RU2811534C1 - Method of quantitative determination of lysine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in lysine monohydrochloride - Google Patents

Method of quantitative determination of lysine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in lysine monohydrochloride Download PDF

Info

Publication number
RU2811534C1
RU2811534C1 RU2023116723A RU2023116723A RU2811534C1 RU 2811534 C1 RU2811534 C1 RU 2811534C1 RU 2023116723 A RU2023116723 A RU 2023116723A RU 2023116723 A RU2023116723 A RU 2023116723A RU 2811534 C1 RU2811534 C1 RU 2811534C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
lysine
bruker
analyzer
monohydrochloride
glass
Prior art date
Application number
RU2023116723A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Сергей Иванович Николаев
Сергей Олегович Шаповалов
Елена Вячеславовна Корнилова
Ольга Юрьевна Брюхно
Елена Андреевна Липова
Мария Алексеевна Рябова
Сергей Юрьевич Агапов
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ) filed Critical федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный аграрный университет" (ФГБОУ ВО Волгоградский ГАУ)
Application granted granted Critical
Publication of RU2811534C1 publication Critical patent/RU2811534C1/en

Links

Abstract

FIELD: analytical chemistry.
SUBSTANCE: invention can be used in agricultural production, in particular in the feed industry. A method of the quantitative determination of lysine on Bruker MPA or Bruker Tango-R infrared analyzers in lysine monohydrochloride involves determining the amino acid on the analyzer. Before starting the work on the Bruker MPA or Bruker Tango-R infrared analyzers, the background is measured for 60 seconds, then lysine in monohydrochloride is selected on the display, after which the sample is placed on the bottom of two glasses of the same capacity, while the sample layer completely covers the bottom of each glass without the possibility of air bubbles and transparency, then the first glass is placed in the analyzer and measurement begins, after the message appears on the analyzer screen: “1 of 2 measurements taken. If you are ready to continue, click OK” place a second glass in the analyzer and start the analyzer again, after the second measurement the result of the measurement of lysine in lysine sulfate will be displayed on the screen.
EFFECT: ability to quickly and accurately quantify lysine in lysine monohydrochloride without the use of any chemical reagents and without any sample preparation.
1 cl, 1 tbl

Description

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству, в частности к кормопроизводству, и может быть использовано в комбикормовой промышленности для быстрого и точного количественного определения лизина в лизине моногидрохлориде.The invention relates to agricultural production, in particular to feed production, and can be used in the feed industry for the rapid and accurate quantitative determination of lysine in lysine monohydrochloride.

Задача - возможность быстрого и точного количественного определения лизина в лизине моногидрохлориде без использования химических реактивов и без подготовки проб.The goal is the ability to quickly and accurately quantify lysine in lysine monohydrochloride without the use of chemical reagents and without sample preparation.

Технический результат - возможность быстрого и точного количественного определения лизина в лизине моногидрохлориде без использования химических реактивов и без подготовки проб.The technical result is the ability to quickly and accurately quantify lysine in lysine monohydrochloride without the use of chemical reagents and without sample preparation.

Технический результат достигается способом количественного определения лизина, на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R в лизине моногидрохлориде, включающем определение аминокислоты на анализаторе отличающийся тем, что перед началом работы на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R проводят измерение фона в течении 60 сек., затем на дисплее выбирают аминокислоту лизин, после чего образец лизина в моногидрохлориде помещают на дно двух стаканов, одинаковой емкостью, при этом слой образца закрывает полностью дно каждого стакана без возможности наличия пузырьков воздуха и прозрачности, затем первый стакан помещают в анализатор и начинают измерение, после появления на экране анализатора сообщения: «Проведено 1 из 2 измерений. Если Вы готовы продолжить нажмите ОК», в анализатор помещают второй стакан и снова запускают анализатор, после второго измерения на экране отобразится результат измерений лизина в лизине моногидрохлориде.The technical result is achieved by a method for the quantitative determination of lysine, on infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R in lysine monohydrochloride, including the determination of amino acids on the analyzer, characterized in that before starting work on infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R, a background measurement is carried out for 60 sec., then the amino acid lysine is selected on the display, after which a sample of lysine in monohydrochloride is placed on the bottom of two glasses of the same capacity, while the sample layer completely covers the bottom of each glass without the possibility of air bubbles and transparency, then the first glass is placed in the analyzer and begin measurement, after the message appears on the analyzer screen: “1 of 2 measurements has been carried out. If you are ready to continue, click OK”, place a second glass in the analyzer and start the analyzer again, after the second measurement, the result of the measurement of lysine in lysine monohydrochloride will be displayed on the screen.

