RU2799917C1 - Способ ранней диагностики задержки развития плода - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинаталогии, и может быть использовано для ранней диагностики задержки развития плода. Исследуют сыворотку крови беременной, взятой на 8 неделе беременности. Определяют содержание коллагена 1 типа (COL1) и активность металлопротеиназы ММР-1. Рассчитывают коэффициент соотношения COL1/ММР-1. При величине коэффициента равного 1,67 и ниже диагностируют задержку развития плода. Способ обеспечивает повышение точности диагностики развития задержки роста плода за счет определения коэффициента соотношения COL1/ММР-1 в сыворотке крови беременной, взятой на 8 неделе беременности, что позволяет назначать своевременную адекватную терапию в более раннем периоде. 2 пр.

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и перинаталогии, и найдет широкое применение при разработке акушерской практики.

Современные данные литературы свидетельствуют о высокой перинатальной заболеваемости (17-36%) и смертности (8-24%) при гипотрофии плода (Стрижаков А.Н., Мирющенко М.М., Игнатко И.В., и соавт. 2017). В последующем, эти дети отстают в физическом и интеллектуальном развитии значительно чаще, чем доношенные и недоношенные, имеющие массу, нормальную для своего гестационного срока. В современном акушерстве актуальна проблема плацента-ассоциированных осложнений беременности, к которым относится и задержка развития плода (ЗРП).

Согласно данным ВОЗ, в мире ежегодно рождается около 21 млн. детей, имеющих малую массу тела. Проблема этиологии, диагностики и лечения задержки роста плода являются актуальными для акушерства и перинатологии, что связано с частотой его развития и последствиями для новорожденных.

Кроме задержки физического развития отмечаются также особенности становления многих органов и систем. Так, нарушения иммунологического статуса ведут к повышенной заболеваемости острыми респираторными и кишечными инфекциями, пневмониями, экссудативным диатезом, анемией, рахитом. Частота неврологических нарушений, по данным различных исследователей, варьирует от 10 до 45% (Радзинский В.Е., 2012; Захарова Л.И., Печкуров Д.В., Кольцова Н.С., 2014). Разноречивость данных о частоте ЗРП обусловлена и тем, что до настоящего времени нет единого мнения относительно определения этого осложнения. Высокий процент частоты ЗРП зарегистрирован у тех авторов, которые включали в это понятие все случаи рождения маловесных детей, не исключая конституционально и генетически обусловленные (Ганичкина М.Б., Мантрова Д.А., Кан Н.Е., Тютюнник В.Л., Хачатурян А.А., Зиганшина М.М. Ведение беременности при задержке роста плода. Акушерство и гинекология. 2017; 10: 5-11). Относительно низкий процент наблюдается у исследователей, которые учитывали только ЗРП как результат осложнения беременности (Безнощенко Г.Б., Кравченко Е.Н., Куклина Л.В., и соавт. Задержка роста плода: факторы риска и прогнозирование. Таврический медико-биологический вестник. 2016. Т. 19. N 2. С. 18-21).

В настоящее время существует ранняя и поздняя форма задержки роста плода, имеющие различный патогенез и требующие разных подходов к диагностике, что позволит выработать рациональную акушерскую тактику, снизит риск для матери и плода и улучшит перинатальные исходы при ЗРП.

Несмотря на многочисленные исследования, посвященные различным аспектам ЗРП, эта проблема остается до конца не изученной.

В связи с этим актуальным представляется выявление ранних диагностических маркеров задержки развития плода с целью проведения своевременных лечебных мероприятий.

Анализ патентной и научно-медицинской литературы позволил проанализировать наличие существующих способов диагностики задержки роста плода. Более современным приемом диагностики ЗРП, служит использование нескольких фетометрических показателей, но они являются информативными, только в третьем триместре беременности (в 26-38 недель) (Стрижаков А.Н., Мирющенко М.М., Игнатко И.В., Попова Н.Г., Флорова B.C., Кузнецов А.С. Прогнозирование синдрома задержки роста плода у беременных высокого риска. Акушерство и гинекология. 2017; 7: 34-44). Ультразвуковая диагностики ЗРП основана на сопоставлении фетометрических показателей, полученных в результате исследования, с нормативными показателями для данного срока беременности.

В последнее время для выявления синдрома ЗРП применяют допплерометрическое определение объемного кровотока в аорте плода, пупочной вене или внутренней сонной артерии с последующим анализом кривых скоростей кровотока (с помощью систоло-диастолического отношения (S/D) и индекса резистентности Pi). Однако все эти исследования наиболее достоверны в сроке с 17-20 недель беременности.

