RU2783685C2 - Анти-pd-l1 антитело и его применение - Google Patents
Анти-pd-l1 антитело и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2783685C2 RU2783685C2 RU2021108266A RU2021108266A RU2783685C2 RU 2783685 C2 RU2783685 C2 RU 2783685C2 RU 2021108266 A RU2021108266 A RU 2021108266A RU 2021108266 A RU2021108266 A RU 2021108266A RU 2783685 C2 RU2783685 C2 RU 2783685C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- cancer
- seq
- amino acid
- variable region
- Prior art date
Links
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 title claims abstract description 142
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 title claims abstract description 142
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 70
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 44
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 44
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 44
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 32
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 25
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims abstract description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 101710012053 CD274 Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102100007290 CD274 Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 claims abstract description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 72
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 67
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 23
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims description 20
- 208000002154 Non-Small-Cell Lung Carcinoma Diseases 0.000 claims description 17
- 108009000071 Non-small cell lung cancer Proteins 0.000 claims description 16
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 claims description 15
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 claims description 15
- 206010017758 Gastric cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 10
- 108091006028 chimera Proteins 0.000 claims description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 7
- 201000011231 colorectal cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 231100000765 Toxin Toxicity 0.000 claims description 6
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 claims description 6
- 108091008116 antibody drug conjugates Proteins 0.000 claims description 6
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 claims description 6
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 claims description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 6
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 6
- 108020003112 toxins Proteins 0.000 claims description 6
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 5
- 206010025650 Malignant melanoma Diseases 0.000 claims description 5
- 208000002030 Merkel Cell Carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 206010029266 Neuroendocrine carcinoma of the skin Diseases 0.000 claims description 5
- 208000008443 Pancreatic Carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 5
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000009377 thymus cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 230000003915 cell function Effects 0.000 claims description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 3
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2S)-2-[[(2R,3R)-3-methoxy-3-[(2S)-1-[(3R,4S,5S)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2S)-3-methyl-2-[[(2S)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 claims description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N ADRIAMYCIN Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 2
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N Calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 claims description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 claims description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 2
- 229960004679 Doxorubicin Drugs 0.000 claims description 2
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N Duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 claims description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 2
- 229940047122 Interleukins Drugs 0.000 claims description 2
- DASWEROEPLKSEI-UIJRFTGLSA-N Monomethyl auristatin E Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 DASWEROEPLKSEI-UIJRFTGLSA-N 0.000 claims description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 2
- 102000003390 Tumor Necrosis Factors Human genes 0.000 claims description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factors Proteins 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating Effects 0.000 claims description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 2
- 210000004962 mammalian cells Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 102100002977 CDR1 Human genes 0.000 claims 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 41
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 41
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 28
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 21
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 21
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 20
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 17
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 16
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 15
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 14
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 12
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 12
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 12
- 206010061289 Metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 11
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 11
- BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N Val-His Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 11
- 230000001394 metastastic Effects 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 10
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 10
- 108010072668 atezolizumab Proteins 0.000 description 10
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Arginine Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Serine Chemical compound OCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N Asp-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 7
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 7
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 7
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 7
- MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 7
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 7
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 7
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 7
- 102100019451 CD80 Human genes 0.000 description 6
- 101700080477 CD80 Proteins 0.000 description 6
- XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N 0.000 description 6
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 6
- RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N L-prolylglycine Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 RNKSNIBMTUYWSH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 6
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfizole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 6
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 6
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 6
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 6
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 6
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N Glu-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 5
- JZOYFBPIEHCDFV-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Histidine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 JZOYFBPIEHCDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FBTYOQIYBULKEH-ZFWWWQNUSA-N His-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 FBTYOQIYBULKEH-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 5
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 5
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 5
- ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 5
- ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO ILVGMCVCQBJPSH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 5
- CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 5
- STTYIMSDIYISRG-WDSKDSINSA-N Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O STTYIMSDIYISRG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 5
- GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N Valyl-Threonine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 5
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 5
- NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 4
- RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Asparagine Chemical compound NC(N)=NCCCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RGGVDKVXLBOLNS-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CC(N)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 RGGVDKVXLBOLNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N BNC210 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N 0.000 description 4
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 4
- JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 4
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 4
- YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN YQAIUOWPSUOINN-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N Ser-Pro Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WBAXJMCUFIXCNI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- CUTPSEKWUPZFLV-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Cysteine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O CUTPSEKWUPZFLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 4
- -1 expression vector Substances 0.000 description 4
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 4
- STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N gly-val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 4
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 4
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N p-acetaminophenol Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 4
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 4
- NJMYZEJORPYOTO-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Proline Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O NJMYZEJORPYOTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(4-amino-1-carboxy-4-oxobutyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229950002916 Avelumab Drugs 0.000 description 3
- 102100005310 CTLA4 Human genes 0.000 description 3
- 101700054183 CTLA4 Proteins 0.000 description 3
- 229950009791 Durvalumab Drugs 0.000 description 3
- JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N Gln-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JEFZIKRIDLHOIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 108010064750 Humanized Monoclonal Antibodies Proteins 0.000 description 3
- 102000015434 Humanized Monoclonal Antibodies Human genes 0.000 description 3
- TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N Lysyl-Asparagine Chemical compound NCCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OGGRSJFVXREKOR-CIUDSAMLSA-N Met-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC OGGRSJFVXREKOR-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 102100019764 PDCD1 Human genes 0.000 description 3
- HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 108060007796 SPATA2 Proteins 0.000 description 3
- LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N Ser-Asn Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AUEJLPRZGVVDNU-STQMWFEESA-N Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AUEJLPRZGVVDNU-STQMWFEESA-N 0.000 description 3
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N Val-Tyr Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VEYJKJORLPYVLO-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 3
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 3
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 108010010826 avelumab Proteins 0.000 description 3
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 3
- 108010016436 durvalumab Proteins 0.000 description 3
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 3
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 3
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 3
- 108010044655 lysylproline Proteins 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 3
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 108010033670 threonyl-aspartyl-tyrosine Proteins 0.000 description 3
- LXZZYRPGZAFOLE-UHFFFAOYSA-L transplatin Chemical compound [H][N]([H])([H])[Pt](Cl)(Cl)[N]([H])([H])[H] LXZZYRPGZAFOLE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N val-gly Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NCC(O)=O IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N α-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 3
- ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N (2S)-1-[(2S)-1-[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- YRJOLUDFVAUXLI-GSSVUCPTSA-N (2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O YRJOLUDFVAUXLI-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 2
- LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N (2S)-5-amino-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-4-carboxybutanoyl)amino]-3-methylpentanoic acid Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NAXPHWZXEXNDIW-JTQLQIEISA-N 0.000 description 2
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N Arg-Gln Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N Asn-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N Asn-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N Asn-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N Asp-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTQDELBZOMWXRS-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003719 B-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 2
- 102100019461 CD28 Human genes 0.000 description 2
- 101700033362 CD28 Proteins 0.000 description 2
- HAYVTMHUNMMXCV-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C(N)CS HAYVTMHUNMMXCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGTVXXNMOGHRAY-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Arginine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N RGTVXXNMOGHRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YHDXIZKDOIWPBW-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Glutamine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(N)=O YHDXIZKDOIWPBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009058 Death Domain Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010049207 Death Domain Receptors Proteins 0.000 description 2
- 210000004443 Dendritic Cells Anatomy 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 230000035693 Fab Effects 0.000 description 2
- OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N Gln-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LLEUXCDZPQOJMY-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 2
- ARPVSMCNIDAQBO-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O ARPVSMCNIDAQBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHLZDSUANXBJHW-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Phenylalanine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 VHLZDSUANXBJHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N Gly-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N His-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N Imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Threonine Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N L-lysyl-L-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 210000002540 Macrophages Anatomy 0.000 description 2
- 210000000138 Mast Cells Anatomy 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101710011976 PDCD1LG2 Proteins 0.000 description 2
- 102100007289 PDCD1LG2 Human genes 0.000 description 2
- FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N Ser-Asp Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VBKBDLMWICBSCY-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)=CNC2=C1 LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 2
- UBAQSAUDKMIEQZ-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 UBAQSAUDKMIEQZ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- 210000003462 Veins Anatomy 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010052670 arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 2
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 2
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 2
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940121650 immune-checkpoint protein inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular Effects 0.000 description 2
- 108010078274 isoleucylvaline Proteins 0.000 description 2
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 2
- 230000036961 partial Effects 0.000 description 2
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N pro glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 102000035402 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091005683 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- OPINTGHFESTVAX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Arginine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N OPINTGHFESTVAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N (+)-methoprene Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N (2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-azaniumylpropanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CXRCVCURMBFFOL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N (2S)-1-[(2S)-2-azaniumyl-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 VNYDHJARLHNEGA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- KYPMKDGKAYQCHO-RYUDHWBXSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 KYPMKDGKAYQCHO-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N (2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OCYROESYHWUPBP-VGMNWLOBSA-N (2S,3R)-3-methyl-2-[[(2S)-pyrrolidin-1-ium-2-carbonyl]amino]pentanoate Chemical compound CC[C@@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 OCYROESYHWUPBP-VGMNWLOBSA-N 0.000 description 1
- PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-[[(1S)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZENKESXKWBIZCV-UHFFFAOYSA-N 2,2,4,4-tetrafluoro-1,3-benzodioxin-6-amine Chemical group O1C(F)(F)OC(F)(F)C2=CC(N)=CC=C21 ZENKESXKWBIZCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFCVXVPWSPOMFJ-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-azaniumyl-3-phenylpropanoyl)amino]-4-methylpentanoate Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 RFCVXVPWSPOMFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-azaniumyl-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetate Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- PABVKUJVLNMOJP-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(1-carboxy-2-sulfanylethyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O PABVKUJVLNMOJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUTIHHSZKFBMHM-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(3-amino-1-carboxy-3-oxopropyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O TUTIHHSZKFBMHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- QADCERNTBWTXFV-JSGCOSHPSA-N Arg-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 QADCERNTBWTXFV-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N Asn-His Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C(N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBKIFHUVGLOJKT-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O VBKIFHUVGLOJKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Asparagine Chemical compound OC(=O)CC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UKGGPJNBONZZCM-WDSKDSINSA-N Aspartyl-L-proline Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O UKGGPJNBONZZCM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108010005144 Bevacizumab Proteins 0.000 description 1
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 210000000349 Chromosomes Anatomy 0.000 description 1
- ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N Cys-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N Cys-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- AYKQJQVWUYEZNU-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Asparagine Chemical compound SCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O AYKQJQVWUYEZNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NXTYATMDWQYLGJ-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS NXTYATMDWQYLGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WXOFKRKAHJQKLT-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS WXOFKRKAHJQKLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 Gastrointestinal Tract Anatomy 0.000 description 1
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N Glu-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Aspartate Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(O)=O)C(O)=O SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HHSJMSCOLJVTCX-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O HHSJMSCOLJVTCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710004393 HAVCR2 Proteins 0.000 description 1
- 102100016384 HAVCR2 Human genes 0.000 description 1
- VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 210000004408 Hybridomas Anatomy 0.000 description 1
- RCFDOSNHHZGBOY-ACZMJKKPSA-N Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 210000000822 Killer Cells, Natural Anatomy 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N L-arginyl-L-glutamic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N Leucyl-Glutamine Chemical compound CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(N)=O JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 1
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N Lys-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N Lys-Pro Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 210000002901 Mesenchymal Stem Cells Anatomy 0.000 description 1
- KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N Met-Thr Chemical compound CSCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C([O-])=O KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- 210000001616 Monocytes Anatomy 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L Nickel(II) sulfate Chemical compound [Ni+2].[O-]S([O-])(=O)=O LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000004967 Non-hematopoietic Stem Cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000012271 PD-L1 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121656 PD-L1 inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 102100017818 PTPN11 Human genes 0.000 description 1
- 101710018405 PTPN11 Proteins 0.000 description 1
- 210000003819 Peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N Phe-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N Phe-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JWBLQDDHSDGEGR-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N Phe-Pro Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N1[C@@H](CCC1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 1
- SHAQGFGGJSLLHE-BQBZGAKWSA-N Pro-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 SHAQGFGGJSLLHE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HXNYBZQLBWIADP-UHFFFAOYSA-N Prolyl-Cysteine Chemical compound OC(=O)C(CS)NC(=O)C1CCCN1 HXNYBZQLBWIADP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N Ser-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 208000000587 Small Cell Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N Thr-His Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 WXVIGTAUZBUDPZ-DTLFHODZSA-N 0.000 description 1
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- YKRQRPFODDJQTC-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Lysine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCCN YKRQRPFODDJQTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRQCSEWEPIHLBI-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Asparagine Chemical compound C1=CC=C2C(CC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 GRQCSEWEPIHLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000711955 Turkey rhinotracheitis virus Species 0.000 description 1
- QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N Tyr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- WITCOKQIPFWQQD-FSPLSTOPSA-N Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O WITCOKQIPFWQQD-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- OBTCMSPFOITUIJ-FSPLSTOPSA-N Val-Asp Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O OBTCMSPFOITUIJ-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- GJNDXQBALKCYSZ-RYUDHWBXSA-N Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 GJNDXQBALKCYSZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- WPSXZFTVLIAPCN-UHFFFAOYSA-N Valyl-Cysteine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O WPSXZFTVLIAPCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- URRBLVUOXIGNQR-HXUWFJFHSA-N [(1R)-1-phenylethyl] N-(2-aminoethyl)-N-[(3-methoxy-4-phenylmethoxyphenyl)methyl]carbamate Chemical compound C1([C@@H](C)OC(=O)N(CCN)CC=2C=C(C(=CC=2)OCC=2C=CC=CC=2)OC)=CC=CC=C1 URRBLVUOXIGNQR-HXUWFJFHSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 1
- 101700028234 agl5 Proteins 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000002838 bio layer interferometry Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000002222 downregulating Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N gly pro Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine zwitterion Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 108010027338 isoleucylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000001483 mobilizing Effects 0.000 description 1
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 1
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 229940053662 nickel sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000363 nickel(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative Effects 0.000 description 1
- 108091008117 polyclonal antibodies Proteins 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous Effects 0.000 description 1
- 108010071097 threonyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 108010079202 tyrosyl-alanyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 description 1
- 108010052774 valyl-lysyl-glycyl-phenylalanyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Serine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CO)C(O)=O UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQFAGNFSIZZYBA-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CCC(N)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZQFAGNFSIZZYBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности выделенное анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Также раскрыты полинуклеотид и сочетание выделенных полинуклеотидов, кодирующие указанное антитело; вектор экспрессии, содержащий указанный полинуклеотид; клетка-хозяин, содержащая указанный вектор; конъюгат и фармацевтическая композиция, содержащие указанное антитело. Раскрыты способ производства указанного анти-PD-L1 антитела; способ усиления функции T-клеток, способ лечения T-клеточной дисфункции с помощью указанного антитела; применение указанного антитела для лечения или предотвращения PD-L1-связаного рака. Изобретение позволяет эффективно лечить заболевания, ассоциированные с фактором PD-L1. 11 н. и 18 з.п. ф-лы, 5 ил., 11 табл., 6 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[0001] Настоящее изобретение относится к области биомедицины, в частности, к анти-PD-L1 антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, и его применению в медицине.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] В последнее время в области терапии опухолей все больше усилий направлено на использование иммунной системы организма для защиты от опухолей. Этот способ подавления и уничтожения опухолевых клеток путем мобилизации иммунной системы организма называют иммунотерапией опухолей. Иммунотерапия опухолей, включая клеточную иммунотерапию, противоопухолевые вакцины, пассивную иммунотерапию, направленную на опухоли, и ингибиторы иммунных контрольных точек, является в настоящее время наиболее перспективным направлением исследований в области терапии опухолей и привела к получению ряда многообещающих результатов исследований.
[0003] Термин «иммунная контрольная точка» означает сигнальный путь, который контролирует интенсивность T-клеточного иммунного ответа, уравновешивая костимулирующие и коподавляющие сигналы (ссылка 1). Иммунные контрольные точки могут поддерживать иммунную толерантность путем регуляции интенсивности аутоиммунного ответа в нормальных условиях. Однако, когда в организм вторгаются опухоли, активация иммунных контрольных точек может приводить к ингибированию аутоиммунитета, что способствует росту опухолевых клеток и их уклонению от иммунной системы. Иммунные контрольные точки, такие как CTLA-4, рецептор 1 программируемой гибели клеток (PD-1)/лиганд 1 программируемой гибели клеток (PD-L1) и TIM-3, являются ключевыми молекулами отрицательной регуляции, играющими важную роль в уклонении опухолей от иммунной системы. Блокирование отрицательного регуляторного пути иммунных контрольных точек специфическим антителом и восстановление способности иммунной системы организма узнавать и уничтожать опухолевые клетки приводит к хорошим терапевтическим результатам при иммунотерапии опухолей. Среди известных иммунных контрольных точек PD-1/PD-L1 привлекли большое внимание в противоопухолевых исследованиях и терапии.
[0004] PD-1 (белок 1 программируемой гибели клеток, рецептор 1 программируемой гибели клеток, CD279), представитель суперсемейства CD28, является важной иммуносупрессорной молекулой. PD-1 экспрессируется на активированных T-клетках, B-клетках, NK-клетках, моноцитах и некоторых опухолевых клетках. PD-1 представляет собой трансмембранный белок из 288 аминокислот, закодированный геном PDCD1. PD-1, в основном, содержит внеклеточную область - подобный вариабельной области иммуноглобулина (IgV) домен, трансмембранную область и внутриклеточную область. Внутриклеточная область содержит C-концевые и N-концевые аминокислотные остатки, и содержит два отдельных сайта фосфорилирования, расположенные в иммунорецепторном тирозиновом ингибирующем мотиве (ITIM) и иммунорецепторном тирозиновом переключающем мотиве (ITSM). Связывание внеклеточного IgV-подобного домена PD-1 с его лигандом приводит к изменениям в ITSM, с последующим рекрутингом сигналов SHP2, что приводит к активации последующих путей (ссылка 2).
[0005] Существуют два естественных лиганда для PD-1, PD-L1 и PD-L2 (ссылка 3). PD-L1 (лиганд 1 программируемой гибели клеток, CD274, B7-H1) представляет собой 40-кДа трансмембранный белок, кодируемый геном CD274, он при индукции экспрессируется на T-клетках, B-клетках, дендритных клетках, макрофагах, мезенхимальных стволовых клетках, тучных клетках из костного мозга и не гемопоэтических клетках, и его экспрессия может быть быстро повышена в опухолевых тканях и других тканях в ответ на интерферон и другие воспалительные факторы (ссылка 4). При активации пути PD-1/PD-L1 иммунная система подавляется при раке, беременности, трансплантации тканей и аутоиммунных заболеваниях. PD-L2 (лиганд 2 программируемой гибели клеток, CD273, B7-DC) имеет ограничения в том, что он экспрессируется, и его экспрессия стимулируется, в основном в активированных макрофагах, дендритных клетках и тучных клетках (ссылка 5). Хотя PD-L1 и PD-L2 имеют 37% гомологию последовательностей, их регуляторные эффекты различны вследствие различий в основных экспрессирующих их клетках. В отличие от PD-L2, PD-L1 экспрессируется на различных опухолевых клетках, что делает PD-L1 основным лигандом при изучении пути PD-1/PD-L в области иммунотерапии опухолей.
