RU2802519C1

RU2802519C1 - Nutrient medium for aliivibrio cultivation

Info

Publication number: RU2802519C1
Application number: RU2023103900A
Authority: RU
Inventors: Владимир Анатольевич Чистяков; Мария Сергеевна Мазанко; Евгения Валерьевна Празднова; Тимур Викторович Белик; Александр Германович Шелепов
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "АгроХолод" (ООО "АгроХолод")
Filing date: 2023-02-20
Publication date: 2023-08-30

Abstract

FIELD: microbiology; biotechnology.

SUBSTANCE: nutrient medium for growing bioluminescent bacteria of the genus Aliivibrio is proposed, which includes LB medium with the addition of 2% sucrose as a nutrient base.

EFFECT: increase in the intensity of bioluminescence of Aliivibrio microorganisms.

1 cl, 1 tbl, 1 ex

Description

Aliivibrio являются биолюминесцентными грамотрицательными микроорганизмами, факультативными анаэробами, колонизирующими некоторых морских животных, также часто встречаются в морской воде. Некоторые штаммы бактерий рода Aliivibrio широко используются для исследований в области биолюминесценции, чувства кворума, а также для исследования симбиотических механизмов «микроорганизм - хозяин».Aliivibrio are bioluminescent gram-negative microorganisms, facultative anaerobes that colonize some marine animals and are also commonly found in seawater. Some strains of bacteria of the genus Aliivibrio are widely used for research in the field of bioluminescence, quorum sensing, as well as for the study of symbiotic microorganism-host mechanisms.

Aliivibrio культивируется на многих натуральных и синтетических средах при температуре 20-25°С. Через сутки культура образует мелкие полупрозрачные колонии на твердых средах, либо пристеночное кольцо, помутнение среды и образование пленки на жидких средах. Интенсивность и вообще наличие биолюминесценции варьирует в зависимости от состава питательной среды.Aliivibrio is cultivated on many natural and synthetic media at a temperature of 20-25°C. After 24 hours, the culture forms small translucent colonies on solid media, or a wall ring, turbidity of the medium and the formation of a film on liquid media. The intensity and general presence of bioluminescence varies depending on the composition of the nutrient medium.

Оптимальной по цене и доступности питательной средой для культивирования микроорганизмов Aliivibrio считалась среда LB с добавлением 1,7% NaCl [2], однако через 1 сутки культивирования при температуре 20°С количество колоний бактерий или интенсивность биолюминесценции зачастую оказывались недостаточными для дальнейшего проведения эксперимента. Также известна среда для выращивания биолюминесцентных бактерий [1], однако и при выращивании на данной среде люминесценция Aliivibrio не проявляется в необходимой степени.The optimal nutrient medium for the cultivation of Aliivibrio microorganisms in terms of price and availability was considered to be LB medium with the addition of 1.7% NaCl [2], however, after 1 day of cultivation at a temperature of 20°C, the number of bacterial colonies or the intensity of bioluminescence were often insufficient for further experimentation. A medium for growing bioluminescent bacteria is also known [1], however, even when grown on this medium, the luminescence of Aliivibrio does not manifest itself to the required extent.

Было установлено, что при добавлении в среду LB 2% сахарозы уже через 18 часов культивации при подходящей температуре Aliivibrio демонстрировали достаточный рост и яркую биолюминесценцию.It was found that when 2% sucrose was added to LB medium, after 18 hours of cultivation at a suitable temperature, Aliivibrio showed sufficient growth and bright bioluminescence.

Пример 1Example 1

Культура Aliivibrio logei высевалась на чашки Петри со средой, приготовленной согласно источнику [1], источнику [2], и по предложенной рецептуре. Чашки помещались в термостат с оптимальными условиями культивирования, и спустя 24 часа проводилась оценка интенсивности биолюминесценции.The Aliivibrio logei culture was sown on Petri dishes with a medium prepared according to the source [1], source [2], and according to the proposed recipe. The dishes were placed in a thermostat with optimal cultivation conditions, and after 24 hours the intensity of bioluminescence was assessed.

Результаты представлены в таблице 1.The results are presented in Table 1.

Как видно из представленных результатов, предложенная рецептура среды обеспечивает более высокий уровень люминесценции, чем известные составы.As can be seen from the presented results, the proposed medium formulation provides a higher level of luminescence than known compositions.

Список цитируемых источниковList of cited sources

1. Патент RU 2368658, МПК C12N 1/20, Сазыкина Марина Александровна (RU), Цыбульский Игорь Евгеньевич (RU), Абросимова Ксения Сергеевна (RU).1. Patent RU 2368658, IPC C12N 1/20, Sazykina Marina Aleksandrovna (RU), Tsybulsky Igor Evgenievich (RU), Abrosimova Ksenia Sergeevna (RU).

2. Патент RU 2342434, МПК C12Q 1/02, C12R 1/63, Марина Александровна Сазыкина (RU), Игорь Евгеньевич Цыбульский (RU).2. Patent RU 2342434, IPC C12Q 1/02, C12R 1/63, Marina Aleksandrovna Sazykina (RU), Igor Evgenievich Tsybulsky (RU).

Claims

Nutrient medium for growing bioluminescent bacteria of the genus Aliivibrio, characterized in that the nutrient base is LB medium with the addition of 2% sucrose.