RU2776897C2

RU2776897C2 - Соединения для лечения трижды негативного рака молочной железы и рака яичника

Info

Publication number: RU2776897C2
Application number: RU2020141169A
Authority: RU
Inventors: Вэй Ли; Дуэйн Д. Миллер; Шаньшань ДЭН; Рая КРУТИЛИНА; Тиффани СИГРОУВЗ; Цзюньмин ЮЭ; Гуаньнань ЧЖАО; Ван ЦИНХУЭЙ; Митчелл С. Стейнер
Original assignee: Юниверсити Оф Теннесси Рисерч Фаундейшн; Веру Инк.
Priority date: 2018-05-15
Filing date: 2019-05-15
Publication date: 2022-07-28

Abstract

Изобретение относится к области медицины и фармакологии и направлено на лечение трижды негативного рака молочной железы. Предложен способ лечения трижды негативного рака молочной железы у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, представленного структурой формулы XI(e), где R₄ и R₅ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂; i представляет собой целое число от 0 до 5 и n представляет собой целое число от 1 до 4, или фармацевтически приемлемой соли, гидрата, или их комбинации, чтобы излечить трижды негативный рак молочной железы. Технический результат: обеспечение эффективного лечения трижды негативного рака молочной железы. 9 з.п. ф-лы, 78 ил., 2 табл., 7 пр.

Description

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Данная заявка испрашивает преимущество предварительных заявок на патенты США №№ 62/671824, поданной 15 мая 2018 г.; 62/741494, поданной 4 октября 2018 г.; и 62/805,826, поданной 14 февраля 2019 г., включенных в настоящий документ посредством ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новым способам лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, при этом необязательно с включением фармацевтически приемлемого наполнителя.

Заявление касательно исследований или разработки, поддерживаемых на государственном уровне

Настоящее изобретение, описанное в данном документе, было создано при государственной поддержке в рамках гранта № CA148706, выданного Национальным институтом здравоохранения. Правительство обладает некоторыми правами на настоящее изобретение.

Предпосылки изобретения

Рак является второй по частоте причиной смерти в США, уступающей только болезням сердца. В Соединенных Штатах на рак приходится 1 из каждых 4 смертей. 5-летняя относительная выживаемость для всех онкологических больных, диагностированных в 1996-2003 гг., составляет 66%, по сравнению с 50% в 1975-1977 гг. (Cancer Facts & Figures American Cancer Society: Atlanta, GA (2008)). Это улучшение выживаемости отражает прогресс в диагностике на более ранней стадии и улучшение лечения. Открытие высокоэффективных противораковых средств с низкой токсичностью является основной целью исследований рака.

Микротрубочки представляют собой филаменты цитоскелета, состоящие из α и β-тубулиновых гетеродимеров и участвующие в широком спектре клеточных функций, включая поддержание формы, транспорт везикул, подвижность и деление клеток. Тубулин является основным структурным компонентом микротрубочек и хорошо проверенной мишенью для множества очень успешных противораковых лекарственных средств. Соединения, которые способны нарушать равновесие микротрубочек и тубулина в клетках, эффективны при лечении рака. Противораковые лекарственные средства, такие как таксол и винбластин, которые способны нарушать равновесие микротрубочек и тубулина в клетках, широко используются при химиотерапии рака. Существует три основных класса антимитотических средств. Средства, стабилизирующие микротрубочки, которые связываются с полностью сформированными микротрубочками и предотвращают деполимеризацию субъединиц тубулина, представлены таксанами и эпотилонами. Два других класса средств представляют собой дестабилизирующие микротрубочки средства, которые связываются с димерами тубулина и ингибируют их полимеризацию в микротрубочки. Алкалоиды барвинка, такие как винбластин, связываются с участком связывания алкалоидов барвинка и представляют один из этих классов. Колхицин и связывающиеся с колхициновым сайтом вещества взаимодействуют в отдельном участке связывания на тубулине и определяют третий класс антимитотических средств.

Как таксаны, так и алкалоиды барвинка широко используются для лечения рака человека, при этом в настоящее время для химиотерапии рака не одобрены какие-либо вещества, связывающиеся с колхициновым сайтом. Однако средства, связывающиеся с участком связывания колхицина, такие как комбретастатин A-4 (CA-4) и ABT-751, в настоящее время проходят клинические исследования в качестве потенциальных новых химиотерапевтических средств (Luo et al., ABT-751, «A novel tubulin-binding agent, decreases tumor perfusion and disrupts tumor vasculature,» Anticancer Drugs 2009, 20(6), 483-92; Mauer et al., «A phase II study of ABT-751 in patients with advanced non-small cell lung cancer,» J. Thorac. Oncol., 2008, 3(6), 631-6; Rustin et al., «A Phase Ib trial of CA4P (combretastatin A-4 phosphate), carboplatin, and paclitaxel in patients with advanced cancer», Br. J. Cancer, 2010, 102(9), 1355-60).