Известен способ определения количества лизина в лизине моногидрохлориде по ГОСТ 33428-2015 (ISO 17180:2013). Пробы лизина моногидрохлорида обрабатывают раствором соляной кислоты, разбавляют цитратным буфером и добавляют внутренний стандарт норлейцина. Лизин определяют на аминокислотном анализаторе или высокоэффективной жидкостной хроматографией с использованием катионообменной смолы и цитратного буфера в качестве элюента, проводят дериватизацию нингидрином или ортофталдиальдегидом (ОРА) и детектируют с помощью фотометрического или флуоресцентного детектора соответственно.There is a known method for determining the amount of lysine in lysine monohydrochloride according to GOST 33428-2015 (ISO 17180:2013). Lysine monohydrochloride samples are treated with hydrochloric acid solution, diluted with citrate buffer, and norleucine internal standard is added. Lysine is determined by amino acid analyzer or high performance liquid chromatography using a cation exchange resin and citrate buffer as eluent, derivatized with ninhydrin or orthophthaldialdehyde (OPA) and detected using a photometric or fluorescent detector, respectively.

Первоначально готовят растворы:Initially prepare solutions:

1. Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 7,5 моль/дм3.1. Preparation of a solution of sodium hydroxide with a molar concentration of 7.5 mol/dm 3 .

Гидроокись натрия массой 300,0 г растворяют в воде небольшими порциями при перемешивании и после охлаждения доводят объем раствора водой до 1000 см3.Sodium hydroxide weighing 300.0 g is dissolved in water in small portions with stirring and, after cooling, the volume of the solution is adjusted to 1000 cm 3 with water.

2. Приготовление раствора соляной кислотымолярной концентрации 0,1 моль/дм3.2. Preparation of a solution of hydrochloric acid with a molar concentration of 0.1 mol/dm 3 .

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 8,2 см соляной кислоты, добавляют около 900 см3 воды, тщательно перемешивают и доводят водой объем раствора до метки.Place 8.2 cm of hydrochloric acid in a volumetric flask with a capacity of 1000 cm 3 , add about 900 cm 3 of water, mix thoroughly and adjust the volume of the solution to the mark with water.

3. Приготовление цитратного буфера 2,20 ед. рН3. Preparation of citrate buffer 2.20 units. pH

В стакан вместимостью 1000 см3 помещают 19,61 г двуводного лимоннокислого натрия, 1 г фенола, 5 см тиодигликоля, 16,5 см3 соляной кислоты и растворяют их в 800 см бидистиллированной воды (фенол используют для сохранения буферного раствора). Доводят рН раствора до 2,20 ед. рН несколькими каплями раствора соляной кислоты или раствора гидроокиси натрия.19.61 g of sodium citrate dihydrate, 1 g of phenol, 5 cm of thiodiglycol, 16.5 cm 3 of hydrochloric acid are placed in a glass with a capacity of 1000 cm 3 and dissolved in 800 cm of bidistilled water (phenol is used to preserve the buffer solution). Adjust the pH of the solution to 2.20 units. pH with a few drops of hydrochloric acid solution or sodium hydroxide solution.

