RU2797016C1 - Method of malonium dialdehyde determination - Google Patents
Method of malonium dialdehyde determination Download PDFInfo
- Publication number
- RU2797016C1 RU2797016C1 RU2022131654A RU2022131654A RU2797016C1 RU 2797016 C1 RU2797016 C1 RU 2797016C1 RU 2022131654 A RU2022131654 A RU 2022131654A RU 2022131654 A RU2022131654 A RU 2022131654A RU 2797016 C1 RU2797016 C1 RU 2797016C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- malondialdehyde
- determination
- sample
- thiobarbituric acid
- concentration
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к области биохимии и медицины и может быть использовано при диагностических исследованиях различных заболеваний, сопровождающихся окислительным стрессом.The invention relates to the field of biochemistry and medicine and can be used in diagnostic studies of various diseases accompanied by oxidative stress.
Малоновый диальдегид - один из продуктов свободнорадикального окисления липидов, накопление которого отражает степень оксидативного стресса в организме.Malondialdehyde is one of the products of free radical lipid oxidation, the accumulation of which reflects the degree of oxidative stress in the body.
Известен способ определения количества малонового диальдегида [Романова Л.А., Стальная И.Д. // Современные способы в биохимии. - М., 1977, с. 64-66] с тиобарбитуровой кислотой, в котором проводят измерение оптической плотности продуктов окислительной модификации биомолекул, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой. Реакция проходит при температуре кипящей водяной бани, результат регистрируют на спектрофотометре при длине волны 532 нм.A known method for determining the amount of malondialdehyde [Romanova L.A., Steel I.D. // Modern methods in biochemistry. - M., 1977, p. 64-66] with thiobarbituric acid, in which the optical density of the products of oxidative modification of biomolecules reacting with thiobarbituric acid is measured. The reaction takes place at the temperature of a boiling water bath, the result is recorded on a spectrophotometer at a wavelength of 532 nm.
Недостатком способа является завышение результата при наличии в пробе биомолекул белкового, нуклеотидного, углеводного происхождения, способных реагировать с тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенных продуктов реакции.The disadvantage of this method is the overestimation of the result in the presence in the sample of biomolecules of protein, nucleotide, carbohydrate origin, capable of reacting with thiobarbituric acid to form colored reaction products.
Известен способ определения количества малонового диальдегида [Ф.А. Тугушева, А.И. Куликова, И.М. Зубина Особенности перекисного окисления липидов крови больных хроническим гломерулонефритом в стадии нарушения функции почек на фоне нефротического синдрома // Вопросы медицинской химии, 1993, т. 39, №3, с. 18-21], основанный на хроматографическом суммарном определении токоферола, общих и небелковых SH-групп эритроцитов и малонового диальдегида с математическим выделением доли малонового диальдегида.A known method for determining the amount of malondialdehyde [F.A. Tugusheva, A.I. Kulikova, I.M. Zubina Peculiarities of blood lipid peroxidation in patients with chronic glomerulonephritis at the stage of impaired renal function against the background of nephrotic syndrome // Questions of Medical Chemistry, 1993, vol. 39, no. 3, p. 18-21], based on the chromatographic total determination of tocopherol, total and non-protein SH-groups of erythrocytes and malondialdehyde with mathematical separation of the proportion of malondialdehyde.
Недостатком способа является сложность оценки исходных данных для математической обработки данных. Начальные допущения алгоритма приводят к значительной погрешности определения уровня малонового диальдегида в зависимости от фонового состава образца.The disadvantage of this method is the complexity of the evaluation of the initial data for mathematical data processing. The initial assumptions of the algorithm lead to a significant error in determining the level of malondialdehyde depending on the background composition of the sample.
