RU2800317C1 - Способ поддержания силы и жесткости постуральных мышц млекопитающих при их функциональной разгрузке - Google Patents
Способ поддержания силы и жесткости постуральных мышц млекопитающих при их функциональной разгрузке Download PDFInfo
- Publication number
- RU2800317C1 RU2800317C1 RU2022122255A RU2022122255A RU2800317C1 RU 2800317 C1 RU2800317 C1 RU 2800317C1 RU 2022122255 A RU2022122255 A RU 2022122255A RU 2022122255 A RU2022122255 A RU 2022122255A RU 2800317 C1 RU2800317 C1 RU 2800317C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- muscle
- soleus
- suspension
- day
- strength
- Prior art date
Links
- 230000001144 postural effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 title claims description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 title description 34
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 95
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 claims abstract description 43
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 38
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims abstract description 20
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims abstract 2
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 abstract description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 25
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 25
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 13
- 206010052904 Musculoskeletal stiffness Diseases 0.000 description 12
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 10
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 7
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 6
- 208000006083 Hypokinesia Diseases 0.000 description 4
- 201000009342 Limb-girdle muscular dystrophy Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000003483 hypokinetic effect Effects 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 108010002947 Connectin Proteins 0.000 description 3
- 102000004726 Connectin Human genes 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 239000005441 aurora Substances 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000009864 tensile test Methods 0.000 description 3
- 208000020925 Bipolar disease Diseases 0.000 description 2
- 102000001267 GSK3 Human genes 0.000 description 2
- 108010014905 Glycogen Synthase Kinase 3 Proteins 0.000 description 2
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 2
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 2
- 101100013419 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) fpp gene Proteins 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 208000026214 Skeletal muscle atrophy Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000025185 skeletal muscle atrophy Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010043137 Actomyosin Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 101100421200 Caenorhabditis elegans sep-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000936911 Chionoecetes opilio Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase Proteins 0.000 description 1
- 102000010831 Cytoskeletal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037414 Cytoskeletal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- UXFSPRAGHGMRSQ-UHFFFAOYSA-N IBMP Natural products COC1=NC=CN=C1CC(C)C UXFSPRAGHGMRSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010049565 Muscle fatigue Diseases 0.000 description 1
- 102000005604 Myosin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010084498 Myosin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- 102000003921 Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma Coactivator 1-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000310 Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma Coactivator 1-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 102000041060 alpha-actinin family Human genes 0.000 description 1
- 108091060828 alpha-actinin family Proteins 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000544 articulatio talocruralis Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide;molecular oxygen Chemical compound O=O.O=C=O UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000005486 microgravity Effects 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004844 protein turnover Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical compound OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004616 tribromoethanol Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к реабилитационной и космической медицине, и касается предотвращения снижения силы и жесткости постуральных камбаловидных мышц крысы в условиях функциональной разгрузки задних конечностей методом антиортостатического вывешивания. Способ заключается в ежедневном внутрибрюшинном введении крысам хлорида лития в дозе 40 мг/кг на фоне 7-суточного антиортостатического вывешивания. Изобретение обеспечивает предотвращение атрофии мышечных волокон и поддерживание силы и жесткости изолированной камбаловидной мышцы. 6 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к реабилитационной и космической медицине, и может применяться для предотвращения атрофии мышечных волокон и поддержания максимальной мышечной силы при гипокинезии и в условиях невесомости.
