RU2801166C1 - [n'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid - Google Patents

[n'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid Download PDF

Info

Publication number
RU2801166C1
RU2801166C1 RU2023102869A RU2023102869A RU2801166C1 RU 2801166 C1 RU2801166 C1 RU 2801166C1 RU 2023102869 A RU2023102869 A RU 2023102869A RU 2023102869 A RU2023102869 A RU 2023102869A RU 2801166 C1 RU2801166 C1 RU 2801166C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nmr
dmso
ome
secoestra
methoxy
Prior art date
Application number
RU2023102869A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Алексей Игоревич Иловайский
Валентина Михайловна Меркулова
Елена Ивановна Чернобурова
Марина Анатольевна Щетинина
Игорь Викторович Заварзин
Александр Олегович Терентьев
Александр Михайлович Щербаков
Ольга Евгеньевна Андреева
Диана Игоревна Сальникова
Original Assignee
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН)
Filing date
Publication date
Application filed by ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН) filed Critical ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН)
Application granted granted Critical
Publication of RU2801166C1 publication Critical patent/RU2801166C1/en

Links

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: invention relates to new [N'(iso)quinolylmethylene]hydrazides 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-triene-17-oic acid of the following general formula, which have antiproliferative activity against MCF-7 breast cancer cells and can be used in medicine, veterinary medicine, chemical and pharmaceutical industry and biotechnology.
R1 and R2=H, Me, OMe, Cl or F
EFFECT: obtaining [n'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid.
2 cl, 4 tbl, 22 ex

Description

Изобретение относится к новым неописанным биологически активным соединениям, конкретно, новым [N'-(изо)хинолилметилен]гидразидам 3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты общей формулы:The invention relates to new undescribed biologically active compounds, specifically, new [N'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid of the general formula:

R1 и R2 = Н, Me, ОМе, Cl или F.R 1 and R 2 \u003d H, Me, OMe, Cl or F.

Предлагаемые соединения общей формулы I обладают антипролиферативной активностью в отношении эстрогензависимых клеток рака молочной железы MCF-7 и могут найти применение в медицине, ветеринарии, химико-фармацевтической промышленности и в биотехнологиях. Рак, неконтролируемое, быстрое и патологическое размножение аномальных клеток, является одной из основных проблем здравоохранения во всем мире. По данным ВОЗ, ведущим онкологическим заболеванием у женщин является рак молочной железы. Однако применяемое в настоящее время лечение бывает не всегда эффективным [V. Wadhwa, N. Patel, D. Grover, F.S. Ali, N. Thosani, Interventional gastroenterology in oncology, CA Cancer J Clin. 2022, 1-34; R.L. Siegel, K.D. Miller, H.E. Fuchs, A. Jemal, Cancer Statistics, 2021, CA Cancer J Clin. 2021, 71, 7-33].The proposed compounds of general formula I have antiproliferative activity against estrogen-dependent breast cancer cells MCF-7 and can be used in medicine, veterinary medicine, pharmaceutical industry and biotechnology. Cancer, the uncontrolled, rapid and pathological reproduction of abnormal cells, is one of the major public health problems worldwide. According to WHO, the leading cancer in women is breast cancer. However, currently used treatment is not always effective [V. Wadhwa, N. Patel, D. Grover, F.S. Ali, N. Thosani, Interventional gastroenterology in oncology, CA Cancer J Clin. 2022, 1-34; R.L. Siegel, K.D. Miller, H.E. Fuchs, A. Jemal, Cancer Statistics, 2021, CA Cancer J Clin. 2021, 71, 7-33].

Большое значение для лечения гормонозависимых онкологических заболеваний женщин имеют химиотерапевтические препараты стероидной структуры. Они образуют уникальную группу в семействе противоопухолевых средств. В повседневной клинической практике применяют стероидные препараты, такие как фулвестрант формулы:Chemotherapeutic drugs of steroid structure are of great importance for the treatment of hormone-dependent oncological diseases in women. They form a unique group in the anticancer family. In everyday clinical practice, steroid drugs are used, such as fulvestrant of the formula:

сульфамат эстрона (ЕМАТЕ) формулы: экземестан формулы: estrone sulfamate (EMATE) formulas: exemestane formulas:

[R. Minorics, I. Zupko, Steroidal Anticancer Agents: An Overview of Estradiol-related Compounds, Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry 2018, 18, 652-666; A. Belosay, A.M.H. Brodie, V.C.O. Njar, Effects of Novel Retinoic Acid Metabolism Blocking Agent (VN/14-1) on Letrozole-Insensitive Breast Cancer Cells, Cancer Res. 2006, 66 (23), 11485-11493].[R. Minorics, I. Zupko, Steroidal Anticancer Agents: An Overview of Estradiol-related Compounds, Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry 2018, 18, 652-666; A. Belosay, A.M.H. Brodie, V.C.O. Njar, Effects of Novel Retinoic Acid Metabolism Blocking Agent (VN/14-1) on Letrozole-Insensitive Breast Cancer Cells, Cancer Res. 2006, 66 (23), 11485-11493].

Однако высокая токсичность доступных в настоящее время лекарств для нормальных клеток и резистентность опухолевых клеток к лекарственным средствам приводит к ограничению области их применения и низкому терапевтическому эффекту. В связи с этим актуальной задачей является расширение арсенала противоопухолевых препаратов [Е. Frei, A. Elias, С. Wheeler, P. Richardson, W. Hryniuk, The relationship between high-dose treatment and combination chemotherapy: the concept of summation dose intensity, Clin. Cancer Res. 1998, 4, 2027-2037; M.M. Gottesman, Mechanisms of cancer drug resistance, Annu Rev. Med. 2002, 53, 615-627; P.A. Clarke, T. Roe, K. Swabey, S.M. Hobbs, C. McAndrew, K. Tomlin, I. Westwood, R. Burke, R. van Montfort, P. Workman, Dissecting mechanisms of resistance to targeted drug combination therapy in human colorectal cancer, Oncogene 2019, 38, 5076-5090]. Одним из недостатков вышеуказанных известных лекарственных средств является наличие у них неселективной активности, в частности, реализуемой за счет их взаимодействия с рядом ферментов и рецепторов в нормальных тканях пациента. Такие взаимодействия приводят к нежелательным побочным эффектам, иногда приводящим к коррекции дозы или отмене терапии выбранным препаратом. В опухолевых клетках стероидные препараты также могут активировать пути, поддерживающие пролиферацию. Например, ингибитор ароматазы экземестан может активировать в клетках рака молочной железы сигнальные пути рецептора андрогенов, что может быть одной из причин развития рецидива заболевания.However, the high toxicity of currently available drugs to normal cells and the resistance of tumor cells to drugs leads to a limitation in the scope of their application and a low therapeutic effect. In this regard, an urgent task is to expand the arsenal of anticancer drugs [E. Frei, A. Elias, C. Wheeler, P. Richardson, W. Hryniuk, The relationship between high-dose treatment and combination chemotherapy: the concept of summation dose intensity, Clin. Cancer Res. 1998, 4, 2027-2037; M.M. Gottesman, Mechanisms of cancer drug resistance, Annu Rev. Med. 2002, 53, 615-627; P.A. Clarke, T. Roe, K. Swabey, S.M. Hobbs, C. McAndrew, K. Tomlin, I. Westwood, R. Burke, R. van Montfort, P. Workman, Dissecting mechanisms of resistance to targeted drug combination therapy in human colorectal cancer, Oncogene 2019, 38, 5076-5090] . One of the disadvantages of the above known drugs is the presence of non-selective activity, in particular, realized due to their interaction with a number of enzymes and receptors in the normal tissues of the patient. Such interactions lead to undesirable side effects, sometimes leading to dose adjustments or discontinuation of therapy with the selected drug. In tumor cells, steroid drugs can also activate pathways that support proliferation. For example, the aromatase inhibitor exemestane can activate androgen receptor signaling pathways in breast cancer cells, which may be one of the reasons for the development of disease recurrence.

В связи с этим перспективными противоопухолевыми агентами являются производные секостероидов - полусинтетические природные стероиды, у которых отсутствует одно из четырех колец стероидного каркаса и для которых в силу их химического строения характерно отсутствие заметного гормонального (агонистического) эффекта [R. Minorics, N. Bózsity, J. Molnár, J. Wölfling, E. Mernyák, G. Schneider. I. Ocsovszki, I. Zupkó, A molecular understanding of D-homoestrone-induced G2/M cell cycle arrest in HeLa human cervical carcinoma cells, J. Cell. Mol. Med. 2015, 19(10), 23652374; E. Frank, G. Schneider, Synthesis of sex hormone-derived modified steroids possessing antiproliferative activity, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 2013, 137, 301-315; J. Huber, J. Wölfling, G. Schneider, I. Ocsovszki, M. Varga, I. Zupkó, E. Mernyák, Synthesis of antiproliferative 13α-d-homoestrones via Lewis acid-promoted one-pot Prins-Ritter reactions of d-secosteroidal δ-alkenyl-aldehydes, Steroids, 2015, 102, 76-84].In this regard, promising antitumor agents are derivatives of secosteroids - semi-synthetic natural steroids that lack one of the four rings of the steroid skeleton and which, due to their chemical structure, are characterized by the absence of a noticeable hormonal (agonistic) effect [R. Minorics, N. Bózsity, J. Molnár, J. Wölfling, E. Mernyák, G. Schneider. I. Ocsovszki, I. Zupkó, A molecular understanding of D-homoestrone-induced G2/M cell cycle arrest in HeLa human cervical carcinoma cells, J. Cell. Mol. Med. 2015, 19(10), 23652374; E. Frank, G. Schneider, Synthesis of sex hormone-derived modified steroids possessing antiproliferative activity, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 2013, 137, 301-315; J. Huber, J. Wölfling, G. Schneider, I. Ocsovszki, M. Varga, I. Zupkó, E. Mernyák, Synthesis of antiproliferative 13α-d-homoestrones via Lewis acid-promoted one-pot Prins-Ritter reactions of d -secosteroidal δ-alkenyl-aldehydes, Steroids, 2015, 102, 76-84].

Ранее в литературе были описаны соединения общей формулы:Previously, compounds of the general formula have been described in the literature:

где Where

R3 = Н, Me, NO2 близкие по структуре к заявленным соединениям общей формулы I [J. Szabó, I. Bacsa, J. Wölfling, G. Schneider, I. Zupkó, M. Varga, B.E. Herman, L. Kalmár, M. Szécsi, E. Mernyák, Synthesis and in vitro pharmacological evaluation of N-[(1-benzyl-1,2,3-triazol-4-yl) methyl]-carboxamides on d-secoestrone scaffolds, J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2016, 31, 574-579]. Эти бензил- и п-бензилзамещенные триазолы D-секоэстрона общей структурной формулы II проявили умеренные по активности антипролиферативные свойства в отношении клеток рака молочной железы MCF-7.R 3 = H, Me, NO 2 similar in structure to the claimed compounds of General formula I [J. Szabó, I. Bacsa, J. Wölfling, G. Schneider, I. Zupkó, M. Varga, BE Herman, L. Kalmár, M. Szécsi, E. Mernyák, Synthesis and in vitro pharmacological evaluation of N-[(1- benzyl-1,2,3-triazol-4-yl)methyl]-carboxamides on d-secoestrone scaffolds, J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2016, 31, 574-579]. These benzyl- and p-benzyl-substituted triazoles of D-secoestrone of general structural formula II showed moderate antiproliferative properties against MCF-7 breast cancer cells.

Наиболее близкими по структуре и свойствам к заявленным соединениям общей формулы I являются [N'-(гетеро)арилметилен]гидразиды 13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты общей структурной формулы:Closest in structure and properties to the claimed compounds of general formula I are [N'-(hetero)arylmethylene]hydrazides of 13,17-secoestra-1,3,5(10)-triene-17-oic acid of the general structural formula:

где Where

R4 = арил или гетероарил [A.I. Ilovaisky, V.M. Merkulova, E.I. Chernoburova, M.A. Shchetinina, D.I. Salnikova, A.M. Scherbakov, I.V. Zavarzin, A.O. Terent'ev, Secosteroidal hydrazides: Promising scaffolds for anti-breast cancer agents, J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2021, 214, 106000].R 4 = aryl or heteroaryl [AI Ilovaisky, VM Merkulova, EI Chernoburova, MA Shchetinina, DI Salnikova, AM Scherbakov, IV Zavarzin, AO Terent'ev, Secosteroidal hydrazides: Promising scaffolds for anti-breast cancer agents, J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2021, 214, 106000].

Известные соединения общей формулы III проявляют антипролиферативные свойства в отношении клеток рака молочной железы MCF-7. Значения IC50 (IC50 - концентрация, ингибирующая рост клеток на 50% по сравнению с контролем) в отношении клеток рака молочной железы MCF-7 для ведущих секостероидов общей формулы III, где R4 = 4-нитрофенил (3l) составил 2.2±0.2, R4 = 4-хлорфенил (3d) составил 2.9±0.3 и R4 = 3-(м-толил)-1Н-пиразол-4-ил (3q) составил 3±0.3 мкМ, т.е. находятся в интервале 2.2-3 мкМ, при этом 50% нормальных эпителиальных клеток MCF-10A погибало при концентрациях соединений 6.7, 9.1 и 7.6 мкМ. Таким образом, индекс селективности (ИС), рассчитанный как отношение значений IC50 для MCF-10A к значениям IC50 для MCF-7, для 3l составляет - 3.0, для 3d - 3.1, для 3q - 2.5, т.е. находится в интервале от 2.5 до 3.1. Общей задачей предлагаемого изобретения является создание секостероидов, которые не уступают по антипролиферативным характеристикам секостероидам формулы III и превосходят их по ИС не менее чем на 45%. Ожидается, что увеличение ИС приведет к созданию антипролиферативных средств с улучшенным фармакологическим профилем.Known compounds of general formula III exhibit antiproliferative properties against MCF-7 breast cancer cells. IC 50 values (IC 50 - concentration inhibiting cell growth by 50% compared to control) in relation to MCF-7 breast cancer cells for leading secosteroids of general formula III, where R 4 = 4-nitrophenyl (3l) was 2.2±0.2 , R 4 = 4-chlorophenyl (3d) was 2.9±0.3 and R 4 = 3-(m-tolyl)-1H-pyrazol-4-yl (3q) was 3±0.3 μM, i.e. are in the range of 2.2–3 µM, while 50% of normal MCF-10A epithelial cells died at compound concentrations of 6.7, 9.1, and 7.6 µM. Thus, the selectivity index (SI), calculated as the ratio of the IC 50 values for MCF-10A to the IC 50 values for MCF-7, for 3l is - 3.0, for 3d - 3.1, for 3q - 2.5, i.e. is in the range from 2.5 to 3.1. The general objective of the invention is to create secosteroids that are not inferior in antiproliferative characteristics to secosteroids of formula III and surpass them in IS by at least 45%. It is expected that the increase in SI will lead to the creation of antiproliferative agents with an improved pharmacological profile.

