RU2781949C1 - Способ выведения солеустойчивого сорта риса - Google Patents
Способ выведения солеустойчивого сорта риса Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781949C1 RU2781949C1 RU2021127970A RU2021127970A RU2781949C1 RU 2781949 C1 RU2781949 C1 RU 2781949C1 RU 2021127970 A RU2021127970 A RU 2021127970A RU 2021127970 A RU2021127970 A RU 2021127970A RU 2781949 C1 RU2781949 C1 RU 2781949C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hybrids
- generation
- salt
- rice
- salt tolerance
- Prior art date
Links
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 title claims abstract description 56
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 title claims abstract description 56
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 title claims abstract description 41
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 23
- 230000001488 breeding Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 title 1
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims abstract description 56
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 claims abstract description 33
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 29
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 16
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 13
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000004698 Polyethylene (PE) Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 230000002860 competitive Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000009331 sowing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000005070 ripening Effects 0.000 claims abstract 7
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000005562 seed maturation Effects 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 abstract 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 101700007567 PIL13 Proteins 0.000 description 4
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 229920000033 CRISPR Polymers 0.000 description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 2
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 2
- 238000010354 CRISPR gene editing Methods 0.000 description 1
- 108010082319 CRISPR-Associated Protein 9 Proteins 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N Ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 1
- 240000002582 Oryza sativa Indica Group Species 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structures Anatomy 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003621 irrigation water Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000001902 propagating Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу выведения солеустойчивого сорта риса. Способ выведения солеустойчивого сорта риса включает в себя следующие этапы: А) подбирают родительские формы с геном солеустойчивости и с высокой урожайностью, скрещивают их для получения гибридов; Б) анализируют гибриды со второго F2 до шестого поколения F6 на наличие гена Saltol методом ПЦР-анализа, оставляют доминантные гомозиготы и гетерозиготы; В) все гибридные формы, начиная с гибридов второго поколения F2 и заканчивая гибридами шестого поколения F6, подвергают строгому фенотипическому, генотипическому и лабораторному отбору под воздействием стресса с учетом хозяйственно-ценных признаков; отбирают лучшие линии для репродуцирования следующего поколения; Г) все гибриды каждый год изучают на солеустойчивость лабораторным способом: в рулонах из фильтровальной бумаги и полиэтилена, в 1,5% солевом растворе NaCl; отбирают лучшие образцы с солеустойчивостью свыше 70%; Д) в гибридах четвертого поколения F4 изучают солеустойчивость семян гибридов риса от посева до созревания в условиях микрочеков, которые представляют собой наполненную почвой ёмкость размером 300 × 100 см, изолированную полиэтиленовой плёнкой от протекания для сохранения стабильных жестких условий – 1,5% концентрации соли в почве; после созревания проводят биометрический анализ растений, отбирают все выжившие гибриды для репродуцирования следующего поколения в обычных рисовых чеках; Ж) все семена гибридных форм пятого поколения F5 после фенотипического и генотипического отборов с помощью ПЦР-анализа проходят отбор на 1,5% засолении NaCl рулонным способом, самые лучшие проростки с солеустойчивостью выше 50% и в которых присутствует искомый ген солеустойчивости переносят в стаканчики с почвой и в виде рассады пересаживают в рисовые чеки; З) для отбора устойчивых к засолению форм риса в период цветения и созревания семян гибриды шестого поколения F6 извлекают из рисовых чеков в период трубкования и помещают в ящики с фиксированной концентрацией NaCl 1%, при этом растения шестого поколения F6, сформировавшие максимальное количество зёрен в таких стрессовых условиях, как солевой шок перед цветением, являются самыми устойчивыми к солевому стрессу в период цветения и созревания семян; И) гибриды шестого поколения F6 формируют максимально чистые линии, готовые к размножению и испытанию в контрольном питомнике и конкурсном сортоиспытании, а также дальнейшему государственному сортоиспытанию. Изобретение позволяет повысить урожайность риса при его возделывании на засоленных почвах и при орошении водой с массовой долей солей до 1,5%. 6 ил.
Description
Заявляемое изобретение относится к новым способам выращивания растений, а именно к способу выведения солеустойчивого сорта риса.
Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение урожайности риса при его возделывании на засоленных почвах и при орошении водой с массовой долей солей до 1,5%.
За счет скрещивания сортов риса разного экологического происхождения, относящихся к разным подвидам, происходит объединение генов, контролирующих признаки высокой солеустойчивости и урожайности.
Солеустойчивый рис может расти на засоленных почвах, таким образом, решается проблема возделывания риса на малопригодных землях. Урожайность повышается за счет устойчивости риса к неблагоприятным условиям, в том числе к наличию высокой концентрации соли в воде для полива.
На данный момент известны следующие способы, наиболее схожие с заявляемым:
1. Метод быстрого размножения солеустойчивых сортов риса по патенту CN103262788. Данное изобретение относится к способу быстрого размножения солеустойчивого сорта риса и относится к технической области селекции растений. Способ быстрого размножения включает следующие стадии: гибридизацию сортов и проведение ускоренного размножения гибридов; проведение идентификации на стадии проращивания семян в поколении F1 и выявление солеустойчивых зародышей в условиях лаборатории и прибрежной засоленной почвы с концентрацией солевого раствора 0,4-0,5% для скрининга отдельных растений риса. Растения с урожайностью и качеством выше, чем у Yancheng 156, пересаживаются отдельно в естественных условиях. Далее происходит выборочное традиционное размножение нового толерантного к засолению сорта риса индика с солеустойчивостью 0,4-0,5%, высокой урожайностью и хорошим качеством риса, названного солеустойчивым рисом 3931. Отличается от заявленного способа тем, что использует только генетический метод - для уже выведенных сортов, в то время как заявленный способ нацелен на первоначальное выведение солеустойчивых сортов риса.
2. Применение гена OsPIL13 в повышении солеустойчивости риса по патенту CN105002212. Изобретение раскрывает применение гена OsPIL13 для улучшения устойчивости риса к солевому стрессу. Специфический фрагмент гена OsPIL13 сорта риса Nipponbare принимается в качестве последовательности нуклеотидов, которая переносится в рис, уровень экспрессии гена OsPIL13 понижается, а солеустойчивость повышается. В условиях солевого стресса (200 мМ NaCl) выживаемость контрольных проростков риса составляет около 11,0%, а трансгенных - 71-90%. Новые генные ресурсы представляются как возможность выращивания солеустойчивых сортов сельскохозяйственных культур с высокой устойчивостью к данному стрессору, а также предоставляется поддержка для изучения солеустойчивости у других видов зерновых культур. Данный способ отличается от заявляемого тем, что использует метод редактирования генов, требующий использования дорогостоящего оборудования, которое не доступно большинству научных центров и сельских хозяйств при массовом выведения сортов риса.
3. Метод селекции для направленной и эффективной селекции солеустойчивых сортов риса по патенту CN109207509. Настоящее изобретение относится к способу направленной и эффективной селекции сортов риса с высокой солеустойчивостью и гетерозисом. Способ основан на методике редактирования гена CRISPR/Cas9 в сочетании с методами повышения гетерозиса. Метод включает выбор конкретной последовательности-мишени в соответствии с последовательностью экзонов риса OsRR22, одновременное редактирование родителей гибридного риса, создание мутантных линий со значительно улучшенной солеустойчивостью в качестве превосходных солеустойчивых родителей, а затем проведение теста на скрещивание и селекцию новых гибридных сортов риса с высокой солеустойчивостью и сильным гетерозисом. Отличается от заявляемого способа тем, что использует более низкую концентрацию соли 0,5%, что не позволяет отобрать наиболее устойчивые к солевому стрессу образцы и повысить урожайность, а также использует дорогостоящий метод редактирования генов.