[0006] Поскольку PD-L1 также может связывать CD80 (принадлежащий к суперсемейству иммуноглобулинов, CD28 и CTLA4 в качестве его лигандов, играющих важную роль в мониторинге аутоиммунитета, гуморальном иммунном ответе и ответе на трансплантацию) (ссылка 6), ингибирование PD-L1 может уменьшать препятствия для CD80, тем самым способствуя повышению активности T-клеток. С точки зрения безопасности лекарственных средств PD-L2, другой лиганд PD-1, имеет аффинность для PD-1, которая в три раза выше, чем аффинность PD-L1 для PD-1 (ссылка 7), и блокаторы PD-L1 не связываются с PD-L2. Теоретически, анти-PD-1 антитело блокирует взаимодействие PD-1 как с PD-L1, так и с PD-L2, в то время как анти-PD-L1 антитело блокирует только взаимодействие PD-1 с PD-L1, не затрагивая взаимодействие PD-1 с PD-L2. И кроме того, PD-L2 необходим для поддержания иммунной толерантности в легких и желудочно-кишечном тракте. Учитывая все это, анти-PD-L1 антитело может иметь меньше побочных эффектов на легкие и желудочно-кишечный тракт, чем анти-PD-1 антитело. В сравнении с блокаторами PD-1, блокаторы PD-L1 могут иметь лучшие показатели с точки зрения эффективности и безопасности (ссылка 8).
[0007] В настоящее время три анти-PD-L1 антитела в качестве лекарственных средств были одобрены FDA США для реализации на рынке (как показано в Таблице 1).
Таблица 1 - Ингибиторы иммунных контрольных точек PD-L1, одобренные FDA
Торговое название | Лекарственное средство | Время поступления на рынок | Производитель | Основные утвержденные показания |
Тецентрик | атезолизумаб | 2016 | Roche | Уротелиальний рак, немелкоклеточный рак легкого и карцинома из клеток Меркеля |
Бавенцио | авелумаб | 2017 | Merck/Pfizer | |
Имфинци | дурвалумаб | 2017 | AstraZeneca |
[0008] Атезолизумаб был одобрен FDA США впервые в мае 2016 г., и был одобрен для лечения многих заболеваний в последующие два года (как показано в Таблице 2).
Таблица 2 - Одобренные показания для атезолизумаба
Время | Одобренные показания |
2016.05.18 | (1) Пациенты, у которых произошло прогрессирование заболевания в процессе, или после, химиотерапии препаратами платины, и (2) Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, у которых произошло прогрессирование заболевания в течение 12 месяцев после химиотерапии препаратами платины в качестве неоадъювантного или адъювантного лечения |
2016.10.18 | Пациенты с метастатическим немелкоклеточным раком легкого (НМКРЛ), у которых произошло прогрессирование заболевания после химиотерапии препаратами платины |
2017.04.17 | (1) Пациенты, которые не подходят для химиотерапии цисплатином, и (2) Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, у которых произошло прогрессирование заболевания в процессе, или после, химиотерапии любыми препаратами платины, или в течение 12 месяцев после неоадъювантной или адъювантной химиотерапии |
2018.06.19 | (1) Пациенты, которые не подходят для химиотерапии цисплатином и имеют опухоли, экспрессирующие PD-L1 (окрашенные на PD-L1 опухоль-инфильтрирующие иммунные клетки (ИК), занимающие ≥5% площади опухоли), (2) Пациенты с опухолями, экспрессирующими PD-L1, но не соответствующие условиям лечения какими-либо химиотерапевтическими препаратами платины, и (3) Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, у которых произошло прогрессирование заболевания в процессе, или после, химиотерапии любыми препаратами платины, или в течение 12 месяцев после неоадъювантной или адъювантной химиотерапии |
2018.07.02 | (1) Пациенты, которые не подходят для химиотерапии цисплатином на основании одобренного FDA теста и с опухолями, экспрессирующими PD-L1 (окрашенные на PD-L1 опухоль-инфильтрирующие иммунные клетки (ИК), занимающие ≥5% площади опухоли), (2) Пациенты, не соответствующие условиям лечения какими-либо химиотерапевтическими препаратами платины, и (3) Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, у которых произошло прогрессирование заболевания в процессе, или после, химиотерапии любыми препаратами платины, или в течение 12 месяцев после неоадъювантной или адъювантной химиотерапии |
[0009] В 2019 г. атезолизумаб был дополнительно одобрен в качестве лечения первой линии для трех рефрактерных прогрессирующих форм рака, в том числе, атезолизумаб+бевацизумаб+химиотерапия, одобренная в Европейском союзе, в качестве лечения первой линии для прогрессирующего не плоскоклеточного немелкоклеточного рака легкого, а также сочетание атезолизумаба с химиотерапией, одобренной в США, в качестве лечения первой линии для PD-L1-положительного прогрессирующего трижды негативного рака молочной железы и в качестве лечения первой линии для прогрессирующего мелкоклеточного рака легкого.
[0010] Два других анти-PD-L1 антитела в качестве лекарственных средств на рынке, авелумаб и дурвалумаб, также были успешно одобрены для лечения, например, метастатической карциномы из клеток Меркеля, локально распространенного или метастатического уротелиального рака, или хирургически нерезектабельного немелкоклеточного рака легкого III стадии. Смотри Таблицы 3-4 для подробной информации.
Таблица 3 - Одобренные показания для авелумаба
Время | Одобренные показания |
2017.03.23 | Пациенты с метастатической карциномой из клеток Меркеля (ККМ) |
2017.05.09 | Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком (мУР), у которых произошло прогрессирование заболевания в процессе, или после, химиотерапии препаратами платины |
2017.05.09 | Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком (мУР), у которых произошло прогрессирование заболевания в течение 12 месяцев после химиотерапии препаратами платины до хирургической операции (неоадъювантное лечение) или после хирургической операции (адъювантное лечение) |
Таблица 4 - Одобренные показания для дурвалумаба
Время | Одобренные показания |
2017.05.01 | Пациенты с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, у которых произошло прогрессирование заболевания в течение 12 месяцев после химиотерапии препаратами платины или адъювантной химиотерапии |
2018.02.16 | Пациенты с хирургически нерезектабельным немелкоклеточным раком легкого III стадии, и в случае отсутствия ослабления заболевания при одновременном лечении химиотерапевтическими препаратами платины и лучевой терапией |
[0011] В патентной заявке CN102245640A также описано анти-PD-L1 антитело и его применение для повышения функции T-клеток с целью усиления клеточного иммунного ответа, и предложен способ лечения T-клеточной дисфункции, включая инфекцию (например, острую и хроническую) и опухолевую иммунизацию. Виды рака, связанные с опухолевой иммунизацией, включают рак молочной железы, рак легкого, рак толстого кишечника, рак яичника, меланому, рак мочевого пузыря, рак почки, рак печени, рак слюнных желез, рак желудка, глиому, рак щитовидной железы, рак тимуса, эпителиальный рак, рак головы и шеи, рак желудка и рак поджелудочной железы.
[0012] Исходя из современных одобренных показаний для каждого анти-PD-L1 антитела и существующей технической литературы, для разных анти-PD-L1 антител существуют совершенно разные показания, при этом три существующих на рынке антитела потерпели несколько неудач в III фазе клинических испытаний, например, в трех испытаниях бавенцио для лечения рака яичника: JAVELIN Ovarian 100, JAVELIN Ovarian 200 и JAVELIN Ovarian PARP 100, это свидетельствует о том, что все еще имеется большое количество существенных клинических потребностей, которые в настоящее время не удовлетворены. Таким образом, существует острая клиническая потребность в разработке большего количества ингибиторов PD-L1, которые являются более эффективными и применимыми для большего количества показаний, в частности, моноклональных антител, нацеленных на PD-L1.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0013] Настоящее изобретение относится к анти-PD-L1 антителу, а также полинуклеотиду, сочетанию полинуклеотидов, экспрессионному вектору и сочетанию экспрессионных векторов, которые кодируют антитело. Настоящее изобретение также относится к конъюгату или фармацевтической композиции, содержащей вышеуказанное анти-PD-L1 антитело. Настоящее изобретение также относится к применению вышеуказанных полинуклеотида, сочетания полинуклеотидов, экспрессионного вектора, сочетания экспрессионных векторов, конъюгата или фармацевтической композиции анти-PD-L1 антитела в качестве лекарственного средства для лечения или предотвращения рака.
[0014] Настоящее изобретение относится к выделенному анти-PD-L1 антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, при этом анти-PD-L1 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи. Вариабельная область тяжелой цепи и/или вариабельная область легкой цепи содержит последовательность CDR, идентичную таковой у антитела, определяемого следующей последовательностью, или полученного путем 1-2 аминокислотных замен в последовательности CDR антитела, определяемого следующей последовательностью:
(1) аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи, приведенная в SEQ ID NO: 31; и/или
(2) аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи, приведенная в SEQ ID NO: 32.
[0015] В конкретном варианте осуществления, в зависимости от разных способов определения или идентификации систем, определяющие комплементарность области CDR 1-3 соответствующих вариабельных областей тяжелой цепи и легкой цепи являются такими, как показано в Таблице 5.
