RU2788004C2 - 3-β(4-МЕТОКСИБЕНЗИЛОКСИ)ПРЕГН-5-ЕН-20-ОН ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ НАРУШЕНИЙ, СВЯЗАННЫХ С УПОТРЕБЛЕНИЕМ КАННАБИНОИДОВ - Google Patents
3-β(4-МЕТОКСИБЕНЗИЛОКСИ)ПРЕГН-5-ЕН-20-ОН ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ НАРУШЕНИЙ, СВЯЗАННЫХ С УПОТРЕБЛЕНИЕМ КАННАБИНОИДОВ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2788004C2 RU2788004C2 RU2020130586A RU2020130586A RU2788004C2 RU 2788004 C2 RU2788004 C2 RU 2788004C2 RU 2020130586 A RU2020130586 A RU 2020130586A RU 2020130586 A RU2020130586 A RU 2020130586A RU 2788004 C2 RU2788004 C2 RU 2788004C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cannabinoid
- mbp
- thc
- induced
- compound
- Prior art date
Links
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 title claims abstract description 224
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 title claims abstract description 224
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 103
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 title claims abstract description 59
- FCYQTGCEDUOHLT-LEKSSAKUSA-N 1-[(8S,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]ethanone Chemical compound C1C=C2CCCC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 FCYQTGCEDUOHLT-LEKSSAKUSA-N 0.000 title description 14
- -1 4-METHOXYBENZYLOXY Chemical class 0.000 title description 12
- 230000002149 cannabinoid Effects 0.000 claims abstract description 223
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 192
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 132
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims description 53
- 206010057666 Anxiety disease Diseases 0.000 claims description 31
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 29
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 claims description 25
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 claims description 21
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 claims description 21
- 206010061920 Psychotic disease Diseases 0.000 claims description 17
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 claims description 13
- 230000000607 poisoning Effects 0.000 claims description 13
- 231100000601 Intoxication Toxicity 0.000 claims description 12
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 claims description 12
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 claims description 12
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 claims description 12
- 239000003554 cannabinoid 1 receptor agonist Substances 0.000 claims description 10
- 206010012218 Delirium Diseases 0.000 claims description 9
- 206010007776 Catatonia Diseases 0.000 claims description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 7
- 206010040984 Sleep disease Diseases 0.000 claims description 7
- 206010048010 Withdrawal syndrome Diseases 0.000 claims description 5
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 5
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 3
- 241000218236 Cannabis Species 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 47
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 38
- 230000003542 behavioural Effects 0.000 abstract description 32
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 22
- 239000000556 agonist Substances 0.000 abstract description 18
- 230000001143 conditioned Effects 0.000 abstract description 14
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 10
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 abstract description 10
- 230000002269 spontaneous Effects 0.000 abstract description 7
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000001624 sedative Effects 0.000 abstract description 2
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 274
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 272
- 230000035492 administration Effects 0.000 description 65
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 58
- JZCPYUJPEARBJL-UHFFFAOYSA-N Rimonabant Chemical compound CC=1C(C(=O)NN2CCCCC2)=NN(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)C=1C1=CC=C(Cl)C=C1 JZCPYUJPEARBJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 229960003015 Rimonabant Drugs 0.000 description 57
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 47
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 42
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 36
- 230000003042 antagnostic Effects 0.000 description 35
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 35
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 32
- 102000009132 CB1 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 description 30
- 108010073366 CB1 Cannabinoid Receptor Proteins 0.000 description 30
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 29
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 29
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 29
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 27
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 26
- 206010002855 Anxiety Diseases 0.000 description 25
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 25
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 25
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 24
- 239000000463 material Substances 0.000 description 24
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 24
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 23
- ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N Pregnenolone Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N 0.000 description 23
- 229960000249 Pregnenolone Drugs 0.000 description 23
- ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N Pregnenolone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC3)C[C@@H](O)CC4)CC2)CC1 ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N 0.000 description 23
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 23
- 108091007472 MAP kinase family Proteins 0.000 description 22
- 102000004331 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 22
- 108090000823 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 241000638023 Cannabis sativa subsp. indica Species 0.000 description 19
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 description 19
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M Lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 18
- 230000001965 increased Effects 0.000 description 18
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 17
- 230000014860 sensory perception of taste Effects 0.000 description 17
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 17
- 230000035917 taste Effects 0.000 description 17
- 230000002354 daily Effects 0.000 description 16
- 230000006977 prepulse inhibition Effects 0.000 description 16
- 230000004044 response Effects 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 15
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 15
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 15
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 15
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 15
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 14
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 14
- 230000001404 mediated Effects 0.000 description 14
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 208000009132 Catalepsy Diseases 0.000 description 13
- 210000000214 Mouth Anatomy 0.000 description 13
- 206010047853 Waxy flexibility Diseases 0.000 description 13
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 13
- 230000001603 reducing Effects 0.000 description 13
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 13
- 206010063659 Aversion Diseases 0.000 description 12
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N cAMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 12
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 12
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N iso-propanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 12
- 230000000865 phosphorylative Effects 0.000 description 12
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 12
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 12
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 11
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 10
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 10
- HQVHOQAKMCMIIM-UHFFFAOYSA-N WIN 55,212-2 Chemical compound C=12N3C(C)=C(C(=O)C=4C5=CC=CC=C5C=CC=4)C2=CC=CC=1OCC3CN1CCOCC1 HQVHOQAKMCMIIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 10
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 206010027175 Memory impairment Diseases 0.000 description 9
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 9
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 9
- 230000035943 smell Effects 0.000 description 9
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 9
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 8
- OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N Corticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N 0.000 description 8
- 210000001853 Microsomes, Liver Anatomy 0.000 description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 8
- 230000004098 cellular respiration Effects 0.000 description 8
- 230000003750 conditioning Effects 0.000 description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 8
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 8
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 8
- 230000006403 short-term memory Effects 0.000 description 8
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 7
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 7
- 229940065521 Glucocorticoid inhalants for obstructive airway disease Drugs 0.000 description 7
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 7
- 230000036740 Metabolism Effects 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 210000001009 Nucleus accumbens Anatomy 0.000 description 7
- 229940037128 Systemic Glucocorticoids Drugs 0.000 description 7
- 230000035507 absorption Effects 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 7
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 7
- 231100000494 adverse effect Toxicity 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 230000035510 distribution Effects 0.000 description 7
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 7
- 230000035786 metabolism Effects 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 7
- 230000036231 pharmacokinetics Effects 0.000 description 7
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 230000003014 reinforcing Effects 0.000 description 7
- 230000003997 social interaction Effects 0.000 description 7
- 240000000218 Cannabis sativa Species 0.000 description 6
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 6
- 241000282695 Saimiri Species 0.000 description 6
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 6
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 6
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 6
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 6
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 6
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000035839 C max Effects 0.000 description 5
- 210000003169 Central Nervous System Anatomy 0.000 description 5
- 206010052804 Drug tolerance Diseases 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 5
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 5
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 230000026781 habituation Effects 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 5
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 5
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 5
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 4
- UVOLYTDXHDXWJU-NRFANRHFSA-N Cannabichromene Natural products C1=C[C@](C)(CCC=C(C)C)OC2=CC(CCCCC)=CC(O)=C21 UVOLYTDXHDXWJU-NRFANRHFSA-N 0.000 description 4
- 206010053398 Clonic convulsion Diseases 0.000 description 4
- 210000003608 Feces Anatomy 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 4
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N Saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940081974 Saccharin Drugs 0.000 description 4
- RODXRVNMMDRFIK-UHFFFAOYSA-N Scopoletin Chemical compound C1=CC(=O)OC2=C1C=C(OC)C(O)=C2 RODXRVNMMDRFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002700 Urine Anatomy 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 235000012765 hemp Nutrition 0.000 description 4
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 4
- 235000012766 marijuana Nutrition 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N methylene dichloride Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002085 persistent Effects 0.000 description 4
- 150000003131 pregnenolone derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 230000035812 respiration Effects 0.000 description 4
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 4
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 4
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 4
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 4
- CYQFCXCEBYINGO-ZYMOGRSISA-N (6aR)-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6a,7,8,10a-tetrahydrobenzo[c]chromen-1-ol Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-ZYMOGRSISA-N 0.000 description 3
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 240000005337 Agave sisalana Species 0.000 description 3
- 235000011624 Agave sisalana Nutrition 0.000 description 3
- AURFZBICLPNKBZ-SYBPFIFISA-N Allopregnanolone Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-SYBPFIFISA-N 0.000 description 3
- 230000037250 Clearance Effects 0.000 description 3
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 3
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N Dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 3
- 230000035695 Efflux Effects 0.000 description 3
- 230000036826 Excretion Effects 0.000 description 3
- 210000002683 Foot Anatomy 0.000 description 3
- 210000003128 Head Anatomy 0.000 description 3
- 210000003494 Hepatocytes Anatomy 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 3
- 229960001375 Lactose Drugs 0.000 description 3
- RJKFOVLPORLFTN-STHVQZNPSA-N Progesterone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC(=O)CC4)CC3)CC2)CC1 RJKFOVLPORLFTN-STHVQZNPSA-N 0.000 description 3
- 229960004063 Propylene glycol Drugs 0.000 description 3
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 3
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 3
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Syngestrets Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 3
- 229960003604 Testosterone Drugs 0.000 description 3
- 102100015888 UGT1A1 Human genes 0.000 description 3
- 101710034649 UGT1A1 Proteins 0.000 description 3
- 230000001058 adult Effects 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 230000000561 anti-psychotic Effects 0.000 description 3
- 230000000949 anxiolytic Effects 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000035512 clearance Effects 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 3
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 3
- 239000002895 emetic Substances 0.000 description 3
- 230000000095 emetic Effects 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000003054 hormonal Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- 230000003137 locomotive Effects 0.000 description 3
- 230000003278 mimic Effects 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 3
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 3
- 229940001470 psychoactive drugs Drugs 0.000 description 3
- 239000004089 psychotropic agent Substances 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000000306 recurrent Effects 0.000 description 3
- 235000018770 reduced food intake Nutrition 0.000 description 3
- 231100000191 repeated dose toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 3
- 230000002110 toxicologic Effects 0.000 description 3
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- VUKAUDKDFVSVFT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-[4,5-bis(2-hydroxypropoxy)-2-(2-hydroxypropoxymethyl)-6-methoxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxane-3,4-diol Chemical compound COC1C(OC)C(OC2C(C(O)C(OC)C(CO)O2)O)C(COC)OC1OC1C(COCC(C)O)OC(OC)C(OCC(C)O)C1OCC(C)O VUKAUDKDFVSVFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YJISHJVIRFPGGN-UHFFFAOYSA-N 5-[5-[3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxan-2-yl]oxy-6-[[3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)-2-methyloxane-3,4-diol Chemical compound O1C(CO)C(OC)C(O)C(O)C1OCC1C(OC2C(C(O)C(OC)C(CO)O2)O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(C)C(O)C2O)CO)O1 YJISHJVIRFPGGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLYNXDIDWUWASO-UHFFFAOYSA-N 6,6,9-trimethyl-3-pentyl-8,10-dihydro-7H-benzo[c]chromene-1,9,10-triol Chemical compound CC1(C)OC2=CC(CCCCC)=CC(O)=C2C2=C1CCC(C)(O)C2O ZLYNXDIDWUWASO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100014001 ABCB1 Human genes 0.000 description 2
- 101700002015 ABCB1 Proteins 0.000 description 2
- 102100002706 ABCG2 Human genes 0.000 description 2
- 101700040074 ABCG2 Proteins 0.000 description 2
- 229940005529 ANTIPSYCHOTICS Drugs 0.000 description 2
- 229940005530 ANXIOLYTICS Drugs 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 206010000059 Abdominal discomfort Diseases 0.000 description 2
- 206010001488 Aggression Diseases 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 2
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 description 2
- 102000009135 CB2 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010073376 CB2 Cannabinoid Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100018575 CYP1A2 Human genes 0.000 description 2
- 102100014737 CYP2B6 Human genes 0.000 description 2
- 102100004057 CYP3A4 Human genes 0.000 description 2
- 101710007540 CYP3A4 Proteins 0.000 description 2
- IGHTZQUIFGUJTG-UHFFFAOYSA-N Cannabicyclol Chemical compound O1C2=CC(CCCCC)=CC(O)=C2C2C(C)(C)C3C2C1(C)CC3 IGHTZQUIFGUJTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N Cannabidiol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 229950011318 Cannabidiol Drugs 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-MSOLQXFVSA-N Cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@@H]1[C@@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-MSOLQXFVSA-N 0.000 description 2
- QXACEHWTBCFNSA-SFQUDFHCSA-N Cannabigerol Chemical compound CCCCCC1=CC(O)=C(C\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=C1 QXACEHWTBCFNSA-SFQUDFHCSA-N 0.000 description 2
- 102000018208 Cannabinoid receptor family Human genes 0.000 description 2
- 108050007331 Cannabinoid receptor family Proteins 0.000 description 2
- VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N Cannabinol Chemical compound C1=C(C)C=C2C3=C(O)C=C(CCCCC)C=C3OC(C)(C)C2=C1 VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003453 Cannabinol Drugs 0.000 description 2
- 206010057668 Cognitive disease Diseases 0.000 description 2
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 description 2
- 206010051625 Conjunctival hyperaemia Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- 108010074922 Cytochrome P-450 CYP1A2 Proteins 0.000 description 2
- 108010020070 Cytochrome P-450 CYP2B6 Proteins 0.000 description 2
- 206010013754 Drug withdrawal syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010016256 Fatigue Diseases 0.000 description 2
- 102000003676 Glucocorticoid Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000079 Glucocorticoid Receptors Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 208000007999 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 2
- 208000000269 Hyperkinesis Diseases 0.000 description 2
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 2
- 206010022437 Insomnia Diseases 0.000 description 2
- 230000035708 Intrinsic clearance Effects 0.000 description 2
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 2
- 206010061284 Mental disease Diseases 0.000 description 2
- 230000036650 Metabolic stability Effects 0.000 description 2
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 210000001331 Nose Anatomy 0.000 description 2
- 210000001672 Ovary Anatomy 0.000 description 2
- XAPRFLSJBSXESP-UHFFFAOYSA-N Oxycinchophen Chemical compound N=1C2=CC=CC=C2C(C(=O)O)=C(O)C=1C1=CC=CC=C1 XAPRFLSJBSXESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N P-Toluenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010033664 Panic attack Diseases 0.000 description 2
- 229940066842 Petrolatum Drugs 0.000 description 2
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 2
- 206010035039 Piloerection Diseases 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 206010037175 Psychiatric disease Diseases 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 102100017015 SLC22A2 Human genes 0.000 description 2
- 108091006650 SLC22A2 Proteins 0.000 description 2
- 102100020159 SLC22A6 Human genes 0.000 description 2
- 108091006654 SLC22A6 Proteins 0.000 description 2
- 102100010016 SLC22A8 Human genes 0.000 description 2
- 101710019777 SLC22A8 Proteins 0.000 description 2
- 102100007110 SLCO1B1 Human genes 0.000 description 2
- 108091006646 SLCO1B1 Proteins 0.000 description 2
- 102100007112 SLCO1B3 Human genes 0.000 description 2
- 108091006645 SLCO1B3 Proteins 0.000 description 2
- 206010040998 Sleep disturbance Diseases 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229940032147 Starch Drugs 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N Stearic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDYANYHVCAPMJV-LXQIFKJMSA-N UDP-α-D-glucuronic acid Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(NC(=O)C=C1)=O)O)O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HDYANYHVCAPMJV-LXQIFKJMSA-N 0.000 description 2
- 210000001635 Urinary Tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000001430 anti-depressive Effects 0.000 description 2
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000000164 antipsychotic agent Substances 0.000 description 2
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 101700081248 byr1 Proteins 0.000 description 2
- 230000003491 cAMP production Effects 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000000271 cardiovascular Effects 0.000 description 2
- 244000261228 chanvre indien Species 0.000 description 2
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 2
- 230000003931 cognitive performance Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 235000019788 craving Nutrition 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 230000003111 delayed Effects 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 2
- 230000003203 everyday Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 235000019138 food restriction Nutrition 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 230000002496 gastric Effects 0.000 description 2
- 230000001738 genotoxic Effects 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000003434 inspiratory Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 2
- 230000004301 light adaptation Effects 0.000 description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000003340 mental Effects 0.000 description 2
- 238000001690 micro-dialysis Methods 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic Effects 0.000 description 2
- 230000005371 pilomotor reflex Effects 0.000 description 2
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 230000036278 prepulse Effects 0.000 description 2
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary Effects 0.000 description 2
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 230000024188 startle response Effects 0.000 description 2
- 229940097346 sulfobutylether-beta-cyclodextrin Drugs 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N (3R,4aR,5S,6S,6aS,10S,10aR,10bS)-3-ethenyl-6,10,10b-trihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxododecahydro-1H-benzo[f]chromen-5-yl acetate Chemical compound O=C([C@@]12O)C[C@](C)(C=C)O[C@]1(C)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H](O)[C@@H]1[C@]2(C)[C@@H](O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N 0.000 description 1
- RBEAVAMWZAJWOI-MTOHEIAKSA-N (5aS,6S,9R,9aR)-6-methyl-3-pentyl-9-prop-1-en-2-yl-7,8,9,9a-tetrahydro-5aH-dibenzofuran-1,6-diol Chemical compound C1=2C(O)=CC(CCCCC)=CC=2O[C@H]2[C@@H]1[C@H](C(C)=C)CC[C@]2(C)O RBEAVAMWZAJWOI-MTOHEIAKSA-N 0.000 description 1
- MOHYOXXOKFQHDC-UHFFFAOYSA-N 1-(chloromethyl)-4-methoxybenzene Chemical compound COC1=CC=C(CCl)C=C1 MOHYOXXOKFQHDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JERGUCIJOXJXHF-TVWVXWENSA-N 17α-hydroxypregnenolone Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)C)(O)[C@@]1(C)CC2 JERGUCIJOXJXHF-TVWVXWENSA-N 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 2-Pyrrolidone Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBWPWIZUYLTJNF-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;calcium Chemical compound [Ca].NCC(O)=O PBWPWIZUYLTJNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEACJMVNYZDSKR-UHFFFAOYSA-N 2-octyldodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCC(CO)CCCCCCCC LEACJMVNYZDSKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940005513 ANTIDEPRESSANTS Drugs 0.000 description 1
- 230000035715 AUC last Effects 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 210000004100 Adrenal Glands Anatomy 0.000 description 1
- 235000019489 Almond oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- 229940025084 Amphetamine Drugs 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Chemical class 0.000 description 1
- WMGFVAGNIYUEEP-WUYNJSITSA-N Amylopectin Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)O2)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@H]1O WMGFVAGNIYUEEP-WUYNJSITSA-N 0.000 description 1
- 208000007415 Anhedonia Diseases 0.000 description 1
- 210000003403 Autonomic Nervous System Anatomy 0.000 description 1
- 229960000686 Benzalkonium Chloride Drugs 0.000 description 1
- 240000000318 Bixa orellana Species 0.000 description 1
- 230000035592 Brain Concentration Effects 0.000 description 1
- 230000037187 Brain/plasma Effects 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N Butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003563 Calcium Carbonate Drugs 0.000 description 1
- 235000008697 Cannabis sativa Nutrition 0.000 description 1
- SVTKBAIRFMXQQF-UHFFFAOYSA-N Cannabivarin Chemical compound C1=C(C)C=C2C3=C(O)C=C(CCC)C=C3OC(C)(C)C2=C1 SVTKBAIRFMXQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001631457 Cannula Species 0.000 description 1
- 208000008787 Cardiovascular Disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001175 Cerebrospinal Fluid Anatomy 0.000 description 1
- 206010008531 Chills Diseases 0.000 description 1
- OHCQJHSOBUTRHG-ZYIXGEAZSA-N Coleonol Natural products O=C([C@@]12O)C[C@](C)(C=C)O[C@]1(C)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H](O)[C@@H]1[C@]2(C)[C@H](O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-ZYIXGEAZSA-N 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 206010010947 Coordination abnormal Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Chemical class 0.000 description 1
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N Cortisol Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 229960001681 Croscarmellose Sodium Drugs 0.000 description 1
- 229920002785 Croscarmellose sodium Polymers 0.000 description 1
- 210000000805 Cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Chemical class OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Chemical class OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical class OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 206010011953 Decreased activity Diseases 0.000 description 1
- 206010061428 Decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 206010012374 Depressed mood Diseases 0.000 description 1
- 206010013663 Drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 229940112141 Dry Powder Inhaler Drugs 0.000 description 1
- 206010013781 Dry mouth Diseases 0.000 description 1
- 208000001187 Dyskinesias Diseases 0.000 description 1
- 102000019460 EC 4.6.1.1 Human genes 0.000 description 1
- 108060000200 EC 4.6.1.1 Proteins 0.000 description 1
- 230000036469 Elimination phase Effects 0.000 description 1
- 210000000783 Endoplasmic Reticulum, Smooth Anatomy 0.000 description 1
- 241001539473 Euphoria Species 0.000 description 1
- 206010015535 Euphoric mood Diseases 0.000 description 1
- 230000036081 Excretion rate Effects 0.000 description 1
- 102000003688 G-protein coupled receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000045 G-protein coupled receptors Proteins 0.000 description 1
- OKMWKBLSFKFYGZ-UHFFFAOYSA-N Glyceryl behenate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO OKMWKBLSFKFYGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000004547 Hallucinations Diseases 0.000 description 1
- 239000004866 Hashish Substances 0.000 description 1
- 206010019233 Headache Diseases 0.000 description 1
- 206010020400 Hostility Diseases 0.000 description 1
- 208000008454 Hyperhidrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010020651 Hyperkinesia Diseases 0.000 description 1
- 206010020718 Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000006083 Hypokinesia Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010021113 Hypothermia Diseases 0.000 description 1
- 206010021654 Increased appetite Diseases 0.000 description 1
- 206010021703 Indifference Diseases 0.000 description 1
- 229940102223 Injectable Solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 Injectable Suspension Drugs 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- 206010061256 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004731 Jugular Veins Anatomy 0.000 description 1
- 102100006988 KCNH2 Human genes 0.000 description 1
- 101700085508 KCNH2 Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 Kidney Anatomy 0.000 description 1
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- 101700067074 MAPK Proteins 0.000 description 1
- 101710041325 MAPKAPK2 Proteins 0.000 description 1
- 230000037013 METABOLISM RATE Effects 0.000 description 1
- 206010025482 Malaise Diseases 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 208000005565 Marijuana Use Diseases 0.000 description 1
- 241000266847 Mephitidae Species 0.000 description 1
- 108020004999 Messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000035633 Metabolized Effects 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940042472 Mineral Oil Drugs 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinylpyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097496 Nasal Spray Drugs 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- 208000009668 Neurobehavioral Manifestations Diseases 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 229940100688 Oral Solution Drugs 0.000 description 1
- 206010058667 Oral toxicity Diseases 0.000 description 1
- 230000036855 Plasma AUC Effects 0.000 description 1
- 230000036823 Plasma Levels Effects 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 Polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N Potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010037211 Psychomotor hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 230000036056 RATIO OF AUC Effects 0.000 description 1
- 230000036490 Ratio AUC Effects 0.000 description 1
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 229960001534 Risperidone Drugs 0.000 description 1
- RAPZEAPATHNIPO-UHFFFAOYSA-N Risperidone Chemical compound FC1=CC=C2C(C3CCN(CC3)CCC=3C(=O)N4CCCCC4=NC=3C)=NOC2=C1 RAPZEAPATHNIPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282696 Saimiri sciureus Species 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- 208000008742 Seborrheic Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010039792 Seborrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000008630 Sialorrhea Diseases 0.000 description 1
- 210000003491 Skin Anatomy 0.000 description 1
- 206010041243 Social avoidant behaviour Diseases 0.000 description 1
- 240000001016 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010065604 Suicidal behaviour Diseases 0.000 description 1
- 206010042458 Suicidal ideation Diseases 0.000 description 1
- 230000037098 T max Effects 0.000 description 1
- 102100009534 TNF Human genes 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- ZROLHBHDLIHEMS-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrocannabivarin Chemical compound C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCC)=CC(O)=C3C21 ZROLHBHDLIHEMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N Triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K Trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010001801 Tumor Necrosis Factor-alpha Proteins 0.000 description 1
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N Verapamil Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Vitamin C Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002730 additional Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 230000036626 alertness Effects 0.000 description 1
- 201000005794 allergic hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- 229940087168 alpha Tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229960002734 amfetamine Drugs 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic Effects 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000338 anxiogenic Effects 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003693 atypical antipsychotic agent Substances 0.000 description 1
- 201000000751 autosomal recessive congenital ichthyosis Diseases 0.000 description 1
- 238000009227 behaviour therapy Methods 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic Effects 0.000 description 1
- 238000009529 body temperature measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004641 brain development Effects 0.000 description 1
- 230000003925 brain function Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 231100000153 central nervous system (CNS) toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940081733 cetearyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 230000001149 cognitive Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 235000019571 color Nutrition 0.000 description 1
- 230000002860 competitive Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000005824 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Chemical class 0.000 description 1
- 239000000973 cosmetic coloring agent Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 235000010947 crosslinked sodium carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 230000001809 detectable Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000000385 dialysis solution Substances 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940095079 dicalcium phosphate anhydrous Drugs 0.000 description 1
- 230000003292 diminished Effects 0.000 description 1
- 235000014632 disordered eating Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000003291 dopaminomimetic Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 201000006180 eating disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000835 electrochemical detection Methods 0.000 description 1
- 230000002996 emotional Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000008387 emulsifying waxe Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 231100000755 favorable toxicity profile Toxicity 0.000 description 1
- 230000002349 favourable Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000003260 fluorescence intensity Methods 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005558 fluorometry Methods 0.000 description 1
- 229930002911 forskolin Natural products 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 231100000025 genetic toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229940049654 glyceryl behenate Drugs 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 description 1
- 239000005337 ground glass Substances 0.000 description 1
- 230000002650 habitual Effects 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003082 hepatotoxic Effects 0.000 description 1
- 231100000334 hepatotoxic Toxicity 0.000 description 1
- UBHWBODXJBSFLH-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol;octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO.CCCCCCCCCCCCCCCCCCO UBHWBODXJBSFLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003483 hypokinetic Effects 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular Methods 0.000 description 1
- 238000007916 intrasternal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007915 intraurethral administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesions Effects 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 231100000832 liver cell necrosis Toxicity 0.000 description 1
- 238000011068 load Methods 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 231100000896 loss of balance Toxicity 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Chemical class 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000004630 mental health Effects 0.000 description 1
- 229920002106 messenger RNA Polymers 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 230000037230 mobility Effects 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000017311 musculoskeletal movement, spinal reflex action Effects 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic Effects 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N n-methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003533 narcotic Effects 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 230000003188 neurobehavioral Effects 0.000 description 1
- 230000001722 neurochemical Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neurons Anatomy 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100001078 no known side-effect Toxicity 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 231100000418 oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Chemical class 0.000 description 1
- 230000003334 potential Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 150000003132 pregnenolones Chemical class 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 230000036678 protein binding Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 239000002469 receptor inverse agonist Substances 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 230000002336 repolarization Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 101710024887 rl Proteins 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 230000002393 scratching Effects 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000001953 sensory Effects 0.000 description 1
- 231100000197 serious side effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960001790 sodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 1
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 1
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Chemical class 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 101700045897 spk-1 Proteins 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000005477 standard model Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 201000009032 substance abuse Diseases 0.000 description 1
- 231100000736 substance abuse Toxicity 0.000 description 1
- 230000002142 suicide Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 230000002522 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M tetrabutylazanium;iodide Chemical compound [I-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DPKBAXPHAYBPRL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 1
- 231100000440 toxicity profile Toxicity 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient Effects 0.000 description 1
- 230000001702 transmitter Effects 0.000 description 1
- 239000011778 trisodium citrate Substances 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000001515 vagal Effects 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 1
- 230000003313 weakening Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000001238 wet grinding Methods 0.000 description 1
- 201000007117 withdrawal disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к применению соединения формулы (I), которое обладает высокой активностью при ингибировании большого спектра безусловных и обусловленных поведенческих эффектов агонистов CB1, не имеет известных побочных эффектов, не вызывает неспецифические поведенческие эффекты, такие как седативное действие, возбудимость, изменение спонтанного поведения, хорошо всасывается, является стабильным и не превращается в значительных количествах в последующие метаболиты. Изобретение может найти применение в медицине для лечения нарушений, связанных с каннабиноидами. 16 з.п. ф-лы, 10 ил., 8 табл., 8 пр.