К сожалению, противораковые лекарственные средства, взаимодействующие с микротрубочками, при клиническом применении имеют две основные проблемы: развитие резистентности к лекарственным средствам и нейротоксичность. Общий механизм резистентности к лекарственным средствам связан с белками множественной лекарственной резистентности (MDR), а именно, отток лекарственных средств, опосредованный белком-переносчиком АТФ-связывающей кассеты (АВС), ограничивает эффективность этих лекарственных средств (Green et al., «Beta-Tubulin mutations in ovarian cancer using single strand conformation analysis-risk of false positive results from paraffin embedded tissues,» Cancer Letters, 2006, 236(1), 148-54; Wang et al., «Paclitaxel resistance in cells with reduced beta–tubulin,» Biochimica et Biophysica Acta, Molecular Cell Research, 2005, 1744(2), 245-255; Leslie et al., «Multidrug resistance proteins: role of P-glycoprotein, MRP1, MRP2, and BCRP (ABCG2) in tissue defense,» Toxicology and Applied Pharmacology, 2005, 204(3), 216-237).

P-гликопротеины (белок P-gp кодируется геном MDR1) являются важными представителями суперсемейства ABC. P-gp предотвращает внутриклеточное накопление многих противораковых лекарственных средств, активно выводя лекарственное средство из раковых клеток, а также способствуя нормальным печеночному, почечному или кишечному путям клиренса. Попытки совместного введения модуляторов или ингибиторов P-gp для увеличения клеточной доступности путем блокирования действий P-gp имели ограниченный успех (Gottesman et al., «The multidrug transporter, a double-edged sword,» J. Biol. Chem., 1988, 263(25), 12163-6; Fisher et al., «Clinical studies with modulators of multidrug resistance,» Hematology/Oncology Clinics of North America, 1995, 9(2), 363-82).

Другой серьезной проблемой таксанов, как и многих биологически активных природных продуктов, является их липофильность и отсутствие растворимости в водных системах. Это приводит к использованию эмульгаторов, таких как Cremophor EL и Tween 80, в клинических составах. Описан ряд биологических эффектов, связанных с этими средами-носителями для состава лекарственного средства, включая реакции острой гиперчувствительности и периферические невропатии (Hennenfent, et al., «Novel formulations of taxanes: a review. Old wine in a new bottle?» Ann. Oncol., 2006, 17(5), 735-49; ten Tije, et al., «Pharmacological effects of formulation vehicles: implications for cancer chemotherapy», Clin. Pharmacokinet., 2003, 42(7), 665-85).

По сравнению с соединениями, связывающими участок связывания паклитаксела или алкалоида барвинка, связывающиеся с участком связывания колхицина, обычно демонстрируют относительно простые структуры. Таким образом, обеспечивается лучшая возможность для пероральной биодоступности за счет оптимизации структуры для улучшения растворимости и фармакокинетических (PK) параметров. Кроме того, многие из этих лекарственных средств, по-видимому, позволяют избегать резистентности к лекарственным средствам, опосредованной P-gp. Следовательно, эти новые соединения, нацеленные на участок связывания колхицина, имеют большие перспективы в качестве терапевтических средств, особенно потому, что они обладают улучшенной растворимостью и преодолевают опосредованную P-gp резистентность к лекарственным средствам.

Трижды негативный рак молочной железы обнаруживается в 15% всех случаев рака молочной железы в Соединенных Штатах. Трижды негативный рак молочной железы определяется как опухоль, в которой отсутствует экспрессия рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PR) и рецептора эпидермального фактора роста человека (HER-2). Трижды негативный рак молочной железы характеризуется агрессивным клиническим течением и плохим прогнозом по причине быстро растущей резистентности ко многим химиотерапевтическим лекарственным средствам и отсутствия подходящих мишеней. В настоящее время не существует доступных одобренных целевых видов терапии. Классические лекарственные средства, нацеленные на микротрубочки (MTD), такие как паклитаксел и его полусинтетические производные, достигли значительных успехов в клиническом контроле новообразований рака молочной железы. Химиотерапия на основе антрациклинов и таксанов является стандартным методом лечения трижды негативного рака молочной железы. Однако в конечном итоге у большинства пациентов с трижды негативным раком молочной железы разовьется резистентность к лекарственным средствам, рецидив опухоли и/или метастазы после временного ответа на начальные циклы лечения. Существует острая необходимость в разработке новаторских и более эффективных терапевтических подходов, обеспечивающих более длительный ответ на лечение трижды негативного рака молочной железы.

Метастатический рак яичника является наиболее смертельным гинекологическим заболеванием у женщин, и химиотерапия является одним из стандартных вариантов лечения. Несмотря на то, что существует несколько одобренных FDA антитубулиновых средств, в основном таксанов, которые включены в эффективный контроль рака яичника, резистентность к лекарственным средствам таксанам часто приводит к прогрессированию заболевания.

С ростом заболеваемости трижды негативным раком молочной железы и раком яичника и высокой степенью резистентности в отношении современных терапевтических средств разработка более эффективных лекарственных средств для лечения таких видов рака, которые могут эффективно избегать MDR, принесет значительную пользу пациентам с раком.