Известен способ диагностики ЗРП (заявка N 2001112477/14, 2001 г.) согласно которому на основании УЗИ матки и определении индекса пульсации, при его повышении в маточных артериях диагностируют ЗВРП.

В патенте N 2172958 (2001 г.) предложен способ диагностики ЗРП, который позволяет осуществить диагностику на ранних этапах развития задержки роста плода путем анализа периферической крови, включающий выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции и определения аллеля PL-AII гена гликопротеина IIIA. Следует отметить, что данный способ имеет главный недостаток, прежде всего, ограниченность применения, ввиду сложности его выполнения, выражающейся в длительности его исполнения и нескольких этапов данного определения.

Еще одним способом раннего прогнозирования синдрома задержки развития плода является определение в периферической венозной крови содержания HLA-DR+моноцитов (патент 2265224, 2004 г.) и при его значении, равном или меньшем 57,9%, прогнозируют развитие синдрома ЗРП. Следует отметить, что данный способ также ограничен в применении ввиду сложности и длительности его выполнения.

В патенте РФ N 2331365 (2007) предложен способ диагностики синдрома задержки внутриутробного развития плода по определению в крови беременной женщины содержания аллантоина и при значениях его концентрации от 2,9 до 5,8 мкмоль/л диагностируют синдром задержки внутриутробного развития плода. Данный способ не является специфичным, так как выраженное уменьшение данного показателя наблюдается не только при ЗРП, а также при неразвивающейся беременности и ранних самопроизвольных абортах.

Имеется патент N 2246733 (2003 г.) на изобретение «Способ прогнозирования задержки внутриутробного развития плода», в котором определяют содержание инсулиноподного фактора роста (ИПФР) и сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР), рассчитывают коэффициент их отношения и при величине его 28,5 и ниже диагностируют задержку развития плода. Данный способ обладает рядом несовершенств (он неспецифичен, требует дорогостоящей аппаратуры и импортных наборов реагентов для иммуноферментного анализа).

Известен «Способ диагностики задержки роста плода» (RU 2425379 С1, 2011) по определению аргинина и пролина и по их коэффициенту равному 3,2 и выше, диагностируют задержку развития плода.

Прототипом данного изобретения избран способ раннего прогнозирования задержки роста плода, описанный в патенте RU 2718725 С1 2020 г., в котором у женщин в 9 нед. в перефирической венозной крови определяют уровень карбонильных производных и при его величине 1,9 ммоль/л прогнозируют задержку роста плода. Данный способ обладает рядом несовершенств:

1. Способ недостаточно специфичен - изменение уровня карбонильных производных наблюдается при различных осложнениях беременности - гестозе, угрозе прерывания беременности, преждевременных родах, ФПН (Погорелова Т.Н., Гунько В.О., Никашина А.А. и соавт. // Российский Вестник акушера-гинеколога - 2019. Т. 19. - №2. - С. 42-46).

2. Метод трудоемок и длителен по времени его выполнения.

3. Осуществление метода требует специфической аппаратуры, что затрудняет его широкое применение в клинической практике.

Указанные недостатки устраняются в заявляемом изобретении.

Задача изобретения: повышение точности и специфичности, путем разработки способа ранней диагностики задержки развития плода (ЗРП).

Поставленная задача решается следующим образом. В венозной крови женщины в сроки беременности (с 8-9 недель гестации) определяют содержание коллагена и активность коллагеназы, рассчитывают коэффициент их отношения и при величине коэффициента равного 1,67 и ниже, диагностируют задержку роста плода.

Технический результат, получаемый в ходе использования изобретения, состоит в повышении точности диагностики развития задержки роста плода, что позволяет назначать своевременную адекватную терапию в более раннем периоде.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается диагностировать ЗРП у беременных в раннем периоде, исследуя сыворотку крови (однократно) и определяя в ней соотношение содержания коллагена к коллагеназе.

Доказано, что из 3-х основных типов коллагена более 90% составляет именно 1 тип, представленный в сосудах, сердце, коже и т.д. (Кац Я.А. Диагностика: основы теории и практики; монография. - Саратов, 2012. - 358 с.).