формула (I)
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к области нарушений, связанных с употреблением психоактивных веществ, и в частности к области нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов. Оно относится к конкретному производному прегненолона, "3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-ону", который не может метаболизироваться in vivo с образованием активных метаболитов прегненолона, и к его применению для лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Препараты каннабиноидов, содержащие синтетические агонисты CB1 или экстракт, полученный из растения Cannabis sativa, являются наиболее широко используемыми запрещенными психоактивными веществами в США и в европейских странах.
Последствия употребления каннабиноидов, в особенности, но без ограничения, у наиболее предрасположенных групп населения (14-25 лет) крайне серьезны и могут включать зависимость, нарушение развития мозга с пониженным IQ, ускорение развития психических заболеваний, включающих, без ограничения, шизофрению и депрессию, поступление субъектов в отделение неотложной помощи с различными синдромами интоксикации, более низкие результаты обучения, когнитивные нарушения, низкий уровень дохода, более высокой зависимостью от социального обеспечения, безработицу и пониженную удовлетворенность отношениями и жизнью (Substance Abuse and Mental Health Services Administration (2013). Results from the 2013 National Survey on Drug Use and Health: Summary of National Findings; Cerda et al., 2012; Volkow et al., 2014; Hall et al., 2009).
В США 12-месячное распространение каннабиноидной зависимости, определенное в одном из наиболее часто используемых руководств по диагностике как нарушение, вызванное употреблением каннабиса, составляет примерно 3,4% в возрасте 12-17 лет и 1,5% у взрослых в возрасте 18 лет и старше. Частота нарушения, вызванного употреблением каннабиноидов, выше среди взрослых мужчин (2,2%), чем взрослых женщин (0,8%), и среди мужчин от 12 до 17 лет (3,8%), чем среди женщин в возрасте от 12 до 17 лет (3,0%). Частота распространения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов, за двенадцать месяцев снижается с возрастом, причем наиболее высокие показатели наблюдаются среди лиц в возрасте от 18 до 29 лет (4,4%), а самые низкие - среди лиц в возрасте 65 лет и старше (0,01%). Этнические и расовые различия в распространении являются умеренными.
Употребление каннабиноидов в США также является причиной 450000 обращений в отделения неотложной помощи в год (DAWN report, 2013). У этих пациентов наблюдаются несколько типов симптомов. Наиболее распространены следующие: a. состояние глубокой тревоги, которое напоминает паническую атаку: b. психоз, делирий и глубоко дезорганизованное поведение; с. синдром гиперемезиса; d. кататоническое поведение (Adams et al., 2017, Khan et al., 2016).
Наконец, употребление каннабиноидов растет и будет только еще больше увеличиваться при легализации использования каннабиса в рекреационных и медицинских целях в западных странах, с распространенностью более 30% в США и большинстве европейских стран среди лиц в возрасте от 16 до 24 лет. Примерно у 9% употребляющих каннабис развивается зависимость. Это число составляет примерно 1 из 6 среди тех, кто начинает употреблять марихуану в подростковом возрасте, и до 25-50% среди ежедневно курящих марихуану.
Связанные с употреблением каннабиноидов нарушения в первую очередь возникают в результате активации рецептора CB1 Δ9-тетрагидроканнабинол (ТГК), основным психоактивным компонентом каннабиса, или любым другим синтетическим соединением, таким как синтетические каннабиноиды.
Способы, направленные на блокирование активности CB1 посредством ингибирования ортостерического сайта связывания, сайта, в котором эндогенные лиганды связываются для активации рецептора, были разработаны и представлены для клинических исследований с целью снижения массы тела. Одно из таких соединений, римонабант, даже было выпущено в продажу под торговым наименованием Акомплиа®. К сожалению, доступные ортостерические антагонисты, такие как римонабант, полностью ингибируют активность рецептора, а также действуют как обратные агонисты рецептора CB1, то есть они ингибируют не только активацию CB1, но и базальную активность рецептора в отсутствие эндогенного лиганда. Из-за такого обратного агонистического действия и полного ингибирования активности рецептора доступные способы, основанные на введении ортостерических антагонистов CB1, также имеют ряд серьезных побочных эффектов. Из-за этих побочных эффектов коммерциализация Акомплиа® была приостановлена, а разработка других способов ингибирования ортостерического сайта CB1 была прекращена.
Ортостерические антагонисты CB1 и, в частности, Акомплиа® имеют следующие известные нежелательные эффекты, делающие их непрактичными средствами для лечения связанных с употреблением каннабиноидов нарушений:
1. Они уменьшают потребление пищи, что указывает на общее нарушение функций подкрепляющей системы;
2. Они вызывают подобное тревожному поведение у животных и тревогу у людей;
3. Они вызывают подобное депрессии поведение у животных и депрессию у людей;
4. Они увеличивают секрецию глюкокортикоидов, вызывающую нарушение гормонального статуса у субъекта. В частности, повышение уровня глюкокортикоидов может повышать активность дофаминергической системы, которая опосредует положительные подкрепляющие эффекты наркотических средств, в том числе каннабиноидов. Повышенная секреция глюкокортикоидов может затем приводить к повышенной чувствительности к подкрепляющим эффектам каннабиноидов, что может препятствовать терапевтическому действию ингибитора CB1 при нарушениях, связанных с употреблением каннабиноидов;
5. Они вызвают наступление абстинентного состояния у ТГК-зависимых животных;
6. Они вызывают судороги и общее нарушение поведенческих и клинических показателей в исследованиях фармакологической и токсикологической безопасности стандарта GLP;
7. Они обладают гепатотоксическим действием.
Недавно было обнаружено, что при избыточной активации рецептора CB1 синтетическими каннабиноидами или очень высокими дозами ТГК, значительно превышающими дозу ТГК, используемую лицами, злоупотребляющими каннабисом, повышается концентрация стероидного гормона прегненолона (3000%) в головном мозге. При этом прегненолон связывается со специфическим сайтом рецептора CB1, отличным от сайта, связываемого агонистами CB1, такими как ТГК, и действует как специфический ингибитор эндогенной сигнализации рецептора CB1 (eCB1-SSi). Таким образом, прегненолон селективно ингибирует CB1-индуцированную активацию пути MAPK (митоген-активируемой протеинкиназы), но не CB1-индуцированное ингибирование аденилатциклазы. Несмотря на это ограниченное молекулярное действие, когда прегненолон вводят до воздействия ТГК, он подавляет большинство опосредуемых ТГК поведенческих эффектов у грызунов (Vallee et al., 2014).
Бускетс-Гарсия с соавт. также демонстрируют, что прегненолон может блокировать весь спектр безусловного действия ТГК, который связан с психотическими симптомами, которые наблюдаются после употребления каннабиноидов у людей. Таким образом, авторы предполагают, что лекарственные средства, имитирующие активность прегненолона, можно применять для лечения острых психотических состояний, вызванных каннабиноидами (CIAPS) (Busquets-Garcia et al., 2017).
По этим причинам прегненолон представляется многообещающим средством для лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов.
Однако прегненолон не может применяться в качестве лекарственного средства, поскольку он обладает плохой доступностью, имеет очень короткий период полувыведения и превращается в активные стероиды.
В WO2012/160006 три производных прегненолона, а именно 3-фторпрегненолон, 17-метилпрегненолон, 3-фтор-17-метилпрегненолон, исследовали на крысах или мышах после стимуляции ТГК и/или после ограничения пищи. Эти соединения могли ингибировать эффекты активации CB1 при приеме пищи.
Другие соединения, и особенно 3β-бензилоксипрегненолон, исследовали на их способность ингибировать: i. эффекты ТГК-индуцированной каннабиноидой тетрады (гипотермия и подавление двигательной активности); ii. ТГК-индуцированное увеличение потребления пищи, типичный эффект активации CB1; iii. повышение ФНО-альфа, вызванное ЛПС, другой эффект, типичный для антагонистов CB1.
В WO2014/083068 раскрыт "3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он" и его применение для ингибирования рецептора CB1, однако в очень общем виде. Нет никакого упоминания об ингибировании активации CB1, вызванной, в частности, ТГК.
В любом случае, не существует никаких одобренных лекарственных средств для лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов, что, следовательно, является важной неудовлетворенной потребностью медицины.
Таким образом, сохраняется потребность в лечении нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов.
Разработка способов лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов, на основе специфического подавления сигналов рецептора CB1, которые могут применяться у человека, представляет несколько сложностей. При этом такое соединение должно одновременно обладать всеми следующими характеристиками:
1. Оно должно ингибировать активность рецептора CB1 селективным и сигнально-специфическим образом.
2. Оно должно ингибировать большой спектр безусловных и обусловленных поведенческих эффектов агонистов CB1, чтобы его можно было применять для лечения различных нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов. Это представляет особую проблему для специфического ингибитора сигнализации. Поскольку это соединение изменяет лишь некоторые клеточные эффекты активации CB1 под действием агониста. Следовательно, невозможно предсказать, какой из различных поведенческих эффектов каннабиноидов будет изменен специфическим ингибитором сигнализации.
3. Оно не должно иметь известных побочных эффектов ингибиторов CB1. В частности, оно не должно вызывать: a. уменьшение потребления пищи; b. усиление связанного с тревогой и депрессией поведения; с. увеличение секреции глюкокортикоидов; d. состояния отмены у ТГК-зависимых животных; e. судороги и нарушение клинических проявлений, связанных с центральной нервной системой; f. гепатотоксичность.
4. Оно не должно иметь неспецифических поведенческих эффектов, включающих, помимо прочего, седативное действие, возбудимость, измененное спонтанное поведение, которые могут нарушать его терапевтическое действие.
5. Оно должно хорошо всасываться, должно быть стабильным и не превращаться in vivo в значительные количества метаболитов, которые могут оказывать нежелательное действие, включая, без ограничения, активные стероиды.
6. Оно должно проникать в головной мозг, который является органом-мишенью терапевтического средства, направленного на лечение нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов.
7. Оно не должно модифицировать основные метаболические ферменты и белки-переносчики в организме, которые могут вызывать модификации на уровне или активности эндогенных молекул или экзогенных терапевтических средств.
8. Оно должно иметь хороший терапевтический индекс (соотношение между активной дозой и дозой, демонстрирующей нежелательные эффекты). Приемлемым терапевтическим индексом обычно считается по меньшей мере 10.
Ни для одного из специфических ингибиторов сигнализации и других антагонистов рецепторов CB1, описанных выше или в предшествующих доступных источниках, не были описаны все вышеуказанные особенности. В более общем смысле, практически ни одно соединение, применяемое для лечения поведенческих нарушений, не обладает всеми этими характеристиками. Таким образом, три основных класса психоактивных средств - анксиолитики, антидепрессанты и нейролептики - вызывают нежелательные поведенческие эффекты в диапазоне терапевтических доз. Например: a. Анксиолитические средства вызывают сонливость, снижают внимание и ухудшают память; b. Антидепрессант вызывает возбудимость, бессонницу и снижение либидо; c. Нейролептик вызывает гормональные нарушения, седативное действие, дискинезию и непроизвольные движения.
Следовательно, соединение, обладающее всеми характеристиками, описанными в пунктах 1-8, будет не только крупной инновацией в качестве лекарственного средства, предназначенного для лечения заболеваний, связанных с употреблением каннабиноидов, но также и крупной инновацией для всей области психоактивных средств, предназначенных для лечения поведенческих нарушений.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение в целом относится к определенному производному прегненолона для применения для лечения нарушения, связанного с употреблением каннабиноидов.
В частности, изобретение относится к соединению Формулы (I):
для применения при лечении нарушения, связанного с употреблением каннабиноидов.
Фактически, соединение согласно изобретению обладает уникальными характеристиками, заключающимися в наличии всех описанных ниже свойств, которые делают его крайне инновационным терапевтическим средством для лечения заболеваний, связанных с употреблением каннабиноидов.
1. Оно селективно ингибирует активность рецептора CB1 сигнально-специфическим образом;
2. Оно обладает очень высокой активностью при ингибировании большого спектра безусловных и обусловленных поведенческих эффектов агонистов CB1 и, следовательно, может применяться для лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов;
3. Он не имеет известных побочных эффектов ингибиторов и антагонистов CB1. В частности, оно не: a. уменьшает потребление пищи; b. усиливает поведение, связанное с тревогой и депрессией; c. повышает секрецию глюкокортикоидов; d. вызывает наступление состояния отмены у ТГК-зависимых животных; e. вызывает судороги и нарушения, а также клинические проявления, связанные с центральной нервной системой; f. вызвает гепатотоксичность в исследованиях стандарта GLP.
4. Он не вызывает неспецифические поведенческие эффекты, такие как седативное действие, возбудимость, изменение спонтанного поведения, которые могли бы помешать его терапевтическому действию.
5. Оно хорошо всасывается, является стабильным и не превращается в значительных количествах в последующие метаболиты.
6. Оно проникает в мозг.
7. Оно не изменяет главные метаболические ферменты и белки-переносчики организма.
8. Оно имеет превосходный терапевтический индекс >7200.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
ФИГУРА 1: Схема синтеза соединения формулы (I) (3pMBP)
ФИГУРЫ 2: In vitro эффекты 3pMBP в отношении вызванных ТГК модификаций CB1-опосредованной сигнализации и клеточной активности.
ФИГУРА 2A: Действие 3pMBP (0, 1, 10 и 100 нМ) на ТГК-индуцированное фосфорилирование MAPK. Отношение P-MAPK/CoxIV из клеток HEK293, стабильно трансфицированных hCB1.
ФИГУРА 2B: Действие 3pMBP (0, 1, 10 и 100 нМ) на ТГК-индуцированное фосфорилирование MAPK. Отношение P-MAPK/MAPK из клеток HEK293, транзиентно трансфицированных hCB1.
ФИГУРА 2C: Действие 3pMBP (1 нМ, 10 нМ, 100 нМ и 1 мкМ) на ТГК-индуцированное снижение уровней цАМФ в клетках CHO, стабильно трансфицированных hCB1. NT=необработанные, т.е. клетки, получавшие оба растворителя 3pMBP и ТГК.
ФИГУРА 2D: Действие 3pMBP (0, 1, 10 и 100 нМ) на ТГК-индуцированное ингибирование клеточного дыхания в клетках HEK293, транзиентно трансфицированных hCB1.
***p<0,001; **p<0,01; *p<0,05, группы, обработанные ТГК в сравнении с группами, обработанными растворителем ТГК; ###p<0,001; ##p<0,01; #p<0,05, группы, обработанные 3pMBP+ТГК в сравнении с группами, обработанными растворителем 3pMBP (0 нМ) +ТГК. (A, B критерий Тьюки, D. критерий Даннетта).
ФИГУРЫ 3: Действие 3pMBP на ТГК-индуцированную гиперфагию, психомоторную стимуляцию и нарушение преимпульсного ингибирования:
ФИГУРА 3A: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей увеличение потребления пищи, вызванное ТГК (1 мг/кг; в/б).
***p<0,001, ТГК в сравнении с растворителем ТГК; ###p<0,001, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мкг/кг) +ТГК (критерий Даннетта).
ФИГУРА 3B: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей увеличение двигательной активности, вызванное ТГК (0,3 мг/кг; в/б).
Сплошные черные линии соответствуют средним; пунктирные черные линии соответствуют значениям SEM для групп, получавших растворитель ТГК (VEH) или ТГК без 3pMBP. Черные круги, средние значения ± SEM для групп, получавших 3pMBP и ТГК.
p>0,05, 3pMBP (0,00015 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP +ТГК,
p<0,01, 3pMBP (0,0005 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP +ТГК,
p<0,001, 3pMBP (0,0015 мг/кг) +ТГК, 3pMBP (0,015 мг/кг) +ТГК и 3pMBP (0,15 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP+ТГК.
(критерий Даннетта после однофакторного дисперсионного анализа, p<0,001).
ФИГУРА 3C: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей нарушение преимпульсного (82 дБ) ингибирования (PPI), вызванного ТГК (10 мг/кг; в/б).
Сплошные черные линии соответствуют средним; пунктирные черные линии соответствуют значениям SEM для групп, обработанных растворителем ТГК (VEH) или ТГК без 3pMBP. Черные круги, средние значения ± SEM для групп, обработанных 3pMBP и ТГК.
p>0,05, 3pMBP (0,0015 мг/кг) +ТГК и 3pMBP (0,005 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP +ТГК,
p<0,05, 3pMBP (0,015 мг/кг) +ТГК и 3pMBP (0,05 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP +ТГК,
p<0,01, 3pMBP (0,03 мг/кг) +ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP +ТГК
(критерий Даннетта после однофакторного дисперсионного анализа, p<0,001).
ФИГУРЫ 4: Действие 3pMBP на ТГК-индуцированное нарушение кратковременной памяти, распознавания объектов, социального взаимодействия и тестирования реальности.
ФИГУРА 4A: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей нарушение кратковременной памяти, вызванное ТГК (5 мг/кг) в водном лабиринте.
**p<0,01, ТГК в сравнении с растворителем ТГК (VEHТГК; критерий Даннетта).
#p<0,05, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) +ТГК (критерий Даннетта).
ФИГУРА 4B: 3pMBP (внутрь) предотвращает у мышей нарушение распознавания объектов, вызванное ТГК (6 мг/кг).
***p<0,001, Знакомый в сравнении с Новым объектом (критерий Шидака).
###p<0,001, время исследования нового объекта: Растворитель 3pMBP (0 мг/кг) + ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) и без ТГК или в сравнении с 3pMBP+ТГК (критерий Шидака).
ФИГУРА 4C: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей нарушение социального взаимодействия, вызванное ТГК (3 мг/кг).
**p<0,01, ТГК в сравнении с растворителем ТГК (VEHТГК; критерий Даннетта).
###p<0,001; #p<0,05, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) + ТГК (критерий Даннетта).
ФИГУРА 4D: 3pMBP (внутрь) дозозависимо предотвращает у мышей нарушение тестирования реальности, вызванное ТГК (1 мг/кг).
*p<0,05, ТГК в сравнении с растворителем ТГК (VEHТГК; непарный t-критерий).
ФИГУРЫ 5: Дествие 3pMBP на ТГК-индуцированную каталепсию, обусловленное раскрывание рта и выброс дофамина в прилежащем ядре.
ФИГУРА 5A: 3pMBP (внутрь) дозозависимо уменьшает у мышей каталепсию, вызванную ТГК (10 мг/кг).
***p<0,001, ТГК в сравнении с растворителем ТГК (критерий Манна-Уитни).
#p<0,05, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) +ТГК (критерий Манна-Уитни).
ФИГУРА 5B: 3pMBP (внутрь) предотвращает у мышей обусловленное раскрывание рта, вызванное ТГК (10 мг/кг). Среднее количество ± SEM раскрываний рта, вызванных ТГК-спаренным раствором сахарина при предварительной обработке 3pMBP (0,005 и 0,015 мг/кг) или растворителем 3pMBP (0 мг/кг) во время адаптации и контрольного испытания.
*p<0,05, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) +ТГК (однофакторный дисперсионный анализ, основное действие при введении 3pMBP).
ФИГУРА 5C: 3pMBP ингибирует увеличение оттока дофамина в зависимости от времени в прилежащем ядре крыс, обработанных ТГК (1 мг/кг). Черная стрелка, время инъекции ТГК.
ФИГУРА 5D: 3pMBP уменьшает среднюю площадь под кривой (AUC, вычисленную от времени "0" до 60 минут для каждой группы) оттока дофамина в прилежащем ядре крыс, обработанных ТГК (1 мг/кг).
***p<0,001; **p<0,01, 3pMBP+ТГК в сравнении с растворителем 3pMBP (0 мг/кг) +ТГК (критерий Даннетта).
ФИГУРА 6: Действие 3pMBP при внутривенном самовведении WIN 55,212-2 у мышей.
3pMBP (внутрь) уменьшает самовведение WIN 55-512,2 (0,0125 мг/кг/инфузия; в/в) у мышей. Количество инфузий во время освоения самовведения (первые 10 процедур, закрашенные черным круги) и во время процедур самовведения 3pMBP (0,005 мг/кг, процедуры 11-14 и 0,015 мг/кг, процедуры 15-18; серые квадраты) или с Растворителем 3pMBP (0 мг/кг, белым заполненными кругами).
*p<0,05, обработанная 3pMBP (0,015 мг/кг) группа в сравнении с растворителем (0 мг/кг) (двухфакторный дисперсионный анализ, основное действие при введении 3pMBP).
ФИГУРЫ 7: Действие 3pMBP при самовведении ТГК и восстановлении у обезьян.
ФИГУРА 7A: 3pMBP дозозависимо снижает количество инъекций ТГК у саймири во время внутривенного самовведения (1-ч процедуры) ТГК (4 мкг/кг/инъекция) при фиксированном отношении десять (FR10)
*p<0,05, в сравнении с растворителем 3pMBP+ТГК (критерий Бонферрони).
ФИГУРА 7B: 3pMBP дозозависимо уменьшает процент ответа на ТГК у саймири во время внутривенного самовведения (1-ч процедуры) ТГК (4 мкг/кг/инъекция) при фиксированном отношении десять (FR10).
*p<0,05, в сравнении с растворителем 3pMBP+ТГК (критерий Бонферрони).
ФИГУРА 7C: 3pMBP (внутрь) уменьшает ТГК-индуцированное возобновление (0,04 мг/кг) поиска наркотического средства у обезьян. Столбик представляет собой среднее количество ± SEM (n=4) инъекций растворителя. "0 мг/кг" представляет собой растворитель 3pMBP.
*p<0,05, в сравнении с 'праймингом растворителем' (критерий Тьюки).
#p<0,05, в сравнении с 'праймингом ТГК' (критерий Тьюки).
ФИГУРА 7D: 3pMBP (внутрь) уменьшает процент ответов во время теста ТГК-индуцированного возобновления (0,04 мг/кг) поиска наркотического средства у обезьян. Столбик представляет собой среднее значение ± SEM (n=4) процента ответов. "0 мг/кг" представляет собой растворитель 3pMBP.
*p<0,05, в сравнении с 'праймингом растворителем' (критерий Тьюки).
#p<0,05, в сравнении с 'праймингом ТГК' (критерий Тьюки).
ФИГУРЫ 8 Действие 3pMBP и римонабанта на потребление пищи и массу тела и на ТГК-индуцированное состояние отмены.
ФИГУРА 8A: Действие 3pMBP и римонабанта на массу тела у мышей с ожирением.
В сравнении с животными, получавшими растворитель (VEH), Римонабант (Rimo 10 мг/кг; в/б), но не 3pMBP (0,005, 0,015, 0,05, 5 и 15 мг/кг; внутрь), вызывал снижение массы тела у мышей с ожирением.
Дни 1-4: отсутствие значимого действия римонабанта.
Дни 5-7: p<0,05, Rimo в сравнении с VEH (критерий Даннетта).
Дни 7-15: p<0,01, Rimo в сравнении с VEH (критерий Даннетта).
ФИГУРА 8B: Действие 3pMBP и римонабант на потребление пищи у мышей с ожирением.
По сравнению с животными, получавшими растворитель (VEH), Римонабант (Rimo 10 мг/кг; IP), но не 3pMBP (0,005, 0,015, 0,05, 5 и 15 мг/кг; внутрь), вызывал снижение потребления пищи у мышей с ожирением.
День 1-5: p<0,001, Rimo в сравнении с VEH (критерий Тьюки).
ФИГУРА 8C: Действие 3pMBP и римонабанта на длительность качания головой.