Краткое описание изобретения

В одном варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта путем введения субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы XI, где формула XI представлена:

…(XI),

где

X представляет собой связь, NH или S;

Q представляет собой O, NH или S; и

A представляет собой кольцо и представляет собой замещенную или незамещенную насыщенную или ненасыщенную однокольцевую, с конденсированными кольцами или многокольцевую, арильную или (гетеро)циклическую кольцевую систему; N-гетероцикл; S-гетероцикл; O-гетероцикл; циклический углеводород или смешанный гетероцикл;

где кольцо A необязательно замещено 1-5 заместителями, которые представляют собой независимо O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

где, если Q представляет собой S, то X не является связью, и его фармацевтически приемлемых солей.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения терапевтически эффективного количества соединения формулы VIII субъекту, где формула VIII представлена структурой:

…(VIII),

каждый из R₄, R₅ и R₆ независимо представляет собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

Q представляет собой S, O или NH;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 3, и его фармацевтически приемлемых солей.

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения терапевтически эффективного количества соединения формулы XI (b) субъекту, где формула XI (b) представлена структурой:

…XI(b),

где R₄ и R₅ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4, и его фармацевтически приемлемых солей.

Один вариант осуществления настоящего изобретения охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения терапевтически эффективного количества соединения формулы XI(c) субъекту, где соединение формулы XI(c) представлено структурой:

…XI(c),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

Другой вариант осуществления настоящего изобретения охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения соединения формулы XI(e), где формула XI(e) представлена структурой:

…XI(e),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

Еще один вариант осуществления настоящего изобретения охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения субъекту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из следующих соединений: (2-(фениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (5a), (2-(п-толиламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (5b), (2-(п-фторфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (5c), (2-(4-хлорфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (5d), (2-(фениламино)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (5e), 2-(1H-индол-3-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (17ya) и (2-(1H-индол-5-иламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанон (55).

В другом варианте осуществления соединение по настоящему изобретению представляет собой его стереоизомер, фармацевтически приемлемую соль, гидрат, N-оксид или их комбинации. Настоящее изобретение включает фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.

Краткое описание графических материалов

Предмет, рассматриваемый как изобретение, особо выделен и четко заявлен в заключительной части описания. Однако настоящее изобретение, как в отношении организации, так и в отношении способа реализации, а также его объектов, признаков и преимуществ, может быть лучше всего понято путем ссылки на следующее подробное описание при чтении с прилагаемыми графическими материалами, на которых показано следующее.

На фиг. 1A-1B проиллюстрированы два графика для противораковой активности соединения 17ya in vitro. На фиг. 1A проиллюстрированы результаты для соединения 17ya, испытанное на линии клеток MDA-MB-231, в сравнении с колхицином и паклитакселом. На фиг. 1B проиллюстрированы результаты для соединения 17ya, испытанное на линии клеток MDA-MB-468, в сравнении с колхицином и паклитакселом.

На фиг. 2A-2B проиллюстрировано сравнение активности колхицина, паклитаксела и соединения 17ya в линии клеток MDS-MB-231 при концентрациях 0, 8, 16 и 32 нМ (фиг. 2A), а результаты представлены в виде гистограммы (фиг. 2B).

На фиг. 3A-3B проиллюстрировано противодействие миграции для соединения 17ya. На фиг. 3A проиллюстрирован эффект противодействия миграции для соединения 17ya на линиях клеток TNBC по сравнению с контролем, колхицином (16 нМ) и соединением 17ya (16 нМ) на линиях клеток MDA-MB-231 и MDC-MB-468. На фиг. 3B в виде гистограммы проиллюстрированы результаты тестов.

На фиг. 4A-4B проиллюстрировано сравнение с использованием линии клеток MBA-MD-231 (16 нМ) между контролем, колхицином, паклитакселом и соединением 17ya через 0 часов, 12 часов и 24 часа, что впервые показано на фиг. 4A. На фиг. 4B проиллюстрированы численные результаты, показаны в виде гистограммы.

На фиг. 5A-5B проиллюстрировано сравнение с использованием линии клеток MBA-MD-468 (16 нМ) между контролем, колхицином, паклитакселом и соединением 17ya через 0 часов, 24 часа и 48 часов. На фиг. 5A проиллюстрирован эффект противодействия миграции. На фиг. 5B проиллюстрированы численные результаты в виде гистограммы.

На фиг. 6A-6B проиллюстрировано противодействие инвазии для соединения 17ya. На фиг. 6A показано противоинвазионное действие соединения 17ya (40 нМ) на линии клеток TNBC по сравнению с контролем в MDA-MB-231 и соединения 17ya (32 нМ) в сравнении с контролем и колхицином (32 нМ) в линиях клеток MDC-MB-468. На фиг. 6B в виде гистограммы проиллюстрированы результаты тестов.