Технической задачей предлагаемого изобретения является расширение ассортимента секостероидных соединений, обладающих высокими антипролиферативной активностью и селективностью в отношении клеток рака молочной железы MCF-7 при приемлемой растворимости в воде. Поставленная техническая задача достигается новыми [N'-(изо)хинолилметилен]гидразидами 3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты общей формулы:The technical objective of the present invention is to expand the range of secosteroid compounds with high antiproliferative activity and selectivity against MCF-7 breast cancer cells with acceptable solubility in water. The set technical task is achieved by new [N'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid of the general formula:

R1 и R2 = H, Me, OMe, Cl или F.R 1 and R 2 = H, Me, OMe, Cl or F.

Предлагаемые соединения общей формулы I являются новыми, неописанными ранее в литературе, и отличаются от известных соединений тем, что они содержат остаток хинолина или изохинолина - бициклических гетероциклов, содержащих атом азота.The proposed compounds of general formula I are new, not previously described in the literature, and differ from known compounds in that they contain a quinoline or isoquinoline residue - bicyclic heterocycles containing a nitrogen atom.

Предлагаемые соединения общей формулы I обладают высокой антипролиферативной активностью в отношении клеток рака молочной железы MCF-7.The proposed compounds of general formula I have a high antiproliferative activity against MCF-7 breast cancer cells.

Предлагаемые соединения получают путем взаимодействия гидразида 13α- или 13β-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты с замещенными хинолинкарбальдегидами или изохинолин-5-карбальдегидом общей структурной формулы RCHO, где R имеет вышеуказанные значения, в среде этанола при кипячении. Выход полученных соединений составляет 70-89%.The proposed compounds are obtained by reacting 13α- or 13β-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid hydrazide with substituted quinolinecarbaldehydes or isoquinoline-5-carbaldehyde of the general structural formula RCHO, where R has the above values, in ethanol at boiling. The yield of the obtained compounds is 70-89%.

Процесс протекает по следующей схеме:The process proceeds according to the following scheme:

R1 и R2 = Н, Me, OMe, Cl или F.R 1 and R 2 = H, Me, OMe, Cl or F.

Расположение заместителей (метильной группы и гидроксильной группы) в 13 положении стероидного скелета может быть различным: 13α-ОН/β-СН3 или 13α-СН3/β-ОН.The location of the substituents (methyl group and hydroxyl group) in the 13th position of the steroid skeleton can be different: 13α-OH/β-CH 3 or 13α-CH 3 /β-OH.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, не ограничивающими его объем.The invention is illustrated by the following non-limiting examples.

Пример 1.Example 1

К раствору гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (0.332 г, 1 ммоль) в этаноле (7 мл) прибавили хинолин-3-карбальдегид (173 мг, 1,1 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятили в течение 4 часов и затем охлаждали до комнатной температуры. По окончании реакции растворитель упаривали, остаток очищали колоночной хроматографией: элюент - смесь: петролейный эфир-этилацетат (3:1). Получили 401 мг (85%) [N'-хинолин-3-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ia), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 222-224°С, + 78.2 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.11-1.66 (м, 6Н), 1.72-1.82 (м, 1Н), 1.92-2.43 (м, 5Н), 2.67-2.87 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.34 (с, 0.6Н, ОН), 4.36 (с, 0.4Н, ОН), 6.56 (д, J=2.8 Гц, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Гц, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.6, 2.8 Гц, 1Н, Н-2), 7.16 (д, J=8.6 Гц, 1Н, Н-1), 7.64 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.79 (т, J=7.7 Гц, 1Н), 7.99-8.09 (м, 2Н), 8.20 (с, 0.6Н, CH=N), 8.40 (с, 0.4Н, CH=N), 8.51 (д, J=1.8 Гц, 0.6Н), 8.56 (д, J=1.8 Гц, 0.4Н), 9.25 (д, J=1.8 Гц, 0.4Н), 9.29 (д, J=1.8 Гц, 0.6Н), 11.44 (с, 0.6Н, NH), 11.63 (с, 0.4Н, NH). 13С ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.04, 21.15, 23.00, 23.21, 26.99, 28.22, 28.28, 30.00, 33.99, 35.73, 42.36, 42.42, 42.79, 42.82, 43.00, 43.10, 51.59, 51.78, 54.81, 71.56, 71.60, 111.61, 112.99, 126.40, 127.25, 127.28, 127.50, 127.61, 128.42, 128.52, 128.79, 128.83, 130.12, 130.22, 131.90, 134.29, 134.39, 137.29, 140.19, 143.33, 147.60, 147.73, 148.02, 148.28, 157.03, 169.26, 175.12. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2592. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05. Найдено для (%): С, 73.72; Н, 7.19.Quinoline-3- carbaldehyde (173 mg, 1.1 mmol) at room temperature. The reaction mixture was boiled for 4 hours and then cooled to room temperature. At the end of the reaction, the solvent was evaporated, the residue was purified by column chromatography: eluent - mixture: petroleum ether-ethyl acetate (3:1). Received 401 mg (85%) of [N'-quinolin-3-ylmethylene]hydrazide 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Ia) , purity 98% (by NMR). So pl. 222-224°С, + 78.2 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.11-1.66 (m, 6H), 1.72-1.82 (m, 1H), 1.92-2.43 (m, 5H) , 2.67-2.87 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.34 (s, 0.6H, OH), 4.36 (s, 0.4H, OH), 6.56 (d, J=2.8 Hz, 0.6H , H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.16 (d, J=8.6 Hz, 1Н, Н-1), 7.64 (t, J=7.6 Hz, 1Н), 7.79 (t, J=7.7 Hz, 1Н), 7.99-8.09 (m, 2Н), 8.20 (s, 0.6Н, CH=N ), 8.40 (s, 0.4H, CH=N), 8.51 (d, J=1.8 Hz, 0.6H), 8.56 (d, J=1.8 Hz, 0.4H), 9.25 (d, J=1.8 Hz, 0.4 H), 9.29 (d, J=1.8 Hz, 0.6H), 11.44 (s, 0.6H, NH), 11.63 (s, 0.4H, NH). 13 С NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.04, 21.15, 23.00, 23.21, 26.99, 28.22, 28.28, 30.00, 33.99, 35.73, 42.36, 42.42, 42.79, 42.82, 43.00, 43.10, 51.59, 51.78, 54.81 , 71.56 71.60 111.61 112.99 126.40 127.25 127.28 127.50 127.61 128.42 128.52 128.79 128.83 130.12 130.22 1 31.90, 134.29, 134.39, 137.29, 140.19, 143.33, 147.60, 147.73, 148.02, 148.28 , 157.03, 169.26, 175.12. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2592. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05. Found for (%): C, 73.72; H, 7.19.

Пример 2.Example 2

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг хинолин-5-карбальдегида получено 401 мг (83%) [N'-хинолин-5-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ib), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 191-193°С, + 67.5 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.00 (с, 1.8Н, Н-18), 1.02 (с, 1.2Н, Н-18), 1.09-1.67 (м, 6Н), 1.70-1.82 (м, 1Н), 1.93-2.45 (м, 5Н), 2.64-2.91 (м, 3Н), 3.67 (с, 3Н, ОМе), 4.38 (с, 0.6Н, ОН), 4.41-4.58 (ушир. с, 0.4Н, ОН), 6.56 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.8 Hz, 1Н, Н-2), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1Н, H-1), 7.62 (дд, J=8.8, 4.4 Hz, 0.6H, H-3'), 7.65 (дд, J=8.8, 4.4 Hz, 0.4H, H-3'), 7.79-7.86 (м, 1Н), 7.88-7.95 (м, 1Н), 8.07 (д, J=8.1 Hz, 1H), 8.62 (с, 0.6H, CH=N), 8.75 (с, 0.4H, CH=N), 8.93-8.97 (м, 1H, H-2'), 9.10 (д, J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.37 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, Н-4'), 11.35 (с, 0.6H, NH), 11.70 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.18, 21.23, 23.00, 23.38, 27.10, 28.37, 30.07, 34.04, 35.86, 42.42, 42.50, 42.90, 43.17, 51.66, 51.87, 54.93, 71.71, 71.77, 111.74, 113.09, 122.31, 125.30, 125.36, 126.55, 127.51, 128.67, 129.15, 129.19, 130.39, 130.43, 130.92, 131.15, 132.00, 132.62, 133.33, 137.40, 137.44, 141.77, 145.42, 148.06, 150.75, 157.13, 169.42, 175.11. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2587. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05; N, 8.91. Найдено для (%): С, 73.64; Н, 7.27; N, 8.78..Similarly, 401 mg (83%) was obtained from 0.332 g of 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid hydrazide and 173 mg of quinoline-5-carbaldehyde [ 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid N'-quinolin-5-ylmethylene]hydrazide (Ib), 98% purity (by NMR) . So pl. 191-193°С, + 67.5 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.00 (s, 1.8H, H-18), 1.02 (s, 1.2H, H-18), 1.09-1.67 (m, 6H), 1.70-1.82 ( m, 1H), 1.93–2.45 (m, 5H), 2.64–2.91 (m, 3H), 3.67 (s, 3H, OMe), 4.38 (s, 0.6H, OH), 4.41–4.58 (broad s, 0.4H, OH), 6.56 (d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.8 Hz , 1Н, Н-2), 7.16 (d, J=8.7 Hz, 1Н, H-1), 7.62 (dd, J=8.8, 4.4 Hz, 0.6H, H-3'), 7.65 (dd, J= 8.8, 4.4 Hz, 0.4H, H-3'), 7.79-7.86 (m, 1H), 7.88-7.95 (m, 1H), 8.07 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.62 (s, 0.6H , CH=N), 8.75 (s, 0.4H, CH=N), 8.93-8.97 (m, 1H, H-2'), 9.10 (d, J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.37 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, Н-4'), 11.35 (s, 0.6H, NH), 11.70 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.18, 21.23, 23.00, 23.38, 27.10, 28.37, 30.07, 34.04, 35.86, 42.42, 42.50, 42.90, 43.17, 51.66, 51.87, 54.93, 71.71, 71.77, 111.74 113.09 122.31 125.30 125.36 126.55 127.51 128.67 129.15 129.19 130.39 130.43 130.92 131.15 132.00 132.62 133.33, 137.40, 137.44, 141.77, 145.42, 148.06, 150.75, 157.13, 169.42, 175.11 . High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2587. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05; N, 8.91. Found for (%): C, 73.64; H, 7.27; N, 8.78..

Пример 3.Example 3

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг хинолин-6-карбальдегида получено 377 мг (80%) [N'-хинолин-6-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ic), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 149-151°С, + 65.6 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.12-1.66 (м, 6Н), 1.71-1.81 (м, 1Н), 1.90-2.43 (м, 5Н), 2.64-2.89 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.35 (с, 0.6Н, ОН), 4.39 (с, 0.4Н, ОН), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 1Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.6, 2.8 Hz, 1Н, H-2), 7.18 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.56 (дд, J=8.3, 4.1 Hz, 1H), 8.00-8.08 (м, 1H), 8.10-8.24 (м, 2.6H), 8.36-8.46 (м, 1.4H), 8.91 (д, J=4.1 Hz, 1H), 11.38 (c, 0.6H, NH), 11.63 (c, 0.4H, NH). 13С ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.05, 21.16, 23.02, 23.23, 27.01, 28.21, 28.31, 30.04, 34.14, 35.75, 42.33, 42.39, 42.80, 42.85, 43.02, 43.17, 51.59, 51.84, 54.84, 71.58, 71.62, 111.67, 113.02, 125.81, 126.27, 126.43, 127.91, 128.10, 128.16, 129.55, 131.91, 132.55, 132.69, 136.26, 136.32, 137.31, 141.92, 144.94, 148.26, 148.33, 151.03, 151.09, 157.05, 169.23, 175.03. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2598. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05; N, 8.91. Найдено для (%): С, 73.74; Н, 7.17; N, 8.89.Similarly, 377 mg (80%) was obtained from 0.332 g of 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid hydrazide and 173 mg of quinoline-6-carbaldehyde [ 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid N'-quinolin-6-ylmethylene]hydrazide (Ic), 98% purity (by NMR) . So pl. 149-151°С, + 65.6 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.12-1.66 (m, 6H), 1.71-1.81 (m, 1H), 1.90-2.43 (m, 5H) , 2.64-2.89 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.35 (s, 0.6H, OH), 4.39 (s, 0.4H, OH), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 1H, H-4), 6.66 (dd, J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.18 (d, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.56 (dd, J=8.3, 4.1 Hz, 1H), 8.00-8.08 (m, 1H), 8.10-8.24 (m, 2.6H), 8.36-8.46 (m, 1.4H), 8.91 (d, J=4.1 Hz, 1H), 11.38 (s, 0.6H , NH), 11.63 (s, 0.4H, NH). 13 С NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.05, 21.16, 23.02, 23.23, 27.01, 28.21, 28.31, 30.04, 34.14, 35.75, 42.33, 42.39, 42.80, 42.85, 43.02, 43.17, 51.59, 51.84, 54.84 , 71.58 71.62 111.67 113.02 125.81 126.27 126.43 127.91 128.10 128.16 129.55 131.91 132.55 132.69 136.26 1 36.32, 137.31, 141.92, 144.94, 148.26, 148.33, 151.03, 151.09, 157.05, 169.23 , 175.03. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2598. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05; N, 8.91. Found for (%): C, 73.74; H, 7.17; N, 8.89.