Римонабант (Rimo, 10 мг/кг; в/б), но не 3pMBP (0,15 мг/кг; внутрь), увеличивает длительность качания головой у мышей, повторно получавших лечение путем введения ТГК (20 мг/кг; в/б), по сравнению с животными, повторно получавшими ТГК с инъекцией растворителя (VEH).
***p<0,001; VEH-ТГК в сравнении с группой Rimo-ТГК (t-критерий Стьюдента).
ФИГУРА 8D: Действие 3pMBP и римонабанта на длительность дрожания лап.
Римонабант (Rimo, 10 мг/кг; в/б), но не 3pMBP (0,15 мг/кг; внутрь), увеличивает продолжительность дрожания лап у мышей, повторно получавших лечение путем введения ТГК (20 мг/кг; в/б), по сравнению с животными, повторно получавшими ТГК с инъекцией растворителя (VEH).
*p<0,05; VEH-ТГК в сравнении с группой Rimo-ТГК (t-критерий Стьюдента).
ФИГУРЫ 9: Действие повторных введений 3pMBP или римонабанта на поведение, связанное с тревогой и депрессией, у мышей.
ФИГУРА 9A: Действие у мышей повторных (28 дней, один раз в день) введений 3pMBP (0, 0,05, 5, 15 мг/кг, внутрь) или римонабанта (Rimo 0 и 10 мг/кг; в/б) на поведение, связанное с тревогой, измеряемое процентом времени, проведенного в открытых рукавах приподнятого крестообразного лабиринта. 3pMBP не влияет на время пребывания в открытых рукавах, тогда как римонабант сокращает время, проведенное в открытых рукавах.
ФИГУРА 9B: Действие у мышей повторных (28 дней, один раз в день) введений 3pMBP (0, 0,05; 5; 15 мг/кг, внутрь) или римонабанта (Rimo 0 и 10 мг/кг; в/б) на поведение, связанное с тревогой, измеряемое процентом посещений открытых рукавов приподнятого крестообразного лабиринта. 3pMBP не влияет на посещения открытых рукавов, тогда как римонабант уменьшает процент посещений открытых рукавов.
**p<0,01; *p<0,05; Rimo в сравнении с растворителем (0 мг/кг) (t-критерий Стьюдента).
ФИГУРА 9C: Действие у мышей повторных (28 дней, один раз в день) введений 3pMBP (0, 0.05; 5; 15 мг/кг, внутрь) на поведение, связанное с депрессией, измеряемое в тесте на предпочтение сахарозы. 3pMBP не влияет на потребление сахарозы.
ФИГУРА 9D: Действие у мышей повторных (28 дней, один раз в день) введений римонабанта (Rimo 0 и 10 мг/кг; в/б) на поведение, связанное с депрессией, измеряемое в тесте на предпочтение сахарозы. Римонабант уменьшает потребление сахарозы (задержка до 20:30-22:00).
*p<0,05, Rimo в сравнении с растворителем (0 мг/кг) (t-критерий Стьюдента).
ФИГУРЫ 10: Влияние 3pMBP на концентрации кортикостерона в плазме у мышей.
ФИГУРА 10A: У самцов мышей введение 3pMBP (0,3 или 10 мг/кг; внутрь) или растворителя (VEH) не оказывает значительного влияния на концентрации кортикостерона в плазме, измеряемые через 2, 5, 8 и 24 часа после введения.
ФИГУРА 10B: У самок мыши введение 3pMBP (0,3 или 10 мг/кг; внутрь) или растворителя (VEH) не оказывает значительного влияния на концентрации кортикостерона в плазме, измеряемые через 2, 5, 8 и 24 часа после введения.
Данные представлены в log(10) масштабе.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Настоящее изобретение в целом относится к соединению Формулы (I):
для применения при лечении нарушения, связанного с употреблением каннабиноидов.
Соединение согласно настоящему изобретению, 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он, блокирует не всю активность рецептора-мишени, а только часть его активности. Конкретным рецептором-мишенью соединения согласно настоящему изобретению является рецептор CB1.
Соединение Формулы (I) способно воспроизводить эффекты недавно открытого механизма в головном мозге, который обеспечивает эндогенную отрицательную обратную связь, регулируя избыточную активацию CB1. Важно отметить, что этот регуляторный механизм включается только тогда, когда CB1 сильно переактивирован, но не тогда, когда активация рецептора находится в границах более физиологического диапазона. Вот почему соединение согласно настоящему изобретению крайне эффективно блокирует эффекты агониста CB1, ТГК, и, таким образом, является эффективным для лечения нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов. Кроме того, из-за своего сигнально-специфического механизма действия соединение согласно настоящему изобретению не оказывает воздействия на поведение как таковое у здоровых субъектов, у которых CB1 не активирован каннабиноидами.
Механизм действия соединения согласно настоящему изобретению в этом отношении сильно отличается от механизма действия ортостерических антагонистов CB1, которые путем блокирования связывания эндогенных и экзогенных агонистов рецептора CB1 вызывают полное ингибирование всей активности CB1 и нарушают поведение как таковое. Кроме того, механизм действия антагонистов не существует на физиологическом уровне, то есть, насколько это известно, не существует эндогенных соединений, которые, как антагонисты, блокируют связывание агонистов CB1 с рецептором. Из-за искусственной природы этого механизма действия такие антагонисты, в дополнение к коррекции избыточно повышенной активации рецептора-мишени, обычно снижают его активность ниже базальных уровней, нарушая физиологию и вызывая побочные эффекты.
Иной механизм действия соединения согласно настоящему изобретению и ортостерических антагонистов, таких как римонабант, объясняет, почему оба лекарственных средства могут ингибировать эффекты ТГК, но не имеют других общих поведенческих эффектов.
Следовательно, соединение согласно настоящему изобретению не является антагонистом CB1 и как таковое не блокирует все клеточные эффекты ТГК, как это делает ортостерический антагонист CB1 римонабант.
Фактически, соединение согласно настоящему изобретению превращает ТГК в цАМФ-смещенный агонист CB1.
Смещенный агонист представляет собой соединение, которое способно активировать только некоторые клеточные эффекты, опосредуемые его рецептором-мишенью. В случае CB1, два основных эффекта агониста, такого как ТГК, заключаются в одновременном ингибировании продукции цАМФ и стимуляции активности MAPK. Смещенный агонист CB1 может при этом либо селективно ингибировать цАМФ (агонист CB1 с цАМФ-смещенной активностью), либо активировать MAPK (агонист CB1 с MAPK-смещенной активностью).
Когда соединение согласно настоящему изобретению уже присутствует в организме, ТГК все еще способен ингибировать продукцию цАМФ, но не может активировать MAPK.
Другими словами, соединение согласно настоящему изобретению превратило ТГК в цАМФ-смещенный агонист.
Данные доклинических исследований, полученные с соединением согласно настоящему изобретению, показывают, что ТГК как цАМФ-смещенный агонист теряет большую часть своих безусловных и обусловленных поведенческих эффектов, и становится менее усиливающим и в меньшей степени способен вызывать возобновление поиска наркотического средства после периода прекращения приема наркотического средства.
Однако ТГК все еще способен оказывать некоторые из своих клеточных эффектов. Вероятно, поэтому соединение согласно настоящему изобретению не вызывает наступление состояния отмены у ТГК-зависимых мышей, тогда как римонабант делает это.
Соединение согласно настоящему изобретению обладает преимуществом, которое состоит в том, что оно не проявляет поведенческих эффектов антагонистов CB1. Фактически, ортостерические антагонисты CB1 блокируют всю клеточную активность рецептора, тогда как соединение согласно настоящему изобретению блокирует только некоторые из них.
Также в качестве преимущества и в более общем смысле у соединения согласно настоящему изобретению не наблюдали нежелательных эффектов.
Отсутствие нежелательных эффектов и, во многих случаях, отсутсвие действия соединения согласно настоящему изобретению у грызунов и собак вероятно вызвано специфической структурой, механизмом действия и характеристиками Всасывания/Распределения/Метаболизма/Экскреции соединения согласно настоящему изобретению.
Авторы изобретения демонстрируют, что соединение согласно изобретению обладает сопутствующими свойствами, которые делают его уникальным идеальным средством для лечения нарушений, связанных с употребления каннабиноидов. Эти свойства включают, без ограничения перечисленным, следующее:
1. Соединение согласно настоящему изобретению обладает уникальным механизмом действия, специально созданным как эндогенный механизм в головном мозге для преодоления избыточной активации рецептора CB1, но, по-видимому, не оказывающий влияния на базальную активность рецептора. Нарушение базальной активности системы-мишени часто является причиной некоторых нежелательных эффектов антагонистов. Кроме того, соединение согласно настоящему изобретению обладает высокой селективностью и не взаимодействует ни с одним из 85 протестированных рецепторов. Нецелевые эффекты часто являются причиной некоторых нежелательных эффектов новых химических соединений. Клеточная активность рецептора CB1 при этом ингибируется селективным и сигнально-специфическим образом.
2. Соединение согласно настоящему изобретению демонстрирует in vivo очень высокую активность при ингибировании большого спектра безусловных и обусловленных эффектов агонистов CB1 в том числе, но без ограничения, ТГК.
3. Соединение согласно настоящему изобретению не имеет нежелательных эффектов ортостерических антагонистов CB1, включающих, без ограничения перечисленными: a. снижение потребления пищи; b. усиление поведения, связанного с тревогой и депрессией: c. повышенная секреция глюкокортикоидов; d. вызванное состояние отмены у ТГК-зависимых животных; e. индукция клонических судорог и клинических проявлений, связанных с поражением центральной нервной системы; f. гепатотоксичность.
4. Соединение согласно настоящему изобретению не вызывает соответствующих изменений в поведении как таковое, даже в дозах, которые в тысячу раз выше, чем ID50 для ингибирования ТГК.
5. Соединение согласно настоящему изобретению имеет хорошие характеристики Всасывания, Распределения, Метаболизма и Экскреции с незначительным превращением в основные метаболиты, включающие, без ограничения, последующие активные стероиды.
6. Соединение согласно настоящему изобретению демонстрирует хороший доступ в головной мозг.
7. Соединение согласно настоящему изобретению не изменяет активность основных эндогенных метаболических ферментов и транспортных систем.
8. Соединение согласно настоящему изобретению не имеет побочных и токсических эффектов in vitro и in vivo в дозах, в тысячи раз превышающих ID50 для ингибирования эффектов ТГК. Следовательно, соединение согласно настоящему изобретению имеет очень хороший терапевтический индекс >7200.
Согласно настоящему изобретению "связанные с каннабиноидами нарушения" или "связанное с каннабиноидами нарушение", или "CRD" включают нарушение, связанное с употреблением каннабиноидов (CUD); отравление каннабиноидами; синдром отмены каннабиноидов; другие вызванные каннабиноидами нарушения; неуточненное нарушение, связанное с каннабиноидами; синдром каннабиноидного гиперемезиса, вызванная каннабиноидами кататонию и любые нарушения, которые могут быть связаны с употреблением каннабиноидов.
Чтобы проиллюстрировать основные нарушения, связанные с каннабиноидами (CRD), здесь используются критерии пятого издания Диагностического и статистического руководства по психическим расстройствам (DSM-5™), которые относятся к каннабису и синтетическим каннабиноидам.
Однако это не исключительное описание нарушений, связанных с каннабиноидами, и охватывает аналогичные нарушения, описанные в других диагностических руководствах, включая, помимо прочего, Международную классификацию болезней (Всемирная организация здравоохранения) и, в более общем виде, все нарушения, вызванные препаратами, полученными из каннабиса или содержащими синтетические каннабиноиды.
Примеры таких нарушений подробно описаны в публикации Всемирной организации здравоохранения 2016 года под названием "Медицинские и социальные последствия немедицинского употребления каннабиса". Краткосрочные эффекты от употребления каннабиноидов включают такие нарушения, как нарушение когнитивных функций и координации, тревогу и психотические симптомы, острое токсическое действие, острые воздействия на сердечно-сосудистую систему и острые воздействия на легкие и на дыхательные пути. Длительное употребление каннабиноидов подразумевает не только неблагоприятные психосоциальные и психические последствия, но и сердечно-сосудистые нарушения, связанные с каннабиноидами, а также ишемический инсульт, связанный с каннабиноидами.
"Нарушение, связанное с употреблением каннабиноидов" или "CUD" следует понимать как проблемный профиль использования каннабиноидов, приводящий к клинически значимому ухудшению или нарушению, которое проявляется в виде по меньшей мере двух из следующих событий, происходящих за 12-месячный период:
1. Каннабиноиды часто принимают в больших количествах или в течение более длительного периода, чем было предусмотрено.
2. Присутствует постоянная тяга или неудачные попытки уменьшить или контролировать использование каннабиноидов.
3. Много времени тратится на деятельность, необходимую для получения каннабиноидов, использования каннабиноидов или восстановления после их действия.
4. Тяга, или сильное желание или потребность в использовании каннабиноидов.
5. Неоднократно повторяющееся использование каннабиноидов, приводящее к невыполнению основных обязанностей на работе, школе или дома.
6. Продолжение употребления каннабиноидов, несмотря на наличие постоянных или повторяющихся социальных или межличностных проблем, вызванных или усугубляемых действием каннабиноидов.
7. Отказ от важных социальных, профессиональных или развлекательных мероприятий или их ограничение из-за употребления каннабиноидов.
8. Неоднократно повторяющееся использование каннабиноидов в ситуациях, в которых это представляет физическую угрозу.
9. Использование каннабиноидов продолжается, несмотря на известное присутствие постоянной или повторяющейся физической или психологической проблемы, которая может быть вызвана или усилена каннабиноидами.
10. Толерантность, определяемая любым из следующего:
a. Потребность в заметно увеличенных количествах каннабиноидов с достижением интоксикации или нужного эффекта.
b. Заметно ослабленный эффект при продолжительном использовании одного и того же количества каннабиноидов.
11. Состояние отмены, проявляющийся любым из следующего:
a. Характерный синдром отмены каннабиноидов.
b. Каннабиноиды (или близко родственное вещество) принимают для облегчения или предотвращения наступления состояния отмены.
Согласно DSM-5™, нарушение, связанное с употреблением каннабиноидов, будет считаться "легким", если присутствуют 2-3 симптома, "средним", если присутствуют 4-5 симптомов, и "тяжелым", если присутствуют 6 или более симптомов.
При использовании в настоящем документе "отравление каннабиноидами" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Недавнее использование каннабиса или синтетического каннабиноида.
B. Клинически значимые проблематичные поведенческие или психологические изменения (например, нарушение координации движений, эйфория, тревога, ощущение замедленного времени, помутнение сознания, социальное отчуждение), которые развивались во время или вскоре после использования каннабиноидов.
C. Два (или более) следующих признака или симптома, развивающихся в течение 2 часов после использования каннабиноидов:
1. Конъюнктивальная инъекция.
2. Повышенный аппетит.
3. Сухость во рту.
4. Тахикардия.
D. Признаки или симптомы не связаны с другим заболеванием и не могут быть лучше объяснены присутствием другого психического расстройства, включая интоксикацию другим веществом.
Термин "нарушение, связанное с состоянием отмены каннабиноидов" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Прекращение использования каннабиноидов, которое было тяжелым и длительным (т.е. обычно ежедневное или почти ежедневное использование в течение по меньшей мере нескольких месяцев).
B. Три (или более) следующих признаков и симптомов развиваются в течение приблизительно 1 недели после Критерия A:
1. Раздражительность, гнев или агрессия.
2. Нервозность или тревожное состояние.
3. Трудности с засыпанием (например, бессонница, беспокойные сны).
4. Сниженный аппетит или потеря веса.
5. Возбуждение.
6. Подавленное настроение.
7. По меньшей мере один из следующих физических симптомов, вызывающих значительный дискомфорт: боль в животе, дрожь/тремор, потливость, жар, озноб или головная боль.
C. Признаки или симптомы критерия B вызывают клинически значимые расстройства или нарушения в социальной, профессиональной или других важных сферах жизнедеятельности.
D. Признаки или симптомы не относятся к другому заболеванию и не могут быть лучше объяснены присутствием другого психического расстройства, включая интоксикацию или отмену другого вещества.
Согласно DSM-5™ "Другие вызванные каннабиноидами нарушения" являются вызванным каннабиноидами тревожным расстройством; вызванным каннабиноидами психотическим нарушением; вызванным каннабиноидами нарушением сна; каннабиноидным интоксикационным делирием. Такие вызванные каннабиноидами нарушения диагностируют вместо отравления каннабиноидами или отмены каннабиноидов, когда симптомы являются достаточно тяжелыми, чтобы служить основанием независимого клинического наблюдения.
"Вызванное каннабиноидами психотическое нарушение" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Присутствие одного или обоих следующих симптомов:
1. Бредовые идеи.
2. Галлюцинации.
B. Существует подтверждение из анамнеза, объективного обследования или результатов лабораторного исследования (1) и (2):
1. Симптомы Критерия A развились во время или вскоре после отравления каннабиноидами или отмены каннабиноидов, или после воздействия лекарственного средства.
2. Включенные каннабиноиды способны вызывать симптомы Критерия A.
C. Нарушение не может быть лучше объяснено психотическим нарушением, которое не вызвано употреблением психоактивного вещества. Такой симптом независимого психотического нарушения мог включать следующее:
Симптомы присутствовали до начала употребления каннабиноидов; симптомы сохраняются в течение значительного периода времени (например, около 1 месяца) после прекращения острого состояния отмены или тяжелой интоксикации: или существует другое подтверждение независимого психотического нарушения, не связанного с психоактивным веществом/лекарственным средством (например, наличие в анамнезе повторяющихся эпизодов, не связанные с психоактивным веществом/лекарственным средством).
D. Нарушение наблюдается не только во время делирия.
E. Нарушение вызывает клинически значимое расстройство или нарушение в социальной, профессиональной или других важных сферах жизнедеятельности.
Этот диагноз следует ставить вместо диагноза интоксикации или отмены психоактивного вещества только в том случае, если симптомы Критерия A преобладают в клинической картине и когда они являются достаточно тяжелыми, чтобы требовать клинического внимания.
"Вызванное каннабиноидами тревожное расстройство" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Панические атаки или тревога преобладают в клинической картине.
B. Существует подтверждение из анамнеза, объективного обследования или результатов лабораторного исследования (1) и (2):
1. Симптомы Критерия A развились во время или вскоре после отравления каннабиноидами или отмены каннабиноидов, или после воздействия каннабиноидов.
2. Включенные каннабиноиды способны вызывать симптомы Критерия A.
C. Нарушение не может быть лучше объяснено присутствием тревожного расстройства, которое не вызвано каннабиноидами. Такое подтверждение независимого тревожного расстройства может включать следующее:
Симптомы присутствовали до начала использования психоактивного вещества/лекарственного средства; симптомы сохраняются в течение существенного периода времени (например, приблизительно 1 месяц) после прекращения острого состояния отмены или тяжелой интоксикации: или существует другое подтверждение, предполагающее присутствие независимого тревожного расстройства, не вызванного психоактивным веществом/лекарственным средством (например, повторные эпизоды в анамнезе, не связанные с психоактивным веществом/лекарственным средством).
D. Нарушение наблюдается не только во время делирия.
E. Нарушение вызывает клинически значимое расстройство или нарушение в социальной, профессиональной или других важных сферах жизнедеятельности.
Примечание: Этот диагноз следует ставить вместо диагноза отравления каннабиноидами или состояния отмены каннабиноидов только, когда симптомы Критерия A преобладают в клинической картине и являются достаточно тяжелыми, чтобы служить основанием клинического наблюдения.
"Вызванное каннабиноидами нарушение сна" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Выраженное и тяжелое нарушение сна.
B. Существует подтверждение в анамнезе, объективного обследования или результатов лабораторного исследования (1) и (2):
1. Симптомы Критерия A развились во время или вскоре после отравления каннабиноидами или после отмены каннабиноидов, или воздействия каннабиноидов.
2. Включенные каннабиноиды способны вызывать симптомы Критерия A.
C. Нарушение не может быть лучше объяснено нарушением сна, которое не вызвано каннабиноидами. Такое подтверждение независимого нарушения сна может включать следующее:
Симптомы присутствовали до начала использования каннабиноидов; симптомы сохраняются в течение существенного периода времени (например, приблизительно 1 месяц) после прекращения острого состояния отмены или тяжелой интоксикации; или существует другое подтверждение, предполагающее присутствие независимого нарушения сна, не вызванного каннабиноидами (например, повторные эпизоды в анамнезе, не связанные с психоактивным веществом/лекарственным средством).
D. Нарушение наблюдается не только во время делирия.
E. Нарушение вызывает клинически значимое расстройство или нарушение в социальной, профессиональной или других важных сферах жизнедеятельности.
Примечание: Этот диагноз следует ставить вместо диагноза отравления каннабиноидами или отмены каннабиноидов только тогда, когда симптомы Критерия A преобладают в клинической картине и когда они являются достаточно тяжелыми, чтобы служить основанием для клинического наблюдения.
"Интоксикационный делирий" следует диагностировать по следующим критериям:
A. Нарушение внимания (т.е. сниженная способность направлять, сосредотачивать, удерживать и переключать внимание) и осознанности (ухудшение ориентации в окружающей среде).
B. Нарушение развивается за короткий период времени (обычно от нескольких часов до нескольких дней), представляет изменение от исходного уровня внимания и восприятия, и имеет тенденцию к изменению тяжести в течение дня.
C. Дополнительное нарушение когнитивной функции (например, нарушение памяти, дезориентация, нарушение речи, зрительно-пространственной способности или восприятия).
D. Нарушения Критериев A и C не могут быть лучше объяснены присутствием другого, существовшего ранее, установившегося или развивающегося нейрокогнитивного нарушения, и не наблюдаются в контексте сильно сниженного уровня активации, такого как кома.
E. Существует подтверждение из анамнеза, объективного обследования или результатов лабораторного исследования, что нарушение является прямым физиологическим последствием отравления каннабиноидами или отмены каннабиноидов.
Диагноз каннабиноидного интоксикационного делирия следует ставить вместо отравления каннабиноидами, когда симптомы Критериев A и C преобладают в клинической картине и когда они являются достаточно тяжелыми, чтобы служить основанием для клинического наблюдения.
Диагноз делирия на фоне отмены каннабиноидов следует ставить вместо состояния отмены психоактивного вещества, когда симптомы Критериев A и C преобладают в клинической картине и когда они являются достаточно тяжелыми, чтобы служить основанием для клинического наблюдения.
При использовании в настоящем документе и в соответствии с DSM-5™, категория "Неуточненное связанное с каннабиноидом нарушение" относится к проявлениям, в которых симптомы, характерные для расстройства, связанного с каннабиноидами, которые вызывают клинически значимое расстройство или нарушение в социальной, профессиональной или других важных сферах жизнедеятельности, преобладают, но не соответствуют полным критериям каких-либо конкретных нарушений, связанных с каннабиноидами, или каких-либо нарушений в диагностическом классе нарушений, связанных с употреблением психоактивных веществ, и аддиктивных расстройств.
При использовании в настоящем документе "синдром каннабиноидного гиперемезиса" относится к проявлениям, характеризуемым употреблением каннабиноидов, циклическими эпизодами тошноты и рвоты, обычно связанными с частым принятием горячих ванн. Клиническое течение синдрома каннабиноидного гиперемезиса можно разделить на три фазы: продромальную, гиперемезию и фазу восстановления. Гипереметическая фаза обычно прекращается в течение 48 часов. Пациенты часто демонстрируют привычное поведение частого принятия горячих ванн, что приводит к временному прекращению тошноты, рвоты и болей в животе (Galli et al., 2011).
При использовании в настоящем документе "Вызванная каннабиноидами кататония" относится к проявлениям, характеризуемым использованием каннабиноидов, сопровождаемым состоянием, подобным кататоническому, с ограниченной подвижностью, внимательностью и чувствительностью к внешней стимуляции как преобладающей клинической симптоматики (Adams et al 2017, Khan et al., 2016).
Следовательно, настоящее изобретение относится к соединению Формулы (I):
для применения при лечении нарушения, связанного с каннабиноидами, выбранного из нарушения, связанного с употреблением каннабиноидов (CUD); отравления каннабиноидами; состояния отмены каннабиноидов; других вызванных каннабиноидами нарушений, неуточненного связанного с каннабиноидами нарушения; синдрома каннабиноидного гиперемезиса и вызванной каннабиноидами кататонии.
При использовании в настоящем документе "каннабиноиды" относятся к веществам, которые являются полными или частичными агонистами, действующими на каннабиноидные рецепторы. Каннабиноиды включают природные экстракты и синтетические соединения, также известные как подобные каннабису вещества.
Были описаны два главных типа каннабиноидных (CB) рецепторов: рецепторы CB1 и CB2.
Как правило, природные каннабиноиды могли быть выделены из растения Cannabis L., в особенности Cannabis sativa.
Со временем растительный материал, полученный из растения конопли Cannabis L., приобрел множество названий (например, травка, зелье, трава, косяк, марихуана, наркота, бханг, сканк, бум, гангстер, киф и ганджа). Лица, употребляющие каннабиноиды, могут употреблять либо части растения, например, цветок или листья, либо другой тип концентрированного экстракта растения, одним из которых является наиболее часто используемый гашиш. Компоненты растений или экстракты растений обычно курят или употребляют вместе с некоторыми пищевыми продуктами.
Каннабис является психоактивным растением, содержащим больше 500 компонентов, из которых в настоящее время были идентифицированы 104 каннабиноида.
Δ9-тетрагидроканнабинол (ТГК) является главным психоактивным компонентом в растении конопли. Активность каннабиса, прежде всего, оценивают по концентрации ТГК. По этой причине экстракт, содержащий чистый ТГК (чистое золото), может быть приобретен и используется потребителями каннабиноидов. Неблагоприятные эффекты после кратковременного или регулярного употребления каннабиса находится в прямой зависимости от концентраций ТГК в продукте (Lafaye et al., 2017).
Каннабидиол (КБД), каннабинол (КБН), каннабиварин (ТГКВ), каннабигерол (КБГ), каннабихромен (КБХ), дельта-8-ТГК, каннабициклол (КБЛ), каннабитриол (КБТ) и каннабиэлсоин являются одними из многих различных природных каннабиноидов, содержащихся в растении конопли. Большинство из них, как известно, обладают психоактивными свойствами.