Уровень техники
Скелетные мышцы млекопитающих (особенно постуральные или «антигравитационные») претерпевают значительные морфофункциональные изменения в условиях вынужденной гипокинезии и микрогравитации. В научной литературе хорошо описаны изменения, происходящие в постуральных мышцах грызунов и человека в условиях функциональной разгрузки, вызванной пребыванием в условиях реальной или модулируемой невесомости. Так, в постуральной камбаловидной мышце были отмечены такие изменения, как уменьшение площади поперечного сечения (ППС) мышечных волокон (атрофия), значительное снижение силы и жесткости мышечных волокон (атония), а также увеличение доли волокон, содержащих «быстрые» изоформы тяжелых цепей миозина (Oganov et al., 1981, 1988; Ohira et al., 1992; Caiozzo et al., 1994; McDonald and Fitts, 1995; Widrick et al., 1999; Toursel et al., 2002; Fitts et al., 2010). Атрофию мышечных волокон и сопутствующее снижение мышечного тонуса (жесткости) и силы связывают с увеличением распада ключевых саркомерных белков (миозина, актина, титина), а также снижением интенсивности синтеза миофибриллярных белков (Bodine, 2013; Atherton et al., 2016; Peris-Moreno et al., 2021). Для количественной оценки мышечного тонуса принято использовать показатели мышечной жесткости. Под мышечной жесткостью понимают приращение растягивающей силы, отнесенной к площади поперечного сечения, в ответ на относительное удлинение мышечных волокон (Shenkman et al., 2021). Мышечная жесткость может служить индикатором структурно-функционального состояния мышцы. Хорошо известно, что нахождение человека в условиях функциональной разгрузки (невесомости) приводит к снижению мышечного тонуса (Grigoriev et al., 2004), связанного с инактивацией пула «медленных» двигательных единиц мышц-экстензоров. Такое снижение мышечного тонуса (жесткости) можно называют рефлекторным (Shenkman et al., 2021). Однако было установлено, что изолированная от нервной системы скелетная мышца обладает собственной жесткостью. Жесткостные свойства изолированной скелетной мышцы определяются как активным компонентом, представленным актомиозиновыми взаимодействиями, так и состоянием белков внеклеточного матрикса и внутриклеточного цитоскелета, представленного молекулами белков, проявляющими эластические свойства (титин) и способных к механическому сопротивлению в ответ на растяжение или сокращение мышцы (Shenkman et al., 2021). Ранее было продемонстрировано, что функциональная разгрузка задних конечностей грызунов методом антиортостатического вывешивания (2-3 недели) приводит к значительному снижению пассивных свойств как изолированных камбаловидных мышц крысы (Canon and Goubel, 1995), так и отдельных мышечных волокон (Toursel et al., 2002). При этом в условиях функциональной разгрузки было установлено достоверное снижение содержания ключевого эластичного белка титина в волокнах камбаловидной мышцы (Toursel et al., 2002; Udaka et al., 2008; Ulanova et al., 2019).
В настоящее время ведутся поиски фармакологической коррекции морфофункциональных изменений в скелетных мышцах млекопитающих после периода гипокинезии (функциональной разгрузки). Одним из перспективных и одобренных медицинскими организациями препаратов является литий - препарат, который широко используется в медицинской практике для лечения биполярного расстройства и является хорошо известным природным ингибитором киназы гликогензинаты-3 (GSK-3) (Beurel et al., 2015). Показано, что литий ингибирует GSK-3 двумя способами: (а) конкурируя с ионами Mg2+, которые необходимы для киназной активности GSK-3, (б) путем увеличения ингибирующего фосфорилирования Ser9/Ser21 GSK-3a/β (Davis et al., 2018). При биполярном расстройстве литий обычно назначают в узком диапазоне (концентрация лития в сыворотке крови 0,5-1,0 ммоль) из-за опасений нефротоксичности при хронически более высокой дозе (Davis et al., 2018). Недавно опубликованные результаты показывают, что кормление мышей низкой дозой хлорида лития (10 мг/кг) в течение 6 недель приводит к концентрации хлорида лития в сыворотке 0,02 ммоль (Hamstra et al., 2020; Kurgan et al., 2019). Несмотря на то, что данная доза лития значительно ниже терапевтического диапазона, она эффективно ингибировала GSK-3 в сердечной и костной ткани мышей, что приводило к улучшению регуляции Са2+ (Hamstra et al., 2020; Kurgan, Bott, et al., 2019). GSK-3 является ферментом, который негативно регулирует анаболические процессы (синтез белка) в мышечных волокнах и способствует активации протеолитических процессов (деградация белков) (Mirzoev et al., 2021).
Из уровня техники известно, что получение мышами низкой дозы хлорида лития (10 мг/кг, с питьевой водой) в течение 6 недель ингибирует GSK-3 и повышает устойчивость к утомляемости камбаловидной мышцы за счет активации NFAT и увеличения экспрессии PGC-1-alpha и белка МуНС I, а также увеличивает генерацию удельной силы скелетных мышц (Whitely et al., 2020). Также на мышиной модели поясно-конечностной мышечной дистрофии (ПКМД) было показано, что введение хлорида лития (250 мг/кг) в течение 1 месяца может увеличивать массу скелетных мышц и диаметр мышечных волокон (Findlay et al., 2019).
Наиболее близкими к заявляемому изобретению являются следующие изобретения: способ профилактики деструкции цитоскелетных белков скелетных мышц грызунов в условиях 14-суточной функциональной разгрузки с помощью аминокислоты L-аргинина (патент на изобретение RU 2444354, 10.03.2012), а также способ предотвращения атрофии скелетных мышц при 3-суточном антиортостатическом вывешивании грызунов путем перорального введения вещества VX 745 (патент на изобретение RU 2714923, 21.02.2020). Однако в данных изобретениях применялись другие препараты и не измерялось действие используемых препаратов на активные и пассивные механические свойства изолированных постуральных мышц. Кроме того, значительно отличаются сроки функциональной разгрузки задних конечностей: 7 суток в заявляемом изобретении против 14 и 3 суток в вышеуказанных изобретениях.