Пример 4.Example 4

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг хинолин-8-карбальдегида получено 382 мг (81%) [N'-хинолин-8-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Id), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 134-136°С, + 36.9 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.00 (с, 1.8Н, Н-18), 1.02 (с, 1.2Н, Н-18), 1.08-1.66 (м, 6Н), 1.71-1.81 (м, 1Н), 1.92-2.41 (м, 5Н), 2.63-2.94 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.36 (с, 1H, ОН), 6.61 (д, J=2.5 Hz, 1H, Н-4), 6.67 (дд, J=8.7,2.5 Hz, 1Н, Н-2), 7.17 (д, J=8.7 Hz, 1Н, H-1), 7.61 (дд, J=8.2, 4.2 Hz, 1H, H-3'), 7.70 (т, J=7.7 Hz, 0.4H, H-6'), 7.72 (т, J=7.7 Hz, 0.6H, H-6'), 8.06 (д, J=7.8 Hz, 1H), 8.32 (д, J=7.7 Hz, 1H), 8.44 (д, J=8.2 Hz, 1H), 8.97 (дд, J=4.2, 1.5 Hz, 1H, H-2'), 9.28 (с, 0.6H, CH=N), 9.48 (c, 0.4H, CH=N), 11.44 (с, 0.6H, NH), 11.65 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.08, 21.19, 23.15, 23.40, 27.05, 28.38, 30.08, 30.14, 30.71, 34.41, 35.86, 42.43, 42.86, 42.91,43.10, 43.26, 51.64, 51.93, 54.90, 71.63, 111.72, 113.03, 113.09, 121.91, 125.10, 125.50, 126.54, 128.04, 129.65, 129.81, 131.26, 131.36, 131.94, 136.66, 137.37, 139.80, 142.76, 145.23, 150.35, 157.08, 169.20, 175.11. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2602. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05; N, 8.91. Найдено для (%): С, 73.71; Н, 7.19; N, 8.83.Similarly, 382 mg (81%) were obtained from 0.332 g of 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-triene-17-oic acid hydrazide and 173 mg of quinoline-8-carbaldehyde [ 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid N'-quinolin-8-ylmethylene]hydrazide (Id), 98% purity (by NMR) . So pl. 134-136°С, + 36.9 (from 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.00 (s, 1.8H, H-18), 1.02 (s, 1.2H, H-18), 1.08-1.66 (m, 6H), 1.71-1.81 ( m, 1H), 1.92-2.41 (m, 5H), 2.63-2.94 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.36 (s, 1H, OH), 6.61 (d, J=2.5 Hz, 1H, H-4), 6.67 (dd, J=8.7,2.5 Hz, 1H, H-2), 7.17 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.61 (dd, J=8.2, 4.2 Hz, 1H, H-3'), 7.70 (t, J=7.7 Hz, 0.4H, H-6'), 7.72 (t, J=7.7 Hz, 0.6H, H-6'), 8.06 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.32 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.44 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.97 (dd, J=4.2, 1.5 Hz, 1H, H-2') , 9.28 (s, 0.6H, CH=N), 9.48 (s, 0.4H, CH=N), 11.44 (s, 0.6H, NH), 11.65 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.08, 21.19, 23.15, 23.40, 27.05, 28.38, 30.08, 30.14, 30.71, 34.41, 35.86, 42.43, 42.86, 42.91, 43.10, 43.26, 51.64, 51.93, 54.90 , 71.63 111.72 113.03 113.09 121.91 125.10 125.50 126.54 128.04 129.65 129.81 131.26 131.36 131.94 137.37, 139.80, 142.76, 145.23, 150.35, 157.08, 169.20, 175.11. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2602. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05; N, 8.91. Found for (%): C, 73.71; H, 7.19; N, 8.83.

Пример 5.Example 5

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 188 мг 6-метилхинолин-5-карбальдегида получено 422 мг (87%), [N'-(6-метилхинолин-5-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ie), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 157-159°С, + 79.5 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 0.99 (с, 1.8Н, Н-18), 1.03 (с, 1.2Н, Н-18), 1.08-1.66 (м, 6Н), 1.69-1.82 (м, 1Н), 1.93-2.45 (м, 5Н), 2.53-2.88 (м, 3Н), 2.58 (с, 3Н, СН3), 3.67 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 4.31 (с, 0.6Н, ОН), 4.40 (с, 0.4Н, ОН), 6.50 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.61 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.62-6.71 (м, 1Н, Н-2), 7.14 (д, J=8.8 Hz, 0.6Н, H-1), 7.17 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, H-1), 7.53 (дд, J=8.8, 4.4 Hz, 0.6H, H-3'), 7.57 (дд, J=8.8, 4.4 Hz, 0.4H, H-3'), 7.66 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-7'), 7.96 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-8'), 8.66 (с, 0.6H, CH=N), 8.80 (с, 0.4H, CH=N), 8.83-8.88 (м, 1H, H-2'), 9.03 (д, J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.31 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, H-4'), 11.32 (с, 0.6H, NH), 11.57 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 20.03, 20.23, 21.13, 21.18, 22.75, 23.31, 26.96, 28.20, 29.79, 30.03, 33.75, 35.80, 42.41, 42.80, 43.07, 51.61, 51.76, 54.85, 71.55, 71.66, 111.60, 111.68, 112.96, 113.00, 122.01, 122.07, 125.76, 126.46, 127.62, 130.09, 130.41, 131.90, 132.81, 133.27, 133.94, 136.62, 137.08, 137.28, 137.36, 141.34, 144.60, 146.81, 149.66, 157.03, 157.07, 169.14, 174.90. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H36N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2606. Элементный анализ; вычислено для C30H35N3O3 (%): С, 74.20; Н, 7.26; N, 8.65. Найдено для (%): С, 74.04; Н, 7.37; N, 8.54.Similarly, 422 mg (87% ), [N'-(6-methylquinolin-5-yl)methylene]hydrazide of 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Ie) , purity 98% (by NMR). So pl. 157-159°С, + 79.5 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 0.99 (s, 1.8H, H-18), 1.03 (s, 1.2H, H-18), 1.08-1.66 (m, 6H), 1.69-1.82 ( m, 1H), 1.93-2.45 (m, 5H), 2.53-2.88 (m, 3H), 2.58 (s, 3H, CH3 ), 3.67 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 4.31 (s, 0.6H, OH), 4.40 (s, 0.4H, OH), 6.50 (d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.61 (d, J=2.8 Hz, 0.4 H, H-4), 6.62-6.71 (m, 1H, H-2), 7.14 (d, J=8.8 Hz, 0.6H, H-1), 7.17 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, H -1), 7.53 (dd, J=8.8, 4.4 Hz, 0.6H, H-3'), 7.57 (dd, J=8.8, 4.4 Hz, 0.4H, H-3'), 7.66 (d, J= 8.8 Hz, 1H, H-7'), 7.96 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-8'), 8.66 (s, 0.6H, CH=N), 8.80 (s, 0.4H, CH=N ), 8.83-8.88 (m, 1H, H-2'), 9.03 (d, J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.31 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, H-4' ), 11.32 (s, 0.6H, NH), 11.57 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 20.03, 20.23, 21.13, 21.18, 22.75, 23.31, 26.96, 28.20, 29.79, 30.03, 33.75, 35.80, 42.41, 42.80, 43.07, 51.61, 51.76, 54.85, 71.55 , 71.66 111.60 111.68 112.96 113.00 122.01 122.07 125.76 126.46 127.62 130.09 130.41 131.90 132.81 133.94, 136.62, 137.08, 137.28, 137.36, 141.34, 144.60, 146.81, 149.66, 157.03 , 157.07, 169.14, 174.90. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 36 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2606. elemental analysis; calculated for C 30 H 35 N 3 O 3 (%): C, 74.20; H, 7.26; N, 8.65. Found for (%): C, 74.04; H, 7.37; N, 8.54.

Пример 6.Example 6

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 206 мг 8-метоксилхинолин-5-карбальдегида получено 411 мг (82%) [N'-(8-метоксихинолин-5-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (If), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 190-192°С, + 77.4 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.02 (с, 3Н, Н-18), 1.10-1.66 (м, 6Н), 1.70-1.82 (м, 1Н), 1.92-2.42 (м, 5Н), 2.65-2.86 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.01 (с, 3Н, ОМе), 4.33 (с, 0.6Н, ОН), 4.39 (с, 0.4Н, ОН), 6.56 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.62-6.71 (м, 1Н, Н-2), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1Н, Н-1), 7.25 (д, J=8.1 Hz, 1Н, Н-7'), 7.59-7.70 (м, 1Н, Н-3'), 7.80 (д, J=8.1 Hz, 1Н, H-6'), 8.46 (с, 0.6H, CH=N), 8.58 (с, 0.4H, CH=N), 8.86-8.93 (м, 1H, H-2'), 9.21 (д, J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.47 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, H-4'), 11.18 (с, 0.6H, NH), 11.39 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.14, 22.82, 23.28, 26.99, 28.26, 29.97, 33.78, 35.70, 42.35, 42.44, 42.78, 43.05, 51.59, 51.77, 54.81,55.83,71.56,71.62, 107.82, 107.92, 111.57, 111.62, 113.00, 121.78, 122.67, 126.12, 126.24, 126.40, 129.52, 130.50, 131.88, 132.70, 133.34, 137.30, 139.65, 142.64, 146.13, 148.98, 156.40, 156.57, 157.02, 168.90, 174.68. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H36N3O4]+ [М+Н]+: вычислено 502.2700, найдено: 502.2697. Элементный анализ; вычислено для C30H35N3O4 (%): С, 71.83; Н, 7.03; N, 8.38. Найдено для (%): С, 71.64; Н, 7.38; N, 8.23.Similarly, 411 mg (82% ) 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid [N'-(8-methoxyquinolin-5-yl)methylene]hydrazide (If), purity 98% (by NMR). So pl. 190-192°С, + 77.4 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.02 (s, 3H, H-18), 1.10-1.66 (m, 6H), 1.70-1.82 (m, 1H), 1.92-2.42 (m, 5H) , 2.65-2.86 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.01 (s, 3H, OMe), 4.33 (s, 0.6H, OH), 4.39 (s, 0.4H, OH), 6.56 ( d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.62-6.71 (m, 1H, H-2), 7.16 (d, J =8.7 Hz, 1H, H-1), 7.25 (d, J=8.1 Hz, 1H, H-7'), 7.59-7.70 (m, 1H, H-3'), 7.80 (d, J=8.1 Hz , 1Н, H-6'), 8.46 (s, 0.6H, CH=N), 8.58 (s, 0.4H, CH=N), 8.86-8.93 (m, 1H, H-2'), 9.21 (d , J=8.8 Hz, 0.6H, H-4'), 9.47 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, H-4'), 11.18 (s, 0.6H, NH), 11.39 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.14, 22.82, 23.28, 26.99, 28.26, 29.97, 33.78, 35.70, 42.35, 42.44, 42.78, 43.05, 51.59, 51.77, 54.81,55.83,71.56,71.62, 107.82 107.92 111.57 111.62 113.00 121.78 122.67 126.12 126.24 126.40 129.52 130.50 131.88 132.70 133.34 139.65, 142.64, 146.13, 148.98, 156.40, 156.57, 157.02, 168.90, 174.68. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 36 N 3 O 4 ] + [M+H] + : calculated 502.2700, found: 502.2697. elemental analysis; calculated for C 30 H 35 N 3 O 4 (%): C, 71.83; H, 7.03; N, 8.38. Found for (%): C, 71.64; H, 7.38; N, 8.23.

Пример 7.Example 7

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 193 мг 6-фторхинолин-3-карбальдегида получено 435 мг (89%) (N'-(6-фторхинолин-3-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ig), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 197-199°С, + 75.4 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.07-1.68 (м, 6Н), 1.72-1.82 (м, 1Н), 1.90-2.43 (м, 5Н), 2.68-2.85 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.36 (с, 0.6Н, ОН), 4.39 (с, 0.4Н, ОН), 6.56 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.8 Hz, 1Н, H-2), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.69 (ддд, J=9.0, 9.0, 2.8 Hz, 1H, H-7'), 7.81 (дд, J=9.0, 2.8 Hz, 0.6H, H-5'), 7.86 (дд, J=9.0, 2.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.10 (дд, J=9.0, 5.5 Hz, 1H, H-8'), 8.18 (с, 0.6H, CH=N), 8.38 (c, 0.4H, CH=N), 8.48 (д, J=2.0 Hz, 0.6H, H-4'), 8.55 (д, J=2.0 Hz, 0.4H, H-4'), 9.21 (д, J=2.0 Hz, 0.4H, H-2'), 9.25 (д, J=2.0 Hz, 0.6H, H-2'), 11.44 (с, 0.6H, NH), 11.66 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.07, 21.17, 23.07, 23.28, 27.05, 28.29, 28.36, 30.08, 34.09, 35.81, 42.39, 42.45, 42.89, 43.07, 43.17, 51.63, 51.81, 54.85, 71.65, 111.48 (д, 2JCF=21.8 Hz), 111.57 (д, 2JCf=21.8 Hz), 111.67, 113.01, 120.04 (д, 2JCF=25.9 Hz), 126.50, 128.15, 128.24, 128.29, 128.35, 131.70 (д, 3JCF=9.8 Hz), 131.73 (д, 3JCF=9.8 Hz), 131.93, 133.77, 133.84, 137.35, 139.93, 143.03, 144.82, 144.97, 147.61, 147.98, 157.09, 160.11 (д, 1JCF=245.3 Hz), 169.42, 175.24. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H33FH3O3]+: [М+Н]+: вычислено 490.2500, найдено: 490.2498. Элементный анализ; вычислено для C29H32FN3O2 (%): С, 71.14; Н, 6.26; N, 8.58. Найдено для (%): С, 71.02; Н, 6.65; N, 8.47.Similarly, 435 mg (89% ) (N'-(6-fluoroquinolin-3-ylmethylene]hydrazide 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Ig), purity 98 % (by NMR), mp 197-199°С, + 75.4 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.07-1.68 (m, 6H), 1.72-1.82 (m, 1H), 1.90-2.43 (m, 5H) , 2.68-2.85 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.36 (s, 0.6H, OH), 4.39 (s, 0.4H, OH), 6.56 (d, J=2.8 Hz, 0.6H , H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.16 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.69 (ddd, J=9.0, 9.0, 2.8 Hz, 1H, H-7'), 7.81 (dd, J=9.0, 2.8 Hz, 0.6H, H-5'), 7.86 ( dd, J=9.0, 2.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.10 (dd, J=9.0, 5.5 Hz, 1H, H-8'), 8.18 (s, 0.6H, CH=N), 8.38 (s, 0.4H, CH=N), 8.48 (d, J=2.0 Hz, 0.6H, H-4'), 8.55 (d, J=2.0 Hz, 0.4H, H-4'), 9.21 (d , J=2.0 Hz, 0.4H, H-2'), 9.25 (d, J=2.0 Hz, 0.6H, H-2'), 11.44 (s, 0.6H, NH), 11.66 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.07, 21.17, 23.07, 23.28, 27.05, 28.29, 28.36, 30.08, 34.09, 35.81, 42.39, 42.45, 42.89, 43.07, 43.17, 51.63, 51.81, 54.85, 71.65 , 111.48 (d, 2 J CF =21.8 Hz), 111.57 (d, 2 J Cf =21.8 Hz), 111.67, 113.01, 120.04 (d, 2 J CF =25.9 Hz), 126.50, 128.15, 128.24, 128.29, 12 8.35 , 131.70 (d, 3J CF =9.8 Hz), 131.73 (d, 3J CF =9.8 Hz), 131.93, 133.77, 133.84, 137.35, 139.93, 143.03, 144.82, 144.97, 147.61, 147 .98, 157.09, 160.11 (d , 1 JCF =245.3 Hz), 169.42, 175.24. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 33 FH 3 O 3 ] + : [M+H] + : calculated 490.2500, found: 490.2498. elemental analysis; calculated for C 29 H 32 FN 3 O 2 (%): C, 71.14; H, 6.26; N, 8.58. Found for (%): C, 71.02; H, 6.65; N, 8.47.