Таблица 5 - CDR 1-3 Аминокислота последовательности of тяжелая цепь и легкая цепь вариабельные области
Категория | Система | CDR1 | CDR2 | CDR3 |
Тяжелая цепь | IMGT | SEQ ID NO: 1 GFSLSRYS |
SEQ ID NO: 2 IWGVGTT |
SEQ ID NO: 3 ARNWGTADYFDY |
Kabat | SEQ ID NO: 7 RYSVH |
SEQ ID NO: 8 MIWGVGTTDYNSALKS |
SEQ ID NO: 9 NWGTADYFDY |
|
Chothia | SEQ ID NO: 13 GFSLSRY |
SEQ ID NO: 14 WGVGT |
SEQ ID NO: 15 NWGTADYFDY |
|
AbM | SEQ ID NO: 19 GFSLSRYSVH |
SEQ ID NO: 20 MIWGVGTTD |
SEQ ID NO: 21 NWGTADYFDY |
|
Contact | SEQ ID NO: 25 SRYSVH |
SEQ ID NO: 26 WLGMIWGVGTTD |
SEQ ID NO: 27 ARNWGTADYFD |
|
Легкая цепь | IMGT | SEQ ID NO: 4 KSVHTSGYSY |
SEQ ID NO: 5 LAS |
SEQ ID NO: 6 QHSGELPYT |
Kabat | SEQ ID NO: 10 RASKSVHTSGYSYMH |
SEQ ID NO: 11 LASNLES |
SEQ ID NO: 12 QHSGELPYT |
|
Chothia | SEQ ID NO: 16 RASKSVHTSGYSYMH |
SEQ ID NO: 17 LASNLES |
SEQ ID NO: 18 QHSGELPYT |
|
AbM | SEQ ID NO: 22 RASKSVHTSGYSYMH |
SEQ ID NO: 23 LASNLES |
SEQ ID NO: 24 QHSGELPYT |
|
Contact | SEQ ID NO: 28 HTSGYSYMHWY |
SEQ ID NO: 29 LLIYLASNLE |
SEQ ID NO: 30 QHSGELPY |
[0016] Настоящее изобретение также относится к выделенному анти-PD-L1 антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, которое в некоторых конкретных вариантах осуществления содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, при этом:
(1) в вариабельной области тяжелой цепи CDR1 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 7, 13, 19 или 25, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 1, 7, 13, 19 или 25; CDR2 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, 8, 14, 20 или 26, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 2, 8, 14, 20 или 26; CDR3 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 9, 15, 21 или 27, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 3, 9, 15, 21 или 27; и/или
(2) в вариабельной области легкой цепи CDR1 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, 10, 16, 22 или 28, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 4, 10, 16, 22 или 28; CDR2 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, 11, 17, 23 или 29, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 5, 11, 17, 23 или 29; CDR3 содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, 12, 18, 24 или 30, или полученную путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 6, 12, 18, 24 или 30.
[0017] Настоящее изобретение также относится к выделенному анти-PD-L1 антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту. В некоторых конкретных вариантах осуществления
(1) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-3, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 1-3, и/или CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4-6, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 4-6; или
(2) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 7-9, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 7-9, и/или CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 10-12, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 10-12; или
(3) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 13-15, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 13-15, и/или CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 16-18, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 16-18; или
(4) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 19-21, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 19-21, и/или CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 22-24, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 22-24; или
(5) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 25-27, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 25-27, и/или CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 28-30, или полученные путем 1 или 2 аминокислотных замен в SEQ ID NO: 28-30.
[0018] В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, в котором CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-3; CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4-6.
[0019] В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельные области, выбранные из следующей группы:
(1) вариабельная область тяжелой цепи, содержащая последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 31, или содержащая те же CDR 1-3, что и в SEQ ID NO: 31, и более чем на 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичная SEQ ID NO: 31; и/или
(2) вариабельная область легкой цепи, содержащая последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 32, или содержащая те же CDR 1-3, что и в SEQ ID NO: 32, и более чем на 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичная SEQ ID NO: 32.
[0020] Вариабельная область тяжелой цепи анти-PD-L1 антитела по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 31):
QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGFSLS RYSVHWIRQP PGKGLEWLGM IWGVGTTDYN 60 SALKSRLTIS KDTSKNQFSL KLSSVTAADT AVYYCARNWG TADYFDYWGQ GTTVTVSSAS 120 |
[0021] Вариабельная область легкой цепи анти-PD-L1 антитела по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 32):
DIVLTQSPAS LAVSPGQRAT ITCRASKSVH TSGYSYMHWY QQKPGQPPKL LIYLASNLES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIN PVEANDTANY YCQHSGELPY TFGGGTKVEI KRT 113 |
[0022] В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему (1) вариабельную область тяжелой цепи с последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 31; и/или (2) вариабельную область легкой цепи с последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 32.
[0023] В некоторых конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему (1) тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 33; и/или (2) легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 34.
[0024] Антитело, предложенное по настоящему изобретению, может представлять собой моноклональное антитело, химерное антитело, гуманизированное антитело, биспецифическое антитело, мультиспецифическое антитело, либо Fab-фрагмент, F(ab’)-фрагмент, F(ab’)2-фрагмент, Fv-фрагмент, дАт, Fd-фрагмент, одноцепочечное антитело (scFv). Кроме того, антитело представляет собой гуманизированное моноклональное антитело.
[0025] Антитело, предложенное по настоящему изобретению, дополнительно содержит константную область человеческого или мышиного антитела, и константная область может быть дополнительно выбрана из константной области IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. IgG2 включает IgG2A и IgG2B.
[0026] Настоящее изобретение также относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему вышеуказанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, или сочетанию полинуклеотидов, кодирующему тяжелую цепь, или ее часть, и легкую цепь, или ее часть, вышеуказанного антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента.
[0027] Настоящее изобретение также относится к конструкции нуклеиновой кислоты или вектору, содержащей вышеуказанный полинуклеотид, кодирующий анти-PD-L1 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент.
[0028] Настоящее изобретение также относится к клетке-хозяину, содержащей вышеуказанную конструкцию нуклеиновой кислоты или вектор. Клетка может представлять собой прокариотическую клетку, эукариотическую клетку, дрожжевую клетку, клетку млекопитающего, клетку E. coli или клетку CHO, клетку NS0, клетку Sp2/0, клетку BHK.
[0029] Настоящее изобретение также относится к конъюгату антитело-лекарственное средство, содержащему анти-PD-L1 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по настоящему изобретению и лекарственный токсин. Лекарственный токсин можно выбирать из химических средств, токсинов, полипептидов, ферментов, изотопов, цитокинов, антител или других биологически активных веществ, либо их смеси, которые могут ингибировать рост клеток или уничтожать клетки непосредственно, опосредованно или путем активации иммунного ответа организма на лечение опухолей, предпочтительно интерлейкинов, факторов некроза опухолей, хемокинов, наночастиц, MMAE, MMAF, DM1, DM4, калихеамицина, дуокармицина, доксорубицина.
[0030] Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей анти-PD-L1 антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, и/или вышеуказанный конъюгат по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.
[0031] Настоящее изобретение также относится к способу производства анти-PD-L1 антитела, включающему культивирование вышеуказанной клетки-хозяина в условиях, подходящих для экспрессии вектора, кодирующего анти-PD-L1 антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, и извлечение антитела или фрагмента.
[0032] Настоящее изобретение также относится к способу усиления функции T-клеток, включающему доставку эффективного количества вышеуказанной фармацевтической композиции по настоящему изобретению к дисфункциональным T-клеткам.
[0033] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или предотвращения рака, включающему введение терапевтически эффективного количества антитела, полинуклеотида, сочетания полинуклеотидов, экспрессионного вектора, конъюгата и/или фармацевтической композиции по настоящему изобретению субъекту, который нуждается в этом.
[0034] В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению анти-PD-L1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, полинуклеотида, сочетания полинуклеотидов, соответствующей конструкции нуклеиновой кислоты или вектора, кодирующего антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгата антитело-лекарственное средство или фармацевтической композиции по настоящему изобретению в производстве лекарственного препарата, используемого для лечения или предотвращения рака.
[0035] В другом аспекте настоящее изобретение относится к антителу, полинуклеотиду, сочетанию полинуклеотидов, экспрессионному вектору, конъюгату и/или фармацевтической композиции по настоящему изобретению для использования в лечении или предотвращении рака.
[0036] Кроме того, рак представляет собой солидную опухоль.
[0037] Кроме того, солидная опухоль представляет собой рак легкого, колоректальный рак, рак молочной железы, рак яичника, меланому, рак мочевого пузыря, уротелиальный рак, рак почки, рак печени, рак слюнных желез, рак желудка, глиомы, рак щитовидной железы, рак тимуса, эпителиальный рак, рак головы и шеи, рак желудка и рак поджелудочной железы.
[0038] Кроме того, рак легкого представляет собой немелкоклеточный рак легкого.
[0039] Кроме того, рак молочной железы представляет собой трижды негативный рак молочной железы.
[0040] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения T-клеточной дисфункции, включающему введение терапевтически эффективного количества вышеуказанной фармацевтической композиции по настоящему изобретению пациенту с T-клеточной дисфункцией. T-клеточная дисфункция включает инфекции и опухолевую иммунизацию. Опухолевую иммунизацию вызывает рак, выбранный из рака молочной железы, рака легкого, рака толстого кишечника, рака яичника, меланомы, рака мочевого пузыря, рака почки, рака печени, рака слюнных желез, рака желудка, глиомы, рака щитовидной железы, рака тимуса, эпителиального рака, рака головы и шеи, рака желудка и рака поджелудочной железы.
[0041] Настоящее изобретение также относится к применению анти-PD-L1 антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, полинуклеотида, сочетания полинуклеотидов, соответствующей конструкции нуклеиновой кислоты или вектора, кодирующего антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгата антитело-лекарственное средство или фармацевтической композиции по настоящему изобретению в производстве лекарственного препарата, используемого для лечения или предотвращения рака.
