RU2781558C1 - Способ окрашивания триптаза-позитивных тучных клеток в микропрепаратах тканей c докрашиванием раствором Май-Грюнвальда - Google Patents
Способ окрашивания триптаза-позитивных тучных клеток в микропрепаратах тканей c докрашиванием раствором Май-Грюнвальда Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781558C1 RU2781558C1 RU2021122678A RU2021122678A RU2781558C1 RU 2781558 C1 RU2781558 C1 RU 2781558C1 RU 2021122678 A RU2021122678 A RU 2021122678A RU 2021122678 A RU2021122678 A RU 2021122678A RU 2781558 C1 RU2781558 C1 RU 2781558C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- staining
- tryptase
- mast cells
- solution
- immunohistochemical
- Prior art date
Links
- 210000000138 Mast Cells Anatomy 0.000 title claims abstract description 47
- 108060005989 Tryptase family Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 102000001400 Tryptase family Human genes 0.000 title claims abstract description 43
- 238000010186 staining Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 title claims abstract description 8
- 230000002055 immunohistochemical Effects 0.000 claims abstract description 14
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229960000583 Acetic Acid Drugs 0.000 claims abstract description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000001744 histochemical Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000000339 bright-field microscopy Methods 0.000 abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000001413 cellular Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 22
- 101710042185 MCT7 Proteins 0.000 description 9
- 210000000805 Cytoplasm Anatomy 0.000 description 8
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 210000004940 Nucleus Anatomy 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-VYIIXAMBSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@@]2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-VYIIXAMBSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 239000012120 mounting media Substances 0.000 description 3
- 210000003651 Basophils Anatomy 0.000 description 2
- 210000000170 Cell Membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010192 crystallographic characterization Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000003248 secreting Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 Blood Cells Anatomy 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 210000003855 Cell Nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 108090000227 Chymases Proteins 0.000 description 1
- 102000003858 Chymases Human genes 0.000 description 1
- XCLDDDHMRBWEKC-UHFFFAOYSA-N DAPI staining Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)[CH]C2=N1 XCLDDDHMRBWEKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088598 Enzyme Drugs 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 210000003979 Eosinophils Anatomy 0.000 description 1
- 230000036826 Excretion Effects 0.000 description 1
- 210000002744 Extracellular Matrix Anatomy 0.000 description 1
- 210000000224 Granular leucocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003714 Granulocytes Anatomy 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 229940072221 IMMUNOGLOBULINS Drugs 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 210000000265 Leukocytes Anatomy 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 210000000440 Neutrophils Anatomy 0.000 description 1
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 240000002509 Viola sororia Species 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000003328 fibroblastic Effects 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000010820 immunofluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 1
- 230000003458 metachromatic Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 230000001953 sensory Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к клеточной биологии, цитологии, гистологии, и может быть использовано для окрашивания триптаза-позитивных тучных клеток в микропрепаратах тканей с докрашиванием раствором Май-Грюнвальда. Проводят депарафинизацию срезов и их окрашивание иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител, нанесением вторичных антител, выявляемых реагентом, с последующим гистохимическим окрашиванием раствором Май-Грюнвальда. После иммуногистохимического окрашивания, не допуская высыхания препарата, на него наносят 1,5-2 мл раствора Май-Грюнвальда, оставляют на 5 минут, после чего погружают в 0,4-0,8% раствор ледяной уксусной кислоты не менее 5 раз. Способ обеспечивает возможность иденификации общей популяции тучных клеток в светлопольной микроскопии с одновременной иммуногистохимической детекцией триптаза-позитивных тучных клеток, объективной характеристикой функциональной активности тучных клеток, за счет объективной оценки уровня экспрессии триптазы в популяции тучных клеток благодаря заявленному способу окрашивания тканей. 2 ил.
Description
Изобретение относится к области клеточной биологии, цитологии, гистологии, позволяет при окрашивании в несколько этапов визуализировать как триптаза-негативные, так и триптаза-позитивные тучные клетки, в том числе метахроматически окрашенные.