Пример 8.Example 8

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 193 мг 6-фторхинолин-8-карбальдегида получено 396 мг (81%), [N'-(6-фторхинолин-8-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ih), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 131-133°С, + 70.4 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.00 (с, 1.8Н, Н-18), 1.01 (с, 1.2Н, Н-18), 1.11-1.65 (м, 6Н), 1.70-1.81 (м, 1Н), 1.93-2.42 (м, 5Н), 2.65-2.90 (м, 3Н), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 4.33 (с, 0.6Н, ОН), 4.35 (с, 0.4Н, ОН), 6.55 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.8, 2.8 Hz, 1Н, H-2), 7.16 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-1), 7.64 (дд, J=8.8, 4.2 Hz, 1H, H-3'), 7.83-7.91 (м, 1H), 8.00-8.10 (м, 1H), 8.41 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-4'), 8.94 (д, J=4.2 Hz, 1H, H-2'), 9.23 (с, 0.6H, CH=N), 9.43 (с, 0.4H, CH=N), 11.54 (с, 0.6H, NH), 11.74 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.05, 21.18, 23.19, 23.34, 27.02, 28.29, 28.35, 30.02, 34.30, 35.87, 42.43, 42.86, 43.06,43.18, 51.61, 51.87, 54.87, 71.63, 111.67, 112.55 (д, 2JCF=22.2 Hz), 112.75 (д, 2JCF=22.2 Hz), 113.00, 113.90 (д, 2JCF=26.0 Hz), 114.21 (д, 2JCF=26.0 Hz), 122.78, 126.52, 129.30 (д, 3Jcf=10.5 Hz), 131.94, 134.46 (д, 3JCF=8.8 Hz), 136.24 (д, 4Jcf=4.7 Hz), 137.33, 137.37, 138.47, 141.48, 141.53, 142.47, 142.54, 149.78, 149.80, 157.08, 159.40 (д, 1JCf=244.5 Hz), 169.37, 175.29. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H33FN3O3]+: [M+H]+: вычислено 490.2500, найдено: 490.2496. Элементный анализ; вычислено для C29H32FN3O3 (%): С, 71.14; Н, 6.59; N, 8.58. Найдено для (%): С, 71.03; Н, 6.65; N, 8.39.Similarly, 396 mg (81% ), 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid [N'-(6-fluoroquinolin-8-yl)methylene]hydrazide (Ih) , purity 98% (by NMR). So pl. 131-133°С, + 70.4 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.00 (s, 1.8H, H-18), 1.01 (s, 1.2H, H-18), 1.11-1.65 (m, 6H), 1.70-1.81 ( m, 1H), 1.93-2.42 (m, 5H), 2.65-2.90 (m, 3H), 3.68 (s, 3H, OMe), 4.33 (s, 0.6H, OH), 4.35 (s, 0.4H, OH ), 6.55 (d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.8, 2.8 Hz, 1H, H -2), 7.16 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-1), 7.64 (dd, J=8.8, 4.2 Hz, 1H, H-3'), 7.83-7.91 (m, 1H), 8.00- 8.10 (m, 1H), 8.41 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-4'), 8.94 (d, J=4.2 Hz, 1H, H-2'), 9.23 (s, 0.6H, CH= N), 9.43 (s, 0.4H, CH=N), 11.54 (s, 0.6H, NH), 11.74 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.05, 21.18, 23.19, 23.34, 27.02, 28.29, 28.35, 30.02, 34.30, 35.87, 42.43, 42.86, 43.06, 43.18, 51.61, 51.87, 54.87, 71.63, 111.67 , 112.55 (d, 2 J CF =22.2 Hz), 112.75 (d, 2 J CF =22.2 Hz), 113.00, 113.90 (d, 2 J CF =26.0 Hz), 114.21 (d, 2 J CF =26.0 Hz) , 122.78, 126.52, 129.30 (d, 3 J cf =10.5 Hz), 131.94, 134.46 (d, 3 J CF =8.8 Hz), 136.24 (d, 4 J cf =4.7 Hz), 137.33, 137.37, 138.47, 141. 48 , 141.53, 142.47, 142.54, 149.78, 149.80, 157.08, 159.40 (d, 1J Cf =244.5 Hz), 169.37, 175.29. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 33 FN 3 O 3 ] + : [M+H] + : calculated 490.2500, found: 490.2496. elemental analysis; calculated for C 29 H 32 FN 3 O 3 (%): C, 71.14; H, 6.59; N, 8.58. Found for (%): C, 71.03; H, 6.65; N, 8.39.

Пример 9.Example 9

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 210 мг 2-хлорхинолин-3-карбальдегида получено 434 мг (86%) [N'-(2-хлорхинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ii), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 160°С (разд.), + 61.5 (с 1, CHCl3). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.09-1.65 (м, 6Н), 1.70-1.83 (м, 1H), 1.91-2.42 (м, 5Н), 2.63-2.85 (м, 3Н), 3.66 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 4.36 (с, 0.4Н, ОН), 4.39 (с, 0.6Н, ОН), 6.49 (д, J=2.6 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.6 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.65 (дд, J=8.6, 2.6 Hz, 1Н, H-2), 7.15 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.68 (т, J=7.3 Hz, 1H), 7.84 (т, J=7.8 Hz, 1H), 7.96 (д, J=8.1 Hz, 1H, H-8'), 8.11 (д, J=8.6 Hz, 0.6H, H-5'), 8.20 (д, J=8.6 Hz, 0.4H, H-5'), 8.43 (с, 0.6H, CH=N), 8.63 (с, 0.4H, CH=N), 8.88 (c, 1H, H-3'), 11.59 (с, 0.6H, NH), 11.81 (c, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.10, 21.17, 23.17, 23.31, 26.96, 27.04, 28.33, 30.06, 34.32, 35.89, 42.40, 42.46, 42.86, 43.02, 43.11, 51.61, 51.80, 54.84, 71.65, 71.68, 111.61, 111.68, 112.98, 126.24, 126.32, 126.48, 126.88, 127.61, 127.70, 127.83, 128.77, 128.96, 131.59, 131.68, 131.89, 135.32, 135.51, 137.32, 137.70, 140.80, 146.93, 147.05, 148.31, 148.41, 157.06, 169.37, 175.25. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H33ClN3O3]+: [М+Н]+: вычислено 506.2205, найдено: 506.2201. Элементный анализ; вычислено для C29H32ClN3O3 (%): С, 68.83; Н, 6.37; N, 8.30. Найдено для С, 68.69; Н, 6.51; N, 8.19.Similarly, 434 mg (86% ) 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid [N'-(2-chloroquinolin-3-yl)methylene]hydrazide (Ii), purity 98% (by NMR). So pl. 160°C (sec.), + 61.5 (s 1, CHCl3 ). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.09-1.65 (m, 6H), 1.70-1.83 (m, 1H), 1.91-2.42 (m, 5H) , 2.63-2.85 (m, 3H), 3.66 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 4.36 (s, 0.4H, OH), 4.39 (s, 0.6H, OH), 6.49 (d, J=2.6 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.6 Hz, 0.4H, H-4), 6.65 (dd, J=8.6, 2.6 Hz, 1H, H-2 ), 7.15 (d, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.68 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.84 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J=8.1 Hz , 1H, H-8'), 8.11 (d, J=8.6 Hz, 0.6H, H-5'), 8.20 (d, J=8.6 Hz, 0.4H, H-5'), 8.43 (s, 0.6 H, CH=N), 8.63 (s, 0.4H, CH=N), 8.88 (s, 1H, H-3'), 11.59 (s, 0.6H, NH), 11.81 (s, 0.4H, NH) . 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.10, 21.17, 23.17, 23.31, 26.96, 27.04, 28.33, 30.06, 34.32, 35.89, 42.40, 42.46, 42.86, 43.02, 43.11, 51.61, 51.80, 54.84, 71.65 , 71.68 111.61 111.68 112.98 126.24 126.32 126.48 126.88 127.61 127.70 127.83 128.77 128.96 131.89, 135.32, 135.51, 137.32, 137.70, 140.80, 146.93, 147.05, 148.31, 148.41 , 157.06, 169.37, 175.25. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 33 ClN 3 O 3 ] + : [M+H] + : calculated 506.2205, found: 506.2201. elemental analysis; calculated for C 29 H 32 ClN 3 O 3 (%): C, 68.83; H, 6.37; N, 8.30. Found for C, 68.69; H, 6.51; N, 8.19.

Пример 10.Example 10

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 226 мг 2-хлор-6-метилхинолин-3-карбальдегида получено 436 мг (84%) [N'-(2-хлор-6-метилхинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ij), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 168-170°С, + 66.9 (с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.11-1.64 (м, 6Н), 1.72-1.84 (м, 1Н), 1.89-2.42 (м, 5Н), 2.48, 2.49 оба с, 3Н, СН3) 2.67-2.85 (м, 3Н), 3.67 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 4.38 (с, 1H, ОН), 6.50 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.54 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.15 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.68 (дд, J=8.6, 2.0 Hz, 1H, H-7'), 7.83 (c, 0.6H), 7.85 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-8'), 7.92 (с, 0.4H), 8.42 (с, 0.6H, CH=N), 8.62 (c, 0.4H, CH=N), 8.73 (с, 0.6H), 8.75 (с, 0.4H), 11.60 (с, 0.6H, NH), 11.85 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.11, 21.16, 23.14, 23.32, 26.97, 27.02, 28.28, 28.37, 30.04, 30.16, 34.21, 35.90, 42.40, 42.48, 42.84, 42.91, 43.05, 43.13, 51.61, 51.82, 54.85, 54.88, 71.67, 111.70, 112.91, 113.01, 126.22, 126.49, 126.55, 126.85, 126.89, 127.28, 127.36, 127.45, 131.90, 131.93, 133.74, 133.87, 134.50, 134.77, 137.34, 137.38, 137.59, 137.87, 140.98, 145.59, 145.71, 147.46, 147.55, 157.07, 169.46, 175.26. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H35ClN3O3] [М+Н]+: вычислено 520.2361, найдено: 520.2354. Элементный анализ; вычислено для C30H34ClN3O3 (%): С, 69.28; Н, 6.59; N, 8.08. Найдено (%): С, 69.14; Н, 6.63; N, 7.97.Similarly, 436 mg (84%) [N'-(2-chloro-6-methylquinolin-3-yl)methylene]hydrazide 17-oic acid (Ij), 98% pure (by NMR). So pl. 168-170°С, + 66.9 (s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.11-1.64 (m, 6H), 1.72-1.84 (m, 1H), 1.89-2.42 (m, 5H) , 2.48, 2.49 both s, 3H, CH3 ) 2.67–2.85 (m, 3H), 3.67 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 4.38 (s, 1H, OH), 6.50 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.54 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H-2 ), 7.15 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.68 (dd, J=8.6, 2.0 Hz, 1H, H-7'), 7.83 (s, 0.6H), 7.85 (d, J =8.6 Hz, 1H, H-8'), 7.92 (s, 0.4H), 8.42 (s, 0.6H, CH=N), 8.62 (s, 0.4H, CH=N), 8.73 (s, 0.6H ), 8.75 (s, 0.4H), 11.60 (s, 0.6H, NH), 11.85 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.11, 21.16, 23.14, 23.32, 26.97, 27.02, 28.28, 28.37, 30.04, 30.16, 34.21, 35.90, 42.40, 42.48, 42.84, 42.91, 43.05, 43.13, 51.61 , 51.82 54.85 54.88 71.67 111.70 112.91 113.01 126.22 126.49 126.55 126.85 126.89 127.28 127.36 127.45 .90, 131.93, 133.74, 133.87, 134.50, 134.77, 137.34, 137.38, 137.59, 137.87 , 140.98, 145.59, 145.71, 147.46, 147.55, 157.07, 169.46, 175.26. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 35 ClN 3 O 3 ] [M+H] + : calculated 520.2361, found: 520.2354. elemental analysis; calculated for C 30 H 34 ClN 3 O 3 (%): C, 69.28; H, 6.59; N, 8.08. Found (%): C, 69.14; H, 6.63; N, 7.97.

Пример 11.Example 11.