Известен способ определения количества малонового диальдегида [Janero D. R. Malondialdehyde and thiobarbituric acid-reactivity as diagnostic indices of lipid peroxidation and peroxidative tissue injury //Free Radical Biology and Medicine. - 1990. - Т. 9. - №. 6. - С. 515-540], в котором проводят измерение оптической плотности продукта реакции малонового диальдегида с тиобарбитуровой кислотой, в результате которой образуется розовый триметиновый комплекс. Реакция проходит при температуре кипящей водяной бани. Измерение количества образующегося розового триметинового комплекса проводят на спектрофотометре при длине волны 532 нм.A known method for determining the amount of malondialdehyde [Janero D. R. Malondialdehyde and thiobarbituric acid-reactivity as diagnostic indices of lipid peroxidation and peroxidative tissue injury //Free Radical Biology and Medicine. - 1990. - T. 9. - No. 6. - S. 515-540], in which the measurement of the optical density of the product of the reaction of malondialdehyde with thiobarbituric acid, which results in the formation of a pink trimethine complex, is carried out. The reaction takes place at the temperature of a boiling water bath. The measurement of the amount of the resulting pink trimethine complex is carried out on a spectrophotometer at a wavelength of 532 nm.
Недостатком способа является использование термостатирования реакции в кипящей водяной бане и завышение результата при наличии в пробе биомолекул белкового, нуклеотидного, углеводного происхождения, способных реагировать с тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенных продуктов реакции.The disadvantage of this method is the use of temperature control of the reaction in a boiling water bath and overestimation of the result in the presence of biomolecules of protein, nucleotide, carbohydrate origin in the sample, capable of reacting with thiobarbituric acid to form colored reaction products.
Известен способ определения количества малонового диальдегида [Мальцев Г.Ю., Васильев А.В. // Вопросы питания, 1999, №2, с. 41-43], в котором измеряют суммарную антиоксидантную активность супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы, диеновых конъюгатов и малонового диальдегида с последующим вычислением доли малонового диальдегида с использованием нормирующих коэффициентов при расчете.A known method for determining the amount of malondialdehyde [Maltsev G.Yu., Vasiliev A.V. // Questions of nutrition, 1999, No. 2, p. 41-43], in which the total antioxidant activity of superoxide dismutase, catalase, glutathione reductase, glutathione peroxidase, diene conjugates and malondialdehyde is measured, followed by the calculation of the proportion of malondialdehyde using normalizing coefficients in the calculation.
Недостатком способа является сложность оценки исходных данных для математической обработки данных. Начальные допущения алгоритма приводят к полуколичественной оценке результатов определения малонового диальдегида.The disadvantage of this method is the complexity of the evaluation of the initial data for mathematical data processing. The initial assumptions of the algorithm lead to a semi-quantitative evaluation of the results of the determination of malondialdehyde.
Известен способ определения количества малонового диальдегида [Никифоров О.Н., Сазонова О.В., Суханова Л.Я., Князькова Л.Г., Галенок В.А. Перекисное окисление липидов и состояние системы антиоксидантной защиты у больных инсулинзависимым сахарным диабетом. Проблемы Эндокринологии. 1997;43(5):16-19] в эритроцитах, в котором проводят спектрофотометрическое измерение в максимуме оптической плотности 532 нм количества продукта реакции между малоновым диальдегидом и тиобарбитуровой кислотой, которая при высокой температуре кипящей водяной бани и кислой среде pH протекает с образованием окрашенного триметинового комплекса, содержащего одну молекулу МДА и две молекулы тиобарбитуровой кислоты.A known method for determining the amount of malondialdehyde [Nikiforov O.N., Sazonova O.V., Sukhanova L.Ya., Knyazkova L.G., Galenok V.A. Lipid peroxidation and the state of the antioxidant defense system in patients with insulin-dependent diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 1997;43(5):16-19] in erythrocytes, in which a spectrophotometric measurement is carried out at a maximum optical density of 532 nm of the amount of the reaction product between malondialdehyde and thiobarbituric acid, which, at a high temperature of a boiling water bath and an acidic pH medium, proceeds with the formation of a colored trimethine complex containing one molecule of MDA and two molecules of thiobarbituric acid.
Недостатком способа является постоянное поддержание высокой температуры, что отрицательно влияет на стабильность анализируемого образца.The disadvantage of this method is the constant maintenance of a high temperature, which adversely affects the stability of the analyzed sample.