Каждый орган обладает специализированными клеточными ансамблями тканей, которые используют для поддержания местного гомеостаза собственные регуляторные механизмы. В управлении клеточными кооперациями принимают активное участие тучные клетки (ТК), осуществляя мониторинг большинства ключевых параметров клеточного микроокружения. Уникальность ТК заключается в сочетании адаптированного сенсорного аппарата к информационно значимым сигналам интегративно-буферной метаболической среды и полифункционального эффекторного аппарата, представленного секретомом. Особое значение представляют собой специфические протеазы тучных клеток - триптаза и химаза, секреторные пути которых представляют собой различные варианты выведения веществ во внеклеточный матрикс с высокой избирательностью на внешние вызовы [Atiakshin D., Buchwalow I., Samoilova V., Tiemann M. Tryptase as a polyfunctional component of mast cells. Histochemistry and Cell Biology. 2018, 149(5), 461-477; Atiakshin D., Samoilova V., Buchwalow I., Boecker W., Tiemann M. Characterization of mast cell populations using different methods for their identification. Histochem Cell Biol. 2017; 147(6): 683-694].
На сегодняшний день возможности морфологического анализа популяции тучных клеток в светлопольной микроскопии с одновременной иммуногистохимической детекцией триптаза-позитивных тучных клеток ограничены.
Известна методика иммуногистохимической идентифицикации триптазы тучных клеток мышиными моноклональными антителами Anti-MastCellTryptaseantibody, AbCam, разведение не менее 1:2000, согласно стандартному протоколу [Buchwalow IB, Boöcker W. Immunohistochemistry: Basics and Methods. 1st ed. London: New York: Springer; ISBN 978-3-642-04609-4; 2010. URL: https://www.springer.com/gp/book/9783642046087 (дата обращения 10.02.2021)]. Гомологичные мышиные иммуноглобулины блокируются при предварительной инкубации срезов с неконъюгированными Fab-фрагментами Goatanti-mouseIgG, JacksonImmunoResearh, разведение не менее 1:13. Для светлопольной микроскопии связанные первичные антитела детектируются с помощью пероксидазы хрена AmpliStain™ HorseradishPeroxidaseconjugates (SDTGmbH, Baesweiler, Germany) в соответствии с инструкцией производителя. В дальнейшем ферментную метку визуализируют набором с 3,3'-диаминобензидином в качестве субстрата DABsubstratekit, VectorLaboratories, Burlingame, СА, USA). Срезы докрашивают гематоксилином Майера и эозином, далее заключают в монтажную среду.
Недостатки метода: идентифицируются только ТК содержащие гранулы с триптазой. При малой наполненности триптаза-позитивными гранулами ТК могут идентифицироваться как свободнолежащие гранулы или цитопласт. Невозможно визуализировать триптаза-негативные ТК.
Способ иммунофлуоресцентной детекции триптазы в тучных клетках включает несколько стадий [Buchwalow IB, Boöcker W. Immunohistochemistry: Basics and Methods. 1st ed. London: New York: Springer; 2010. URL: https://www.springer.com/gp/book/9783642046087 (дата обращения 10.02.2021) ISBN 978-3-642-04609-4]. Инкубация с первичными антителами к триптазе в разведении 1:2000 проводится в течение двенадцати часов при температуре +4°С. Связанные антитриптазные первичные антитела в рабочей концентрации 10 мг/мл PBS визуализируют с помощью козьих вторичных антител, конъюгированных с Су3, СуТМ3-conjugatedAffinPureGoatAntiMouseIgG и используют соответствующий набор фильтров. Ядра контрастируют неинтеркалирующим красителем DAPI, после чего срезы заключают в монтажную среду Vectashield (Vector Laboratories, Burlingame, США). Иммунофлуоресцентную маркировку выполняют в соответствии со стандартными протоколами.
Недостатки: метод позволяет выполнить анализ триптазного профиля ТК, однако визуализировать триптаза-негативные ТК с его помощью невозможно. Данная методика, рассчитанная на использование иммунофлуоресцентной микроскопии в темном поле с использованием специальных фильтров и подсветок на микроскопе. Соответственно невозможно использование ее в лабораториях не имеющих специального оборудования, в том числе и в патологоанатомических бюро, клинических гистологических лабораториях.
Широко известен способ окрашивания по Май-Грюнвальду для дифференциального окрашивания форменных элементов крови [найдено в интернет http://labx.narod.ru/documents/okraska_po_maj_gryunvaldu.html, дата обращения 02.02.2021]. Существует несколько вариантов техники исполнения. Согласно инструкции производителя ООО «ЭргоПродашкн» (Россия) мазки просушивают на воздухе в течение 5 минут. Затем погружают в раствор Май-Грюнвальда на 5 минут, обрабатывают рабочим раствором Гимзы в течение 15 минут и промывают под проточной водой в течение 5-30 секунд. Затем мазки просушивают на воздухе.