[0042] Анти-PD-L1 моноклональное антитело, предложенное по настоящему изобретению, представляет собой новое моноклональное антитело, нацеленное на PD-L1, с новой последовательностью CDR и аминокислотной последовательностью. Анти-PD-L1 моноклональное антитело, предложенное по настоящему изобретению, имеет удивительную аффинность и специфичность для PD-L1 человека, и имеет значительные преимущества в конкуренции с PD-1 человека за связывание с PD-L1 человека. Анти-PD-L1 моноклональное антитело, предложенное по настоящему изобретению, проявляет неожиданные опухоль-ингибирующие эффекты в in vitro животных моделях как немелкоклеточного рака легкого, так и колоректального рака, и представляет собой лучший вариант для ингибирования прогрессирования опухоли.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[0043] На ФИГ. 1 показана кривая аффинного связывания и диссоциации hAAG5D8 с PD-L1 человека, где кривая 1 соответствует 100 нМ hAAG5D8, кривая 2 соответствует 50 нМ hAAG5D8 и кривая 3 соответствует 25 нМ hAAG5D8.
[0044] На ФИГ. 2 показана кривая, отражающая конкуренцию между hAAG5D8 и PD-1 человека за связывание.
[0045] На ФИГ. 3 показана способность связывания hAAG5D8 с различными белками семейства B7 (PD-L1, PD-L2, B7-H3, PD-1 и CD80).
[0046] На ФИГ. 4 показана кривая роста опухоли после введения hAAG5D8 (5 мг/кг), MPDL3820A (5 мг/кг, положительный контроль) или IgG1 человека (5 мг/кг, отрицательный контроль) в модели подкожного ксенотрансплантата человеческой опухоли немелкоклеточного рака легкого.
[0047] На ФИГ. 5 показано изменение объема опухоли после введения hAAG5D8 (1 мг/кг, 3 мг/кг или 9 мг/кг), MPDL3820A (10 мг/кг, положительный контроль) или PBS (отрицательный контроль) в модели подкожного ксенотрансплантата человеческой опухоли колоректального рака.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения
[0048] Если нет иных указаний, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то значение, которое им придают специалисты в данной области. Что касается определений и терминов в данной области, ссылка может быть сделана на сборник Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel). Стандартный трех- и/или однобуквенный код, используемый для обозначения 20 обычных L-аминокислот в данной области, принят в качестве сокращений для аминокислотных остатков.
[0049] В настоящем изобретении способ определения или нумерации остатков определяющей комплементарность области (CDR) вариабельного домена антитела включает системы IMGT, Kabat, Chothia, AbM и Contact, хорошо известные в данной области.
[0050] Для целей настоящего изобретения «совпадение», «идентичность» или «сходство» между двумя нуклеотидными или аминокислотными последовательностями относится к процентному содержанию идентичных нуклеотидов или идентичных аминокислотных остатков в двух сравниваемых последовательностях после оптимального выравнивания. Процентное содержание является чисто статистическим, и различия между двумя последовательностями распределяются случайным образом и покрывают всю их длину. Сравнение последовательностей двух нуклеотидных или аминокислотных последовательностей, как правило, производят путем сравнения этих последовательностей после их оптимального сопоставления, и сравнение можно производить на сегменте или в «окне сравнения». Помимо осуществления вручную, оптимальное выравнивание для сравнения последовательностей также можно производить с использованием алгоритма поиска локальной гомологии Смита-Ватермана (1981) [Ad. App. Math. 2: 482], алгоритма поиска локальной гомологии Нидлмана-Вунша (1970) [J. Mol. Biol. 48: 443], метода поиска сходства Пирсона-Липмана (1988) [Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 2444) или компьютерной программы, в которой используются данные алгоритмы (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA пакете программ Wisconsin Genetics, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI, либо программы сравнения последовательностей BLAST N или BLAST P).
[0051] В настоящем документе термин «антитело» используется в самом широком смысле и охватывает различные антитела, включая, но без ограничения, моноклональное антитело, поликлональное антитело и мультиспецифическое антитело (например, биспецифическое антитело). Используемый в настоящем документе термин «антигенсвязывающий фрагмент» означает фрагмент антитела, состоящий из, или содержащий частичную последовательность из, вариабельной области тяжелой или легкой цепи антитела, из которого он получен, при этом частичная последовательность способна сохранять ту же специфичность связывания, что и антитело, из которого она получена, и достаточную аффинность, предпочтительно равную по меньшей мере 1/100, более предпочтительно по меньшей мере 1/10 аффинности антитела, из которого она получена. Такой функциональный фрагмент содержит минимум 5 аминокислот, предпочтительно 10, 15, 25, 50 или 100 смежных аминокислот последовательности антитела, из которого он получен, включая (в частности) фрагмент Fab, F(ab’), F(ab’)2, Fv, дАт, Fd, определяющую комплементарность область (CDR), одноцепочечное антитело (scFv) и двухвалентное одноцепочечное антитело, которое содержит по меньшей мере фрагмент иммуноглобулина, достаточный для обеспечения связывания специфического антигена с полипептидом. Вышеуказанные фрагменты могут быть получены синтетическим или ферментативным способом, путем химического расщепления интактного иммуноглобулина, или могут быть получены методами генетической инженерии с использованием технологии рекомбинантных ДНК. Способы их получения хорошо известны в данной области. Тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенное обозначение VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три домена, CH1, CH2 и CH3. Легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенное обозначение VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи содержит домен CL. Области VH и VL могут быть дополнительно подразделены на несколько областей с высокой вариабельностью, называемых определяющими комплементарность областями (CDR), которые перемежаются с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (FR). Каждая область VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, которые организованы от амино-конца к карбоксильному концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Эти вариабельные области тяжелой и легкой цепей содержат связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константная область антитела может опосредовать связывание иммуноглобулина с тканью или фактором хозяина, включая различные клетки в иммунной системе (такие как эффекторные клетки) и первый компонент классической системы комплемента (C1q). Химерные или гуманизированные антитела также охвачены термином «антитела» по настоящему изобретению.
[0052] Термин «гуманизированное антитело» означает антитело, которое содержит область CDR из не принадлежащего человеку антитела, а остальную часть из одного (или нескольких) человеческого антитела. Кроме того, для сохранения аффинности связывания некоторые остатки в каркасном (называемом FR) сегменте могут быть модифицированы (Jones et al., Nature, 321: 522-525, 1986; Verhoeyen et al., Science, 239: 1534-1536, 1988; Riechmann et al., Nature, 332: 323-327, 1988). Гуманизированные антитела, или их фрагменты, по настоящему изобретению могут быть получены методами, известными специалистам в данной области (например, описанными в публикациях Singer et al., J. Immun. 150: 2844-2857, 1992; Mountain et al., Biotechnol. Genet. Eng. Rev., 10: 1-142, 1992; или Bebbington et al., Bio/Technology, 10: 169-175, 1992).
[0053] Термин «химерное антитело» означает антитело, в котором последовательность вариабельной области происходит из антитела одного биологического вида, в то время как последовательность константной области происходит из антитела другого биологического вида, например, антитело, в котором последовательность вариабельной области происходит из мышиного антитела, в то время как последовательность константной области происходит из человеческого антитела. Химерное антитело, или его фрагмент, по настоящему изобретению может быть получено с использованием технологии генетической рекомбинации. Например, химерное антитело может быть получено путем клонирования рекомбинантной ДНК, содержащей промотор и последовательность, кодирующую вариабельную область не принадлежащего человеку, в частности, мышиного моноклонального антитела по настоящему изобретению, и последовательность, кодирующую константную область человеческого антитела. Химерное антитело по настоящему изобретению, закодированное таким рекомбинантным геном, будет представлять собой, например, мышиную-человеческую химеру, специфичность которой определяется вариабельной областью, полученной из мышиной ДНК, а изотип определяется константной областью, полученной из человеческой ДНК. Для информации о способах получения химерного антитела, например, можно сослаться на публикацию Verhoeyn et al. (BioEssays, 8:74, 1988).
[0054] Термин «моноклональное антитело» относится к препарату молекул антитела, состоящему из одинаковых молекул. Композиции моноклональных антител обладают одной специфичностью связывания и аффинностью для конкретного эпитопа.
[0055] Термин «выделенная» молекула нуклеиновой кислоты означает молекулу нуклеиновой кислоты, идентифицированную и отделенную от по меньшей мере одной примесной молекулы нуклеиновой кислоты, и, как правило, связанную с примесной молекулой нуклеиновой кислоты в природном источнике нуклеиновой кислоты антитела. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты отличается по форме или окружению от такой же молекулы, встречающейся в природе, и, таким образом, отличается от молекул, присутствующих в естественных клетках. Однако выделенная молекула нуклеиновой кислоты включает молекулу нуклеиновой кислоты, находящуюся в клетках, в которых обычно экспрессируется антитело, и в которых, например, она занимает иное положение на хромосоме, чем в естественной клетке.
[0056] Как правило, для получения моноклонального антитела, или его функционального фрагмента, в частности, мышиного моноклонального антитела, или его функционального фрагмента, можно упомянуть технологию, описанную в руководстве «Antibodies» (Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor NY, pp. 726, 1988), или методику получения из клеток гибридомы, описанную Kohler и Milstein (Nature, 256: 495-497, 1975).
ПРИМЕРЫ
[0057] Далее варианты осуществления настоящего изобретения будут описаны подробно в сочетании с примерами. Однако специалисты в данной области поймут, что следующие примеры использованы лишь для иллюстрации настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.