За прототип принят способ определения концентрации малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты [RU 2112241 C1, МПК G01N 33/48 (1995.01), G01N 33/50 (1995.01)] в котором в образец крови, сыворотки или гомогената ткани последовательно добавляют 1% раствор тритона X-100 или дезоксихолата, 0.6 М раствор HCl и 0.06 М раствор тиобарбитуровой кислоты; смесь перемешивают с постоянной частотой колебаний (120 качаний в минуту) образец инкубируют при постоянной температуре 95°C в течение 30-60 минут. Реакцию останавливают дигидрокверцетином; перед определением оптической плотности образца добавляют трилон Б и смесь этанола с хлороформом в соотношении (7: 3). Полученная смесь имеет характерную розовую окраску триметинового комплекса. Количество малонового диальдегида в образце оценивают по величине оптической плотности образованного триметинового комплекса относительно смеси с теми же реагентами, в отсутствии образца.The prototype is a method for determining the concentration of malonic dialdehyde using thiobarbituric acid [RU 2112241 C1, IPC G01N 33/48 (1995.01), G01N 33/50 (1995.01)] in which a 1% triton solution is sequentially added to a blood sample, serum or tissue homogenate X-100 or deoxycholate, 0.6 M HCl and 0.06 M thiobarbituric acid; the mixture is stirred at a constant frequency of oscillation (120 swings per minute), the sample is incubated at a constant temperature of 95°C for 30-60 minutes. The reaction is stopped with dihydroquercetin; Before determining the optical density of the sample, Trilon B and a mixture of ethanol and chloroform in the ratio (7: 3) are added. The resulting mixture has a characteristic pink color of the trimetine complex. The amount of malondialdehyde in the sample is estimated by the value of the optical density of the formed trimethine complex relative to a mixture with the same reagents, in the absence of a sample.
Недостатками способа являются длительность анализа более 1 часа, завышение результата при наличии в пробе биомолекул белкового, нуклеотидного, углеводного происхождения, способных реагировать с тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенных продуктов реакции. Продукты таких реакций изменяют прозрачность и окраску полученной смеси, что мешает определению её оптической плотности на спектрофотометре. Помимо этого, кровь содержит большое количество окрашивающих веществ, что в несколько раз повышает оптическую плотность в области поглощения триметинового комплекса 532 нм.The disadvantages of this method are the duration of the analysis for more than 1 hour, the overestimation of the result in the presence of biomolecules of protein, nucleotide, carbohydrate origin in the sample, capable of reacting with thiobarbituric acid to form colored reaction products. The products of such reactions change the transparency and color of the resulting mixture, which interferes with the determination of its optical density on a spectrophotometer. In addition, the blood contains a large amount of coloring substances, which several times increases the optical density in the absorption region of the trimetine complex at 532 nm.
Техническим результатом предложенного изобретения является создание быстрого способа, позволяющего повысить достоверность определения малонового диальдегида The technical result of the proposed invention is the creation of a fast method to improve the reliability of the determination of malondialdehyde
Способ определения малонового диальдегида, также как в прототипе, включает последовательное добавление в жидкую пробу 1/20 по массе тритона Х-100 в виде водного раствора, раствора HCl для создания кислой среды рН ≅ 1 и использование тиобарбитуровой кислоты, оценку концентрации малонового диальдегида спектрофотометрически по величине оптической плотности образованного триметинового комплекса при длине волны 532 нм.The method for determining malondialdehyde, as well as in the prototype, includes the sequential addition to a liquid sample 1/20 by weight of triton X-100 in the form of an aqueous solution, an HCl solution to create an acidic pH ≅ 1 and the use of thiobarbituric acid, assessing the concentration of malondialdehyde spectrophotometrically by the value of the optical density of the formed trimethine complex at a wavelength of 532 nm.
Согласно изобретению, для регистрации оптической плотности образованного триметинового комплекса используют полиметакрилатную матрицу с иммобилизованной в неё 1.0 % тиобарбитуровой кислотой, а концентрацию малонового диальдегида определяют по градуировочному графику или визуально по цветовой шкале, используя интенсивность окраски полиметакрилатной матрицы.According to the invention, to register the optical density of the formed trimethine complex, a polymethacrylate matrix with 1.0% thiobarbituric acid immobilized in it is used, and the concentration of malondialdehyde is determined by a calibration graph or visually by a color scale using the color intensity of the polymethacrylate matrix.