Согласно инструкции производителя ООО «Минимед» (Россия) мазки погружают на 10-15 минут в разведенный раствор Май-Грюнвальда, далее промывают фосфатным буфером или водой, высушивают. Ядра клеток красно-фиолетовые/розовые, цитоплазма базофилов от голубой до темно-синей, цитоплазма эозинофилов от бледно-красной до розовой, полихроматофильная цитоплазма от серой до фиолетовой, ацидофильные гранулы - оранжевые, нейтрофильные гранулы темно-коричневые/розовые, базофильные гранулы темно-фиолетовые, азурофильные гранулы от пурпурных до пурпурно-фиолетовых. При окрашивании срезов красителем Май-Грюнвальд ТК приобретают метахроматическую фиолетовую окраску.
Сведений об использовании красителя Май-Грюнвальда для анализа триптазного профиля тучных клеток в доступной литературе мы не обнаружили.
Методики иммуногистохимического окрашивания, с докрашиванием гематоксилином Майера и эозином, а так же окрашивание по Май-Грюнвальду, не позволяют объективно оценить уровень экспрессии триптазы в популяции тучных клеток.
Технический результат - идентификация общей популяции тучных клеток в светлопольной микроскопии с одновременной иммуногистохимической детекцией триптаза-позитивных тучных клеток, объективная характеристика функциональной активности ТК (фиг. 1).
Способ позволяет визуализировать биогенез и секреторные пути триптазы ТК, цитотопографию ее гранул и их направленную миграцию от ядра к плазматической мембране (фиг. 2).
Технический результат достигают окрашиванием микропрепаратов в два этапа, при этом на втором этапе вместо стандартного докрашивания гематоксилином Майера используют окраску по Май-Грюнвальду.
На первом этапе проводят иммуногистохимическую детекцию триптазы согласно стандартному подходу [Buchwalow IB, Boöcker W. Immunohistochemistry: Basics and Methods. 1st ed. London: New York: Springer; 2010. URL: https://www.springer.com/gp/book/9783642046087 (дата обращения 10.02.2021) ISBN 978-3-642-04609-4]. Срезы депарафинизируют и инкубируют с моноклональными антителами в течение двенадцать часов. Затем наносят вторичные антитела которые выявляют реагентом согласно инструкции производителя. В результате при завершении первого этапа методики на микропрепаратах визуализируют только триптаза-позитивные ТК, отдельно лежащие гранулы триптазы либо фрагменты цитоплазмы.
На втором этапе срезы докрашивают для выявления метахромазии клеток раствором Май-Грюнвальда по предложенным нами модифицированным протоколам.
Второй этап окрашивания осуществляют следующим образом.
На срезы ткани, промытые в дистиллированной воде, после иммуногистохимического окрашивания, незамедлительно, не допуская высыхания препарата после первого этапа окрашивания, наносят 1,5-2 мл раствора Май-Грюнвальда, оставляют на 5 минут.
Промывают в 0,4-0,8% растворе ледяной уксусной кислоты, не менее 5 погружений, под контролем микроскопа.
Последующие этапы окраски осуществляют согласно стандартам, рекомендованным производителем, а именно: обезвоживают в трех спиртах посменно: 1 спирт - не более минуты, 2 спирт - не более 2-х минут, 3 спирт - не более 3-х минут; просветляют в трех порциях О-Ксилола не более, чем по 3 минуты; наносят на препарат монтажную среду; покрывают препарат покровным стеклом.
В процессе отработки технологии окрашивания нами установлено, что без этапа промывания препарата в 0,4-0,8% ледяной уксусной кислоте специфического окрашивания на метахромазию получить невозможно.
Использованный методический прием сочетания иммуногистохимического и гистохимического протоколов окрашивания позволяет провести одновременную идентификацию популяции тучных клеток с визуализацией триптаза-позитивных ТК.
Таким образом, методика двойного окрашивания позволяет проводить количественный анализ триптаза-негативных и триптаза-позитивных тучных клеток. В свою очередь, в зависимости от количества триптаза-содержащих гранул ТК можно разделить на несколько групп: ТК с единичными гранулами; ТК с гранулами, занимающими 1/3, 2/3 либо весь объем цитоплазмы клетки. Это способствует более полному изучению популяции ТК в разных органах и тканях.