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 226 мг 2-хлор-8-метилхинолин-3-карбальдегида получено 465 мг (87%) [N'-(2-хлор-8-метилхинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ik), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 155-157°С, + 33.1 (с 1,CHCl3). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.10-1.66 (м, 6Н), 1.70-1.83 (м, 1Н), 1.91-2.43 (м, 5Н), 2.64 (с, 3Н, СН3) 2.68-2.84 (м, 3Н), 3.66 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 4.34 (с, 0.4Н, ОН), 4.36 (с, 0.6Н), 6.49 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.59 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.64 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.14 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.54 (т, J=7.4 Hz, 1H, H-6'), 7.68 (д, J=7.3 Hz, 1H, H-7'), 7.90 (д, J=7.4 Hz, 0.6H, H-5'), 7.99 (д, J=7.4 Hz, 0.4H, H-5'), 8.42 (с, 0.6H, CH=N), 8.62 (с, 0.4H, CH=N), 8.81 (c, 1H, H-4'), 11.57 (с, 0.6H, NH), 11.77 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 17.27, 21.03, 21.13, 23.11, 23.24, 26.92, 28.23, 28.27, 30.01, 34.21, 35.84, 42.48, 42.82, 42.98, 43.05, 51.58, 51.76, 54.79, 71.62, 111.56, 112.95, 125.92, 125.98, 126.40, 126.56, 126.74, 126.87, 127.49, 131.42, 131.51, 131.86, 135.38, 135.48, 135.72, 137.27, 137.71, 140.83, 145.98, 146.10, 147.35, 147.44, 157.01, 169.31, 175.20. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H35ClN3O3]+: [М+Н]+: вычислено 520.2361, найдено: 520.2359. Элементный анализ; вычислено для C30H34ClN3O3 (%): С, 69.28; Н, 6.59; N, 8.08. Найдено (%): С, 69.09; Н, 6.75; N, 7.94.Similarly, 465 mg (87%) [N'-(2-chloro-8-methylquinolin-3-yl)methylene]hydrazide 17-oic acid (Ik), 98% pure (by NMR). So pl. 155-157°С, + 33.1 (with 1,CHCl 3 ). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.10-1.66 (m, 6H), 1.70-1.83 (m, 1H), 1.91-2.43 (m, 5H) , 2.64 (s, 3H, CH3 ) 2.68-2.84 (m, 3H), 3.66 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 4.34 (s, 0.4H, OH), 4.36 (s, 0.6H), 6.49 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.59 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.64 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.14 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.54 (t, J=7.4 Hz, 1H, H-6'), 7.68 (d, J=7.3 Hz , 1H, H-7'), 7.90 (d, J=7.4 Hz, 0.6H, H-5'), 7.99 (d, J=7.4 Hz, 0.4H, H-5'), 8.42 (s, 0.6 H, CH=N), 8.62 (s, 0.4H, CH=N), 8.81 (s, 1H, H-4'), 11.57 (s, 0.6H, NH), 11.77 (s, 0.4H, NH) . 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 17.27, 21.03, 21.13, 23.11, 23.24, 26.92, 28.23, 28.27, 30.01, 34.21, 35.84, 42.48, 42.82, 42.98, 43.05, 51.58, 51.76, 54.79, 71.62 111.56 112.95 125.92 125.98 126.40 126.56 126.74 126.87 127.49 131.42 131.51 131.86 135.38 137.27, 137.71, 140.83, 145.98, 146.10, 147.35, 147.44, 157.01, 169.31, 175.20 . High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 35 ClN 3 O 3 ] + : [M+H] + : calculated 520.2361, found: 520.2359. elemental analysis; calculated for C 30 H 34 ClN 3 O 3 (%): C, 69.28; H, 6.59; N, 8.08. Found (%): C, 69.09; H, 6.75; N, 7.94.

Пример 12.Example 12.

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 243 мг 2-хлор-6-метоксихинолин-3-карбальдегида получено 460 мг (86%) [N'-(2-хлор-6-метоксихинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (II), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 148-150°С, + 27.5 (с 1, CHCl3). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.02 (с, 3Н, Н-18), 1.12-1.67 (м, 6Н), 1.71-1.83 (м, 1Н), 1.90-2.44 (м, 5Н), 2.67-2.86 (м, 3Н), 3.67 (с, 1.8Н, ОМе), 3.69 (с, 1.2Н, ОМе), 3.88 (с, 1.8Н, ОМе), 3.90 (с, 1.2Н, ОМе), 4.33 (с, 0.4Н, ОН), 4.38 (с, 0.6Н, ОН), 6.50 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.61 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.47 (д, J=9.0 Hz, 1H), 7.49 (с, 0.6H), 7.64 (с, 0.4H), 7.86 (д, J=9.0 Hz, 1H), 8.42 (c, 0.6H, CH=N), 8.60 с, 0.4H, CH=N), 8.79 (с, 1H), 11.55 (с, 0.6H, NH), 11.75 (c, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.05, 21.13, 23.03, 23.24, 26.95, 28.21, 28.30, 29.97, 30.04, 34.28, 35.84, 42.37, 42.41, 42.79, 42.87, 42.97, 43.13, 51.58, 51.85, 54.79, 55.61, 55.68, 71.62, 106.27, 106.57, 111.64, 112.83, 112.98, 123.97, 126.23, 126.45, 128.15, 128.96, 129.10, 131.85, 133.93, 134.10, 137.29, 137.80, 140.75, 142.94, 145.65, 157.02, 158.00, 169.25, 175.10. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H35ClN3O4]+: [М+Н]+: вычислено 536.2311, найдено: 536.2306. Элементный анализ; вычислено для C30H34ClN3O4 (%): С, 67.22; Н, 6.39; N, 7.84. Найдено (%): С, 67.04; Н, 6.46; N, 7.73.Similarly, 460 mg (86%) [N'-(2-chloro-6-methoxyquinolin-3-yl)methylene]hydrazide 17-oic acid (II), 98% purity (according to NMR). So pl. 148-150°С, + 27.5 (s 1, CHCl3 ). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.02 (s, 3H, H-18), 1.12-1.67 (m, 6H), 1.71-1.83 (m, 1H), 1.90-2.44 (m, 5H) , 2.67-2.86 (m, 3H), 3.67 (s, 1.8H, OMe), 3.69 (s, 1.2H, OMe), 3.88 (s, 1.8H, OMe), 3.90 (s, 1.2H, OMe), 4.33 (s, 0.4H, OH), 4.38 (s, 0.6H, OH), 6.50 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.61 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H -4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.16 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.47 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 0.6H), 7.64 (s, 0.4H), 7.86 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.42 (s, 0.6H, CH=N), 8.60 s, 0.4H, CH=N) , 8.79 (s, 1H), 11.55 (s, 0.6H, NH), 11.75 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.05, 21.13, 23.03, 23.24, 26.95, 28.21, 28.30, 29.97, 30.04, 34.28, 35.84, 42.37, 42.41, 42.79, 42.87, 42.97, 43.13, 51.58, 51.85 . .85, 133.93, 134.10, 137.29, 137.80, 140.75, 142.94, 145.65, 157.02, 158.00 , 169.25, 175.10. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 35 ClN 3 O 4 ] + : [M+H] + : calculated 536.2311, found: 536.2306. elemental analysis; calculated for C 30 H 34 ClN 3 O 4 (%): C, 67.22; H, 6.39; N, 7.84. Found (%): C, 67.04; H, 6.46; N, 7.73.

Пример 13.Example 13

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 243 мг 2-хлор-7-метоксихинолин-3-карбальдегида получено 470 мг (88%) [N'-(2-хлор-7-метоксихинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Im), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 162-164°С, + 28.8 (с 1, CHCl3). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.11-1.65 (м, 6Н), 1.71-1.82 (м, 1H), 1.96-2.41 (м, 5Н), 2.66-2.83 (м, 3Н), 3.67 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 3.93 (с, 3Н, ОМе), 4.35 (с, 0.4Н, ОН), 4.37 (с, 0.6Н, ОН), 6.50 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.59 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.65 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.15 (д, J=8.7 Hz, 1Н, Н-1), 7.31 (д, J=8.8 Hz, 1Н, Н-6'), 7.35 (с, 1Н, Н-8'), 7.99 (д, J=8.8 Hz, 0.6Н, H-5'), 8.09 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.40 (с, 0.6Н, CH=N), 8.60 (с, 0.4Н, CH=N), 8.77 (с, 0.6Н, Н-4'), 8.78 (с, 0.4Н, Н-4'), 11.50 (с, 0.6Н, NH), 11.72 (с, 0.4Н, NH). 13С ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.08, 21.15, 23.11, 23.28, 26.93, 27.00, 28.31, 30.01, 34.25, 35.84, 42.37, 42.45, 42.84, 43.00, 43.09, 51.60, 51.79, 54.81, 55.78, 71.65, 106.35, 106.41, 111.60, 112.97, 120.52, 122.04, 122.08, 123.60, 123.71, 126.43, 129.90, 130.11, 131.88, 134.93, 135.12, 137.31, 137.96, 141.09, 148.63, 148.73, 149.01, 149.15, 157.03, 161.90, 162.00, 169.22, 175.11. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H35ClN3O4]+: [М+Н]+: вычислено 536.2311, найдено: 536.2300. Элементный анализ; вычислено для C30H34ClN3O4 (%): С, 67.22; Н, 6.39; N, 7.84. Найдено (%): С, 67.05; Н, 6.51; N, 7.70.Similarly, 470 mg (88%) [N'-(2-chloro-7-methoxyquinolin-3-yl)methylene]hydrazide 17-oic acid (Im), 98% pure (by NMR). So pl. 162-164°С, + 28.8 (s 1, CHCl3 ). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.11-1.65 (m, 6H), 1.71-1.82 (m, 1H), 1.96-2.41 (m, 5H) , 2.66-2.83 (m, 3H), 3.67 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 3.93 (s, 3H, OMe), 4.35 (s, 0.4H, OH), 4.37 (s, 0.6H, OH), 6.50 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.59 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.65 (dd, J=8.7 , 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.15 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.31 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-6'), 7.35 (s, 1H, H-8'), 7.99 (d, J=8.8 Hz, 0.6H, H-5'), 8.09 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.40 (s, 0.6H, CH =N), 8.60 (s, 0.4Н, CH=N), 8.77 (s, 0.6Н, Н-4'), 8.78 (s, 0.4Н, Н-4'), 11.50 (s, 0.6Н, NH ), 11.72 (s, 0.4Н, NH). 13 С NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.08, 21.15, 23.11, 23.28, 26.93, 27.00, 28.31, 30.01, 34.25, 35.84, 42.37, 42.45, 42.84, 43.00, 43.09, 51.60, 51.79, 54.81, 55.78 , 71.65 106.35 106.41 111.60 112.97 120.52 122.04 122.08 123.60 123.71 126.43 129.90 130.11 131.88 135.12, 137.31, 137.96, 141.09, 148.63, 148.73, 149.01, 149.15, 157.03, 161.90 , 162.00, 169.22, 175.11. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 35 ClN 3 O 4 ] + : [M+H] + : calculated 536.2311, found: 536.2300. elemental analysis; calculated for C 30 H 34 ClN 3 O 4 (%): C, 67.22; H, 6.39; N, 7.84. Found (%): C, 67.05; H, 6.51; N, 7.70.

Пример 14.Example 14

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 239 мг 2,6-диметоксихинолин-3-карбальдегида получено 382 мг (72%) [N'-(2,6-диметокси-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (In), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 172-175°С, + 73.0 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ d 1.02 (с, 3Н, Н-18), 1.11-1.66 (м, 6Н), 1.71-1.82 (м, 1Н), 1.94-2.40 (м, 5Н), 2.68-2.86 (м, 3Н), 3.67 (с, 1.8Н, ОМе), 3.68 (с, 1.2Н, ОМе), 3.83 (с, 1.8Н, ОМе), 3.85 (с, 1.2Н, ОМе), 4.02 (с, 3Н, ОМе), 4.33 (с, 0.4Н, ОН), 4.36 (с, 0.6Н, ОН), 6.50 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.61 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.33 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-7'), 7.37 (с, 0.6H, H-5'), 7.49 (с, 0.4H, H-5'), 7.70 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-8'), 8.31 (с, 0.6H, CH=N), 8.51 (с, 0.4H, CH=N), 8.57 (с, 0.6H, H-4'), 8.60 (с, 0.4H, H-4'), 11.39 (с, 0.6H, NH), 11.59 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.05, 21.13, 23.04, 23.27, 26.95, 28.32, 29.98, 30.09, 34.24, 35.81, 42.38, 42.79, 42.87, 43.01, 43.17, 51.59, 51.86, 53.42, 54.78, 54.81, 55.35, 55.40, 71.59, 106.96, 107.27, 111.66, 112.82, 112.99, 118.64, 118.70, 122.02, 125.42, 125.50, 126.47, 127.76, 127.87, 131.86, 132.85, 133.14, 136.98, 137.04, 137.30, 141.42, 141.50, 155.97, 157.02, 157.91, 169.07, 174.99. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C31H37N3O5Na]+ [M+Na]+: вычислено 554.2625, найдено: 554.2615. Элементный анализ; вычислено для C31H37N3O5 (%): С, 70.03; Н, 7.01; N, 7.90. Найдено (%): С, 69.92; Н, 7.28; N, 7.75.Similarly, 382 mg ( 72%) [N'-(2,6-dimethoxy-3-yl)methylene]hydrazide 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (In), purity 98% (by NMR). So pl. 172-175°С, + 73.0 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ d 1.02 (s, 3H, H-18), 1.11-1.66 (m, 6H), 1.71-1.82 (m, 1H), 1.94-2.40 (m, 5H ), 2.68-2.86 (m, 3H), 3.67 (s, 1.8H, OMe), 3.68 (s, 1.2H, OMe), 3.83 (s, 1.8H, OMe), 3.85 (s, 1.2H, OMe) , 4.02 (s, 3H, OMe), 4.33 (s, 0.4H, OH), 4.36 (s, 0.6H, OH), 6.50 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.61 (d , J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.16 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.33 ( e, J=8.8 Hz, 1H, H-7'), 7.37 (s, 0.6H, H-5'), 7.49 (s, 0.4H, H-5'), 7.70 (d, J=8.8 Hz, 1H, H-8'), 8.31 (s, 0.6H, CH=N), 8.51 (s, 0.4H, CH=N), 8.57 (s, 0.6H, H-4'), 8.60 (s, 0.4 H, H-4'), 11.39 (s, 0.6H, NH), 11.59 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.05, 21.13, 23.04, 23.27, 26.95, 28.32, 29.98, 30.09, 34.24, 35.81, 42.38, 42.79, 42.87, 43.01, 43.17, 51.59, 51.86, 53.42, 54.78 . .76, 127.87, 131.86, 132.85, 133.14, 136.98, 137.04, 137.30, 141.42, 141.50 , 155.97, 157.02, 157.91, 169.07, 174.99. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 31 H 37 N 3 O 5 Na] + [M+Na] + : calculated 554.2625, found: 554.2615. elemental analysis; calculated for C 31 H 37 N 3 O 5 (%): C, 70.03; H, 7.01; N, 7.90. Found (%): C, 69.92; H, 7.28; N, 7.75.