Осуществление заявляемого способа выведения солеустойчивого сорта риса иллюстрируется следующими фигурами:
фиг. 1 Закладка семян риса на солеустойчивость рулонным способом;
фиг. 2 Сравнение проростков риса в соленой и дистиллированной воде для анализа солеустойчивости;
фиг. 3 Образцы микрочеков с размеченными рядками риса;
фиг. 4 Изучение солеустойчивости риса в условиях микрочеков (контрольный/опытный образец);
фиг. 5 Отбор лучших проростков риса на соленом фоне в стаканчики с целью дальнейшей пересадки в чеки в виде рассады;
фиг. 6 Изучение солеустойчивости риса в период трубкования;
Суть заявляемого способа состоит в следующем: сначала подбирают родительские формы с геном солеустойчивости и высокой урожайностью, далее их скрещивают и из каждой гибридной комбинации все линии пересевают из года в год, подвергая массовым отборам: фенотипическим, генотипическим, лабораторным под воздействием стресса. Каждая линия из первоначальной комбинации изучается 7-8 лет, пока не выделится лучшая по хозяйственно-ценным и генотипическим признакам, с урожайностью выше стандартного сорта. Такая линия имеет право называться солеустойчивым сортом риса.
Скрещивают родительские формы: Российский высокоурожайный скороспелый сорт и Зарубежный сорт с геном солеустойчивости Saltol. Используют минимум три сорта донора солеустойчивости. Гибридизацию проводят твел-методом в тепличных условиях. Гибриды первого поколения F1 выращивают в поле.
Гибриды второго поколения F2 анализируют на наличие гена Saltol методом ПЦР-анализа. При проведении маркерного анализа используют 2 пары маркеров, сцепленных с локусом солеустойчивости: RM493 и RM7075.
Амплификацию проводят в термоциклере PalmCyclerCorbettResearch. ПЦР продукты разделяют с помощью электрофореза в 2% агарозном геле с бромистым этидием.
Для дальнейшей работы оставляют доминантные гомозиготы и гетерозиготы, рецессивные гомозиготы выбраковывают, поскольку они не несут искомого гена. Все гибридные формы, начиная с гибридов второго поколения F2 и заканчивая гибридами шестого поколения F6, подвергают строгому фенотипическому отбору с учетом хозяйственно-ценных признаков.
Параллельно каждый год все гибриды изучают на солеустойчивость лабораторным способом - в рулонах из фильтровальной бумаги и полиэтилена 1, в 1,5% солевом растворе NaCl. На контроле семена проращивают в дистиллированной воде. Все растения выращивают в термостате при температуре 25°С, влажности 70%. Через 10 дней определяют всхожесть, измеряют длину и массу проростков риса, рассчитывают процент солеустойчивости 2.
Солеустойчивость определяют как соотношение длины ростков и корешков риса на солевом растворе к таковым показателям на дистиллированной воде, выраженное в процентах. Для отбора лучших форм риса опираются не только на относительные величины, но и на абсолютные. Отбирают лучшие образцы с солеустойчивостью свыше 70%.
Таким образом, изучают гибриды третьего поколения F3 и четвертого поколения F4. В гибридах четвертого поколения F4 ключевым моментом является изучение солеустойчивости семян гибридов риса от посева до созревания в условиях микрочеков 3. Гибриды риса высевают в почву микрочеков. Микрочеки представляют собой наполненную почвой емкость размером 300×100 см, изолированную полиэтиленовой пленкой от протекания для сохранения стабильных жестких условий - 1,5% концентрации соли в почве микрочека.
Схема опыта включает в себя: контроль - вода без засоления, опыт - засоление 0,5% раствором NaCl. Полив производится водопроводной водой до фиксированного уровня 10 см. Повторность двухкратная, в микрочеке размещают по 25 рядов с 50 семенами риса в каждом ряду.
После созревания проводят биометрический анализ растений по следующим признакам: высота растения, масса снопа с делянки, кустистость, длина метелки, масса метелки, количество выполненных зерен, количество пустых колосков, общее число колосков, фертильность.
Отбирают все выжившие гибриды и пересевают для репродуцирования следующего поколения в обычных рисовых чеках. Лучшие по общему индексу солеустойчивости гибриды риса отбирают в селекционный питомник в качестве кандидатов в будущие солеустойчивые сорта.