В качестве жидкой пробы используют воду или биологические жидкости, содержащие малоновый диальдегид.As a liquid sample, water or biological fluids containing malondialdehyde are used.
Полиметакрилатную матрицу, состоящую из 95 % полиметилметакрилата и 5 % полиэтиленгликоля с молекулярной массой 400 (ПЭГ 400), в форме пластинки 4х6х1 мм опускают на 10 с в раствор, содержащий 1.0 % тиобарбитуровой кислоты в 8.2 М растворе этанола. Пластинка после обработки остается бесцветной и прозрачной. После этого матрица готова к работе или может храниться без потери свойств не менее 6 месяцев.A polymethacrylate matrix, consisting of 95% polymethyl methacrylate and 5% polyethylene glycol with a molecular weight of 400 (PEG 400), in the form of a 4x6x1 mm plate, is lowered for 10 s into a solution containing 1.0% thiobarbituric acid in 8.2 M ethanol solution. The plate after processing remains colorless and transparent. After that, the matrix is ready for use or can be stored without loss of properties for at least 6 months.
Полиметакрилатная матрица при рН ≅ 1 экстрагирует в собственный объем малоновый диальдегид из анализируемой пробы и препятствует проникновению биомолекул белкового, нуклеотидного, углеводного происхождения, способных реагировать с тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенных продуктов в зону реакции. Таким образом, исключается влияние посторонних веществ образца на результат определения малонового диальдегида, следовательно, возрастает достоверность его определения.The polymethacrylate matrix at pH ≅ 1 extracts malondialdehyde from the analyzed sample into its own volume and prevents the penetration of protein, nucleotide, and carbohydrate biomolecules capable of reacting with thiobarbituric acid to form colored products into the reaction zone. Thus, the influence of foreign substances of the sample on the result of the determination of malondialdehyde is excluded, therefore, the reliability of its determination increases.
По сравнению с прототипом для осуществления предложенного способа определения малонового диальдегида в жидкой пробе не требуются стадии нагревания в кипящей водяной бане в течение 10 мин, охлаждения при 15°C в течение 30 мин, стабилизации окраски с использованием трилона Б, этанола и хлороформа, что существенно сокращает время анализаCompared with the prototype, the implementation of the proposed method for the determination of malondialdehyde in a liquid sample does not require the stages of heating in a boiling water bath for 10 min, cooling at 15°C for 30 min, color stabilization using Trilon B, ethanol and chloroform, which is essential reduces analysis time
На фиг. 1 показана градуировочная зависимость поглощения полиметилметакрилатной матрицы (А) от концентрации малонового диальдегида (С) в пробе при длине волны 532 нм.In FIG. 1 shows the calibration dependence of the absorption of the polymethyl methacrylate matrix (A) on the concentration of malondialdehyde (C) in the sample at a wavelength of 532 nm.
На фиг. 2 представлена цветовая шкала окраски полиметилметакрилатной матрицы от концентрации малонового диальдегида в пробеIn FIG. 2 shows the color scale of the color of the polymethyl methacrylate matrix from the concentration of malondialdehyde in the sample
В таблице 1 показана проверка правильности предложенного способа определения малонового диальдегида. Table 1 shows the validation of the proposed method for the determination of malondialdehyde.