Окрашенные по предложенной методике препараты изучали на микроскопе ZEISS Axio Imager.A2 с системой фотодокументирования изображений. Работа выполнена на базе НИИ экспериментальной биологии и медицины ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н.Н. Бурденко Минздрава России в строгом соответствии с Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986), приказом Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 №708н «Об утверждении Правил лабораторной практики», приказом Минздрава СССР №755 от 12 августа 1977 года «О мерах по дальнейшему совершенствованию форм работы с использованием лабораторных животных».
Установлено, что детекция триптаза-позитивных ТК с докрашиванием раствором Май-Грюнвальда позволяет визуализировать триптаза-позитивные и триптаза-негативные ТК, метахроматично окрашенные ТК и ТК, содержащие триптазу (фиг. 1). Количество триптаза-позитивных гранул в тучных клетках может существенно различаться - от единичных до полного заполнения цитоплазмы (фиг. 2). Триптаза-позитивные тучные клетки контактируют с гранулярным лейкоцитом, а также располагаются вблизи клеток фибробластического дифферона и солокализуются с нейтрофильными гранулоцитами и фибробластом.
Метод позволяет повысить точность оценки триптазного профиля популяции тучных клеток с учетом цитотопографии гранул с триптазой и их направленной миграции от ядра к плазматической мембране при использовании светлопольной микроскопии, а также интерпретировать иммуномодулирующие свойства тучных клеток благодаря оценке их солокализации с определенными лейкоцитами в специфическом тканевом микроокружении.
Использование светлопольной микроскопии, позволяет прибегать к предложенной методике большому количеству лабораторий.
Описание к фигурам.
Фиг. 1. Гистотопография тучных клеток. Фиксация - 10% нейтральный формалин. Масштабный отрезок: 50 мкм. Иммуногистохимическое окрашивание на триптазу тучных клеток (ТК) с докрашиванием раствором Май-Грюнвальда. А - участок скопления триптаза-позитивных ТК, коричневое окрашивание; Б - участок скопления метахроматично окрашенных в розово-фиолетовый цвет ТК, не содержащих триптазу.
1 - Тучные клетки, содержащие гранулы триптазы имеют коричневое окрашивание, интенсивность которого увеличивается при увеличении числа гранул с триптазой в клетке.
2 - Тучные клетки не содержащие триптазу, при окрашивании приобретают имеют розово-фиолетовый оттенок
Фиг. 2. Типы тучных клеток с различным уровнем экспрессии триптазы. Фиксация -10% нейтральный формалин. Иммуногистохимическое окрашивание на триптазу ТК с докрашиванием по Май-Грюнвальду.
1 - Тучные клетки, содержащие гранулы триптазы, имеют коричневое окрашивание, интенсивность которого увеличивается при увеличении числа гранул с триптазой в клетке.
2 - Тучные клетки, не содержащие гранул с триптазой при окрашивании приобретают розово-фиолетовый оттенок
3 - Ядро тучной клетки, окрашено в синий цвет
4 - Тучная клетка, не содержащая гранул с тритазой
5 - Тучная клетка в которой триптаза-позитивные гранулы, имеющие коричневое окрашивание, занимают около трети объема цитоплазмы
6 - Тучная клетка, в которой триптаза-позитивные гранулы занимают практически весь объем цитоплазмы.
Claims (1)
- Способ окрашивания триптаза-позитивных тучных клеток в микропрепаратах тканей с докрашиванием раствором Май-Грюнвальда, включающий депарафинизацию срезов и их окрашивание иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител, нанесением вторичных антител, выявляемых реагентом, с последующим гистохимическим окрашиванием раствором Май-Грюнвальда, отличающийся тем, что после иммуногистохимического окрашивания, не допуская высыхания препарата на него наносят 1,5-2 мл раствора Май-Грюнвальда, оставляют на 5 минут, после чего погружают в 0,4-0,8% раствор ледяной уксусной кислоты не менее 5 раз.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2781558C1 true RU2781558C1 (ru) | 2022-10-13 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2138776C1 (ru) * | 1998-10-12 | 1999-09-27 | Амурская государственная медицинская академия | Способ морфометрической идентификации фенотипа тучных клеток мезометриальной брыжейки на этапах секреторного цикла |
| RU2180752C2 (ru) * | 1999-07-14 | 2002-03-20 | Амурская государственная медицинская академия | Способ идентификации миграционной активности тучных клеток соединительной ткани млекопитающих и человека |
