RU2816476C2 - Антитело, которое связывается с vegf и il-1бета, и способы применения - Google Patents
Антитело, которое связывается с vegf и il-1бета, и способы применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2816476C2 RU2816476C2 RU2021120697A RU2021120697A RU2816476C2 RU 2816476 C2 RU2816476 C2 RU 2816476C2 RU 2021120697 A RU2021120697 A RU 2021120697A RU 2021120697 A RU2021120697 A RU 2021120697A RU 2816476 C2 RU2816476 C2 RU 2816476C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- amino acid
- seq
- human
- cdr
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 74
- 101100372758 Danio rerio vegfaa gene Proteins 0.000 title 1
- 101150030763 Vegfa gene Proteins 0.000 title 1
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 claims abstract description 178
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 claims abstract description 178
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims abstract description 173
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 42
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 459
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 150
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 131
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 108
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 108
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 claims description 88
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 claims description 54
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 17
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 14
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 14
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 claims description 13
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 13
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 13
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims 2
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 abstract description 23
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 abstract description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 155
- 102000009524 Vascular Endothelial Growth Factor A Human genes 0.000 description 138
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 83
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 80
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 78
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 description 72
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 69
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 63
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 52
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 52
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 51
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 51
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 47
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 46
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 46
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 38
- 102100039196 CX3C chemokine receptor 1 Human genes 0.000 description 35
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 35
- 208000022873 Ocular disease Diseases 0.000 description 33
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 33
- 208000008069 Geographic Atrophy Diseases 0.000 description 31
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 31
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 29
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 28
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 27
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 27
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 24
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 24
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 22
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 21
- 208000004644 retinal vein occlusion Diseases 0.000 description 21
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 20
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 19
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 18
- 108010081667 aflibercept Proteins 0.000 description 17
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 16
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 16
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 15
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 208000000208 Wet Macular Degeneration Diseases 0.000 description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 description 14
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 14
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 12
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 11
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 11
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 11
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 11
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 11
- 101000851007 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 2 Proteins 0.000 description 10
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 10
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 208000005590 Choroidal Neovascularization Diseases 0.000 description 9
- 206010060823 Choroidal neovascularisation Diseases 0.000 description 9
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 9
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 9
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 9
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 9
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 9
- 229940051306 eylea Drugs 0.000 description 9
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 9
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 208000001344 Macular Edema Diseases 0.000 description 8
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 8
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 8
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 8
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 8
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 8
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- 229940076783 lucentis Drugs 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- YTZALCGQUPRCGW-ZSFNYQMMSA-N verteporfin Chemical compound N1C(C=C2C(=C(CCC(O)=O)C(C=C3C(CCC(=O)OC)=C(C)C(N3)=C3)=N2)C)=C(C=C)C(C)=C1C=C1C2=CC=C(C(=O)OC)[C@@H](C(=O)OC)[C@@]2(C)C3=N1 YTZALCGQUPRCGW-ZSFNYQMMSA-N 0.000 description 8
- WLCZTRVUXYALDD-IBGZPJMESA-N 7-[[(2s)-2,6-bis(2-methoxyethoxycarbonylamino)hexanoyl]amino]heptoxy-methylphosphinic acid Chemical compound COCCOC(=O)NCCCC[C@H](NC(=O)OCCOC)C(=O)NCCCCCCCOP(C)(O)=O WLCZTRVUXYALDD-IBGZPJMESA-N 0.000 description 7
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 7
- UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 7
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 7
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 7
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 7
- 229960002833 aflibercept Drugs 0.000 description 7
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 7
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 7
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 7
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 7
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 7
- 238000012552 review Methods 0.000 description 7
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 7
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N Ala-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N 0.000 description 6
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N Ala-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N 0.000 description 6
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 6
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 6
- HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- 206010055665 Corneal neovascularisation Diseases 0.000 description 6
- SBDVXRYCOIEYNV-YUMQZZPRSA-N Cys-His-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N SBDVXRYCOIEYNV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 6
- GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N Gln-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- BIYNPVYAZOUVFQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BIYNPVYAZOUVFQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 6
- BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N His-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 BDFCIKANUNMFGB-PMVVWTBXSA-N 0.000 description 6
- 201000002563 Histoplasmosis Diseases 0.000 description 6
- CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 6
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- CFRRIZLGFGJEDB-SRVKXCTJSA-N Met-His-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CFRRIZLGFGJEDB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 6
- GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- BIWBTRRBHIEVAH-IHPCNDPISA-N Ser-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O BIWBTRRBHIEVAH-IHPCNDPISA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 6
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 6
- GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N Tyr-Asp-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 6
- QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N Tyr-Cys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- STTVVMWQKDOKAM-YESZJQIVSA-N Tyr-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O STTVVMWQKDOKAM-YESZJQIVSA-N 0.000 description 6
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 6
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 6
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 6
- 201000000159 corneal neovascularization Diseases 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 6
- 108010033719 glycyl-histidyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 6
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 6
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 6
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 6
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 6
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 6
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 6
- YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 5
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N Asn-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 5
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PUUPMDXIHCOPJU-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 5
- IOXWDLNHXZOXQP-FXQIFTODSA-N Asp-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N IOXWDLNHXZOXQP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 5
- JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N Asp-Thr-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O JSNWZMFSLIWAHS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 5
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 5
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 5
- LLXVQPKEQQCISF-YUMQZZPRSA-N Gly-Asp-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)CN LLXVQPKEQQCISF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 5
- FJWSJWACLMTDMI-WPRPVWTQSA-N Gly-Met-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FJWSJWACLMTDMI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 5
- VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ser-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 5
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 5
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 5
- NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 5
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 5
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 5
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 5
- MIMXMVDLMDMOJD-BZSNNMDCSA-N Lys-Tyr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MIMXMVDLMDMOJD-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 5
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 201000010183 Papilledema Diseases 0.000 description 5
- IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N Phe-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 5
- WZEWCHQHNCMBEN-PMVMPFDFSA-N Phe-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N WZEWCHQHNCMBEN-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 5
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 5
- 208000007135 Retinal Neovascularization Diseases 0.000 description 5
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- CRJZZXMAADSBBQ-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CO CRJZZXMAADSBBQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 5
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 5
- MDYSKHBSPXUOPV-JSGCOSHPSA-N Val-Gly-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N MDYSKHBSPXUOPV-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 5
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 5
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 5
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 5
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 5
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 208000011325 dry age related macular degeneration Diseases 0.000 description 5
- FEBLZLNTKCEFIT-VSXGLTOVSA-N fluocinolone acetonide Chemical compound C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@]1(F)[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O FEBLZLNTKCEFIT-VSXGLTOVSA-N 0.000 description 5
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 5
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960004716 idoxuridine Drugs 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 5
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 5
- 108010045397 lysyl-tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 5
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- XXJWYDDUDKYVKI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-fluoro-2-methyl-1H-indol-5-yl)oxy]-6-methoxy-7-[3-(1-pyrrolidinyl)propoxy]quinazoline Chemical compound COC1=CC2=C(OC=3C(=C4C=C(C)NC4=CC=3)F)N=CN=C2C=C1OCCCN1CCCC1 XXJWYDDUDKYVKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ODNWIBOCFGMRTP-SRVKXCTJSA-N Asp-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)CC1=CN=CN1 ODNWIBOCFGMRTP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 4
- 208000003569 Central serous chorioretinopathy Diseases 0.000 description 4
- 208000033379 Chorioretinopathy Diseases 0.000 description 4
- 206010058202 Cystoid macular oedema Diseases 0.000 description 4
- SDTPKSOWFXBACN-GUBZILKMSA-N His-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDTPKSOWFXBACN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- AIPUZFXMXAHZKY-QWRGUYRKSA-N His-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O AIPUZFXMXAHZKY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 4
- 239000002147 L01XE04 - Sunitinib Substances 0.000 description 4
- WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N Lys-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- 206010025415 Macular oedema Diseases 0.000 description 4
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 201000007737 Retinal degeneration Diseases 0.000 description 4
- 208000007014 Retinitis pigmentosa Diseases 0.000 description 4
- 206010038933 Retinopathy of prematurity Diseases 0.000 description 4
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 4
- QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N Thr-Lys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N 0.000 description 4
- MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 4
- 206010001902 amaurosis Diseases 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000010206 cystoid macular edema Diseases 0.000 description 4
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 4
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 201000010230 macular retinal edema Diseases 0.000 description 4
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 201000001937 osteoporosis-pseudoglioma syndrome Diseases 0.000 description 4
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 4
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 4
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 4
- 210000003583 retinal pigment epithelium Anatomy 0.000 description 4
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 4
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- UHTHHESEBZOYNR-UHFFFAOYSA-N vandetanib Chemical compound COC1=CC(C(/N=CN2)=N/C=3C(=CC(Br)=CC=3)F)=C2C=C1OCC1CCN(C)CC1 UHTHHESEBZOYNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960003895 verteporfin Drugs 0.000 description 4
- 229940061392 visudyne Drugs 0.000 description 4
- WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N Ala-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N Ala-Leu-Thr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MEFILNJXAVSUTO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 3
- QUAWOKPCAKCHQL-SRVKXCTJSA-N Asn-His-Lys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N QUAWOKPCAKCHQL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N Asn-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N Asp-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 208000002691 Choroiditis Diseases 0.000 description 3
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 3
- NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N Cys-Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N NDUSUIGBMZCOIL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 3
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 3
- FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- BFEZQZKEPRKKHV-SRVKXCTJSA-N Glu-Pro-Lys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O BFEZQZKEPRKKHV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N Glu-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N Glu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- AFWYPMDMDYCKMD-KBPBESRZSA-N Gly-Leu-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AFWYPMDMDYCKMD-KBPBESRZSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYTCLUIYTYFGPT-YUMQZZPRSA-N His-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FYTCLUIYTYFGPT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N His-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N His-Thr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ALPXXNRQBMRCPZ-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 3
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 3
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 3
- MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- QQPSCXKFDSORFT-IHRRRGAJSA-N Lys-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QQPSCXKFDSORFT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N Lys-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MIFFFXHMAHFACR-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- IEVXCWPVBYCJRZ-IXOXFDKPSA-N Lys-Thr-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IEVXCWPVBYCJRZ-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 3
- QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- 208000010164 Multifocal Choroiditis Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N Phe-Ile-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 3
- WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N Phe-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- 208000003971 Posterior uveitis Diseases 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OOLOTUZJUBOMAX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N Pro-Arg-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- ABSSTGUCBCDKMU-UWVGGRQHSA-N Pro-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ABSSTGUCBCDKMU-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OWQXAJQZLWHPBH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N Pro-Ser-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MKGIILKDUGDRRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 description 3
- 206010038886 Retinal oedema Diseases 0.000 description 3
- 206010038910 Retinitis Diseases 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- KNCJWSPMTFFJII-ZLUOBGJFSA-N Ser-Cys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KNCJWSPMTFFJII-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 3
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N Ser-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 3
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N Ser-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(O)=O HSWXBJCBYSWBPT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- UIRKNQLZZXALBI-MSVGPLKSSA-N Squalamine Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](NCCCNCCCCN)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@H](C(C)C)OS(O)(=O)=O)[C@@]2(C)CC1 UIRKNQLZZXALBI-MSVGPLKSSA-N 0.000 description 3
- UIRKNQLZZXALBI-UHFFFAOYSA-N Squalamine Natural products OC1CC2CC(NCCCNCCCCN)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(C(C)C)OS(O)(=O)=O)C1(C)CC2 UIRKNQLZZXALBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N Thr-Ala-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 3
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 3
- GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N Thr-Glu-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 3
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N Thr-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O JLNMFGCJODTXDH-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 3
- RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N Thr-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N RPECVQBNONKZAT-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 3
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 3
- QNXZCKMXHPULME-ZNSHCXBVSA-N Thr-Val-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O QNXZCKMXHPULME-ZNSHCXBVSA-N 0.000 description 3
- RNFZZCMCRDFNAE-WFBYXXMGSA-N Trp-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RNFZZCMCRDFNAE-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 3
- UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N Trp-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N Tyr-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N)C(=O)O WURLIFOWSMBUAR-SLFFLAALSA-N 0.000 description 3
- MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- BXJQKVDPRMLGKN-PMVMPFDFSA-N Tyr-Trp-Leu Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 BXJQKVDPRMLGKN-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 3
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 3
- KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N Val-Lys-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N KTEZUXISLQTDDQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N Val-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 3
- GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N Val-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 108010043116 abicipar pegol Proteins 0.000 description 3
- 229950008281 abicipar pegol Drugs 0.000 description 3
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 3
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 3
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- -1 cytosine (C) Chemical compound 0.000 description 3
- 208000001309 degenerative myopia Diseases 0.000 description 3
- 230000004340 degenerative myopia Effects 0.000 description 3
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 3
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 3
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 3
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 3
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 3
- 229940092110 macugen Drugs 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 229940005014 pegaptanib sodium Drugs 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 108091008695 photoreceptors Proteins 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 201000011195 retinal edema Diseases 0.000 description 3
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229950001248 squalamine Drugs 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 229960002117 triamcinolone acetonide Drugs 0.000 description 3
- YNDXUCZADRHECN-JNQJZLCISA-N triamcinolone acetonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O YNDXUCZADRHECN-JNQJZLCISA-N 0.000 description 3
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 3
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 3
- 208000006542 von Hippel-Lindau disease Diseases 0.000 description 3
- LSIXBBPOJBJQHN-UHFFFAOYSA-N 2,3-Dimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-ene Chemical compound C1CC2C(C)=C(C)C1C2 LSIXBBPOJBJQHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-[hydroxy(methyl)phosphoryl]butanoic acid;azane Chemical compound [NH4+].CP(O)(=O)CCC(N)C([O-])=O ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 2
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 2
- YUWPMEXLKGOSBF-GACAOOTBSA-N Anecortave acetate Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)C3=CC[C@]4(C)[C@](C(=O)COC(=O)C)(O)CC[C@H]4[C@@H]3CCC2=C1 YUWPMEXLKGOSBF-GACAOOTBSA-N 0.000 description 2
- 102100034608 Angiopoietin-2 Human genes 0.000 description 2
- 102400000068 Angiostatin Human genes 0.000 description 2
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 2
- PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)CN=C(N)N PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- RYKWOUUZJFSJOH-FXQIFTODSA-N Asp-Gln-Glu Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RYKWOUUZJFSJOH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N Asp-Glu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O XDGBFDYXZCMYEX-NUMRIWBASA-N 0.000 description 2
- GYNUXDMCDILYIQ-QRTARXTBSA-N Asp-Val-Trp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N GYNUXDMCDILYIQ-QRTARXTBSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- 208000021089 Coats disease Diseases 0.000 description 2
- 102100031162 Collagen alpha-1(XVIII) chain Human genes 0.000 description 2
- 102100022133 Complement C3 Human genes 0.000 description 2
- 102000003706 Complement factor D Human genes 0.000 description 2
- 108090000059 Complement factor D Proteins 0.000 description 2
- 206010010719 Conjunctival haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- 206010048843 Cytomegalovirus chorioretinitis Diseases 0.000 description 2
- 102100025698 Cytosolic carboxypeptidase 4 Human genes 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000003556 Dry Eye Syndromes Diseases 0.000 description 2
- 206010013774 Dry eye Diseases 0.000 description 2
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N Everolimus Chemical compound C1C[C@@H](OCCO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N 0.000 description 2
- 208000020564 Eye injury Diseases 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 2
- 102000034615 Glial cell line-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- 108091010837 Glial cell line-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 2
- MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PVBBEKPHARMPHX-DCAQKATOSA-N Glu-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O PVBBEKPHARMPHX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N Glu-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N Gly-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 2
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- 101000901154 Homo sapiens Complement C3 Proteins 0.000 description 2
- 101000932590 Homo sapiens Cytosolic carboxypeptidase 4 Proteins 0.000 description 2
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 2
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 2
- YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N Ile-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)O)N YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 2
- 108090000965 Insulin-like growth factor binding protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 102100022708 Insulin-like growth factor-binding protein 3 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 206010065630 Iris neovascularisation Diseases 0.000 description 2
- UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N L-alanyl-L-prolylglycine zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N Leu-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N 0.000 description 2
- KZZCOWMDDXDKSS-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KZZCOWMDDXDKSS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N Leu-Val-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YQFZRHYZLARWDY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- WGCKDDHUFPQSMZ-ZPFDUUQYSA-N Lys-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN WGCKDDHUFPQSMZ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- ONGCSGVHCSAATF-CIUDSAMLSA-N Met-Ala-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O ONGCSGVHCSAATF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PWPBGAJJYJJVPI-PJODQICGSA-N Met-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 PWPBGAJJYJJVPI-PJODQICGSA-N 0.000 description 2
- MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N Met-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O MNGBICITWAPGAS-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 101001033003 Mus musculus Granzyme F Proteins 0.000 description 2
- 206010062207 Mycobacterial infection Diseases 0.000 description 2
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 208000025464 Norrie disease Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 206010033712 Papilloedema Diseases 0.000 description 2
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 2
- KAJLHCWRWDSROH-BZSNNMDCSA-N Phe-Phe-Asp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 KAJLHCWRWDSROH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100035846 Pigment epithelium-derived factor Human genes 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N Pro-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 HAAQQNHQZBOWFO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 2
- 208000008709 Retinal Telangiectasis Diseases 0.000 description 2
- 206010038926 Retinopathy hypertensive Diseases 0.000 description 2
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 description 2
- UAJAYRMZGNQILN-BQBZGAKWSA-N Ser-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O UAJAYRMZGNQILN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O HDBOEVPDIDDEPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N Ser-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N Ser-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 206010043189 Telangiectasia Diseases 0.000 description 2
- CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N Temsirolimus Chemical compound C1C[C@@H](OC(=O)C(C)(CO)CO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 CBPNZQVSJQDFBE-FUXHJELOSA-N 0.000 description 2
- XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 2
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VJOWWOGRNXRQMF-UVBJJODRSA-N Val-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 VJOWWOGRNXRQMF-UVBJJODRSA-N 0.000 description 2
- JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N Val-Arg-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N JIODCDXKCJRMEH-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N Val-Glu-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N Val-Phe-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KISFXYYRKKNLOP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229960001232 anecortave Drugs 0.000 description 2
- 230000002391 anti-complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 2
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 2
- 108010008730 anticomplement Proteins 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 239000008228 bacteriostatic water for injection Substances 0.000 description 2
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010217 blepharitis Diseases 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002412 cediranib Drugs 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 208000001763 cytomegalovirus retinitis Diseases 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- BJOLKYGKSZKIGU-UHFFFAOYSA-N ecothiopate Chemical compound CCOP(=O)(OCC)SCC[N+](C)(C)C BJOLKYGKSZKIGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229940116862 faricimab Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 229960001347 fluocinolone acetonide Drugs 0.000 description 2
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 2
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 201000001948 hypertensive retinopathy Diseases 0.000 description 2
- 229940029200 iluvien Drugs 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010044348 lysyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(z)-(5-fluoro-2-oxo-1h-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1h-pyrrole-3-carboxamide;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C LBWFXVZLPYTWQI-IPOVEDGCSA-N 0.000 description 2
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 description 2
- 201000003142 neovascular glaucoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 229940083224 ozurdex Drugs 0.000 description 2
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000000649 photocoagulation Effects 0.000 description 2
- 108090000102 pigment epithelium-derived factor Proteins 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 229950003608 prinomastat Drugs 0.000 description 2
- YKPYIPVDTNNYCN-INIZCTEOSA-N prinomastat Chemical compound ONC(=O)[C@H]1C(C)(C)SCCN1S(=O)(=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=NC=C1 YKPYIPVDTNNYCN-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004258 retinal degeneration Effects 0.000 description 2
- 230000004264 retinal detachment Effects 0.000 description 2
- 201000007714 retinoschisis Diseases 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N sunitinib Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N 0.000 description 2
- 229960001796 sunitinib Drugs 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 229940034785 sutent Drugs 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 2
- 208000009056 telangiectasis Diseases 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N vatalanib Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1NC(C1=CC=CC=C11)=NN=C1CC1=CC=NC=C1 YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000016804 zinc Nutrition 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPZWRYOUJMDQSY-PKLMIRHRSA-N (1r)-3-amino-1-[3-(cyclohexylmethoxy)phenyl]propan-1-ol;hydrochloride Chemical compound Cl.NCC[C@@H](O)C1=CC=CC(OCC2CCCCC2)=C1 BPZWRYOUJMDQSY-PKLMIRHRSA-N 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N (3R,3'R)-beta,beta-carotene-3,3'-diol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N 0.000 description 1
- IWEGDQUCWQFKHS-UHFFFAOYSA-N 1-(1,3-dioxolan-2-ylmethyl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrazole Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1C1=CN(CC2OCCO2)N=C1 IWEGDQUCWQFKHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEFYFGMSRKDXHZ-UHFFFAOYSA-N 1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-3-[4-bromo-2-(2h-tetrazol-5-yl)phenyl]urea Chemical compound FC(F)(F)C1=CC(C(F)(F)F)=CC(NC(=O)NC=2C(=CC(Br)=CC=2)C=2NN=NN=2)=C1 AEFYFGMSRKDXHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYNVOQYGXDUHRX-UHFFFAOYSA-N 1-nitropyrazole Chemical class [O-][N+](=O)N1C=CC=N1 TYNVOQYGXDUHRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 11-cis-retinal Chemical compound O=C/C=C(\C)/C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-HPNHMNAASA-N 11Z-retinal Natural products CC(=C/C=O)C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-HPNHMNAASA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASJSAQIRZKANQN-UHFFFAOYSA-N 2-deoxypentose Chemical compound OCC(O)C(O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQOQDQWUFQDJMK-SSTWWWIQSA-N 2-methoxy-17beta-estradiol Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H](O)CC[C@H]3[C@@H]1CCC1=C2C=C(OC)C(O)=C1 CQOQDQWUFQDJMK-SSTWWWIQSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-N,1-dimethyl-2-oxo-N-phenyl-3-quinolinecarboxamide Chemical group OC=1C2=CC=CC=C2N(C)C(=O)C=1C(=O)N(C)C1=CC=CC=C1 SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSEMPUNMUMBGQG-UHFFFAOYSA-N 9-(2-anthracen-9-ylethynyl)anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C(C#CC=3C4=CC=CC=C4C=C4C=CC=CC4=3)=C21 WSEMPUNMUMBGQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-MKOSUFFBSA-N 9-cis-retinal Chemical compound O=C/C=C(\C)/C=C/C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-MKOSUFFBSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001257 Adenoviral conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 102100038568 Age-related maculopathy susceptibility protein 2 Human genes 0.000 description 1
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QDRGPQWIVZNJQD-CIUDSAMLSA-N Ala-Arg-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QDRGPQWIVZNJQD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N Ala-Asp-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N Ala-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102100021266 Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 1
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 108010048036 Angiopoietin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 description 1
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- AHPWQERCDZTTNB-FXQIFTODSA-N Arg-Cys-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)CN=C(N)N AHPWQERCDZTTNB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SVHRPCMZTWZROG-DCAQKATOSA-N Arg-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N SVHRPCMZTWZROG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VDBKFYYIBLXEIF-GUBZILKMSA-N Arg-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VDBKFYYIBLXEIF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- BECXEHHOZNFFFX-IHRRRGAJSA-N Arg-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BECXEHHOZNFFFX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- PPMTUXJSQDNUDE-CIUDSAMLSA-N Asn-Glu-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PPMTUXJSQDNUDE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZTRJUKDEALVRMW-SRVKXCTJSA-N Asn-His-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ZTRJUKDEALVRMW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N Asn-Ser-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N Asn-Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- VPPXTHJNTYDNFJ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VPPXTHJNTYDNFJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OERMIMJQPQUIPK-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OERMIMJQPQUIPK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N Asp-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZELQAFZSJOBEQS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SBHUBSDEZQFJHJ-CIUDSAMLSA-N Asp-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O SBHUBSDEZQFJHJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OMMIEVATLAGRCK-BYPYZUCNSA-N Asp-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OMMIEVATLAGRCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SEMWSADZTMJELF-BYULHYEWSA-N Asp-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O SEMWSADZTMJELF-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- NZWDWXSWUQCNMG-GARJFASQSA-N Asp-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)C(=O)O NZWDWXSWUQCNMG-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- KCOPOPKJRHVGPE-AQZXSJQPSA-N Asp-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O KCOPOPKJRHVGPE-AQZXSJQPSA-N 0.000 description 1