Раскрытие изобретения
Технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, является отсутствие эффективных средств поддержания мышечной силы и пассивной жесткости (собственного тонуса) в условиях вынужденной гипокинезии (лежачие больные) и невесомости (космонавты на борту космической станции).
Техническим результатом заявленного изобретения является поддержание удельной силы и пассивной жесткости изолированных постуральных мышц (m. soleus) в условиях 7-суточной функциональной разгрузки путем ежедневного введения хлорида лития (LiCl). Преимуществом препарата LiCl перед известными является то, что в используемой дозе (40 мг/кг веса) он не вызывает побочных реакций и эффективно предотвращает вызванное 7-суточной функциональной разгрузкой снижение сократительных возможностей постуральной камбаловидной мышцы, если препарат вводится ежедневно, начиная с первых суток функциональной разгрузки.
Этот технический результат достигается за счет предотвращения уменьшения диаметра мышечных волокон и снижения силы и жесткости изолированных постуральных мышц при их функциональной разгрузке путем воздействия на организм фактора, ингибирующего киназу гликогнсинтазы-3 в мышечной ткани, в качестве которого используется хлорид лития (LiCl).
Из уровня техники неизвестно применение хлорида лития для профилактики негативных последствий функциональной разгрузки (антиортостатического вывешивания) для механических (сократительных) свойств изолированных постуральных мышц. Известно протективное действие LiCl для скелетных мышц в мышиной модели поясно-конечностной мышечной дистрофии (ПКМД), при этом доза вводимого хлорида лития (250 мг/кг) и длительность введения (1 месяц) были в несколько раз больше, чем заявляемом изобретении.
Краткое описание чертежей
Сущность изобретения и возможность его осуществления поясняются фиг. 1-6.
На фиг. 1 представлена площадь поперечного сечения (ППС) «медленных» (slow) и «быстрых» (fast) волокон камбаловидной мышцы (m.soleus). Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, $ - р<0.05 vs. 7HS.
На фиг. 2 представлено соотношение разных типов волокон в камбаловидной мышце (m. soleus). Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, $ - р<0.05 vs. 7HS.
На фиг. 3 представлена таблица, где приводятся параметры активных механических свойств изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы при введении хлорида лития на фоне 7-суточной функциональной разгрузки. Данные представлены в виде «среднее значения ± стандартная ошибка среднего значения». Обозначения: С - контрольная группа, C+Li -контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl. * -достоверное отличие от «С» (р<0,05); # - достоверное отличие от «7HS».
На фиг. 4 представлена удельная максимальная сила изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, # - р<0.05 vs. C+Li, $ - р<0.05 vs. 7HS.
На фиг. 5 представлена таблица, где приводятся параметры пассивных механических свойств изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы при введении хлорида лития на фоне 7-суточной функциональной разгрузки. Данные представлены в виде «среднее значения ± стандартная ошибка среднего значения». Обозначения: Fp - максимальная пиковая сила, Fs - максимальная сила в конце теста на растяжение, F/фППС - удельное напряжение, Е1/2 - модуль Юнга. С - контрольная группа, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl. * - достоверное отличие от «С» (р<0,05); # - достоверное отличие от «7HS».
На фиг. 6 представлена удельная пассивная жесткость изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, # - р<0.05 vs. C+Li, $ - р<0.05 vs. 7HS.
Осуществление изобретения
Самцы крыс Вистар возрастом 3 месяца (весом 207*+14 г) были разделены на четыре группы (по 8 крыс в каждой группе): виварный контроль (С); виварный контроль с введением хлорида лития (C+Li); 7-суточное антиортостатическое вывешивание (7HS); 7-суточное антиортостатическое вывешивание с введением хлорида лития (7HS+Li). Хлорид лития вводили в дозировке 40 мг\кг веса внутрибрюшинно один раз в сутки. Животных содержали в помещении с контролем температуры и светового дня. Все животные имели свободный доступ к пище и воде. Эвтаназия животных осуществлялась путем введения овердозы трибромэтанола. Все эксперименты с животными были одобрены Комиссией по биомедицинской этике ГНЦ РФ - ИМБП РАН (протокол №618 от 23 июня 2022 г.).