На фиг. 7A-7B проиллюстрирован апоптоз клеток, обусловленный соединением 17ya (100 нМ), на клетках TNBC. На фиг. 7A проиллюстрирован апоптоз клеток, обусловленный соединением 17ya, (100 нМ), на клетках TNBC, линии клеток MDA-MB-231 в сравнении с контролем через 24 часа, 48 часов и 72 часа. На фиг. 7B проиллюстрированы результаты сравнения в виде гистограммы.

На фиг. 8 проиллюстрирован апоптоз, обусловленный соединением 17ya, в зависимости от дозы и времени через 48 часов на клетках TNBC, линии клеток MDA-MB-231 в сравнении с контрольным колхицином (200 нМ) и паклитакселом (200 нМ) и соединением 17ya при 50 нМ, 100 нМ, 150 нМ и 200 нМ. На фиг. также проиллюстрированы результаты сравнения в виде гистограммы.

На фиг. 9A-9B проиллюстрировано двумя графиками подавление с помощью соединения 17ya роста опухоли TNBC дозозависимым образом без влияния на массу тела мышей. На фиг. 9A сравнивается роста опухоли в процентах (объем) с течением времени, когда вводили среду-носитель, 5 мг/кг соединения 17ya и 10 мг/кг соединения 17ya. На фиг. 9B проиллюстрирована масса тела крысы с течением времени (дней) при введении среды-носителя, 5 мг/кг соединения 17ya и 10 мг/кг соединения 17ya.

На фиг. 10 проиллюстрирован вес опухоли или конечный вес опухоли (как определено на фиг. 9) в виде гистограммы и сравнение размеров, поскольку соединение 17ya подавляет рост опухоли TNBC дозозависимым образом.

На фиг. 11A-11B проиллюстрирована противораковая активность соединения 17ya в сравнении со средой-носителем и паклитакселом. На фиг. 11A проиллюстрирована противораковая активность соединения 17ya в сравнении со средой-носителем и паклитакселом при 12,5 мг/кг путем измерения веса опухоли. На фиг. 11B проиллюстрирована противораковая активность соединения 17ya в сравнении со средой-носителем и паклитакселом в дозе 12,5 мг/кг путем измерения конечного объема опухоли.

На фиг. 12 проиллюстрирован антиметастатический эффект соединения 17ya in vivo с использованием срезов легких, окрашенных с помощью H&E, в сравнении с контролем, 10 мг/кг паклитаксела и 10 мг/кг соединения 17ya.

На фиг. 13A-B проиллюстрировано действие соединения 17ya на клетки рака яичника, демонстрируя значительное подавление выживания клеток. На фиг. 13A проиллюстрирована выживаемость клеток, определенная по колониям/полям 350 клеток SKOV3, обработанных соединением 17ya при 0, 1,25, 2,5, 5, 10 и 30 нМ, где ** p <0,01 и *** p <0,001. На фиг. 13B проиллюстрирована выживаемость клеток, определенная по колониям/полям клеток OVCAR3, обработанных соединением 17ya при 0, 1,25, 2,5, 5, 10 и 30 нМ, где ** p <0,01 и *** p <0,001.

На фиг. 14A-14B проиллюстрировано подавление с помощью соединения 17ya миграции и инвазии клеток рака яичника. На фиг. 14A показан результат миграции клеток SKOV3 и OVCAR3, обработанных соединением 17ya (20 нМ) и контролем (средой-носителем) с использованием планшетов Transwell. Мигрировавшие клетки окрашивали кристаллическим фиолетовым и подсчитывали, где ** p <0,01 и *** p <0,001. На фиг. 14B проиллюстрированы результаты инвазии клеток SKOV3 и OVCAR3, обработанных соединением 17ya (20 нМ) и контролем (средой-носителем) в течение 5 часов с использованием планшетов, покрытых матригелем (клетки окрашивали с помощью H.E. и подсчитывали) и ** p <0,01 и ** * р <0,001.

На фиг. 15A-15C проиллюстрировано подавление с помощью соединения 17ya роста и метастазирования опухоли яичника in vivo. На фиг. 15A проиллюстрировано действие соединения 17ya в отношении самок мышей NSG в возрасте 2 месяцев, которые получали инъекцию интрабурсально 5 × 105 клеток SKOV3-Luc2 дикого типа после обработки в течение пяти дней в неделю в течение 4 недель. На фиг. 15B графически проиллюстрирован вес опухоли в яичниках, обработанных соединением 17ya и контролем. На фиг. 15c проиллюстрировано, что опухоли не были видны в яичниках, печени и селезенке мышей, обработанных соединением 17ya.

На фиг. 16A-B графически проиллюстрирована жизнеспособность клеток после обработки с помощью колхицина, паклитаксела и соединения 17ya. На фиг. 16A проиллюстрирована жизнеспособность клеток MDA-MD-231 после обработки колхицином, паклитакселом и соединением 17ya с IC₅₀ (нМ) 17,46, 3,05 и 8,23, соответственно, и SEM, равным 3,40, 0,42 и 1,34 соответственно. На фиг. 16B проиллюстрирована жизнеспособность клеток MDA-MD-468 после обработки колхицином, паклитакселом и соединением 17ya с IC₅₀ (нМ) 9,80, 4,61 и 9,59 соответственно, и SEM 1,45, 0,63 и 1,78 соответственно.