Синтетические каннабиноиды связываются с каннабиноидными рецепторами и вызывают эффекты, подобные действию Δ9-тетрагидроканнабинола (ТГК). Некоторые примеры синтетических каннабиноидов описаны, но без ограничения, в Таблице 1.
Вещества, содержащие синтетические каннабиноиды (SCB), также известны под зарегистрированными патентованными наименованиями "Spice", "K2", "herbal incense", "Cloud 9", "Mojo".
Таблица 1: Примеры синтетических каннабиноидов
Следовательно, при использовании в настоящем документе связанные с каннабиноидами нарушения включают нарушения, связанные с употреблением каннабиноидов.
Термины "3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он" или "C29H40O3" или "3-β(пара-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он" или "3pMBP" или "1-((3S,8S,9S,10R,13S,14S,17S)-3-(4-метоксибензил)-окси)-10,13-диметил-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-тетрадекагидро-1H-циклопента[a]фенантрен-17-ил)этан-1-он" обозначают производное прегненолона согласно настоящему изобретению, имеющее следующую формулу (I):
Термин "лечение" или "способ лечения" или его эквивалент не предназначен в качестве абсолютного термина, и применетельно, например, к нарушениям, связанным с каннабиноидами, относится к процедуре или порядку действий, которые предназначены для уменьшения или устранения, или для облегчения одного или более симптомов нарушений, связанных с каннабиноидами.
Часто "лечение" или "способ лечения" нарушений, связанных с каннабиноидами, выполняют даже при низкой вероятности успеха, но, тем не менее, считается, что они вызывают общий положительный эффект. Лечение нарушений, связанных с каннабиноидами, относится, например, к задержке начала, уменьшению частоты одного или более симптомов или уменьшению тяжести одного или более симптомов, связанных с нарушением. В некоторых случаях частота и тяжесть одного или более симптомов снижается до непатологического уровня.
В частности, термин "лечение" или "способ лечения" нарушений, связанных с каннабиноидами, относится к улучшению клинических поведенческих или биологических критериев у субъекта. Например, "лечение" или "способ лечения" нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов, может относиться, в частности, к уменьшению количества и/или интенсивности критериев с 1 по 11, определенных выше для нарушений, связанных с употреблением каннабиноидов. Это также может относиться к предотвращению или задержке возникновения или снижению интенсивности клинических поведенческих или биологических критериев, связанных с другими нарушениями, связанными с каннабиноидами.
Настоящее изобретение также относится к способу производства соединения Формулы (I), который включает три химических стадии, из легко доступного исходного материала прегненолона.
Следовательно, настоящее изобретение относится к способу производства соединения Формулы (I), включающему:
- Первую стадию защиты прегненолона:
до соединения Формулы (IV):
- Вторую стадию, в которой указанное соединение Формулы (IV) реагирует с соединением Формулы (III):
с получением соединения Формулы (II):
- Третью стадию, в которой соединение Формулы (II), подвергают снятию защиты с получением соединения Формулы (I):
Способ производства соединения Формулы (I) описан на Фигуре 1.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей соединение Формулы (I):
и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
Форма фармацевтической композиции, путь введения, доза и схема применения обычно зависят от состояния, подлежащего лечению, тяжести заболевания, возраста, веса и пола пациента, и т.д.
Хотя соединение настоящего изобретения можно вводить отдельно, предпочтительно включать его в состав фармацевтической композиции в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Таким образом, в изобретении также предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы (I) в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
Также в настоящем изобретении предложен способ получения фармацевтической композиции, который включает смешивание соединения Формулы (I) по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
Фармацевтическая композиция, как правило, будет включать по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Приемлемые вспомогательные вещества для терапевтического применения известны в области фармацевтики и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 21st Edition 2011. Выбор фармацевтического вспомогательного вещества может быть сделан в соответствии с предполагаемым путем введения и стандартной фармацевтической практикой. Вспомогательное вещество должно быть приемлемым в том смысле, что оно не должно быть токсичным для реципиента. По меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество может быть, например, связующим веществом, разбавителем, носителем, смазывающим веществом, разрыхлителем, смачивающим веществом, диспергирующим веществом, суспендирующим веществом и т.п.
Пути введения (доставки) указанного выше соединения включают, без ограничения перечисленными: пероральный (например, в виде таблетки, капсулы или в виде раствора для приема внутрь), наружный, мукозальный (например, в виде назального спрея или аэрозоля для ингаляции), назальный, желудочно-кишечный, интраспинальный, внутрибрюшинный, внутримышечный, внутривенный, внутриматочный, внутриглазной, внутрикожный, внутричерепной, интратрахеальный, интравагинальный, интрацеребровентрикулярный, интрацеребральный, подкожный, офтальмологический (включая интравитреальный или интракамеральный), трансдермальный, ректальный, буккальный, эпидуральный, подъязычный.
Предпочтительные пути введения включают пероральный, мукозальный, парентеральный и подъязычный.
Например, соединение могут вводить перорально в форме таблеток, таблеток с оболочкой, пилюль, капсул, мягких желатиновых капсул, порошков для приема внутрь, гранул, суппозиториев, настоек, растворов или суспензий, которые могут содержать ароматизаторы или красители, для применения путем немедленного, отсроченного, модифицированного, замедленного, импульсного или контролируемого высвобождения.
Таблетки могут содержать вспомогательные вещества, такие как микрокристаллическую целлюлозу, лактозу, цитрат натрия, карбонат кальция, двухосновный фосфат кальция и глицин, разрыхлитель, такой как крахмал (предпочтительно кукурузный, картофельный крахмал или крахмал тапиоки), натрий крахмалгликолят, натрий кроскармеллозу и некоторые сложные силикаты, связующее вещество, такое как поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлозу (ГПМЦ), гидроксипропилцеллюлозу (ГПЦ), сахарозу, желатин и гуммиарабик, смазывающее вещество, такое как стеарат магния, стеариновую кислоту, глицерилбегенат. Твердые композиции аналогичного типа также могут использоваться в качестве наполнителей в твердых желатиновых капсулах. Предпочтительные вспомогательные вещества в этом случае включают лактозу, сахарозу, сорбит, маннит, картофельный крахмал, кукурузный крахмал, амилопектин, производные целлюлозы или желатин. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы соединения согласно изобретению.
Мягкие желатиновые капсулы могут быть изготовлены при использовании капсул, содержащих соединение согласно изобретению, растительное масло, воски, жир или другой подходящий растворитель для мягких желатиновых капсул. В качестве примера приемлемым растворителем может быть масляный носитель, такой как растительное масло из длинноцепочечных триглицеридов (например, кукурузное масло).
Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, могут содержать активный ингредиент в смеси с диспергирующими веществами, смачивающими веществами и суспендирующими веществами и одним или более консервантами. Также могут присутствовать дополнительные вспомогательные вещества, например подсластители, ароматизаторы и красители. Такие композиции можно консервировать путем добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения могут включать фармацевтически приемлемые растворы, эмульсии, суспензии, сиропы и настойки, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как воду или масляный носитель. Жидкая лекарственная форма может быть представлена в виде сухого продукта для смешивания с водой или другим подходящим растворителем перед применением. Такие композиции также могут включать вспомогательные вещества, такие как смачивающие вещества, эмульгаторы и суспендирующие вещества, комплексообразователи, такие как 2-гидроксипропил-бета-циклодекстрин, сульфобутилэфир-бета-циклодекстрин, а также подсластители, ароматизаторы, отдушки, красящие вещества или красители с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль и глицерин, а также их комбинации. Эти композиции можно консервировать путем добавления антиоксиданта, такого как бутилгидроксианизол или альфа-токоферол.
Тонко измельченный порошок соединения согласно изобретению может быть изготовлен, например, с помощью микронизации или процессов, известных в уровне техники. Соединение согласно изобретению можно молоть с использованием известных процедур размола, таких как влажный размол, с получением частиц с размером, подходящим для формования таблеток и составов других типов.
Если соединение согласно настоящему изобретению вводят парентерально, то примеры такого введения включают одно или более из: внутривенного, внутриартериального, внутрибрюшинного, интратекального, интравентрикулярного, интрауретрального, внутригрудинного, интракраниального, внутримышечного или подкожного введения средства; и/или при использовании методов инфузии.
Соединение согласно изобретению могут вводить парентеральным путем с готовым доступным составом или составом депо-типа.
Фармацевтические композиции для парентерального введения готового доступного состава могут быть в форме стерильного водного или масляного раствора или суспензии для инъекций в нетоксичном, парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, и могут содержать вспомогательные вещества, такие как суспендирующие, стабилизирующие, диспергирующие, смачивающие и/или комплексообразующие вещества, такие как циклодекстрин, например, 2-гидроксипропил-бета-циклодекстрин, сульфобутилэфир-бета-циклодекстрин.
Состав депо-типа для парентерального введения может быть изготовлен обычными методами с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, включающим, без ограничения перечисленными, биосовместимые и биоразлагаемые полимеры (например, поли(β-капролактон), полиэтиленоксид, полигликолевую кислоту, сополимер молочной и гликолевой кислоты..., поли молочную кислоту..., бионеразлагаемые полимеры (например, сополимер этилена и винилацетата, полиуретан, полиэфирамид, поливинилхлорид …), водные и неводные носители (например, воду, кунжутное масло, хлопковое масло, соевое масло, касторовое масло, миндальное масло, масляные сложные эфиры, этиловый спирт или фракционированные растительные масла, пропиленгликоль, ДМСО, ТГФ, 2-пирролидон, N-метилпирролидинон, N-винилпирролидинон …).
В альтернативе активный ингредиент может находиться в сухой форме, такой как порошок, кристаллическое или лиофилизированное твердое вещество, для восстановления подходящим носителем. Изготовление подходящих парентеральных составов в стерильных условиях легко осуществляется с помощью стандартных фармацевтических методов, хорошо известных специалистам в данной области.
Как указано, соединение согласно настоящему изобретению можно вводить интраназально или путем ингаляции, и его удобно доставлять в форме ингалятора сухого порошка или аэрозольного спрея из контейнера под давлением, насоса, спрея или небулайзера с использованием подходящего пропеллента, например дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана (например, производства Ineos Fluor), диоксида углерода или другого подходящего газа. В случае аэрозоля под давлением единица дозы может быть определена с помощью клапана для доставки дозируемого количества. Контейнер под давлением, насос, спрей или небулайзер могут содержать раствор или суспензию действующего соединения. Капсулы и картриджи (изготовленные, например, из желатина) для применения в ингаляторе или инсуффляторе могут быть изготовлены так, чтобы они содержали порошковую смесь соединения и подходящую порошковую основу, такую как лактозу или крахмал. Для композиций, подходящих и/или предназначенных для ингаляционного введения, предпочтительно, чтобы соединение или соль формулы (I) находились в форме с уменьшенным размером частиц, при этом более предпочтительно форма с уменьшенным размером получена или может быть получена путем микронизации. Предпочтительный размер частиц соединения с уменьшенным размером частиц (например, микронизированного), соли или сольвата определяется значением D50 от приблизительно 0,5 до приблизительно 50 микрон (например, при измерении с помощью лазерной дифракции).
В альтернативе соединение согласно настоящему изобретению могут вводить в форме суппозитория или пессария, или его можно применять наружно в форме геля, гидрогеля, лосьона, раствора, крема, мази или присыпки. Соединение согласно настоящему изобретению также можно вводить дермально или трансдермально, например, с использованием кожного пластыря. Их также можно вводить легочным или ректальным путем. Его также можно вводить глазным путем. Для офтальмологического применения соединение может быть изготовлено в виде микронизированных суспензий в изотоническом, pH-отрегулированном стерильном физиологическом растворе или, предпочтительно, в виде растворов в изотоническом, pH-отрегулированном стерильном физиологическом растворе, необязательно в комбинации с консервантом, таким как хлорид бензалкония. В альтернативе оно может быть изготовлено в виде мази, такой как петролатум.
Для наружного применения на коже средство согласно настоящему изобретению может быть изготовлено в виде подходящей мази, содержащей действующее соединение, суспендированное или растворенное, например, в смеси с одним или более следующими компонентами: минеральное масло, вазелиновое масло, вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, соединение полиоксипропилена, эмульгирующий воск и вода. В альтернативе оно может быть изготовлено в виде подходящего лосьона или крема, суспендированного или растворенного, например, в смеси одного или более следующих компонентов: минеральное масло, сорбитан моностеарат, полиэтиленгликоль, вазелиновое масло, полисорбат 60, воск цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и вода.
Как правило, врач определяет фактическую дозу, которая будет наиболее подходящей для отдельного субъекта. Конкретный уровень дозы и частота введения доз для любого конкретного лица могут изменяться и будут зависеть от множества факторов, включающих активность конкретного применяемого соединения и продолжительность действия этого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, питание, способ и время приема, скорость выведения, комбинацию лекарственных средств, тяжесть конкретного состояния и пациента, проходящего терапию.
Вышеуказанное соединение могут вводить субъекту для применения при лечении заболеваний, связанных с каннабиноидами, в любой дозе, подходящей для получения терапевтического эффекта.
Для перорального и парентерального введения человеку ежедневный уровень дозы средства может содержаться в одной или дробных дозах.
Предложенный диапазон дозы соединения согласно настоящему изобретению для введения человеку (весом приблизительно 70 кг), составляет, включая, но без ограничения, от 1 мкг до 1000 мг, более типично от 1 мкг до 500 мг, более типично от 1 мкг до 100 мг, более типично от 1 мкг до 50 мг, более типично от 1 мкг до 10 мг, более типично от 1 мкг до 5 мг, более типично от 1 мкг до 1 мг, более типично от 1 мкг до 600 мкг, более типично от 1 мкг до 200 мкг, более типично от 1 мкг до 100 мкг, более типично от 1 мкг до 60 мкг, более типично от 10 мкг до 1000 мг, более типично от 10 мкг до 500 мг, более типично от 10 мкг до 100 мг, более типично от 10 мкг до 50 мг, более типично от 10 мкг до 10 мг, более типично от 10 мкг до 5 мг, более типично от 10 мкг до 1 мг, более типично от 10 мкг до 600 мкг, более типично от 10 мкг до 200 мкг, более типично от 10 мкг до 100 мкг, более типично от 20 мкг до 1000 мг, более типично от 20 мкг до 600 мг, более типично от 20 мкг до 200 мг, более типично от 20 мкг до 60 мг, более типично от 20 мкг до 20 мг, более типично от 20 мкг до 6 мг, более типично от 20 мкг до 2 мг, более типично от 20 мкг до 600 мкг, более типично от 20 мкг до 200 мкг действующего веществв на стандартную дозу, в расчете на вес свободной кислоты. Стандартную дозу могут вводить, например, 1-4 раза в день. Доза будет зависеть от пути введения. Следует понимать, что может потребоваться сделать обычные коррекции дозы в зависимости от возраста и веса пациента, а также тяжести состояния. Доза также будет зависеть от пути введения. Точную дозу и способ введения, в конечном счете, будет определять лечащий врач или ветеринар.
"Подходящая доза", "эффективное количество" соединения согласно изобретению относится к эффективному количеству, достаточному для предотвращения, уменьшения, устранения, контроля, лечения или ингибирования нарушения, связанного с каннабиноидами. Термин "контроль" предназначен для обозначения всех процессов, в которых может происходить замедление, прерывание, прекращение или остановка прогрессирования заболеваний и состояний, описанных в настоящем документе, но не обязательно указывает на полное устранение всех симптомов заболеваний и состояний. Дозы, используемые для введения, могут быть адаптированы в зависимости от различных параметров, в частности, в зависимости от используемого способа введения, соответствующей патологии или, альтернативно, от требуемой продолжительности лечения. Обычно форма фармацевтической композиции, путь введения, доза и схема применения зависят от состояния, подлежащего лечению, тяжести заболевания, возраста, веса и пола субъекта, и т.д. Диапазоны эффективной дозы, представленные ниже, не должны ограничивать изобретение и представляют собой предпочтительные диапазоны доз. Однако предпочтительная доза может быть скорректирована для отдельного субъекта, как это известно, и может быть определена специалистом в данной области, без излишних экспериментов.
Изобретение также относится к способу лечения нарушений, связанных с каннабиноидами, у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение эффективного количества соединения Формулы (I):
указанному пациенту.
Весь вариант осуществления, раскрытый выше, охвачен этим аспектом.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения Формулы (I):
для лечения нарушения, связанного с каннабиноидами.
Весь вариант осуществления, раскрытый выше, охвачен этим аспектом.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединения Формулы (I):
для производства фармацевтического препарата для лечения нарушения, связанного с каннабиноидами.
Весь вариант осуществления, раскрытый выше, охвачен этим аспектом.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Синтез, получение и изготовление состава 3
p
MBP
3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он (3pMBP) является химическим соединением, содержащим 7 хиральных центров 3S, 8S, 9S, 10R, 13S, 14S, 17S, как описано в Формуле (I):
Стереохимическая конфигурация в этих центрах идентична конфигурации исходного соединения, прегненолона.
Получение 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-она (3pMBP)
Получение 3pMBP описано на фигуре 1 и ниже
Стадия 1: Получение соединения Формулы (IV): (3S,8S,9S,10R,13S,14S,17S)-10,13-диметил-17-(2-метил-1,3-диоксолан-2-ил)-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-тетрадекагидро-1H-циклопента[a]фенантрен-3-ол
Стадию 1 проводили одной партией. Этиленгликоль (11,676 кг), прегненолон (6,992 кг) и пара-толуолсульфоновую кислоту (0,840 кг, 4,42 моль, 0,2 экв.) вносили в реактор. Реакционную смесь перемешивали при температуре от 15°C до 25°C в течение 25 мин. Триэтилортоформиат (20,939 кг) добавляли тремя порциями и перемешивали смесь в течение по меньшей мере 1 часа при температуре от 15°C до 25°C. После завершения реакции реакционную смесь собирали и медленно вливали в раствор бикарбоната натрия (2,943 кг в 35,5 л воды) при температуре от 0°C до 10°C. В конце добавления реакционную смесь перемешивали при температуре от 0°C до 10°C в течение 1 ч, после чего реакционную смесь фильтровали и промывали водой (12 л). Фильтрат также промывали 2-пропанолом (12 л) и сушили в вакууме в токе азота. Высушенное твердое вещество собирали и вносили в реактор с 2-пропанолом (35 л). Суспензию нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры от 0°C до 10°C, после чего перемешивали в течение 2 ч. Твердое вещество отфильтровывали и промывали 2-пропанолом (12 л), после чего сушили в вакууме в токе азота. Соединение Формулы (IV) (8,031 кг) получали с выходом 100,8% (некорректированный выход).
Стадия 2: Получение соединения Формулы (II): 2-(3S,8S,9S,10R,13S,14S,17S)-3-(4-метоксибензил)окси)-10,13-диметил-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-тетрадекагидро-1H-циклопента[a]фенантрен-17-ил)-2-метил-1,3-диоксолан
Соединение Формулы (IV) (3,460 кг) и тетрагидрофуран (ТГФ) (69 л) вносили в реактор. Реакционную смесь перемешивали при температуре от 20°C до 25°C в течение 80 минут. Реакционную смесь фильтровали и раствор соединения Формулы (IV) в ТГФ вводили в реактор. К раствору Соединения Формулы (IV) в ТГФ порциями добавляли t-BuOK (2,835 кг) при температуре от 20°C до 25°C. В конце добавления к реакционной смеси через капельную воронку добавляли пара-метоксибензилхлорид Формулы (III) (2,832 кг) и ТГФ (4 л). Реакционную смесь нагревали при температуре от 38°C до 42°C. В реакционную смесь порциями вводили TBAI (1,555 кг) при температуре от 38°C до 42°C. Реакционную смесь нагревали при температуре от 55°C до 60°C в течение 16 ч 30 мин.
После завершения реакции реакционную смесь выпаривали в вакууме с отгонкой от 34 л до 36 л ТГФ. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры.
В реактор вводили воду (52 л), затем охлаждали при температуре от 0°C до 10°C. Реакционную смесь осторожно вливали в воду при поддержании температуры от 0°C до 10°C. В конце добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч 50 мин при температуре от 0°C до 10°C. Реакционную смесь фильтровали и промывали водой (13 л). Фильтрат промывали ацетонитрилом (13,5 л) и твердое вещество сушили в вакууме в токе азота в течение 4 дней.
Твердое вещество собирали и вносили в реактор с ацетонитрилом (13 л). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч. Дополнительный ацетонитрил (11 л) вводили в реактор и нагревали с обратным холодильником до получения прозрачного раствора. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры от 0°C до 10°C, перемешивали в течение 45 минут при температуре от 0°C до 10°C и затем фильтровали. В реакторе вводили ацетонитрил (10,5 л), охлаждали до температуры от 0°C до 10°C, затем добавляли на фильтр для промывки фильтрата и сушили твердое вещество в вакууме в токе азота в течение 21 ч. Соединение Формулы (II) (2,449 кг) получали с выходом 59,2%.
Стадия 3: Получение соединения Формулы (I): 3
p
MBP
Соединение Формулы (II) (2,448 кг) и дихлорметан (10 л) вносили в реактор. Раствор перемешивали в течение 20 минут. В раствор добавляли 1М соляную кислоту (4,9 л) при температуре от 15°C до 25°C. Реакционную смесь перемешивали до завершения реакции при температуре от 15°C до 25°C. Дихлорметан (8 л) добавляли (до полного растворения осадка) и позволяли фазам разделиться. Органический слой два раза промывали водой (5 л). Органический слой собирали и вводили с 2-пропанолом (24,5 л) в реактор при температуре от 15°C до 25°C. Реакционную смесь выпаривали в вакууме при температуре ниже 40°C. После завершения реакции реакционную смесь нагревали с обратным холодильником. Добавляли 2-пропанол (40 л), пока раствор не становился прозрачным. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали при температуре от 0°C до 10°C, перемешивали в течение 1 ч при температуре от 0°C и 10°C. Твердое вещество отфильтровывали и промывали 2-пропанолом (5 л), затем сушили в вакууме в токе азота при нагревании фильтра при температуре от 35°C до 45°C в течение 20 ч. Соединение Формулы (I) (1,907 кг) получали с выходом 85,8%.
Фармацевтическая композиция
3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он может быть изготовлен в лекарственной форме в виде капсулы, содержащей раствор 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-она в кукурузном масле. Состав этой лекарственной формы описан в таблице 2.
В настоящем изобретении представлен пример изготовления мягких желатиновых капсул, содержащих соответственно 20 мкг, 0,2 мг и 2 мг раствора 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-она в кукурузном масле.
Этапы, составляющие процесс производства, могут быть кратко описаны следующим образом:
1. 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-он перемешивали в кукурузном масле до полного растворения.
2. Затем раствором 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-она этапа 1 наполняли мягкую желатиновую капсулу.
Все вспомогательные вещества соответствуют статьям Европейской фармакопеи (Ph. Eur.) и статьям Национального Формуляра фармакопеи США (USP-NF).
Таблица 2: Состав мягких желатиновых капсул 3-β(4-метоксибензилокси)прегн-5-ен-20-она | |||
Капсула 0,02 мг | Капсула 0,20 мг | Капсула 2,00 мг | |
3pMBP | 0,020 мг | 0,200 мг | 2,000 мг |
Кукурузное масло | 96,980 мг | 969,800 мг | 969,000 мг |
Диоксид титана | 1,04 мг | 5,29 мг | 5,29 мг |
Глицерин 85% | 21,61 мг | 134,77 мг | 134,77 мг |
Желатин, | 47,79 мг | 232,02 мг | 232,02 мг |
Общая масса | 167,44 мг | 1342,08 мг | 1342,08 мг |
Пример 2: Специфическое ингибирование активности рецептора CB1 под действием 3
p
MBP
Понимание действия соединения настоящего изобретения, 3pMBP, на активность рецептора CB1 исследовали путем изучения действия 3pMBP на следующие клеточные эффекты, вызванные активацией рецептора CB1 под действием ТГК. Специфичность действия 3pMBP на рецептор CB1 изучали путем анализа влияния этого соединения на связывание других 85 рецепторов.
Материалы и методы
Действие 3pMBP на ТГК-индуцированное повышение фосфорилирования MAPK:
Цель данного исследования состояла в оценке эффектов 3pMBP на повышение фосфорилирования Erk1/2MAPK, обычно называемой MAPK (митоген-активируемой протеинкиназы), вызванное введение ТГК в эмбриональные клетки почки человека 293 (HEK-293), стабильно или транзиентно трансфицированные человеческим рецептором CB1 (hCB1).
Клетки HEK-293 были выбраны, потому что они не экспрессируют эндогенные рецепторы CB1, они могут быть легко трансфицированы и ранее использовались в экспериментах по исследованию in vitro активности рецептора CB1 (Shore et al., 2014) и в экспериментах, демонстрирующих, что прегненолон способен ингибировать ТГК-индуцированное фосфорилирование MAPK (Vallee et al., 2014).
Исследовали действие 3pMBP в трех дозах (1 нМ, 10 нМ и 100 нМ, растворенных в ацетонитриле 0,01%) на эффект ТГК в количестве 1 мкМ (растворенный в EtOH 6.2e-4%, Эксперимент 1) и 10 мкм (растворенный в EtOH 6.2e-3%, Эксперимент 2) на фосфорилирование MAPK. Различие в концентрациях ТГК, используемых в двух экспериментах, связано с разной эффективностью трансфекции плазмиды кДНК hCB1, которая является стабильной в Эксперименте 1 и транзиентной в Эксперименте 2. Обработка ТГК и 3pMBP была параллельной и продложалась 5 мин.
Фосфорилирование MAPK (белки P-Erk1/2MAPK) измеряли с помощью Вестерн-блоттинга. В эксперименте 1 митохондриальный маркер CoxIV и в эксперименте 2 нефосфорилированные белки MAPK использовали в качестве контролей нанесения. Вычисляли отношения P-MAPK/CoxIV и P-MAPK/MAPK, данные приведены в % клеток, обработанных растворителем.