| RU2418065C1 (ru) * | 2009-12-08 | 2011-05-10 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Сибирского отделения РАМН (НЦРВХ СО РАМН) | Способ идентификации тучных клеток в гистологическом препарате |
| UA70754U (ru) * | 2011-12-02 | 2012-06-25 | Запорожский Государственный Медицинский Университет | Способ выявления тучных клеток |
| RU2458918C2 (ru) * | 2006-07-22 | 2012-08-20 | Оксаген Лимитед | Соединения, обладающие антагонистической активностью по отношению к crth2 |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2138776C1 (ru) * | 1998-10-12 | 1999-09-27 | Амурская государственная медицинская академия | Способ морфометрической идентификации фенотипа тучных клеток мезометриальной брыжейки на этапах секреторного цикла |
| RU2180752C2 (ru) * | 1999-07-14 | 2002-03-20 | Амурская государственная медицинская академия | Способ идентификации миграционной активности тучных клеток соединительной ткани млекопитающих и человека |
| RU2458918C2 (ru) * | 2006-07-22 | 2012-08-20 | Оксаген Лимитед | Соединения, обладающие антагонистической активностью по отношению к crth2 |
| RU2418065C1 (ru) * | 2009-12-08 | 2011-05-10 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Сибирского отделения РАМН (НЦРВХ СО РАМН) | Способ идентификации тучных клеток в гистологическом препарате |
| UA70754U (ru) * | 2011-12-02 | 2012-06-25 | Запорожский Государственный Медицинский Университет | Способ выявления тучных клеток |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Donald Metcalf et al. Concordant mast cell and basophil production by individual hematopoietic blast colony-forming cells, PNAS, 2013, 110 (22), 9031-9035. * |
| Атякшин Д.А. и др. Новый гистохимический подход для оценки экспрессии триптазы в популяции тучных клеток, Журнал анатомии и гистопатологии. 2020; 9(3), с.95, столбец 1, абзацы 3-4. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kohli et al. | Algorithmic assessment of cellular senescence in experimental and clinical specimens | |
| Flor-Garcia et al. | Unraveling human adult hippocampal neurogenesis | |
| Atale et al. | Cell‐death assessment by fluorescent and nonfluorescent cytosolic and nuclear staining techniques | |
| Redon et al. | γ-H2AX detection in peripheral blood lymphocytes, splenocytes, bone marrow, xenografts, and skin | |
| Mukaide et al. | Histological detection of catalytic ferrous iron with the selective turn-on fluorescent probe RhoNox-1 in a Fenton reaction-based rat renal carcinogenesis model | |
| Erben et al. | What to do with high autofluorescence background in pancreatic tissues–an efficient Sudan black B quenching method for specific immunofluorescence labelling | |
| JP2009509171A (ja) | 個別化抗癌化学療法（ｐａｃ）のための包括的な診断試験 | |
| CN116008549A (zh) | 一种多重荧光免疫组化检测试剂盒及其应用 | |
| Hogarth et al. | Immunohistochemical approaches for the study of spermatogenesis | |
| Zhang et al. | Management of autofluorescence in formaldehyde-fixed myocardium: choosing the right treatment | |
| Shukla et al. | Mast cell ultrastructure and staining in tissue | |
| RU2781558C1 (ru) | Способ окрашивания триптаза-позитивных тучных клеток в микропрепаратах тканей c докрашиванием раствором Май-Грюнвальда | |
| Roelofs et al. | Immunostaining of skeletal tissues | |
| Wan et al. | Determination of phosphorylated histone H2AX in nanoparticle-induced genotoxic studies | |
| Li et al. | Histo-ELISA technique for quantification and localization of tissue components | |
| Nic-Can et al. | An efficient immunodetection method for histone modifications in plants | |
| Blake | Target validation in drug discovery | |
| Walls et al. | Detection of mast cells and basophils by immunohistochemistry | |
| Quesada et al. | Assessment of the murine tumor microenvironment by multiplex immunofluorescence | |
| Kilic et al. | Methods to evaluate the formation and stabilization of blood vessels and their role in tumor growth and metastasis | |
| Stefanović et al. | Romanowsky-Giemsa as a counterstain for immunohistochemistry: optimizing a traditional reagent | |
| RU2793507C2 (ru) | Способ метахроматической идентификации с визуализацией триптаза-позитивных тучных клеток | |
| Padmanabhan | Immunostaining analysis of tissue cultured cells and tissue sections using phospho-Histone H3 (Serine 10) antibody | |
| Deng et al. | Detection of protein aggregation in neurodegenerative diseases | |
| Shi et al. | Extended application of antigen retrieval technique in immunohistochemistry and in situ hybridization |