На фиг. 17A-B проиллюстрировано подавление миграции клеток соединением 17ya и колхицином. На фиг. 17A проиллюстрирован эффект колхицина или соединения 17ya на миграцию клеток по сравнению с контролем. На фиг. 17B проиллюстрировано действие колхицина, PTX, соединения 17ya на миграцию клеток через мембрану, покрытую матригелем.

На фиг. 18 проиллюстрировано иммунофлуоресцентное окрашивание, используемое для визуализации сравнения сети микротрубочек между контролем, колхицином, паклитакселом и Veru-111 (соединение 17ya), все при 32 нМ, с применением клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468.

На фиг. 19 проиллюстрировано влияние соединения 17ya (VERU-111) на индукцию апоптоза в клетках TNBC, где клетки MDA-MB-231 обрабатывали 100 нМ соединением 17ya в зависимости от времени, и соединение индуцировало апоптоз клеток по сравнению с контроль через 24 часа, 48 часов и 72 часа с различным временем и концентрациями.

На фиг. 20 проиллюстрирована противораковая активность соединения 17ya (VERU-111) на ортотопической мышиной модели TNBC, чтобы определить, можно ли наблюдать сильный эффект соединения 17ya in vivo, как определено с течением времени, в том числе после 33 дней обработки, где соединение 17ya подавляло рост опухоли TNBC дозозависимым образом, не влияя на массу тела мышей.

На фиг. 21 проиллюстрировано сравнение эффективности соединения 17ya (VERU-111) с паклитакселом на модели, поскольку паклитаксел является одним из стандартных средств лечения TNBC в клинике, при этом соединение 17ya и паклитаксел значительно снижали размер опухоли и вес опухоли.

На фиг. 22 проиллюстрировано окрашивание опухолей H & E в сравнительном исследовании соединения 17ya (VERU-111) и паклитаксела при индуцированном некрозе опухоли TNBC в ткани легких, где группа обработки средой-носителем была заполнена метастазами (обозначены желтой стрелкой), в то время как в легких в группе обработки соединением 17ya и группе обработки паклитакселом их содержалось малое количество, что позволяет предположить, что соединение 17ya значительно снижает метастазирование TNBC.

На фиг. 23 проиллюстрировано окрашивание IHC опухолей в сравнительном исследовании соединения 17ya (VERU-111) и паклитаксела при индуцированном некрозе опухоли TNBC в ткани легких, где в группе обработки средой-носителем наблюдали заполненность метастазами (обозначены желтой стрелкой), тогда как в легких в группе обработки соединением 17ya и группе обработки паклитакселом их было мало, что позволяет предположить, что соединение 17ya значительно снижает степень метастазирования TNBC.

На фиг. 24 проиллюстрирована краткая информация о соединении, демонстрирующая, что соединение VERU-111 (соединение 17ya) представляет собой новый пероральный ингибитор тубулина следующего поколения, нацеленный на α- и β-субъединицы микротрубочек, с низким наномолярным ингибированием полимеризации тубулина, высокой биодоступностью при пероральном приеме, высокой степенью проникновения в головной мозг, и обладает эффективностью против рака предстательной железы, молочной железы и других видов рака in vivo и in vitro.

На фиг. 25 проиллюстрировано, что в основе VERU-111 (соединение 17ya) доказанный механизм ингибирования сборки микротрубочек, а также сравниваются микротрубочки, измененные от формы веретена (контроль) по сравнению с глобулярной формой (соединение 17ya).

На фиг. 26A-B проиллюстрировано молекулярное моделирование VERU-111 (соединение 17ya) с комплексом тубулина (соединение 17ya = 6a). На фиг. 26A проиллюстрировано молекулярное моделирование соединения 17ya с участком связывания колхицина, где соединение находится ближе по своей позиции связывания к TN-16, чем к самому колхицину. На фиг. 26B проиллюстрировано, что соединение 17ya является более линейным и проникает глубже в связывающий карман мономера β-тубулина, чем TN-16 и имеет водородную связь, которая приводит к дифференциальному и более сильному связыванию с α- и β-тубулином.

На фиг. 27 проиллюстрированы свойства, подобные лекарственному средству VERU-111 (соединение 17ya) и VERU-112 (соединение 55).

На фиг. 28 проиллюстрированы фармакокинетические параметры VERU-111 (соединение 17ya) и VERU-112 (соединение 55) у мышей, крыс и собак.

На фиг. 29 проиллюстрирован путь метаболизма для VERU-111 (соединение 17ya) у человека и собак, где распространенный метаболит М + 34 был обнаружен только в микросомах печени собаки, что привело к высокому клиренсу у собак in vivo.