4. Приготовление основного раствора нор лейцина молярной концентрации 2,5 ммоль/дм3.4. Preparation of a stock solution of nor leucine with a molar concentration of 2.5 mmol/dm 3 .

В стакане вместимостью 100 см3 растворяют 0,328 г норлейцина в растворе соляной кислоты, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и доводят объем до метки тем же раствором.In a glass with a capacity of 100 cm 3 , 0.328 g of norleucine is dissolved in a solution of hydrochloric acid, transferred quantitatively to a volumetric flask with a capacity of 1000 cm 3 and the volume is adjusted to the mark with the same solution.

5. Приготовление основного раствора аминокислоты лизина молярной концентрации 2,5 ммоль/дм3.5. Preparation of a stock solution of the amino acid lysine with a molar concentration of 2.5 mmol/dm 3 .

В три мерные колбы вместимостью 1000 см3 помещают соответственно 0,456 г лизина гидрохлорида, доводят объем в колбах до метки раствором соляной кислоты.0.456 g of lysine hydrochloride is placed in three volumetric flasks with a capacity of 1000 cm 3 , and the volume in the flasks is adjusted to the mark with a solution of hydrochloric acid.

6. Приготовление градуировочных растворов аминокислот6. Preparation of amino acid calibration solutions

6.1 Весовое разведение6.1 Weight breeding

В колбы вместимостью 50 см3 взвешивают по 2,5 см основного раствора лизина и 2,5 см3 основного раствора норлейцина. Доводят объем раствора в колбе до метки цитратным буфером.2.5 cm of lysine stock solution and 2.5 cm3 of norleucine stock solution are weighed into flasks with a capacity of 50 cm 3 . Bring the volume of solution in the flask to the mark with citrate buffer.

Подготовка пробSample preparation

Пробу измельчают на лабораторной мельнице или в ступке до прохода через сито с размером стороны ячейки 0,25 мм и тщательно перемешивают. Для каждой пробы проводят два параллельных испытания в условиях повторяемости.The sample is ground in a laboratory mill or in a mortar until it passes through a sieve with a mesh size of 0.25 mm and mixed thoroughly. For each sample, two parallel tests are carried out under repeatability conditions.

Взвешивают 0,45-0,47 г лизина гидрохлорида, навески переносят во взвешенные конические колбы вместимостью 500 см3 и добавляют примерно по 400 см3 раствора соляной кислоты. Колбы помещают на магнитную мешалку и перемешивают содержимое в течение 30 мин. Взвешивают колбы с растворами и вычисляют массу экстракционного раствора.Weigh 0.45-0.47 g of lysine hydrochloride, transfer the portions into weighed conical flasks with a capacity of 500 cm 3 and add approximately 400 cm 3 of hydrochloric acid solution. The flasks are placed on a magnetic stirrer and the contents are stirred for 30 minutes. Weigh the flasks with solutions and calculate the mass of the extraction solution.

С помощью пипеточного дозатора берут аликвоту 1 см3 в предварительно взвешенную мерную колбу вместимостью 50 см3 и определяют массу аликвоты. В ту же колбу помещают 2,5 см3 раствора норлейцина, взвешивают колбу и вычисляют его массу затем доводят объем раствора до метки цитратным буфером и тщательно перемешивают.Using a pipette dispenser, take an aliquot of 1 cm 3 into a pre-weighed volumetric flask with a capacity of 50 cm 3 and determine the mass of the aliquot. Place 2.5 cm 3 of norleucine solution in the same flask, weigh the flask and calculate its mass then bring the volume of the solution to the mark with citrate buffer and mix thoroughly.

Необходимый объем анализируемого раствора фильтруют через мембранный фильтр в пиалу и вводят в аминокислотный анализатор или систему ВЭЖХ. Вводимый объем, как правило, составляет 20-50 мм.The required volume of the analyzed solution is filtered through a membrane filter into a bowl and introduced into an amino acid analyzer or HPLC system. The injected volume is usually 20-50 mm.