Пример 1. Example 1
Использовали водный раствор стандарта малонового диальдегида (1,1,3,3-тетраэтоксипропана), полученный смешиванием 5 мкл государственного стандартного образца (массовая доля 1,1,3,3-тетраэтоксипропана - 97 %) и 100 мл дистиллированной воды. Пробу 100 мкл водного раствора стандарта малонового диальдегида вносили в пробирку объемом 10 мл, последовательно добавляли 0.5 мл 1% раствора тритона Х-100, 0.2 мл 0.6 М раствора HCl для создания кислой среды рН ≅ 1. Затем в пробирку помещали полиметакрилатную матрицу с распределенной в ее объеме 1.0 % тиобарбитуровой кислотой. Пробирку встряхивали в течение 10 мин для образования хромогенного продукта розового цвета, достаточного для количественной оценки. Раствор сливали, вынимали полиметакрилатную матрицу и высушивали фильтровальной бумагой. Регистрацию результата проводили на спектрофотометре путем измерения величины оптической плотности при длине волны 532 нм. Содержание малонового диальдегида в анализируемом растворе определяли по градуировочному графику (фиг. 1). Результат определения: 4.98±0.03 мкл.We used an aqueous solution of the malondialdehyde standard (1,1,3,3-tetraethoxypropane) obtained by mixing 5 μl of the state standard sample (mass fraction of 1,1,3,3-tetraethoxypropane - 97%) and 100 ml of distilled water. A sample of 100 μL of an aqueous solution of the malonic dialdehyde standard was placed into a 10-mL test tube; 0.5 mL of 1% Triton X-100 solution and 0.2 mL of 0.6 M HCl solution were successively added to create an acidic medium pH ≅ 1 . Then, a polymethacrylate matrix with 1.0% thiobarbituric acid distributed in its volume was placed in a test tube. The tube was shaken for 10 minutes to form a pink chromogenic product sufficient for quantification. The solution was decanted, the polymethacrylate matrix was removed and dried with filter paper. Registration of the result was carried out on a spectrophotometer by measuring the optical density at a wavelength of 532 nm. The content of malondialdehyde in the analyzed solution was determined according to the calibration curve (Fig. 1). The result of the determination: 4.98±0.03 µl.
Пример 2.Example 2
Использовали водные растворы стандарта малонового диальдегида (1,1,3,3-тетраэтоксипропана), полученные смешиванием 1, 2, 4, 6 мкл государственного стандартного образца (массовая доля 1,1,3,3-тетраэтоксипропана - 97%) и 100 мл дистиллированной воды. Пробу 100 мкл водного раствора стандарта малонового диальдегида вносили в пробирку объемом 10 мл, последовательно добавляли 0.5 мл 1% раствора тритона Х-100, 0.3 мл 0.4 М раствора HCl для создания кислой среды рН ≅ 1. Затем в пробирку помещали полиметакрилатную матрицу с распределенной в ее объеме 1.0 % тиобарбитуровой кислотой. Пробирку встряхивали в течение 10 мин для образования хромогенного продукта розового цвета, достаточного для количественной оценки. Раствор сливали, вынимали полиметакрилатную матрицу и высушивали фильтровальной бумагой. Построенная цветовая шкала (фиг. 2) позволяет проводить полуколичественное визуальное определение содержания малонового диальдегида в пробе.Aqueous solutions of the malondialdehyde standard (1,1,3,3-tetraethoxypropane) were used, obtained by mixing 1, 2, 4, 6 μl of the state standard sample (mass fraction of 1,1,3,3-tetraethoxypropane - 97%) and 100 ml distilled water. A sample of 100 μl of an aqueous solution of the malondialdehyde standard was placed into a 10-ml test tube, 0.5 ml of a 1% solution of Triton X-100, and 0.3 ml of a 0.4 M HCl solution were successively added to create an acidic medium pH ≅ 1 . Then, a polymethacrylate matrix with 1.0% thiobarbituric acid distributed in its volume was placed in a test tube. The tube was shaken for 10 minutes to form a pink chromogenic product sufficient for quantification. The solution was poured off, the polymethacrylate matrix was taken out and dried with filter paper. The constructed color scale (Fig. 2) allows for a semi-quantitative visual determination of the content of malondialdehyde in the sample.
Пример 3.Example 3
Для определения количества малонового диальдегида отбирали в центрифужную пробирку цельную гепаринизированную кровь объемом 0.02 мл. После чего кровь центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин, затем отбирали плазму. Оставшуюся эритроцитарную массу перемешивали и инкубировали 90 мин в условиях жесткого окисления в термостате (t=37°С, с доступом О2 воздуха). После инкубации к реакционной смеси прибавляли 1 мл 28% раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивали и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин. Завершив центрифугирование, супернатант переносили количественно в пробирку объемом 5 мл.To determine the amount of malondialdehyde, whole heparinized blood with a volume of 0.02 ml was taken into a centrifuge tube. After that, the blood was centrifuged at 1500 rpm for 10 min, then the plasma was collected. The remaining erythrocyte mass was mixed and incubated for 90 min under conditions of severe oxidation in a thermostat (t=37°C, with access to O 2 air). After incubation, 1 ml of 28% trichloroacetic acid solution was added to the reaction mixture, mixed and centrifuged at 3000 rpm for 10 min. After centrifugation was completed, the supernatant was quantitatively transferred into a 5 ml tube.