Пример 15.Example 15

Аналогично из 0.332 г гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 239 мг 2,7-диметоксихинолин-3-карбальдегида получено 372 мг (70%) [N'-(2,7-диметоксихинолин-3-ил)метилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Io), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 140-142°С, + 6.4 (с 1, CHCl3). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 3Н, Н-18), 1.11-1.64 (м, 6Н), 1.71-1.81 (м, 1Н), 1.94-2.37 (м, 5Н), 2.67-2.84 (м, 3Н), 3.67 (с, 3Н, ОМе), 3.90 (с, 3Н, ОМе), 4.04 (с, 3Н, ОМе), 4.35 (с, 1Н, ОН), 6.51 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.09 (д, J=8.8 Hz, 1H, H-6'), 7.16 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.18 (с, 1H, H-8'), 7.83 (д, J=8.8 Hz, 0.6H, H-5'), 7.92 (д, J=8.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.29 (с, 0.6H, CH=N), 8.49 (с, 0.4H, CH=N), 8.55 (с, 0.6H, H-4'), 8.57 (с, 0.4H, H-4'), 11.32 (с, 0.6H, NH), 11.52 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.07, 21.14, 23.09, 23.30, 26.92, 26.98, 28.24, 28.30, 30.00, 30.05, 34.19, 35.79, 42.36, 42.44, 42.80, 42.84, 43.02, 43.12, 51.59, 51.78, 53.54, 54.81, 54.83, 55.48, 71.60, 106.14, 106.20, 111.60, 112.98, 115.81, 115.94, 116.69, 119.49, 119.55, 126.44, 129.60, 129.80, 131.90, 133.69, 133.96, 137.18, 137.31, 140.20, 147.97, 148.09, 157.03, 159.73, 159.76, 161.29, 161.39, 168.99, 174.96. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C31H37N3O5Na]+ [M+Na]+: вычислено 554.2625, найдено: 554.2616. Элементный анализ; вычислено для C31H37N3O5 (%): С, 70.03; Н, 7.01; N, 7.90. Найдено (%): С, 69.94; Н, 7.23; N, 7.78.Similarly, 372 mg ( 70%) [N'-(2,7-dimethoxyquinolin-3-yl)methylene] 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Io), 98% purity (by NMR). So pl. 140-142°С, + 6.4 (s 1, CHCl3 ). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 3H, H-18), 1.11-1.64 (m, 6H), 1.71-1.81 (m, 1H), 1.94-2.37 (m, 5H) , 2.67-2.84 (m, 3H), 3.67 (s, 3H, OMe), 3.90 (s, 3H, OMe), 4.04 (s, 3H, OMe), 4.35 (s, 1H, OH), 6.51 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.09 ( e, J=8.8 Hz, 1H, H-6'), 7.16 (e, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.18 (s, 1H, H-8'), 7.83 (d, J=8.8 Hz, 0.6H, H-5'), 7.92 (d, J=8.8 Hz, 0.4H, H-5'), 8.29 (s, 0.6H, CH=N), 8.49 (s, 0.4H, CH= N), 8.55 (s, 0.6H, H-4'), 8.57 (s, 0.4H, H-4'), 11.32 (s, 0.6H, NH), 11.52 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.07, 21.14, 23.09, 23.30, 26.92, 26.98, 28.24, 28.30, 30.00, 30.05, 34.19, 35.79, 42.36, 42.44, 42.80, 42.84, 43.02, 43.12, 51.59 . 4, 129.60, 129.80, 131.90, 133.69, 133.96, 137.18, 137.31, 140.20, 147.97 , 148.09, 157.03, 159.73, 159.76, 161.29, 161.39, 168.99, 174.96. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 31 H 37 N 3 O 5 Na] + [M+Na] + : calculated 554.2625, found: 554.2616. elemental analysis; calculated for C 31 H 37 N 3 O 5 (%): C, 70.03; H, 7.01; N, 7.90. Found (%): C, 69.94; H, 7.23; N, 7.78.

Пример 16.Example 16

Аналогично из 0.332 г гидразида 13β--гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг хинолин-3-карбальдегида получено 396 мг (84%) [N'-хинолин-3-илметилен]гидразида 13β-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ip), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 162-164°С, + 58.8 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 0.96-1.07 (м, 1Н), 1.18-1.35 (м, 1H), 1.19 (с, 1.8Н, Н-18), 1.22 (с, 1.2Н, Н-18), 1.39-1.76 (м, 5Н), 1.80-2.30 (м, 5Н), 2.57-2.73 (м, 1Н), 2.73-2.90 (м, 2Н, Н-6), 3.68 (с, 3Н, ОМе), 3.96 (с, 1Н, ОН), 6.57 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.67 (дд, J=8.6, 2.8 Hz, 1Н, H-2), 7.18 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.64 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.79 (t, J=1.1 Hz, 1H), 7.97-8.08 (м, 2H), 8.21 (с, 0.6H, CH=N), 8.42 (с, 0.4H, CH=N), 8.49 (д, J=1.8 Hz, 0.6H), 8.56 (д, J=1.8 Hz, 0.4H), 9.24 (д, J=1.8 Hz, 0.4H), 9.27 (д, J=1.8 Hz, 0.6H), 11.43 (с, 0.6H, NH), 11.65 (c, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 23.40, 23.60, 25.91, 26.52, 29.03, 29.18, 30.12, 33.16, 34.59, 40.53, 42.59, 49.52, 49.73, 54.79, 69.87, 111.57, 113.00, 126.39, 127.27, 127.48, 127.63, 128.39, 128.51, 128.79, 128.83, 130.14, 130.22, 132.36, 134.31, 134.38, 137.42, 137.47, 140.22, 143.31, 147.59, 147.73, 147.91, 148.29, 156.91, 169.33, 175.14. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2594,. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05. Найдено (%): С, 73.73; H, 7.18Similarly, 396 mg (84%) of 13β-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid [N'-quinolin-3-ylmethylene]hydrazide (Ip), 98% purity (by NMR ). So pl. 162-164°С, + 58.8 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 0.96-1.07 (m, 1H), 1.18-1.35 (m, 1H), 1.19 (s, 1.8H, H-18), 1.22 (s, 1.2H, H-18), 1.39-1.76 (m, 5H), 1.80-2.30 (m, 5H), 2.57-2.73 (m, 1H), 2.73-2.90 (m, 2H, H-6), 3.68 (s, 3H , OMe), 3.96 (s, 1H, OH), 6.57 (d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.67 (dd , J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.18 (d, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.64 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.79 (t, J=1.1 Hz, 1H), 7.97-8.08 (m, 2H), 8.21 (s, 0.6H, CH=N), 8.42 (s, 0.4H, CH=N), 8.49 (d, J=1.8 Hz, 0.6H) , 8.56 (d, J=1.8 Hz, 0.4H), 9.24 (d, J=1.8 Hz, 0.4H), 9.27 (d, J=1.8 Hz, 0.6H), 11.43 (s, 0.6H, NH), 11.65 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 23.40, 23.60, 25.91, 26.52, 29.03, 29.18, 30.12, 33.16, 34.59, 40.53, 42.59, 49.52, 49.73, 54.79, 69.87, 111.57, 113.00, 126.39, 127.27 127.48 127.63 128.39 128.51 128.79 128.83 130.14 130.22 132.36 134.31 134.38 137.42 137.47 140.22 147.59, 147.73, 147.91, 148.29, 156.91, 169.33, 175.14. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2594,. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05. Found (%): C, 73.73; H, 7.18

Пример 17.Example 17.

Аналогично из 0.332 г гидразида 13β--гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг хинолин-6-карбальдегида получено 391 мг (83%) [N'-хинолин-6-илметилен]гидразида 13β-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Iq), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 145-147°С, + 57.4 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 0.96-1.07 (м, 1Н), 1.19 (с, 1.8Н, Н-18), 1.22 (с, 1.2Н, Н-18), 1.24-1.39 (с, 1Н), 1.40-1.76 (с, 5Н), 1.90-2.29 (с, 5Н), 2.54-2.69 (м, 1Н), 2.73-2.90 (м, 2Н, Н-6), 3.69 (с, 3Н, ОМе), 3.96 (с, 1Н, ОН), 6.60 (д, J=2.8 Hz, 1H, Н-4), 6.68 (дд, J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.18 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.56 (дд, J=8.3, 4.1 Hz, 1H), 8.04 (д, J=8.5 Hz, 1H), 8.09-8.22 (м, 2.6H), 8.34-8.45 (м, 1.4H), 8.91 (д, J=4.1 Hz, 1H), 11.36 (с, 0.6H, NH), 11.54 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 23.42, 23.61, 25.91, 26.48, 26.55, 29.02, 29.17, 30.13, 33.25, 34.63, 40.12, 40.54, 42.59, 49.52, 49.76, 54.81,69.90, 111.60, 113.02, 122.03, 122.07, 125.75, 126.37, 127.87, 127.90, 128.05, 128.10, 129.50, 132.37, 132.52, 132.70, 136.21, 136.29, 137.44, 137.47, 141.88, 144.88, 148.24, 148.33, 151.03, 151.07, 156.92, 169.25, 175.06. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595, найдено: 472.2579. Элементный анализ; вычислено для for C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05. Найдено (%): С, 73.75; Н, 7.19.Similarly, 391 mg (83%) of 13β-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid [N'-quinolin-6-ylmethylene]hydrazide (Iq), 98% purity (by NMR ). So pl. 145-147°С, + 57.4 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 0.96-1.07 (m, 1H), 1.19 (s, 1.8H, H-18), 1.22 (s, 1.2H, H-18), 1.24-1.39 ( s, 1H), 1.40-1.76 (s, 5H), 1.90-2.29 (s, 5H), 2.54-2.69 (m, 1H), 2.73-2.90 (m, 2H, H-6), 3.69 (s, 3H , OMe), 3.96 (s, 1H, OH), 6.60 (d, J=2.8 Hz, 1H, H-4), 6.68 (dd, J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.18 (d , J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.56 (dd, J=8.3, 4.1 Hz, 1H), 8.04 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.09-8.22 (m, 2.6H), 8.34 -8.45 (m, 1.4H), 8.91 (d, J=4.1 Hz, 1H), 11.36 (s, 0.6H, NH), 11.54 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 23.42, 23.61, 25.91, 26.48, 26.55, 29.02, 29.17, 30.13, 33.25, 34.63, 40.12, 40.54, 42.59, 49.52, 49.76, 54.81, 69.90, 111.60, 113.02 122.03 122.07 125.75 126.37 127.87 127.90 128.05 128.10 129.50 132.37 132.52 132.70 136.21 136.29 137.44 137.47, 141.88, 144.88, 148.24, 148.33, 151.03, 151.07, 156.92, 169.25, 175.06 . High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595, found: 472.2579. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05. Found (%): C, 73.75; H, 7.19.

Пример 18.Example 18.

Аналогично из 0.332 г гидразида 13β--гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 206 мг 8-метоксихинолин-5-карбальдегида получено 431 мг (86%) [N'-(8-метоксихинолин-5-ил)метилен]гидразида 13β-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Ir), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 142-144°С, + 41.0 (с 1, ДМСО). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 0.96-1.07 (м, 1Н), 1.13-1.34 (м, 1Н), 1.19 (с, 3Н, Н-18), 1.39-1.78 (м, 5Н), 1.87-2.33 (м, 5Н), 2.57-2.97 (м, 3Н), 3.69 (с, 3Н, ОМе), 3.93 (с, 0.6Н, ОН), 3.94 (с, 0.4Н, ОН), 4.01 (с, 3Н, ОМе), 6.57 (д, J=2.8 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.61 (д, J=2.8 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.67 (дд, J=8.6, 2.8 Hz, 1Н, H-2), 7.18 (д, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.25 (д, J=8.2 Hz, 1H, H-7'), 7.59 (дд, J=8.4, 4.5 Hz, 0.6H, H-3'), 7.67 (дд, J=8.4, 4.5 Hz, 0.4H, H-3'), 7.79 (д, J=8.2 Hz, 1H, H-6'), 8.46 (c, 0.6H, CH=N), 8.59 (с, 0.4H, CH=N), 8.86-8.93 (м, 1H, H-2'), 9.22 (д, J=8.4 Hz, 0.6H, H-4'), 9.47 (д, J=8.4 Hz, 0.4H, H-4'), 11.13 (с, 0.6H, NH), 11.35 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 23.24, 23.50, 25.92, 26.47, 26.53, 29.15, 30.04, 30.11, 32.88, 34.61, 40.54, 42.57, 49.53, 49.73, 54.81, 55.85, 69.91, 107.85, 107.94, 111.55, 113.02, 121.77, 122.58, 122.67, 126.11, 126.24, 126.37, 129.55, 130.47, 132.41, 132.70, 133.36, 137.49, 142.65, 146.06, 148.99, 156.41, 156.56, 156.92, 168.96, 174.68. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C30H33N3O4]+ [М+Н]+: вычислено 502.2700. найдено: 502.2690. Элементный анализ; вычислено для for C30H35N3O4 (%): С, 71.83; Н, 7.03; N, 8.38. Найдено (%): С, 71.67; Н, 7.34; N, 8.25Similarly, 431 mg (86 %) [N'-(8-methoxyquinolin-5-yl)methylene]hydrazide 13β-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Ir) , purity 98% (by NMR). So pl. 142-144°С, + 41.0 (s 1, DMSO). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 0.96-1.07 (m, 1H), 1.13-1.34 (m, 1H), 1.19 (s, 3H, H-18), 1.39-1.78 (m, 5H) , 1.87-2.33 (m, 5H), 2.57-2.97 (m, 3H), 3.69 (s, 3H, OMe), 3.93 (s, 0.6H, OH), 3.94 (s, 0.4H, OH), 4.01 ( s, 3H, OMe), 6.57 (d, J=2.8 Hz, 0.6H, H-4), 6.61 (d, J=2.8 Hz, 0.4H, H-4), 6.67 (dd, J=8.6, 2.8 Hz, 1H, H-2), 7.18 (d, J=8.6 Hz, 1H, H-1), 7.25 (d, J=8.2 Hz, 1H, H-7'), 7.59 (dd, J=8.4, 4.5 Hz, 0.6H, H-3'), 7.67 (dd, J=8.4, 4.5 Hz, 0.4H, H-3'), 7.79 (d, J=8.2 Hz, 1H, H-6'), 8.46 (s, 0.6H, CH=N), 8.59 (s, 0.4H, CH=N), 8.86-8.93 (m, 1H, H-2'), 9.22 (d, J=8.4 Hz, 0.6H, H -4'), 9.47 (d, J=8.4 Hz, 0.4H, H-4'), 11.13 (s, 0.6H, NH), 11.35 (s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 23.24, 23.50, 25.92, 26.47, 26.53, 29.15, 30.04, 30.11, 32.88, 34.61, 40.54, 42.57, 49.53, 49.73, 54.81, 55.85, 69.91, 107.85, 107.94 111.55 113.02 121.77 122.58 122.67 126.11 126.24 126.37 129.55 130.47 132.41 132.70 133.36 137.49 146.06, 148.99, 156.41, 156.56, 156.92, 168.96, 174.68. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 30 H 33 N 3 O 4 ] + [M+H] + : calculated 502.2700. found: 502.2690. elemental analysis; calculated for C 30 H 35 N 3 O 4 (%): C, 71.83; H, 7.03; N, 8.38. Found (%): C, 71.67; H, 7.34; N, 8.25

Пример 19.Example 19.