На фиг. 30 проиллюстрировано проникновение в головной мозг для VERU-111 (соединение 17ya) и VERU-112 (соединение 55). VERU-112 (соединение 55) продемонстрировал высокую степень проникновения в головной мозг. Соотношение концентрации в головном мозге и плазме крови через 4 часа после перорального приема составило приблизительно 20%. Соотношение значения концентрации в мозге и плазме крови оставалось относительно постоянным с течением времени для VERU-111 (соединение 17ya) и VERU-112 (соединение 55), что позволяет предположить, что значения концентрации в головном мозге относились к тому же фармакокинетическому компартменту, что и плазма крови, и не будут накапливаться в головном мозге; возможно, уменьшая возможность нейротоксичности.

На фиг. 31 проиллюстрирована активность соединения в отношении р-гликопротеиновой АТФазы (Pgp АТФазы). VERU-111 (соединение 17ya) не был субстратом для p-гликопротеина, где p <0,05.

На фиг. 32 проиллюстрирован сводный обзор цитотоксической активности VERU-111 (соединение 17ya) in vitro и in vivo, демонстрируя идентичную или большую эффективность, чем паклитаксел и доцетаксел в родительских линиях; в то время как паклитаксел и доцетаксел теряют активность в линиях клеток, резистентных в отношении таксана, VERU-111 (соединение 17ya) обладает сильной антипролиферативной активностью; и соединение является цитотоксичным в отношении нескольких типов рака: рака предстательной железы, рака предстательной железы, резистентного в отношении таксана, рака молочной железы, трижды негативного рака молочной железы, рака легкого, меланомы, глиомы, рака толстой кишки, рака матки, рака яичника и рака поджелудочной железы.

На фиг. 33 проиллюстрирована цитотоксичность in vitro для VERU-111 (соединение 17ya) через 96 часов (значения IC₅₀ - нМ). VERU-111 (соединение 17ya) обладает сходной эффективностью с паклитакселом и доцетакселом в родительской линии клеток PC-3. VERU-111 (соединение 17ya) сохраняет свою эффективность в клетках PC-3, резистентных в отношении паклитаксела, тогда как паклитаксел и доцетаксел теряют эффективность.

На фиг. 34A-D проиллюстрировано подавление с помощью VERU-111 (соединение 17ya) (II) и VERU-112 (IAT) роста ксенотрансплантата рака предстательной железы, резистентного в отношении паклитаксела. На фиг. 34A проиллюстрировано противодействие росту PC-3, где обработку начинали, когда опухоли достигали 150—300 мм³. На фиг. 34B проиллюстрировано противодействие росту TxR (PC-3/TxR является резистентным в отношении таксана), где обработку начинали, когда опухоли достигали 150—300 мм³. На фиг. 34C проиллюстрировано противодействие росту TxR (PC-3/TxR является резистентным в отношении таксана), где обработку начинали, когда опухоли достигали 150—300 мм³. На фиг. 34D проиллюстрировано противодействие росту TxR (PC-3/TxR является резистентным в отношении таксана), где обработку начинали, когда опухоли достигали 150-300 мм³.

На фиг. 35 проиллюстрирована противоопухолевая активность VERU-111 (соединение 17ya) и VERU-112 по сравнению с доцетакселом in vivo. В отличие от недостаточной эффективности доцетаксела при опухолях PC-3/TxR, VERU-111 (соединение 17ya) вводилось перорально и имело > 100% TGI без влияния на массу тела.

На фиг. 36 проиллюстрировано VERU-111 (соединение 17ya), испытанное на дополнительных моделях ксенотрансплантатов.

На фиг. 37 проиллюстрирована противораковая активность VERU-111 (соединение 17ya) при трижды негативном раке молочной железы (TNBC) in vitro, где в MDA-MB-231 колхицин характеризовался IC₅₀, составляющую 17,46 (SE 0,05); паклитаксел характеризовался IC₅₀, составляющую 3,05 (SE 0,04); и VERU-111 (соединение 17ya) характеризовалось IC₅₀, составляющую 8,23 (SE 0,05). В MDA-MB-468 колхицин характеризовался IC₅₀, составляющую 9,80 (SE 0,02); паклитаксел характеризовался IC₅₀, составляющую 4,61 (SE 0,03); и VERU-111 (соединение 17ya) характеризовался IC₅₀, составляющую 22,96 (SE 0,02).

На фиг. 38 проиллюстрирована противоопухолевая активность VERU-111 (соединение 17ya) в TNBC in vivo, где VERU-111 (соединение 17ya) подавляет рост опухоли TNBC дозозависимым образом, не влияя на массу тела мышей.

На фиг. 39 проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya) подавляло ксенотрансплантаты трижды негативного рака молочной железы у мышей.

На фиг. 40 проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya) подавляет метастазы трижды негативного рака молочной железы у мышей.

На фиг. 41 проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya) подавляло рак яичника на ортотопической модели рака яичника (tx 5 раз в неделю в течение 4 недель).