- XWKPSMRPIKKDDU-RCOVLWMOSA-N Asp-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O XWKPSMRPIKKDDU-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- JGLWFWXGOINXEA-YDHLFZDLSA-N Asp-Val-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JGLWFWXGOINXEA-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102400001242 Betacellulin Human genes 0.000 description 1
- 101800001382 Betacellulin Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 102000043139 CK2 family Human genes 0.000 description 1
- 108090000835 CX3C Chemokine Receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 102100028892 Cardiotrophin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000009043 Chemical Burns Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 102000011413 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 102100036217 Collagen alpha-1(X) chain Human genes 0.000 description 1
- HVXBOLULGPECHP-WAYWQWQTSA-N Combretastatin A4 Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1\C=C/C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 HVXBOLULGPECHP-WAYWQWQTSA-N 0.000 description 1
- 108010053085 Complement Factor H Proteins 0.000 description 1
- 102000016550 Complement Factor H Human genes 0.000 description 1
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 102100035321 Complement factor H-related protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 206010011017 Corneal graft rejection Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- OCEHKDFAWQIBHH-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)CN=C(N)N OCEHKDFAWQIBHH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DEVDFMRWZASYOF-ZLUOBGJFSA-N Cys-Asn-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DEVDFMRWZASYOF-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YMBAVNPKBWHDAW-CIUDSAMLSA-N Cys-Asp-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N YMBAVNPKBWHDAW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WTNLLMQAFPOCTJ-GARJFASQSA-N Cys-His-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CS)N)C(=O)O WTNLLMQAFPOCTJ-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N Cys-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N OHLLDUNVMPPUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VDUPGIDTWNQAJD-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Cys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O VDUPGIDTWNQAJD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- TXCCRYAZQBUCOV-CIUDSAMLSA-N Cys-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O TXCCRYAZQBUCOV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DQUWSUWXPWGTQT-DCAQKATOSA-N Cys-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CS DQUWSUWXPWGTQT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QQAYIVHVRFJICE-AEJSXWLSSA-N Cys-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N QQAYIVHVRFJICE-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 206010012688 Diabetic retinal oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019878 Eales disease Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N GDP-L-fucose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N GDP-beta-L-fucose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N 0.000 description 1
- 229940126656 GS-4224 Drugs 0.000 description 1
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CLPQUWHBWXFJOX-BQBZGAKWSA-N Gln-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CLPQUWHBWXFJOX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HWEINOMSWQSJDC-SRVKXCTJSA-N Gln-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HWEINOMSWQSJDC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GURIQZQSTBBHRV-SRVKXCTJSA-N Gln-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GURIQZQSTBBHRV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- FLQAKQOBSPFGKG-CIUDSAMLSA-N Glu-Cys-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N FLQAKQOBSPFGKG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FKGNJUCQKXQNRA-NRPADANISA-N Glu-Cys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O FKGNJUCQKXQNRA-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- KUTPGXNAAOQSPD-LPEHRKFASA-N Glu-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O KUTPGXNAAOQSPD-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N Glu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- ZQYZDDXTNQXUJH-CIUDSAMLSA-N Glu-Met-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZQYZDDXTNQXUJH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HQOGXFLBAKJUMH-CIUDSAMLSA-N Glu-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N HQOGXFLBAKJUMH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N Glu-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N Gly-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CN NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Cys Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QPTNELDXWKRIFX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gly-Gln Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O QPTNELDXWKRIFX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- ZZJVYSAQQMDIRD-UWVGGRQHSA-N Gly-Pro-His Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O ZZJVYSAQQMDIRD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N Gly-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)CN FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031415 Hepatic triacylglycerol lipase Human genes 0.000 description 1
- 208000003923 Hereditary Corneal Dystrophies Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N His-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- LYSVCKOXIDKEEL-SRVKXCTJSA-N His-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LYSVCKOXIDKEEL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QPSCMXDWVKWVOW-BZSNNMDCSA-N His-His-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QPSCMXDWVKWVOW-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- NDKSHNQINMRKHT-PEXQALLHSA-N His-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N NDKSHNQINMRKHT-PEXQALLHSA-N 0.000 description 1
- ZSKJIISDJXJQPV-BZSNNMDCSA-N His-Leu-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 ZSKJIISDJXJQPV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- TTYKEFZRLKQTHH-MELADBBJSA-N His-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N)C(=O)O TTYKEFZRLKQTHH-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- CHIAUHSHDARFBD-ULQDDVLXSA-N His-Pro-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 CHIAUHSHDARFBD-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 101000808726 Homo sapiens Age-related maculopathy susceptibility protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000924533 Homo sapiens Angiopoietin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000875027 Homo sapiens Collagen alpha-1(X) chain Proteins 0.000 description 1
- 101000878136 Homo sapiens Complement factor H-related protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000941289 Homo sapiens Hepatic triacylglycerol lipase Proteins 0.000 description 1
- 101001002634 Homo sapiens Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000692455 Homo sapiens Platelet-derived growth factor receptor beta Proteins 0.000 description 1
- 101000585728 Homo sapiens Protein O-GlcNAcase Proteins 0.000 description 1
- 101000650590 Homo sapiens Roundabout homolog 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000711466 Homo sapiens SAM pointed domain-containing Ets transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- 206010051151 Hyperviscosity syndrome Diseases 0.000 description 1
- PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N Ile-Glu-Thr Chemical compound N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)O PNDMHTTXXPUQJH-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-FQUUOJAGSA-N Ile-Lys-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GLYJPWIRLBAIJH-FQUUOJAGSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N Ile-Lys-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFRXVQGGPNSJRY-CYDGBPFRSA-N Ile-Met-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N UFRXVQGGPNSJRY-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- VOCZPDONPURUHV-QEWYBTABSA-N Ile-Phe-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N VOCZPDONPURUHV-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- SAVXZJYTTQQQDD-QEWYBTABSA-N Ile-Phe-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N SAVXZJYTTQQQDD-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- CIDLJWVDMNDKPT-FIRPJDEBSA-N Ile-Phe-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N CIDLJWVDMNDKPT-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 1
- JZNVOBUNTWNZPW-GHCJXIJMSA-N Ile-Ser-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N JZNVOBUNTWNZPW-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 108010020950 Integrin beta3 Chemical group 0.000 description 1
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100020793 Interleukin-13 receptor subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GNRPTBRHRRZCMA-RWMBFGLXSA-N Leu-Met-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GNRPTBRHRRZCMA-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VUBIPAHVHMZHCM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- CGHXMODRYJISSK-NHCYSSNCSA-N Leu-Val-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CGHXMODRYJISSK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 229910052765 Lutetium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 1
- SJNZALDHDUYDBU-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SJNZALDHDUYDBU-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- BYEBKXRNDLTGFW-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BYEBKXRNDLTGFW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N Lys-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O RFQATBGBLDAKGI-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- YUAXTFMFMOIMAM-QWRGUYRKSA-N Lys-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O YUAXTFMFMOIMAM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- YDDDRTIPNTWGIG-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YDDDRTIPNTWGIG-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- CENKQZWVYMLRAX-ULQDDVLXSA-N Lys-Phe-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CENKQZWVYMLRAX-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YTJFXEDRUOQGSP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Arg Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WQDKIVRHTQYJSN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UIJVKVHLCQSPOJ-XIRDDKMYSA-N Lys-Ser-Trp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O UIJVKVHLCQSPOJ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 206010025412 Macular dystrophy congenital Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- QDMUMFDBUVOZOY-GUBZILKMSA-N Met-Arg-Cys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N QDMUMFDBUVOZOY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UAPZLLPGGOOCRO-IHRRRGAJSA-N Met-Asn-Phe Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N UAPZLLPGGOOCRO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 102100026261 Metalloproteinase inhibitor 3 Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000204801 Muraenidae Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010087066 N2-tryptophyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100033857 Neurotrophin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 description 1
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000004788 Pars Planitis Diseases 0.000 description 1
- 208000034038 Pathologic Neovascularization Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- XWBJLKDCHJVKAK-KKUMJFAQSA-N Phe-Arg-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N XWBJLKDCHJVKAK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- SXJGROGVINAYSH-AVGNSLFASA-N Phe-Gln-Asp Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N SXJGROGVINAYSH-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RSPUIENXSJYZQO-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RSPUIENXSJYZQO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- RYQWALWYQWBUKN-FHWLQOOXSA-N Phe-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RYQWALWYQWBUKN-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- WKLMCMXFMQEKCX-SLFFLAALSA-N Phe-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CC3=CC=CC=C3)N)C(=O)O WKLMCMXFMQEKCX-SLFFLAALSA-N 0.000 description 1
- QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N Phe-Pro-Glu Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 108010081996 Photosystem I Protein Complex Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 1
- CZWCKYRVOZZJNM-UHFFFAOYSA-N Prasterone sodium sulfate Natural products C1C(OS(O)(=O)=O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 CZWCKYRVOZZJNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SZZBUDVXWZZPDH-BQBZGAKWSA-N Pro-Cys-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 SZZBUDVXWZZPDH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HQVPQXMCQKXARZ-FXQIFTODSA-N Pro-Cys-Ser Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O HQVPQXMCQKXARZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XZONQWUEBAFQPO-HJGDQZAQSA-N Pro-Gln-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XZONQWUEBAFQPO-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- INDVYIOKMXFQFM-SRVKXCTJSA-N Pro-Lys-Gln Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O INDVYIOKMXFQFM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DWGFLKQSGRUQTI-IHRRRGAJSA-N Pro-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 DWGFLKQSGRUQTI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MHHQQZIFLWFZGR-DCAQKATOSA-N Pro-Lys-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MHHQQZIFLWFZGR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N Pro-Val-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YDTUEBLEAVANFH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 208000002158 Proliferative Vitreoretinopathy Diseases 0.000 description 1
- 229940123794 Properdin antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001076393 Rattus norvegicus Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 208000002367 Retinal Perforations Diseases 0.000 description 1
- 102100040756 Rhodopsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000820 Rhodopsin Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241001303601 Rosacea Species 0.000 description 1
- 102100027701 Roundabout homolog 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100034018 SAM pointed domain-containing Ets transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039705 Scleritis Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- YMEXHZTVKDAKIY-GHCJXIJMSA-N Ser-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(O)=O YMEXHZTVKDAKIY-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- UGJRQLURDVGULT-LKXGYXEUSA-N Ser-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UGJRQLURDVGULT-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- ICHZYBVODUVUKN-SRVKXCTJSA-N Ser-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ICHZYBVODUVUKN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KCGIREHVWRXNDH-GARJFASQSA-N Ser-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N KCGIREHVWRXNDH-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N Ser-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N Ser-Thr-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNXUIBACCONSOH-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HNDMFDBQXYZSRM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N Ser-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ODRUTDLAONAVDV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000022758 Sorsby fundus dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000027073 Stargardt disease Diseases 0.000 description 1
- 206010042033 Stevens-Johnson syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000168 Stevens-Johnson syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108091007178 TNFRSF10A Proteins 0.000 description 1
- OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N Thr-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OHAJHDJOCKKJLV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- UDQBCBUXAQIZAK-GLLZPBPUSA-N Thr-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UDQBCBUXAQIZAK-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- SXAGUVRFGJSFKC-ZEILLAHLSA-N Thr-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SXAGUVRFGJSFKC-ZEILLAHLSA-N 0.000 description 1
- JWQNAFHCXKVZKZ-UVOCVTCTSA-N Thr-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JWQNAFHCXKVZKZ-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- PUEWAXRPXOEQOW-HJGDQZAQSA-N Thr-Met-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PUEWAXRPXOEQOW-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- PZSDPRBZINDEJV-HTUGSXCWSA-N Thr-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PZSDPRBZINDEJV-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N Thr-Phe-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N)O JMBRNXUOLJFURW-BEAPCOKYSA-N 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 108010031429 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 1
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 201000005485 Toxoplasmosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- DXDMNBJJEXYMLA-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 DXDMNBJJEXYMLA-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- KXFYAQUYJKOQMI-QEJZJMRPSA-N Trp-Ser-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KXFYAQUYJKOQMI-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- BOBZBMOTRORUPT-XIRDDKMYSA-N Trp-Ser-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BOBZBMOTRORUPT-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- VNRTXOUAOUZCFW-WDSOQIARSA-N Trp-Val-His Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O VNRTXOUAOUZCFW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- 102100040113 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A Human genes 0.000 description 1
- DYEGCOJHFNJBKB-UFYCRDLUSA-N Tyr-Arg-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 DYEGCOJHFNJBKB-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- AZZLDIDWPZLCCW-ZEWNOJEFSA-N Tyr-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O AZZLDIDWPZLCCW-ZEWNOJEFSA-N 0.000 description 1
- YKCXQOBTISTQJD-BZSNNMDCSA-N Tyr-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N YKCXQOBTISTQJD-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- MXFPBNFKVBHIRW-BZSNNMDCSA-N Tyr-Lys-His Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N)O MXFPBNFKVBHIRW-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- XJPXTYLVMUZGNW-IHRRRGAJSA-N Tyr-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XJPXTYLVMUZGNW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 description 1
- 229940123429 VEGFR tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N Val-Asp-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BMGOFDMKDVVGJG-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- YCMXFKWYJFZFKS-LAEOZQHASA-N Val-Gln-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YCMXFKWYJFZFKS-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N Val-Gly-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N Val-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N Val-Pro-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N Val-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N Val-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 208000010011 Vitamin A Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010047663 Vitritis Diseases 0.000 description 1
- 102100038968 WAP four-disulfide core domain protein 1 Human genes 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N Z-zeaxanthin Natural products C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1C=CC(C)=CC=CC(C)=CC=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N 0.000 description 1
- QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCC(O)C1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001467 acupuncture Methods 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000695 adrenergic alpha-agonist Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940042992 afinitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003732 agents acting on the eye Substances 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010070783 alanyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N all-trans-Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 230000000964 angiostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000002137 anti-vascular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010913 antigen-directed enzyme pro-drug therapy Methods 0.000 description 1
- 229940006133 antiglaucoma drug and miotics carbonic anhydrase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013357 binding ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229960001724 brimonidine tartrate Drugs 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003489 carbonate dehydratase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 108010041776 cardiotrophin 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 201000005667 central retinal vein occlusion Diseases 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229960003115 certolizumab pegol Drugs 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 229960005537 combretastatin A-4 Drugs 0.000 description 1
- 229960005527 combretastatin A-4 phosphate Drugs 0.000 description 1
- HVXBOLULGPECHP-UHFFFAOYSA-N combretastatin A4 Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C=CC1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 HVXBOLULGPECHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDOGQTQEKVLZIJ-WAYWQWQTSA-N combretastatin a-4 phosphate Chemical compound C1=C(OP(O)(O)=O)C(OC)=CC=C1\C=C/C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 WDOGQTQEKVLZIJ-WAYWQWQTSA-N 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 206010011005 corneal dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 238000002447 crystallographic data Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone sulfate Chemical compound C1[C@@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 108700041286 delta Proteins 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000011190 diabetic macular edema Diseases 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- HSUGRBWQSSZJOP-RTWAWAEBSA-N diltiazem Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](OC(C)=O)C(=O)N(CCN(C)C)C2=CC=CC=C2S1 HSUGRBWQSSZJOP-RTWAWAEBSA-N 0.000 description 1
- 229960004166 diltiazem Drugs 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 108010054813 diprotin B Proteins 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- IAVUPMFITXYVAF-XPUUQOCRSA-N dorzolamide Chemical compound CCN[C@H]1C[C@H](C)S(=O)(=O)C2=C1C=C(S(N)(=O)=O)S2 IAVUPMFITXYVAF-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 229960003933 dorzolamide Drugs 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 229960002017 echothiophate Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- RDYMFSUJUZBWLH-UHFFFAOYSA-N endosulfan Chemical compound C12COS(=O)OCC2C2(Cl)C(Cl)=C(Cl)C1(Cl)C2(Cl)Cl RDYMFSUJUZBWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021373 epidemic keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 229960005167 everolimus Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001497 fibrovascular Effects 0.000 description 1
- 229940043075 fluocinolone Drugs 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKAIKUBBJHFNBZ-UHFFFAOYSA-N glycyl-lysine Chemical group NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 229960001743 golimumab Drugs 0.000 description 1
- 108010085742 growth hormone-releasing peptide-2 Proteins 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 1
- 102000055222 human IL1B Human genes 0.000 description 1
- 102000046319 human OGA Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940101556 human hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 208000013653 hyalitis Diseases 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940044700 hylenex Drugs 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 1
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 108040003607 interleukin-13 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229950000482 lampalizumab Drugs 0.000 description 1
- 108010032674 lampalizumab Proteins 0.000 description 1
- 238000013532 laser treatment Methods 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 1
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 1
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 1
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 description 1
- OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N lutetium atom Chemical compound [Lu] OHSVLFRHMCKCQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002824 mRNA display Methods 0.000 description 1
- 208000029233 macular holes Diseases 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229940121386 matrix metalloproteinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003771 matrix metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- BMGQWWVMWDBQGC-IIFHNQTCSA-N midostaurin Chemical compound CN([C@H]1[C@H]([C@]2(C)O[C@@H](N3C4=CC=CC=C4C4=C5C(=O)NCC5=C5C6=CC=CC=C6N2C5=C43)C1)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 BMGQWWVMWDBQGC-IIFHNQTCSA-N 0.000 description 1
- 229950010895 midostaurin Drugs 0.000 description 1
- 229960003248 mifepristone Drugs 0.000 description 1
- VKHAHZOOUSRJNA-GCNJZUOMSA-N mifepristone Chemical compound C1([C@@H]2C3=C4CCC(=O)C=C4CC[C@H]3[C@@H]3CC[C@@]([C@]3(C2)C)(O)C#CC)=CC=C(N(C)C)C=C1 VKHAHZOOUSRJNA-GCNJZUOMSA-N 0.000 description 1
- 229940029985 mineral supplement Drugs 0.000 description 1
- 235000020786 mineral supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000001491 myopia Diseases 0.000 description 1
- 230000004379 myopia Effects 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000021971 neovascular inflammatory vitreoretinopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001067 neuroprotector Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- 201000002575 ocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 239000006014 omega-3 oil Substances 0.000 description 1
- 229940023490 ophthalmic product Drugs 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229960003407 pegaptanib Drugs 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229940100008 phospholine iodide Drugs 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000013492 plasmid preparation Methods 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229950009829 prasterone sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- DIJBBUIOWGGQOP-QGVNFLHTSA-N pregnenolone sulfate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 DIJBBUIOWGGQOP-QGVNFLHTSA-N 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006785 proliferative vitreoretinopathy Effects 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N purine Chemical compound N1=C[N]C2=NC=NC2=C1 IGFXRKMLLMBKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007420 radioactive assay Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 210000003994 retinal ganglion cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004233 retinal vasculature Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 229960003522 roquinimex Drugs 0.000 description 1
- 201000004700 rosacea Diseases 0.000 description 1
- MCTOGTBIQBEIBZ-RHJKTMSGSA-K rostaporfin Chemical compound CCOC(=O)C([C@]1([C@H]2C)CC)=CC3=C1N([Sn](N14)(Cl)Cl)C2=CC(C(=C2C)CC)=NC2=CC1=C(CC)C(C)=C4C=C1C(CC)=C(C)C3=N1 MCTOGTBIQBEIBZ-RHJKTMSGSA-K 0.000 description 1
- 229950005932 rostaporfin Drugs 0.000 description 1
- 108091008601 sVEGFR Proteins 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 201000006476 shipyard eye Diseases 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 1
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 1
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- IHQKEDIOMGYHEB-UHFFFAOYSA-M sodium dimethylarsinate Chemical compound [Na+].C[As](C)([O-])=O IHQKEDIOMGYHEB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L sodium malonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC([O-])=O PRWXGRGLHYDWPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000001370 static light scattering Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229960000235 temsirolimus Drugs 0.000 description 1
- QFJCIRLUMZQUOT-UHFFFAOYSA-N temsirolimus Natural products C1CC(O)C(OC)CC1CC(C)C1OC(=O)C2CCCCN2C(=O)C(=O)C(O)(O2)C(C)CCC2CC(OC)C(C)=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C(OC)C(O)C(C)=CC(C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PASYJVRFGUDDEW-WMUGRWSXSA-J tetrasodium;[[(2r,3s,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-oxidophosphoryl] [[[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-oxidophosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)[C@@H](O)C1 PASYJVRFGUDDEW-WMUGRWSXSA-J 0.000 description 1
- CXVCSRUYMINUSF-UHFFFAOYSA-N tetrathiomolybdate(2-) Chemical compound [S-][Mo]([S-])(=S)=S CXVCSRUYMINUSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 238000000015 thermotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 229940100411 torisel Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010035534 tyrosyl-leucyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019195 vitamin supplement Nutrition 0.000 description 1
- 201000007790 vitelliform macular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000000318 vitreous detachment Diseases 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000010930 zeaxanthin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001775 zeaxanthin Substances 0.000 description 1
- 229940043269 zeaxanthin Drugs 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к антителу, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, а также к способу его получения. Также раскрыты выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая указанное антитело, а также вектор и клетка, ее содержащие. Изобретение эффективно для лечения сосудистых заболеваний глаз. 6 н. и 5 з.п. ф-лы, 14 ил., 16 табл., 10 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к антителам к VEGF/IL-1бетa и способам их применения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
О биспецифическом антителе, связывающемся с IL-1бета и VEGF, сообщалось ранее, и оно предлагалось для лечения сосудистых заболеваний глаз (WO 2016/075034, антитело «0032»). Биспецифическое антитело 0032 к VEGF/IL-1бета представляет собой полноразмерное подобное IgG антитело с обменом доменами VH/VL в одном связывающем плече (WO 2009/080252, Schaefer, W. et al, PNAS, 108 (2011) 11187-1191), причем связывающее плечо расположения доменов антитела дикого типа специфически связывается с IL-1бета, и связывающее плечо, содержащее кроссинговер доменов VH/VL, специфически связывается с VEGF. VEGF-связывающее плечо содержит домены VH и VL антитела к VEGF ранибизумаба.
Мультиспецифические антитела, содержащие два паратопа в одной паре вариабельного домена тяжелой цепи (VH) и вариабельного домена легкой цепи (VL), были описаны в WO 2008/027236; WO 2010/108127 и Bostrom, J., et al., Science 323 (2009) 1610-1614, а также в WO 2012/163520.
В WO 2012/163520 раскрыты биспецифические антитела, содержащие два неперекрывающихся паратопа в одной паре доменов VH и VL («DutaFabs»). Каждый паратоп биспецифического антитела из WO 2012/163520 содержит аминокислоты из CDR тяжелой цепи и из легкой цепи, причем CDR-H1 и CDR-Н3 тяжелой цепи, а также CDR-L2 легкой цепи обеспечивают первый паратоп, а CDR-L1 и CDR-L3 легкой цепи, а также CDR-H2 тяжелой цепи обеспечивают второй паратоп. Моноспецифические антитела, содержащие отдельные паратопы, выделены независимо из различных Fab-библиотек, которые варьируют или в первом, или во втором паратопе. Аминокислотные последовательности указанных моноспецифических антител определены и объединены в бипаратопной паре VH и VL. Один типичный Fab-фрагмент, специфически связывающийся с VEGF и IL-6, раскрыт в WO 2012/163520.
Существует потребность в улучшенных терапевтических антителах, которые связываются с VEGF и IL-1бета.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к биспецифическим антителам к VEGF/IL-1бета и способам их применения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем паратоп VEGF содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела, причем паратоп IL-1бета содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре домена VL и домена VH, причем пара вариабельного домена легкой цепи и вариабельного домена тяжелой цепи одновременно связывается с VEGF человека и IL-1бета человека.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре домена VL и домена VH, причем ни одна из аминокислот, которые содержатся в паратопе VEGF, не содержится в паратопе IL-1бета.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре домена VL и домена VH, причем антитело связывается с тем же эпитопом на VEGF человека и с тем же эпитопом на IL-1бета человека, что и антитело с вариабельным доменом тяжелой цепи SEQ ID NO:11 и вариабельным доменом легкой цепи SEQ ID NO:12.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем связывание Fab-фрагмента антитела с VEGF человека ингибирует связывание VEGF с VEGFR2 с IC50 менее 50 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и К94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату. В одном варианте реализации антитело содержит паратоп VEGF, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: D55, Н56, Y58, Т61, К62, F63, 164, R66 и R83, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: 12, Y27, W27a, S27c, S27d, Е67, D68, Q69, R92, Y93, Н94 и Y96; и паратоп IL-1бета, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, K94, D95, V96, F98 и D101, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Y91.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, S67, Н68, Е69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату. В одном варианте реализации антитело содержит паратоп VEGF, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66 и R83, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: 12, Y27, W27a, S27c, S27d, S67, Н68, Е69, R92, Y93, Н94 и Y96; и паратоп IL-1бета, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, K94, D95, V96, F98 и D101, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Y91.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11, причем домен VH содержит аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, R66, R83 и K94; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12, причем домен VL содержит аминокислотные остатки 12, Y49, G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с до 15 аминокислотных замен. В одном варианте реализации антитело содержит (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с до 15 аминокислотных замен, причем аминокислотные замены расположены в положениях 3-25, 36-49, 97-82 с, 84-93 или 103-113 SEQ ID NO:11; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с до 15 аминокислотных замен, причем аминокислотные замены расположены в положениях 1, 4, 6, 8-23, 35-48, 58-66, 70-88 или 98-107 SEQ ID NO:12, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с до 15 аминокислотных замен.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и К94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, и содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с до 15 аминокислотных замен.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее последовательность VH с SEQ ID NO:11 и последовательность VL с SEQ ID NO:12.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи с SEQ ID NO:20 и аминокислотную последовательность легкой цепи с SEQ ID NO:19.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи с SEQ ID NO:18 и аминокислотную последовательность легкой цепи с SEQ ID NO:19.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12; причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12; причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и (домен VL), содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12; причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
Один вариант реализации настоящего изобретения относится к фрагменту антитела, который связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека. Один вариант реализации настоящего изобретения относится к фрагменту биспецифического антитела, который связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека. В одном варианте реализации фрагмент антитела выбран из Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2 или одноцепочечных антител, полученных из них. Один вариант реализации настоящего изобретения относится к Fab-фрагменту, который связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека. Один вариант реализации настоящего изобретения относится к Fv-фрагменту, который связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека.
Один вариант реализации настоящего изобретения относится к полноразмерному антителу IgG, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело настоящего изобретения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает клетку-хозяина, содержащую нуклеиновую кислоту настоящего изобретения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту настоящего изобретения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ получения антитела, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, включающий культивирование клетки-хозяина настоящего изобретения так, чтобы получить антитело.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, полученное способом настоящего изобретения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтический состав, содержащий антитело настоящего изобретения и фармацевтически приемлемый носитель.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело настоящего изобретения для применения в качестве лекарственного средства, в одном варианте реализации для применения в лечении сосудистого заболевания.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает применение антитела настоящего изобретения или фармацевтической композиции настоящего изобретения в изготовлении лекарственного средства, в одном варианте реализации лекарственного средства для лечения сосудистого заболевания.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ лечения индивидуума, имеющего сосудистое заболевание, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела настоящего изобретения или фармацевтической композиции настоящего изобретения.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ ингибирования ангиогенеза у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела настоящего изобретения или фармацевтической композиции настоящего изобретения для ингибирования ангиогенеза.