Затем в пробирку помещали полиметакрилатную матрицу с распределенной в ее объеме 1.0 % тиобарбитуровой кислотой. Пробирку встряхивали в течение 10 мин для образования хромогенного продукта розового цвета, достаточного для количественной оценки. Раствор сливали, вынимали полиметакрилатную матрицу и высушивали фильтровальной бумагой. Регистрацию результата проводили на спектрофотометре путем измерения величины оптической плотности при длине волны 532 нм. Содержание малонового диальдегида в анализируемом растворе определяли по градуировочному графику (фиг. 1).Then, a polymethacrylate matrix with 1.0% thiobarbituric acid distributed in its volume was placed in a test tube. The tube was shaken for 10 minutes to form a pink chromogenic product sufficient for quantification. The solution was poured off, the polymethacrylate matrix was taken out and dried with filter paper. Registration of the result was carried out on a spectrophotometer by measuring the optical density at a wavelength of 532 nm. The content of malonic dialdehyde in the analyzed solution was determined according to the calibration curve (Fig. 1).
В способе-прототипе в пробирку добавляли 1 мл 1% раствора тиобарбитуровой кислоты. Полученный раствор термостатировали на кипящей водяной бане 15 мин, охлаждали пробирку в холодной воде и определяли оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 532 нм.In the prototype method, 1 ml of a 1% solution of thiobarbituric acid was added to the tube. The resulting solution was thermostated in a boiling water bath for 15 min, the test tube was cooled in cold water, and the optical density of the solution was determined on a spectrophotometer at a wavelength of 532 nm.
Была проведена проверка правильности способа определения малонового диальдегида [Показатели правильности способа определения, проводили в соответствии с требованиями РМГ 61 - 2010 / РМГ 61-2010 Показатели точности, правильности, прецизионности методик химического анализа. Введ. 2012-09-01. М.: Стандартинформ, 2013. 59 с.]. Количественное определение малонового диальдегида в сыворотке крови способом добавки показало, что малоновый диальдегид может быть определен обоими способами. Данные, полученные двумя независимыми способами, близки и согласуются. Правильность предложенного способа является более высокой по сравнению с прототипом, за счет отсутствия погрешности, вносимой фоновыми веществами крови, имеющими собственную окраску.The correctness of the method for determining malondialdehyde was checked [Indicators of the correctness of the method of determination were carried out in accordance with the requirements of RMG 61 - 2010 / RMG 61-2010 Indicators of accuracy, correctness, precision of chemical analysis methods. Introduction 2012-09-01. M.: Standartinform, 2013. 59 p.]. Quantitative determination of malondialdehyde in blood serum by the addition method showed that malondialdehyde can be determined by both methods. The data obtained by two independent methods are close and consistent. The correctness of the proposed method is higher compared to the prototype, due to the absence of errors introduced by the background blood substances that have their own color.
Предлагаемый способ сокращает время анализа за счет отсутствия стадий нагревания и стабилизации окраски и не требует введения дополнительных химических веществ. Для проведения реакции не требуется избавляться от влияния фоновых мешающих веществ, что позволяет повысить достоверность определения малонового диальдегида.The proposed method reduces the analysis time due to the absence of heating and color stabilization stages and does not require the introduction of additional chemicals. To carry out the reaction, it is not required to get rid of the influence of background interfering substances, which makes it possible to increase the reliability of the determination of malonic dialdehyde.