Влияние 3pMBP на ТГК-индуцированное снижение цАМФ
Цель данного исследования состояла в оценке эффектов 3pMBP на снижение цАМФ, вызванное введение ТГК в клетки яичников китайского хомячка (CHO), стабильно экспрессирующие человеческий рецептор CB1, CHO-hCB1.
Клетки CHO-hCB1 были выбраны в этих экспериментах, потому что они эндогенно не экспрессируют рецептор CB1 и ранее использовались в экспериментах по изучению действия агонистов CB1 (Rinaldi-Carmona, 1996), включая ТГК, на цАМФ и P-MAPK.
Исследовали действие 3pMBP в четырех дозах (1 нМ, 10 нМ, 100 нМ и 1 мкМ, растворенные в N, N-диметилформамиде 0,01%) против функциональной зависимости доза-эффект ТГК (0,3 нМ, 1 нМ, 3 нМ, 10 нМ, 30 нМ, 100 нМ и 300 нМ, растворенного в этаноле 0,0063%).
Клетки CHO-CB1-C2 обрабатывали путем параллельного добавления ТГК и тестируемого соединения в течение 45 минут. Форсколин (2,5 мкм) также одновременно добавляли во всех исследуемых условиях для поддержания базального уровня цАМФ. В конце обработки клетки лизировали для проведения количественного определения цАМФ. Все измерения проводили в тройной повторности в одном эксперименте.
Количественное определение цАМФ проводили с помощью конкурентного флуоресцентного иммуноанализа. Данные выражены в % Дельта флуоресценции (Дельта F), который вычисляли следующим образом: Дельта F % = (Флуоресценция образца - Флуоресценция отрицательного контроля)/Флуоресценция отрицательного контроля.
Влияние 3pMBP на ТГК-индуцированное уменьшение клеточного дыхания
Цель данного исследования состояла в исследовании действия 3pMBP на ингибирование клеточного дыхания, вызванное ТГК (1 мкМ) в клетках HEK-293, транзиентно трансфицированных человеческими рецепторами CB1 (hCB1).
Клетки HEK-293, транзиентно трансфицированные экспрессионной плазмидой hCB1, сначала обрабатывали 3pMBP (0, 1, 10 и 100 нМ, растворенные в ацетонитриле 0,01%). Через 15 мин инкубирования в чашки для культивирования добавляли ТГК (0, 1 мкМ, растворенный в EtOH 0,0034%) на 30 минут.
Клеточное дыхание измеряли на калиброванном респирометре, снабженном электродом Кларка. Скорость поглощения кислорода (ОС) использовали для измерения клеточного дыхания. Действие ТГК в отсутствие и в присутствии 3pMBP на скорость OC выражали в процентах от исходного уровня OC клетки, обработанной растворителем 3pMBP и растворителем ТГК в том же эксперименте. Было проведено 10 независимых экспериментов с получением n=10 на каждое условие эксперимента. Каждый эксперимент включал n=5, содержащие n=1 на экспериментальную группу.
Селективность связывания 3pMBP in vitro:
Данная серия анализов направлена на оценку специфичности связывания 3pMBP путем ее сравнения с профилем прегненолона.
Была протестирована потенциальная способность 3pMBP и прегненолона в концентрации 10 мкМ вытеснять связывание лигандов 85 рецепторов (высокопроизводительный профиль CEREP+4 стероидных рецептора+каннабиноидный рецептор 2 типа). Высокопроизводительный профиль CEREP состоит из 80 трансмембранных и растворимых рецепторов, ионных каналов и рецепторов, сопряженных с G-белком. Он был специально разработан для получения информации с целью определения приоритета наиболее перспективных соединений в процессе отбора потенциальных кандидатов. Рецепторы андрогенов, эстрогенов, прогестерона и PXR, а затем в этот анализ были добавлены каннабиноидные рецепторы 2 типа, чтобы лучше адаптировать анализ к 3pMBP, дополняя спектр стероидных рецепторов, уже содержащихся в высокопроизводительном профиле CEREP.
Результаты
3pMBP имеет профиль, подобный eCB1-SSi прегненолону. 3pMBP ингибирует ТГК-индуцированное повышение фосфорилирования MAPK (ФИГУРА 2A И 2B) и ТГК-индуцированное уменьшение клеточного дыхания (IC50=1,2-11 нМ) в клетках HEK-293, стабильно или транзиентно трансфицированных hCB1 (ФИГУРА 2D).
В отличие от этого 3pMBP не ингибировал ТГК-индуцированное снижение цАМФ в клетках CHO, стабильно экспрессирующих рецептор CB1 человека, CHO-hCB1 (ФИГУРА 2C).
Кроме того, 3pMBP (10 мкм) не изменял связывание ни одного из 85 рецепторов, протестированных in vitro с помощью высокопроизводительного профиля CEREP, включающего основные стероидные рецепторы, рецепторы PXR и рецепторы CB1 и CB2. В этом отношении 3pMBP было более селективным, чем прегненолон (10 мкМ), вытеснвший (>80%) связывание глюкокортикоидных, андрогеновых и прогестероновых рецепторов, и в меньшей степени (>40%) связывание центральных и периферических бензодиазепиновых рецепторов.
Эффекты 3pMBP представлены в приведенной ниже таблице:
Таблица 3: In vitro оценка механизма действия 3pMBP | ||||
Действие 3pMBP на: | Тест-система | ID50 | ID100 | % ингибирования |
ТГК-индуцированное повышение фосфорилирования MAPK в клетках, стабильно экспрессирующих hCB1 | HEK-293 | 1,2 нМ | 10 нМ | 60 |
ТГК-индуцированное повышение фосфорилирования MAPK в клетках, транзиентно экспрессирующих hCB1 | HEK-293 | 11 нМ | 100 нМ | 100 |
ТГК-индуцированное снижение цАМФ | CHO | >1 мкМ | -- | NA |
ТГК-индуцированное снижение клеточного дыхания | HEK-293 | 8 нМ | 100 нМ | 57 |
Высокопроизводительный профиль связывания CEREP (85 рецепторов) | Связывание рецепторов | >10 мкМ | -- | NA |
NA=Не исследовали, поскольку не обнаружили эффекта |
Выводы
Следовательно, 3pMBP in vitro действует как сигнально-специфический ингибитор CB1 (CB1-SSi). Таким образом, 3pMBP в линиях клеток, экспрессирующих человеческий рецептор CB1, (hCB1) ингибировал ТГК-индуцированное повышение фосфорилирования MAPK (митоген-активируемой протеинкиназы) и ТГК-индуцированное уменьшение клеточного дыхания. В отличие от этого, 3pMBP не ингибировал ТГК-индуцированное снижение цАМФ (циклического аденозинмонофосфата).
Кроме того, 3pMBP in vitro является более селективным, чем эндогенный сигнально-специфический ингибитор прегненолон. Фактически, прегненолон (10 мкМ) вытесняет связывание (>80%) прогестероновых, глюкокортикоидных и андрогеновых рецепторов, а также связывание бензодиазепиновых рецепторов (>40%). 3pMBP (10 мкМ) не изменял связывание этих рецепторов и ни одного из других рецепторов (в общей сложности 85), которые исследовали с помощью высокопроизводительного профиля CEREP.
Пример 3: Доклиническая оценка 3
p
MBP в качестве средства для лечения нарушений, связанных с каннабиноидами
В следующих доклинических исследованиях 3pMBP солюбилизировали в кукурузном масле, растительном масле с длинноцепочечными триглицеридами, которое можно безопасно использовать у человека. Этот липидный состав вводили перорально через зонд в виде жидкости.
Активация рецептора CB1 может вызывать связанные с каннабиноидами нарушения и связанные с ними нежелательные последствия за счет двух дополнительных эффектов:
1. Безусловные фармакодинамические эффекты каннабиноидов, которые включают глубокие когнитивные, мотивационные и поведенческие нарушения. Эти три эффекта могут синергически вызывать тяжелые последствия при различных типах нарушений, связанных с каннабиноидами. В частности, они ответственны за: a. Нарушение социальных отношений и снижение удовлетворенности жизнью; b. Более низкие результаты обучения, более низкий доход, более сильную зависимость от социального обеспечения и безработицу, особенно для наиболее уязвимой группы населения (14-25 лет); c. психические расстройства, включающие, без ограничения, депрессию, тревогу и психоз; и d. Сопротивление психологическому лечению;
2. Обусловленные эффекты каннабиноидов, приводящие к развитию поиска каннабиноидов, регулярному употреблению и, в конечном итоге, к зависимости от каннабиноидов. Способность каннабиноидов обусловливать поведение, которое приводит к зависимости от каннабиноидов, затрудняет прекращение употребления каннабиноидов и способствует рецидиву после периода отмены, что приводит к постоянному воздействию нежелательных эффектов каннабиноидов.
На основе предыдущих наблюдений идеальное фармакологическое лечение нарушений, связанных с каннабиноидами, должно быть способно:
1. Противодействовать широкому спектру безусловных эффектов каннабиноидов, чтобы уменьшить негативное воздействие от употребления каннабиноидов на функционирование головного мозга и поведение.
2. Облегчать уменьшение употребления и снижать возобновление употребления каннабиноидов после прекращения, чтобы уменьшить воздействия каннабиноидов на мозг и их негативные последствия.
Эти два комбинированных эффекта, создающие цепь положительной прямой связи (уменьшение эффектов каннабиноидов и уменьшение употребляемого количества каннабиноидов), должны обеспечивать мощное средство для лечения различных нарушений, связанных с каннабиноидами.
С учетом этих соображений доклиническая оценка потенциала 3pMBP для лечения нарушений, связанных с каннабиноидами, была выполнена путем изучения:
1. Нескольких поведенческих моделей, воспроизводящих безусловные эффекты агонистов CB1 у лиц, употребляющих каннабиноиды. В этих исследованиях использовали активное начало каннабиса, ТГК, поскольку это один из наиболее часто используемых каннабиноидов у человека.
2. Нескольких поведенческих моделей (на мышах и приматах кроме человека), оценивающих способность ТГК и синтетических каннабиноидов обусловливать поведение и вызвать зависимость.
1.
Ингибирование безусловных эффектов ТГК под действием 3
p
MBP
Исследовали ингибирование при пероральном введении 3pMBP описанных ниже безусловных поведенческих и нейрохимических эффектов ТГК, ассоциированных с нарушениями, связанными с каннабиноидами:
a. ТГК-индуцированное увеличение потребления пищи;
b. ТГК-индуцированное увеличение психомоторной стимуляции;
c. ТГК-индуцированное нарушение преимпульсного ингибирования;
d. ТГК-индуцированные нарушение памяти;
e. ТГК-индуцированное нарушение социального взаимодействия;
f. ТГК-индуцированное нарушение исследования реальности;
g. ТГК-индуцированная каталепсия;
h. ТГК-индуцированное поведение раскрывания рта;
i. ТГК-индуцированный выброс дофамина в прилежащем ядре.
a. ТГК-индуцированное увеличение потребления пищи
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP ингибировать увеличение потребления пищи, вызванное введением ТГК у мышей. Это поведение было выбрано, поскольку у лиц, употребляющих каннабис, наблюдается нарушение пищевого поведения со склонностью к гиперфагии и предпочтению приемлемой пищи сразу после употребления наркотического средства (Kirkham, 2005).
Материалы и методы
Влияние ТГК на потребление пищи изучали при использовании модели ограничения-возобновления кормления (Bellochio et al., 2010) у самцов мышей CB1f/f. Исследовали действие 3pMBP в трех дозах (5, 15 и 50 мкг/кг) на увеличение потребления пищи, вызванное ТГК (1 мг/кг; в/б) у мышей после 24-часового ограничения доступа к пище с возобновлением кормления через 30 минут после введения ТГК. Потребление пищи измеряли в течение одного часа. Независимые группы животных (по меньшей мере n=8 в группе) использовали для каждого условия лечения. 3pMBP вводили за три часа до введения ТГК.
Результаты
Как описано на Фигуре 3A, 3pMBP ингибирует (ID50≈15 и ID100≈50 мкг/кг) увеличение потребления пищи, вызванное ТГК (1 мг/кг) у мышей.
b. ТГК-индуцированное увеличение психомоторной стимуляции
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP ингибировать увеличение психомоторной стимуляции, вызванное введением ТГК у мышей. Это поведение было выбрано, поскольку его считают суррогатной моделью подобных психотическим симптомов, которые могут быть вызваны употреблением каннабиса (Wiley et al., 2008; DSM 5TH ed, 2013).
Материалы и методы
ТГК-индуцированную психомоторную стимуляцию изучали у самцов мышей C57BL/6N путем измерения двигательной активности в открытом поле с разделенном на квадраты полом. Передвижение оценивали через 45 минут после введения ТГК в течение 5 минут путем подсчета количества пересекаемых квадратов и выражали в процентах от контрольных животных, получавших растворитель.
Исследовали действие 3pMBP в пяти дозах (0,00015, 0,0005, 0,0015, 0,015 и 0,15 мг/кг) на увеличение двигательной активности, вызванное ТГК (0,3 мг/кг). Независимые группы животных (по меньшей мере n=9 в группе) использовали для каждой дозы 3pMBP. 3pMBP вводили за три часа до введения ТГК.
Результаты
3pMBP ингибирует (ID50≈0,0004 и ID100≈0,0015 мг/кг) психомоторную стимуляцию, вызванную ТГК (0,3 мг/кг) у мышей (Фигура 3B).
c. ТГК-индуцированное нарушение преимпульсного ингибирования
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP ингибировать нарушение фильтрации сенсорной информации, вызванное введением ТГК у мышей, изучаемое в анализе преимпульсного ингибирования (PPI). Это поведение было выбрано, поскольку оно представляет собой модель нарушения сенсомоторной фильтрации, наблюдаемого во время психоза (DSM 5th ed., 2013; Kedzior et al., 2006), который, как было показано, был вызыван ТГК (Nagai, 2006).
Материалы и методы
Исследовали действие 3pMBP в пяти дозах (0,0005, 0,0015, 0,015, 0,03 и 0,05 мг/кг) на нарушение PPI, вызванное ТГК (10 мг/кг) у самцов мышей C57BL/6N. 3pMBP вводили за три часа до введения ТГК.
PPI измеряли с помощью автоматизированных клеток PPI, которые позволяли автоматически вести протокол PPI и регистрацию реакций вздрагивания животного. Каждую мышь (по меньшей мере n=8 в группе) помещали в клетку для теста PPI через 60 минут после введения ТГК на 45 минут.
Тест PPI включал различные типы испытаний, состоящих либо в создании фонового шума, отдельного стимула, вызывающего испуг (S; 120 дБ), одного из подготовительных стимулов (73 дБ, 76 дБ или 82 дБ) отдельно или комбинации одного из каждого подготовительного стимула с последующим стимулом, вызывающим испуг (PPI-S). Реакцию вздрагивания после приложения импульса регистрировали и вычисляли индекс PPI (PPI%=100×(S-PPI-S)/S).
Результаты
3pMBP ингибирует (ID50≈0,005 и ID100≈0,015 мг/кг) нарушение преимпульсного ингибирования, вызванное ТГК (10 мг/кг) у мышей. На Фигуре 3C показано действие 3pMBP с предварительным импульсом 82 дБ.
d. Действие 3pMBP на ТГК-индуцированное нарушение памяти
В этих экспериментах изучали действие 3pMBP на нарушение, вызванное ТГК в двух тестах на запоминание: a. кратковременной памяти и b. долговременной памяти. Кратковременная память является способностью временно сохранять и обрабатывать информацию. Она требуется для выполнения повседневной деятельности, такой как поддержание беседы, рассуждение, понимание прочитанного. Дефицит кратковременной памяти является одним из основных когнитивных симптомов во время психоза, который не поддается улучшению при применении существующих антипсихотических средств (Pratt et al., 2012). Нарушение кратковременной памяти также является типичным последствием кратковременного употребления ТГК как у людей, так и у животных (D'Souza, 2007). Долговременная память является способностью хранить изученную информацию в компартементе стабильной памяти, позволяющей вспоминать ее долгое время после того, как произошло изучение. Нарушение долговременной памяти также является типичным эффектом при введении ТГК.
Материалы и методы
Нарушение кратковременной памяти, вызванное ТГК
У мышей кратковременную память можно оценивать в варианте водного лабиринта Морриса с отставленным выбором по соответствию месту, теста на пространственную память, в котором животные должны обрабатывать новую и ранее приобретенную информацию, чтобы найти местоположение скрытой платформы спасения.
У мышей однократное введение ТГК (5 мг/кг) ухудшает кратковременную память в данной задаче (Busquets-Garcia et al., 2017).
Установка состояла из белого круглого бассейна (диаметром 150 см и высотой 60 см), помещенного посреди экспериментальной комнаты с интенсивностью света от 90 до 100 люксов. Бассейн наполняли водой (19-21°C), сделанной непрозрачной при использовании нетоксичного белого косметического красителя без запаха. Белая платформа диаметром 14 см была скрыта на 1 см под поверхностью воды. Этот поведенческий тест состоял из трех фаз: привыкание, обучение и тестирование. Во время фазы привыкания животных один раз помещали в бассейн на 90 секунд, а затем отпускали на платформу на 30 секунд, чтобы они привыкли к условиям эксперимента и снизили уровень своего стресса во время обучения и тестирования. После привыкания мышей подвергали обучению. Изображения разных форм, размещенные на стенах комнаты, служили пространственными ориентирами. Каждая обучающая сессия (по одной в день) состояла из четырех попыток. При каждом испытании мышь помещали в воду лицом к стенке бассейна, а затем оставляли плавать, пока она не достигала скрытой платформы. Если мышь не достигала платформы в течение 90 секунд, ее направляли к ней. Затем мышь оставалась на платформе в течение 30 секунд (интервал между испытаниями). Стартовые положения были одинаковыми для первого и четвертого испытаний, но разные для остальных. Положение платформы меняли каждый день, так что при первом испытании в каждой сессии мышь всегда находила ее случайно. Обучающие сессии повторяли до тех пор, пока мыши не начинали демонстрировать значительное уменьшение времени, требуемого для нахождения платформы между первым испытанием и каждым из трех последующих испытаний в течение трех дней подряд. Обучение длилось от 8 до 12 дней. После обучения мыши получали фармакологические препараты, а затем выполняли одну тестовую сессию с использованием такого же протокола, что и в обучающих сессиях (т.е. 4 испытания с интервалами между испытаниями 30 секунд и остановкой испытания через 90 секунд).
Эффективность кратковременной памяти в обучающей сессии измеряли при вычислении коэффициента экономии времении с помощью следующей формулы: коэффициент экономии = (время до спасения в испытании 1 - время до спасения в испытании 4)/( время до спасения в испытании 1 + время до спасения в испытании 4).
Мышам вводили ТГК (5 мг/кг, в/б) или его растворитель за 30 минут до тестирования. 3pMBP (0,015; 0,15 или 0,45 мг/кг, внутрь через зонд) или его растворитель вводили за 3 часа до введения ТГК или его растворителя.
Нарушение долговременной памяти, вызванное ТГК.
У мышей долговременную память можно оценивать с помощью теста на распознавание объектов, в котором память об одном конкретном объекта оценивают через 24 ч. Для этого конкретного эксперимента самцы мышей CD1-SWISS получали однократное пероральное введение 3pMBP (0,005 мг/кг) или кукурузного масла (5 мл/кг, растворитель) с последующей внутрибрюшинной (в/б) инъекцией ТГК (6 мг/кг; 10 мл/кг) через 3 часа. За десять минут до инъекции ТГК мышам позволяли исследовать 2 идентичных объекта в "L"-образном лабиринте. На следующий день один объект заменяли новым. Согласно спонтанному предпочтению нового мыши исследуют более длинные новые объекты (Ennaceur, 2010). Сравнение времени, затраченного на исследование знакомых и новых объектов, используют в качестве индекса различения знакомого и нового. Поэтому данный параметр используют для оценки эффективности распознавания объектов.
Результаты
3pMBP полностью ингибирует ТГК-индуцированное нарушение распознавания объектов (Фигура 4B) при дозе 0,005 мг/кг с ID50, которая составила <0,005 мг/кг. Аналогично, 3pMBP, вводимый в дозе 0,015, 0,15 или 0,45 мг/кг дозозависимо блокирует нарушение эффективности кратковременной памяти, вызванное ТГК (5 мг/кг), с ID100 0,15 мг/кг (Фигура 4A).
e. Действие 3pMBP на ТГК-индуцированное нарушение социального взаимодействия
Социальная изоляция при психозе определяется как безразличие или отсутствие желания к социальному взаимодействию (Wilson and Koenig, 2014). Социальное взаимодействие можно оценивать у мышей, измеряя их спонтанное предпочтение встречи с сородичем по сравнению с избегание контакта. В этой парадигме однократное введение ТГК (3 мг/кг) снижает социальное предпочтение (Busquets-Garcia et al., 2017; Фигура 4C), обеспечивая надежную модель эндофенотипа социальной изоляции при психозе.
Материалы и методы
Мышей тестировали в открытом поле (35×35 см) с двумя пластмассовыми контейнерами (пластмассовыми цилиндрами диаметром 8 см с отверстиями для взаимодействия с запахами), помещенными в два противоположных угла, в один из которых помещали мышь (взрослого самца C57BL/6-N возрастом 8-10 недель), тогда как другой контейнер оставался пустым. В каждом углу определяли 'общественные' и 'обособленные' зоны в виде области 8 см, окружающей контейнеры. Для каждой экспериментальной группы положение контейнера с мышью уравновешивали. Экспериментальную мышь помещали в центр открытого поля для исследования на 5 минут и вели съемку камерой. Время, проведенное в обеих зонах, посчитывали, определяя, что животное находится в одной зоне, когда все его четыре лапы находились за проведенными линиями. Социальный индекс вычисляли следующим образом:
Социальный индекс=Время, проведенное в "общественной зоне"/Общее время, проведенное в обеих зонах.
Мышам вводили ТГК (3 мг/кг, в/б) или его растворитель за 2 часа до входа в открытое поле. 3pMBP (0,005; 0,015; 0,05 мг/кг, внутрь в кукурузном масле) или его растворитель вводили за 3 часа до ТГК или его растворителя.
Результаты
3pMBP, вводимый в дозе 0,005; 0,015 или 0,05 мг/кг, дозозависимо блокирует уменьшение социального взаимодействия, вызванное ТГК, с ID100 0,015 мг/кг (Фигура 4C).
f. ТГК-индуцированное нарушение тестирования реальности
Изменения в мысленном представлении стимулов, приводящие к несоответствию восприятия и реальности, являются ключевыми характеристиками позитивных симптомов психотических состояний (Busquets-Garcia et al., 2017). У грызунов задача "тестирования реальности" оценивает потенциальное несоответствие между внутренним представлением стимула (запаха или вкуса) и реальностью, которую они предсказывают.
Этот тест основан на парадигме обусловленного отвращения. Два стимула равной силы, обычно вкус и запах, сначала предъявляют одновременно повторяющимся образом (6 раз). Затем один из стимулов, например, запах, связывают с неприятным событием (например, с дискомфортом в желудке, вызванным LiCl). После кондиционирования мыши проявляют определенное отвращение к стимулу, связанному с неприятным событием (то есть к запаху), но не к нейтральному стимулу (то есть к вкусу), хотя запах и вкус ранее были представлены вместе. Эти реакции предполагают, что у мышей создаются определенные представления каждого из стимулов. Однако психодислептики, включая MK-801, амфетамин и ТГК, вызывают отвращение к обоим стимулам, включая тот, который не был обусловлен неприятным событием (опосредованное отвращение). Этот эффект указывает, что психодислептики вызывают неправильное представление о "нейтральном" стимуле. Эти изменения снимаются атипичным антипсихотическим средством рисперидоном (Busquets-Garcia et al., 2017). Таким образом, нарушение "тестирования реальности", вызванное ТГК, а также другими психодислептиками у мышей, показывает как очевидную, так и прогностическую достоверность для исследования положительных психотических симптомов.
Материалы и методы
Тестирование реальности состоит из четырех фаз с различными парами (пара означает одновременное объединение двух стимулов): привыкание (3 дня), предварительное кондиционирование (6 пар запах/вкус, 12 дней), кондиционирование (т.е. 3 пары запахов/введение средства, вызывающего дискомфорт (LiCl), 6 дней), день на восстановление (1 день с водой) и, наконец, тесты (тесты на опосредованное отвращение и прямое отвращение).
Мышам ограничивали доступ к воде на 24 часа перед началом привыкания, которое заключалось в доступе к воде в течение 1 часа в день в течение 3 дней, чтобы привыкнуть получать жидкость каждый день в течение 1 часа и, таким образом, достичь постоянного потребления в течение всего протокола. После этого следовала фаза предварительного кондиционирования, во время которой мышам давали 1-часовой доступ в день к смешанному раствору (O1T1) с одним запахом (миндаль или банан, O1) и одним вкусом (мальтодекстрин или сахароза, T1) в воде. В день 2 мыши получали 1-часовой доступ к раствору с запахом и вкусом, который не давали в предыдущий день (O2T2). После 6 пар O1T1 и O2T2 (12 дней) начинали фазу кондиционирования.
В первый день кондиционирования мышам давали 1-часовой доступ к воде с запахом (O1), сразу после внутрибрюшинной инъекции раствора хлорида натрия. На следующий день мышам давали доступ ко второй воде с запахом (O2), сразу после внутрибрюшинной инъекции LiCl (0,3М) в объеме 10 мл/кг для создания дискомфорта в желудке. После 3 пар O1/раствора хлорида натрия и O2/LiCl (6 дней) мышам давали день на восстановление с 1-часовым доступом к воде.