Согласно настоящему изобретению обеспечивается терапевтическое антитело к VEGF/IL-1бета, которое способно связываться с его целевыми антигенами одновременно, даже когда обеспечивается в виде биспецифического Fab-фрагмента. Кроме того, антитело настоящего изобретения обеспечивает несколько ценных свойств, которые позволяют его терапевтическое применение, таких как высокая аффинность, гидрофильность и высокая стабильность. Антитело настоящего изобретения может обеспечиваться в жидких составах с высокими концентрациями с вязкостью, подходящей для применения для глаз. Антитело настоящего изобретения подходит для лечения сосудистых заболеваний глаз.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Фигура 1: Схематическое изображение Fab-фрагмента антитела к VEGF/IL- 1бета настоящего изобретения. Показан вид сверху вниз родственной пары VH/VL, включающий расположение аминокислоты CDR (верхнее изображение). Домен VH показан серым, домен VL показан белым. Кроме того, указано пространственное расположение областей CDR. Области паратопа антитела настоящего изобретения выделены (нижнее изображение), причем паратоп VEGF расположен в областях H-CDR2, L-CDR1 и L-CDR2, а паратоп IL-1бета расположен в областях H-CDR1, H-CDR3 и L-CDR2.
Фигура 2: Аминокислотные последовательности доменов VH типичных антител к VEGF/IL-1бета настоящего изобретения. Указана нумерация по Кабату положения аминокислот, а также областей CDR и FR. Выделены положения аминокислот, вносящие вклад в паратоп VEGF, а также паратоп IL-1бета, как определено в примере 8.
Фигура 3: Аминокислотные последовательности доменов VL типичных антител к VEGF/IL-1бета настоящего изобретения. Указана нумерация по Кабату положения аминокислот, а также областей CDR и FR. Выделены положения аминокислот, вносящие вклад в паратоп VEGF, а также паратоп IL-1бета, как определено в примере 8.
Фигура 4: Одновременное связывание с антигенами антитела 1HVL12.85 к VEGF/IL-1бета с VEGF и IL-1бета, как оценено посредством ППР согласно примеру 5.
Фигура 5: Одновременное связывание с антигенами антитела RO 7200394 к VEGF/IL-1бета с VEGF и IL-16eTa, как оценено посредством ППР согласно примеру 5.
Фигура 6: Одновременное связывание с антигенами антитела 0032 к VEGF/IL-1бета уровня техники с VEGF и IL-16eTa, как оценено посредством ППР согласно примеру 5.
Фигура 7А: Ингибирование связывания VEGF с hVEGFR2 в присутствии антитела RO 7200394 (Fab-фрагмента), как оценено в примере 6. Ингибирование связывания с рецептором оценивали в присутствии и в отсутствие другого антигена-мишени биспецифического антитела, IL-16eTa.
Фигура 7В: Ингибирование связывания VEGF с hVEGFR2 в присутствии антитела 0032 уровня техники (полноразмерного IgG), как оценено в примере 6. Ингибирование связывания с рецептором оценивали в присутствии и в отсутствие другого антигена-мишени биспецифического антитела, IL-16eTa.
Фигура 8А: Ингибирование связывания IL-16eTa с IL-16eTaRl в присутствии антитела RO 7200394 (Fab-фрагмента), как оценено в примере 6. Ингибирование связывания с рецептором оценивали в присутствии и в отсутствие другого антигена-мишени биспецифического антитела, VEGF.
Фигура 8В: Ингибирование связывания IL-16eTa с IL-16eTaRl в присутствии антитела 0032 уровня техники (полноразмерного IgG), как оценено в примере 6. Ингибирование связывания с рецептором оценивали в присутствии и в отсутствие другого антигена-мишени биспецифического антитела, VEGF.
Фигура 9: Конкурентный ИФА, оценивающий VEGF121-связывание с VEGF-R1 в присутствии указанных антител, как оценено в примере 6.
Фигура 10: Конкурентный ИФА, оценивающий VEGF165-связывание с VEGF-R1 в присутствии указанных антител, как оценено в примере 6.
Фигура 11: Результаты хроматографии гидрофобного взаимодействия (ХГВ) антител настоящего изобретения, как оценено в примере 7.
Фигура 12: Результаты хроматографии гидрофобного взаимодействия (ХГВ) антитела 0032 уровня техники (пример 7).
Фигура 13: Вязкость антитела 1HVL12.85, как оценено в примере 8.
Фигура 14: Вязкость антитела RO 7200394, как оценено в примере 8.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Определения
Если иное не определено в настоящем документе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обычно понимаются специалистами в данной области. Кроме того, если иное не требуется по контексту, термины в единственном числе будут включать множественные формы, и термины во множественном числе будут включать единственное число. Способы и техники настоящего раскрытия в общем выполняются согласно обычным способам, хорошо известным в данной области. В общем, номенклатуры, используемые вместе с, и техники биохимии, ферментологии, молекулярной и клеточной биологии, микробиологии, генетики и химии белков и нуклеиновых кислот и гибридизации, описанные в настоящем документе, являются хорошо известными и обычно используемыми в данной области.
Если иное не определено в настоящем документе, термин «содержащий» будет включать термин «состоящий из».
Термин «приблизительно» при использовании в настоящем документе в связи с конкретным значением (например, температурой, концентрацией, временем и другими) будет относиться к вариации +/-1% конкретного значения, к которому относится термин «приблизительно».
Термин «антитело» в данном документе используется в самом широком смысле и включает различные структуры антител, включая, но не ограничиваясь ими, моноклональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела) и фрагменты антител, при условии, что они проявляют требуемую антигенсвязывающую активность.
«Выделенное» антитело представляет собой антитело, которое было отделено от компонента его природного окружения. В некоторых вариантах реализации антитело является очищенным до более чем 95% или 99% чистоты, определяемой, например, посредством электрофореза (например, ДСН-ПААГ-электрофорез, изоэлектрического фокусирования (ИЭФ), капиллярного электрофореза) или метода хроматографии (например, ионообменной или обращенно-фазовой ВЭЖХ). Обзор методов оценки чистоты антител смотрите, например, в Flatman et al., J. Chromatogr. В 848:79-87 (2007).
В контексте данного документа термин «моноклональное антитело» относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными и/или связывают один и тот же эпитоп, за исключением возможных вариантных антител, например, содержащих естественные мутации или возникающих при получении препарата моноклональных антител, причем такие варианты в целом присутствуют в незначительных количествах. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые обычно содержат разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело препарата моноклональных антител направлено против одной детерминанты на антигене. Таким образом, определение «моноклональный» указывает на характеристику антитела, как полученного из по существу гомогенной популяции антител, и его не следует интерпретировать как требование получения антитела каким-либо конкретным способом.
В настоящем документе термины «полноразмерное антитело», «интактное антитело» и «целое антитело» используются взаимозаменяемо для обозначения антитела, имеющего структуру, по существу сходную со структурой нативного антитела, или имеющего тяжелые цепи, которые содержат Fc-область, определенную в настоящем документе.
«Класс» антитела относится к типу константного домена или константной области, которые содержит его тяжелая цепь. Существует пять основных классов антител: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, и некоторые из них могут быть дополнительно подразделены на подклассы (изотипы), например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. В некоторых вариантах реализации антитело является антителом изотипа IgG1. В некоторых вариантах реализации антитело является антителом изотипа IgG1 с мутацией P329G, L234A и L235A для снижения эффекторной функции Fc-области. В других вариантах реализации антитело является антителом изотипа IgG2. В некоторых вариантах реализации антитело является антителом изотипа IgG4 с мутацией S228P в шарнирной области для улучшения стабильности антитела IgG4. Константные домены тяжелой цепи, соответствующие различным классам иммуноглобулинов, называются α, δ, ε, γ, и μ, соответственно. Легкая цепь антитела может быть отнесена к одному из двух типов, называемых каппа (κ) и лямбда (λ), на основании аминокислотной последовательности своего константного домена.
В данном документе термин «Fc-область» используется для определения С-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина, которая содержит по меньшей мере часть константной области. Этот термин включает Fc-области с нативной последовательностью и вариантные Fc-области. В одном варианте реализации Fc-область тяжелой цепи человеческого IgG простирается от Cys226 или от Рго230 до карбокси-конца тяжелой цепи. Если в данном документе не указано иное, нумерация аминокислотных остатков в Fc-области или константной области соответствует системе нумерации EU, также называемой индексом EU, как описано в Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991.
«Эффекторные функции» относятся к видам биологической активности, характерным для Fc-области антитела, которые варьируются в зависимости от изотипа антитела. Примеры эффекторных функций антител включают: связывание C1q и комплементзависимую цитотоксичность (КЗЦ); связывание с рецептором Fc; антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (АЗКЦ); фагоцитоз; понижающую регуляцию клеточных поверхностных рецепторов (например, В-клеточного рецептора) и активацию В-клетки.
Термин «вариабельная область» или «вариабельный домен» относится к домену тяжелой или легкой цепей антитела, который участвует в связывании антитела с антигеном. Вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи (VH и VL, соответственно) нативного антитела обычно имеют сходные структуры, причем каждый домен содержит четыре консервативные каркасные области (FR) и три гипервариабельные области (HVR) (смотрите, например, Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)). В антителе настоящего изобретения одна пара домена VH и домена VL, т.е. родственная пара VH/VL, специфически связывается с двумя его мишенями: VEGF и IL-1бета.
«DutaFab» представляет биспецифическое антитело, как раскрыто в WO 2012/163520. В DutaFab одна пара домена VH и домена VL специфически связывается с двумя различными эпитопами, причем один паратоп содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3, а другой паратоп содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2. DutaFab содержат два неперекрывающихся паратопа в родственной паре VH/VL и могут одновременно связываться с двумя различными эпитопами. DutaFab и способы их получения путем просмотра библиотек, содержащих моноспецифические Fab-фрагменты, раскрыты в WO 2012/163520.
«Человеческое антитело» представляет собой антитело, которое имеет аминокислотную последовательность, соответствующую последовательности антитела, вырабатываемого человеком или клеткой человека, или полученную из источника, отличного от человека, в котором используются репертуары человеческих антител или другие последовательности, кодирующие человеческие антитела. Это определение человеческого антитела явным образом исключает гуманизированное антитело, содержащее нечеловеческие антигенсвязывающие остатки.
«Человеческая консенсусная каркасная область» представляет собой каркасную область, которая представляет наиболее часто встречающиеся аминокислотные остатки в наборе последовательностей каркасных областей VL или VH человеческого иммуноглобулина. В общем случае набор последовательностей VL или VH человеческого иммуноглобулина получен из подгруппы последовательностей вариабельных доменов. В общем случае подгруппа последовательностей представляет собой подгруппу согласно Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, NIH Publication 91-3242, Bethesda MD (1991), т. 1-3. В одном из вариантов реализации для VL подгруппа представляет собой подгруппу каппа I по Кабату и соавт., ранее. В одном из вариантов реализации для VH подгруппа представляет собой подгруппу III по Кабату и соавт., ранее.
«Фрагмент антитела» относится к молекуле, отличной от интактного антитела, которая содержит часть интактного антитела, которая связывает антиген, с которым связывается интактное антитело. Примеры фрагментов антител включают Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab’)2-фрагменты; диатела; линейные антитела; молекулы одноцепочечных антител (например, scFv); и полиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител, но не ограничиваются ими.
«Паратоп» или «антигенсвязывающий сайт», что используются взаимозаменяемо в настоящем документе, относится к части антитела, которая распознает и связывается с антигеном. Паратоп образован несколькими отдельными аминокислотными остатками из вариабельных доменов тяжелой и легкой цепи антитела, расположенных в пространственной близости в третичной структуре Fv-области. Антитела настоящего изобретения содержат два «неперекрывающихся» паратопа в одной родственной паре VH/VL. Под «неперекрывающимся» понимают, что ни одна из аминокислот, которые содержатся в одном из двух паратопов, не содержится в другом паратопе.
При использовании в настоящем документе «паратоп VEGF» представляет паратоп или антигенсвязывающий сайт, который связывается с VEGF. Паратоп VEGF антитела настоящего изобретения содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела.
При использовании в настоящем документе «паратоп IL-1бета» представляет паратоп или антигенсвязывающий сайт, который связывается с IL-1бета. Паратоп IL-1бета антитела настоящего изобретения содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела.
Употребляемый в данном документе термин «VEGF» относится к любому нативному VEGF из любого источника, относящегося к позвоночным, включая млекопитающих, таких как приматы (например, люди) и грызуны (например, мыши и крысы), если не указано иное. Этот термин охватывает «полноразмерный» непроцессированный VEGF, а также любую форму VEGF, полученную в результате процессинга в клетке. Этот термин также охватывает варианты VEGF природного происхождения, например, сплайс-варианты или аллельные варианты. Аминокислотная последовательность типичного VEGF человека представлена в SEQ ID NO:26.
Термины «антитело к VEGF» и «антитело, которое связывается с VEGF» относятся к антителу, которое способно связывать VEGF с достаточной аффинностью, чтобы антитело можно было применять в качестве диагностического и/или терапевтического средства для нацеливания на VEGF. В одном варианте реализации степень связывания антитела к VEGF с неродственным, не являющимся VEGF белком составляет менее чем приблизительно 10% от связывания антитела с VEGF, что измеряется, например, с помощью поверхностного плазмонного резонанса (ППР). В некоторых вариантах реализации антитело, которое связывается с VEGF, имеет константу диссоциации (KD) ≤1 нМ, ≤ 0,1 нМ или ≤ 0,01 нМ. Антитело, как говорят, «специфически связывается» с VEGF, когда антитело имеет KD 1 мкМ или менее.
В контексте данного документа термин «IL-1бета» относится к любому нативному IL-1бета из любого источника, относящегося к позвоночным, включая млекопитающих, таких как приматы (например, люди) и грызуны (например, мыши и крысы), если не указано иное. Этот термин охватывает «полноразмерный» непроцессированный IL-1бета, а также любую форму IL-1бета, полученную в результате процессинга в клетке. Этот термин также охватывает варианты IL-1бета природного происхождения, например, сплайс-варианты или аллельные варианты. Аминокислотная последовательность типичного IL-1бета человека представлена в SEQ ID NO:27.
Термины «антитело к IL-1бета» и «антитело, которое связывается с IL-1бета» относятся к антителу, которое способно связывать IL-1бета с достаточной аффинностью, чтобы антитело можно было применять в качестве диагностического и/или терапевтического средства для нацеливания на IL-1бета. В одном варианте реализации степень связывания антитела к IL-1бета с неродственным, не являющимся IL-1бета белком составляет менее чем приблизительно 10% от связывания антитела с IL-1бета, что измеряется, например, с помощью поверхностного плазмонного резонанса (ППР). В некоторых вариантах реализации антитело, которое связывается с IL-1бета, имеет константу диссоциации (KD) ≤ 1 нМ, ≤ 0,1 нМ или ≤ 0,03 нМ. Антитело, как говорят, «специфически связывается» с IL-1бета, когда антитело имеет 1 мкМ или менее.
Антитело настоящего изобретения «одновременно связывается с VEGF человека и IL-гбета человека», что означает, что (а) Fab-фрагмент антитела настоящего изобретения, который связывается с IL-гбета человека, (также) специфически связывается с VEGF человека, и (б) Fab-фрагмент антитела настоящего изобретения, который связывается с VEGF человека, (также) специфически связывается с IL-1бета человека. Одновременное связывание можно оценить с помощью способов, известных в данной области, например, с помощью поверхностного плазмонного резонанса, как описано в настоящем документе.
Термин «определяющие комплементарность области» или «CDR» при использовании в настоящем документе относится к каждой из областей вариабельного домена антитела, которые являются гипервариабельными в последовательности и содержат контактирующие с антигеном остатки. В общем случае антитела содержат шесть CDR: три в домене VH (CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3) и три в домене VL (CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3). Если не указано иное, остатки CDR и другие остатки в вариабельном домене (например, FR-остатки) пронумерованы в настоящем документе согласно системе нумерации по Кабату (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991).
«Каркасные области» или «FR» при использовании в настоящем документе относятся к аминокислотным остаткам вариабельного домена, отличным от остатков CDR. Каркасная область вариабельного домена обычно состоит из четырех доменов каркасной области: FR1, FR2, FR3 и FR4. Соответственно, аминокислотные последовательности CDR и FR обычно расположены в следующем порядке в (а) домене VH: FR1-CDR-H1-FR2- CDR-H2-FR3-CDR-H3-FR4; и (б) в домене VL: FR1-CDR-L1-FR2-CDR-L2-FR3-CDR-L3-FR4.
Согласно системе нумерации по Кабату, как используется в настоящем документе, каркасные и CDR области расположены в следующих областях вариабельных доменов:
* в CDR-H1 дополнительные аминокислоты между положением 35b и 36 могут присутствовать, в настоящем документе называемые положениями «35с», «35d» и «35е», как показано на фигуре 2
Положения аминокислот согласно системе нумерации по Кабату, упоминаемые в настоящем документе, показаны на фигуре 2 в соответствии с аминокислотными последовательностями антител настоящего изобретения. Ссылки на аминокислоты в некотором положении в аминокислотной последовательности в настоящем документе сделаны, как хорошо известно в данной области, путем указания соответствующей аминокислоты и положения аминокислоты, например, «Е2» относится к остатку глутаминовой кислоты, расположенному в положении 2 по Кабату аминокислотной последовательности соответствующего домена антитела.
Термин «аффинность» относится к силе суммарных общих нековалентных взаимодействий между одиночным сайтом связывания молекулы (например, антитела) и ее партнера по связыванию (например, антигена). Если не указано иное, в настоящем документе термин «аффинность связывания» относится к присущему молекуле сродству связывания, отражающему взаимодействие между членами пары связывающихся компонентов (например, антителом и антигеном) при их соотношении 1:1. Аффинность молекулы X в отношении ее партнера Y обычно может быть представлена константой диссоциации (KD)- Аффинность можно измерять с помощью общепринятых методов, известных в данной области техники, включая описанные в данном документе. Конкретные иллюстративные и типичные варианты реализации для измерения аффинности связывания описаны в настоящем документе.
Термин «эпитоп» означает сайт на антигене, или белковый, или небелковый, с которым связывается антитело. Эпитопы могут быть образованы как из участков заменимых аминокислот (линейный эпитоп), так и содержать незаменимые аминокислоты (конформационный эпитоп), например, находятся в пространственной близости из-за сворачивания антигена, т.е. за счет третичного сворачивания белкового антигена. Линейные эпитопы обычно все еще связаны антителом после воздействия на белковый антиген денатурирующих средств, тогда как конформационные эпитопы обычно разрушаются при обработке денатурирующими средствами. Эпитоп содержит по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7 или 8-10 аминокислот в уникальной пространственной конформации.
Отбор антител, связывающихся с конкретным эпитопом (т.е. тех, которые связываются с одним и тем же эпитопом), можно проводить с помощью способов, обычных для данной области, таких как, например, помимо прочего, аланиновое сканирование, пептидные блоты (смотрите Meth. Mol. Biol. 248 (2004) 443-463), анализ расщепления пептидов, удаление эпитопа, экстракция эпитопа, химическая модификация антигенов (смотрите Prot. Sci. 9 (2000) 487-496) и перекрестный конкурентный анализ (смотрите «Antibodies», Harlow and Lane (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harb., NY).
Основанное на структуре антигена профилирование антител (ASAP), также известное как профилирование с помощью модификации (MAP), обеспечивает сохранение множества моноклональных антител, специфически связывающихся с VEGF или IL-16eTa, на основе профиля связывания каждого из антител из множества с химически или ферментативно модифицированными поверхностями антигена (см., например, US 2004/0101920). Антитела в каждой группе связываются с одним и тем же эпитопом, который может быть уникальным эпитопом или явно отличающимся, или частично перекрывающимся с эпитопом, представленным другой группой.
Также конкурентное связывание можно использовать для легкого определения того, связывается ли антитело с одним и тем же эпитопом VEGF или IL-16eTa, или конкурирует в отношении связывания с ним, что и эталонное антитело настоящего изобретения. Например, «антитело, которое связывается с теми же эпитопами на VEGF и IL-16eTa», что и эталонное антитело, относится к антителу, которое блокирует связывание эталонного антитела с его антигенами в соответствующем конкурентном анализе на 50% или более, и, наоборот, эталонное антитело блокирует связывание антитела с его антигеном в соответствующем конкурентном анализе на 50% или более. Также в качестве примера, для определения того, связывается ли антитело с тем же эпитопом, что и эталонное антитело, эталонному антителу позволяют связываться с VEGF или IL-1бета при условиях насыщения. После удаления избытка эталонного антитела оценивают способность интересующего антитела связываться с VEGF или IL-1бета. Если интересующее антитело способно связываться с VEGF или IL-1бета после насыщения соединения эталонного антитела, можно сделать вывод, что интересующее антитело связывается с другим эпитопом относительно эталонного антитела. Но если интересующее антитело не способно связываться с VEGF или IL-1бета после насыщения соединения эталонного антитела, тогда интересующее антитело может связываться с тем же эпитопом, что и эпитоп, связываемый эталонным антителом. Для подтверждения того, связывается ли интересующее антитело с тем же эпитопом или только мешает связыванию по стерическим причинам, можно использовать рутинные эксперименты (например, анализы мутаций и связывания пептидов при помощи ИФА, РИА, поверхностного плазмонного резонанса, цитометрии в потоке или любого другого количественного или качественного анализа связывания антител, доступного в данной области). Этот анализ можно проводить в двух установках, т.е. с обоими антителами, являющимися насыщающим антителом. Если в обеих установках только первое (насыщающее) антитело способно связываться с VEGF или IL-1бета, тогда можно сделать вывод, что интересующее антитело и эталонное антитело конкурируют в отношении связывания с VEGF или IL-1бета.
В некоторых вариантах реализации два антитела, как считается, связываются с одним и тем же или перекрывающимися эпитопами, если 1-, 5-, 10-, 20- или 100-кратный избыток одного антитела ингибирует связывание другого по меньшей мере на 50%, меньшей мере на 75%, меньшей мере на 90% или даже 99% или более, что измерено в анализе конкурентного связывания (см., например, Junghans et al., Cancer Res. 50 (1990) 1495-1502).
В некоторых вариантах реализации два антитела, как считается, связываются с одним и тем же эпитопом, если по существу все аминокислотные мутации в антигене, которые снижают или исключают связывание одного антитела, также снижают или исключают связывание с другим. Два антитела, как считается, имеют «перекрывающиеся эпитопы», если только подмножество аминокислотных мутаций, которые снижают или исключают связывание одного антитела, снижают или исключают связывание с другим.
«Процент (%) идентичности аминокислотной последовательности» относительно эталонной полипептидной последовательности определяется как процентная доля аминокислотных остатков в кандидатной последовательности, которые являются идентичными с аминокислотными остатками в эталонной полипептидной последовательности, после выравнивания последовательностей и внесения, в случае необходимости, гэпов для достижения максимального процента идентичности последовательностей, и без учета каких-либо консервативных замен в качестве части идентичности последовательностей с целью выравнивания. Выравнивание в целях определения процента идентичности аминокислотной последовательности можно осуществлять различными способами, которые известны в данной области техники, например, используя общедоступное компьютерное программное обеспечение, такое как программное обеспечение BLAST, BLAST-2, Clustal W, Megalign (DNASTAR) или программный пакет FASTA. Специалисты в данной области техники могут определить подходящие параметры для выравнивания последовательностей, включая любые алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей. Альтернативно, значения процента идентичности можно получить с помощью компьютерной программы для сравнения последовательностей ALIGN-2. Компьютерная программа для сравнения последовательностей ALIGN-2 была разработана Genentech, Inc., а исходный код был подан вместе с пользовательской документацией в Бюро регистрации авторских прав США, Вашингтон, округ Колумбия, 20559, где он зарегистрирован под номером регистрации авторского права США TXU510087 и описан в WO 2000/005319.
Если не указано иное, для целей настоящего документа, однако, значения % идентичности аминокислотных последовательностей получают с помощью программы ggsearch пакета FASTA версии 36.3.8 с или более поздней с матрицей сравнения BLOSUM50. Программный пакет FASTA был создан W. R. Pearson and D. J. Lipman (1988), «Improved Tools for Biological Sequence Analysis», PNAS 85:2444-2448; W. R. Pearson (1996) «Effective protein sequence comparison)) Meth. Enzymol. 266:227- 258; и Pearson et. al. (1997) Genomics 46:24-36, и является общедоступным на www.fasta.bioch.virginia.edu/fasta www2/fasta down.shtml или www.ebi.ac.uk/Tools/sss/fasta. Альтернативно, публичный сервер, доступный на fasta.bioch.virginia.edu/fasta_www2/index.cgi, можно использовать для сравнения последовательностей, используя программу ggsearch (global protein:protein) и параметры по умолчанию (BLOSUM50; open: -10; ext: -2; Ktup=2) для обеспечения выполнения общего, а не местного, выравнивания. Процент идентичности аминокислот дан в заголовке выходных данных выравнивания.
Термин «молекула нуклеиновой кислоты» или «полинуклеотид» включает любое соединение и/или вещество, которое содержит полимер из нуклеотидов. Каждый нуклеотид состоит из основания, в частности, пуринового или пиримидинового основания (т.е. цитозина (С), гуанина (G), аденина (А), тимина (Т) или урацила (U)), сахара (т.е. дезоксирибозы или рибозы) и фосфатной группы. Часто молекула нуклеиновой кислоты описана по последовательности оснований, при этом указанные основания представляют первичную структуру (линейную структуру) молекулы нуклеиновой кислоты. Последовательность оснований, как правило, представлена от 5' к 3'. В данном документе термин молекула нуклеиновой кислоты охватывает дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК), включая, например, комплементарную ДНК (кДНК) и геномную ДНК, рибонуклеиновую кислоту (РНК), в частности, матричную РНК (мРНК), синтетические формы ДНК и РНК и смешанные полимеры, содержащие две или более из этих молекул. Молекула нуклеиновой кислоты может быть линейной или кольцевой. Кроме того, термин молекула нуклеиновой кислоты включает как смысловые, так и антисмысловые цепи, а также одноцепочечные и двухцепочечные формы. Помимо этого, описанная в данном документе молекула нуклеиновой кислоты может содержать нуклеотиды природного и неприродного происхождения. Примеры нуклеотидов неприродного происхождения включают модифицированные нуклеотидные основания с дериватизированными сахарами, или фосфатными остовными связями, или химически модифицированными остатками. Молекулы нуклеиновых кислот также включают молекулы ДНК и РНК, подходящие в качестве вектора для управления экспрессией антитела по изобретению in vitro и/или in vivo, например, в организме хозяина или пациента. Такие ДНК (например, кДНК) или РНК (например, мРНК) векторы могут быть немодифицированными или модифицированными. Например, мРНК может быть химически модифицирована для повышения стабильности РНК-вектора и/или экспрессии кодируемой молекулы так, чтобы мРНК можно было вводить субъекту для генерации антител in vivo (смотрите, например, Stadler ert al, Nature Medicine 2017, опубликованную онлайн 12 июня 2017 г., doi:10.1038/nm.4356 или ЕР 2101823 В1).