Все семена гибридных форм пятого поколения F5 после фенотипического отбора проходят генотипический отбор с помощью ПЦР-анализа. Параллельно все гибриды пятого поколения F5 закладывают в рулоны фильтрованной бумаги для проращивания в 1,5% растворе NaCl, контроль - дистиллированная вода во всех случаях. На 10-й день проращивания отбирают линии риса с максимальной длиной ростков более 7 см и длины корешков более 10 см, а также имеющие искомый ген солеустойчивости. Их помещают в стаканчики 4 с почвой и удобрением нитроаммофоска, а именно 2 гранулы на 300-граммовый стакан с почвой, для восстановления, при этом поливают дистиллированной водой. Через неделю укрепившуюся рассаду высаживают вручную в чеки, разрезая пластиковый стакан по одному краю и вставляя образец с почвой в чек квадратно-гнездовым способом.
Гибриды шестого поколения F6 высевают на размножение в селекционном питомнике. Выборочно, лучшие по признаку солеустойчивости линии риса извлекают из чеков в период трубкования и помещают в ящики 5 размером 100 × 50 × 50 см с полиэтиленовой пленкой на дне для защиты от протекания, в качестве контроля для полива используют обычную водопроводную воду.
Схема опыта аналогична схеме с использованием микрочеков: контроль - без засоления, опыт - засоление 1,0% раствором NaCl. Полив производят водопроводной водой до фиксированного уровня 10 см. Повторность двухкратная, в каждом ящике размещают по 50 кустов - по 3-4 растения в каждом, согласно схеме 5×10.
После созревания проводят биометрический анализ растений по следующим признакам: высота растения, длина метелки, масса метелки, количество выполненных зерен, количество пустых колосков, общее число колосков, фертильность, масса 1000 зерен. Рассчитывают соотношение опыт/контроль (О/К) по каждому признаку и выводят средний процент солеустойчивости.
Растения, формирующие максимальное количество зерен в таких стрессовых условиях как солевой шок перед цветением, являются самыми устойчивыми к солевому стрессу во время цветения и созревания.
В гибридах шестого поколения F6 уже сформировано достаточно семян для размножения, и лучшие линии передают в контрольный питомник, где изучают их урожайность. После этого гибриды седьмого поколения F7 определяют в контрольный питомник второго года и далее в конкурсное сортоиспытание для определения лучших линий по урожайности. Гибриды восьмого поколения F8 передают в конкурсное сортоиспытание и далее на государственное сортоиспытание.
Claims (9)
- Способ выведения солеустойчивого сорта риса, включающий в себя следующие этапы:
- А) подбирают родительские формы с геном солеустойчивости и с высокой урожайностью, скрещивают их для получения гибридов;
- Б) анализируют гибриды со второго F2 до шестого поколения F6 на наличие гена Saltol методом ПЦР-анализа, оставляют доминантные гомозиготы и гетерозиготы;
- В) все гибридные формы, начиная с гибридов второго поколения F2 и заканчивая гибридами шестого поколения F6, подвергают строгому фенотипическому, генотипическому и лабораторному отбору под воздействием стресса с учетом хозяйственно-ценных признаков; отбирают лучшие линии для репродуцирования следующего поколения;
- Г) все гибриды каждый год изучают на солеустойчивость лабораторным способом: в рулонах из фильтровальной бумаги и полиэтилена, в 1,5% солевом растворе NaCl; отбирают лучшие образцы с солеустойчивостью свыше 70%;
- Д) в гибридах четвертого поколения F4 изучают солеустойчивость семян гибридов риса от посева до созревания в условиях микрочеков, которые представляют собой наполненную почвой ёмкость размером 300 × 100 см, изолированную полиэтиленовой плёнкой от протекания для сохранения стабильных жестких условий – 1,5% концентрации соли в почве; после созревания проводят биометрический анализ растений, отбирают все выжившие гибриды для репродуцирования следующего поколения в обычных рисовых чеках;