Функциональная разгрузка мышц задних конечностей осуществлялась стандартным методом антиортостатического вывешивания (англ. - hindlimb suspension, HS) грызунов (Novikov and Ilyin, 1981; Morey-Holton and Globus, 2002). В этой модели крысы подвешиваются за хвост под углом 35 градусов к полу клетки так, чтобы задние конечности не касались пола, а передние опирались на него. Эта экспериментальная модель позволяет грызуну свободно передвигаться по клетке на передних конечностях, вращаться на 360°, имея при этом доступ к корму и питьевой воде ad libitum. Данная модель одобрена институциональными комиссиями по биомедицинской этике большинства научных организаций мира, в том числе Физиологической секцией Российской Национальной комиссии по биологической этике. При правильном выполнении всех условий содержания животных, эксперименты с использованием этой модели, как правило, не сопровождаются гормональными проявлениями стресс-реакции (Ogneva et al., 2014; Tyganov et al., 2019). В исследовании крысы вывешивались в течение 7 суток. Объектом исследования являлась постуральная («антигравитационная») камбаловидная мышца (m. soleus).
Определение механических свойств изолированных мышц
Измерения силы изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) оценивали ex vivo. Перед извлечением камбаловидной мышцы измеряли оптимальную длину этой мышцы с помощью цифрового штангенциркуля in situ, располагая коленный и голеностопный суставы под прямым углом. Далее мышцу извлекали из животного и помещали в охлажденный раствор Рингера-Кребса (138 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 1 мМ NaH2PO4, 2 мМ CaCl2, 2 мМ MgCl2, 24 мМ NaHCO3, 11 мМ глюкозы), с постоянной перфузией карбогеном (95% O2 + 5% CO2), и инкубировали в течение 45 минут. Двойные простые узлы завязывали вокруг дистального и проксимального концов мышцы вблизи мышечно-сухожильного соединения. После этого мышцу прикрепляли датчику силы с одного конца и к фиксированному крючку с другого конца в ванночке с регулируемой температурой (28°С) (Aurora Scientific Bath 809С). Оптимальную длину мышцы (L0) заново определяли с помощью серии одиночных сокращений (0,5 мс, 10 В). Максимальная сила одиночных сокращений измерялась при L0. Для каждого одиночного сокращения измеряли время до пика (время, необходимое для достижения максимальной силы) и время полурасслабления (время, необходимое для падения силы до половины максимальной). Тест на тетаническое изометрическое сокращение также выполняли при L0. Камбаловидную мышцу (m. soleus) стимулировали в течение 2 секунд при частоте импульсов 40 Гц двумя параллельными платиновыми электродами. Оптимальная частота и длительность стимуляции была определена в предварительных экспериментах. Регистрировали максимальную силу тетанического сокращения. На этой же мышце измерялись пассивные механические свойства. Мышца устанавливалась на расслабленную длину (slack length, Ls), то есть на длину, когда можно зафиксировать минимальное напряжение. Затем мышца растягивалась на 25% от Ls со скоростью 50 мм/с. Мышца находилась в растянутом состоянии в течении двух минут, после чего возвращалась на Ls. Фиксировалась максимальная сила в начале теста на растяжение (peak tension, Fp) и в конце (steady tension, Fs), так как пассивное напряжение постепенно снижалось (расслабление напряжения) и выходило на плато ко второй минуте теста. Поскольку считается, что моделью мышцы могут служить 2 эластичных элемента, соединенные параллельно через вязкостной элемент, то из полученных данных рассчитывался модуль Юнга для двух эластичных элементов (Е1 и Е2). Подробно методика измерения пассивных свойств описана в работе Anderson et al., 2001. Для всех расчетов использовалось измерения, полученные в результате 5 повторений для каждой мышцы. Для нормализации показателей рассчитывали физиологическое сечение мышцы (фППС): сырой вес мышцы, деленный на оптимальную длину, умноженную на плотность мышцы (1.07 г/см3). Измерения силы были выполнены с использованием датчика силы Aurora Scientific 305C-LR с частотой сбора данных 10 кГц. Обработку данных проводили с помощью Aurora Scientific 615А Analysis Software Suite.
Статистическая обработка полученных данных
Поскольку не во всех случаях было подтверждено нормальное распределение выборки, для сравнения экспериментальных групп между собой был использован непараметрический критерий Краскела-Уоллиса. Данные представлены как среднее (М)±стандартная ошибка среднего (SEM).
Результаты
Площадь поперечного сечения (ППС) «медленных» и «быстрых» волокон камбаловидной мышцы была достоверно ниже контрольных значений после периода антиортостатического вывешивания (Фиг. 1), однако применение хлорида лития (LiCl) на фоне функциональной разгрузки предотвратило уменьшение ППС мышечных волокон m. soleus как медленного, так и быстрого типов (Фиг. 1). Кроме того, инъекции LiCl на фоне антиортостатического вывешивания позволили предотвратить изменение соотношения «медленных» и «быстрых» волокон камбаловидной мышцы, а именно, трансформацию «медленных» мышечных волокон в «быстрые» волокна (Фиг. 2).