«Выделенная» нуклеиновая кислота относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая была отделена от компонента ее естественного окружения. Выделенная нуклеиновая кислота включает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащуюся в клетках, которые обычно содержат эту молекулу нуклеиновой кислоты, но при этом молекула нуклеиновой кислоты присутствует внехромосомно или в хромосомном положении, которое отличается от ее природного хромосомного положения.
«Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело» относится к одной или более молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим тяжелые и легкие цепи антитела (или их фрагменты), включая молекулы нуклеиновых кислот в одном векторе или отдельных векторах и молекулы нуклеиновых кислот, присутствующие в одной или более локациях в клетке-хозяине.
В контексте данного документа термин «вектор» относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной увеличивать число копий другой нуклеиновой кислоты, с которой она связана. Этот термин включает вектор в виде самореплицирующейся структуры нуклеиновой кислоты, а также вектор, включенный в геном клетки-хозяина, в которую его внесли. Некоторые векторы способны управлять экспрессией нуклеиновых кислот, с которыми они функционально связаны. Такие векторы называются в данном документе «экспрессионными векторами».
Термины «клетка-хозяин», «линия клеток-хозяев» и «культура клеток-хозяев» используются взаимозаменяемо и относятся к клеткам, в которые была внесена экзогенная нуклеиновая кислота, включая потомство таких клеток. Клетки-хозяева включают «трансформантов» и «трансформированные клетки», которые включают первично трансформированные клетки и полученное от них потомство вне зависимости от числа пассажей. Потомство может не быть полностью идентичным родительской клетке по содержанию нуклеиновой кислоты и может содержать мутации. Сюда включено мутантное потомство, которое имеет такую же функцию или биологическую активность, в отношении которых проводится скрининг или отбор изначально трансформированных клеток.
Термин «фармацевтическая композиция» или «фармацевтический состав» относится к препарату, который находится в форме, обеспечивающей эффективность биологической активности содержащегося в нем активного ингредиента, и который не содержит дополнительные компоненты, которые являются неприемлемо токсичными для субъекта, которому предполагается вводить фармацевтическую композицию.
«Фармацевтически приемлемый носитель» относится к ингредиенту в фармацевтической композиции или фармацевтическом составе, отличному от активного ингредиента, который нетоксичен для субъекта. Фармацевтически приемлемый носитель включает, но не ограничивается этим, буфер, вспомогательное вещество, стабилизатор или консервант.
«Эффективное количество» средства, например, фармацевтической композиции, относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения желательного терапевтического или профилактического результата.
«Индивидуум» или «субъект» представляет собой млекопитающее. Млекопитающие включают, но не ограничиваются этими, одомашненных животных (например, коров, овец, кошек, собак, лошадей), приматов (например, людей и приматов, не являющихся человеком, таких, как обезьяны), кроликов и грызунов (например, мышей и крыс). Согласно определенным вариантам реализации индивидуум или субъект представляет собой человека.
В настоящем документе термин «лечение» (и его грамматические варианты, такие как «лечить» или «лечащий») относится к клиническому вмешательству с целью изменения естественного течения заболевания у индивидуума, которого лечат, и может проводиться как для профилактики, так и при течении клинической патологии. Необходимые эффекты лечения включают, но не ограничиваются этим, предотвращение появления или повторного появления заболевания, смягчение симптомов, уменьшение каких-либо прямых или косвенных патологических последствий заболевания, предотвращение метастазирования, снижение скорости прогрессирования заболевания, уменьшение интенсивности или временное облегчение болезненного состояния и ремиссию или улучшение прогноза. В некоторых вариантах реализации антитела согласно настоящему изобретению используют для задержки развития заболевания или замедления прогрессирования заболевания.
Термин «заболевание глаз» при использовании в настоящем документе включает любое заболевание глаз, связанное с патологическим ангиогенезом и/или атрофией. Заболевание глаз может характеризоваться измененной или нерегулируемой пролиферацией и/или инвазией новых кровеносных сосудов в структуры ткани глаза, такой как сетчатка или роговица. Заболевание глаз может характеризоваться атрофией ткани сетчатки (фоторецепторов и лежащего в основе пигментного эпителия сетчатки (ПЭС) и хориокапилляров). Неограничивающие заболевания глаз включают, например, ВМД (например, влажную ВМД, сухую ВМД, промежуточную ВМД, запущенную ВМД и географическую атрофию (ГА)), макулярную дегенерацию, макулярный отек, ДМО (например, фокальный, нецентральный ДМО и диффузный, с вовлечением центрального отдела сетчатки ДМО), ретинопатию, диабетическую ретинопатию (ДР) (например, пролиферативную ДР (ПДР), непролиферативную ДР (НПДР) и высотную ДР), другие связанные с ишемией ретинопатии, РН, окклюзию вены сетчатки (ОВС) (например, формы, связанные с центральной веной (ОЦВС) и ветвями вены (ОВВС)), ХНВ (например, миопическую ХНВ), неоваскуляризацию роговицы, заболевания, связанные с неоваскуляризацией роговицы, неоваскуляризацию сетчатки, заболевания, связанные с неоваскуляризацией сетчатки/хориоидальной неоваскуляризацией, центральную серозную ретинопатию (ЦСР), патологическую миопию, болезнь Гиппеля-Линдау, гистоплазмоз глаза, СЭВРП, болезнь Коутса, болезнь Норри, нарушения сетчатки, связанные с синдромом остеопороза-псевдоглиомы (ОППГ), субконъюнктивальное кровоизлияние, покраснение радужки, неоваскулярное заболевание глаз, неоваскулярную глаукому, пигментный ретинит (ПР), гипертоническую ретинопатию, ангиоматозную пролиферацию сетчатки, макулярную телеангиэктазию, неоваскуляризацию радужной оболочки, внутриглазную неоваскуляризацию, дегенерацию сетчатки, кистозный макулярный отек (КМО), васкулит, отек диска зрительного нерва, ретинит, включая, помимо прочего, ЦМВ-ретинит, меланому глаз, бластому сетчатки, конъюнктивит (например, инфекционный конъюнктивит и неинфекционный (например, аллергический) конъюнктивит), наследственный амавроз Лебера (также известный как наследственный амавроз Лебера или НАЛ), увеит (включая инфекционный и неинфекционный увеит), хориоидит (например, мультифокальный хориоидит), гистоплазмоз глаз, блефарит, синдром сухого глаза, травматическое повреждение глаз, болезнь Шегрена и другие офтальмологические заболевания, причем заболевание или болезнь связана с неоваскуляризацией глаз, транссудацией и/или отеком сетчатки или атрофией сетчатки. Дополнительные типичные заболевания глаз включают ретиношизис (аномальное расщепление нейросенсорных слоев сетчатки), заболевания, связанные с покраснением радужки (неоваскуляризация угла передней камеры), и заболевания, вызванные атипичной пролиферацией сосудисто-волокнистой или волокнистой ткани, включая все формы пролиферативной витреоретинопатии. Типичные заболевания, связанные с неоваскуляризацией роговицы, включают, помимо прочего, эпидемический кератоконъюнктивит, дефицит витамина А, чрезмерное ношение контактных линз, атопический кератит, верхний лимбальный кератит, сухой кератит крыловидной плевы, синдром Шегрена, розацею, фликтенулезный конъюнктивит, сифилис, микобактериальные инфекции, липидную дегенерацию, химические ожоги, бактериальные язвы, грибковые язвы, инфекции простого герпеса, инфекции опоясывающего герпеса, инфекции простейшими, саркому Капоши, язву Мурена, маргинальную дегенерацию Терриена, краевую дистрофию роговицы, ревматоидный артрит, системную волчанку, полиартериит, травму, саркоидоз Вегенера, склерит, синдром Стивенса-Джонсона, перифигоидную радиальную кератотомию и отторжение роговичного трансплантата. Типичные заболевания, связанные с хориоидальной неоваскуляризацией и дефектами в сосудистой системе сетчатки, включая повышенную транссудацию, аневризмы и капиллярную закупорку, включают, помимо прочего, диабетическую ретинопатию, макулярную дегенерацию, серповидноклеточную анемию, саркоид, сифилис, эластическую псевдоксантому, болезнь Педжета, окклюзию вены, окклюзию артерии, обструктивную болезнь сонной артерии, хронический увеит/витрит, микобактериальные инфекции, болезнь Лайма, системную красную волчанку, ретинопатию недоношенных, отек сетчатки (включая макулярный отек), болезнь Илза, болезнь Бехчета, инфекции, вызывающие ретинит или хориоидит (например, мультифокальный хориоидит), предполагаемый гистоплазмоз глаз, болезнь Беста (врожденную макулярную дегенерацию), миопию, ямки диска зрительного нерва, pars planitis, отслоение сетчатки (например, хроническое отслоение сетчатки), синдром повышенной вязкости крови, токсоплазмоз, травму и осложнения после лазерной коррекции.
Типичные заболевания, связанные с атрофией тканей сетчатки (фоторецепторов и лежащего в основе ПЭС), включают, помимо прочего, атрофическую или неэкссудативную ВМД (например, географическую атрофию или запущенную сухую ВМД), атрофию желтого пятна (например, атрофию, связанную с неоваскуляризацией и/или географической атрофией), диабетическую ретинопатию, болезнь Штаргардта, дистрофию глазного дна Сорсби, ретиношизис и пигментный ретинит.
Термин «вкладыш в упаковку» используется для обозначения инструкций, обычно включаемых в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, применении, дозировке, введении, комбинированной терапии, противопоказаниях и/или предупреждениях относительно использования таких терапевтических продуктов.
2. Подробное описание вариантов реализации настоящего изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение основано, отчасти, на обеспечении биспецифических антител для терапевтического применения. В некоторых аспектах обеспечиваются антитела, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека. Антитела настоящего изобретения пригодны, например, для диагностики или лечения сосудистых заболеваний, например, сосудистых заболеваний глаз.
А. Типичные антитела, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитела, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека. В одном аспекте обеспечиваются выделенные антитела, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека. В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитела, которые специфически связываются с VEGF человека и IL-гбета человека.
В некоторых аспектах обеспечивается антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит паратоп VEGF (т.е. антигенсвязывающий сайт, который связывается с VEGF) и паратоп IL-1бета (т.е. антигенсвязывающий сайт, который связывается с IL-1бета) в одной родственной паре домена VL и домена VH, причем
• паратоп VEGF содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела, причем паратоп IL-1бета содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела; и/или
• пара вариабельного домена легкой цепи и вариабельного домена тяжелой цепи одновременно связывается с VEGF человека и IL-1бета человека; и/или
• ни одна из аминокислот, которые содержатся в паратопе VEGF, не содержится в паратопе IL-1бета; и/или
• ни одна из аминокислот, которые содержатся в паратопе IL-1бета, не содержится в паратопе VEGF; и/или
• антитело связывается с тем же эпитопом на VEGF человека и с тем же эпитопом на IL-1бета человека, что и антитело с вариабельным доменом тяжелой цепи с SEQ ID NO: 11 и вариабельным доменом легкой цепи с SEQ ID NO: 12; и/или
• Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и/или
• Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С; и/или
• Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света; и/или
• связывание Fab-фрагмента антитела с VEGF человека ингибирует связывание VEGF с VEGFR2 с IC50 менее 50 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату. В одном варианте реализации антитело содержит паратоп VEGF, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66 и R83, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: 12, Y27, W27a, S27c, S27d, Е67, D68, Q69, R92, Y93, Н94 и Y96; и паратоп IL-1бета, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, К94, D95, V96, F98 и D101, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Y91.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11, причем домен VH содержит аминокислотные остатки Е2, G26, V28, К30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12, причем домен VL содержит аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11, причем домен VH содержит аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, R66, R83 и K94; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12, причем домен VL содержит аминокислотные остатки 12, Y49, G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:12.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами, причем аминокислотные замены расположены в положениях 3-25, 36-49, 97-82 с, 84-93 или 103-113 SEQ ID NO:11; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами, причем аминокислотные замены расположены в положениях 1, 4, 6, 8-23, 35-48, 58-66, 70-88 или 98-107 SEQ ID NO:12, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, и содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12 с 1-15, 1-10 или 1-5 аминокислотными заменами.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VH, имеющий по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:11. В некоторых аспектах последовательность VH, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции в сравнении с эталонной последовательностью, но антитело, которое связывается с VEGF человека и II-1бета человека, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с VEGF человека и IL-1бета человека. В некоторых аспектах была проведена замена, вставка и/или делеция в общей сложности 1-10 аминокислот в SEQ ID NO:11. В некоторых аспектах замены, вставки или делеции находятся в областях за пределами CDR (т.е. в FR). В конкретном аспекте VH содержит (а) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13; (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14; и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:15.
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает антитело, содержащее домен VL, имеющий по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12. В некоторых аспектах последовательность VL, имеющая по меньшей мере 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности, содержит замены (например, консервативные замены), вставки или делеции в сравнении с эталонной последовательностью, но антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, содержащее эту последовательность, сохраняет способность связываться с VEGF человека и IL-1бета человека. В некоторых аспектах была проведена замена, вставка и/или делеция в общей сложности 1-10 аминокислот в SEQ ID NO:12. В некоторых аспектах замены, вставки или делеции находятся в областях за пределами CDR (т.е. в FR). В конкретном аспекте VL содержит (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8.
В другом аспекте обеспечивается антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, причем антитело содержит последовательность VH, как в любом из аспектов, представленных выше, и последовательность VL, как в любом из аспектов, представленных выше. В одном аспекте антитело содержит последовательности VH и VL в SEQ ID NO:11 и SEQ ID NO:12, соответственно, включая посттрансляционные модификации этих последовательностей.
В другом аспекте обеспечивается антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, причем антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепь SEQ ID NO:20 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:19.
В другом аспекте обеспечивается антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, причем антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепь SEQ ID NO:18 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:19.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, согласно любому из вышеуказанных аспектов, является моноклональным антителом. В одном аспекте антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, является фрагментом антитела, например, фрагментом Fv, Fab, Fab', scFv, диателом или F(ab')2. В другом аспекте антитело представляет собой полноразмерное антитело.
В дополнительном аспекте антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-гбета человека, согласно любому из вышеуказанных аспектов может включать любой из признаков, по отдельности или в комбинации, как описано в разделах 1-7 ниже.
1. Аффинность антител
В некоторых вариантах реализации антитело, представленное в настоящем документе, связывается с VEGF с константой диссоциации (KD) ≤ 1 нМ, ≤ 0,1 нМ или ≤ 0,01 нМ. В некоторых вариантах реализации антитело, которое связывается с IL-1бета, имеет константу диссоциации (KD) ≤ 1 нМ, ≤ 0,1 нМ или ≤ 0,03 нМ.
В одном аспекте KD определяют, используя анализ методом поверхностного плазмонного резонанса BIACORE®.
Например, KD антитела, связывающегося с VEGF, измеряют в анализе с применением BIACORE®-2000 или BIACORE ®-3000 (BIAcore, Inc., Пискатауэй, Нью-Джерси), выполняемом при 25°С с иммобилизованным VEGF121 с чипами С1 при ~10 единицах ответа (ЕО). Для измерений кинетики двукратные серийные разведения Fab (от 1,2 нМ до 100 нМ) вводят в HBS-P+(10 мМ HEPES, 150 мМ NaCl рН 7,4, 0,05% поверхностно-активного вещества Р20) при 25°С при скорости потока приблизительно 30 мкл/мин. Скорости ассоциации (kacc.) и скорости диссоциации (kдисс.) рассчитывают, используя простую один-к-одному модель связывания Лэнгмюра (оценочное программное обеспечение BIACORE®, версия 3.2), путем одновременной аппроксимации сенсограмм ассоциации и диссоциации. Равновесную константу диссоциации (Ко) рассчитывали как соотношение kдисс./kacc.Смотрите, например, Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999).
Например, KD антитела, связывающегося с IL-1бета, измеряют в анализе с применением BIACORE®-2000 или BIACORE ®-3000 (BIAcore, Inc., Пискатауэй, Нью-Джерси), выполняемом при 25°С с иммобилизованным биспецифическим антителом с чипами С1 при -20 единицах ответа (ЕО). Для измерений кинетики двукратные серийные разведения IL-1бета человека (от 0,74 нМ до 60 нМ) вводят в HBS-P+(10 мМ HEPES, 150 мМ NaCl рН 7,4, 0,05% поверхностно-активного вещества Р20) при 25°С при скорости потока приблизительно 30 мкл/мин. Скорости ассоциации (касс.) и скорости диссоциации (кдисс.) рассчитывают, используя простую один-к-одному модель связывания Лэнгмюра (оценочное программное обеспечение BIACORE, версия 3.2), путем одновременной аппроксимации сенсограмм ассоциации и диссоциации. Равновесную константу диссоциации (KD) рассчитывали как соотношение кдиссАасс. Смотрите, например, Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999).
2. Фрагменты антител
В некоторых аспектах антитело, обеспеченное в настоящем документе, представляет собой фрагмент антитела.
В одном аспекте фрагмент антитела представляет собой фрагмент Fab, Fab', Fab'-SH или F(ab')2, в частности Fab-фрагмент. Расщепление интактных антител папаином позволяет получить два идентичных антигенсвязывающих фрагмента, называемых «Fab»-фрагментами, каждый из которых содержит вариабельные домены тяжелой и легкой цепи (VH и VL, соответственно) и также константный домен легкой цепи (CL) и первый константный домен тяжелой цепи (СН1). Таким образом, термин «Fab-фрагмент» относится к фрагменту антитела, содержащему легкую цепь, содержащую домен VL и домен CL, и фрагмент тяжелой цепи, содержащий домен VH и домен СН1. «Fab'-фрагменты» отличаются от Fab-фрагментов добавлением остатков на карбоксильном конце домена СН1, содержащих один или более остатков цистеина из шарнирной области антитела. Fab'-SH представляют собой Fab'-фрагменты, в которых остаток(ки) цистеина константных доменов несет(ут) свободную тиольную группу. Обработка пепсином приводит к получению Е(ab’)2-фрагмента, который имеет два антигенсвязывающих сайта (два Fab-фрагмента) и часть Fc-области. Обсуждение фрагментов Fab и F(ab')2, содержащих остатки эпитопа связывания рецептора реутилизации и имеющих увеличенное время полужизни in vivo, смотрите в патенте США №5869046.
Фрагменты антител можно получать различными способами, включая, но не ограничиваясь этим, протеолитическое расщепление интактного антитела, а также рекомбинантную выработку рекомбинантными клетками-хозяевами (например, Е. coli, СНО), как описано в настоящем документе.
3. Термическая стабильность
Антитела, представленные в настоящем документе, характеризуются превосходной термической стабильностью. В некоторых вариантах реализации Fab-фрагмент антитела, представленный в настоящем документе, характеризуется температурой начала агрегации более 70°С. В некоторых вариантах реализации Fab-фрагмент антитела, представленный в настоящем документе, характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
4. Антитела, полученные из библиотек
В некоторых аспектах антитело, представленное в настоящем документе, получено из библиотеки. Антитела согласно настоящему изобретению могут быть выделены путем скрининга комбинаторных библиотек антител с необходимой активностью или свойствами. Методы скрининга комбинаторных библиотек рассмотрены, например, в Lerner et al. в Nature Reviews 16:498-508 (2016). Например, в данной области техники известны различные способы получения библиотек фагового дисплея и скрининг таких библиотек в отношении антител, обладающих необходимыми характеристиками связывания. Такие методы рассмотрены, например, в Frenzel et al. в mAbs 8:1177-1194 (2016); Bazan et al. в Human Vaccines and Immunotherapeutics 8:1817-1828 (2012) и Zhao et al. в Critical Reviews in Biotechnology 36:276-289 (2016), а также в Hoogenboom et al. в Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001) и в Marks and Bradbury в Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003).
В некоторых способах на основе фагового дисплея репертуары генов VH и VL по отдельности клонируют с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и случайным образом рекомбинируют в фаговых библиотеках, которые затем можно подвергать скринингу в отношении антигенсвязывающего фага, как описано в Winter et al. в Annual Review of Immunology 12: 433-455 (1994). Как правило, фаг представляет фрагменты антител в виде одноцепочечных Fv-фрагментов (scFv) или Fab-фрагментов. Библиотеки из иммунизированных источников позволяют получать антитела с высокой аффинностью к иммуногену без необходимости конструирования гибридом. В альтернативном варианте можно клонировать наивный репертуар (например, от человека) для получения единого источника антител к широкому спектру не собственных, а также собственных антигенов без какой-либо иммунизации, как описано в Griffiths et al. в EMBO Journal, 12: 725-734 (1993). Кроме того, наивные библиотеки также можно получать синтетически, клонируя неперестроенные V-генные сегменты из стволовых клеток и используя ПЦР-праймеры, содержащие случайную последовательность, для кодирования высоковариабельных областей CDR3 и осуществления перестройки in vitro, как описано в Hoogenboom and Winter в Journal of Molecular Biology 227: 381-388 (1992). Патентные публикации, в которых описаны фаговые библиотеки человеческих антител, включают, например: патенты США №№5750373; 7985840; 7785903 и 8679490, а также публикации патентов США №№2005/0079574, 2007/0117126, 2007/0237764 и 2007/0292936.
Дополнительные примеры методов, известных в данной области для скрининга комбинаторных библиотек для антител с необходимой активностью или активностями, включают рибосомный и мРНК дисплей, а также методы для дисплея и выбора антител на бактериях, клетках млекопитающих, клетках насекомых или клетках дрожжей. Методы для дисплея поверхности дрожжей рассмотрены, например, в Scholler et al. в Methods in Molecular Biology 503:135-56 (2012) и в Cherf et al. в Methods in Molecular biology 1319:155-175 (2015), a также в Zhao et al. в Methods in Molecular Biology 889:73-84 (2012). Методы рибосомного дисплея описаны, например, в Не et al. в Nucleic Acids Research 25:5132-5134 (1997) и в Hanes et al. в PNAS 94:4937-4942 (1997).
Антитела или фрагменты антител, выделенные из библиотек человеческих антител, считаются в данном документе человеческими антителами или фрагментами человеческих антител.
5. Мультиспецифические антитела
В некоторых аспектах предложенное в данном документе антитело представляет собой мультиспецифическое антитело. «Мультиспецифические антитела» представляют собой моноклональные антитела, которые имеют специфичности связывания для по меньшей мере двух различных сайтов, т.е. различных эпитопов на различных антигенах или различных эпитопов на одном и том же антигене. В некоторых аспектах мультиспецифическое антитело имеет три или более специфичности связывания.
Мультиспецифические антитела с тремя или более специфичностями связывания, содержащие антитела, обеспеченные в настоящем документе, могут быть представлены в асимметричной форме с кроссовером доменов в одном или более связывающих плечах одной и той же специфичности к антигену, т.е. путем замены доменов VH/VL (см., например, WO 2009/080252 и WO 2015/150447), доменов CH1/CL (см., например, WO 2009/080253) или полных Fab-фрагментов (см., например, WO 2009/080251, WO 2016/016299, также см. Schaefer et al, PNAS, 108 (2011) 1187-1191, и Klein at al., MAbs 8 (2016) 1010-20). Различные дополнительные молекулярные форматы для мультиспецифических антител известны в данной области и включены в настоящий документ (см., например, Spiess et al., Mol Immunol 67 (2015) 95-106).
6. Варианты антител
В некоторых аспектах предусмотрены варианты аминокислотной последовательности антител, представленных в настоящем документе. Например, может существовать потребность в изменении аффинности связывания и/или других биологических свойств антитела. Варианты аминокислотной последовательности антитела можно получать путем внесения соответствующих модификаций в нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело, или с помощью пептидного синтеза. Такие модификации включают, например, делеции, и/или вставки, и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях антитела. Для получения конечной конструкции можно осуществлять любую комбинацию делеций, вставок и замен при условии, что конечная конструкция обладает необходимыми характеристиками, например, связывания антигена.
В некоторых аспектах предложены варианты антитела, содержащие одну или более аминокислотных замен. Сайты, представляющие интерес для заместительного мутагенеза, включают CDR и FR. Консервативные замены показаны в таблице ниже под заголовком «предпочтительные замены». Более существенные изменения представлены в таблице 1 под заголовком «типовые замены», и как дополнительно описано ниже со ссылкой на классы аминокислотных боковых цепей. Аминокислотные замены можно вносить в представляющее интерес антитело и проводить скрининг полученных продуктов в отношении необходимой активности, например, сохранения/улучшения связывания антигена, снижения иммуногенности или улучшения АЗКЦ или КЗЦ.
Аминокислоты можно разделить на группы в соответствии с общими свойствами боковых цепей:
(1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) кислые: Asp, Glu;
(4) основные: His, Lys, Arg;
(5) остатки, влияющие на ориентацию цепи: Gly, Pro;
(6) ароматические: Trp, Tyr, Phe.
Неконсервативные замены подразумевают замену представителя одного из этих классов представителем другого класса.