Хроматографическая система должна обеспечивать линейную зависимость в диапазоне концентраций градуировочных растворов.The chromatographic system must provide a linear relationship over the concentration range of the calibration solutions.

Содержание лизина в анализируемых пробах определяют с использованием градуировочных растворов. Для того чтобы убедиться в отсутствии дрейфа, для контроля стабильности вводят градуировочный раствор после каждых четырех определений. Если при этом полученные результаты определения массовой концентрации аминокислоты в градуировочном растворе не укладываются в диапазон от 99% до 101%, то градуировку проводят заново.The lysine content in the analyzed samples is determined using calibration solutions. To ensure that there is no drift, a calibration solution is injected after every four determinations to monitor stability. If the results obtained for determining the mass concentration of an amino acid in the calibration solution do not fall within the range from 99% to 101%, then the calibration is carried out again.

Определяют площади пиков градуировочных растворов и анализируемых растворов испытуемых проб и рассчитывают массовую долю аминокислоты в пробе.The peak areas of the calibration solutions and analyzed solutions of the test samples are determined and the mass fraction of the amino acid in the sample is calculated.

Вычисляют коэффициент чувствительности для лизина по формулеCalculate the sensitivity coefficient for lysine using the formula

Где - площадь пика норлейцина в градуировочном растворе;Where - peak area of norleucine in the calibration solution;

- масса 2,5 смз основного раствора аминокислоты, г; - mass of 2.5 ml of amino acid stock solution, g;

- площадь лика аминокислоты в градуировочном растворе; - area of the amino acid face in the calibration solution;

- масса 2,5 см* основного раствора норлейцина, г. - mass of 2.5 cm* of norleucine stock solution, g.

Вычисляют массовую долю аминокислоты в пробе Waa, %, используя формулуCalculate the mass fraction of amino acid in the sample Waa, %, using the formula

Где - площадь пика аминокислоты в анализируемом растворе;Where - peak area of the amino acid in the analyzed solution;

- коэффициент чувствительности аминокислоты; - amino acid sensitivity coefficient;

- концентрация аминокислоты в основном растворе, г/дм3, предполагая, что 1000 см3 раствора весит 1 кг, г/кг; - concentration of amino acid in the main solution, g/dm 3 , assuming that 1000 cm 3 of solution weighs 1 kg, g/kg;

- масса 2,5 см3 основного стандартного раствора норлейцина в анализируемом растворе, г; - mass of 2.5 cm 3 of the main standard solution of norleucine in the analyzed solution, g;

- масса экстракционного раствора, г; - mass of extraction solution, g;

100 - коэффициент перевода результата в проценты;100 - coefficient for converting the result into percentage;

- площадь пика норлейцина в анализируемом растворе; - peak area of norleucine in the analyzed solution;

- масса навески, г; - weight of the sample, g;

- масса используемой аликвоты экстракционного раствора, г; - mass of the extraction solution aliquot used, g;

1000 - коэффициент согласования единиц массы.1000 is the coefficient of coordination of mass units.

Полученная массовая доля лизина гидрохлорида может быть пересчитана в массовую долю лизина %, по формулеThe resulting mass fraction of lysine hydrochloride can be recalculated into the mass fraction of lysine%, according to the formula

ГдеWhere

- - массовая доля лизина гидрохлорида, %;- - mass fraction of lysine hydrochloride, %;

- 1,25 - коэффициент пересчета лизина гидрохлорида в лизин.- 1.25 - conversion factor of lysine hydrochloride to lysine.

Общими недостатком известного технического решения является, то что представленный способы позволяют определить содержание лизина в лизине моногидрохлориде только при использовании дорогостоящего оборудования, расходных материалов и вспомогательного оборудования, так же необходим высококвалифицированный специалист и время проведения исследования составляет около 5-6 часов.A common disadvantage of the known technical solution is that the presented methods make it possible to determine the lysine content in lysine monohydrochloride only using expensive equipment, consumables and auxiliary equipment; a highly qualified specialist is also required and the research time is about 5-6 hours.