На следующий день опосредованное отвращение оценивали путем выполнения теста с двумя вариантами выбора с двумя бутылками воды, содержащими один из двух вкусов: вкус в сочетании с запахом, связанным с инъекцией LiCl (T2), называемый C+; или вкус в сочетании с другим запахом, который был связан с инъекцией раствора хлорида натрия (T1), называемый C-. В этом тесте появление опосредованного отвращения выражалось в уменьшении потребления воды, содержащей вкус в сочетании с запахом, который ранее был связан с LiCl (T2, C+), по сравнению с водой, содержащей другой вкус, связанный с запахом, который никогда не сочетался с LiCl (T1, C-). Результаты тестов выражали индексом отвращения следующим образом:
Индекс отвращения = (Потребление C- - Потребление C+)/Общее потребление
Мышам вводили ТГК (1 мг/кг, в/б) или его растворитель за 2 часа до теста с двумя вариантами выбора, оценивающего опосредованное отвращение. 3pMBP (0,015; 0,05 мг/кг, внутрь), или его растворитель вводили за 3 часа до ТГК или его растворителя.
Результаты
После инъекции раствора хлорида натрия животные не проявляли отвращения к вкусу, ранее связанному с запахом, который во время кондиционирования приобретал свойство ожидаемого дискомфорта, вызванного LiCl (Фигура 4D). Это - правильная интерпретация, поскольку вкус никогда не был непосредственно связан с вызывающим отвращение стимулом (инъекцией LiCl). С другой стороны ТГК вызывает отвращение к тому же вкусу, поведенческую реакцию, указывающую, что животное неправильно воспринимает внешние стимулы (Фигура 4D). Введение 3pMBP в дозе 0,015 или 0,05 мг/кг полностью предотвращает такое неверное восприятие, вызванное ТГК (1 мг/кг), с ID100 0,015 мг/кг (Фигура 4D).
g. ТГК-индуцированная каталепсия
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP ингибировать ТГК-индуцированную каталепсию у мышей. Каталепсию изучали, поскольку ее можно рассматривать как модель кататонического состояния, наблюдаемого у некоторых субъектов после употребления каннабиноидных препаратов (Khan et al., 2016).
Материалы и методы
Исследовали действие 3pMBP в четырех дозах (0,0015, 0,005, 0,015 или 0,05 мг/кг) в 5 мл/кг кукурузного масла) на каталепсию, вызванную ТГК (10 мг/кг в 10 мл/кг 0,9% NaCl, содержащего 2% этанола и 3% Tween80) у самцов мышей C57BL6/J (24,8±0,1 г, среднее ± SEM, на начало экспериментов), линии, которую обычно используют для этого типа теста (Vallee et al., 2014). ТГК вводили через 3 ч 00 мин после 3pMBP. Измерение каталепсии, вызванной ТГК, начинали через 30 минут после инъекции ТГК.
Каталепсию измеряли с помощью теста каталепсии с перекладиной. Передние лапы мышей помещали на перекладину, зафиксированную горизонтально на уровне 3,5 см от поверхности лабораторного стола. Регистрировали время задержки при перемещении с перекладины, с фиксированным временем остановки теста через 420 с (7 минут). Каждой мыши предоставляли максимум четыре последовательных попытки. Максимальное время задержки, показанное в одной попытке, выбирали в качестве показателя каталепсии.
Результаты
3pMBP ингибировал (на 50%) каталепсию, вызванную ТГК (10 мг/кг), с ID50≈0,005 и ID100≈0,05 мг/кг (Фигура 5A).
h. ТГК-индуцированное поведение обусловленного раскрывания рта
ТГК-индуцированное раскрывание рта использовали в настоящем документе в качестве модели синдрома каннабиноидного гиперемезиса. Таким образом, несмотря на то, что крысы неспособны к рвоте, они демонстрируют выраженные реакции обусловленного раскрывания рта во время ковторного контакта с запахом, ранее объединенным с рвотным средством. Такой устойчивый навык приобретается в одном испытании и с длительными перерывами (часы) между пробой нового запаха и введением рвотного средства. Обусловленные реакции раскрывания рта последовательно воспроизводят рвотными средствами и предотвращают противорвотными средствами, указывая, что они являются надежным показателем недомогания и тошноты, вызванной лекарственным средством.
Материалы и методы
Через три дня после операции канюлирования, крыс адаптировали к камере вкусовой реактивности. Крыс индивидуально помещали в камеру вкусовой реакции (TR), при этом их канюли подсоединяли к инфузионному насосу для вливания воды в их ротовую полость в течение 2 минут со скоростью 1 мл/мин, а затем возвращали в их домашнюю клетку. Крысы проходили первое из трех ежедневных испытаний для выработки условного рефлекса через три дня после адаптационного испытания. Крыс случайно распределяли по условиям предварительного лечения; 3pMBP 0,015 мг/кг (n=8), 3pMBP 0,005 мг/кг (n=8), растворитель 0 мг/кг (n=8). Крысы получали лекарственное средство для предварительного лечения за 3 часа до кондиционирования через зонд для искусственного питания. Затем их помещали в TR камеру и вливали 0,1% раствор сахарина в течение 2 минут со скоростью 1 мл/мин, при этом регистрировали орофациальные реакции. Сразу после инфузии сахарина крысам вводили (внутрь) 10 мг/кг ТГК или VEH и возвращали в их домашнюю клетку. Через двадцать четыре часа крыс подвергали тесту без лекарственного средства, в котором их помещали в TR камеру и вливали 0,1% раствор сахарина в течение 2 минут со скоростью 1 мл/мин, и регистрировали орофациальные реакции.
Результаты
При кондиционировании 10 мг/кг ТГК, крысы больше раскрывали рот во время контрольного испытания, чем во время испытания по выработке условного рефлекса. Как видно на Фигуре 5B, предварительная обработка обеими дозами 3pMBP (0,005 и 0,015 мг/кг) препятствовала установлению обусловленного раскрывания рта путем уменьшения среднего количества реакций раскрывания рта (различие между растворителем и 3pMBP 0,005 мг/кг, p=0,023, между растворителем и 3pMBP 0,015 мг/кг, p=0,029).
i. ТГК-индуцированный выброс дофамин в прилежащем ядре
В этих экспериментах стремились оценать способность 3pMBP ингибировать увеличение выброса дофамина (DA), вызванное ТГК в прилежащем ядре (Nac) свободно передвигающихся крыс, измереяемое методом микродиализа. Выброс DA в Nac изучали, поскольку его считают главной биологической основой аддиктивных свойств веществ, вызывающих привыкание, включая ТГК.
Материалы и методы
Исследовали действие 3pMBP в трех дозах (0,005, 0,015 или 0,05 мг/кг, внутрь) на увеличение выброса DA в Nac, вызванное ТГК (1 мг/кг) у самцов крыс Спрег-Доули. ТГК солюбилизировали в 0,9% NaCl, содержащем этанол (2%) и Tween80 (2%), который также использовали в качестве контрольного растворителя (VEHТГК), и вводили внутрибрюшинно в объеме 1 мл/кг.
Крысам (n=5-7 в группе) под анестезией имплантировали направляющую канюлю непосредственно над субрегионами оболочки правого Nac. В день фармакологического эксперимента (через 5-7 дней после операции) свободно передвигающиеся крысы получали одну из доз 3pMBP или VEH3pMBP, и зонд для микродиализа имплантировали в направляющую канюлю, которую затем перфузировали искусственной спинномозговой жидкостью. Диализаты собирали каждые 15 минут. Через 180 минут после начала перфузии всем животным вводили ТГК. Затем наблюдали отток DA в течение 120 минут. Концентрации DA в образцах диализата исследовали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), сопряженной с электрохимическим детектированием, как описано ранее (Leggio et al., 2009). Содержание DA в каждом образце выражали в процентах от среднего исходного уровня, вычисленного по трем фракциям, предшествующим введению ТГК. Площадь под кривой (AUC) вычисляли для каждой группы от времени забора проб 0 минут до 60 минут после инъекции ТГК.
Результаты
3pMBP ингибирует (ID50≈0,005 и ID100≈0,015 мг/кг) увеличение выброса дофамина в прилежащем ядре, вызванное 1 мг/кг ТГК у крыс (Фигуры 5C и 5D).
2.
Ингибирование под действием 3
p
MBP способности ТГК и агонистов CB1 формировать поведение и вызывать зависимость
Исследовали ингибирование при пероральном введении 3pMBP описанных ниже обусловленных фармакодинамических эффектов агонистов CB1 и ТГК:
a. Внутривенное самовведение агониста CB1 WIN 55,212-2;
b. Внутривенное самовведение ТГК и возобновление поиска ТГК.
a. Внутривенное самовведение агониста CB1 WIN 55,212-2
В этих экспериментах стремились оценить у мышей способность 3pMBP ингибировать подкрепляющие эффекты агониста CB1 WIN 55,212-2 (WIN), изучаемые с помощью теста внутривенного самовведения, который считают золотым стандартом для измерения подкрепляющих эффектов психоактивных средств.
Материалы и методы
Действие 3pMBP при внутривенном (в/в) самовведении измеряли у самцов мышей CD1-Swiss.
Перед началом сеансов самовведения мышам под анестезией в правую яремную вену имплантировали катетеры. Эксперименты по самовведению проводили через 3 дня после операции в оперантных камерах мышей, оборудованных одним "активным" и одним "неактивным" отверстиями. Когда животное помещало свой нос (просовывало нос) в активное отверстие, ему делали внутривенную инфузию WIN (12,5 мкг/кг). Мышей обучали по схеме подкрепления условного рефлекса с фиксированным соотношением 1 (FR1).
Двухчасовые ежедневные сеансы самовведения проводили 6 дней в неделю в течение 19 дней. Мыши получали растворитель кукурузное масло (2 мл/кг) перорально в день 9 и 10, чтобы они могли привыкнуть к процедуре введения через зонд. На 11 день мышей случайным образом распределяли в две группы (n=13 в группе), одна из которых получала 3pMBP, а другая - растворитель кукурузное масло за 3 часа до начала сеанса самовведения в течение 9 дней подряд. 3pMBP вводили в дозе 0,005 мг/кг в первые четыре дня и в дозе 0,015 мг/кг в остальные пять дней.
Результаты
3pMBP ингибирует (ID50≈0,005 и ID100≈0,015 мг/кг) внутривенное самовведение WIN 55,212-2 у мышей (Фигура 6).
b. Внутривенное самовведение ТГК и возобновление поиска ТГК у неотносящихся к человеку приматов
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP ингибировать подкрепляющие эффекты ТГК у неотносящегося к человеку примата (саймири), который является моделью золотого стандарта для изучения зависимости от каннабиса и рецидива у животных. Использовали две экспериментальных модели:
- ТГК-опосредованное внутривенное самовведение
- опосредованное ТГК-праймингом возобновление поиска ТГК
Эти две модели использовали, потому что они считаются лучшими моделями для измерения соответственно склонности лица к употреблению каннабиса и подверженности к рецидиву употребления каннабиса после периода отмены.
Материалы и методы
Для всех экспериментов 3pMBP вводили перорально в винограде в объеме 0,1 мл кукурузного масла за 4 ч до тестирования.
Использовали четыре самца саймири (Saimiri sciureus или обыкновенной беличьей обезьяны), потому что это - вид, у которого самовведение ТГК может быть изучено наиболее достоверно.
Обезьян обучали нажимать рычаг для получения внутривенной (в/в) инъекции ТГК (4 мкг/кг/инъекция) в соответствии со схемой с фиксированным отношением десять к одной инъекции психоактивного средства (FR10, каждый 10-й ответ на нажатие рычага производил инъекцию ТГК).
Регистрировали количество нажатий рычага и количество инъекций в каждой сессии. Процент ответа вычисляли на основе доступного времени сессии для ответа (т.е. вычитали время перерывов). Статистическую обработку выполняли для количества инъекций и процента ответа в каждой сессии с использованием однофакторного или двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями с дозой ТГК или временем в качестве факторов.
Обезьян, использованных в предыдущих экспериментах, подвергали ежедневным сеансам ослабления условной реакции, во время которых нажатие на рычаг приводило к инфузии растворителя, плюс визуальные сигналы, которые были ранее сопряжены с инфузиями ТГК, но без ТГК. После по меньшей мере двух сеансов ослабления, когда ответ достигал низкого уровня, определяли влияние предварительной обработки 3pMBP (0,0015, 0,005 и 0,015 мг/кг) или контрольного растворителя 3pMBP на индуцированное ТГК-праймингом (0,04 мг/кг в/в) возобновление поиска ТГК. Инициирующие инъекции ТГК делали непосредственно перед началом сеансов тестирования. Во время тестирования нажатие рычага (FR10) продолжало производить только инъекции растворителя и дискретные сигналы. Влияние 0,015 мг/кг 3pMBP на прайминг растворителем также тестировали для определения, будет ли 3pMBP в таком качестве влиять на ответ после ослабления условной реакции.
Результаты
3pMBP ингибирует (ID50≈0,005 и ID100≈0,015 мг/кг) внутривенное самовведение ТГК у неотносящихся к человеку приматов (саймири) (Фигура 7A и 7B). 3pMBP также ингибировал (ID100≤0,0015 мг/кг) возобновление поиска ТГК у неотносящихся к человеку приматов (саймири), индуцированное праймингом ТГК, но не оказывал никакого влияния на прайминг растворителем (Фигуры 7C и 7D).
Выводы
Результаты экспериментов по оценке влияния 3pMBP на обусловленные и безусловные эффекты ТГК представлены в таблице ниже (Таблица 4). В этой таблице четко показано, что 3pMBP является очень мощным ингибитором широкого спектра эффектов ТГК, связанных с несколькими нарушениями, которые появляются после употребления каннабиноидов. Следовательно, 3pMBP представляет в качестве средства для общего лечения нарушений, связанных с каннабиноидами.
Таблица 4: Результаты доклинической оценки 3pMBP в качестве средства для лечения нарушений, связанных с каннабиноидами | ||||
Тест-система |
ID50
(мг/кг) |
ID100
(мг/кг) |
% ингибирования | |
Безусловные эффекты ТГК | ||||
ТГК-индуцированное увеличение потребления пищи | мыши | 0,015 | 0,05 | 100 |
ТГК-индуцированное увеличение психомоторной стимуляции | мыши | 0,00036 | 0,0015 | 100 |
ТГК-индуцированное нарушение преимпульсного ингибирования | мыши | 0,0045 | 0,015 | 100 |
ТГК-индуцированное нарушение кратковременной памяти | мыши | ND | 0,15 | 100 |
ТГК-индуцированное нарушение долговременной памяти | мыши | <0,005 | ND | 100 |
ТГК-индуцированное нарушение социального взаимодействия | мыши | 0,005 | 0,015 | 100 |
ТГК-индуцированное нарушение тестирования реальности | мыши | <0,015 | ND | 100 |
ТГК-индуцированная каталепсия | мыши | 0,005 | 0,05 | 50 |
ТГК-индуцированное поведение раскрывания рта | крысы | <0,005 | ND | 50 |
ТГК-индуцированное нарушение выброса дофамина | крысы | 0,005 | 0,015 | 50 |
Обусловленные эффекты ТГК и WIN 55,212-2 | ||||
Внутривенное самовведение агониста CB1 WIN 55,212-2 | мыши | 0,005 | 0,015 | 80 |
Внутривенное самовведение ТГК | обезьяны | 0,005 | 0,015 | 80 |
Возобновление поиска ТГК | обезьяны | <0,0015 | ND | 80 |
ND=не определяли |
Пример 4: 3
p
MBP не имеет ни одного из поведенческих и эндокринологических побочных эффектов ортостерических антагонистов CB1
Сравнивали фармакологический профиль и влияние на фенотипы, связанные с побочными эффектами, 3pMBP и ортостерического антагониста CB1 римонабанта. Ортостерические антагонисты CB1, такие как Акомплиа®, были сняты с продажи из-за побочных эффектов. Следовательно, чтобы терапевтическое средство, ингибирующее CB1, имело практическое применение у человека, оно не должно иметь известных побочных эффектов ортостерических антагонистов CB1.
Известными побочными эффектами ортостерических антагонистов рецепторов CB1 и, в частности, римонабанта являются: 1. Снижение потребления пищи и массы тела, что является признаком неспецифического действия на пути подкрепления; 2. Индукция поведения, связанного с тревогой и депрессией; 3. Повышение секреции глюкокортикоидов, вызывающее нарушение гормонального статуса субъекта; 4. Индукция состояния отмены у субъектов, зависимых от каннабиноидов.
Затем авторы изобретения исследовали воздействие 3pMBP на все эти параметры.
1.
Влияние многократного лечения 3
p
MBP на потребление пищи и массу тела
В этих экспериментах стремились оценить способность многократного лечения 3pMBP снижать потребление пищи и массу тела в модели алиментарного ожирения (DIO) на мышах и сравнить эти эффекты с эффектами ортостерического антагониста CB1 римонабанта. Массу тела и потребление пищи изучали, поскольку они снижаются при многократном лечении ортостерическими антагонистами CB1 как у мышей, так и у людей (Wiley et al., 2005; Mazier et al., 2015; Bermudez-Silva FJ, et al., 2012). Использовали мышей DIO, потому что эффекты антагониста CB1 имеют более широкую амплитуду у мышей с ожирением, чем у тощих мышей.
Методы и материалы
Самцы мышей C57BL/6J получали без ограничения рацион с высоким содержанием жиров (HFD) в течение 8 недель до начала фармакологического лечения. Во время фармакологического лечения HFD сохраняли и ежедневно измеряли потребление пищи и массу тела. Количество потребляемой пищи вычисляли путем вычитания количества корма, оставшегося в бункерах, из первоначального предварительно взвешенного количества.
В первом эксперименте (n=10-7 в группе) исследовали действие 3pMBP (0, 0,005, 0,015 и 0,05 мг/кг; в 2 мл/кг кукурузного масла) в течение четырех недель. Во втором эксперименте (n=8 в группе) действие 3pMBP (0, 5 и 15 мг/кг в 5 мл/кг кукурузного масла) сравнивали с действием римонабанта (10 мг/кг в 5 мл/кг кукурузного масла) в течение двух недель лечения. 3pMBP и римонабант вводили перорально через зонд один раз в день, за два часа до начала темной фазы цикла света/темноты.
Результаты
3pMBP ни в одной из протестированных доз не изменял потребление пищи или массу тела в течение всей продолжительности эксперимента (четыре недели для 0,005, 0,015 и 0,05 мг/кг и две недели для 5 и 15 мг/кг). В отличие от этого, антагонист CB1 римонабант снижал и потребление пищи, и массу тела (Фигуры 8A и 8B).
2.
Влияние 3
p
MBP на развитие синдрома отмены
В этих экспериментах стремились оценить способность 3pMBP вызывать синдром отмены у мышей, длительно получавших ТГК. Вызванный синдром отмены изучали, поскольку он может составлять потенциальный побочный эффект ингибитора ТГК у субъектов с зависимостью от каннабиноидов. Например, ортостерический антагонист CB1 римонабант, как известно, вызывает синдром отмены у мышей, длительно получавших ТГК.
Материалы и методы
Схема долговременного приема ТГК (20 мг/кг, два раза в день), используемая в этих экспериментах, была выбрана потому, что она имитирует интенсивное употребление марихуаны (Cook et al., 1998) и рассматривается как модель зависимости от каннабиноидов у мышей (Cutando et al., 2013; Hutcheson et al., 1998).
Действие римонабанта (10 мг/кг) и 3pMBP (0,15 мг/кг) изучали в независимых экспериментах на мышах CD1-Swiss. С 1 по 4-5 дни мышам в/б вводили растворитель или ТГК (20 мг/кг в NaCl 0,9%, содержащем 2% этанола и 2% Tween80, 10 мл/кг) два раза в день. В последний день лечения мыши в группе ТГК получали римонабант или 3pMBP. Все остальные животные получали соответствующий растворитель. Данные анализировали в течение 45 минут сразу (римонабант) или через 3 часа (3pMBP) после введения. Доза и схема введения римонабанта, выбранные для этого исследования, обычно использовали, чтобы вызвать состояние отмены ТГК у мышей (Cook et al., 1998, Hutcheson et al., 1998, Huang et al., 2009).
Для измерения ускоренного наступления состояния отмены мышей помещали в новую домашнюю клетку, при этом видеокамера, расположенная перед каждой клеткой, записывала поведение животных. Оценку производили в течение 1 минуты каждые 5 мин. Исследовали два признака состояния отмены: тремор лап и потряхивание головой, поскольку они являются наиболее частыми признаками отмены ТГК, наблюдаемыми у мышей (Cook et al., 1998, Hutcheson et al., 1998, Lichtman et al., 2001).
Результаты
3pMBP не вызывал состояние отмены у мышей. Напротив, в тех же экспериментальных условиях признаки состояния отмены появлялись после введения ортостерического антагониста CB1 римонабанта (Фигуры 8C и 8D).
3.
Влияние многократного введения 3
p
MBP на связанное с тревогой и депрессией поведение у мышей
В этих экспериментах стремились оценить способность многократного лечения 3pMBP усиливать связанное с тревогой и депрессией поведение у мышей и сравнить эти потенциальные эффекты с действием ортостерического антагониста CB1 римонабанта. Связанное с тревогой и депрессией поведение изучали, потому что увеличение тревоги и депрессии является последствиями многократного лечения ортостерическими антагонистами CB1 и у грызунов, и у людей (Bellocchio et al., 2013, Patel et al., 2006, Moreira et al., 2009, Tzavara et al., 2003). Подобное тревоге поведение изучали в приподнятом крестообразном лабиринте (EPM), потому что эта модель широко используется у грызунов для оценки предполагаемого анксиогенного или анксиолитического действия фармакологических соединений (Walf et al., 2007). Связанное с депрессией поведение изучали с помощью теста на предпочтение сахарозы, который часто используют в качестве модели ангедонии, одного из кардинальных симптомов депрессии.
Материалы и методы
Установка EPM состояла из четырех приподнятых отсеков, расположенных крестообразно, при этом два противоположных отсека были окружены стенками, а два других отсека были открыты. Для всех экспериментов, после получения соответствующего лечения мышей помещали в центр EPM и позволяли исследовать лабиринт в течение 5 минут. Затраченное время и количество заходов в открытые и закрытые отсеки измеряли с помощью автоматической системы видеонаблюдения. Уменьшение процента посещений и/или времени, проведенного в открытых отсеках, считается показателем повышения уровня тревоги.
Тест на предпочтение сахарозы проводили в домашней клетке мышей. Две одинаковые бутылки, одна с водой, а другая с 2% раствором сахарозы, были помещены в бункер каждой домашней клетки. Мыши имели неограниченный доступ к воде и растворам сахарозы во время фазы активности, темной фазы цикла света/темноты, которая начиналась в 7 часов вечера. Объемы воды и растворов сахарозы, выпитых мышами, измеряли в течение двух интервалов по 1 ч 30, первый - с 19:00 до 20:30, и второй - с 20:30 до 22:00. В каждую точку времени бутылки взвешивали и вычисляли выпитый объем путем вычитания первоначального веса бутылки из конечного веса бутылки.
Самцы мышей C57BL/6J (n=6-8 в группе) получали либо одно ежедневное введение 3pMBP (0,05; 5 или 15 мг/кг), римонабанта (10 мг/кг) или соответствующих растворителей в течение 28 дней. В день 26 мышей подвергали тесту ЕРМ, а в день 28 - тесту на предпочтение сахарозы. Все поведенческие процедуры начинали через 3 часа после обработки 3pMBP или растворителем 3pMBP (0 мг/кг) и через 30 минут после обработки римонабантом или растворителем римонабанта (0 мг/кг).
Результаты
3pMBP не оказывал влияния на поведение, связанное с тревогой и депрессией, при измерении в тестах EPM (Фигуры 9A и 9B) и на предпочтение сахарозы (Фигура 9C), соответственно. В отличие от этого римонабант усиливал связанное тревогой и депрессией поведение, на что указывало уменьшение времени, проведенного в открытых отсеках EPM (Фигура 9A), и процента посещений открытых отсеков (Фигура 9B), а также снижение предпочтения сахарозы (Фигура 9D).
4.
Влияние 3
p
MBP на секрецию глюкокортикоидов у мышей
В этих экспериментах стремились оценить у мышей действие 3pMBP на концентрации в плазме кортикостерона, основного глюкокортикоида, вырабатываемого в надпочечниках у грызунов и соответствующего кортизолу у людей. Действие 3pMBP на уровни кортикостерона изучали, поскольку ортостерический антагонист CB1 римонабант повышает концентрацию кортикостерона в плазме (Steiner et al., 2008).
Материалы и методы
Действие 3pMBP (0.3 и 10 мг/кг) или растворителя (VEH) на уровни кортикостерона в плазме изучали у самцов и самок мышей CD-1 Swiss. Забор крови производили через 2, 5, 8 и 24 ч после введения дозы (n=3 каждого пола, на дозу и на момент забора пробы). Для забора крови мышам делали анестезию изофлураном и собирали кровь путем кардиальной пункции. Кровь центрифугировали, отбирали плазму и замораживали при -80°C до проведения количественного анализа кортикостерона с помощью ЖХ-МС/МС (газовой хроматографии-тандемной масс-спектрометрии) при использовании утвержденного метода ЖХ-МС, описанного в литературе (Vallee et al., 2014; Vallee et al., 2000; George et al., 2010).
Результаты
3pMBP в дозе 0,3 и 10 мг/кг не увеличивал секрецию глюкокортикоидов у самцов (Фигура 10A) и у самок (Фигура 10B) мышей.
Выводы
Нежелательный эффект римонабанта сравнивали с действием 3pMBP в таблице 5.
Таблица 5: 3pMBP не имеет ни одного из нежелательных эффектов римонабанта | |||||||
IN VIVO | ТЕСТ-СИСТЕМА | 3 p MBP | Римонабант | ||||
Эффект | Макс. тестируемая доза (мг/кг) | N раз IC50* | Эффект |
IC100
(мг/кг) |
N раз IC100** | ||
Ингибирование потребления пищи и массы тела (многократное введение) | самцы мышей | Нет | 15 | 3000 | Да | 10 | 1 |
Ускоренное состояние отмены у ТГК-зависимых мышей | самцы мышей | Нет | 0,15 | 30 | Да | 10 | 1 |
Увеличение связанного с тревогой и депрессией поведения (многократное введение) | самцы мышей | Нет | 15 | 3000 | Да | 10 | 1 |
Увеличение секреции глюкокортикоидов | самцы+самки мышей | Нет | 10 | 2000 | Да | 2 | 0,2# |
*=0,005 мг/кг наиболее часто наблюдаемая ID50 3pMBP для ингибирования поведенческих эффектов ТГК; | |||||||
**=Референсная ID100 для эффектов римонабанта =10 мг/кг. | |||||||
#=из Steiner et al., 2008 |
Действие 3pMBP сильно отличается от ортостерического антагониста CB1 римонабанта.