Аналогично из 0.332 г гидразида 13β--гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты и 173 мг N'-изохинолин-5-карбальдегида получено 377 мг (80%) [N'-изохинолин-5-илметилен]гидразида 13α-гидрокси-3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты (Is), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 162-165°С, + 73.9(с 1, EtOH). 1Н ЯМР (300 MHz, ДМСО-d6) δ 1.01 (с, 1.8Н, Н-18), 1.02 (с, 1.2Н, Н-18), 1.08-1.67 (м, 5Н), 1.72-1.82 (м, 1Н), 1.94-2.45 (м, 5Н), 2.65-2.92 (м, 3Н), 3.67 (с, 3Н, ОМе), 4.35 (с, 0.6Н, ОН), 4.42 (с, 0.4Н, ОН), 6.56 (д, J=2.7 Hz, 0.6Н, Н-4), 6.60 (д, J=2.7 Hz, 0.4Н, Н-4), 6.66 (дд, J=8.7, 2.7 Hz, 1Н, H-2), 7.15 (д, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.75 (дд, J=8.1, 7.3 Hz, 1H), 8.05-8.13 (м, 1H), 8.18 (д, J=8.1 Hz, 1H), 8.47 (д, J=6.1 Hz, 0.6H), 8.59 (д, J=6.1 Hz, 0.6H), 8.61 (с, 0.6H, CH=N), 8.61 (д, J=6.1 Hz, 0.4H), 8.73 (с, 0.4H, CH=N), 8.74 (д, J=6.1 Hz, 0.4H), 9.37 (с, 1H), 11.36 (с, 0.6H, NH), 11.61 (с, 0.4H, NH). 13C ЯМР (75 MHz, ДМСО-d6) δ 21.13, 22.89, 23.29, 27.05, 28.27, 28.30, 30.01, 33.95, 35.79, 42.37, 42.44, 42.82, 43.08, 51.59, 51.81, 54.84, 71.59, 71.66, 111.65, 113.00, 116.85, 117.49, 126.45, 127.11, 127.16, 128.60, 128.88, 128.95, 129.61, 129.84, 130.81, 131.91, 132.32, 132.36, 137.30, 137.34, 141.26, 144.08, 144.14, 144.83, 153.14, 153.20, 157.04, 169.23, 174.98. Масс-спектр высокого разрешения (ESI) для [C29H34N3O3]+ [М+Н]+: вычислено 472.2595н. найдено: 472.2598. Элементный анализ; вычислено для C29H33N3O3 (%): С, 73.86; Н, 7.05; N, 8.91. Найдено (%): С, 73.72; Н, 7.18; N, 8.80. Предлагаемый новый тип гибридных соединений - секостероида и хинолина общей формулой I был подвергнут скринингу на антипролиферативную активность в отношении чувствительной к эстрогену линии клеток рака молочной железы человека MCF-7.Similarly, 377 mg ( 80%) [N'-isoquinolin-5-ylmethylene]hydrazide 13α-hydroxy-3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid (Is), purity 98% (according to NMR). So pl. 162-165°С, + 73.9(s 1, EtOH). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) δ 1.01 (s, 1.8H, H-18), 1.02 (s, 1.2H, H-18), 1.08-1.67 (m, 5H), 1.72-1.82 ( m, 1H), 1.94-2.45 (m, 5H), 2.65-2.92 (m, 3H), 3.67 (s, 3H, OMe), 4.35 (s, 0.6H, OH), 4.42 (s, 0.4H, OH ), 6.56 (d, J=2.7 Hz, 0.6H, H-4), 6.60 (d, J=2.7 Hz, 0.4H, H-4), 6.66 (dd, J=8.7, 2.7 Hz, 1H, H -2), 7.15 (d, J=8.7 Hz, 1H, H-1), 7.75 (dd, J=8.1, 7.3 Hz, 1H), 8.05-8.13 (m, 1H), 8.18 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.47 (d, J=6.1 Hz, 0.6H), 8.59 (d, J=6.1 Hz, 0.6H), 8.61 (s, 0.6H, CH=N), 8.61 (d, J=6.1 Hz, 0.4H), 8.73 (s, 0.4H, CH=N), 8.74 (d, J=6.1 Hz, 0.4H), 9.37 (s, 1H), 11.36 (s, 0.6H, NH), 11.61 ( s, 0.4H, NH). 13 C NMR (75 MHz, DMSO-d 6 ) δ 21.13, 22.89, 23.29, 27.05, 28.27, 28.30, 30.01, 33.95, 35.79, 42.37, 42.44, 42.82, 43.08, 51.59, 51.81, 54.84, 71.59, 71.66, 111.65 113.00 116.85 117.49 126.45 127.11 127.16 128.60 128.88 128.95 129.61 129.84 130.81 131.91 132.32 137.30, 137.34, 141.26, 144.08, 144.14, 144.83, 153.14, 153.20, 157.04, 169.23 , 174.98. High resolution mass spectrum (ESI) for [C 29 H 34 N 3 O 3 ] + [M+H] + : calculated 472.2595n. found: 472.2598. elemental analysis; calculated for C 29 H 33 N 3 O 3 (%): C, 73.86; H, 7.05; N, 8.91. Found (%): C, 73.72; H, 7.18; N, 8.80. The proposed new type of hybrid compounds - secosteroid and quinoline of General formula I was screened for antiproliferative activity against estrogen-sensitive human breast cancer cell line MCF-7.

Пример 20. Антипролиферативная активность заявленных соединений. Изучение антипролиферативной активности заявленных соединений проводилось на культурах эстрогензависимых клеток рака молочной железы человека MCF-7. Данные об антипролиферативной активности (IC50 - концентрация, ингибирующая рост клеток на 50% по сравнению с контролем) заявленных в изобретении соединений, приводятся в таблице 1, где для каждого соединения указана структура и номер примера их синтеза (описанных выше), а также приводятся данные об антипролиферативной активности для препарата сравнения - противоопухолевого препарата цисплатина. Определение IC50 проводилось с помощью МТТ-теста по стандартной методике, описанной в литературе [Т. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. Соединения растворяли в ДМСО (Applichem) в концентрации 10 мкМ. Клетки рака молочной железы человека MCF-7 были получены из коллекции АТСС. Клетки MCF-7 культивировали in vitro в стандартной среде DMEM (Gibco). Среда содержала 10%-ную эмбриональную сыворотку телят (HyClone), пеницилин 50 ед/мл и стрептомицин 50 мкг/мл (PanEco), инкубацию проводили при 37°С, 5%-ном СО2 и относительной влажности 80-90%. При определении количества выживших клеток был использован МТТ тест, основанный на превращении реагента МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2]-2,5-дифенилтетразол бромида) в кристаллы формазана. Клетки рассевали на 24-луночные планшеты в расчете 40 000 клеток на одну лунку. Через 24 часа добавляли анализируемые соединения; к контрольным клеткам добавляли соответствующее количество растворителя (ДМСО). Концентрация соединений в среде для культивирования варьировалась от 0.5 до 50 мкМ, при этом содержание органического растворителя в среде не превышало 0.5%. Через 72 часа роста с соединениями среду удаляли и добавляли к клеткам МТТ реагент (AppliChem) на 2 ч. После окончания инкубации клетки лизировали в ДМСО и легким встряхиванием планшета растворяли накопленный клетками формазан. Оптическую плотность полученных растворов анализировали на спектрофотометре MultiScan FC (ThermoFisher) при 571 нм. За 100% принимали выживаемость клеток, обработанных растворителем. Сравнение активности соединений выполняли с помощью статистики ANOVA в программе GraphPad.Example 20. Antiproliferative activity of the claimed compounds. The study of the antiproliferative activity of the claimed compounds was carried out on cultures of estrogen-dependent human breast cancer cells MCF-7. Data on the antiproliferative activity (IC 50 - concentration that inhibits cell growth by 50% compared to the control) of the compounds claimed in the invention are given in table 1, where for each compound the structure and number of an example of their synthesis (described above) are indicated, and also are given data on antiproliferative activity for the reference drug - the antitumor drug cisplatin. Determination of IC 50 was carried out using the MTT test according to the standard method described in the literature [T. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. Compounds were dissolved in DMSO (Applichem) at a concentration of 10 μM. MCF-7 human breast cancer cells were obtained from the ATCC collection. MCF-7 cells were cultured in vitro in standard DMEM medium (Gibco). The medium contained 10% fetal calf serum (HyClone), penicillin 50 U/ml and streptomycin 50 μg/ml (PanEco), incubation was carried out at 37°C, 5% CO 2 and relative humidity 80-90%. When determining the number of surviving cells, the MTT test was used, based on the conversion of the MTT reagent (3-[4,5-dimethylthiazole-2]-2,5-diphenyltetrazole bromide) into formazan crystals. Cells were seeded into 24-well plates at a rate of 40,000 cells per well. After 24 hours, the analyzed compounds were added; an appropriate amount of solvent (DMSO) was added to control cells. The concentration of compounds in the culture medium varied from 0.5 to 50 μM, while the content of the organic solvent in the medium did not exceed 0.5%. After 72 hours of growth with the compounds, the medium was removed and the MTT reagent (AppliChem) was added to the cells for 2 hours. After the end of incubation, the cells were lysed in DMSO, and the formazan accumulated by the cells was dissolved by slight shaking of the plate. The optical density of the resulting solutions was analyzed on a MultiScan FC spectrophotometer (ThermoFisher) at 571 nm. The survival of the cells treated with the solvent was taken as 100%. Comparison of compound activity was performed using ANOVA statistics in the GraphPad program.

Как видно из представленных данных, соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения и описанные в примерах, обладают антипролиферативным действием в микромолярных концентрациях и в большинстве случаев превосходят активность препарата сравнения цисплатина. Максимальной антипролиферативной активностью обладают соединения Ia и Ic (IC50=1.7-1.8 мкМ) и соединение If (IC50=0.8 мкМ), превосходя эталонный препарат цисплатин в 3-7 раз.As can be seen from the data presented, the compounds of the present invention and described in the examples have antiproliferative activity at micromolar concentrations and in most cases are superior to the activity of the reference drug cisplatin. Compounds Ia and Ic (IC 50 =1.7-1.8 μM) and compound If (IC 50 =0.8 μM) have the maximum antiproliferative activity, surpassing the reference drug cisplatin by 3-7 times.

Пример 21.Example 21.

Антипролиферативная активность заявленных соединений в отношении полирезистентных опухолевых клеток.Antiproliferative activity of the claimed compounds against multiresistant tumor cells.