Один тип варианта замены включает замену одного или более остатков гипервариабельной области родительского антитела (например, гуманизированного или человеческого антитела). Как правило, полученный вариант(ы), выбранный для дальнейшего изучения, будет иметь модификации (например, улучшения) определенных биологических свойств (например, повышенную аффинность, пониженную иммуногенность) по сравнению с родительским антителом и/или будет иметь по существу сохраненные некоторые биологические свойства исходного антитела. Типовой заместительный вариант представляет собой антитело с созревшей аффинностью, которое удобно получать, например, используя методики созревания аффинности на основе фагового дисплея, такие как описанные в данном документе. Вкратце, один или более, остатков CDR подвергают мутации и вариантные антитела представляют на поверхности фага и проводят скрининг в отношении конкретного вида биологической активности (например, аффинности связывания).
Модификации (например, замены) в CDR можно осуществить, например, с целью улучшения аффинности антитела. Такие изменения могут быть сделаны в «горячих точках» CDR, т.е. в остатках, кодируемых кодонами, которые с высокой частотой подвергаются мутации во время процесса соматического созревания (см., например, Chowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)), и/или в остатках, которые контактируют с антигеном, при этом испытывают аффинность связывания полученного варианта VH или VL. Созревание аффинности путем конструирования и повторного отбора из вторичных библиотек было описано, например, в Hoogenboom et al. в Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001). В некоторых аспектах созревания аффинности в вариабельные гены, выбранные для созревания, вносят разнообразие любым из ряда способов (например, ПЦР с внесением ошибок, перетасовки цепей или олигонуклеотид-направленного мутагенеза). Затем создают вторичную библиотеку. После этого библиотеку подвергают скринингу для идентификации любых вариантов антител с необходимой аффинностью. Другой способ для внесения разнообразия включает подходы, направленные на CDR, в которых несколько остатков CDR (например, 4-6 остатков подряд) являются рандомизированными. Остатки CDR, вовлеченные в связывание антигена, могут быть конкретно идентифицированы, например, с использованием сканирующего аланином мутагенеза или моделирования. В частности, мишенями часто являются CDR-H3 и CDR-L3.
В некоторых аспектах замены, вставки или делеции могут находиться в одной или более CDR при условии, что такие изменения по существу не снижают способность антитела связывать антиген. Например, в CDR можно проводить консервативные изменения (например, консервативные замены, предложенные в данном документе), которые существенно не снижают аффинность связывания. Такие изменения могут, например, находиться за пределами контактирующих с антигеном остатков в CDR. В некоторых вариантных последовательностях VH и VL, представленных выше, каждая CDR остается неизменной или содержит не более одной, двух или трех аминокислотных замен.
Удобный способ выявления остатков или областей антитела, которые могут быть мишенями для мутагенеза, называется «аланин-сканирующим мутагенезом», описанным Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085. В этом способе остаток или группу целевых остатков (например, заряженные остатки, такие как Arg, Asp, His, Lys и Glu) идентифицируют и заменяют нейтральной или отрицательно заряженной аминокислотой (например, аланином или полиаланином) для определения влияния на взаимодействие антитела с антигеном. Дополнительные замены можно вносить в аминокислотные положения, демонстрирующие функциональную чувствительность к исходным заменам. В альтернативном или дополнительном варианте для выявления точек контакта между антителом и антигеном можно использовать кристаллическую структуру комплекса антиген-антитело. Такие контактные остатки и соседние остатки можно использовать для нацеливания или удалять из кандидатов для замены. Можно проводить скрининг вариантов, чтобы определить, имеют ли они необходимые свойства.
Вставки аминокислотных последовательностей включают амино- и/или карбокси-концевые слияния с диапазоном длины от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки внутри последовательности одного или некоторого количества аминокислотных остатков. Примеры концевых вставок включают антитело с N-концевым остатком метионила. Другие инсерционные варианты молекулы антитела включают слияние с N- или С-концом антитела с ферментом (например, для терапии ADEPT (антитело-направленной ферментной пролекарственной терапии)) или полипептидом, который увеличивает период полувыведения антитела из сыворотки.
а. Варианты по гликозилированию
В некоторых аспектах антитело, предложенное в данном документе, изменяют с целью увеличения или уменьшения степени гликозилирования антитела. Добавление или удаление сайтов гликозилирования к антителу удобно осуществлять путем изменения аминокислотной последовательности так, чтобы создать или удалить один или более сайтов гликозилирования.
Если антитело содержит Fc-область, можно изменять присоединенный к ней олигосахарид. Нативные антитела, вырабатываемые клетками млекопитающих, обычно содержат разветвленный биантеннарный олигосахарид, который обычно присоединен посредством N-связи к Asn297 СН2-домена Fc-области. Смотрите, например, Wright et al. TIBTECH 15:26-32 (1997). Олигосахарид может содержать различные углеводы, например, маннозу, N-ацетилглюкозамин (GlcNAc), галактозу и сиаловую кислоту, а также фукозу, присоединенную к GlcNAc в «стебле» биантеннарной олигосахаридной структуры. В некоторых аспектах модификации олигосахарида в антителе по данному изобретению можно осуществлять с целью создания вариантов антитела с определенными улучшенными свойствами.
В одном аспекте предлагаются варианты антител, содержащие нефукозилированный олигосахарид, т.е. олигосахаридную структуру с недостаточным количеством фукозы, присоединенной (непосредственно или косвенно) к Fc-области. Такой нефукозилированный олигосахарид (также называемый «афукозилированный» олигосахарид), в частности, представляет N-связанный олигосахарид с недостаточным количеством фукозного остатка, присоединенного к первой GlcNAc в основе биантенарной олигосахаридной структуры. В одном аспекте предлагаются варианты антитела, содержащие увеличенную долю нефукозилированных олигосахаридов в Fc-области по сравнению с нативным или родительским антителом. Например, доля нефукозилированных олигосахаридов может составлять по меньшей мере приблизительно 20%, по меньшей мере приблизительно 40%, по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 80% или даже приблизительно 100% (т.е. нет фукозилированных олигосахаридов). Процент нефукозилированных олигосахаридов представляет (среднее) количество олигосахаридов без фукозных остатков относительно суммы всех олигосахаридов, присоединенных к Asn 297 (например, сложных, гибридных структур и структур с высоким содержанием маннозы), согласно результатам измерения методом масс-спектрометрии ВП-МАЛДИ, например, как описано в WO 2006/082515. Asn297 относится к остатку аспарагина, расположенному в позиции 297 в области Fc (согласно нумерации ЕС остатков области Fc); при этом Asn297 также может быть расположен на около ±3 аминокислот выше или ниже позиции 297, т.е. между позициями 294 и 300, вследствие незначительных вариаций последовательностей в антителах. Такие антитела, содержащие увеличенную долю нефукозилированных олигосахаридов в Fc-области, могут иметь улучшенное связывание с рецептором FcγRIIIa и/или улучшенную эффекторную функцию, в частности, улучшенную функцию АЗКЦ. См., например, US 2003/0157108; US 2004/0093621.
Примеры клеточных линий, способных производить антитела с уменьшенным дефукозилированием, включают клетки СНО Lec13 с недостаточностью в отношении фукозилирования белка (Ripka et al. Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986); US 2003/0157108 и WO 2004/056312, особенно в Примере 11), а также нокаутированные клеточные линии, таких как нокаутированные по гену альфа-1,6-фукозилтрансферазы, FUT8, клетки СНО (см., например, Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614-622 (2004); Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006); и WO 2003/085107), или клетки со сниженной или аннулированной активностью синтеза GDP-фукозы или транспортного белка (см., например, US 2004259150, US 2005031613, US 2004132140, US 2004110282).
В дополнительном аспекте предложены варианты антител с раздвоенными олигосахаридами, например, в которых биантеннарный олигосахарид, присоединенный к Fc-области антитела, разделен пополам GlcNAc. Такие варианты антител могут иметь сниженный уровень фукозилирования и/или улучшенную функцию АЗКЦ, как описано выше. Примеры таких вариантов антител описаны, например, в Umana et al., Nat Biotechnol 17, 176-180 (1999); Ferrara et al., Biotechn Bioeng 93, 851-861 (2006); WO 99/54342; WO 2004/065540, WO 2003/011878.
Согласно данному изобретению также предложены варианты антител с по меньшей мере одним остатком галактозы в олигосахариде, прикрепленном к Fc-области. Такие варианты антител могут иметь улучшенную функцию КЗЦ. Такие варианты антител описаны, например, в WO 1997/30087; WO 1998/58964 и WO 1999/22764.
б. Варианты по Fc-области
В определенных аспектах одну или более аминокислотных модификаций можно вносить в Fc-область антитела, предложенного в данном документе, с получением, таким образом, варианта по Fc-области. Вариант по Fc-области может содержать последовательность человеческой Fc-области (например, Fc-области человеческого IgG1 IgG2, IgG3 или IgG4), содержащую аминокислотную модификацию (например, замену) в одной или более аминокислотных положениях.
Согласно некоторым аспектам настоящее изобретение предусматривает вариант антитела, который обладает некоторыми, но не всеми эффекторными функциями, что делает его желательным кандидатом для вариантов применения, в которых важен период полужизни антитела в условиях in vivo, но при этом определенные эффекторные функции (такие как комплементзависимая цитотоксичность (КЗЦ) и антителозависимая клеточноопосредованная цитотоксичность (АЗКЦ)) не нужны или вредны. Цитотоксические анализы могут быть проведены in vitro и/или in vivo для подтверждения восстановления/ослабления активности CDC и/или АЗКЦ. Например, исследования связывания рецептора Fc (FcR) могут быть проведены, чтобы убедиться в том, что антитело не способно к связыванию FcγR (следовательно, вероятно, не обладает АЗКЦ-активностью), но сохраняет способность связывать FcRn. Первичные клетки для опосредования АЗКЦ, NK-клетки, экспрессируют только FcγRIII, тогда как моноциты экспрессируют FcγRI, FcγRII и FcγRIII. Экспрессия FcR на гемопоэтических клетках обобщенно описана в Таблице 3 на странице 464 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991). Неограничивающие примеры методов in vitro анализа для оценки АЗКЦ-активности представляющей интерес молекулы, описаны в патенте США №5500362 (смотрите, например, Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)) и Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985); 5821337 (смотрите Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)). В альтернативном варианте можно использовать нерадиоактивные методы анализа (смотрите, например, нерадиоактивный анализ цитотоксичности для проточной цитометрии ACTI™ (CellTechnology, Inc., Маунтин-Вью, Калифорния); и нерадиоактивный анализ цитотоксичности CytoTox 96® (Promega, Мадисон, Висконсин). Эффекторные клетки, подходящие для такого анализа, включают мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) и естественные клетки-киллеры (NK). В альтернативном или дополнительном варианте АЗКЦ-активность представляющей интерес молекулы можно оценить in vivo, например, в животной модели, такой как раскрыта в Clynes et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998). Также можно проводить анализ связывания C1q, чтобы подтвердить, что антитело не способно связывать C1q и, следовательно, у него отсутствует КЗЦ-активность. См., например, анализ связывания C1q и С3с ИФА в WO 2006/029879 и WO 2005/100402. Для оценки активации комплемента можно проводить исследование КЗЦ (см., например, Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003); и Cragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)). Определение связывания с FcRn и in vivo клиренса/времени полужизни также можно проводить, используя методы, известные в данной области техники (смотрите, например, Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006); WO 2013/120929 A1).
Антитела со сниженной эффекторной функцией включают антитела с заменой одного или более остатков Fc-области 238, 265, 269, 270, 297, 327 и 329 (патент США №6737056). Такие Fc-мутанты включают Fc-мутантов с заменами в двух или более аминокислотных положениях 265, 269, 270, 297 и 327, включая так называемый Fc-мутант «DANA» с заменой остатков 265 и 297 аланином (патент США №7332581).
Описаны некоторые варианты антител с улучшенным или уменьшенным связыванием с FcR. (Смотрите, например, патент США №6737056, WO 2004/056312 и Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001).)
В некоторых аспектах вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые улучшают АЗКЦ, например, с заменами в позициях 298, 333 и/или 334 Fc-области (нумерация остатков EU).
В некоторых аспектах вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые снижают связывание с FcγR, например, с заменами в положениях 234 и 235 Fc-области (нумерация остатков EU). В одном аспекте замены представляют L234A и L235A (LALA). В некоторых аспектах вариант антитела дополнительно содержит D265A и/или P329G в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1. В одном аспекте замены представляют L234A, L235A и P329G (LALA-PG) в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1. (См., например, WO 2012/130831). В другом аспекте замены представляют L234A, L235A и D265A (LALA-DA) в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1.
В некоторых аспектах изменения сделаны в Fc области, что привело к изменению (то есть или к улучшению, или к ухудшению) связывания C1q и/или комплементзависимой цитотоксичности (КЗЦ), например, как описано в патенте США №6194551, международной патентной заявке WO 99/51642 и публикации Idusogie et al. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).
Антитела с увеличенным периодом полужизни и улучшенным связыванием с неонатальным рецептором Fc (FcRn), который отвечает за перенос материнских IgG плоду (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) и Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)), описаны в США 2005/0014934 (Hinton et al.). Эти антитела содержат Fc-домен с одной или более заменами, которые улучшают связывание Fc-области с FcRn. Такие Fc-варианты включают варианты с заменами в одном или более остатках Fc-области: 238, 252, 254, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 или 434, например, замена остатка 434 Fc-области (см., например, патент США №7371826; Dall'Acqua, W.F., et al. J. Biol. Chem. 281 (2006) 23514-23524).
Остатки Fc-области, важные для взаимодействия мышиного Fc-мышиного FcRn, были идентифицированы сайт-направленным мутагенезом (см., например, Dall'Acqua, W.F., et al. J. Immunol 169 (2002) 5171-5180). Остатки I253, H310, H433, N434 и Н435 (нумерация согласно EU-индексу) вовлечены во взаимодействие (Medesan, С., et al., Eur. J. Immunol. 26 (1996) 2533; Firan, M., et al., Int. Immunol. 13 (2001) 993; Kim, J.K., et al., Eur. J. Immunol. 24 (1994) 542). Остатки I253, H310 и H435, как было обнаружено, важны для взаимодействия человеческого Fc с мышиным FcRn (Kim, J.K., et al., Eur. J. Immunol. 29 (1999) 2819). Исследования комплекса человеческого Fc-человеческого FcRn показали, что остатки I253, S254, Н435 и Y436 являются важными для взаимодействия (Firan, M., et al., Int. Immunol. 13 (2001) 993; Shields, R.L., et al., J. Biol. Chem. 276 (2001) 6591-6604). В Yeung, Y.A., et al. (J. Immunol. 182 (2009) 7667-7671) сообщали и исследовали различные мутанты остатков 248-259, и 301-317, и 376-382, и 424-437.
В определенных вариантах реализации вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые снижают связывание с FcRn, например, с заменами в положениях 253, и/или 310, и/или 435 Fc-области (нумерация остатков EU). В некоторых аспектах вариант антитела содержит Fc-область с аминокислотными заменами в положениях 253, 310 и 435. В одном аспекте замены представляют I253A, Н310А и Н435А в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1. См., например, Grevys, A., et al., J. Immunol. 194 (2015) 5497-5508.
В определенных вариантах реализации вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые снижают связывание с FcRn, например, с заменами в позициях 310, и/или 433, и/или 436 Fc-области (нумерация остатков EU). В некоторых аспектах вариант антитела содержит Fc-область с аминокислотными заменами в положениях 310, 433 и 436. В одном аспекте замены представляют Н310А, Н433А и Y436A в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1. (См., например, WO 2014/177460 А1).
В определенных вариантах реализации вариант антитела содержит Fc-область с одной или более аминокислотными заменами, которые улучшают связывание с FcRn, например, с заменами в позициях 252, и/или 254, и/или 256 Fc-области (нумерация остатков EU). В некоторых аспектах вариант антитела содержит Fc-область с аминокислотными заменами в положениях 252, 254 и 256. В одном аспекте замены представляют M252Y, S254T и Т256Е в Fc-области, полученной из Fc-области человеческого IgG1. См. также Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988); патент США №5648260; патент США №5624821; и WO 94/29351 в отношении других примеров вариантов Fc-области.
С-конец тяжелой цепи представленного в данном документе антитела может представлять собой полный С-конец, оканчивающийся аминокислотными остатками PGK. С-конец тяжелой цепи может представлять собой укороченный С-конец, в котором были удалены один или два С-концевых аминокислотных остатка. В одном предпочтительном аспекте С-конец тяжелой цепи представляет собой укороченный С-конец, оканчивающийся PG. В одном аспекте из всех представленных в данном документе аспектов антитело, содержащее тяжелую цепь, содержащую С-концевой СН3-домен, описанный в данном документе, содержит С-концевой глицин-лизиновый дипептид (G446 и K447, нумерация в соответствии с индексом EU положений аминокислот). В одном аспекте из всех представленных в данном документе аспектов антитело, содержащее тяжелую цепь, содержащую С-концевой СН3-домен, описанный в данном документе, содержит С-концевой остаток глицина (G446, нумерация в соответствии с индексом EU положений аминокислот).
в. Варианты антител, сконструированные с использованием цистеина
В некоторых аспектах может быть желательно создать антитела, сконструированные с использованием цистеина, например, антитела THIOMAB™, в которых один или более остатков замещены остатками цистеина. В конкретных аспектах замещенные остатки находятся в доступных сайтах антитела. При замене этих остатков цистеином реакционноспособные тиоловые группы располагаются в доступных сайтах антитела и могут использоваться для конъюгации антитела с другими фрагментами, такими как лекарственные фрагменты или фрагменты линкер-лекарственный препарат, для создания иммуноконъюгата, как дополнительно описано в данном документе. Антитела, сконструированные с использованием цистеина, можно получить, как описано, например, в патентах США №№7521541, 830930, 7855275, 9000130 или в заявке WO 2016040856.
7. Иммуноконъюгаты
В настоящем изобретении также предложены иммуноконъюгаты, содержащие предложенное в данном документе антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, конъюгированное (химически связанное) с одним или более терапевтическими средствами, такими как цитотоксические средства, химиотерапевтические средства, лекарственные препараты, ингибиторы роста, токсины (например, белковые токсины, ферментативно активные токсины бактериального, грибкового, растительного или животного происхождения, или их фрагменты) или радиоактивные изотопы.
В одном аспекте иммуноконъюгат представляет конъюгат антитела-лекарственного средства (АЛС), в котором антитело конъюгировано с одним или более терапевтическими средствами, указанными выше. Антитело, как правило, соединено с одним или более терапевтическими средствами с помощью линкеров. Обзор технологии АЛС, включая примеры терапевтических средств и лекарственных средств и линкеров, приведен в Pharmacol Review 68:3-19 (2016).
Б. Рекомбинантные способы и композиции
Антитела могут быть получены с применением рекомбинантных способов и композиций, например, как описано в US 4816567. Для этих способов представлена одна или более выделенных нуклеиновых кислот, кодирующих антитело.
В одном аспекте представлены выделенные нуклеиновые кислоты, кодирующие антитело настоящего изобретения.
В одном аспекте предложен способ получения антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, причем указанный способ включает культивирование клетки-хозяина, содержащей нуклеиновую кислоту(ы), кодирующую предложенное выше антитело, в условиях, подходящих для экспрессии антитела, и, необязательно, выделение антитела из клетки-хозяина (или культуральной среды клетки-хозяина).
Для рекомбинантной продукции антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, нуклеиновые кислоты, кодирующие антитело, например, как описано выше, являются выделенными и вставленными в один или более векторов для дальнейшего клонирования и/или экспрессии в клетке-хозяине. Такие нуклеиновые кислоты легко выделять и секвенировать, используя традиционные процедуры (например, используя олигонуклеотидные зонды, которые способны специфически связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи антитела), или получать рекомбинантными методами, или получать химическим синтезом.
Подходящие клетки-хозяева для клонирования или экспрессии векторов, кодирующих антитела, включают прокариотические или эукариотические клетки, описанные в данном документе. Например, антитела могут вырабатываться в бактериях, в частности, если не требуется гликозилирование и Fc-эффекторная функция. Касательно экспрессии фрагментов антитела и полипептидов в бактериях см., например, патенты US 5648237, US 5789199 и US 5840523. (См. также Charlton, K.A., в: Methods in Molecular Biology, Vol. 248, Lo, B.K.C. (ed.), Humana Press, Totowa, NJ (2003), pp. 245-254, где описана экспрессия фрагментов антитела в Е. coli). После экспрессии антитело можно выделять из бактериальной клеточной пасты в растворимую фракцию и дополнительно очищать.
Клетки позвоночных также можно использовать в качестве хозяев. Например, можно использовать линии клеток млекопитающих, которые адаптированы для роста в суспензии. Другими примерами применимых линий клеток-хозяев млекопитающих являются линия клеток почки обезьяны CV1, трансформированная SV40 (COS-7); линия клеток почки эмбриона человека (клетки 293 или 293Т, описанные, например, в Graham F.L. et al., J. Gen Virol. 36 (1977) 59-74); клетки почки новорожденного хомяка (BHK); клетки Сертоли мышей (клетки ТМ4, описанные, например, в Mather, J.P., Biol. Reprod. 23 (1980) 243-252); клетки почки обезьяны (CV1); клетки почки африканской зеленой мартышки (VERO-76); клетки карциномы шейки матки человека (HELA); клетки почки собаки (MDCK; клетки печени серой крысы (BRL 3А); клетки легкого человека (W138); клетки печени человека (Hep G2); клетки опухоли молочной железы мышей (ММТ 060562); клетки TRI (как описано, например, в Mather, J.Р. et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383 (1982) 44-68); клетки MRC 5 и клетки FS4. Другие подходящие линии клеток-хозяев млекопитающих включают клетки яичника китайского хомяка (СНО), включая DHFR-клетки СНО (Urlaub G. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77 (1980) 4216-4220); и линии клеток миеломы, такие как Y0, NS0 и Sp2/0. Обзор некоторых линий клеток-хозяев млекопитающих, пригодных для получения антител, смотрите, например, в Yazaki, P. and Wu, A.M., Methods in Molecular Biology, Vol. 248, Lo, B.K.C. (ed.), Humana Press, Totowa, NJ (2004), pp. 255-268.
В одном аспекте клетка-хозяин является эукариотической, например клетка яичника китайского хомяка (СНО) или лимфоидная клетка (например, клетка Y0, NS0, Sp20).
В. Фармацевтические композиции
В дополнительном аспекте предложены фармацевтические композиции, содержащие любое из предложенных в настоящем документе антител, например, для применения в любом из нижеприведенных терапевтических способов. В одном аспекте фармацевтическая композиция содержит любое из предложенных в настоящем документе антител и фармацевтически приемлемый носитель. В другом аспекте фармацевтическая композиция содержит любое из предложенных в настоящем документе антител и по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, например, как описано ниже.
Фармацевтические композиции описанного в настоящем документе антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, готовят путем смешивания такого антитела, имеющего необходимую степень чистоты, с одним или более необязательными фармацевтически приемлемыми носителями (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)) в форме лиофилизированных композиций или водных растворов. Фармацевтически приемлемые носители в общем случае являются нетоксичными для реципиентов в применяемых дозировках и концентрациях и включают, но не ограничиваются этим: буферы, такие как гистидин, фосфат, цитрат, ацетат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензил аммония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония; хлорид бензетония; фенол; бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол; и м-крезол); низкомолекулярные (содержащие менее 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие средства, такие как ЭДТА; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; металлсодержащие комплексы (например, комплексы Zn-белок) и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как полиэтиленгликоль (ПЭГ). Типовые фармацевтически приемлемые носители по данному документу дополнительно включают средства для диспергирования лекарственных препаратов в интерстициальном пространстве, такие как растворимые нейтрально-активные гликопротеины гиалуронидазы (sHASEGP), например, растворимые гликопротеины гиалуронидазы РН-20 человека, такие как rHuPH20 (HYLENEX®, Halozyme, Inc.). Некоторые типовые sHASEGP и способы их применения, включая rHuPH20, описаны в патентных публикациях США №№2005/0260186 и 2006/0104968. В одном аспекте sHASEGP комбинируют с одной или более дополнительными гликозаминогликаназами, такими как хондроитиназы.
Типовые композиции лиофилизированных антител описаны в патенте США №6267958. Водные композиции антител включают описанные в патенте США №6171586 и WO 2006/044908, причем последние композиции содержат гистидин-ацетатный буфер.
Фармацевтическая композиция настоящего документа также может содержать более одного активного ингредиента, если это необходимо для конкретного показания, подлежащего лечению, предпочтительно те, которые обладают дополняющими видами активности и не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Такие активные ингредиенты приемлемо присутствуют в комбинации в количествах, которые эффективны для предполагаемой цели.
Активные ингредиенты также могут быть заключены в микрокапсулах, полученных, например, с помощью методик коацервации или путем межфазной полимеризации, например, гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и полиметилметакрилатные микрокапсулы, соответственно, в коллоидных системах для доставки лекарственных средств (например, липосомах, альбуминовых микросферах, микроэмульсиях, наночастицах и нанокапсулах) или в макроэмульсиях. Такие методики описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).
Фармацевтические композиции для замедленного высвобождения можно получать. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие антитело, причем матрицы находятся в виде формованных изделий, например, пленок или микрокапсул.
Фармацевтические композиции, предназначенные для введения in vivo, обычно являются стерильными. Стерильность можно легко обеспечить, например, путем фильтрования через мембраны для стерильной фильтрации.
Г. Терапевтические способы и пути введения
Любое из антител, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека, представленные в настоящем документе, можно использовать в терапевтических методах.