- Ж) все семена гибридных форм пятого поколения F5 после фенотипического и генотипического отборов с помощью ПЦР-анализа проходят отбор на 1,5% засолении NaCl рулонным способом, самые лучшие проростки с солеустойчивостью выше 50% и в которых присутствует искомый ген солеустойчивости переносят в стаканчики с почвой и в виде рассады пересаживают в рисовые чеки;
- З) для отбора устойчивых к засолению форм риса в период цветения и созревания семян гибриды шестого поколения F6 извлекают из рисовых чеков в период трубкования и помещают в ящики с фиксированной концентрацией NaCl 1%, при этом растения шестого поколения F6, сформировавшие максимальное количество зёрен в таких стрессовых условиях, как солевой шок перед цветением, являются самыми устойчивыми к солевому стрессу в период цветения и созревания семян;
- И) гибриды шестого поколения F6 формируют максимально чистые линии, готовые к размножению и испытанию в контрольном питомнике и конкурсном сортоиспытании, а также дальнейшему государственному сортоиспытанию.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2781949C1 true RU2781949C1 (ru) | 2022-10-21 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116508644A (zh) * | 2023-04-11 | 2023-08-01 | 江苏省大华种业集团有限公司 | 一种轻简化栽培粳稻品种快速高效的选育方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КУДАШКИНА Е.Б., Оценка солеустойчивости коллекционных и селекционных образцов риса в условиях Ростовской области, автореферат диссертации, Краснодар, 2019, весь документ. КОСТЫЛЕВ П.И. и др., Селекция стрессоустойчивых сортов риса с помощью ДНК-маркеров, Таврический вестник аграрной науки, N 2 (6), 2016, c. 69-78. SINGH, D. et al., Marker assisted selection and crop management for salt tolerance: a review, African Journal Biotechnology, 2011, V. 10., 66., p. 14694-14698. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116508644A (zh) * | 2023-04-11 | 2023-08-01 | 江苏省大华种业集团有限公司 | 一种轻简化栽培粳稻品种快速高效的选育方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sabar et al. | Identification and mapping of QTLs associated with drought tolerance traits in rice by a cross between Super Basmati and IR55419-04 | |
| CN105010129A (zh) | 早熟陆地棉新种质选育方法 | |
| US20190191645A1 (en) | Method for cultivating perennial rice using asexual propagation characteristic of oryza longistaminata | |
| US20220232796A1 (en) | Methods for the production of seed with improved seed germination properties | |
| CN102405826A (zh) | 一种利用甘薯特异材料选育自交系的方法 | |
| CN109618911A (zh) | 一种简便高效低成本的冬小麦异地加代育种方法 | |
| KR102276931B1 (ko) | 침수 저항성, 혐기 발아성 및 도열병 저항성이 우수한 인디카 벼 신품종 '세종인디1' 및 이의 육종 방법 | |
| CN106342555B (zh) | 胡杨和灰杨的天然杂交变异种灰胡杨选育新品种的方法 | |
| CN103109747A (zh) | 一种基于茎节增殖的金钱松快速繁殖方法 | |
| AU2015202003A1 (en) | A method of in vitro culture of wheat spikes through hybridization between wheat and maize to induce haploid embryos | |
| CN104813926A (zh) | 一种抗小麦黄花叶病的育种方法 | |
| CN103869058A (zh) | 番茄耐盐度的快速评价方法 | |
| RU2781949C1 (ru) | Способ выведения солеустойчивого сорта риса | |
| Yamaguchi et al. | Early-maturing and chilling-tolerant soybean lines derived from crosses between Japanese and Polish cultivars | |
| CN106376454B (zh) | 抗烟嘧磺隆谷子种质的选育方法及应用 | |
| Suwignyo et al. | Development of rice varieties adaptive to nontidal swampland using MABC: Growth characteristics of parent plant and F1 result | |
| KR102140300B1 (ko) | 인산 흡수능, 침수 저항성 및 혐기발아성이 증가된 벼 신품종 'ipsa' 및 이의 육종 방법 | |
| CN112493121A (zh) | 一种适用于高产油用牡丹实生选种方法 | |
| CN108901820A (zh) | 一种耐盐光身水稻三系不育系选育方法 | |
| Toxopeus et al. | Breeding research and in vitro propagation to improve carvone production of caraway (Carum carvi L.) | |
| CN114634995B (zh) | 一种甜瓜耐冷qtl及其连锁的分子标记的方法与应用 | |
| Hogan et al. | Importance of selection and evaluation of vegetatively propagated jojoba before commercial release | |
| Hanzawa et al. | Quantification of soil-surface roots in seedlings and mature rice plants | |
| Khayitov et al. | Study of rice genotypes and their use in the process of selection | |
| CN106358729B (zh) | 一种用于野生大豆遗传完整性分析的繁殖更新方法 |