3pMBP не имеет ни одного из типичных нежелательных эффектов римонабанта и других ортостерических антагонистов CB1, таких как уменьшение потребления пищи, увеличение связанного с тревогой и депрессией поведения, ускоренного состояния отмены у ТГК-зависимых животных и увеличение секреции глюкокортикоидов.
Это отсутствие эффектов 3pMBP наблюдали для всех максимальных доз, используемых в каждом тесте. Эти дозы были в несколько раз выше (в мг/кг), чем ID50 (0,005 мг/кг) 3pMBP для ингибирования самовведения агонистов CB1 и ТГК, соответственно: в 30 раз выше для ускоренной отмены; В 2000 раз выше для секреции глюкокортикоидов; и в 3000 раз выше для потребления пищи, массы тела, связанного с тревогой и депрессией поведения.
Пример 5: 3 p MBP не оказывает никакого влияния на спонтанное поведение у мышей .
В дополнение к отсутствию таких же нежелательных поведенческих эффектов ортостерических антагонистов CB1, 3pMBP не оказывал никаких поддающихся обнаружению эффектов на поведение как таковое у грызунов, как показано с помощью видеоанализа спонтанного поведения в домашней клетке в течение 24 часов после введения 3pMBP у мышей в дозе 15 мг/кг.
Пример 6: 3 p MBP не оказывает никакого влияния на настроение и когнитивную эффективность у человека .
Эти эксперименты были разработаны для оценки действия однократной и повторных повышаемых доз 3pMBP на настроение, когнитивную функцию и суицидальные проявления у людей с использованием батареи валидированных тестов.
Материалы и методы
Проводили два исследования. В первом исследовании независимые когорты здоровых добровольцев получали однократное введение 3pMBP в одной из 3 повышаемых доз (0,2, 0,6; 2 мг/субъект) или плацебо. В каждой когорте дозы, с использованием двойной слепой процедуры, 6 субъектов получали назначенную дозу 3pMBP, и 2 субъекта получали плацебо. Во втором исследовании независимые когорты здоровых добровольцев получали многократные введения 0,6 мг/субъект 3pMBP (один раз в день в течение 7 дней). В каждой когорте дозы, с использованием двойной слепой процедуры, 6 субъектов получали назначенную дозу 3pMBP, и 2 субъекта получали плацебо. Доза 0,2 мг/субъект вызывает повышение концентраций 3pMBP в плазме, которые находятся в границах концентраций, наблюдаемых при наиболее часло наблюдаемой ED100 (0,015 мг/кг) для ингибирования поведенческих эффектов ТГК у грызунов.
В обоих исследованиях после введения дозы 3pMBP субъекты также подвергались общему наблюдению поведения, выполняемому сертифицированным медработником, и проводили следующие исследования.
Визуальная шкала Бонда и Ладера
Визуальная аналоговая шкала (VAS) Бонда и Ладера (Bond and Lader, 1974) состоит из 16 биполярных линий самооценки длиной 100 мм между двумя противоположными определениями. Тест выполняют с помощью компьютера. Субъект должен указать на каждой линии, как он чувствует себя во время теста, с помощью мышки. Ответ оценивают путем измерения расстояния в мм между левым концом линии и отметкой субъекта. Балл состоит из трех производных факторных подбаллов: внимательность, удовлетворение (благополучие) и спокойствие. Более высокий балл указывает на более высокую внимательность, удовлетворение и спокойствие.
ARCI 49
Этот самостоятельно заполняемый и выполняемый с помощью компьютера опросник состоит из 49 пунктов. Каждый вопрос появляется один за другим на экране. Используя мышь, субъект должен нажать "неверно" или "верно" для каждого пункта, относительно того, что он чувствует в то время, когда он читает вопрос. Затем получают 5 оценок: PCAG (оценка по шкале группы пентобарбитала-хлорпромазина-алкоголя), BG (группа бензедрина), AG (оценка по шкале группы амфетамина), LSD (оценка по шкале группы ЛСД) и MBG (оценка по шкале группы морфина-бензедрина) (Martin et al., 1971).
POMS 65
Шкала Профиля эмоционального состояния состоит из 65 определений, описывающих различные чувства настроения (Mc Nair et al., 1992; Cayrou et al., 2000; Cayrou et al., 2003).
Эта версия является компьютерной версией. Каждое определение появляется один за другим на экране, и субъекта просят описать, как эти определения отражают его настроение в то время, когда он заполняет опросник, оценивая каждое описание по 5-балльной шкале возрастающего согласия: от "нисколько" до "чрезвычайно".
При заполнении опросника классически получают шесть оценок: напряжение - тревога (TA); депрессия - уныние (DD); гнев - враждебность (АХ); энергичность - активность (VA); усталость - инертность (FI); дезориентация - растерянность (CB).
Шкала оценки тяжести суицидальных проявлений Колумбийского университета (C-SSRS)
Взаимосвязь между лекарственными средствами, проникающими в ЦНС, и возможностью суицидальных проявлений (суицидальных мыслей и поведения) недавно привлекла повышенное внимание регулирующих органов, таких как FDA, и вызвала необходимость упреждающего внедрения более последовательных и строгих механизмов сбора данных в клинических исследованиях.
Проспективную оценку суицидальных проявлений проводят с использованием Колумбийской шкалы оценки степени тяжести самоубийств (C-SSRS). C-SSRS разработана для оценки как суицидального поведения, так и суицидальных мыслей, и состоит из двух опросников: один предназначен для оценки исходного состояния (охватывает продолжительность жизни субъекта до посещения с целью оценки исходного состояния), а другой используется во время исследования (опросник "С момента последнего посещения").
Результаты
Ни для одной из протестированных доз 3pMBP не наблюдали никакого изменения общего поведения субъекта и никакого изменения ни одного из проведенных психометрических тестов. В частности, отсутствие изменений в тесте ARCI-49 указывает, что субъекты не могут сказать, что они получали психоактивное вещество.
В заключении следует отметить, что данные показывают, что у человека, как наблюдали и у животных, введение 3pMBP не вызывает значимых изменений исходного поведения, настроения и когнитивной эффективности.
Пример 7: Исследования фармакологической безопасности и токсикологические исследования 3
p
MBP в сравнении с римонабантом
1.
Оценка фармакологической безопасности 3
p
MBP стандарта GLP
Материалы и методы
Оценка действия 3pMBP на ток каналов hERG в стабильно трансфицированных клетках HEK-293:
Цель данного исследования состояла в оценке любых возможных эффектов 3pMBP на следовой ток hERG в стабильно трансфицированных клетках HEK-293. Исследование проводили согласно общим требованиям GLP, при этом схема исследования соответствовала рекомендациям ICH S7A (2001) для исследований безопасности лекарственных средств.
3pMBP исследовали в 3 клетках HEK-293, стабильно трансфицированных hERG. На каждой клетке тестировали следующее лечение: раствор Тироде; Растворитель 3pMBP (0,3% ДМСО в растворе Тироде) и 3pMBP в концентрации 10,98×10-8 M, 10,98×10-7 M и 3pMBP в концентрации 10,98×10-6 M.
E-4031 использовали в качестве положительного контроля и тестировали в одной отдельной клетке HEK-293 для подтверждения достоверности используемого метода.
Клетки фиксировали при -80 мВ, деполяризовали до 0 мВ в течение 5 секунд для активации тока hERG и повторно поляризовали до -50 мВ в течение 5 секунд, обеспечивая деактивацию следового тока hERG. Эту экспериментальную процедуру повторяли при частоте 0,06 Гц. Токи фильтровали при 1 кГц и регистрировали при частоте 2 кГц. Амплитуду следового тока hERG измеряли во время импульса реполяризации от 0 до -50 мВ. Клетки перфузировали раствором Тироде, а затем раствором Тироде, содержащим 3pMBP, в течение по меньшей мере 5 минут, пока в течение каждого периода перфузии не достигалось стационарное состояние. Ток измеряли до и после воздействия тестируемого препарата.
Влияние 3pMBP на тесты Ирвина и температуру тела у крыс:
Цель данного исследования состояла в оценке любых потенциальных нейроповеденческих эффектов и влияния 3pMBP на температуру тела после однократного перорального введения у крыс.
Исследование проводили согласно общим требованиям GLP, а схема исследования соответствовала директиве (2001) ICH S7A для исследований безопасности лекарственных средств.
Исследование включало 4 группы из 6 самцов крыс линии Вистар весом от 154,0 до 185,9 г. Группы получали дозы, соответственно, растворителя (кукурузного масла, т.е. контрольная группа) или 2, 9 или 36 мг/кг 3pMBP.
В день исследования животных сначала оценивали при использовании стандартизированной батареи наблюдения Ирвина и измеряли температуру тела. Затем им перорально вводили одну из доз 3pMBP или его растворитель в объеме 4 мл/кг. После этого оценки Ирвина, а также измерение температуры тела снова производили через 1, 3, 6, 8 и 24 часа после введения.
Оценка действия 3pMBP на дыхание у нефиксированной бодрствующей крысы после однократного перорального введения
Цель данного исследования состояла в оценке любого возможного действия однократного перорального введения 3pMBP на показатели дыхания (частоту дыхания, максимальные скорости вдоха и максимальные скорости выдоха, время вдоха и выдоха, индекс сопротивления дыхательных путей, дыхательный объем и минутную вентиляцию), измеренные с помощью метода плетизмографии всего тела у бодрствующих крыс.
Исследование проводили согласно общим требованиям GLP, а схема исследования соответствовала директиве (2001) ICH S7A для исследований безопасности лекарственных средств.
Исследование включало 4 группы из 6 самцов крыс линии Вистар, группы получали дозы, соответственно, растворителя (кукурузного масла, т.е. контрольная группа) или 2, 9 или 36 мг/кг 3pMBP.
За день до исследования животным позволяли пить только воду. В день исследования животных помещали в плетизмограф и сразу же начинали производить измерения. Метод плетизмографии всего тела позволяет измерять в закрытой камере изменения воздушного потока из-за движений грудной клетки во время дыхания и позволяет измерять показатели дыхания у бодрствующего животного, которое могло совершенно свободно перемещаться. По меньшей мере через 15 минут после начала измерений животным перорально вводили 3pMBP или его растворитель в объеме 4 мл/кг. Дыхание регистрировали в течение 6 часов после введения дозы. Показатели дыхания определяли на основе анализа дыхательных циклов.
Оценка действия 3pMBP на артериальное давление, частоту сердечных сокращений, электрокардиограмму и температуру тела после однократного перорального введения бодрствующим собакам
Цель данного исследования состояла в оценке любых возможных эффектов 3pMBP на артериальное давление, частоту сердечных сокращений, температуру тела и электрокардиограмму после однократного перорального введения бодрствующим собакам.
Исследование проводили согласно общим требованиям GLP, а схема исследования соответствовала директиве (2001) ICH S7A для исследований безопасности лекарственных средств.
Исследование включало 4 самца биглей, которым ранее были установлены телеметрические передатчики для измерений артериального давления, температуры тела и электрокардиограммы.
Исследование проводили в двух частях. В I части каждое животное получало растворитель (т.е. кукурузное масло), 3pMBP в дозе 2, 9 и 36 мг/кг перорально, согласно схеме введения повышаемых доз, с периодом выведения между дозами одна неделя. Телеметрические измерения артериального давления, частоты сердечных сокращений, температуры тела и электрокардиограммы (эпикардиальное отведение II) начинали по меньшей мере за 2 часа до введения каждой дозы и продолжали в течение по меньшей мере 24 часов после введения доз. Во II части животным снова перорально вводили 3pMBP в дозе 9 или 36 мг/кг (n=2 на уровень дозы) для дополнительных исследований, т.е. забора крови и наблюдения за животными.
Результаты
3pMBP не показал нежелательных эффектов в анализах фармакологической безопасности стандарта GLP:
1. In vitro, 3pMBP (100 нМ, 1 мкМ и 10 мкМ) не изменял следовой ток hERG (человеческий Ether-ago-go-родственный ген) в клетках HEK-293, стабильно трансфицированных кДНК hERG-1.
2. In vivo, 3pMBP (2, 9 и 36 мг/кг) не изменял: a. поведение (теста Ирвина) и температуру тела у крыс; b. дыхание у бодрствующих крыс; и c. артериальное давление, частоту сердечных сокращений, электрокардиограмму и температуру тела у бодрствующих собак.
Единственным отмеченным эффектом было уменьшение высокочастотных ритмов и колебаний сердечных сокращений, связанное с уменьшением вариабельности сердечного ритма при дозе 9 мг/кг только у собаки. Это открытие предполагает влияние на баланс вегетативной нервной системы и, более точно, снижение вагусной активности. Однако этот эффект был слабым, поскольку он не вызывал никаких изменений частоты сердечных сокращений и не может считаться нежелательным эффектом сам по себе.
2.
Токсикологическая оценка 3
p
MBP GLP
Материалы и методы
Цитотоксические, мутагенные и генотоксические эффекты 3pMBP исследовали до максимальных концентраций, приемлемых для тестируемых систем, т.е. от 74 до 100 мкМ.
Эти дозы приблизительно в 7400 и 10000 выше, чем максимальная IC50 3pMBP (10 нМ) для ингибирования CB1-опосредованных клеточных эффектов ТГК.
Токсикологические исследования, которые проводили in vitro с целью анализа 3pMBP, включали следующее: 1. Тест Эймса +/-метаболическую активацию (GLP); 2. Анализ хромосомных аберраций у человека +/- метаболическую активацию (GLP); 3. Цитотоксичность в первичной культуре нейронов и гепатоцитов (не GLP).
Исследования токсичности повторных доз проводили на крысах и собаках. Эти два вида были выбраны, потому что у обоих этих видов экспрессируется рецептор CB1, и их обычно успешно использовали для обнаружения токсического действия ортостерических антагонистов CB1, таких как римонабант. Кроме того, предполагаемый сайт связывания прегненолона обладает 100% гомологией у крыс, собак и людей. Наконец, исследования связывания с белками показывают, что связывание 3pMBP не отличается у крыс (84-94%), собак (84-105%) и людей (88-98%), тогда как у обезьян оно, по-видимому, выше (97-99%).
Повторные токсикологические исследования, проведенные с целью анализа 3pMBP, представляли собой 28-дневное исследование токсического действия при пероральном введении (GLP) у крыс и собак с тремя дозами (2 мг/кг, 9 мг/кг и 36 мг/кг).
Результаты
Исследования in vitro
3pMBP не показал цитотоксичности, генотоксичности и мутагенеза даже при наиболее высокой тестируемой концентрации (от 74 до 100 мкМ). Концентрации 74 и 100 мкМ 3pMBP в 7400-10000 раз выше, чем IC50 3pMBP для ингибирования CB1-зависимого фосфорилирования MAPK.
Исследования in vivo
Таблица 6: Результаты исследований токсического действия in vivo 3pMBP у крыс и собак | ||||
Токсикологическое исследование перорального введения многократных доз | ||||
Дни лечения | 28 | 28 | 28 | 28 (+14) |
Доза 3 p MBP (мг/кг) | 2 | 9 | 36 | 36 |
Растворитель кукурузное масло (мг/кг) | 4 | 4 | 4 | 4 |
Кол-во крыс | 10M, 10F | 10M, 10F | 10M, 10F | 10M, 10F |
Кол-во собак | 3M, 3F | 3M, 3F | 3M, 3F | 2M, 2F |
Смертность | NOE | NOE | NOE | NOE |
Клинические признаки | NOE | NOE | NOE | NOE |
Температура тела | NOE | NOE | NOE | NOE |
Масса тела | NOE | NOE | NOE | NOE |
Потребление пищи | NOE | NOE | NOE | NOE |
Офтальмология | NOE | NOE | NOE | NOE |
Сердечнососудистые показатели | NAR, NOED | NAR, NOED | NAR, NOED | NA |
Гематология и коагуляция | NOE | NOE | NOE | NOE |
Биохимический анализ крови | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED |
Анализ мочи | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED |
Масса органов | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED | NOAE R , NOED |
Макроскопические исследования | NOE | NOE | NOE | NOE |
Патогистология | NOE | NOE | NOE | NOE |
M=самцы; F=самки; NOE=не наблюдаемые эффекты; NOAE=не наблюдаемые нежелательные эффекты; NA=не исследовали; если не указано иное, эффекты наблюдали и у крыс, и у собак. NOAER и NOER=изменение, наблюдаемое только у крысы; NOAED и NOED=изменение, наблюдаемое только у собаки. |
In vivo, 3pMBP имеет у крысы NOAEL (уровень дозы без наблюдаемых нежелательных эффектов) >36 мг/кг/день/28 дней, и у собаки NOEL (уровень дозы без наблюдаемых эффектов) >36 мг/кг/день/28 дней.
С учетом того, что наиболее часто наблюдаемая ID50 3pMBP для ингибирования эффектов ТГК у мышей, крыс и не относящихся к человеку приматов составляет 0,005 мг/кг, 3pMBP имеет терапевтический индекс (ТИ) >7200.
Выводы
По результатам токсикологических экспериментов, 3pMBP показывает благоприятный профиль токсичности с ТИ>7200. Такой высокий ТИ может быть результатом двух характеристик 3pMBP:
1. Уникальный и очень селективный механизм действия (MoA), не обнаруженный у других одобренных лекарственных средств и, насколько известно, еще не проверенный в других доклинических исследованиях. Таким образом, 3pMBP, по-видимому, ингибирует только активность одного из индуцируемых ТГК сигнальных путей (MAPK) и не оказывает никакого действия на ТГК-независимые, CB1-опосредуемые фенотипы in vivo.
2. Низкое превращение в образующиеся из лекарственного средства метаболиты, которые очень часто являются причиной токсичности НХС in vivo.
Как показано в приведенной ниже таблице (Таблица 7) профиль безопасности и токсичности 3pMBP сильно отличался от профиля ортостерического антагониста CB1 римонабанта. Таким образом, римонабант вызвал несколько нежелательных явлений в дозах, очень близких к терапевтической дозе, и, в частности, клонические судороги, гепатотоксичность и несколько глубоких изменений поведения.
Таблица 7 Сравнение токсического действия 3pMBP и римонабанта в исследованиях GLP | ||||||
Токсичность в исследованиях GLP | Антагонист CB1 (Римонабант) | 3pMBP | ||||
Эффект | ED100 (мг/кг) | Индекс безопасности | Эффект | Максимальная протестированная доза (мг/кг) |
Индекс безопасности | |
Острая токсичность | (в/б) Грызун | (внутрь) Крыса | ||||
Клиническая токсичность: пролежени, прострация, сниженная активность, слабость, пилоэрекция, загрязнение урогенитальной области, выделения из носа | Да | 60 | 6 | Нет | 36 | >7200 |
Токсическое действие на ЦНС: двигательная гиперактивность, сопровождаемая седативным действием | Да | 3 | 0,3 | Нет | 36 | >7200 |
Клонические судороги | Да | 60 | 6 | Нет | 36 | >7200 |
Максимумальная нелетальная доза | Да | 60 | 6 | Нет | 36 | >7200 |
Токсичность повторных доз (внутрь) КРЫСА | ||||||
Клиническая токсичность: худоба, запекшаяся кровь на мордочке, припухлость вокруг глаз и красные выделения/ слезоточения из глаз, загрязнение урогенитальной области, пилоэрекция, обезвоживание, гипотония, потеря равновесия | Да | 6 (самки) 40 (самцы) | 0,6 (самки) 4 (самцы) |
Нет | 36 | >7200 |
Токсическое действие на ЦНС: Повышенная возбудимость: гиперестезия, тактильная гиперестезия или повышенная чувствительность к прикосновениям, чрезмерное почесывание, повышенная возбудимость, гиперактивность, гиперкинезия, агрессивность и атакующее поведение | Да | 30 | 3 | Нет | 36 | >7200 |
Клонические судороги | Да | 6 (самки) 40 (самцы) | 0,6 (самки) 4 (самцы) |
Нет | 36 | >7200 |
Гепатотоксичность: Очаговый гепатоцеллюлярный некроз, себорея, увеличение веса и размера печени, гипертрофия центрилобулярных гепатоцитов, имеющих цитоплазму с эффектом матового стекла, и гиперплазия гладкого эндоплазматического ретикулума. | Да | 40 | 4 | Нет | 36 | >7200 |
Смертность | Да | 60 (самки) 120 (самцы) | 6 (самки) 12 (самцы) |
Нет | 36 | >7200 |
Токсичность повторных доз (внутрь) собака | ||||||
Клинические признаки: гиперсаливация; дрожь, покраснение конъюнктив, атаксия, гипокинезия | Да | 10-15 | ND | Нет | 36 | ND |
Признаки со стороны ЦНС: агрессивность и прыжки при испуге | Да | 15 | ND | Нет | 36 | ND |
ND=Не определяли, индекс безопасности вычисляли для 10 мг/кг Римонабанта и 0,005 для 3pMBP |
Пример 8: Исследования фармакокинетики, всасывания, распределения, метаболизма и экскреции 3
p
MBP
1.
Фармакокинетика и всасывание 3
p
MBP у животных
Материалы и методы
Фармакокинетику (ФК) 3pMBP в плазме изучали у самцов и самок мышей, крыс и собак после введения внутрь (в кукурузном масле) через желудочный зонд. Распределение 3pMBP в головном мозге изучали у мышей и крыс. У собак 3pMBP также вводили внутривенно после солюбилизации в циклодекстрине. И в плазме, и в мозге концентрации 3pMBP измеряли с помощью жидкостной хроматографии, сопряженной с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ/МС-МС).
Результаты
Различий между самцами и самками по ФК параметрам 3pMBP в плазме после введения мышам (0,3, 4 и 10 мг/кг, внутрь), крысам (1,6 мг/кг, внутрь) и собакам (0,7 мг/кг, внутрь и в/в). Как описано в Таблице 8 (результаты для самцов и самок животных суммировали), увеличение AUC в плазме после однократного введения 3pMBP было линейным для трех доз, исследованных у мышей (0,3, 4 и 10 мг/кг). У мышей, крыс и собак tmax 3pMBP было аналогичным (≈3ч), что свидетельствует о сопоставимой скорости всасывания 3pMBP. Период полувыведения 3pMBP был самым длительным у собак (28,0 ч внутрь; 35,9 в/в), далее следовали мыши (17,8-18,3 ч), и самым коротким он был у крыс (8-13,9 ч). Отношения AUC/доза после перорального введения были выше у собак (2074), затем мышей (848-1132); и самое низкое - у крыс (661).
У мышей и крыс 3pMBP имел более длительный tmax (7 ч и ≈3 ч) и более высокие AUC и Cmax в мозге, чем в плазме. Отношение AUC и Cmax в мозге/плазме оказались обратно пропорциональными дозе, при этом самые высокие отношения (Cmax=2,8 и AUC=7,38) наблюдали для 0,3 мг/кг 3pMBP у мышей. Период полувыведения 3pMBP из мозга и плазмы был аналогичным.
После перорального или внутривенного введения 3pMBP мыши, крысы и собаки демонстрировали двухфазный профиль элиминации, быстрое снижение (фаза распределения) с последующим намного более медленным снижением до последнего момента забора проб (фаза элиминации).
У собак биодоступность 3pMBP составляла приблизительно 68%.
Таблица 8: Обобщенные средние фармакокинетические параметры в плазме мышей, крыс и собак после однократного введения 3pMBP | |||||||||
Вид | Введение |
Доза
мг/кг |
n |
C
max
(нг/мл) |
T max (ч) |
AUC
last
(нг/мл*ч) |
Отношение AUC/доза | Отношение AUC M/F |
T
1/2
(ч) |
Мыши | Внутрь | 0,3 | 6 | 35,5 | 2,5 | 254 | 848 | 1,1 | 17,8 |
4 | 6 | 490 | 2,25 | 3744 | 936 | 1,5 | 18,3 | ||
10 | 6 | 1787 | 2,25 | 11322 | 1132 | 0,9 | 18,2 | ||
Крысы | 1,6 | 9 | 116,4 | 4,1 | 1058,7 | 661,7 | 0,7 | 13,9 | |
Собаки | в/в | 0,7 | 6 | 505 | 0,125 | 2192 | 3131 | 1,28 | 35,9* |
внутрь | 0,7 | 6 | 137,7 | 2,67 | 1452,5 | 2074,5 | 0,93 | 28,0* |
Данные от самцов и самок были сложены. Значения Cmax и AUC, выделенные жирным шрифтом, следует умножить примерно на 4, чтобы компенсировать фактически введенную более низкую дозу.
*=t1/2 определено при использовании ручного метода линейной регрессии с выбором последних трех точек на каждой ФК кривой.
2.
Фармакокинетика 3
p
MBP у человека
Материалы и методы
В данном исследовании независимые когорты здоровых добровольцев получали однократное введение 3pMBP в одной из 3 повышаемых доз (0,2, 0,6; 2 мг/субъект) или плацебо. В каждой когорте дозы при использовании двойной слепой процедуры 6 субъектов получали назначенную дозу 3pMBP, и 2 субъекта получали плацебо.
Концентрации 3pMBP в плазме оценивали, проводя полный фармакокинетический анализ в течение первых 24 ч после введения дозы и каждые 24 ч после этого.
Результаты
Пероральное введение 3pMBP создавало концентрацию лекарственного средства в плазме, которая находилась в границах концентраций, предсказанных в ФК исследования на животных с использованием преобразования по отношению площади поверхности тела, подтверждая хорошее всасывание 3pMBP у людей. Доза 0,2 мг/субъект вызывала увеличение концентраций 3pMBP в плазме, которые находились в диапазоне концентраций, наблюдаемых при наибольшей наблюдаемой ED100 (0,015 мг/кг) для ингибирования поведенческих эффектов ТГК у грызунов.