Изучение цитотоксичности заявленных соединений Ia и Ic проводили также на культуре полирезистентных опухолевых клеток NCI/ADR-RES с экспрессией р-гликопротеина (p-gp). Известно, что экспрессия АТР-связывающих кассетных транспортеров, таких как р-гликопротеин, на поверхности опухолевых клеток является одним из наиболее типичных механизмов резистентности, развивающихся в опухолевых клетках в ответ на химиотерапию [R.W. Robey, K.М. Pluchino, M.D. Hall, А.Т. Fojo, S.E. Bates, M.M. Gottesman, Revisiting the role of ABC transporters in multidrug-resistant cancer, Nat. Rev. Cancer 2018, 18, 452-464; A.A. Stavrovskaya, E.Y. Rybalkina, Recent Advances in the Studies of Molecular Mechanisms Regulating Multidrug Resistance in Cancer Cells, Biochemistry Moscow 2018, 83, 779-786; M.P. Ceballos, J.P. Rigalli, L.I. Ceré, M. Semeniuk, V.A. Catania, MX. Ruiz, ABC Transporters: Regulation and Association with Multidrug Resistance in Hepatocellular Carcinoma and Colorectal Carcinoma, Curr. Med. Chem. 2019, 26, 1224-1250]. NCI/ADR-RES - это линия клеток, служащая общепринятой моделью для изучения резистентности опухолевых клеток к химиотерапии [А. Vert, J. Castro, М. Ribó, М. Vilanova, A. Benito, Transcriptional profiling of NCI/ADR-RES cells unveils a complex network of signaling pathways and molecular mechanisms of drug resistance, Onco Targets Ther. 2018, 11, 221-237]. Определение IC50 (IC50 - концентрация, ингибирующая рост клеток на 50% по сравнению с контролем) заявленных в изобретении соединений Ia и Ic проводилось аналогично описанному выше с помощью МТТ-теста по стандартной методике, описанной в литературе [Т. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. В качестве соединения сравнения использовался противоопухолевый препарат доксорубицин. Стандартные значения IC50 для доксорубицина лежат в области 0.05-0.5 мкМ, однако больше 50% клеток NCI/ADR-RES выживает даже при концентрации доксорубицина 2 мкМ, что показывает высокий уровень устойчивости клеток NCI/ADR-RES к доксорубицину (Таблица 2).The study of the cytotoxicity of the claimed compounds Ia and Ic was also carried out on a culture of polyresistant tumor cells NCI/ADR-RES with the expression of p-glycoprotein (p-gp). It is known that the expression of ATP-binding cassette transporters, such as p-glycoprotein, on the surface of tumor cells is one of the most typical resistance mechanisms that develop in tumor cells in response to chemotherapy [RW Robey, K.M. Pluchino, M.D. Hall, A.T. Fojo, SE Bates, MM Gottesman, Revisiting the role of ABC transporters in multidrug-resistant cancer, Nat. Rev. Cancer 2018, 18, 452-464; AA Stavrovskaya, EY Rybalkina, Recent Advances in the Studies of Molecular Mechanisms Regulating Multidrug Resistance in Cancer Cells, Biochemistry Moscow 2018, 83, 779-786; MP Ceballos, JP Rigalli, LI Ceré, M. Semeniuk, VA Catania, MX. Ruiz, ABC Transporters: Regulation and Association with Multidrug Resistance in Hepatocellular Carcinoma and Colorectal Carcinoma, Curr. Med. Chem. 2019, 26, 1224-1250]. NCI/ADR-RES is a cell line that serves as an accepted model for studying the resistance of tumor cells to chemotherapy [A. Vert, J. Castro, M. Ribó, M. Vilanova, A. Benito, Transcriptional profiling of NCI/ADR-RES cells unveils a complex network of signaling pathways and molecular mechanisms of drug resistance, Onco Targets Ther. 2018, 11, 221-237]. Determination of IC 50 (IC 50 - concentration that inhibits cell growth by 50% compared to control) claimed in the invention compounds Ia and Ic was carried out similarly to that described above using the MTT test according to the standard method described in the literature [T. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. The anticancer drug doxorubicin was used as a reference compound. Standard IC 50 values for doxorubicin lie in the region of 0.05-0.5 μM, however, more than 50% of NCI/ADR-RES cells survive even at a doxorubicin concentration of 2 μM, which indicates a high level of resistance of NCI/ADR-RES cells to doxorubicin (Table 2).

Соединения общей формулы I на примере заявленных соединения Ia и Ic показали высокую антипролиферативную активность в отношении полирезистентных опухолевых клеток NCI/ADR-RES со значениями IC50=1.5±0.3 мкМ для Ia и IC50=3.5±0.5 мкМ для Ic (Таблица 3), что демонстрирует возможность использования заявленных соединений формулы I для преодоления устойчивости опухолевых клеток к химиотерапии.Compounds of general formula I, using the example of the claimed compounds Ia and Ic, showed high antiproliferative activity against multiresistant NCI/ADR-RES tumor cells with IC 50 values \u003d 1.5 ± 0.3 μM for Ia and IC 50 = 3.5 ± 0.5 μM for Ic (Table 3) , which demonstrates the possibility of using the claimed compounds of formula I to overcome the resistance of tumor cells to chemotherapy.

Пример 22.Example 22.

Селективность заявленных соединений по отношению к опухолевым клеткам MCF-7 по сравнению с клетками нормального эпителия MCF-10A. Современные стандарты разработки лекарственных средств указывают на необходимость оценки токсичности соединений на самых ранних этапах разработки. Это позволяет отобрать соединения, которые эффективно блокируют рост опухолевых клеток, но не повреждают нетрансформированные (нормальные) клетки. Для оценки потенциальной токсичности ведущего стероида Ic выбрана линия MCF-10A. Определение IC50 (IC50 - концентрация, ингибирующая рост клеток на 50% по сравнению с контролем) соединения Ic в отношении нормальных клеток MCF-10A проводилось аналогично описанному выше с помощью МТТ-теста по стандартной методике, описанной в литературе [Т. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. В таблице 4 указаны полученные значения IC50 для секостероида Ic в сравнении с известными ведущими секостероидами общей формулы III (3l, 3d, 3q) и эталонным соединением - противоопухолевым препаратом доксорубицином. Индекс селективности (ИС) рассчитан как отношение значений IC50 для MCF-10A к значениям IC50 для MCF-7.The selectivity of the claimed compounds with respect to MCF-7 tumor cells compared to normal epithelial cells MCF-10A. Modern standards for drug development indicate the need to assess the toxicity of compounds at the earliest stages of development. This allows the selection of compounds that effectively block the growth of tumor cells, but do not damage untransformed (normal) cells. To assess the potential toxicity of the leading steroid Ic, the MCF-10A line was chosen. Determination of IC 50 (IC 50 - the concentration that inhibits cell growth by 50% compared to control) compounds Ic in relation to normal cells MCF-10A was carried out similarly to that described above using the MTT test according to the standard method described in the literature [T. Mossman, Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays, J. Immunol. Methods 1983, 65, 55-63]. Table 4 shows the obtained IC 50 values for the secosteroid Ic in comparison with the known leading secosteroids of the general formula III (3l, 3d, 3q) and the reference compound, the anticancer drug doxorubicin. The selectivity index (SI) is calculated as the ratio of the IC 50 values for MCF-10A to the IC 50 values for MCF-7.

Как видно из представленных данных, доксорубицин оказывает значительное токсическое воздействие на клетки нормального эпителия и не обладает селективностью в отношении опухолевых клеток. Заявленные в изобретении секостероиды общей формулы I на примере Ic превосходят по антипролиферативной активности известные ведущие секостероиды общей формулы III (3l, 3d, 3q), при этом ИС соединения Ic превышает ИС ведущих секостероидов общей формулы III (3l, 3d, 3q) на 48%. Таким образом, секостероиды общей формулы I на примере Ic являются высокотоксичными для опухолевых клеток и низкотоксичными для нормальных клеток. Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание новых, неописанных в литературе, соединений общей формулы I, обладающих антипролиферативной активностью в отношении клеток рака молочной железы MCF-7. Большинство полученных соединений обладают максимальной антипролиферативной активностью (IC50 от 2.5-5.0 мкМ) и превосходят по активности эталонный лекарственный препарат цисплатин (IC50 6.2 мкМ), продемонстрировали на примере секостероида Ic очень хорошую селективность в отношении опухолевых клеток (ИС=4.6) по сравнению с эталонным соединением доксорубином (ИС=0.2) и с известными секостероидами общей формулы III (3l, 3d, 3q), у которых ИС составляет от 2.5 до 3.1, а также показали на примере соединений Ia и Ic высокую антипролиферативную активность со значениями IC50=1.5±0.3 мкМ для Ia и IC50=3.5±0.5 мкМ для Ic в отношении полирезистентных опухолевых клеток NCI/ADR-RES, что демонстрирует возможность использования заявленных соединений I для преодоления устойчивости опухолевых клеток к химиотерапии.As can be seen from the presented data, doxorubicin has a significant toxic effect on normal epithelial cells and does not have selectivity for tumor cells. The secosteroids of the general formula I claimed in the invention in the example of Ic are superior in antiproliferative activity to the known leading secosteroids of the general formula III (3l, 3d, 3q), while the IS of the compound Ic exceeds the IS of the leading secosteroids of the general formula III (3l, 3d, 3q) by 48% . Thus, the secosteroids of general formula I in the example of Ic are highly toxic to tumor cells and low toxic to normal cells. The technical result of the invention is the creation of new, not described in the literature, compounds of General formula I, with antiproliferative activity against MCF-7 breast cancer cells. Most of the obtained compounds have the maximum antiproliferative activity (IC 50 from 2.5-5.0 μM) and are superior in activity to the reference drug cisplatin (IC 50 6.2 μM), demonstrated very good selectivity for tumor cells (IC = 4.6) using secosteroid Ic as an example. with the reference compound doxorubine (IC = 0.2) and with known secosteroids of the general formula III (3l, 3d, 3q), in which the IC is from 2.5 to 3.1, and also showed high antiproliferative activity with the values of IC 50 = 1.5±0.3 μM for Ia and IC 50 =3.5±0.5 μM for Ic in relation to multiresistant tumor cells NCI/ADR-RES, which demonstrates the possibility of using the claimed compounds I to overcome the resistance of tumor cells to chemotherapy.

Полученные соединения могут рассматриваться в качестве кандидатов для разработки противоопухолевых препаратов, в частности, для агрессивных раковых опухолей с множественной лекарственной устойчивостью.The obtained compounds can be considered as candidates for the development of anticancer drugs, in particular, for aggressive cancerous tumors with multidrug resistance.

Claims (5)

1. [N'-(Изо)хинолилметилен]гидразиды 3-метокси-13,17-секоэстра-1,3,5(10)-триен-17-овой кислоты общей формулы1. [N'-(Iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid of the general formula где Where R1 и R2=Н, Me, ОМе, Cl или F.R 1 and R 2 \u003d H, Me, OMe, Cl or F. 2. Соединения по п. 1, обладающие антипролиферативной активностью в отношении клеток рака молочной железы MCF-7.2. Compounds according to claim 1 having antiproliferative activity against MCF-7 breast cancer cells.
RU2023102869A 2023-02-09 [n'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid RU2801166C1 (en)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2801166C1 true RU2801166C1 (en) 2023-08-02

Family

ID=

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2601423C1 (en) * 2015-11-02 2016-11-10 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН) 16α,17α-CYCLOHEXA-17β-2'-HYDROXYETHYL)-13β-METHYLGONA-1,3,5(10)-TRIEN-3-OL AND PREPARATION METHOD THEREOF

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2601423C1 (en) * 2015-11-02 2016-11-10 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН) 16α,17α-CYCLOHEXA-17β-2'-HYDROXYETHYL)-13β-METHYLGONA-1,3,5(10)-TRIEN-3-OL AND PREPARATION METHOD THEREOF

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A.I. ILOVAISKY ET AL., Secosteroidal hydrazides: Promising scaffolds for anti-breast cancer agents, J. STEROID BIOCHEM. MOL. BIOL., 2021, 214, 106000; DOI: 10.1016/j.jsbmb.2021.106000. J. SZABO ET AL., Synthesis and in vitro pharmacological evaluation of N-[(1-benzyl-1,2,3-triazol-4-yl)methyl]-carboxamides on D-secoestrone scaffolds, J. ENZYME INHIB. MED. CHEM., 2016, 31, pp. 574-579; DOI: 10.3109/14756366.2015.1050008. C. Д. ЛОГУЗОВ И ДР., Новые производные секостероидов. Синтез 3-метокси-13-гидрокси-D-секоэстра-1,3,5(10)-триен-14β-пропан-N-арилгидразинкарботиоамидов, МАТЕРИАЛЫ ЗАОЧНЫХ ДОКЛАДОВ МЕЖДУНАРОДНОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ "АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ (18-21 НОЯБРЯ 2020 ГОДА, ЕКАТЕРИНБУРГ, РОССИЯ)", Изд-во АМБ, Екатеринбург, 2020, стр. 199. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3312163B1 (en) Deuterium-substituted dehydrophenylahistin-like compounds, preparation method thereof and use in preparation of antitumor drug
McCracken et al. Synthesis and antimalarial and antituberculosis activities of a series of natural and unnatural 4-methoxy-6-styryl-pyran-2-ones, dihydro analogues and photo-dimers
UA79229C2 (en) 3-nitrogen-6,7-dioxygen steroids and uses related thereto
CN108409663B (en) Microtubule inhibitors, methods of preparation and uses thereof
CN110563732B (en) 7- (trimethoxyphenyl) -pyrrolo [2,3-d ] pyrimidine and application thereof
KR20210003175A (en) Method for preparing a modulator of p300 and/or CBP
EP2499151A2 (en) Mammalian metabolites of steroids
US5491138A (en) Estradiol derivative alkylating agent conjugate with reduced hormonal activity, process for preparing the same, compounds useful for the preparation thereof, and growth inhibiting composition containing the conjugate or estradiol derivative
Guo et al. Synthesis, characterization and biological evaluation of some 16E-arylidene androstane derivatives as potential anticancer agents
JP3913475B2 (en) Steroid sulfatase inhibitor and method for producing and using the inhibitor
EP3611170A1 (en) Antianxiety deuterated compounds and medical use thereof
JP6842474B2 (en) Steroid compounds, compositions containing the compounds and their use
US20130005696A1 (en) Bufadienolide derivatives, preparing process thereof, composition comprising the same and the use thereof
US10246481B2 (en) Bile acid derivatives and methods for synthesis and use
Kiss et al. Stereocontrolled synthesis of the four possible 3-methoxy and 3-benzyloxy-16-triazolyl-methyl-estra-17-ol hybrids and their antiproliferative activities
RU2801166C1 (en) [n'-(iso)quinolylmethylene]hydrazides of 3-methoxy-13,17-secoestra-1,3,5(10)-trien-17-oic acid
AU2013289384B2 (en) Combination therapy for the treatment of cancer and immunosuppression
US6566341B1 (en) Derivative of isoindigo, indigo and indirubin for the treatment of cancer
CA2266051A1 (en) 3-substituted-d-homo-1,3,5,(10)-estratriene derivatives
RU2686459C1 (en) Taxanic compound, as well as preparation method and use thereof
WO2022179577A1 (en) Crystal form of cyclopropyl-substituted benzofuran compound and preparation method therefor
KR102620495B1 (en) Cyclic dinucleotide prodrug molecules and their preparation methods and applications
Makarov et al. Modification of 3, 5-bis (arylidene)-4-piperidone pharmacophore by phosphonate group using 1, 2, 3-triazole cycle as a linker for the synthesis of new cytostatics
Hou et al. Synthesis of oridonin derivatives via mizoroki-heck reaction and click chemistry for cytotoxic activity
RU2629186C1 (en) Racemic 2,17alfabeta-disulfamoyloxy-3-methoxy-d-homo-8alpha-estra-1,3,5 (10)-triene as msf-7 tumor cells proliferation inhibitor