На фиг. 42A-D проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya), подавляет рак поджелудочной железы. На фиг. 42A (i-ii) проиллюстрирован дозозависимый эффект VERU-111 (соединение 17ya) на линии клеток Panc-1, AsPC-1 и HPAF-II в виде процента жизнеспособности клеток. На фиг. 42B (i-ii) проиллюстрирован зависимый от времени эффект VERU-111 (соединение 17ya) при 5 нМ, 10 нМ и 20 нМ в сравнении с контролем. На фиг. 42C проиллюстрирован эффект VERU-111 (соединение 17ya) при 1,25 нМ, 2,5 нМ и 5 нМ по сравнению с контролем с применением линий клеток Panc-1 (фиг. C (i)), AsPC-1 (фиг. C (ii)) или HPAF-II (фиг. C (iii)). На фиг. 42D проиллюстрирован эффект VERU-111 (соединение 17ya) при 1,25 нМ, 2,5 нМ и 5 нМ по сравнению с контролем с применением Panc-1 (фиг. D (i)), AsPC-1 (фиг. D (ii)) или HPAF-II (фиг. D (iii)) в виде гистограмм.

На фиг. 43 проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya) подавляет рак поджелудочной железы.

На фиг. 44 проиллюстрировано VERU-111 (соединение 17ya) с доклинической безопасностью (меньшей миелосупрессией, меньшей нейротоксичностью, поддержанием массы тела), где на фиг. 44 показаны исследования токсичности в отношении массы печени и количества лейкоцитов (WBC) у мышей при использовании VERU-111 (3,3 мг/кг или 6,7 мг/кг) и VERU-112 (10 мг/кг и 30 мг/кг) по сравнению с контролем и DTX (10 мг/кг и 20 мг/кг).

На фиг. 45 проиллюстрировано VERU-111 (соединение 17ya) с доклинической безопасностью (меньшая миелосупрессия, меньшая нейротоксичность, поддержание массы тела), на фиг. 45 показаны тесты на нейротоксичность (тест горячей пластиной при 5-52,5°C и время, необходимое для вылизывания лапы, записанное как латентный период для болевого порога) у мышей при использовании VERU-111 (3,3 мг/кг или 6,7 мг/кг) и VERU-112 (10 мг/кг и 30 мг/кг) по сравнению с контролем и DTX (10 мг/кг и 20 мг/кг).

На фиг. 46 проиллюстрировано, что VERU-111 (соединение 17ya) является антипролиферативным и поддерживает массу тела, в отличие от недостаточной эффективности доцетаксела при опухолях PC-3/Txr, VERU-111 (соединение 17ya) вводился перорально и имел> 100% TGI без влияния на массу тела.

На фиг. 47 проиллюстрированы доклинические результаты оценки блокады калиевых каналов HERG, стабильно экспрессируемых в клетках HEK293, и исследования безопасности в отношении центральной нервной системы у крыс с IC₂₀ 9,23 нМ и пероральное введение VERU-111 (соединение 17ya) в дозах до 10 мг/кг и включительно не было связано с какими-либо побочными эффектами на нервно-поведенческую функцию у крыс.

На фиг. 48 проиллюстрированы доклинические результаты для VERU-111 (соединение 17ya) в оценочном исследовании сердечно-сосудистой и дыхательной систем у собак породы бигль, где VERU-111 (соединение 17ya) вводили собакам в дозах 2, 4 и 8 мг/кг, и что не приводило к летальному исходу или влиянию на кровяное давление, частоту сердечных сокращений или оцениваемые электрокардиограмму или респираторные параметры. Повышение температуры тела (максимальное изменение ≤0,7°C) наблюдалось при всех дозах VERU-111 (соединение 17ya) примерно от 3,5 до 11 часов после введения дозы. Рвоту отмечали между 4 и 24 часами после приема дозы 8 мг. Пероральное введение VERU-111 (соединение 17ya) в дозах до 8 мг/кг включительно не было связано с какими-либо побочными эффектами на сердечно-сосудистую или респираторную функцию у собак.

На фиг. 49 проиллюстрировано, что фармакокинетические параметры для VERU-111 (соединение 17ya) у собак представлены средним значением (±SD) и CV% для фармакокинетических параметров VERU-111 (соединение 17ya) в дни 1 и 7 после перорального введения капсул с 5 и 10 мг/кг VERU- 111 самцам собак.

На фиг. 50 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул VERU-111 (соединение 17ya) для перорального применения на собаках породы бигль, которое выявило, что оно не влияет на выживаемость собак, отсутствие офтальмоскопических замечаний; отсутствие изменений показателей гематологии, коагуляции и анализа мочи; отсутствие клинических или макроскопических патологических наблюдений; при 4 и 8 мг/кг легкие проявления отсутствия аппетита, рвоты и диареи; у собак при дозе 8 мг/кг/день потеря массы тела; удлинение QTc превышало изменение 10%; и снижение массы органа, представляющего собой тимус, и уменьшение количества лимфоцитов в тимусе; уровень отсутствия наблюдаемых побочных эффектов (NOAEL) составлял 4 мг/кг/день; и после 28 дней приема дозы 4 мг/кг/день средние значения C_max и AUC_{0-12 ч.} составляли 23,2 нг/мл и 71,7 ч.*нг/мл, соответственно.