В одном аспекте представлено антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в качестве лекарственного препарата. В дополнительных аспектах представлено антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в лечении сосудистого заболевания. В некоторых аспектах представлено антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в способе лечения. В некоторых аспектах настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в способе лечения индивидуума, имеющего сосудистое заболевание, включающем введение индивидууму эффективного количества антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека. В одном таком аспекте способ дополнительно включает введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства (например, одного, двух, трех, четырех, пяти или шести дополнительных терапевтических средств), например, как описано ниже. В дополнительных аспектах настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в ингибировании ангиогенеза. В некоторых аспектах настоящее изобретение обеспечивает антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в способе ингибирования ангиогенеза у индивидуума, включающем введение индивидууму эффективного количества антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для ингибирования ангиогенеза. «Индивидуум» в соответствии с любым из вышеприведенных аспектов предпочтительно является человеком.
В дополнительных аспектах представлено антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для применения в лечении заболевания глаз. В одном варианте реализации заболевание глаз выбрано из ВМД (в одном варианте реализации влажной ВМД, сухой ВМД, промежуточной ВМД, запущенной ВМД и географической атрофии (ГА)), макулярной дегенерации, макулярного отека, ДМО (в одном варианте реализации фокального, нецентрального ДМО и диффузного, с вовлечением центрального отдела сетчатки ДМО), ретинопатии, диабетической ретинопатии (ДР) (в одном варианте реализации пролиферативной ДР (ПДР), непролиферативной ДР (НПДР) и высотной ДР), других связанных с ишемией ретинопатии, РН, окклюзии вены сетчатки (ОВС) (в одном варианте реализации форм, связанных с центральной веной (ОЦВС) и ветвями вены (ОВВС)), ХНВ (в одном варианте реализации миопической ХНВ), неоваскуляризации роговицы, заболеваний, связанных с неоваскуляризацией роговицы, неоваскуляризации сетчатки, заболеваний, связанных с неоваскуляризацией сетчатки/хориоидальной неоваскуляризацией, центральной серозной ретинопатии (ЦСР), патологической миопии, болезни Гиппеля-Линдау, гистоплазмоза глаза, СЭВРП, болезни Коутса, болезни Норри, нарушений сетчатки, связанных с синдромом остеопороза-псевдоглиомы (ОППГ), субконъюнктивального кровоизлияния, покраснения радужки, неоваскулярного заболевания глаз, неоваскулярной глаукомы, пигментного ретинита (ПР), гипертонической ретинопатии, ангиоматозной пролиферации сетчатки, макулярной телеангиэктазии, неоваскуляризации радужной оболочки, внутриглазной неоваскуляризации, дегенерации сетчатки, кистозного макулярного отека (КМО), васкулита, отека диска зрительного нерва, ретинита, включая, помимо прочего, ЦМВ-ретинит, меланому глаз, бластому сетчатки, конъюнктивит (в одном варианте реализации инфекционный конъюнктивит и неинфекционный (в одном варианте реализации аллергический) конъюнктивит), наследственного амавроза Лебера (также известного как наследственный амавроз Лебера или НАЛ), увеита (включая инфекционный и неинфекционный увеит), хориоидита (в одном варианте реализации мультифокального хориоидита), гистоплазмоза глаз, блефарита, синдрома сухого глаза, травматического повреждения глаз, болезни Шегрена и других офтальмологических заболеваний, причем заболевание или болезнь связана с глазной неоваскуляризацией, транссудацией и/или отеком сетчатки или атрофией сетчатки. В одном варианте реализации заболевание глаз выбрано из ВМД (в одном варианте реализации влажной ВМД, сухой ВМД, промежуточной ВМД, запущенной ВМД и географической атрофии (ГА)), макулярной дегенерации, макулярного отека, ДМО (в одном варианте реализации фокального, нецентрального ДМО и диффузного, с вовлечением центрального отдела сетчатки ДМО), ретинопатии, диабетической ретинопатии (ДР) (в одном варианте реализации пролиферативной ДР (ПДР), непролиферативной ДР (НПДР) и высотной ДР.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение обеспечивает применение антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, в производстве или приготовлении лекарственного средства. В одном аспекте лекарственное средство предназначено для лечения сосудистого заболевания. В дополнительном аспекте лекарственное средство предназначено для применения в способе лечения заболевания, включающем введение индивидууму, имеющему сосудистое заболевание, эффективного количества лекарственного средства. В одном таком аспекте указанный способ дополнительно включает введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства, например, как описано ниже.
В одном аспекте состав предназначен для применения в лечении заболевания глаз. В одном аспекте лекарственное средство предназначено для применения в способе лечения заболевания глаз, включающем введение индивидууму, имеющему заболевание глаз, эффективного количества лекарственного средства. В одном таком аспекте указанный способ дополнительно включает введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства, например, как описано ниже.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ лечения сосудистого заболевания. В одном аспекте способ включает введение индивидууму, имеющему такое сосудистое заболевание, эффективного количества антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека. В одном таком аспекте указанный способ дополнительно включает введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства, как описано ниже.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ лечения заболевания глаз. В одном аспекте способ включает введение индивидууму, имеющему такое заболевание глаз, эффективного количества антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека. В одном таком аспекте указанный способ дополнительно включает введение индивидууму эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства, как описано ниже.
«Индивидуум» в соответствии с любым из вышеуказанных аспектов может быть человеком.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, содержащие любое из предложенных в настоящем документе антител, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека, например, для применения в любом из вышеприведенных терапевтических способов. В одном аспекте фармацевтическая композиция содержит любое из предложенных в настоящем документе антител, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека, и фармацевтически приемлемый носитель. В другом аспекте фармацевтическая композиция содержит любое из предложенных в данном документе антител, которые связываются с VEGF человека и IL-1бета человека, и по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, например, как описано ниже.
Антитела настоящего изобретения можно вводить по отдельности или использовать в комбинированной терапии. Например, комбинированная терапия содержит введение антитела настоящего изобретения и введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства (например, одного, двух, трех, четырех, пяти или шести дополнительных терапевтических средств).
Например, в некоторых вариантах реализации любой из предыдущих способов дополнительно включает введение одного или более дополнительных соединений. В некоторых вариантах реализации предложенное в настоящем документе антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, вводят одновременно с дополнительным соединением(ями). В некоторых вариантах реализации антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, вводят перед или после дополнительного соединения(й). В некоторых вариантах реализации дополнительное соединение связывается со второй биологической молекулой, выбранной из группы, состоящей из IL-6; IL-6R; IL-13; IL-13R; PDGF; ангиопоэтина; Ang2; Tie2; S1P; интегринов αvβ3, αvβ5 и α5β1; бетацеллулина; апелина/APJ; эритропоэтина; фактора комплемента D; TNFα; HtrA1; рецептора VEGF; рецептора ST-2; и белков, генетически связанных с риском ВМД, такими как компоненты пути комплемента С2, фактор В, фактор Н, CFHR3, C3b, С5, С5а и С3а; HtrA1; ARMS2; TIMP3; HLA; интерлейкин-8 (IL-8); CX3CR1; TLR3; TLR4; СЕТР; LIPC; COL10A1 и TNFRSF10A. В некоторых вариантах реализации дополнительное соединение представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
В некоторых вариантах реализации согласно (или применительно к) любому из вышеуказанных вариантов реализации глазное расстройство представляет внутриглазную неоваскуляризационное заболевание, выбранное из группы, состоящей из пролиферативных ретинопатии, хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ), возрастной макулярной дегенерации (ВМД), диабетической и других связанных с ишемией ретинопатии, диабетического макулярного отека, патологической миопии, болезни Гиппеля-Линдау, гистоплазмоза глаз, окклюзии вены сетчатки (ОВС), включая ОЦВС и ОВВС, неоваскуляризации роговицы, неоваскуляризации сетчатки и ретинопатии недоношенных (РН).
В некоторых случаях представленное в настоящем документе антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, можно вводить в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтическим средством для лечения глазного расстройства, например, глазного расстройства, описанного в настоящем документе (например, ВМД (например, влажной ВМД), ДМО, ДР, ОВС или ГА). Типичные дополнительные терапевтические средства для комбинированной терапии для лечения глазных расстройств включают, помимо прочего, антиангиогенные средства, такие как антагонисты VEGF, включая, например, антитела к VEGF (например, Fab к VEGF LUCENTIS® (ранибизумаб)), растворимые слитые белки рецепторов (например, рекомбинантные растворимые слитые белки рецепторов EYLEA® (афлиберцепт, также известный как VEGF Trap Eye; Regeneron/Aventis)), аптамеры (например, пегилированный аптамер к VEGF MACUGEN® (пегаптаниб натрия; NeXstar Pharmaceuticals/OSI Pharmaceuticals)) и ингибиторы тирозинкиназы VEGFR (например, 4-(4-бром-2-фторанилино)-6-метокси-7-(1-метилпиперидин-4-илметокси)хиназолин (ZD6474), 4-(4-фтор-2-метилиндол-5-илокси)-6-метокси-7-(3-пирролидин-1-илпропокси)хиназолин (AZD2171), ваталаниб (PTK787), семаксаминиб (SU5416; SUGEN) и SUTENT® (сунитиниб)); триптофанил-тРНК-синтазу (TrpRS); скваламин; RETAANE® (ацетат анекортава для суспензии депо, Alcon, Inc.); пролекарство комбретастатин А4 (СА4Р); MIFEPREX® (мифепристон-ru486); субтенон триамцинолона ацетонид; интравитреальный кристаллический ацетонид триамцинолона; ингибиторы матриксной металлопротеиназы (например, Prinomastat (AG3340; Pfizer)); ацетонид флуоцинолона (включая внутриглазной имплант флуоцинолона; Bausch & Lomb/Control Delivery Systems); линомид; ингибиторы функции интегрина β3; ангиостатин и их комбинации. Эти и другие терапевтические средства, которые можно вводить в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения описаны, например, в заявке на патент США №US 2014/0017244, которая включена в настоящий документ ссылкой во всей своей полноте.
Дополнительные примеры дополнительных терапевтических средств, которые можно использовать в комбинации с представленным в настоящем документе антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА), включают, помимо прочего, VISUDYNE® (вертепорфин; активируемое на свету лекарственное средство, которое обычно используют вместе с фотодинамической терапией с нетермическим лазером), PKC412, Endovion (NS 3728; NeuroSearch A/S), нейротрофические факторы (например, глиальный нейротрофический фактор (GDNF) и ресничный нейротрофический фактор (CNTF)), дилтиазем, дорзоламид, PHOTOTROP®, 9-цис-ретинальное, лекарственное средство для глаз (например, йодид фосфолина, эхотиофат или ингибиторы угольной ангидразы), веовастат (АЕ-941; AEterna Laboratories, Inc.), Sirna-027 (AGF-745; Sima Therapeutics, Inc.), нейротрофины (включая, только в качестве примера, NT-4/5, Genentech), Cand5 (Acuity Pharmaceuticals), INS-37217 (Inspire Pharmaceuticals), антагонисты интегрина (включая из Jerini AG и Abbott Laboratories), EG-3306 (Ark Therapeutics Ltd.), BDM-E (BioDiem Ltd.), талидомид (как используется, например, EntreMed, Inc.), кардиотрофин-1 (Genentech), 2-метоксиэстрадиол (Allergan/Oculex), DL-8234 (Toray Industries), NTC-200 (Neurotech), тетратиомолибдат (Университет Мичигана), LYN-002 (Lynkeus Biotech), соединения из микроводорослей (Aquasearch/Albany, Mera Pharmaceuticals), D-9120 (Celltech Group plc), ATX-S10 (Hamamatsu Photonics), TGF-beta 2 (Genzyme/Celtrix), ингибиторы тирозинкиназы (например, от Allergan, SUGEN или Pfizer), NX-278-L (NeXstar Pharmaceuticals/Gilead Sciences), Opt-24 (OPTIS France SA), нейропротекторы ганглиев клеток сетчатки (Cogent Neurosciences), производные N-нитропиразола (Texas A&M University System), KP-102 (Krenitsky Pharmaceuticals), циклоспорин А, терапевтические средства, используемые в фотодинамической терапии (например, VISUDYNE®; нацеленный на рецептор PDT, Bristol-Myers Squibb, Co.; порфимер натрия для инъекции с PDT; вертепорфин, QLT Inc.; ростапорфин с PDT, Miravent Medical Technologies; талапорфин натрия с PDT, Nippon Petroleum; и мотексафин лютеций, Pharmacyclics, Inc.), антисмысловые олигонуклеотиды (включая, в качестве примера, продукты, протестированные Novagali Pharma SA и ISIS-13650, Ionis Pharmaceuticals) и их комбинации.
Представленное в настоящем документе антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, можно вводить в комбинации с терапией или хирургической процедурой для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА), включая, например, лазерную фотокоагуляцию (например, панретинальную фотокоагуляцию сетчатки (ПФС)), лазерную обработку друз, хирургию макулярной дыры, макулярную транслокационную хирургию, имплантируемые миниатюрные телескопические устройства, ангиографию PHI-motion (также известную как микролазерная терапия и лечение питающих сосудов), терапию протонным пучком, микростимуляционную терапию, хирургию отслоения сетчатки и стекловидного тела, пломбирование склеры, субмакулярную хирургию, транспупиллярную термотерапию, терапию с использованием фотосистемы I, использование РНК-интерференции (РНКи), экстракорпоральный реофорез (также известный как мембранная дифференциальная фильтрация и реотерапия), имплантацию микрочипа, терапию стволовыми клетками, генно-заместительную терапию, генную терапию с использованием рибозимов (включая генную терапию для восприимчивого к гипоксии элемента, Oxford Biomedica; Lentipak, Genetix; и генную терапию PDEF, GenVec), трансплантацию фоторецепторов/клеток сетчатки (включая трансплантируемые эпителиальные клетки сетчатки, Diacrin, Inc.; трансплантат клеток сетчатки, например, Astellas Pharma US, Inc., ReNeuron, СНА Biotech), акупунктуру и их комбинации.
В некоторых случаях антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, можно вводить в комбинации с антиангиогенным средством для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). Любое подходящее антиангиогенное средство можно использовать в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения, включая, помимо прочего, перечисленные в Carmeliet et al. Nature 407:249-257, 2000. В некоторых вариантах реализации антиангиогенное средство представляет собой антагонист VEGF, включая, помимо прочего, антитело к VEGF (например, Fab к VEGF LUCENTIS® (ранибизумаб), RTH-258 (ранее ESBA-1008, одноцепочечный фрагмент антитела к VEGF; Novartis), или биспецифическое антитело к VEGF (например, биспецифическое антитело к VEGF/к ангиопоэтину 2, такое как фарицимаб; Roche)), растворимый рекомбинантный слитый белок рецептора (например, EYLEA® (афлиберцепт)), вариант VEGF, растворимый фрагмент VEGFR, аптамер, способный блокировать VEGF (например, пегаптаниб) или VEGFR, нейтрализующее антитело к VEGFR, низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназ VEGFR, DARPin® к VEGF (например, абиципар пегол, Molecular Partners AG/Allergan), малые интерферирующие РНК, которые ингибируют экспрессию VEGF или VEGFR, ингибитор тирозинкиназ VEGFR (например, 4-(4-бром-2-фторанилино)-6-метокси-7-(1-метилпиперидин-4-илметокси)хиназолин (ZD6474), 4-(4-фтор-2-метилиндол-5-илокси)-6-метокси-7-(3-пирролидин-1-илпропокси)хиназолин (AZD2171), ваталаниб (PTK787), семаксаминиб (SU5416; SUGEN) и SUTENT® (сунитиниб)), и их комбинации.
Другие подходящие антиангиогенные средства, которые можно вводить в комбинации с представленным в настоящем документе антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА) включают кортикостероиды, ангиостатические стероиды, ацетат анекортава, агиостатин, эндостатин, ингибиторы тирозинкиназы, ингибиторы матриксной металлопротеиназы (ММР), белок, связывающий инсулиноподобный фактор роста 3 (IGFBP3), антагонисты фактора, полученного из стромы (SDF-1), (например, антитела к SDF-1), фактор, полученный из пигментного эпителия (PEDF), гамма-секретаза, дельта-подобный лиганд 4, антагонисты интегрина, антагонисты фактора, индуцируемого гипоксией (HIF)-1α, антагонисты протеинкиназы CK2, средства, которые ингибируют хоуминг стволовых клеток (например, эндотелиальных клеток-предшественников) в сайт неоваскуляризации (например, антитело к антиваскулярному эндотелиальному кадгерину (CD-144) и/или антитело к SDF-1), и их комбинации.
В дополнительном примере в некоторых случаях антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, и/или его полимерный состав можно вводить в комбинации со средством, которое имеет активность против неоваскуляризации, для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА), таким как противовоспалительное лекарственное средство, мишень млекопитающих для ингибитора рапамицина (mTOR) (например, рапамицин, AFINITOR® (эверолимус) и TORISEL® (темсиролимус)), циклоспорин, антагонист фактора некроза опухолей (TNF) (например, антитело к TNFα или его антигенсвязывающий фрагмент (например, инфликсимаб, адалимумаб, цертолизумаб пегол и голимумаб) или растворимый рецептор слитого белка (например, этанерцепт)), средство против комплемента, нестероидное противовоспалительное средство (NSAID) или их комбинации.
В еще одном примере в некоторых случаях антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, можно вводить в комбинации со средством, которое является нейропротектором и может потенциально снижать прогрессирование сухой ВМД во влажную ВМД, например, класс лекарственных средств, называемый «нейростероиды», который включает лекарственные средства, такие как дегидроэпиандростерон (DHEA) (торговые названия: PRASTERA™ и FIDELIN®), сульфат дегидроэпиандростерона и сульфат прегненолона.
Любое подходящее терапевтическое средство от ВМД можно вводить как дополнительное терапевтическое средство в комбинации с представленным в настоящем документе антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА), включая, помимо прочего, антагонист VEGF, например, антитело к VEGF (например, LUCENTIS® (ранибизумаб), RTH-258 (ранее ESBA-1008, одноцепочечный фрагмент антитела к VEGF; Novartis), или биспецифическое антитело к VEGF (например, биспецифическое антитело к VEGF/к ангиопоэтину 2, такое как фарицимаб; Roche)), растворимый слитый белок рецептора VEGF (например, EYLEA® (афлиберцепт)), DARPin® к VEGF (например, абиципар пегол; Molecular Partners AG/Allergan), или аптамер к VEGF (например, MACUGEN® (пегаптаниб натрия)); антагонист фактора роста, полученного из тромбоцитов (PDGF), например, антитело к PDGF, антитело к PDGFR (например, REGN2176-3), пегилированный аптамер к PDGF-BB (например, FOVISTA®; Ophthotech/Novartis), растворимый слитый белок рецептора PDGFR или двойной антагонист PDGF/VEGF (например, низкомолекулярный ингибитор (например, DE-120 (Santen) или Х-82 (TyrogeneX)) или биспецифическое антитело к PDGF/к VEGF)); VISUDYNE® (вертепорфин) в комбинации с фотодинамической терапией; антиоксидант; антагонист системы комплемента, например, антагонист фактора комплемента С5 (например, низкомолекулярный ингибитор (например, ARC-1905; Opthotech) или антитело к С5 (например, LFG-316; Novartis), антагонист пропердина (например, антитело к пропердину, например, CLG-561; Alcon), или антагонист фактора комплемента D (например, антитело к фактору комплемента D, например, лампализумаб; Roche)); С3-блокирующий пептид (например, APL-2, Appellis); модификатор цикла превращений родопсина (например, гидрохлорид эмиксустата); скваламин (например, OHR-102; Ohr Pharmaceutical); витаминные и минеральные добавки (например, описанные в исследовании 1 (AREDS1; цинк и/или антиоксиданты) и исследовании 2 возрастных заболеваний глаз (AREDS2; цинк, антиоксиданты, лютеин, зеаксантин и/или омега-3 жирные кислоты)); клеточную терапию, например, NT-501 (Renexus); РН-05206388 (Pfizer), трансплантацию клеток huCNS-SC (StemCells), CNTO-2476 (линия стволовых клеток пуповины; Janssen), OpRegen (суспензия клеток RPE; Cell Cure Neurosciences) или трансплантацию клеток MA09-hRPE (Ocata Therapeutics); антагонист тканевого фактора (например, hI-con1; Iconic Therapeutics); агонист альфа-адренергического рецептора (например, тартрат бримонидина; Allergan); пептидную вакцину (например, S-646240; Shionogi); антагонист амилоида-бета (например, моноклональное антитело к амилоиду-бета, например, GSK-933776); антагонист S1P (например, антитело к S1P, например, iSONEP™; Lpath Inc); антагонист ROBO4 (например, антитело к ROBO4, например, DS-7080a; Daiichi Sankyo); лентивирусный вектор, экспрессирующий эндостатин и ангиостатин (например, RetinoStat); и любую их комбинацию. В некоторых случаях терапевтические средства от ВМД (включая любые из предыдущих терапевтических средств от ВМД) могут быть совместно составленными. Например, антитело к PDGFR REGN2176-3 можно совместно составлять с афлиберцептом (EYLEA®). В некоторых случаях такой совместный состав можно вводить в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения. В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД).
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с LUCENTIS® (ранибизумабом) для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с EYLEA® (афлиберцепт) для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с MACUGEN® (пегаптаниб натрия) для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с VISUDYNE® (вертепорфин) в комбинации с фотодинамической терапией для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с антагонистом PDGF для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). Типичные антагонисты PDGF, которые можно использовать в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения, включают антитело к PDGF, антитело к PDGFR, низкомолекулярный ингибитор (например, скваламин), пегилированный аптамер к PDGF-B, такой как FOVISTA® (Е10030; Ophthotech/Novartis), или двойной антагонист PDGF/VEGF (например, низкомолекулярный ингибитор (например, DE-120 (Santen) или Х-82 (TyrogeneX)) или биспецифическое антитело к PDGF/к VEGF). Например, FOVISTA® можно вводить как вспомогательную терапию с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения. OHR-102 можно вводить в комбинации с антагонистами VEGF, такими как LUCENTIS® или EYLEA®. В некоторых вариантах реализации антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с OHR-102, LUCENTIS® и/или EYLEA®. В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с RTH-258 для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). RTH-258 можно вводить, например, при помощи интравитреальной инъекции или инфузии в глаз. В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с абиципаром пеголом для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Любое терапевтическое средство от ДМО и/или ДР можно вводить в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения для лечения глазного расстройства (например, ВМД, ДМО, ДР, ОВС или ГА), включая, помимо прочего, антагонист VEGF (например, LUCENTIS® или EYLEA®), кортикостероид (например, кортикостероидный имплант (например, OZURDEX® (интравитреальный имплантат дексаметазона) или ILUVIEN® (интравитреальный имплантат ацетонида флуоцинолона)) или кортикостероид, составленный для введения интравитреальной инъекцией (например, ацетонид триамцинолона)), или их комбинации. В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ДМО и/или ДР.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с LUCENTIS® (ранибизумаб) для лечения ДМО и/или ДР (например, НПДР или ПДР).
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с EYLEA® (афлиберцепт) для лечения ДМО и/или ДР (например, НПДР или ПДР).
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с OZURDEX® (интравитреальный имплантат дексаметазона) для лечения ДМО и/или ДР.
Антитело, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения можно вводить в комбинации с ILUVIEN® (интравитреальный имплантат дексаметазона) для лечения ДМО и/или ДР.
В некоторых случаях схему лечения TAO/PRN или схему лечения ТАЕ можно использовать для введения терапевтического средства от ВМД (например, ранибизумаба или афлиберцепта) в комбинации с антителом, которое связывается с VEGF человека и 1b-1бета человека, настоящего изобретения, и/или его полимерным составом. В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ВМД (например, влажную ВМД). В некоторых случаях глазное расстройство представляет собой ГА.
Такие виды комбинированной терапии, отмеченные выше, охватывают комбинированное введение (при котором два или более терапевтических средств включены в один и тот же или отдельные препараты) и раздельное введение, и в этом случае введение антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения может происходить до, одновременно и/или после введения дополнительного терапевтического средства или средств. В одном варианте реализации введение антитела, которое связывается с VEGF человека и IL-1бета человека, настоящего изобретения и введение дополнительного терапевтического средства может разделять около одного, двух, трех, четырех или пяти месяцев, или около одной, двух или трех недель, или около одних, двух, трех, четырех, пяти или шести суток.
Антитело согласно настоящему изобретению (и любое дополнительное терапевтическое средство) можно вводить любым подходящим способом, включая парентеральное, внутрилегочное и интраназальное, и, если необходимо для местного лечения, внутриочаговое введение. Парентеральные инфузии включают внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное или подкожное введение. Введение дозы можно проводить любым удобным способом, например путем инъекций, таких как внутривенные или подкожные инъекции, частично в зависимости от того, является ли введение кратковременным или постоянным. В данном документе предусмотрены различные схемы дозирования, включая, но не ограничиваясь этим, однократное или многократное введение в различные моменты времени, болюсное введение и импульсную инфузию.
Антитела по данному изобретению готовят, дозируют и вводят способом, соответствующим надлежащей медицинской практике. Факторы, которые необходимо учитывать в этом контексте, включают конкретное нарушение, подлежащее лечению, конкретное млекопитающее, подлежащее лечению, клиническое состояние отдельного пациента, причину нарушения, место доставки средства, способ введения, график введения и другие факторы, известные практикующим врачам. Антитело необязательно готовят с одним или более средствами, применяемыми в настоящее время для предотвращения или лечения рассматриваемого нарушения. Эффективное количество таких других средств зависит от количества антитела, присутствующего в фармацевтической композиции, типа нарушения или лечения и других факторов, которые обсуждались выше. Другие средства обычно применяют в таких же дозировках и вводят путями, описанными в данном документе, или в дозировках, составляющих от около 1 до 99% дозировок, описанных в данном документе, или в любой дозировке и любым путем, которые эмпирически/клинически определены как подходящие.