Максимальная сила одиночного сокращения достоверно снизилась в группах «7HS» и «7HS+Li» на 29% и 23% соответственно. Антиортостатическое вывешивание в течение 7 суток также привело к снижению времени сокращения и времени полурасслабления (Фиг 3). После 7 суток вывешивания также наблюдалось снижение максимальной тетанической силы изометрического сокращения на 38% по сравнению с контролем (Фиг. 3). Введение животным LiCl в течение 7 суток привело к достоверному увеличению удельной максимальной силы сокращения изолированной камбаловидной мышцы как в группе «С+Li», так и в группе антиортостатического вывешивания («7HS+Li») по сравнению с контрольной группой («группа С») (Фиг. 3, 4). Также введение крысам хлорида лития на фоне 7-суточной функциональной разгрузки предотвращало изменение модуля юнга первого и второго эластичных элементов камбаловидной мышцы (Фиг. 5). Схожие изменения наблюдались для таких параметров, как пиковая и устойчивая пассивная жесткость изолированной камбаловидной мышцы (Фиг. 5). Эти параметры достоверно снизились после 7-суточного вывешивания на 51% и 42% процента соответственно (Фиг. 5). Это снижение предотвращалось введением хлорида лития на фоне антиортостатического вывешивания. Гистограмма, иллюстрирующая предотвращение снижения удельной пассивной жесткости изолированной камбаловидной мышцы при введении хлорида лития показана на Фиг. 6.
Таким образом, впервые было показано, что ежедневное введение крысам хлорида лития (40 мг/кг) во время 7-суточного антиортостатического вывешивания предотвращает уменьшение диаметра мышечных волокон и трансформацию волокон в «быструю» сторону, а также поддерживает основные активные и пассивные механические свойства изолированной постуральной камбаловидной мышцы.
Краткое описание фигур
Фиг 1. Площадь поперечного сечения (ППС) «медленных» (slow) и «быстрых» (fast) волокон камбаловидной мышцы (m. soleus). Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, $ - р<0.05 vs. 7HS.
Фиг 2. Соотношение разных типов волокон в камбаловидной мышце (m. soleus). Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, $ - р<0.05 vs. 7HS.
Фиг 3. Активные механические свойства изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. С - контрольная группа, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl. * - достоверное отличие от «С» (р<0,05); # - достоверное отличие от «7HS». Данные представлены в виде «среднее значения ± стандартная ошибка среднего значения».
Фиг 4. Удельная максимальная сила изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, # - р<0.05 vs. C+Li, $ - р<0.05 vs. 7HS.
Фиг 5. Пассивные механические свойства изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. Fp - максимальная пиковая сила, Fs - максимальная сила в конце теста на растяжение, F/фППС - удельное пассивное напряжение, Е1/2 - модуль Юнга. С - контрольная группа, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl. * - достоверное отличие от «С» (р<0,05); # - достоверное отличие от «7HS». Данные представлены в виде «среднее значения ± стандартная ошибка среднего значения».
Фиг 6. Удельная пассивная жесткость изолированной камбаловидной мышцы (m. soleus) крысы. Данные представлены как среднее значение ± SEM. Различия между группами представлены в % от контрольной группы. С - контрольная группа животных, C+Li - контроль + ежедневные инъекции LiCl в течение 7 суток, 7HS - 7-суточное антиортостатическое вывешивание, 7HS+Li - 7-суточное антиортостатическое вывешивание + ежедневные инъекции LiCl, * - р<0.05 vs. С, # - р<0.05 vs. C+Li, $ - р<0.05 vs. 7HS.
Список использованной литературы
1. Anderson J, Li Z, Goubel F. Passive stiffness is increased in soleus muscle of desmin knockout mouse. Muscle Nerve. 2001; 24(8): 1090-2. doi: 10.1002/mus.1115.
2. Atherton PJ, Greenhaff PL, Phillips SM, Bodine SC, Adams CM, Lang CH. Control of skeletal muscle atrophy in response to disuse: clinical/preclinical contentions and fallacies of evidence. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2016 Sep 1; 311(3):E594-604. doi: 10.1152/ajpendo.00257.2016.
3. Beurel, E., Grieco, S., Jope, R. Glycogen synthase kinase-3 (GSK3): Regulation, actions, and diseases. Pharmacology & Therapeutics. 2015. 148, 114-131. doi: 10.1016/j.pharmthera.2014.11.016.
4. Bodine SC. Disuse-induced muscle wasting. Int J Biochem Cell Biol. 2013; 45(10):2200-8. doi: 10.1016/j.biocel.2013.06.011.