Пример конкретного выполненияExample of concrete execution

Перед началом работы на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R проводили измерение фона (60 сек.), выбирали продукт - лизин моногидрохлорид, затем заполняли строки в описании образца. Образец помещали в два стакана, так чтобы дно было полностью заполнено, чтобы не было пузырьков воздуха, и слой образца не был прозрачным.Before starting work, the background was measured (60 sec.) using infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R, the product was selected - lysine monohydrochloride, then the lines in the sample description were filled in. The sample was placed in two glasses so that the bottom was completely filled, so that there were no air bubbles and the sample layer was not transparent.

Первый стакан ставили на прибор и нажимали кнопку ИЗМЕРЕНИЕ.The first glass was placed on the device and the MEASURE button was pressed.

Как только измерение заканчивалось на экране появлялась сообщение: «Проведено 1 из 2 измерений. Если Вы готовы продолжить нажмите ОК». Ставили следующий стакан на прибор и нажимали ОК. После измерения второго стакана, на экране отображался результат измерений. Результаты анализа представлены в таблице 1.As soon as the measurement was completed, a message appeared on the screen: “1 of 2 measurements completed. If you are ready to continue, click OK." Place the next glass on the device and press OK. After measuring the second glass, the measurement result was displayed on the screen. The results of the analysis are presented in Table 1.

Так из представленных в таблице 1 позиций видно, что проведенные анализы стандартных образцов лизина на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R соответствует норме содержания лизина в лизине моногидрохлориде, от 78,8 до 80,4, что в свою очередь является допустимым значением количества лизина в лизине моногидрохлориде.Thus, from the positions presented in Table 1, it can be seen that the analyzes of standard samples of lysine on infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R correspond to the norm for the content of lysine in lysine monohydrochloride, from 78.8 to 80.4, which in turn is the permissible value of the amount lysine in lysine monohydrochloride.

Claims (1)

Способ количественного определения лизина на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R в лизине моногидрохлориде, включающий определение аминокислоты на анализаторе, отличающийся тем, что перед началом работы на инфракрасных анализаторах Bruker МРА или Bruker Tango-R проводят измерение фона в течение 60 с, затем на дисплее выбирают аминокислоту лизин, после чего образец лизина в моногидрохлориде помещают на дно двух стаканов одинаковой емкостью, при этом слой образца закрывает полностью дно каждого стакана без возможности наличия пузырьков воздуха и прозрачности, затем первый стакан помещают в анализатор и начинают измерение, после появления на экране анализатора сообщения: «Проведено 1 из 2 измерений. Если Вы готовы продолжить, нажмите ОК» в анализатор помещают второй стакан и снова запускают анализатор, после второго измерения на экране отобразится результат измерений лизина в лизине моногидрохлориде.A method for the quantitative determination of lysine on infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R in lysine monohydrochloride, including determination of an amino acid on the analyzer, characterized in that before starting work on infrared analyzers Bruker MPA or Bruker Tango-R, the background is measured for 60 s, then the amino acid lysine is selected on the display, after which a sample of lysine in monohydrochloride is placed on the bottom of two glasses of the same capacity, while the sample layer completely covers the bottom of each glass without the possibility of air bubbles and transparency, then the first glass is placed in the analyzer and measurement begins, after appearing on message on the analyzer screen: “1 of 2 measurements have been taken. If you are ready to continue, click OK” place a second glass in the analyzer and start the analyzer again, after the second measurement the result of the measurement of lysine in lysine monohydrochloride will be displayed on the screen.
RU2023116723A 2023-06-23 Method of quantitative determination of lysine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in lysine monohydrochloride RU2811534C1 (en)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2811534C1 true RU2811534C1 (en) 2024-01-15