Для профилактики или лечения заболевания соответствующая доза антитела по данному изобретению (используемого отдельно или в комбинации с одним или более другими дополнительными терапевтическими средствами) зависит от типа заболевания, подлежащего лечению, типа антитела, тяжести и течения заболевания, того, вводится ли антитело с профилактической или терапевтической целью, предыдущей терапии, истории болезни пациента и его ответа на антитела, а также решения лечащего врача. Антитело удобно вводить пациенту однократно или в течение серии курсов лечения. В зависимости от типа и тяжести заболевания, начальная кандидатная дозировка антитела для введения пациенту может составлять от приблизительно 1 мкг/кг до 15 мг/кг (например, 0,1 мг/кг - 10 мг/кг), например, за одно или более отдельных введений или в виде непрерывной инфузии. Одна типичная суточная доза может варьироваться от около 1 мкг/кг до 100 мг/кг или более, в зависимости от факторов, упомянутых выше. В случае повторных введений в течение нескольких суток или более, в зависимости от состояния, лечение в общем случае проводят до достижения необходимой степени подавления симптомов заболевания. Одна типовая дозировка антитела находится в диапазоне от около 0,05 мг/кг до около 10 мг/кг. Таким образом, пациенту можно вводить одну или более доз, составляющих около 0,5 мг/кг, 2,0 мг/кг, 4,0 мг/кг или 10 мг/кг (или любую их комбинацию). Такие дозы можно вводить с интервалами, например, раз в неделю или раз в три недели (например, чтобы пациент получал от около двух до около двадцати или, например, около шести доз антитела). Можно вводить начальную более высокую нагрузочную дозу, за которой следует одна или более меньших доз. Эффективность такой терапии легко контролировать при помощи традиционных методик и анализов.
Д. Готовые изделия
В другом аспекте данного изобретения предложено готовое изделие, содержащее материалы, применяемые при лечении, предотвращении и/или диагностике вышеописанных нарушений. Промышленное изделие включает контейнер и этикетку или листок-вкладыш в упаковке, нанесенный на или связанный с контейнером. Подходящие контейнеры включают, например, бутылки, флаконы, шприцы, пакеты с раствором для внутривенного введения и т.д. Контейнеры могут быть изготовлены из различных материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер содержит композицию, которая сама по себе или в комбинации с другой композицией эффективна для лечения, предотвращения и/или диагностики состояния, и может иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может представлять собой пакет с раствором для внутривенного введения или флакон с пробкой, прокалываемой иглой для подкожной инъекции). По меньшей мере одно активное средство в композиции представляет собой антитело по данному изобретению. На этикетке или на вкладыше в упаковку указано, что композицию применяют для лечения выбранного патологического состояния. Кроме того, промышленное изделие может содержать (а) первый контейнер с содержащейся в нем композицией, причем указанная композиция содержит антитело по данному изобретению; и (б) второй контейнер с содержащейся в нем композицией, причем указанная композиция содержит дополнительный цитотоксический или иное терапевтическое средство. Готовое изделие в этом аспекте настоящего изобретения может дополнительно содержать вкладыш в упаковку, на котором указано, что композиции можно применять для лечения конкретного патологического состояния. В альтернативном или дополнительном варианте готовое изделие может дополнительно содержать второй (или третий) контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (БВДИ), фосфатно-солевой буферный раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Дополнительно могут быть включены другие материалы, желательные с коммерческой и потребительской точки зрения, включая другие буферы, растворители, фильтры, иглы и шприцы.
3. Конкретные варианты реализации настоящего изобретения
Далее перечислены конкретные варианты реализации настоящего изобретения.
1. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем паратоп VEGF содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела, причем паратоп IL-1бета содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела.
2. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем пара вариабельного домена легкой цепи и вариабельного домена тяжелой цепи одновременно связывается с VEGF человека и IL-1бета человека.
3. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем ни одна из аминокислот, которые содержатся в паратопе VEGF, не содержится в паратопе IL-1бета.
4. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем антитело связывается с одним и тем же эпитопом на VEGF человека и с одним и тем же эпитопом на IL-1бета человека как антитело с вариабельным доменом тяжелой цепи SEQ ID NO: 11 и вариабельным доменом легкой цепи SEQ ID NO: 12.
5. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем
• паратоп VEGF содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела, причем паратоп IL-1бета содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела; и/или
• пара вариабельного домена легкой цепи и вариабельного домена тяжелой цепи одновременно связывается с VEGF человека и IL-1бета человека; и/или
• ни одна из аминокислот, которые содержатся в паратопе VEGF, не содержится в паратопе IL-1бета; и/или
• антитело связывается с тем же эпитопом на VEGF человека и с тем же эпитопом на IL-1бета человека, что и антитело с вариабельным доменом тяжелой цепи с SEQ ID NO: 11 и вариабельным доменом легкой цепи с SEQ ID NO: 12; и/или
• Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с Kd менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и/или
• Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С; и/или
• Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света; и/или
• связывание Fab-фрагмента антитела с VEGF человека ингибирует связывание VEGF с VEGFR2 с IC50 менее 50 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
6. Антитело по одному из предыдущих вариантов реализации, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8.
7. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8.
8. Антитело по одному из предыдущих вариантов реализации, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток I2, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
9. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
10. Антитело по одному из предыдущих вариантов реализации, содержащее домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, I64, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и домен VL, содержащий аминокислотные остатки I2, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
11. Антитело варианта реализации 10, содержащее
- паратоп VEGF, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66 и R83, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: I2, Y27, W27a, S27c, S27d, Е67, D68, Q69, R92, Y93, Н94 и Y96; и
- паратоп IL-1бета, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, K94, D95, V96, F98 и D101, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Y91.
12. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее в одной паре домена VL и домена VH: (i) домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и (ii) домен VL, содержащий аминокислотные остатки I2, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
13. Антитело варианта реализации 12, содержащее
- паратоп VEGF, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66 и R83, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: I2, Y27, W27a, S27c, S27d, Е67, D68, Q69, R92, Y93, Н94 и Y96; и
- паратоп Il-1бета, содержащий следующие аминокислотные остатки в домене VH: Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, K94, D95, V96, F98 и D101, и следующие аминокислотные остатки в домене VL: L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Y91.
14. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12.
15. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11, причем домен VH содержит аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12, причем домен VL содержит аминокислотные остатки I2, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
16. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12.
17. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11, причем домен VH содержит аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, R66, R83 и K94; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12, причем домен VL содержит аминокислотные остатки I2, Y49, G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
18. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток I2, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12.
19. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 с до 15 аминокислотных замен.
20. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 с до 15 аминокислотных замен, причем аминокислотные замены расположены в положениях 3-25, 36-49, 97-82 с, 84-93 или 103-113 SEQ ID NO: 11; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 с до 15 аминокислотных замен, причем аминокислотные замены расположены в положениях 1, 4, 6, 8-23, 35-48, 58-66, 70-88 или 98-107 SEQ ID NO: 12, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату.
21. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 с до 15 аминокислотных замен.
22. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, и содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11 с до 15 аминокислотных замен; и (б) вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 с до 15 аминокислотных замен.
23. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее последовательность VH с SEQ ID NO: 11 и последовательность VL с SEQ ID NO: 12.
24. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее последовательность VH с SEQ ID NO: 11 и последовательность VL с SEQ ID NO: 12.
25. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 20 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 19.
26. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи с SEQ ID NO: 20 и аминокислотную последовательность легкой цепи с SEQ ID NO: 19.
27. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 19.
28. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи с SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность легкой цепи с SEQ ID NO: 19.
29. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, в котором Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
30. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
31. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с Kd менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
32. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
33. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее в одной паре домена VH и VL: (i) домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52а, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и (ii) домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF 121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
34. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (e) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
35. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
36. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
37. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
38. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
39. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее в одной паре домена VH и VL: (i) домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и (ii) домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
40. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
41. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
42. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
43. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
44. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
45. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее в одной паре домена VH и VL: (i) домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и (ii) домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
46. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и (домен VL), содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
47. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, в котором связывание Fab-фрагмента антитела с VEGF человека ингибирует связывание VEGF с VEGFR2 с IC50 менее 50 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
48. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем связывание Fab-фрагмента антитела с VEGF человека ингибирует связывание VEGF с VEGFR2 с IC50 менее 50 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
49. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
50. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) каркас тяжелой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотные остатки Е2, G26, V28 и K30, (ii) FR3, содержащим аминокислотные остатки R66, R83 и K94; и домен VL, содержащий (д) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (е) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, (ж) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и (и) каркас легкой цепи человека с (i) FR1, содержащим аминокислотный остаток 12, (ii) FR2, содержащим аминокислотный остаток Y49, (iii) FR3, содержащим аминокислотные остатки G57, Е67, D68 и Q69, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату, и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
51. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее в одной паре домена VH и VL: (i) домен VH, содержащий аминокислотные остатки Е2, G26, V28, K30, W31, N35b, D35c, K52a, D55, Н56, Y58, Т61, K62, F63, 164, R66, R83, K94, D95, V96, F98 и D101, и (ii) домен VL, содержащий аминокислотные остатки 12, Y27, W27a, S27c, S27d, L32, Y49, D50, Y53, K54, L56, G57, Е67, D68, Q69, Y91, R92, Y93, Н94 и Y96, причем нумерация в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
52. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, причем антитело содержит домен VH, содержащий (a) CDR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) CDR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (в) CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и домен VL, содержащий (г) CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, содержащее (а) домен VH, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; и (б) домен VL, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; и причем связывание Fab-фрагмента антитела с IL-1бета человека ингибирует связывание IL-1бета с IL-1бетаR1 с IC50 менее 30 нМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
53. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, являющееся моноклональным антителом.
54. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, являющееся фрагментом антитела, который связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека.
55. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем антитело является биспецифическим.
56. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем антитело является Fab-фрагментом.
57. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем антитело является фрагментом биспецифического антитела.
58. Антитело по любому из предыдущих вариантов реализации, причем антитело является мультиспецифическим антителом.
59. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из вариантов реализации 1-58.
60. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту согласно варианту реализации 59.
61. Экспрессионный вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту согласно варианту реализации 61.
62. Способ получения антитела, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, включающий культивирование клетки-хозяина согласно варианту реализации 60 так, чтобы получить антитело.
63. Способ варианта реализации 62, дополнительно включающий извлечение антитела из клетки-хозяина.
64. Антитело, полученное способом варианта реализации 62 или 63.
65. Фармацевтический состав, содержащий антитело по любому из вариантов реализации 1-58 и фармацевтически приемлемый носитель.
66. Антитело по любому из вариантов реализации 1-58 для применения в качестве лекарственного средства.
67. Антитело по любому из вариантов реализации 1-58 для применения в лечении сосудистого заболевания.
68. Антитело по любому из вариантов реализации 1-58 для применения в лечении сосудистого заболевания глаз.
69. Применение антитела по любому из вариантов реализации 1-58 или фармацевтической композиции варианта реализации 65 в производстве лекарственного средства.
70. Применение антитела по любому из вариантов реализации 1-58 или фармацевтической композиции варианта реализации 65 в производстве лекарственного средства для ингибирования ангиогенеза.
71. Способ лечения индивидуума, имеющего сосудистое заболевание, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела по любому из вариантов реализации 1-58 или фармацевтической композиции варианта реализации 65.
72. Способ лечения индивидуума, имеющего сосудистое заболевание глаз, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела по любому из вариантов реализации 1-58 или фармацевтической композиции варианта реализации 65.
73. Способ ингибирования ангиогенеза у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела по любому из вариантов реализации 1-58 или фармацевтической композиции по любому из вариантов реализации 65 для ингибирования ангиогенеза.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры представлены для помощи в понимании настоящего изобретения, подлинный объем которого указан в приложенной формуле изобретения. Понятно, что модификации можно сделать в указанных процедурах без отклонения от сущности настоящего изобретения.
Пример 1:
Получение Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета Fab-фрагмент биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета получали путем независимого скрининга моноспецифических антител, которые связываются с VEGF и IL-1бета, с неперекрывающимися паратопами и последующего слияния аминокислотных последовательностей в бипаратопной паре VH/VL, которая связывается с VEGF и IL-1бета, способом, описанным ранее, например, в WO2012/163520.
Использовали две отдельные библиотеки фаговых дисплеев синтетических Fab-фрагментов, причем в первой библиотеке фаговых дисплеев остатки в областях CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 Fab-фрагментов были различными, и причем во второй библиотеке фаговых дисплеев остатки в областях CDR-L1, CDR-L3 и CDR-H2 Fab-фрагментов были различными. В каждой библиотеке другие три области CDR поддерживали недиверсифицированными как инвариантная фиктивная последовательность. В обеих библиотеках домен СН1 Fab-фрагментов был слит посредством линкера с усеченным белком гена-III для облегчения фагового дисплея.
Первая библиотека была обогащена связующими против IL-1бета человека, а вторая библиотека была обогащена связующими против VEGF-А человека, путем пэннинга фаговой библиотеки. После пэннинга мини-препараты плазмид получали для обоих обогащенных пулов фагемидных векторов. Минипрепараты усваивались рестрикционным ферментом для удаления области, кодирующей усеченный белок гена-III, и повторно циркулировались путем сшивания с получением пулов экспрессионных векторов, кодирующих растворимые Fab-фрагменты, которые были обогащены связующими IL-1бета или связующими VEGF-A, соответственно. Эти пулы векторов превращали в клетки TGI E.coli, и отдельные колонии выбирали и культивировали для растворимой экспрессии отдельных Fab-клонов на титрационном микропланшете. Супернатанты, содержащие растворимые Fab-фрагменты, отбирали для связывания с IL-1бета или VEGF-А, используя стандартные методы ИФА, и клоны TG1, дающие специфические связующие, подвергали действию препаратов плазмид ДНК и секвенированию с получением пар последовательностей VH и VL, специфически связывающихся или с IL-1бета, или с VEGF-A, соответственно.
Пару последовательностей VH и VL биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета разрабатывали in silico путем (1) замены неподходящих остатков VH 52b-65 в последовательности VH специфического к IL-1бета Fab на выбранные остатки VH 52b-65 специфического к VEGF-A Fab, таким образом замещая остатки CDR-H2, потенциально являющиеся частью специфического к VEGF-A паратопа, на тяжелую цепь связующего IL-1бета, и (2) замены неподходящих остатков VL 49-57 в последовательности VL специфического к VEGF-A Fab на выбранные остатки VL 49-57 специфического к IL-1бета Fab, таким образом замещая остатки CDR-L2, потенциально являющиеся частью специфического к IL-1бета паратопа, на легкую цепь связующего VEGF-A.
Пример 2:
Экспрессия 1HVL2.3 Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета
Полученную разработанную пару последовательностей VH и VL биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета синтезировали и клонировали в экспрессионном векторе E.coli в рамке с генными последовательностями, кодирующими домены СН1 и Скаппа. Вектор превращался в клетки TGI E.coli, и отдельную колонию культивировали для растворимой экспрессии Fab-фрагмента биспецифического антитела. Биспецифическое антитело очищали от супернатанта культуры TG1 путем аффинной хроматографии, и проверяли специфическое связывание как с IL-1бета, так и VEGF-A.
Биспецифическое антитело «1HVL2.3» к VEGF/IL-1бета выбирали, и оно характеризовалось тяжелой цепью с SEQ ID NO: 9 и легкой цепью с SEQ ID NO: 10.
Для дальнейших анализов антитела к VEGF/IL-1бета настоящего изобретения превращали в и экспрессировали из клеток HEK293 стандартными рекомбинантными способами.
Пример 3:
Определение характеристик Fab-фрагмента биспецифического антитела 1HVL2.3 к VEGF/IL-1бета
Аффинность связывания, гидрофильность и термическую стабильность биспецифического антитела 1HVL2.3 оценивали следующим образом:
Кинетика связывания VEGF, оцененная при помощи поверхностного плазмонного резонанса (ППР):
Захватывающее антитело к His (GE Healthcare 28995056) иммобилизировали на Sensor Chip С1 серии S (GE Healthcare 29104990), используя стандартную химию аминного связывания, что давало плотность поверхности приблизительно 500 единиц резонанса (ЕР). В качестве подвижного буфера и буфера для разведения использовали HBS-P+(10 мМ ГЭПЭС, 150 мМ NaCl, рН 7,4, 0,05% сурфактанта Р20). VEGF121-His человека захватывался на поверхности с получением плотностей лигандов приблизительно 10 и 20 ЕР, соответственно. Последовательно вводили серийные разведения Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета (1,2-100 нМ, разведение 1:3) в течение 90 с каждое, диссоциацию отслеживали в течение 3600 с при скорости потока 30 мкл/мин (кинетика одного цикла). Поверхность регенерировали путем введения 10 мМ глицина с рН 1,5 в течение 60 с. Объемную разницу показателя преломления корректировали путем вычитания контрольных введений и путем вычитания ответа, полученного от контрольной проточной ячейки без иммобилизованного VEGF 121 человека. Аппроксимацию кривых проводили, используя 1:1 модель связывания Ленгмюра в оценочном программном обеспечении Biacore. Для обеспечения более надежного соответствия вариант Multiple Rmax выбирали для общего соответствия, используя обе плотности лигандов.
Кинетика связывания IL-1b, оцененная при помощи поверхностного плазмонного резонанса (ППР):
Захватывающее антитело к Fab (GE Healthcare 28958325) иммобилизировали на Sensor Chip С1 серии S (GE Healthcare 29104990), используя стандартную химию аминного связывания, что давало плотность поверхности приблизительно 500 единиц резонанса (ЕР). Fab-фрагмент биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета иммобилизировали на поверхности с полученными уровнями иммобилизации приблизительно 20 ЕР. Серийные разведения в диапазоне от 0,74 до 60 нМ (разведение 1:3) или IL-1 бета человека (PeproTech 200-01 В), или IL-1бета яванского макака (Sino Biological 90010-CNAE) вводили в течение 90 с, диссоциацию отслеживали в течение по меньшей мере 600 с при скорости потока 30 мкл/мин. Поверхность регенерировали путем двух последовательных впрысков 10 мМ глицина с рН 2,1 в течение 60 с каждый. Объемную разницу показателя преломления корректировали путем вычитания контрольных введений и путем вычитания ответа, полученного от контрольной проточной ячейки без иммобилизованного Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1 бета. Аппроксимацию кривых проводили, используя 1:1 модель связывания Ленгмюра в оценочном программном обеспечении Biacore.
Хроматография гидрофобного взаимодействия (ХГВ):
Видимую гидрофобность определяли путем впрыска 20 мкг Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета на колонку с ХГВ-эфир-5PW (Tosoh), уравновешенную 25 мМ фосфатом Na, 1,5 М сульфатом аммония, рН 7,0. Элюирование проводили с линейным градиентом от 0 до 100% буфера В (25 мМ фосфата Na, рН 7,0) в течение 60 минут. Время удержания сравнивали с белковыми стандартами с известной гидрофобностью.
Термическая стабильность:
Образцы Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета готовили в концентрации 1 мг/мл в 20 мМ смеси гистидина/хлорида гистидина, 140 мМ NaCl, рН 6,0, переносили в оптический 384-луночный планшет путем центрифугирования через 0,4 мкм фильтровальную пластину и покрывали парафинным маслом. Гидродинамический радиус повторно измеряли методом динамического рассеяния света на планшет-ридере DynaPro (Wyatt) при нагревании образцов со скоростью 0,05°С/мин от 25°С до 80°С. В альтернативном варианте образцы переносили в 10 мкл микрокюветную матрицу и записывали данные по статическому рассеянию света, а также данные по флуоресценции после возбуждения лазером с 266 нм на инструменте Optim1000 (Avacta Inc.) при нагревании со скоростью 0,1°С/мин от 25°С до 90°С.
Температуру начала агрегации определяли как температуру, при которой гидродинамический радиус (DLS) или интенсивность рассеянного света (Optim1000) начинала повышаться. Температуру плавления определяют как точку перегиба на графике зависимости интенсивности флуоресценции от длины волны.
Результаты приведены в Таблицах 1 и 2.
Пример 4:
Улучшение Fab-фрагмента биспецифического антитела 1HVL2.3 к VEGF/IL-1бета
Как показано выше, Fab-фрагмент биспецифического антитела 1HVL2.3 к VEGF/IL-1бета, являясь очень стабильным, характеризуется аффинностью к IL-1бета в наномолярном диапазоне, а также значительной гидрофобностью. Для лечения сосудистых заболеваний глаз, которые требуют инъекции терапевтического средства в глаз, желательно обеспечивать терапевтическое средство с высокой аффинностью к целевому антигену и в очень высоких концентрациях для увеличения длительности терапевтического эффекта и для минимизации неудобств для пациента. Для предполагаемой цели, таким образом, желательно увеличивать аффинность и снижать гидрофобность антитела, чтобы обеспечить растворимость в изотоничном буфере в высоких концентрациях.
Следовательно, для клинического применения антитело требовало дополнительного улучшения, например, в отношении связывания с IL-1бета (в частности, путем увеличения скорости диссоциации) и снижения гидрофобности. Несколько кругов созревания проводили путем введения отдельных аминокислотных замен в домен VH и VL. При созреваниях кандидантные антитела, полученные из антитела 1HVL2.3, отбирали и выбирали на основе их желаемых свойств относительно выхода, аффинности, одновременного связывания с антигеном, гидрофильности, стабильности, вязкости и других параметров.
Улучшенные кандидантные антитела 1HVL5.15, 1HVL12.85 и RO7200394 выбирали из множества протестированных молекул кандидатных антител. Аминокислотные последовательности этих улучшенных Fab-фрагментов биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета идентифицированы в таблице 3.
Фигуры 2 и 3 показывают выравнивание вариабельных доменов тяжелой цепи и вариабельных доменов легкой цепи полученных Fab-фрагментов биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета. Нумерация положений аминокислот в доменах VH и VL представлена согласно системе нумерации по Кабату. Для простоты нумерация включена на фигуре, дополнительно показывая скелет и положения аминокислот CDR.
Пример 5:
Кинетика связывания с антигеном улучшенных Fab-фрагментов биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета
Кинетику связывания с VEGF и IL-1бета для кандидатных антител оценивали, как описано в примере 3, используя указанные Fab-фрагменты биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета (аминокислотная последовательность, как показано в таблице 3). Для сравнения показана кинетика связывания с антигеном антитела 0032 к VEGF/IL-1бета уровня техники, полноразмерного антитела IgG, раскрытого в WO2016/075034.
Результаты кинетики связывания с IL-1бета показаны в таблице 4 и таблице 5.
Кинетика связывания с IL-1бета других частиц и родственных белков оценивали для антител 1HVL5.15 и 1HVL12.85 при помощи ППР, используя такую же экспериментальную установку, как описано в примере 3. Не наблюдали никакого связывания в отношении IL-1бета крыс, IL-1бета свиней, IL-1 альфа человека и IL-1RA человека. Слабое связывание наблюдали в отношении IL-1бета мышей и кроликов.
Результаты для кинетики связывания с VEGF показаны в таблице 6.
Одновременное связывание с антигенами VEGF и IL-1бета кандидатных антител оценивали следующим образом:
Захватывающее антитело к His (GE Healthcare 28995056) иммобилизировали на Sensor Chip С1 серии S (GE Healthcare 29104990), используя стандартную химию аминного связывания, что давало плотность поверхности приблизительно 500 единиц резонанса (ЕР). В качестве подвижного буфера и буфера для разведения использовали HBS-P+(10 мМ ГЭПЭС, 150 мМ NaCl, рН 7,4, 0,05% сурфактанта Р20). VEGF 121-His человека иммобилизировали на поверхности с последующими инъекциями кандидатных антител и IL-1бета. Поверхность регенерировали путем введения 10 мМ глицина с рН 1,5 в течение 60 с. Объемную разницу показателя преломления корректировали путем вычитания контрольных введений и путем вычитания ответа, полученного от контрольной проточной ячейки без иммобилизованного VEGF 121 человека.
Одновременное связывание кандидатных антител с VEGF и IL-1бета подтверждали для всех улучшенных Fab-фрагментов биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета, т.е. 1HVL5.15, 1HVL12.85 и RO7200394. Фигура 4 показывает одновременное связывание антитела 1HVL12.85 к VEGF/IL-1бета. Фигура 5 показывает одновременное связывание антитела RO7200394 к VEGF/IL-1бета.
Одновременное связывание с антигенами полноразмерного антитела 0032 IgG уровня техники (WO2016/075034) также оценивали при помощи такой же экспериментальной установки. Результаты показаны на фигуре 6.
Пример 6:
Ингибирование связывания VEGF и IL-1бета с соответствующими рецепторами
Анализ ингибирования рецепторов
Ингибирование связывания VEGF и IL-1бета с их соответствующими рецепторами, hVEGFR2 и IL-1бетаR1, в присутствии кандидатного антитела RO7200394 (Fab-фрагмент) оценивали, как описано ниже. Для сравнения кинетику антитела 0032 к VEGF/IL-1бета уровня техники (полноразмерного IgG), раскрытого в WO2016/075034, также оценивали.
hVEGFR2 (R&D Systems 357-KD) и IL-1bR1 (Sino Biological Inc. 10126-H02H) иммобилизировали в различных проточных ячейках для Sensor Chip СМ5 серии S (GE Healthcare 29104988), используя стандартную химию аминного связывания, что давало плотности поверхности приблизительно 8000 и 20000 единиц резонанса (ЕР), соответственно. В качестве подвижного буфера и буфера для разведения использовали HBS-P+(10 мМ ГЭПЭС, 150 мМ NaCl, рН 7,4, 0,05% сурфактанта Р20).
Для оценки ингибирования связывания с рецептором VEGF конечную концентрацию 200 нМ RO7200394 или 400 нМ антитела 0032 предварительно инкубировали с 50 нМ VEGF 121. Для оценки ингибирования связывания с рецептором IL-1бета конечную концентрацию 200 нМ RO7200394 или 200 нМ антитела 0032 предварительно инкубировали с 50 нМ IL-1бета. Образцы разводили (1:2) в соответствующем растворе 50 нМ VEGF121 или IL-1бета.