5. Caiozzo VJ, Baker MJ, Herrick RE, Tao M, Baldwin KM. Effect of spaceflight on skeletal muscle: mechanical properties and myosin isoform content of a slow muscle. J Appl Physiol (1985). 1994 Apr; 76(4): 1764-73. doi: 10.1152/jappl.1994.76.4.1764.
6. Canon F, Goubel F. Changes in stiffness induced by hindlimb suspension in rat soleus muscle. Pflugers Archiv: European journal of physiology. 1995; 429:332-337. doi:10.1007/bf00374147.
7. Davis J, Desmond M, Berk M. Lithium and nephrotoxicity: Unravelling the complex pathophysiological threads of the lightest metal. Nephrology (Carlton). 2018; 23(10):897-903. doi: 10.1111/nep.13263.
8. Findlay AR, Bengoechea R, Pittman SK, Chou TF, True HL, Weihl CC. Lithium chloride corrects weakness and myopathology in a preclinical model of LGMD1D. Neurol Genet. 2019; 5(2):e318. doi: 10.1212/NXG.0000000000000318.
9. Fitts RH, Trappe SW, Costill DL, Gallagher PM, Creer AC, Colloton PA, Peters JR, Romatowski JG, Bain JL, Riley DA. Prolonged space flight-induced alterations in the structure and function of human skeletal muscle fibres. J Physiol. 2010; 588(Pt 18):3567-92. doi: 10.1113/jphysiol.2010.188508.
10. Grigoriev AI, Kozlovskaia IB, Shenkman BS. [The role of support afferents in organisation of the tonic muscle system]. Ross Fiziol Zh Im I M Sechenova. 2004; 90(5):508-21.
11. Hamstra SI, Kurgan N, Baranowski RW, Qiu L, Watson CJF, Messner HN, MacPherson REK, MacNeil AJ, Roy BD, Fajardo VA. Low-dose lithium feeding increases the SERCA2a-to-phospholamban ratio, improving SERCA function in murine left ventricles. Exp Physiol. 2020; 105(4):666-675. doi: 10.1113/EP088061.
12. Kurgan N, Bott KN, Helmeczi WE, Roy BD, Brindle ID, Klentrou P, Fajardo VA. Low dose lithium supplementation activates Wnt/β-catenin signalling and increases bone OPG/RANKL ratio in mice. Biochem Biophys Res Commun. 2019; 511(2):394-397. doi: 10.1016/j.bbrc.2019.02.066.
13. McDonald KS, Fitts RH. Effect of hindlimb unloading on rat soleus fiber force, stiffness, and calcium sensitivity. J Appl Physiol (1985). 1995 Nov; 79(5): 1796-802. doi: 10.1152/jappl. 1995.79.5.1796.
14. Mirzoev TM, Sharlo KA, Shenkman BS. The Role of GSK-3p in the Regulation of Protein Turnover, Myosin Phenotype, and Oxidative Capacity in Skeletal Muscle under Disuse Conditions. Int J Mol Sci. 2021; 22(10):5081. doi: 10.3390/ijms22105081.
15. Morey-Holton ER, Globus RK. Hindlimb unloading rodent model: technical aspects. Journal of applied physiology. 2002; 92:1367-1377. doi: 10.1152/japplphysiol.00969.2001.
16. Novikov VE, Ilyin EA. Age-related reactions of rat bones to their unloading. Aviat Space Environ Med. 1981; 52(9):551-3.
17. Oganov VS, Skuratova SA, Murashko LM, Guba F, Takach O. [Effect of short-term space flights on physiological properties and composition of myofibrillar proteins of the skeletal muscles of rats]. Kosm Biol Aviakosm Med. 1988 Jul-Aug; 22(4):50-4.
18. Oganov VS, Skuratova SA, Shirvinskaia MA. [Effect of a flight on the Cosmos-936 biosatellite on the contractile properties of rat muscle fibers]. Kosm Biol Aviakosm Med. 1981 Jun-Jul; 15(4):58-61.
19. Ogneva IV, Biryukov NS, Leinsoo ТА, Larina IM. Possible role of non-muscle alpha-actinins in muscle cell mechanosensitivity. PLoS One. 2014; 9(4):e96395. doi: 10.1371/journal.pone.0096395.
20. Ohira Y, Jiang B, Roy RR, Oganov V, Ilyina-Kakueva E, Marini JF, Edgerton VR. Rat soleus muscle fiber responses to 14 days of spaceflight and hindlimb suspension. J Appl Physiol (1985). 1992 Aug; 73 (2 Suppl):51S-57S. doi: 10.1152/jappl.1992.73.2.S51.