[0058] Пример 1. Получение анти-PD-L1 антитела
[0059] В результате масштабного скрининга анти-PD-L1 антител, полученных после иммунизации мышей, было определено мышиное антитело-кандидат mAAG5D8. После выравнивания последовательности в базе данных вариабельных областей антитела была определена каркасная область IgG1 человека с высокой степенью гомологии с мышиным анти-PD-L1 антителом mAAG5D8. Для mAAG5D8 были дополнительно спроектированы различные гуманизированные антитела и проведено сравнение их аффинности, в конечном итоге было определено гуманизированное анти-PD-L1 антитело-кандидат hAAG5D8.
Таблица 6 - Аминокислотные последовательности CDR 1-3 вариабельных областей тяжелой цепи и легкой цепи анти-PD-L1 гуманизированного антитела hAAG5D8 (определение способом IMGT)
Тяжелая цепь | CDR1 | SEQ ID NO:1 | GFSLSRYS |
CDR2 | SEQ ID NO:2 | IWGVGTT | |
CDR3 | SEQ ID NO:3 | ARNWGTADYFDY | |
Легкая цепь | CDR1 | SEQ ID NO:4 | KSVHTSGYSY |
CDR2 | SEQ ID NO:5 | LAS | |
CDR3 | SEQ ID NO:6 | QHSGELPYT |
[0060] Вариабельная область тяжелой цепи анти-PD-L1 гуманизированного антитела hAAG5D8 содержит аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 31):
QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGFSLS RYSVHWIRQP PGKGLEWLGM IWGVGTTDYN 60 SALKSRLTIS KDTSKNQFSL KLSSVTAADT AVYYCARNWG TADYFDYWGQ GTTVTVSSAS 120 |
[0061] Вариабельная область легкой цепи анти-PD-L1 гуманизированного антитела hAAG5D8 содержит аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 32):
DIVLTQSPAS LAVSPGQRAT ITCRASKSVH TSGYSYMHWY QQKPGQPPKL LIYLASNLES 60 GVPARFSGSG SGTDFTLTIN PVEANDTANY YCQHSGELPY TFGGGTKVEI KRT 113 |
[0062] Аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи анти-PD-L1 гуманизированного антитела hAAG5D8 приведены в SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34, соответственно.
[0063] Пример 2. Сравнение аффинности hAAG5D8 в отношении PD-L1 человека
[0064] Аффинность hAAG5D8 в отношении PD-L1 человека определяли методом биослойной интерферометрии (БСИ). В лунки A-D в колонках 1, 3 и 5 черного 96-луночного планшета добавляли раствор PBS в качестве базовой линии 1, базовой линии 2 и раствора диссоциации, соответственно. В лунки в колонке 2 добавляли раствор PD-L1 (R&D company), в колонке 4 раствор hAAG5D8 (концентрации были следующими: 100 нМ, 50 нМ, 25 нМ и 0 нМ), в колонке 10 раствор имидазола, в колонке 11 воду и в колонке 12 раствор сульфата никеля. В эксперименте использовали зонд Ni-NTA (Fortebio). Сначала зонд погружали в лунки A-D колонки 1 на 180 секунд для стабилизации базовой линии. Затем зонд Ni-NTA погружали в лунки A-D колонки 2 на 300 секунд для иммобилизации PD-L1 на зонде. Затем зонд Ni-NTA погружали в лунки A-D колонки 3 на 120 секунд для стабилизации базовой линии. Затем зонд Ni-NTA погружали в лунки A-D колонки 4 на 600 секунд, предоставляя возможность для связывания hAAG5D8 с иммобилизованным белком PD-L1 в разных концентрациях на зонде. Затем зонд Ni-NTA погружали в лунки A-D колонки 5 на 600 секунд для создания возможности спонтанной диссоциации антитела. И наконец, зонд Ni-NTA погружали в лунки A-D колонок 10, 11 и 12 последовательно для вынужденной диссоциации иммобилизованного PD-L1 от зонда. Анализ данных проводили при помощи программы Data analysis 7.0, получая константу равновесия связывания и диссоциации KD.
[0065] Результаты и выводы: Значение константы равновесия связывания и диссоциации KD и кривая аффинного связывания и диссоциации hAAG5D8 с PD-L1 человека представлены в Таблице 7 и на ФИГ. 1, соответственно. Экспериментальные результаты показывают, что аффинность hAAG5D8 для PD-L1 человека намного выше, чем аффинность PD-1 для PD-L1, равная 8,2 мкМ (Molecular Interactions of Antibody Drugs Targeting PD-1, PD-L1, and CTLA-4 in Immuno-Oncology, Hyun Tae Lee et al., Molecules 2019, 24, 1190; doi:10.3390/molecules24061190, 26 марта 2019 г., последний параграф на странице 4).
Таблица 7 - Кинетическая константа аффинности связывания анти-PD-L1 антитела с PD-L1
Основной параметр | KD(M) |
Кинетическая константа аффинности | 7,62E-11±3,32E-11 |
[0066] Пример 3. Конкуренция между hAAG5D8 и PD-1 человека за связывание
[0067] Способность hAAG5D8 конкурировать с PD-1 за связывание с PD-L1 тестировали методом ELISA. PD-L1 (Fc-тег) разбавляли до концентрации 1 мкг/мл буфером для нанесения (6 мМ Na2CO3, 14 мМ NaHCO3), а затем добавляли 100 мкл в каждую лунку, с последующей инкубацией в течение ночи при 4°C. Затем планшет промывали PBST и добавляли 250 мкл блокирующего раствора (3% БСА/PBST) в каждую лунку для блокирования на 2 ч при 25°C. Затем планшет промывали PBST и добавляли 50 мкл PD-1 человека в концентрации 6 мкг/мл, а также по 50 мкл серийно разбавленного раствора hAAG5D8 (в концентрации 8000 нг/мл, 2000 нг/мл, 500 нг/мл, 250 нг/мл, 125 нг/мл, 62,5 нг/мл, 31,25 нг/мл, 6,25 нг/мл или 1,25 нг/мл) в каждую лунку, с последующим тщательным перемешиванием и инкубацией при 25°C в течение 2 ч. Затем планшет промывали PBST и добавляли 100 мкл меченого ферментом вторичного антитела (антитело козы против IgG-Fc человека, конъюгированное с HRP в разведении 1:5000) в каждую лунку, с последующей инкубацией при 25°C в течение 1 ч. И наконец, добавляли реактивы для развития окраски и снимали показания при 450 нм. Значения EC50 рассчитывали, используя четырехпараметрическое уравнение для подгонки кривой.
[0068] Результаты и выводы: Значение EC50 и кривая конкурентного связывания hAAG5D8 с PD-L1 человека представлены в Таблице 8 и на ФИГ. 2, соответственно. Экспериментальные результаты показывают, что hAAG5D8 может эффективно блокировать связывание PD-1 с PD-L1.
Таблица 8 - Конкуренция между hAAG5D8 и PD-1 человека за связывание (пМ, среднее ± SD)
Основной параметр | Анти-PD-L1 антитело |
EC50 конкуренции с PD-1 человека | 715,56±61,58 |
[0069] Пример 4. Аффинность hAAG5D8 для различных других белков семейства B7
[0070] Аффинность hAAG5D8 для различных других белков семейства B7 (PD-L1, PD-L2, B7-H3, PD-1 и CD80) тестировали методом ELISA. hAAG5D8 разбавляли до концентрации 100 мкг/мл буфером для нанесения (6 мМ Na2CO3, 14 мМ NaHCO3), а затем добавляли 100 мкл в каждую лунку, с последующей инкубацией в течение ночи при 4°C. Затем планшет промывали PBST и добавляли 250 мкл блокирующего раствора (3% БСА/PBST) в каждую лунку для блокирования на 2 ч при 25°C. Затем планшет промывали PBST и добавляли 100 мкл белкового образца (rhPD-L1, rhPD-L2, rhB7-H3, rhPD-1 или rhCD80) в концентрации 5 мкг/мл в каждую лунку, с последующей инкубацией при 25°C в течение 2 ч. Затем планшет промывали PBST и добавляли 100 мкл меченого ферментом вторичного антитела (вторичное антитело анти-His-тег в разведении 1:5000) в каждую лунку, с последующей инкубацией при 25°C в течение 1 ч. И наконец, планшет промывали PBST и добавляли реактивы для развития окраски. Показания снимали при 450 нм.
[0071] Результаты и выводы: Связывание hAAG5D8 с белками семейства B7 (PD-L1, PD-L2, B7-H3, PD-1 или CD80) показано на ФИГ. 3. Результаты свидетельствуют, что hAAG5D8 может специфически связывать PD-L1, но не PD-L2, и hAAG5D8 не связывает другие белки того же семейства с аналогичными функциями (B7-H3, PD-1 и CD80). Соответственно, hAAG5D8 связывает PD-L1 с чрезвычайно высокой специфичностью.
[0072] Пример 5. Исследование терапевтической эффективности hAAG5D8 в отношении подкожно трансплантированной мышам NCG человеческой опухоли немелкоклеточного рака легкого HCC827
[0073] Двенадцати самцам мышей NCG с высокой степенью иммунодефицита в возрасте 4-5 недель, с массой тела 20-26 г (приобретенным в Центре исследований на животных моделях Университета Нанкина) вводили инъекцией 100 мкл человеческих мононуклеарных клеток периферической крови МКПК (1×107 клеток/100 мкл, выделенных из крови здоровых доноров) через хвостовую вену. Через три дня после инъекции в хвостовую вену мышам инокулировали подкожно человеческие клетки немелкоклеточного рака легкого HCC827 (ATCC) в правый бок. Через три дня после инокуляции (средний объем опухоли 57 мм3) мышей случайным образом распределяли в 3 группы (группу A-1, группу A-2 и группу A-3), по 4 мыши в каждую группу, и вводили препараты в соответствии со схемой введения доз, приведенной в Таблице 9. В данном эксперименте использовали как положительный, так и отрицательный, контроль, при этом положительным контролем был MPDL3820A (то есть, атезолизумаб), и отрицательным контролем был IgG1 человека (Crown Bioscience (Taicang) Co., Ltd., лот № AB160083). В день четвертого введения (то есть, день 13 после инокуляции опухолевых клеток) экспериментальных мышей подвергали эвтаназии с использованием CO2, и опухоли извлекали. Рассчитывали относительное ингибирование опухоли (TGIRTV) и ингибирование роста опухоли (TGΔTV) для оценки эффективности лекарственного средства.