Смеси антитело/лиганд вводили на поверхность VEGFR2 или IL-1R1 в течение 60 с при скорости потока 5 мкл/мин. После фазы диссоциации в течение 60 с поверхность VEGFR2 регенерировали путем введения 5 мМ NaOH в течение 60 с, тогда как поверхность IL-1R1 регенерировали путем введения 10 мМ глицина с рН 3,0, а потом 5 мМ NaOH в течение 60 с каждый. Объемную разницу показателя преломления корректировали путем вычитания контрольных введений и путем вычитания ответа, полученного от контрольной проточной ячейки. Для оценки ответа связывания через 5 секунд после окончания введения отбирали. Полученный ответ в ЕР превращали в ответ связывания относительно исходного сигнала, соответствующего лиганду(ам) без антитела. Значения IC50 рассчитывали при помощи 4-параметрической логистической модели (XLfit, ID Business Solutions Ltd.).
Результаты показаны в таблице 7 и таблице 8; и на фигуре 7А (ингибирование VEGFR2 в присутствии антитела RO7200394), фигуре 7В (ингибирование VEGFR2 в присутствии антитела 0032), фигуре 8А (ингибирование IL-1R1 в присутствии антитела RO7200394) и фигуре 8В (ингибирование IL-1R1 в присутствии антитела 0032).
Показано, что связывание IL-1бета с Fab-фрагментом биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета настоящего изобретения не мешает ингибированию взаимодействия VEGF/VEGFR2. Также связывание VEGF с Fab-фрагментом биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета настоящего изобретения не мешает ингибированию взаимодействия IL-1бета/IL-1бетаR1.
Конкурентный ИФА для VEGF
Использовали следующие буферы: PBS (1x PBS рН 7,4); PBST (1x PBS, дополненный 0,1% об./об. Tween-20); PBST 1% BSA (PBST, дополненный 1% BSA (раствор альбумина бычьей сыворотки 30% от Sigma-Aldrich, А0336)); NaHCO3 (раствор NaHCO3, рН 9,4, полученный от BupH Buffer Packs (ThermoScientific, 28382)); 2% MPBST (PBST, дополненный 2% (масс/об.) сухого обезжиренного молока (Carl Roth, Т145.3)).
96-луночные планшеты (Maxisorp Nunc-Immoplates) покрывали 50 мкл/лунку rhVEGFR-l-Fc (R&D #321-FL-050) с конечной концентрацией 1 мкг/мл в 200 мМ NaHCO3, рН 9,4 в течение 1 часа при комнатной температуре.
При этом Fab-фрагменты антител с различными концентрациями предварительно инкубировали с VEGF для получения премикса Fab антитела-VEGF следующим образом: Серийные разведения Fab-фрагмента антитела получали путем добавления 280 мкл раствора Fab-фрагментов антител (409,6 нМ антитела в PBST-1% BSA) в лунках первого столбца круглодонного 96-луночного планшета PS. Отдельные лунки столбцов 2-12 того же планшета заполняли 140 мкл PBST-1% BSA. Затем разведения 1:2 проводили путем переноса 140 мкл раствора антитела в следующий столбец, путем перемешивания и продолжения переноса 140 мкл этого разбавленного раствора антитела в следующий столбец. Это повторяли до столбца 11. Избыток 140 мкл отбрасывали, чтобы все лунки содержали 140 мкл. Столбец 12 служил в качестве контроля (пустой). Для предварительной инкубации с VEGF круглодонные 96-луночные планшеты PS предварительно заполняли 50 мкл/лунку 2 нМ раствора VEGF121 (Humanzyme, HZ-1206, Lot 0614-01) или 2 нМ VEGF165 (Humanzyme, HZ-1153, Lot 0716-01) в PBST-1%BSA. 50 мкл серийных разведений соответствующего Fab-фрагмента антитела добавляли в VEGF121 или VEGF165, соответственно; тщательно перемешивали и инкубировали в течение 1,5 часов при комнатной температуре.
Покрытые rhVEGFR-1-Fc планшеты промывали дважды с помощью PBST и блокировали в течение 45 мин с помощью 200 мкл 2% MPBST. После смывания раствора MPBST дважды с помощью PBST 50 мкл премикса Fab антитела-VEGF добавляли на планшет и инкубировали в течение 1,5 часов при комнатной температуре. Затем планшеты промывали дважды с помощью PBST. Затем 50 мкл раствора, содержащего биотинилированное антитело к VEGF (R&D, BAF293; разведение 1:2000 в PBST) и SA-HRP (KPL, 14-30-00; разведение 1:2000 в PBST) добавляли и инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре. После 6х промываний с помощью PBST 50 мкл раствора субстрата ТМВ (двухкомпонетный субстрат HRP (KPL, 34021); используемого при комнатной температуре) добавляли и инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре. 50 мкл 1н H2SO4 добавляли и поглощение считывали при 450 нм.
Результаты показаны на фигуре 9 и фигуре 10, и показано улучшение ингибирования связывания с VEGF-R1 для 1HVL12.85 и RO7200394 относительно 1HVL2.3.
Пример 7:
Биофизические свойства улучшенных Fab-фрагментов биспецифических антител к VEGF/IL-1бета (стабильность и гидрофобность)
Указанные биофизические свойства кандидатных антител оценивали, как описано в примере 3, используя указанные Fab-фрагменты биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета (аминокислотная последовательность, как показано в таблице 3).
Таблица 9 показывает термическую стабильность и гидрофобность анализируемых антител. Для сравнения включена термическая стабильность антитела 0032 к VEGF/IL-1бета уровня техники, полноразмерного антитела IgG, раскрытого в WO2016/075034. Хроматограммы из ХГВ показаны на фигуре 11 для Fab-фрагментов биспецифических антител к VEGF/IL-1бета, а на фигуре 12 - для антитела IgG 0032 к VEGF/IL-1бета уровня техники.
Пример 8:
Биофизические свойства улучшенных Fab-фрагментов биспецифических антител к VEGF/IL-1бета (динамическая вязкость)
Вязкость кандидатных антител оценивали следующим образом, используя указанные Fab-фрагменты биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета (аминокислотная последовательность, как показано в таблице 3):
Вязкость измеряли при помощи метода с латексным шариком DLS, как описано ранее (Не F et al.; Anal Biochem. 2010 Apr 1;399(1): 141-3). Вкратце, образцы концентрировали до >200 мг/мл (на основе доступности материала) при помощи центрифужных концентрационных устройств, например, Amicon Ultra -0,5 мл фильтровальные центрифуги, Ultracel - 10K, № по каталогу UFC501096.
Серийные разведения от приблизительно 10 мг/мл до максимально выполнимой концентрации получали и Polysorbate 20 и шарики (Nanosphere Size Standards, номинальный диаметр: 300 нм, 1% твердых веществ, ThermoFisher № по каталогу 3300А) добавляли до конечной концентрации 0,02% (PS20) и 0,03% (масс./масс., шарики), соответственно.
Небольшую аликвоту этих образцов центрифугировали в течение 1 минуты при максимальной скорости перед определением концентрации белка путем поглощения UV280.
Оставшийся образец переносили на оптический 384-луночный планшет, покрывали слоем парафинового масла для предотвращения испарения и данные DLS записывали при указанной температуре. Из данных DLS для кажущегося гидродинамического радиуса латексных шариков вязкость раствора рассчитывали, как описано в Не F et al.; выше. Вязкость при наивысшей концентрации указана в таблице 10. Результаты также показаны на фигуре 13 (1HVL12.85) и фигуре 14 (RO7200394).
Результаты показывают, что антитела настоящего изобретения можно составлять в высокой концентрации, содержащей вязкость ниже приемлемого предела вязкости для шприцевания, что составляет до 30 спз. Хотя оба тестируемых антитела показали сильную концентрируемость, эффект более очевиден для антитела RO7200394.
Следовательно, антитела настоящего изобретения являются очень подходящими для глазных применений, поскольку они обеспечивают высокую молярную дозу в ограниченном объеме инъекции, что при объединении с высокой активностью приводит к продолжительному сроку годности и, следовательно, сниженной частоте дозирования, что желательно для снижения сложностей со стороны пациента.
Пример 9:
Химическая стабильность улучшенного Fab-фрагмента биспецифического антитела к VEGF/IL-1бета Тест на химическое разложение:
Образцы антител составляли в 20 мМ His/HisCl, 140 мМ NaCl, рН 6,0, и делили на три аликвоты: одну аликвоту повторно буферизовали в PBS, соответственно, и две аликвоты сохраняли в исходном составе. Аликвоту в PBS и одну аликвоту в His/HisCl инкубировали в течение 2 недель (2 недели) при 40°C (His/NaCl) или 37°С (PBS) в 1 мг/мл, образец в PBS инкубировали дополнительно всего в течение 4 недель (4недели). Третий образец контрольной аликвоты хранили при -80°С. После окончания инкубации образцы анализировали на относительную концентрацию активного вещества (Biacore; концентрация активного вещества обоих подвергнутых обработке аликвот каждого связующего нормализовали до не подвергнутой обработке аликвоты при 4°С), агрегацию (SEC) и фрагментирование (капиллярный электрофорез или SDS-PAGE) и сравнивали с необработанным контролем.
Активность связывания после обработки оценивали следующим образом:
Захватывающее антитело к Fab (GE Healthcare 28958325) иммобилизировали на Sensor Chip СМ5 серии S (GE Healthcare 29104988), используя стандартную химию аминного связывания, что давало плотность поверхности 4000-6000 единиц резонанса (ЕР). В качестве подвижного буфера и буфера для разведения использовали HBS-P+(10 мМ ГЭПЭС, 150 мМ NaCl, рН 7,4, 0,05% сурфактанта Р20). Антитело 1HVL12.85 к VEGF/IL-1бета с концентрацией 2 мкг/мл вводили в течение 60 с при скорости потока 5 мкл/мин. HuVEGF121 (внутренний препарат) или huIL-1beta (Peprotech 200-01 В) с концентрацией 2 мкг/мл каждый вводили в течение 60 с, диссоциацию наблюдали в течение 60 с при скорости потока 5 мкл/мин. Поверхность регенерировали путем двух последовательных впрысков 10 мМ глицина с рН 2,1 в течение 60 с каждый. Объемную разницу показателя преломления корректировали путем вычитания контрольных введений и путем вычитания ответа, полученного от контрольной проточной ячейки. Для оценки ответа связывания через 5 секунд после окончания введения отбирали. Для нормализации сигнала связывания ответ связывания с VEGF или IL-1 бета делили на ответ к Fab. Относительную концентрацию активного вещества рассчитывали путем привязки каждого образца, подвергшегося обработке при температуре, к соответствующему образцу, не подвергавшемуся обработке.
Результаты показаны в таблицах 11 и 12.
Пример 10:
Структурный анализ улучшенного Fab-фрагмента биспецифического антитела 1HVL5.15 к VEGF/IL-1бета
Структурный анализ Fab-фрагмента антитела 1HVL5.15 к VEGF/IL-1бета проводили при помощи рентгенокристаллографии следующим образом:
Комплексообразование и кристаллизация третичного комплекса IL1β-VEGF121 - Fab 1HVL5.15
Для комплексообразования Fab-фрагмент антитела 1HVL5.15 и IL1B человека (Peprotech) смешивали в мольном отношении 1:1,1. После инкубации в течение 16 часов в течение ночи при 4°С, VEGF121 человека (внутренний препарат) добавляли с получением третичного комплекса, который концентрировали до 10 мг/мл. Испытания на исходную кристаллизацию проводили при диффузии паров в сидячей капле при 21°С. Первые микрокристаллы возникали в течение 4 дней из 1,4М малоната натрия. Последующие эксперименты на высеивание давали кристаллы из 0,1 М какодилата натрия рН 5,5, 0,1 М ацетата кальция, 12% PEG8000. Кристаллы непосредственно собирали с планшета для отбора без каких-либо дополнительных этапов оптимизации.
Получение данных и определение структуры
Для сбора данных кристаллы мгновенно охлаждали при 100 K в растворе осадителя с добавлением 15% этиленгликоля в качестве криопротектора. Данные дифракции собирали при длине волны 1,0000 с помощью детектора PILATUS 6М при канале пучка X10SA Swiss Light Source (Villigen, Швейцария). Данные обрабатывали с помощью XDS (Kabsch, W. Acta Cryst. D66, 133-144 (2010)) и наносили на шкалу SADABS (BRUKER). Кристаллы относятся к пространственной группе C2221 с осями ячейки а=177,97 b=286,70 с=105,39 α=β=γ=90° и преломляются для разрешения 2,97 Структуру определяли молекулярной заменой с помощью PHASER (McCoy, A.J. et al. J. Appl. Cryst. 40, 658-674 (2007)), используя координаты связанных внутренних структур Fab-фрагмента, IL1β и pdb входных данных 1MKK для VEGF в качестве моделей поиска. Программы из комплекта ССР4 (Collaborative Computational Project, Number 4 Acta Cryst. D50, 760-763 (1994)) и Buster (Bricogne, G., et al. (2011). Buster version 2.9.5 Cambridge, United Kingdom: Global Phasing Ltd) использовали для уточнения структуры. Перестройку вручную белка, используя разницу электронной плотности, проводили с помощью COOT (Emsley, P., et al. Acta Cryst D66, 486-501 (2010)). Сбор данных и статистика уточнения подытожены в таблице 13. Все графические представления получали с помощью PYMOL (DeLano Scientific, Palo Alto, CA, 2002). Структуру анализировали при помощи программы CONTACT из комплекта ССР4 (Collaborative Computational Project, Number 4 Acta Cryst. D50, 760-763 (1994)) для идентификации остатков паратопа и эпитопа, используя контактное расстояние максимум 4
1 Значения в интервале относятся к наивысшим ячейкам разрешения.
2 Rслитый=∑|I-<I>|/∑I, где I представляет интенсивность.
3 Rрабочий=∑|Fo-<Fc>|/∑Fo, где Fo представляет наблюдаемую, a Fc - рассчитанную амплитуду показателя структуры.
4 Rсвободный рассчитывали на основе 5% всех данных, исключенных при уточнении.
Аминокислотные остатки в контакте с соответствующими антигенами, VEGF и IL-1бета, идентифицировали из кристаллической структуры Fab-фрагмента биспецифического антитела 1HVL5.15 к VEGF/IL-1бета в комплексе. Иллюстрация положения аминокислотных остатков паратопа в доменах VH и VL изображена на фигуре 2 и фигуре 3.
Аминокислоты из легкой цепи CDR1 и CDR3, а также тяжелой цепи CDR2 участвуют в паратопе VEGF. Паратоп VEGF не содержит аминокислоты из легкой цепи CDR2, тяжелой цепи CDR1 и тяжелой цепи CDR3. Паратоп IL-1бета не содержит аминокислоты из легкой цепи CDR2.
Аминокислотные остатки, определенные как участвующие в связывании антигена, идентифицированы в таблице 14 (для аминокислотных остатков вариабельного домена тяжелой цепи) и таблице 15 (для аминокислотных остатков вариабельного домена легкой цепи). Положения аминокислот представлены согласно номерам в системе нумерации по Кабату (такую же нумерацию используют на фигуре 2 и 3). Положения аминокислот, вовлеченных в связывание антигена, идентифицированы по их положению по Кабату в домене VH или VL (см. также нумерацию на фигуре 2 и 3).
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Ф.ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ
<120> Антитело, которое связывается с VEGF и IL-1бета, и способы
применения
<130> P35223 (MME)
<150> EP18215023.5
<151> 2018-12-21
<160> 27
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 115
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен VH 1HVL2.3
<400> 1
Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser
1 5 10 15
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Met Val Phe Ser Trp Asn Ala
20 25 30
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Pro Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe Ile
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Ile Gly Phe Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 2
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен VL 1HVL2.3
<400> 2
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Tyr Arg Ile Ile Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser His Glu Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 3
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR1 1HVL2.3
<400> 3
Trp Asn Ala Met Ser
1 5
<210> 4
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR2 1HVL2.3
<400> 4
Ser Ile Ser Pro Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe Ile
1 5 10 15
Gly
<210> 5
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR3 1HVL2.3
<400> 5
Asp Ile Gly Phe Phe Asp Val
1 5
<210> 6
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR1 1HVL2.3
<400> 6
His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 7
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR2 1HVL2.3
<400> 7
Asp Ala Ser Tyr Arg Ile Ile
1 5
<210> 8
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR3 1HVL2.3, 1HVL12.85, 1HVL5.15 и RO7200394
<400> 8
Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr Thr
1 5
<210> 9
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь Fab-фрагмента 1HVL2.3
<400> 9
Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser
1 5 10 15
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Met Val Phe Ser Trp Asn Ala
20 25 30
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Pro Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe Ile
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Ile Gly Phe Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro
115 120 125
Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val
130 135 140
Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala
145 150 155 160
Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly
165 170 175
Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly
180 185 190
Thr Lys Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys
195 200 205
Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
210 215 220
<210> 10
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> легкая цепь Fab-фрагмента 1HVL2.3
<400> 10
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Tyr Arg Ile Ile Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser His Glu Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 11
<211> 116
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> домен VH 1HVL12.85 и RO7200394
<400> 11
Asp Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Glu Gly Met Val Phe Lys Trp Asn
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe
50 55 60
Ile Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Glu Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 12
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> домен VL 1HVL12.85 и RO7200394
<400> 12
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Lys Tyr Lys His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Lys Glu Asp Gln Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 13
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR1 1HVL12.85, 1HVL5.15 и RO7200394
<400> 13
Trp Asn Asp Met Ser
1 5
<210> 14
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR2 1HVL12.85, 1HVL5.15 и RO7200394
<400> 14
Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe Ile
1 5 10 15
Gly
<210> 15
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> H-CDR3 1HVL12.85, 1HVL5.15 и RO7200394
<400> 15
Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile
1 5
<210> 16
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR1 1HVL12.85 и RO7200394
<400> 16
His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu Val Ala
1 5 10
<210> 17
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR2 1HVL12.85, 1HVL5.15 и RO7200394
<400> 17
Asp Ala Lys Tyr Lys His Leu
1 5
<210> 18
<211> 224
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь Fab-фрагмента 1HVL12.85
<400> 18
Asp Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Glu Gly Met Val Phe Lys Trp Asn
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe
50 55 60
Ile Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Glu Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
180 185 190
Gly Thr Lys Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
210 215 220
<210> 19
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь Fab-фрагмента 1HVL12.85 и RO7200394
<400> 19
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Lys Tyr Lys His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Lys Glu Asp Gln Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 20
<211> 224
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь Fab-фрагмента RO7200394 (SEQ ID NO: 19 с мутацией
K196Q)
<400> 20
Asp Glu Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Glu Gly Met Val Phe Lys Trp Asn
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe
50 55 60
Ile Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Glu Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
180 185 190
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
210 215 220
<210> 21
<211> 116
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> домен VH 1HVL5.15
<400> 21
Asp Glu Thr Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Glu Gly Met Val Phe Lys Trp Asn
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe
50 55 60
Ile Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Glu Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 22
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> домен VL 1HVL5.15
<400> 22
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu
20 25 30
Met Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Lys Tyr Lys His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser His Glu Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 23
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> L-CDR1 1HVL5.15
<400> 23
His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu Met Ala
1 5 10
<210> 24
<211> 224
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> тяжелая цепь Fab-фрагмента 1HVL5.15
<400> 24
Asp Glu Thr Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Glu Gly Met Val Phe Lys Trp Asn
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Lys Lys Gly Asp His Lys Tyr Leu Asn Thr Lys Phe
50 55 60
Ile Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Glu Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Val Gly Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
180 185 190
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
210 215 220
<210> 25
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> легкая цепь Fab-фрагмента 1HVL5.15
<400> 25
Ala Ile Tyr Met His Gln Glu Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys His Gly Ser Tyr Trp Leu Ser Ser Leu
20 25 30
Met Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Lys Tyr Lys His Leu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser His Glu Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Arg Tyr His Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 26
<211> 232
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 26
Met Asn Phe Leu Leu Ser Trp Val His Trp Ser Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Tyr Leu His His Ala Lys Trp Ser Gln Ala Ala Pro Met Ala Glu Gly
20 25 30
Gly Gly Gln Asn His His Glu Val Val Lys Phe Met Asp Val Tyr Gln
35 40 45
Arg Ser Tyr Cys His Pro Ile Glu Thr Leu Val Asp Ile Phe Gln Glu
50 55 60
Tyr Pro Asp Glu Ile Glu Tyr Ile Phe Lys Pro Ser Cys Val Pro Leu
65 70 75 80
Met Arg Cys Gly Gly Cys Cys Asn Asp Glu Gly Leu Glu Cys Val Pro
85 90 95
Thr Glu Glu Ser Asn Ile Thr Met Gln Ile Met Arg Ile Lys Pro His
100 105 110
Gln Gly Gln His Ile Gly Glu Met Ser Phe Leu Gln His Asn Lys Cys
115 120 125
Glu Cys Arg Pro Lys Lys Asp Arg Ala Arg Gln Glu Lys Lys Ser Val
130 135 140
Arg Gly Lys Gly Lys Gly Gln Lys Arg Lys Arg Lys Lys Ser Arg Tyr
145 150 155 160
Lys Ser Trp Ser Val Tyr Val Gly Ala Arg Cys Cys Leu Met Pro Trp
165 170 175
Ser Leu Pro Gly Pro His Pro Cys Gly Pro Cys Ser Glu Arg Arg Lys
180 185 190
His Leu Phe Val Gln Asp Pro Gln Thr Cys Lys Cys Ser Cys Lys Asn
195 200 205
Thr Asp Ser Arg Cys Lys Ala Arg Gln Leu Glu Leu Asn Glu Arg Thr
210 215 220
Cys Arg Cys Asp Lys Pro Arg Arg
225 230
<210> 27
<211> 111
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 27
Met Ala Glu Val Pro Glu Leu Ala Ser Glu Met Met Ala Tyr Tyr Ser
1 5 10 15
Gly Asn Glu Asp Asp Leu Phe Phe Glu Ala Asp Gly Pro Lys Gln Met
20 25 30
Lys Cys Ser Phe Gln Asp Leu Asp Leu Cys Pro Leu Asp Gly Gly Ile
35 40 45
Gln Leu Arg Ile Ser Asp His His Tyr Ser Lys Gly Phe Arg Gln Ala
50 55 60
Ala Ser Val Val Val Ala Met Asp Lys Leu Arg Lys Met Leu Val Pro
65 70 75 80
Cys Pro Gln Thr Phe Gln Glu Asn Asp Leu Ser Thr Phe Phe Pro Phe
85 90 95
Ile Phe Glu Glu Glu Pro Ile Phe Phe Asp Thr Trp Asp Asn Glu
100 105 110
<---
Claims (11)
1. Антитело, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее паратоп VEGF и паратоп IL-1бета в одной родственной паре вариабельного домена легкой цепи (домена VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (домена VH), причем паратоп VEGF содержит аминокислотные остатки из CDR-H2, CDR-L1 и CDR-L3 антитела, причем паратоп IL-1бета содержит аминокислотные остатки из CDR-H1, CDR-H3 и CDR-L2 антитела, в котором антитело включает VH последовательность SEQ ID NO: 11 и VL последовательность SEQ ID NO: 12.
2. Антитело, которое специфически связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, содержащее последовательность VH с SEQ ID NO: 11 и последовательность VL с SEQ ID NO: 12.
3. Антитело по любому из предыдущих пунктов, содержащее аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 20 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 19.
4. Антитело по любому из предыдущих пунктов, причем Fab-фрагмент антитела связывается (i) с VEGF121 человека с KD менее 10 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса, и (ii) с IL-1бета человека с KD менее 30 пМ, что измеряется с помощью поверхностного плазмонного резонанса.
5. Антитело по любому из предыдущих пунктов, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой начала агрегации более 70°С.
6. Антитело по любому из предыдущих пунктов, причем Fab-фрагмент антитела характеризуется температурой плавления более 80°С, что измеряется с помощью динамического рассеяния света.
7. Антитело по любому из предыдущих пунктов, причем антитело представляет собой фрагмент биспецифического антитела.
8. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп. 1-7.
9. Клетка-хозяин, предназначенная для получения антитела по любому из пп. 1-7, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 8.
10. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 8.
11. Способ получения антитела, которое связывается с VEGF человека и с IL-1бета человека, включающий культивирование клетки-хозяина по п. 9 так, чтобы получить антитело.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP18215023.5 | 2018-12-21 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021120697A RU2021120697A (ru) | 2023-01-23 |
RU2816476C2 true RU2816476C2 (ru) | 2024-03-29 |
Family
ID=
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012163520A1 (en) * | 2011-05-27 | 2012-12-06 | Dutalys | Dual targeting |
WO2016075034A1 (en) * | 2014-11-10 | 2016-05-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | ANTI-IL-1beta ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
RU2587616C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2016-06-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Двухвалентные биспецифические антитела |
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2587616C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2016-06-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг | Двухвалентные биспецифические антитела |
WO2012163520A1 (en) * | 2011-05-27 | 2012-12-06 | Dutalys | Dual targeting |
WO2016075034A1 (en) * | 2014-11-10 | 2016-05-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | ANTI-IL-1beta ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JENNY BOSTROM et al. Variants of the Antibody Herceptin That Interact with HER2 and VEGF at the Antigen Binding Site, Science, 2009, 323(5921), 1610-1614. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2018197264A (ja) | ヒトFcRn結合改変抗体及び使用方法 | |
US20230374119A1 (en) | Antibody that binds to vegf-a and ang2 and methods of use | |
JP2023517345A (ja) | 抗インターロイキン-33抗体及びその使用 | |
US20240101657A1 (en) | Antibody that binds to vegf and il-1beta and methods of use | |
US20230105324A1 (en) | Antibody that binds to vegf and pdgf-b and methods of use | |
RU2816476C2 (ru) | Антитело, которое связывается с vegf и il-1бета, и способы применения | |
US20210332142A1 (en) | Tie2-binding agents and methods of use | |
TW202402810A (zh) | 與vegf—a及il6結合之抗體及其使用方法 | |
WO2023086989A1 (en) | Transthyretin (ttr) monomer binding antibodies |