Способ определения малонового ДИальдегидаMethod for determination of malondialdehyde
σ(Δс), %Right
σ(Δ с ), %
Claims (3)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2797016C1 true RU2797016C1 (en) | 2023-05-30 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2112241C1 (en) * | 1995-09-08 | 1998-05-27 | Якутский сельскохозяйственный институт | Method for determining malonic dialdehyde concentration by using thiobarbituric acid |
| DE10125188A1 (en) * | 2001-05-23 | 2002-11-28 | Alexander Gosslau | Device for in vivo detection of oxidative stress, comprises determination of thiobarbituric acid-reactive compounds on a solid phase |
| RU2596791C1 (en) * | 2015-09-09 | 2016-09-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства" | Method of determining content of malonic dialdehyde in vegetative organs of plants by capillary electrophoresis |
| RU2624797C1 (en) * | 2016-07-11 | 2017-07-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of detecting rodanide using polymethacrylate matrix |
| RU2625038C1 (en) * | 2016-08-02 | 2017-07-11 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский государственный университет" (ТГУ, НИ ТГУ) | Method of determination of integrated antioxidant activity using indicator system copper (ii) - neokuproin |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2112241C1 (en) * | 1995-09-08 | 1998-05-27 | Якутский сельскохозяйственный институт | Method for determining malonic dialdehyde concentration by using thiobarbituric acid |
| DE10125188A1 (en) * | 2001-05-23 | 2002-11-28 | Alexander Gosslau | Device for in vivo detection of oxidative stress, comprises determination of thiobarbituric acid-reactive compounds on a solid phase |
| RU2596791C1 (en) * | 2015-09-09 | 2016-09-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства" | Method of determining content of malonic dialdehyde in vegetative organs of plants by capillary electrophoresis |
| RU2624797C1 (en) * | 2016-07-11 | 2017-07-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Method of detecting rodanide using polymethacrylate matrix |
| RU2625038C1 (en) * | 2016-08-02 | 2017-07-11 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский государственный университет" (ТГУ, НИ ТГУ) | Method of determination of integrated antioxidant activity using indicator system copper (ii) - neokuproin |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| De Leon et al. | Evaluation of oxidative stress in biological samples using the thiobarbituric acid reactive substances assay | |
| Waddell | A simple ultraviolet spectrophotometric method for the determination of protein | |
| Baser et al. | Assesment of oxidative status and its association with thyroid autoantibodies in patients with euthyroid autoimmune thyroiditis | |
| Trivedi et al. | New enzymatic method for serum uric acid at 500 nm. | |
| US3979262A (en) | Compositions and methods for the determination of oxidizing agents | |
| Ahmad et al. | Impact of in vitro non-enzymatic glycation on biophysical and biochemical regimes of human serum albumin: relevance in diabetes associated complications | |
| WO1997047972A1 (en) | Calibrator material for instruments which measure interferents in serum and plasma specimens | |
| Ustundag et al. | Establishing reference values and evaluation of an in-house ferric reducing antioxidant power (FRAP) colorimetric assay in microplates | |
| US5989916A (en) | Direct cholesterol assay reagent | |
| US3884638A (en) | Method of determining cholesterol | |
| NIshi et al. | Three turbidimetric methods for determining total protein compared. | |
| RU2797016C1 (en) | Method of malonium dialdehyde determination | |
| Prenesti et al. | Measurement uncertainty evaluation of the Total Antioxidant Capacity of human plasma tested by the CUPRAC-BCS method | |
| Ohkubo et al. | Plasma glucose concentrations of whole blood, as determined with a multilayer-film analytical element. | |
| WO2007039775A1 (en) | Measurement of the total antioxidant capacity in liquids and solutions using tmb | |
| US20090123956A1 (en) | Measurement of the oxidants-antioxidants balance in liquids | |
| Robertson | Optimizing determination of plasma albumin by the bromcresol green dye-binding method. | |
| Attia et al. | A multi-component spectrophotometric method for simultaneous determination of total bilirubin, oxyhemoglobin, and methemalbumin in human sera | |
| IE910070A1 (en) | Circular dichroism and spectrophotometric absorption¹detection methods and apparatus | |
| Szabó et al. | Quantitative analytical method for the determination of biotinidase activity in dried blood spot samples | |
| RU2300771C2 (en) | Method for determination of hemoglobin in biological fluids | |
| RU2798670C1 (en) | Method of determining superoxide dismutase | |
| RU2593361C1 (en) | Spectrophotometric method of determination of protein in biological fluids | |
| Drochioiu | Turbidimetric lipid assay in seed flours | |
| RU2268476C2 (en) | Method for quantitative detecting protein in biological liquids |