[0074] Формула для расчета относительного ингибирования опухоли: TGIRTV=1 - TRTV/CRTV (%). (TRTV представляет собой относительный объем опухоли (TV) в группе положительного контроля или группе лечения в конкретный момент времени, CRTV представляет собой относительный объем опухоли в группе отрицательного контроля в конкретный момент времени, TRTV/CRTV представляет собой выраженное в процентах значение относительного объема опухоли в группе положительного контроля или группе лечения и относительного объема опухоли в группе отрицательного контроля, RTV=Vt/V0, V0 представляет собой объем опухоли у животного в момент формирования групп, и Vt представляет собой объем опухоли у животного после лечения.)
[0075] Формула для расчета ингибирования роста опухоли: TGIΔTV% = (1 - ΔT/ΔC) × 100%. (ΔT=средний объем опухоли в группе положительного контроля или группе лечения в конкретный момент времени - средний объем опухоли в группе положительного контроля или группе лечения в момент начала введения, и ΔC=средний объем опухоли в группе отрицательного контроля в конкретный момент времени - средний объем опухоли в группе отрицательного контроля в момент начала введения).
[0076] Результаты и выводы: Опухоль-ингибирующие эффекты hAAG5D8 в модели человеческого немелкоклеточного рака легкого представлены в Таблице 10 и на ФИГ. 4, соответственно. В Таблице 10 показано относительное ингибирование опухоли и ингибирование роста опухоли за счет hAAG5D8 в случае человеческих клеток немелкоклеточного рака легкого, и на ФИГ. 4 показаны кривые опухолевого роста после введения. Экспериментальные результаты показывают, что hAAG5D8 оказывает значительное ингибирующее действие на немелкоклеточный рак легкого человека.
Таблица 9 - Схема введения доз при изучении опухоль-ингибирующей активности hAAG5D8 в отношении немелкоклеточного рака легкого человека
Группа | Субъект | Лекарственное средство | Доза (мг/кг) | Путь введения | Объем | Периодичность |
1 | Группа A-1 | IgG1 человека | 5 | Внутривенная инъекция | 10 мкл/г | Два раза в неделю × 4 раза |
2 | Группа A-2 | MPDL3820A | 5 | Внутривенная инъекция | 10 мкл/г | Два раза в неделю × 4 раза |
3 | Группа A-3 | hAAG5D8 | 5 | Внутривенная инъекция | 10 мкл/г | Два раза в неделю × 4 раза |
Примечание: Группа 1 представляет собой группу отрицательного контроля, группа 2 представляет собой группу положительного контроля, и группа 3 представляет собой группу лечения.
Таблица 10 - Относительное ингибирование опухоли и ингибирование роста опухоли за счет hAAG5D8 в случае человеческих опухолевых клеток немелкоклеточного рака легкого
Лекарственное средство | TGIRTV (%) | TGIΔTV (%) |
IgG1 человека (5 мг/кг) | -- | -- |
MPDL3820A (5 мг/кг) | 25,3 | 49,5 |
hAAG5D8 (5 мг/кг) | 35,9 | 63,3 |
[0077] Пример 6. Исследование терапевтической эффективности hAAG5D8 в отношении подкожно трансплантированной мышиной опухоли колоректального рака MC38 у трансгенных мышей
[0078] Каждой из 30 трансгенных по PD-1 человека самок мышей C57 (Центр проведения экспериментов на животных Университета Тунцзы) подкожно имплантировали 3×106 мышиных клеток колоректального рака, экспрессирующих PD-L1 человека (Университет Тунцзы, код: MC38-hPD-L1), в левый бок. Когда объем опухолей достигал примерно 100 мм3, мышей случайным образом распределяли в 5 групп: группу C-1 (группа отрицательного контроля, PBS, 6 мышей), группу C-2 (группа положительного контроля, атезолизумаб, 3 мг/кг, 6 мышей), группу C-3 (группа введения hAAG5D8, 1 мг/кг, 6 мышей), группу C-4 (группа введения hAAG5D8, 3 мг/кг, 6 мышей) и группу C-5 (группа введения hAAG5D8, 9 мг/кг, 6 мышей). Внутрибрюшинное введение мышам выполняли 2 раза в неделю, всего 5 раз. Объем опухолей измеряли два раза в неделю до 16-го дня с начала введения.
[0079] Формулы для расчетов:
[0080] Объем опухоли: TV=D1×D22/2, где D1 и D2 представляют собой длинный диаметр опухоли и короткий диаметр опухоли, соответственно.
[0081] Относительный объем опухоли: RTV=TVT/TV1, где TV1 представляет собой объем опухоли до введения, и TVT представляет собой объем опухоли при каждом измерении.
[0082] Относительная пролиферация опухоли: T/C (%) = TRTV/CRTV × 100%, где TRTV представляет собой RTV в группе лечения или группе положительного контроля, и CRTV представляет собой RTV в группе отрицательного контроля.
[0083] Относительное ингибирование опухоли: TGIRTV (%) = (1 - TRTV/CRTV) × 100%.
[0084] Результаты и выводы: Опухоль-ингибирующие эффекты hAAG5D8 на мышиный колоректальный рак представлены в Таблице 11 и на ФИГ. 5. Результаты показывают, что hAAG5D8 в концентрации 3 мг/кг, или выше, оказывает значительное опухоль-ингибирующее действие на подкожно трансплантированные мышиные опухоли колоректального рака. В дозе 3 мг/кг опухоль-ингибирующий эффект анти-PD-L1 антитела значительно превосходил эффект атезолизумаба.
Таблица 11 - Изменение объемов опухолей у несущих опухоль мышей после введения
Группа | Доза (мг/кг) | Объем опухоли TV(мм3) | TRTV/CRTV (%) | TGIRTV (%) | |
Д0 | Д16 | ||||
PBS | -- | 99,9±13,2 | 1974,2±413,2 | -- | -- |
атезолизумаб | 3 | 95,9±16,8 | 1111,6±435,2* | 53 | 47 |
hAAG5D8 | 1 | 95,5±9,8 | 1138,8±144,9* | 64 | 36 |
hAAG5D8 | 3 | 90,7±12,4 | 664,8±92,0** | 39 | 61 |
hAAG5D8 | 9 | 91,2±15,9 | 319,1±190,4** | 14 | 86 |
Примечание: День введения обозначен Д0; *P<0,05, **P<0,01 против PBS.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. CHEN L, FLIES D B. Molecular mechanisms of T cell co-stimulation and co-inhibition [J]. Nature reviews Immunology, 2013, 13(4): 227-42.
2. OHAEGBULAM K C, ASSAL A, LAZAR-MOLNAR E, et al. Human cancer immunotherapy with antibodies to the PD-1 and PD-L1 pathway [J]. Trends in molecular medicine, 2015, 21(1): 24-33.
3. ISHIDA M, IWAI Y, TANAKA Y, et al. Differential expression of PD-L1 and PD-L2, ligands for an inhibitory receptor PD-1, in the cells of lymphohematopoietic tissues [J]. Immunology letters, 2002, 84(1): 57-62.
4. TAUBE J M, ANDERS R A, YOUNG G D, et al. Colocalization of inflammatory response with B7-h1 expression in human melanocytic lesions supports an adaptive resistance mechanism of immune escape [J]. Science translational medicine, 2012, 4(127): 127ra37.
5. TSENG S Y, OTSUJI M, GORSKI K, et al. B7-DC, a new dendritic cell molecule with potent costimulatory properties for T cells [J]. The Journal of experimental medicine, 2001, 193(7): 839-46.
6. BUTTE M J, KEIR M E, PHAMDUY T B, et al. Programmed death-1 ligand 1 interacts specifically with the B7-1 costimulatory molecule to inhibit T cell responses [J]. Immunity, 2007, 27(1): 111-22.
7. CHENG X, VEVERKA V, RADHAKRISHNAN A, et al. Structure and interactions of the human programmed cell death 1 receptor [J]. The Journal of biological chemistry, 2013, 288(17): 11771-85.
8. An Liu, Discovery on small molecular inhibitors of PD-1/PD-L1 pathway [D], Jilin: Jilin University School of Pharmaceutical Sciences, 2016, 15
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> РЕМЕДЖЕН КО., ЛТД.