3.
Метаболизм 3
p
MBP
Материалы и методы
Метаболическая стабильность 3pMBP в микросомах печени человека, крысы, мыши и собаки:
Исследование выполняли на микросомах печени (LM), полученных у мыши (MLM), крысы (RLM), собаки (DLM) и человека (HLM).
3pMBP инкубировали с пулами микросом печени с добавкой NADPH в качестве кофактора. Образцы отбирали в 5 разных точках времени (0, 10, 20, 30 и 60 минут) и контролировали образцы на предмет исчезновения исходного соединения в режиме MRM с помощью ЖХ/МС-МС. Определяли собственный клиренс и период полувыведения. Верапамил использовали в качестве референсного соединения.
Определение метаболического профиля [3H]-3pMBP в плазме и выделениях крыс
Метаболический профиль оценивали в плазме, моче и экскрементах, и изотопно-меченные метаболиты идентифицировали по их времени удерживания с помощью радио-ВЭЖХ анализа. Результаты выражали как % суммы площадей всех обнаруженных пиков.
Превращение 3pMBP в последующие стероиды у мышей, крыс, собак и людей:
Превращение 3pMBP в последующие стероиды изучали у мышей путем измерения образующихся из прегненолона стероидов, прогестерона и 17α,OH-прегненолона, которые являются первыми двумя стадиями метаболизма прегненолона. Превращение 3pMBP в последующие стероиды также изучали у крыс и собак после введения 2, 9 и 36 мг/кг соединения путем измерения тестостерона, ДГЭА и аллопрегнанолон. Наконец, превращение в последующие стероиды (ДГЭА, аллопрегнанолон и тестостерон) изучали у людей после однократного введения одной из трех доз (0,2, 0,6 и 2 мг/субъект) 3pMBP. Во всех этих исследованиях концентрации стероидов в плазме измеряли с помощью газовой хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (ЖХ/МС-МС).
Результаты
Метаболическая стабильность в микросомах печени (МП)
3pMBP имел низкий клиренс в МП человека и крысы (собственный клиренс=3,38 и 12,3 мкл/мин/мг; период полувыведения=410 и 113 мин, соответственно) и умеренный клиренс в МП собак и мышей (собственный клиренс=26,0 и 29,7 мкл/мин/мг и период полувыведения=53,4 и 46,6 мин, соответственно).
Метаболический профиль у крысы
In vivo, [3H]-3pMBP не образует основных метаболитов в плазме. Соединение экскретируется преимущественно с калом, где, по-видимому, происходит большая часть метаболизма. В плазме через три и шесть часов после перорального введения [3H]3pMBP, наблюдали только один основной пик, соответствующий 3pMBP, составлявший соответственно 100% (3 ч) и 78% (6 ч) от всех интегрированных пиков. Через 24 часа 3pMBP не присутствовал в плазме, при этом оставались только следовые количества одного метаболита. В моче обнаруживали небольшое количество 3pMBP (меньше чем 0,5% дозы) в каждый интервал времени. В 0-6-часовой интервал были обнаружены три основных пика (≈30% каждый), включая один пик, соответствующий 3pMBP. Через 6-24 ч и 24-48 ч 3pMBP не обнаруживался в моче, при этом присутствовали только два других пика. Большая часть экскретируемой дозы была обнаружена в кале, в котором, в дополнение к 3pMBP, были обнаружены семь других пиков, каждый из которых составлял от 30 до 10% интегрированных пиков.
Превращение 3pMBP в последующие стероиды
Введение 3pMBP в дозе 0,3 и 10 мг/кг внутрь не вызывало повышения в плазме концентраций прогестерона и 17-OH-прегненолона, продуктов первых двух стадий метаболизма прегненолона, при измерении у самцов и самок мышей через 2, 5, 8 или 24 часа после введения 3pMBP. Аналогичным образом, у самцов и самок крыс и собак не было обнаружено никакого влияния однократного или многократного (28 дней) введения 3pMBP (2, 9 и 36 мг/кг) на концентрации в плазме тестостерона, ДГЭА и аллопрегнанолона, при измерении до введения дозы, а затем через 1 ч, 2 ч, 4 ч, 8 ч и 24 ч после введения дозы. Наконец, никаких изменений активных стероидов у людей для всех протестированных доз 3pMBP не наблюдали.
4.
Взаимодействие 3
p
MBP с метаболическим ферментом CYP, UGT и клеточными белками-переносчиками
Материалы и методы
Потенциальное ингибирование под действием 3pMBP активности нескольких изозимов CYP (1А, 2B6, 2C8, 2C9, 2C19, 2D6, 3А) исследовали in vitro при использовании микросом печени человека.
3pMBP предварительно инкубировали в одной концентрации (10 мкМ) с субстратом и смешанными человеческими микросомами печени. Реакцию инициировали путем добавления образующих NADPH соединений, и после остановки реакции обрабатывали образцы; ВЭЖХ-УФ/вид и ВЭЖХ-МС/МС детектирование использовали для определения площади пиков, соответствующих метаболиту каждого субстрата.
3pMBP (10 мкМ) тестировали в анализе ингибирования UGT1A1 (рекомбинантный, субстрат скополетин). 3pMBP предварительно инкубировали с UGT1A1 и флуоресцентным субстратом скополетином в Трис-буфере (pH 7,5) в течение 15 минут при 37°C. Реакцию инициировали путем добавления кофактора уридин-дифосфатглюкуроновой кислоты (UDPGA), инкубирование продолжали в течение 60 минут, и относительную интенсивность флуоресценции (RFI) измеряли на флуоресцентном планшетном анализаторе.
Способность тестируемого соединения 3pMBP индуцировать CYP1A2, CYP2B6 и CYP3A4 исследовали in vitro в тройной повторности в тестируемых концентрациях 0,01, 0,1 и 1 мкМ с использованием уровня мРНК в качестве конечного результата.
Ингибирование под действием 3pMBP активности различных клеточных белков-переносчиков (OCT2, BCRP, OAT1, OAT3, OATP1B1, OATP1B3, P-gp) исследовали in vitro.
Действие 3pMBP (10 мкМ) и референсных ингибиторов каждого белка-переносчика изучали в клеточной линии с оверэкспрессией клеточных переносчиков-мишеней. Яичники китайского хомячка (CHO) использовали для всех белков-переносчиков за исключением P-gp, который исследовали в клетках почек собаки Мадина-Дарби (MDR1-MDCKII). Ингибирование активности каждого белка-переносчика оценивали путем измерения изменений транспорта их специфических субстратов с помощью флуорометрии.
Результаты
3pMBP в концентрации 10 мкМ не вызывал значимого ингибирования активности изозимов CYP (1А, 2B6, 2C8, 2C9, 2C19, 2D6, 3А) и при 10 нМ, 100 нМ и 1 мкМ не повышал экспрессию CYP1A2, CYP2B6 и CYP3A4.
Согласно руководству FDA, 3pMBP может быть маркирован как лекарственное средство, не взаимодействующее с ферментами CYP.
Кроме того, 3pMBP (10 мкМ) не изменял активность UGT1A1 и нескольких клеточных белков-переносчиков (OCT2, BCRP, OAT1, OAT3, OATP1B1, OATP1B3, P-gp).
Выводы
В целом 3pMBP демонстрирует благоприятные показатели всасывания/распределения/метаболизма/экскреции, которые не отличаются у самцов и самок и аналогичны у мышей, крыс, собак и людей, за исключением более длительного периода полувыведения и более высокой AUC у собак и людей, чем у двух других видов. 3pMBP также обладает хорошей биодоступностью (68% у собак).
3pMBP демонстрирует в четыре раза более высокую AUC в головном мозге, чем в плазме.
3pMBP также метаболически стабилен. Он не превращается в стероиды у мышей, крыс, собак и людей. Он показывает наиболее высокую стабильность in vitro в микросомах печени и гепатоцитах человека по сравнению с другими видами. У крыс in vivo 3pMBP не образует каких-либо метаболитов в количествах, превышающих следовые уровни в плазме, при этом большая часть соединения выводится в таком виде с калом.
Наконец, 3pMBP не ингибирует активность основных изоферментов CYP, UGT человека и клеточных переносчиков, а также не индуцирует экспрессию изоферментов CYP.
Adams AJ, Banister SD, Irizarry L, Trecki J, Schwartz M, Gerona R, "Zombie" Outbreak Caused by the Synthetic Cannabinoid AMB-FUBINACA in New York. N Engl J Med. 2017 Jan 19; 376(3):235-242
Bellocchio L, Lafenêtre P, Cannich A, Cota D, Puente N, Grandes P et al.Bimodal control of stimulated food intake by the endocannabinoid system. NatNeurosci 2010. 13, 281-283.
Bellocchio L, Soria-Gómez E, Quarta C, Metna-Laurent M, Cardinal P, Binder E, et al. Activation of the sympathetic nervous system mediates hypophagic and anxiety-like effects of CB1 receptor blockade. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Mar 19; 110(12):4786-91.
Bermudez-Silva FJ, Cardinal P, Cota D. The role of the endocannabinoid system in the neuroendocrine regulation of energy balance. J Psychopharmacol. 2012 Jan; 26(1):114-24.
Bond and Lader, Br. J. Med. Psychol. 1974; 47:211-218
Busquets-Garcia A, Soria-Gómez E, Redon B, Mackenbach Y, Vallée M, Chaouloff F, Varilh M, Ferreira G, Piazza PV, Marsicano G. Pregnenolone blocks cannabinoid-induced acute psychotic-like states in mice, 2017 Nov;22(11):1594-1603
Cayrou S., Dickès P. & Dolbeault S. Profile Of Mood States (POMS-f) Journal de Thérapie Comportementale et Cognitive, 2003, 13(2), 83-88.
Cayrou S., Dickès P., Gauvain-Piquard A., Dolbeault S., Callahan S. & Roge B. Validation de la traduction française du POMS (Profile Of Mood States). Psychologie et Psychométrie, 2000, 21(4), 5-22.
Cerdá M, Wall M, Keyes K.M, Galea S, and Hasin D. Medical marijuana laws in 50 states: investigating the relationship between state legalization of medical marijuana and marijuana use, abuse and dependence. Drug Alcohol Depend. 2012; 120, 22-27;
Cook SA, Lowe JA, Martin BR. CB1 receptor antagonist precipitates withdrawal in mice exposed to Delta9-tetrahydrocannabinol. J Pharmacol Exp Ther. 1998 Jun; 285(3):1150-6.
Cutando L, Busquets-Garcia A, Puighermanal E, Gomis-González M, Delgado-García JM, Gruart A, Maldonado R, Ozaita A. Microglial activation underlies cerebellar deficits produced by repeated cannabis exposure. J Clin Invest. 2013 Jul;123(7):2816-31.
D'Souza DC. Cannabinoids and psychosis. Int Rev Neurobiol. 2007 78:289-326.
DSM-V Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 5th Edition. 2013 Washington DC, USA: American Psychiatric Press.
Ennaceur A. One-trial object recognition in rats and mice: Methodological and theoretical issues. Behav Brain Res. 2010 Dec 31; 215(2):244-54
Galli J. A., Sawaya R. A., Friedenberg F. K. Cannabinoid hyperemesis syndrome. Current Drug Abuse Reviews. 2011; 4(4):241-249
EPAR (EMEA) discussion: http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Scientific_Discussion/human/000666/WC500021284.pdf
George O, Vallée M, Vitiello S, Le Moal M, Piazza PV, Mayo W. Low brain allopregnanolone levels mediate flattened circadian activity associated with memory impairments in aged rats. Biol Psychiatry. 2010 Nov 15; 68(10):956-63
Hall W, and Degenhardt L. Adverse health effects of non-medical cannabis use. Lancet 2009 374, 1383-1391.
Howlett AC, Barth F, Bonner TI, Cabral G, Casellas P, Devane WA, Felder CC, Herkenham M, Mackie K, Martin BR, Mechoulam R, Pertwee RG. International Union of Pharmacology. XXVII. Classification of cannabinoid receptors. Pharmacol Rev. 2002 Jun; 54(2):161-202.
Huang P, Liu-Chen LY, Unterwald EM, Cowan A. Hyperlocomotion and paw tremors are two highly quantifiable signs of SR141716-precipitated withdrawal from delta9-tetrahydrocannabinol in C57BL/6 mice. Neurosci Lett. 2009 Nov 6; 465(1):66-70.
Hutcheson DM, Tzavara ET, Smadja C, Valjent E, Roques BP, Hanoune J, Maldonado R. Behavioural and biochemical evidence for signs of abstinence in mice chronically treated with delta-9-tetrahydrocannabinol. Br J Pharmacol. 1998 Dec; 125(7):1567-77.
International Conference On Harmonisation Of Technical Requirements For Registration Of Pharmaceuticals For Human Use. The nonclinical evaluation of the potential for delayed ventricular repolarization (QT interval prolongation) by Human pharmaceuticals S7B. Revised Step.
Khan M, Pace L, Truong A, Gordon M, Moukaddam N, Catatonia secondary to synthetic cannabinoid use in two patients with no previous psychosis Am J Addict, 25 (1) (2016), pp. 25-27
Kedzior KK, Martin-Iverson MT. Chronic cannabis use is associated with attention-modulated reduction in prepulse inhibition of the startle reflex in healthy humans. J Psychopharmacol. 2006. 20:471-84.
Kirkham TC. Endocannabinoids in the regulation of appetite and body weight.Behav Pharmacol 2005.16, 297-313.
Lafaye G, Karila L, Blecha L, Benyamina A, Cannabis, cannabinoids, and health., Dialogues Clin Neurosci. 2017 Sep; 19(3):309-316.
Leggio GM, Cathala A, Neny M, Rouge-Pont F, Drago F, Piazza PV, Spampinato U. In vivo evidence that constitutive activity of serotonin2C receptors in the medial prefrontal cortex participates in the control of dopamine release in the rat nucleus accumbens: differential effects of inverse agonist versus antagonist. J Neurochem. 2009 Oct; 111(2):614-23
Lichtman AH, Fisher J, Martin BR. Precipitated cannabinoid withdrawal is reversed by Delta(9)-tetrahydrocannabinol or clonidine. Pharmacol Biochem Behav. 2001 May-Jun; 69(1-2):181-8.
Malinen H, Hyytiä P. Ethanol self-administration is regulated by CB1 receptors in the nucleus accumbens and ventral tegmental area in alcohol-preferring AA rats. Alcohol Clin Exp Res. 2008 Nov; 32(11):1976-83.
Martin WR, Sloan JW, Sapira JD and Jasinski DR. Physiologic, subjective, and behavioral effects of amphetamine, methamphetamine, ephedrine, phenmetrazine, and methylphenidate in man. Clin. Pharm. Ther. 1971 12:245-258, 1971.
Mazier W, Saucisse N, Gatta-Cherifi B, Cota D. The endocannabinoid system as pivotal orchestrator of obesity and metabolic disease. Trends Endocrinol Metab. 2015 Oct; 26(10):524-37.
McNair DM, Lorr M, Droppleman LF. Edits manual for the profile of mood states. San-Diego, California: Educational and industrial testing service, 1992.
Moreira FA, Grieb M, Lutz B. Central side-effects of therapies based on CB1 cannabinoid receptor agonists and antagonists: focus on anxiety and depression. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2009 Feb; 23(1):133-44.
Nagai H, Egashira N, Sano K, Ogata A, Mizuki A, Mishima K et al. Antipsychotics improve Delta9-tetrahydrocannabinol-induced impairment of the prepulse inhibition of the startle reflex in mice. Pharmacol Biochem Behav. 2006. 84: 330-6.
Patel S and Hillard CJ. Pharmacological evaluation of cannabinoid receptor ligands in a mouse model of anxiety: further evidence for an anxiolytic role for endogenous cannabinoid signaling. J Pharmacol Exp Ther. 2006 Jul 318(1):304-11.
Petit-Demouliere B, Chenu F, Bourin M. Forced swimming test in mice: a review of antidepressant activity. Psychopharmacology (Berl). 2005 Jan; 177(3):245-55.
Pratt J, Winchester C, Dawson N, Morris B Advancing schizophrenia drug discovery: optimizing rodent models to bridge the translational gap. Nat Rev Drug Discov. 2012 Jun 22; 11(7):560-79.
Rinaldi-Carmona M, Calandra B, Shire D, Bouaboula M, Oustric D, Barth F, Casellas P, Ferrara P, Le Fur G. Characterization of two cloned human CB1 cannabinoid receptor isoforms. J Pharmacol Exp Ther. 1996 Aug; 278(2):871-8.
S7A Safety Pharmacology Studies For Human Pharmaceuticals ICH July 2001
Sanchis-Segura C and Spanagel R. Behavioural Assessment of Drug Reinforcement and Addictive Features in Rodents: an Overview. Addict Biol 2006. 11:2-38.
Shore DM, Baillie GL, Hurst DH, Navas F, Seltzman HH, Marcu JP, et al. Allosteric modulation of a cannabinoid G protein-coupled receptor: binding site elucidation and relationship to G protein signaling. J Biol Chem. 2014 Feb 28; 289(9):5828-45.
Steiner MA, Marsicano G, Nestler EJ, Holsboer F, Lutz B, Wotjak CT. Antidepressant-like behavioral effects of impaired cannabinoid receptor type 1 signaling coincide with exaggerated corticosterone secretion in mice. Psychoneuroendocrinology. 2008 Jan; 33(1):54-67.
Substance Abuse and Mental Health Services Administration (2013). Results from the 2013 National Survey on Drug Use and Health: Summary of National Findings;
Substance Abuse and Mental Health Services Administration, Center for Behavioral Health Statistics and Quality. The DAWN Report: Highlights of the 2011 Drug Abuse Warning Network (DAWN) Findings on Drug-Related Emergency Department Visits. Rockville, MD: 2013. Feb 22
Tzavara ET, Davis RJ, Perry KW, Li X, Salhoff C, Bymaster FP, Witkin JM, Nomikos GG. The CB1 receptor antagonist SR141716A selectively increases monoaminergic neurotransmission in the medial prefrontal cortex: implications for therapeutic actions. Br J Pharmacol. 2003 Feb; 138(4):544-53.
Vallée M, Rivera JD, Koob GF, Purdy RH, Fitzgerald RL. Quantification of neurosteroids in rat plasma and brain following swim stress and allopregnanolone administration using negative chemical ionization gas chromatography/mass spectrometry. Anal Biochem. 2000 Dec 1; 287(1):153-66.
Vallée M, Vitiello S, Bellocchio L, Hébert-Chatelain E, Monlezun S, Martin-Garcia E, et al. Pregnenolone can protect the brain from cannabis intoxication. Science. 2014 Jan 3; 343(6166):94-8.
Volkow N.D, Baler R.D, Compton W.M, and Weiss S.R.B. Adverse health effects of marijuana use. N. Engl. J. Med. 2014 370, 2219-2227;
Walf AA and Frye CA. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat Protoc. 2007; 2(2):322-8.
Wiley JL, Burston JJ, Leggett DC, Alekseeva OO, Razdan RK, Mahadevan A, Martin BR. CB1 cannabinoid receptor-mediated modulation of food intake in mice. Br J Pharmacol. 2005 Jun; 145(3):293-300.
Wiley JL, Evans RL, Grainger DB, Nicholson KL. Age-dependent differences in sensitivity and sensitization to cannabinoids and 'club drugs' in male adolescent and adult rats. Addict Biol. 2008. 13, 277-86.
Wilson CA, Koenig JI. Social interaction and social withdrawal in rodents as readouts for investigating the negative symptoms of schizophrenia. Eur Neuropsychopharmacol. 2014; 24:759-773.
World Health Organization, The Health and Social Effects of Nonmedical Cannabis Use, 2016
Claims (20)
1. Применение соединения формулы (I):
формула (I)
для лечения нарушения, связанного с каннабиноидами.
2. Применение соединения по п. 1, где связанное с каннабиноидами нарушение выбирают из нарушения, связанного с употреблением каннабиноидов; отравления каннабиноидами; синдрома отмены каннабиноидов; другого вызванного каннабиноидами нарушения; неуточненного, связанного с каннабиноидами нарушения; синдрома каннабиноидного гиперемезиса; вызванной каннабиноидами кататонии.
3. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является нарушением, связанным с употреблением каннабиноидов.
4. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является отравлением каннабиноидами.
5. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является синдромом отмены каннабиноидов.
6. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является другим, вызванным каннабиноидами нарушением, выбранным из вызванного каннабиноидами тревожного расстройства, вызванного каннабиноидами психотического нарушения, вызванного каннабиноидами нарушения сна, каннабиноидного интоксикационного делирия.
7. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является неуточненным, связанным с каннабиноидами нарушением.
8. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является синдромом каннабиноидного гиперемезиса.
9. Применение соединения по п. 1 или 2, где связанное с каннабиноидами нарушение является вызванной каннабиноидами кататонией.
10. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где каннабиноиды получены из растения Cannabis L.
11. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где каннабиноиды являются синтетическими соединениями с активностью агониста CB1.
12. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят субъекту пероральным путем.
13. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят субъекту парентеральным путем.
14. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят субъекту внутривенным путем, или подкожным путем, или внутримышечным путем.
15. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят интраназально, или путем ингаляции, или подъязычно, или наружно, или трансдермально, или в форме суппозитория или пессария.
16. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят субъекту в дозе, составляющей от 1 мкг до 1000 мг.
17. Применение соединения по любому из предыдущих пунктов, где указанное соединение вводят в масляном растворителе, таком как растительное масло с длинноцепочечными триглицеридами и предпочтительно кукурузное масло.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP18305177.0 | 2018-02-20 | ||
EP18305177 | 2018-02-20 | ||
PCT/EP2019/054217 WO2019162328A1 (en) | 2018-02-20 | 2019-02-20 | 3beta-(4-methoxybenzyloxy)pregn-5-en-20-one for use in the treatment of cannabinoids-related disorders |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2020130586A RU2020130586A (ru) | 2022-03-22 |
RU2788004C2 true RU2788004C2 (ru) | 2023-01-16 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014083068A1 (en) * | 2012-11-28 | 2014-06-05 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | 3-(4'-substituted)-benzyl-ether derivatives of pregnenolone |
RU2593751C2 (ru) * | 2011-05-20 | 2016-08-10 | Энсэрм (Энститю Насьональ Де Ля Санте Э Де Ля Решерш Медикаль) | Антагонисты рецептора св1 |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2593751C2 (ru) * | 2011-05-20 | 2016-08-10 | Энсэрм (Энститю Насьональ Де Ля Санте Э Де Ля Решерш Медикаль) | Антагонисты рецептора св1 |
WO2014083068A1 (en) * | 2012-11-28 | 2014-06-05 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | 3-(4'-substituted)-benzyl-ether derivatives of pregnenolone |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Kalutharage N. & Yi C. S., Organic Letters, 17(7), 2015, рр.1778-1781. A. Busquets-Garcia et al, Molecular Psychiatry, 22(11), 2017, pp. 1594-1603. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Tylš et al. | Psilocybin–summary of knowledge and new perspectives | |
Schmid et al. | Acute effects of lysergic acid diethylamide in healthy subjects | |
Jevtovic-Todorovic et al. | The anesthetics nitrous oxide and ketamine are more neurotoxic to old than to young rat brain | |
Benowitz | Clinical pharmacology of nicotine: implications for understanding, preventing, and treating tobacco addiction | |
Staley et al. | Human tobacco smokers in early abstinence have higher levels of β2* nicotinic acetylcholine receptors than nonsmokers | |
Chi et al. | Mecamylamine attenuates the subjective stimulant‐like effects of alcohol in social drinkers | |
King et al. | Hypothalamic-pituitary-adrenocortical (HPA) axis response and biotransformation of oral naltrexone: preliminary examination of relationship to family history of alcoholism | |
US20080255097A1 (en) | Methods for the Treatment of Substance Abuse and Dependence | |
Tomaselli et al. | Stress and drug abuse-related disorders: The promising therapeutic value of neurosteroids focus on pregnenolone-progesterone-allopregnanolone pathway | |
Portugal et al. | Bupropion dose-dependently reverses nicotine withdrawal deficits in contextual fear conditioning | |
Barrett et al. | The role of dopamine in alcohol self-administration in humans: individual differences | |
Haney et al. | Signaling-specific inhibition of the CB1 receptor for cannabis use disorder: phase 1 and phase 2a randomized trials | |
Greene | Tryptamines | |
Dodd et al. | Psilocybin in neuropsychiatry: a review of its pharmacology, safety, and efficacy | |
Marusich et al. | Tobacco's minor alkaloids: Effects on place conditioning and nucleus accumbens dopamine release in adult and adolescent rats | |
Warren et al. | Influence of tramadol on the ventilatory response to hypoxia in humans | |
RU2788004C2 (ru) | 3-β(4-МЕТОКСИБЕНЗИЛОКСИ)ПРЕГН-5-ЕН-20-ОН ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ НАРУШЕНИЙ, СВЯЗАННЫХ С УПОТРЕБЛЕНИЕМ КАННАБИНОИДОВ | |
CN101495121A (zh) | 用于治疗物质滥用和物质依赖的方法 | |
EP3755339B1 (en) | 3-beta-(4-methoxybenzyloxy)pregn-5-en-20-one for use in the treatment of cannabinoids-related disorders | |
O'Brien et al. | Routes of administration, pharmacokinetics and safety of medicinal cannabis | |
Uchiumi et al. | Serotonergic involvement in the amelioration of behavioral abnormalities in dopamine transporter knockout mice by nicotine | |
Mojica et al. | Nicotine modulation of adolescent dopamine receptor signaling and hypothalamic peptide response | |
Benturquia et al. | Is the 3, 4-methylendioxypyrovalerone/mephedrone combination responsible for enhanced stimulant effects? A rat study with investigation of the effect/concentration relationships | |
Malkesman et al. | Dehydroepiandrosterone in the nucleus accumbens is associated with early onset of depressive-behavior: a study in an animal model of childhood depression | |
Ghitza et al. | Serotonergic responsiveness in human cocaine users |