 10-20 минут при температуре 110-130°С и инокуляция стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 1,5-2,5% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующими ферментацией в течение 20-28 ч при температуре 34-40°С и фильтрацией; и (3) sterilization of the antlers solution obtained after the reaction in stage (2) for 10-20 minutes at a temperature of 110-130°C and inoculation of the sterilized antlers solution with a culture of Bacillus coagulans in an amount of 1.5-2.5% (vol/ volume) in relation to a sterilized solution of antlers, followed by fermentation for 20-28 hours at a temperature of 34-40°C and filtration; And (4) пастеризация отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 5-15 мин при температуре 90-100°С с последующими концентрированием и сушкой.(4) pasteurization of the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 5-15 minutes at a temperature of 90-100°C, followed by concentration and drying. 3. Быстрорастворимый в воде порошок экстракта ферментированных пантов, полученный с помощью способа по п. 1 или 2.3. Instantly soluble powder of fermented antlers extract in water, obtained using the method according to claim 1 or 2. 4. Способ повышения содержания сульфатированных гликозаминогликанов, N-ацетилнейраминовой кислоты и свободных аминокислот в экстракте ферментированных пантов, включающий: 4. A method for increasing the content of sulfated glycosaminoglycans, N-acetylneuraminic acid and free amino acids in the extract of fermented antlers, including: (1) обработку измельченных пантов при высокой температуре 115-125°С и высоком давлении 2,5-3,5 бар в течение 50-70 мин; (1) processing of crushed antlers at high temperature 115-125°C and high pressure 2.5-3.5 bar for 50-70 minutes; (2) добавление протеиназы и ферментного комплекса целлюлазы, бета-глюканазы и гемицеллюлазы к раствору пантов, полученному путем добавления воды в 4-6-кратном количестве (объем/масса) к пантам, обработанным на стадии (1), и обеспечение возможности протекания реакции в течение 4-6 ч при температуре 55-65°С; (2) adding proteinase and the enzyme complex of cellulase, beta-glucanase and hemicellulase to the antlers solution obtained by adding 4-6 times the amount of water (volume/weight) to the antlers treated in step (1) and allowing the reaction to occur for 4-6 hours at a temperature of 55-65°C; (3) стерилизацию раствора пантов, полученного после реакции на стадии (2), в течение 10-20 мин при температуре 110-130°С и инокуляцию стерилизованного раствора пантов культурой Bacillus coagulans в количестве 1,5-2,5% (объем/объем) по отношению к стерилизованному раствору пантов с последующими ферментацией в течение 20-28 ч при температуре 34-40°С и фильтрацией; и (3) sterilization of the antlers solution obtained after the reaction in stage (2) for 10-20 minutes at a temperature of 110-130°C and inoculation of the sterilized antlers solution with a Bacillus coagulans culture in an amount of 1.5-2.5% (vol/ volume) in relation to a sterilized solution of antlers, followed by fermentation for 20-28 hours at a temperature of 34-40°C and filtration; And (4) пастеризацию отфильтрованного раствора, полученного путем фильтрации на стадии (3), в течение 5-15 мин при температуре 90-100°С с последующими концентрированием и сушкой.(4) pasteurization of the filtered solution obtained by filtration in step (3) for 5-15 minutes at a temperature of 90-100°C, followed by concentration and drying.
RU2023117059A 2020-12-11 2021-10-27 Method of producing fermented velvet antlers extract by three-step treatment RU2816703C1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2020-0173471 2020-12-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2816703C1 true RU2816703C1 (en) 2024-04-03

Family

ID=

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2004120476A (en) * 2004-07-06 2006-01-10 Александра Геннадьевна Козаченко (RU) PANT PUMP EXTRACT AND METHOD FOR PREPARING IT

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2004120476A (en) * 2004-07-06 2006-01-10 Александра Геннадьевна Козаченко (RU) PANT PUMP EXTRACT AND METHOD FOR PREPARING IT

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ЗЕМЦОВА Н.П. и др. "Стабильность измельченых пантов марала в условиях стресс-испытаний"; Фармация, 2016, т.65, N 8, с.25-27. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO342031B1 (en) Process for fermentation and cultivation, fermented plant extract, fermented plant extract powder and mixture containing the fermented plant extract
JP5249817B2 (en) Immunostimulated fermented food from fructan-containing food
CN112999261B (en) Natto fermented composition capable of relieving arteriosclerosis and preparation method and application thereof
CN113966832A (en) Dendrobium nobile fermentation product and preparation method and application thereof
CN111436614A (en) Probiotics delivery microcapsule based on mushroom soluble dietary fiber and preparation method
KR20200078093A (en) The composition for preventing patella luxation and muscle strengthening for companion animals
KR20220148723A (en) Method for producing GABA and low molecular weight collagen using Lactobacillus brevis BJ-20 (KCTC11377BP), composition for improving skin barrier damage and composition for improving sleep activity including the same
CN114214366A (en) Compound medicine of small peptide powder and heme peptide red for preventing and treating anemia and preparation method and application thereof
KR102543551B1 (en) Method for producing fermented antler extract by three-step processing
RU2816703C1 (en) Method of producing fermented velvet antlers extract by three-step treatment
JP3902015B2 (en) Manufacturing method of health nutrition food
JP2013039087A (en) Drinking water containing proteoglycan and method for producing the same
CN111165750A (en) Method for preparing sea cucumber pollen by fermentation technology
KR101814941B1 (en) Food composition for anti-oxidation comprising cockscomb flower extract short-term fermented by lactic acid bacteria and the method of preparation thereof
WO2019101696A1 (en) Endoglucanase-treated glucans
JP2006511504A (en) Pharmaceuticals for use as therapeutics
CN113558238A (en) Natto freeze-dried powder spina date seed solid beverage and preparation method thereof
KR102217456B1 (en) Fermenting method for honey using microorganism, fermented honey manufactured by the same and products using thereof
CN108660174B (en) Sesame bioactive peptide for resisting fatigue and promoting intestinal probiotic proliferation
CN1245989C (en) Immunopotentiator
KR101768817B1 (en) Food composition for anti-oxidation and inhanced immunity comprising chamomile flower extract short-term fermented by lactic acid bacteria and the method of preparation thereof
RU2630457C1 (en) Method of obtaining biologically active substance with prebiotic effect based on medusomyces gysevii
KR102441355B1 (en) Method for producing velvet antler extracts with enhanced ganglioside content
CN114886929B (en) Application of bifidobacterium bifidum B11 in preparing product for improving brain cognitive function and improving memory
CN111406928B (en) Red date fermented food with function of improving chronic diarrhea and preparation method and application thereof