21. Peris-Moreno D, Cussonneau L, Combaret L, Polge C, Taillandier D. Ubiquitin Ligases at the Heart of Skeletal Muscle Atrophy Control. Molecules. 2021 Jan 14; 26(2):407. doi: 10.3390/molecules26020407.
22. Shenkman BS, Tsaturyan AK, Vikhlyantsev IM, Kozlovskaya IB, Grigoriev AI. Molecular Mechanisms of Muscle Tone Impairment under Conditions of Real and Simulated Space Flight. Acta Naturae. 2021; 13(2):85-97. doi: 10.32607/actanaturae. 10953.
23. Toursel T, Stevens L, Granzier H, Mounier Y. Passive tension of rat skeletal soleus muscle fibers: effects of unloading conditions. J Appl Physiol (1985). 2002; 92(4): 1465-72. doi: 10.1152/japplphysiol.00621.2001.
24. Tyganov SA, Mochalova EP, Belova SP, Sharlo KA, Rozhkov SV, Vilchinskaya NA, Paramonova II, Mirzoev TM, Shenkman BS. Effects of Plantar Mechanical Stimulation on Anabolic and Catabolic Signaling in Rat Postural Muscle Under Short-Term Simulated Gravitational Unloading. Front Physiol. 2019; 10:1252. doi: 10.3389/fphys.2019.01252.
25. Udaka J, Ohmori S, Terui T, Ohtsuki I, Ishiwata S, Kurihara S, Fukuda N. Disuse-induced preferential loss of the giant protein titin depresses muscle performance via abnormal sarcomeric organization. The Journal of general physiology. 2008; 131:33-41. doi:10.1085/jgp.200709888.
26. Ulanova A, Gritsyna Y, Salmov N, Lomonosova Y, Belova S, Nemirovskaya T, Shenkman B, Vikhlyantsev I. Effect of L-Arginine on Titin Expression in Rat Soleus Muscle After Hindlimb Unloading. Frontiers in physiology. 2019; 10:1221. doi: 10.3389/fphys.2019.01221.
27. Whitley КС, Hamstra SI, Baranowski RW, Watson CJF, MacPherson REK, MacNeil AJ, Roy BD, Vandenboom R, Fajardo VA. GSK3 inhibition with low dose lithium supplementation augments murine muscle fatigue resistance and specific force production. Physiol Rep.2020; 8(14):e14517. doi: 10.14814/phy2.14517.
28. Widrick JJ, Knuth ST, Norenberg KM, Romatowski JG, Bain JL, Riley DA, Karhanek M, Trappe SW, Trappe ТА, Costill DL, Fitts RH. Effect of a 17 day spaceflight on contractile properties of human soleus muscle fibres. J Physiol. 1999; 516 (Pt 3):915-30. doi: 10.1111/j. 1469-7793.1999.0915u.x.
Claims (1)
- Способ поддержания силы и жесткости постуральных камбаловидных мышц млекопитающих при их функциональной разгрузке, заключающийся в ежедневном внутрибрюшинном введении крысам хлорида лития в дозе 40 мг/кг на фоне 7-суточного антиортостатического вывешивания.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2800317C1 true RU2800317C1 (ru) | 2023-07-20 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2444354C2 (ru) * | 2010-03-23 | 2012-03-10 | Учреждение Российской академии наук Государственный научный центр Российской Федерации - Институт медико-биологических проблем Российской академии наук (ГНЦ РФ - ИМБП РАН) | Способ профилактики и снижения деструкции цитоскелетных белков скелетных мышц при их атрофии, вызванной гипокинезией и/или гравитационной разгрузкой |
| RU2529813C1 (ru) * | 2013-08-13 | 2014-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУ ФНКЦ ФМБА России) | Способ моделирования физиологических эффектов пребывания на поверхности планет с пониженным уровнем гравитации |
| RU2714923C1 (ru) * | 2019-03-20 | 2020-02-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Применение vx 745 для предотвращения атрофии скелетных мышц при их функциональной разгрузке |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2444354C2 (ru) * | 2010-03-23 | 2012-03-10 | Учреждение Российской академии наук Государственный научный центр Российской Федерации - Институт медико-биологических проблем Российской академии наук (ГНЦ РФ - ИМБП РАН) | Способ профилактики и снижения деструкции цитоскелетных белков скелетных мышц при их атрофии, вызванной гипокинезией и/или гравитационной разгрузкой |
| RU2529813C1 (ru) * | 2013-08-13 | 2014-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУ ФНКЦ ФМБА России) | Способ моделирования физиологических эффектов пребывания на поверхности планет с пониженным уровнем гравитации |