<120> анти-PD-L1 антитело и его применение
<130> CP0020-TW-0398
<160> 33
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 1
Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr Ser
1 5
<210> 2
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 2
Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr
1 5
<210> 3
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 3
Ala Arg Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 4
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 4
Lys Ser Val His Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr
1 5 10
<210> 5
<211> 3
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 5
Leu Ala Ser
1
<210> 6
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 6
Gln His Ser Gly Glu Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 7
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 7
Arg Tyr Ser Val His
1 5
<210> 8
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 8
Met Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 9
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 9
Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 10
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 10
Arg Ala Ser Lys Ser Val His Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His
1 5 10 15
<210> 11
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 11
Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 12
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 12
Gln His Ser Gly Glu Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 13
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 13
Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
1 5
<210> 14
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 14
Trp Gly Val Gly Thr
1 5
<210> 15
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 15
Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 16
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 16
Arg Ala Ser Lys Ser Val His Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His
1 5 10 15
<210> 17
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 17
Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 18
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 18
Gln His Ser Gly Glu Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 19
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 19
Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr Ser Val His
1 5 10
<210> 20
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 20
Met Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr Asp
1 5
<210> 21
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 21
Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 22
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 22
Arg Ala Ser Lys Ser Val His Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His
1 5 10 15
<210> 23
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 23
Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 24
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 24
Gln His Ser Gly Glu Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 25
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 25
Ser Arg Tyr Ser Val His
1 5
<210> 26
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 26
Trp Leu Gly Met Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr Asp
1 5 10
<210> 27
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 27
Ala Arg Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp
1 5 10
<210> 28
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 28
His Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr
1 5 10
<210> 29
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 29
Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu
1 5 10
<210> 30
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 30
Gln His Ser Gly Glu Leu Pro Tyr
1 5
<210> 31
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 31
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120
<210> 32
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 32
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val His Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln His Ser Gly
85 90 95
Glu Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr
<210> 33
<211> 450
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 33
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Arg Tyr
20 25 30
Ser Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Met Ile Trp Gly Val Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asn Trp Gly Thr Ala Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 34
<211> 220
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 34
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val His Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn
65 70 75 80
Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln His Ser Gly
85 90 95
Glu Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
115 120 125
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
130 135 140
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
145 150 155 160
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
180 185 190
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
195 200 205
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<---
Claims (60)
1. Выделенное анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи,
где вариабельная область тяжелой цепи и/или вариабельная область легкой цепи содержат последовательность CDR, идентичную последовательности CDR антитела, определенного следующей последовательностью:
(1) аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:31; и
(2) аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:32.
2. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где:
(1) в вариабельной области тяжелой цепи
CDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, 7, 13, 19 или 25;
CDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2, 8, 14, 20 или 26;
CDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3, 9, 15, 21 или 27; и
(2) в вариабельной области легкой цепи
CDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4, 10, 16, 22 или 28;
CDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5, 11, 17, 23 или 29;
CDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6, 12, 18, 24 или 30.
3. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.2, где:
(1) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:1-3 и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:4-6; или
(2) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:7-9 и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:10-12; или
(3) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:13-15 и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:16-18; или
(4) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:19-21 и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:22-24; или
(5) CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:25-27 и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:28-30.
4. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-3, где
CDR 1-3 вариабельной области тяжелой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:1-3; и
CDR 1-3 вариабельной области легкой цепи содержат аминокислотные последовательности SEQ ID NO:4-6.
5. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-4, где:
(1) вариабельная область тяжелой цепи содержит последовательность SEQ ID NO:31; и
(2) вариабельная область легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO:32.
6. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.5, где:
(1) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:31; и
(2) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:32.
7. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.6, где:
(1) тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:33; и
(2) легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:34.
8. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7, где антитело представляет собой моноклональное антитело, химерное антитело или гуманизированное антитело.
9. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8, которое представляет собой гуманизированное моноклональное антитело.
10. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-9, дополнительно содержащее константную область человеческого или мышиного антитела.
11. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.10, где константную область выбирают из константной области IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4.
12. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.11, где константная область представляет собой константную область IgG1, IgG2A или IgG2B.
13. Выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-12.
14. Сочетание выделенных полинуклеотидов, которое кодирует антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-12 и содержит
полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-12, и
полинуклеотид, кодирующий легкую цепь антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-12.
15. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п.13.
16. Клетка-хозяин для получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-12, где клетка содержит вектор по п.15.
17. Клетка-хозяин по п.16, которая представляет собой прокариотическую клетку, эукариотическую клетку, дрожжевую клетку, клетку млекопитающего, клетку E. coli или клетку CHO, клетку NS0, клетку Sp2/0, клетку BHK.
18. Конъюгат антитело-лекарственное средство для лечения или профилактики PD-L1-связанной злокачественной опухоли, содержащий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-12 и лекарственный токсин.
19. Конъюгат антитело-лекарственное средство по п.18, где лекарственный токсин выбран из химических средств, токсинов, полипептидов, ферментов, изотопов, цитокинов, антител или других биологически активных веществ либо их смеси, которые могут ингибировать рост клеток или уничтожать клетки непосредственно, опосредованно или путем активации иммунного ответа организма на лечение опухолей, предпочтительно интерлейкинов, факторов некроза опухолей, хемокинов, наночастиц, MMAE, MMAF, DM1, DM4, калихеамицина, дуокармицина и доксорубицина.
20. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики PD-L1-связанной злокачественной опухоли, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-12 и/или конъюгат по п.18 или 19 и фармацевтически приемлемый носитель.
21. Способ производства анти-PD-L1 антитела, включающий культивирование клетки-хозяина по п.16 или 17 в условиях, подходящих для экспрессии вектора, кодирующего анти-PD-L1 антитело или антигенсвязывающий фрагмент, и извлечение антитела или фрагмента.
22. Способ усиления функции T-клеток, включающий доставку эффективного количества фармацевтической композиции по п.20 к дисфункциональным T-клеткам.
23. Способ лечения T-клеточной дисфункции, включающий введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.20 пациенту с T-клеточной дисфункцией.
24. Способ по п.23, где опухолевая иммунизация вызвана раком, выбранным из группы, состоящей из рака молочной железы, рака легкого, рака толстого кишечника, рака яичника, меланомы, рака мочевого пузыря, рака почки, рака печени, рака слюнных желез, рака желудка, глиомы, рака щитовидной железы, рака тимуса, эпителиального рака, рака головы и шеи, рака желудка и рака поджелудочной железы.
25. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-12, полинуклеотида по п.13, сочетания полинуклеотидов по п.14, вектор по п.15, конъюгата антитело-лекарственное средство по п.18 или 19 или фармацевтической композиции по п.20 в производстве лекарственного препарата, используемого для лечения или предотвращения PD-L1-связаного рака.
26. Применение по п.25, где рак представляет собой солидную опухоль.
27. Применение по п.26, где солидная опухоль представляет собой рак легкого, колоректальный рак, рак молочной железы, рак яичника, меланому, рак мочевого пузыря, уротелиальный рак, рак почки, рак печени, рак слюнных желез, рак желудка, глиомы, рак щитовидной железы, рак тимуса, эпителиальный рак, рак головы и шеи, рак желудка, рак поджелудочной железы, карциному из клеток Меркеля.
28. Применение по п.27, где рак легкого представляет собой немелкоклеточный рак легкого.
29. Применение по п.28, где рак молочной железы представляет собой трижды негативный рак молочной железы.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910805440.7 | 2019-08-29 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021108266A RU2021108266A (ru) | 2022-09-29 |
RU2783685C2 true RU2783685C2 (ru) | 2022-11-15 |
Family
ID=
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2523894C2 (ru) * | 2007-04-18 | 2014-07-27 | Янссен Альцгеймер Иммунотерапи | Предупреждение и лечение церебральной амилоидной ангиопатии |
RU2580045C2 (ru) * | 2009-12-24 | 2016-04-10 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела человека против ангиопоэтин-подобного белка 4 человека |
WO2017058859A1 (en) * | 2015-09-29 | 2017-04-06 | Celgene Corporation | Pd-1 binding proteins and methods of use thereof |
WO2018052818A1 (en) * | 2016-09-16 | 2018-03-22 | Henlix, Inc. | Anti-pd-1 antibodies |
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2523894C2 (ru) * | 2007-04-18 | 2014-07-27 | Янссен Альцгеймер Иммунотерапи | Предупреждение и лечение церебральной амилоидной ангиопатии |
RU2580045C2 (ru) * | 2009-12-24 | 2016-04-10 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Антитела человека против ангиопоэтин-подобного белка 4 человека |
WO2017058859A1 (en) * | 2015-09-29 | 2017-04-06 | Celgene Corporation | Pd-1 binding proteins and methods of use thereof |
WO2018052818A1 (en) * | 2016-09-16 | 2018-03-22 | Henlix, Inc. | Anti-pd-1 antibodies |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2693661C2 (ru) | Антитело против pdl-1, его фармацевтическая композиция и применение | |
EP3882275B1 (en) | Anti-pd-1 and anti-vegfa bifunctional antibody, pharmaceutical composition thereof and use thereof | |
US11518815B2 (en) | Anti-ROR1 antibodies and methods of making and using thereof | |
CN111944050B (zh) | 一种抗b7-h3抗体及其应用 | |
EP4353745A1 (en) | A group of b7h3 monoclonal antibodies and medical use thereof | |
CN110407941A (zh) | Cd39的高亲和力抗体及其用途 | |
CA3114467C (en) | Anti pd-l1 antibody and use thereof | |
US20200392238A1 (en) | Human tnfrsf25 antibody | |
WO2023151693A1 (zh) | 包含抗tigit抗体和抗pd-1-抗vegfa双特异性抗体的药物组合物及用途 | |
CN115812081A (zh) | 抗ctla-4抗体及其用途 | |
US20230257465A1 (en) | ANTI-PDL1 x EGFR BISPECIFIC ANTIBODY | |
WO2019238074A1 (zh) | 一种高亲和力高生物活性的lag-3抗体及其应用 | |
WO2023001303A1 (zh) | 药物组合物及用途 | |
EP4234579A1 (en) | Anti-cd73 antibody and use thereof | |
RU2783685C2 (ru) | Анти-pd-l1 антитело и его применение | |
CN114316045B (zh) | 抗pd-l1抗体及其用途 | |
US20230151090A1 (en) | Composition comprising an ige antibody | |
WO2023246247A1 (zh) | 药物组合物及其用途 | |
US20240084026A1 (en) | Anti-4-1bb antibodies and methods of making and using thereof | |
CA3155172A1 (en) | Combination of anti-garp antibody and immunomodulator |