Family

ID=

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1387417A1 (en) * 1986-08-05 1990-08-30 Предприятие П/Я М-5629 Method of determining l-lysine
RU2263307C2 (en) * 2003-07-21 2005-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "Шебекинский завод кормовых концентратов" Method for determination of content of free amino acids lysine and/or methionine in fodder agents
RU2299433C1 (en) * 2006-04-07 2007-05-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная технологическая академия Method for determination of lysine in aqueous solution
RU2484460C2 (en) * 2011-09-15 2013-06-10 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Университет Имени Н.Г. Чернышевского" METHOD OF DETECTING LYSINE IN MIXTURE OF α-AMINO ACIDS

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1387417A1 (en) * 1986-08-05 1990-08-30 Предприятие П/Я М-5629 Method of determining l-lysine
RU2263307C2 (en) * 2003-07-21 2005-10-27 Общество с ограниченной ответственностью "Шебекинский завод кормовых концентратов" Method for determination of content of free amino acids lysine and/or methionine in fodder agents
RU2299433C1 (en) * 2006-04-07 2007-05-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная технологическая академия Method for determination of lysine in aqueous solution
RU2484460C2 (en) * 2011-09-15 2013-06-10 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Университет Имени Н.Г. Чернышевского" METHOD OF DETECTING LYSINE IN MIXTURE OF α-AMINO ACIDS

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ГОСТ 33428-2015 (ISO 17180: 2013) "КОРМА, ПРЕМИКСЫ, ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЛИЗИНА, МЕТИОНИНА И ТРЕОНИНА", 2015. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110726803A (en) Method for determining amino value by automatic potentiometric titration
CN104792775A (en) An economical and rapid type test pack for colorimetric determination of COD in a water body and a determination method
KR102099458B1 (en) Measurement method for clay content contained in fine aggregate
RU2811534C1 (en) Method of quantitative determination of lysine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in lysine monohydrochloride
CN102353606A (en) Method for detecting distribution uniformity of colloid in colloid battery
RU2811526C1 (en) Method for quantitative determination of lysine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in lysine sulfate
CN103293175A (en) Method for measuring chemical components of liquid sodium silicate
RU2811528C1 (en) Method of quantitative determination of threonine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in feed threonine
CN108169145A (en) A kind of kit for measuring serum complement C1q and its preparation application method
CN108627652B (en) It is a kind of to detect based on simple grain diameter and simultaneously the kit of RBP ELISA in serum and urine specimen
CN104048960B (en) Rapid detection method for oxidation degree of grease and testing box
CN112858561A (en) Hyperbolic method for determining casein content in formula milk powder
RU2811527C1 (en) Method of quantitative determination of valine on infrared analyzers bruker mpa or bruker tango-r in feed valine
CN106680062A (en) Method for determining content of anionic surfactant by utilizing resonance rayleigh scattering method
CN110133280A (en) A kind of measuring method of the glycation ratio of hemoglobin of β chain variation
Borges et al. Constant-current coulometry and ion chromatography bromide determination to characterize the purity of the potassium chloride
CN104062285A (en) Determination method for contents of calcium, aluminum and silicon elements in solid surface materials
CN106645751A (en) Kit for detecting content of fibrinogen
RU2751655C1 (en) Method for the simultaneous quantitative determination of calcium, phosphorus and sodium on a skalar san ++ flow-through analyzer in compound feeds and compound feed raw materials
CN102192971B (en) Disintegration time limit testing standard substance and preparation method thereof
CN109613237A (en) A kind of cystatin C detection kit
CN107036989B (en) A method of measurement chrome tanning agent active constituent content
JPS62842A (en) Analysis of component by using calibration curve and calibration curve chart for component analysis
CN110441437A (en) A kind of measuring method of Michaelis acid content
CN108196066A (en) A kind of kit for measuring calcium sozin and its preparation application method