Значимость понимания ранней диагностики и профилактики нарушений в работе функциональной системы коллагенообразования очевидна. Стоит учитывать тот факт, что при продолжительном воздействии повреждающих факторов нарастает активация металлопротеиназ с разрушением эластических свойств сосудов, повышением перефирического сопротивления. Таким образом, ферментативно-морфологические особенности формируются и распространяются на все капиллярно-соединительнотканные структуры или клеточно-биохимические комплексы соединительной ткани, роль которых многообразна (Кац Я.А, Пархонюк Е.В., Акимова Н.С. Ж. Фундаментальные исследования, 2013, №5. С. 189-195). Их значимость состоит в том, что через них осуществляется контроль над состоянием коллагенобразующей системы и биосинтезом коллагенового белка.

Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения.

Указанный способ осуществляется путем исследования сыворотки крови.

Содержание коллагена 1 типа (COL1) и активность металлопротеиназы ММР-1 (коллагеназы), определяли иммуноферментными наборами «ELISA», USA. Данные наборы имеют высокую чувствительность и специфичность для определения COL1 и ММР-1. Не обнаружено значимой кросс-реактивности и интерференции с аналогами. Точность внутри одного набора (коэффициент вариации <10%).

Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами.

Пример 1. Г. 22 года. Пришла на консультативный прием в поликлинику РНИИАП 6.02.2021 г. Первобеременная. Дз: беременность 8 нед., низкая плацентация.

7.02.2021 г. произведено взятие крови из вены. Определено содержание в сыворотке крови коллагена и активности коллагеназы иммуноферментным методом (наборами фирмы «ELISA», USA на фотометре «Victor», Финляндия). Уровень коллагена составил - 387,1 пг/мл, активность коллагеназы - 521,0 пг/мл. Коэффициент отношения коллаген/коллагеназа=0,74.

Поставлен диагноз: высокий риск развития ЗРП. Женщина в течение беременности находилась под наблюдением врача женской консультации. В 32 нед. беременности ей был поставлен диагноз ЗРП 1 степени. 15.11.2021 г. Поступила в родильное отделение на роды, которые завершились рождением живого ребенка, с массой 2440,0. Данный клинический пример подтверждает возможность диагностики ЗРП по предложенному нами коэффициенту в ранние сроки.

Пример 2. Беременная К. 23 года. Пришла на консультативный прием в поликлинику РНИИАП 24.05.2021 г. Дз.: беременность 8 нед.

Произведено аналогичным методом определение содержания в сыворотке крови коллагена и коллагеназы. Уровень коллагена соответствовал 548,5 пг/мл, а активность коллагеназы 342,8 пг/мл. Коэффициент соотношения коллаген/коллагеназа был равен 1,68, что свидетельствовало об отсутствии ЗРП.

В течение всего периода гестации пациентка находилась под наблюдением в консультации РНИИАП.

28.12.2021 г. Женщина поступила на роды в родильное отделение. Дз: беременность 39 нед. Роды спонтанные, закончились рождением живого, доношенного ребенка с массой 3600,0.

Данный клинический пример подтверждает отсутствие развития ЗРП.

По заявляемому способу обследовано 37 беременных женщин, среди которых у 11 коэффициент соотношения коллаген/коллагеназа в 8 нед. беременности равен 1,67 и ниже, а у 26 пациенток он был 1,68 и выше. У всех беременных с коэффициентом 1,67 и ниже наблюдалась ЗРП, подтвержденная рождением маловесных детей (2370-2450,0). Женщины, у которых коэффициент соотношения коллаген/коллагеназа был равен 1,68 и выше, родили детей без признаков ЗРП.

Вышеизложенное подтверждает диагностическую ценность заявляемого метода.

Таким образом, заявляемый способ является более эффективным по сравнению с известными и обладает рядом преимуществ:

1. Способ специфичен (определение ЗРП по данному коэффициенту является специфическим методом).

2. Обладает высокой точностью. Достоверность составляет 100%.

3. Способ высокочувствителен, дает возможность определения ЗРП на доклинической стадии.

Апробация заявляемого изобретения проведена на достаточном по объему клиническом материале, что подтвердило работоспособность метода и возможность его применения в клинической практике.

Claims (1)

1. Способ ранней диагностики задержки развития плода, характеризующийся тем, что исследуют сыворотку крови беременной, взятой на 8 неделе беременности, определяют содержание коллагена 1 типа (COL1) и активность металлопротеиназы ММР-1, рассчитывают коэффициент соотношения COL1/ММР-1 и при величине коэффициента равного 1,67 и ниже диагностируют задержку развития плода.