| RU2714923C1 (ru) * | 2019-03-20 | 2020-02-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Применение vx 745 для предотвращения атрофии скелетных мышц при их функциональной разгрузке |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Дёмина А.В., Коваленко А.А, Антонова И.В., Смоленский И.В., Захарова М.В. Применение блокатора метаботропных рецепторов глутамата 5-го типа в период эпилептогенеза усиливает тревожно-депрессивные нарушения у крыс в литий-пилокарпиновой модели эпилепсии. Секция "ПАТОФИЗИОЛОГИЯ". АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ БИОМЕДИЦИНЫ - 2021, с. 47-48. Вахитов П.Г., Мустаева А.С., Султанов Р.В., Протопопов В.А. МЕМБРАННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЦЕРАМИДА, ФЛОТИЛЛИНА И АМИНОКИСЛОТНОГО ТРАНСПОРТЕРА SNАT2 В M. SOLEUS НА ФОНЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ РАЗГРУЗКИ. АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ БИОМЕДИЦИНЫ, 2021, с. 29-30. ЗОЗУЛЯ И. С. и др. Мышечно-фасциальная дисфункция. Пути ее коррекции. Международный неврологический журнал. N 4(66), 2014, с. 41-50. Справочник химика 21. ХИМИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ. Опубликовано 15.08.2017, по данным web.archive. https://web.archive.org/web/20170815032936/https://chem21.info/article/275156/. Vijayalakshmi Adipudi, V. Krishna Reddy. Effect of chronic lithium chloride on membrane adenosine triphosphatases in certai * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Eide | Wind‐up and the NMDA receptor complex from a clinical perspective | |
| Verdú et al. | Influence of aging on peripheral nerve function and regeneration | |
| Cairncross et al. | Olfactory projection systems, drugs and behaviour: a review | |
| Pucilowski et al. | Aggressive behaviour and the central serotonergic systems | |
| Wu et al. | Dietary curcumin counteracts the outcome of traumatic brain injury on oxidative stress, synaptic plasticity, and cognition | |
| Zhang et al. | Physical inactivity induces the atrophy of skeletal muscle of rats through activating AMPK/FoxO3 signal pathway. | |
| ES2306465T3 (es) | Procedimiento para la reduccion a largo plazo de almacenes de grasa corporal,resistencia a insulina,hiperinsulinemia e hiperglucemia en vertebrados. | |
| Spaulding et al. | Is exercise the right medicine for dystrophic muscle | |
| Kong et al. | Melatonin induces Akt phosphorylation through melatonin receptor-and PI3K-dependent pathways in primary astrocytes | |
| Klepstad et al. | Four years' treatment with ketamine and a trial of dextromethorphan in a patient with severe post‐herpetic neuralgia | |
| Ding et al. | Involvement of TRPV4-NO-cGMP-PKG pathways in the development of thermal hyperalgesia following chronic compression of the dorsal root ganglion in rats | |
| Yu et al. | Depression-like behavior in a dehydroepiandrosterone-induced mouse model of polycystic ovary syndrome | |
| Maggi et al. | Visceromotor responses to calcitonin gene-related peptide (CGRP) in the rat lower urinary tract: evidence for a transmitter role in the capsaicin-sensitive nerves of the ureter | |
| RU2800317C1 (ru) | Способ поддержания силы и жесткости постуральных мышц млекопитающих при их функциональной разгрузке | |
| Rakhshan et al. | Evaluation of chronic physical and psychological stress induction on cardiac ischemia/reperfusion injuries in isolated male rat heart: the role of sympathetic nervous system | |
| Yonehara et al. | Involvement of NMDA–nitric oxide pathways in the development of tactile hypersensitivity evoked by the loose-ligation of inferior alveolar nerves in rats | |
| Pentore et al. | Accidental choke cherry poisoning: early symptoms and neurological sequelae of an unusual case of cyanide intoxication | |
| Karasu-Minareci et al. | The achilles heel in melatonin: asthma | |
| Nyborg et al. | Angiotensin-II contracts isolated human posterior ciliary arteries. | |
| Yumatov et al. | System Organization of the Relationship between Emotional Stress and Sleep | |
| WO2015060746A1 (ru) | Комбинация для лечения и/или профилактики проявлений психических, когнитивных, поведенческих и неврологических нарушений при органических заболеваниях цнс различного генеза | |
| Okamoto et al. | Inhibition of temporomandibular joint input to medullary dorsal horn neurons by 5HT3 receptor antagonist in female rats | |
| Kasri et al. | Effects of unilateral and bilateral labyrinthectomy on rat postural muscle properties: the soleus | |
| Tanida et al. | Day–night difference in thermoregulatory responses to olfactory stimulation | |
| Dellefave et al. | Cardiomyopathy in neuromuscular disorders |