На фиг. 51A и 51B проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках - вес. На фиг. 51A проиллюстрировано среднее значение массы тела у самцов собак относительно времени (недель) от даты начала. На фиг. 51B проиллюстрировано среднее значение массы тела у собак относительно времени (недель) от даты начала.

На фиг. 52 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках - интервал QT.

На фиг. 53 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках - гематология.

На фиг. 54 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках - гематология.

На фиг. 55 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках- функциональные пробы печени.

На фиг. 56 проиллюстрировано 28-дневное исследование токсичности капсул для перорального применения VERU-111 (соединение 17ya) на собаках- функциональные пробы печени.

На фиг. 57A-B проиллюстрировано 28-дневное исследование токсикокинетики капсул для перорального применения соединения 17ya на собаках породы бигль. На фиг. 57A проиллюстрированы отдельные и средние значения C_max соединения 17ya в дни 1 и 28 после ежедневного перорального введения капсул 2, 4 и 8 мг/кг соединения 17ya собакам (совместно самцам и самкам). На фиг. 57B проиллюстрированы отдельные и средние значения AUC_0-12ч.для соединения 17ya в дни 1 и 28 после ежедневного перорального введения капсул 2, 4 и 8 мг/кг соединения 17ya собакам (совместно самцам и самкам).

На фиг. 58A-B проиллюстрирован эффект соединения 17ya с дестабилизирующим тубулин колхицином и стабилизирующим тубулин средством паклитакселом. На фиг. 58A проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении линии клеток MDA-MB-231. На фиг. 58B проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении линии клеток MDA-MB-486.

На фиг. 59A-B проиллюстрирован эффект соединения 17ya в сравнении с колхицином и паклитакселом в анализе образования колоний. На фиг. 59A проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении MDA-MB-231. На фиг. 59B проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении MDA-MB-486.

На фиг. 60 проиллюстрировано иммунофлуоресцентное окрашивание сети микротрубочек, сравнивающее контроль, соединение 17ya, колхицин и паклитаксел.

На фиг. 61 проиллюстрирован эффект соединения 17ya в отношении подавления способности клеток TNBC мигрировать через мембранный вкладыш в присутствии концентрации 16 нМ концентрации при среднем уровне миграции 40% в клетках MDA-MB-231 и 34% в клетках MDA-MB-468 по сравнению с контрольной группой.

На фиг. 62 проиллюстрирован эффект соединения 17ya в отношении снижения способности клеток TNBC проникать через покрытую матригелем мембрану со средним уровнем инвазии 55% и 36% в клетках MDA-MB-231 и MDA-MB-468 по сравнению с контролем.

На фиг. 63A-B проиллюстрированы результаты анализа методом зарастания царапины с использованием соединения 17ya, паклитаксела и колхицина в качестве положительных контролей на линиях клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-486. В дозе 16 нМ соединение 17ya, колхицин и паклитаксел продемонстрировали эффективное подавление миграции клеток, как показано на фиг. 63A для MDA-MB-231. Эффект для тех же соединений и дозы показан на фиг. 63B для MDA-MB-486.

На фиг. 64A-B проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении накопления клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-486 в G2- и M-фазах. На фиг. 64A проиллюстрировано влияние на популяцию клеток в G1- и S-фазах дозозависимым образом для соединения 17ya, колхицина и паклитаксела (используемых в качестве положительных контролей) на клетки MDA-MB-231 в G2-/M-фазе. На фиг. 64B проиллюстрировано влияние на популяцию клеток в G1- и S-фазах дозозависимым образом для соединения 17ya, колхицина и паклитаксела (используемых в качестве положительных контролей) на клетки MDA-MB-486 в G2-/M-фазе.

На фиг. 65A-B проиллюстрирована способность соединения 17ya, колхицина и паклитаксела инициировать апоптотическую гибель клеток дозозависимым образом. На фиг. 65A проиллюстрирован эффект в отношении линии клеток MDA-MB-231. На фиг. 65B проиллюстрирован эффект в отношении линии клеток MDA-MB-486.

На фиг. 66A-B проиллюстрирована эффективность соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении индукции апоптоза клеток TNBC. На фиг. 66A проиллюстрированы результаты с использованием линии MDA-MB-231 при обработке 100 нМ соединения 17ya в течение 24, 48 и 72 часов. На фиг. 66B проиллюстрированы результаты с использованием линии MDA-MB-486 при обработке 100 нМ соединения 17ya в течение 24, 48 и 72 часов.

На фиг. 67A-B проиллюстрирован эффект соединения 17ya, колхицина и паклитаксела в отношении апоптотической гибели клеток посредством регулирования пути каспазы-3/PARP, экспрессии расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP в клетках TNBC. На фиг. 67A проиллюстрирован эффект в отношении клеток MDA-MB-231 после 24 часов обработки, проанализированный с помощью вестерн-блоттинга. На фиг. 67B проиллюстрирован эффект в отношении клеток MDA-MB-486 после 24 часов обработки, проанализированный с помощью вестерн-блоттинга.

На фиг. 68 проиллюстрирован эффект соединения 17ya и контроля на увеличение количества расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP в зависимости от времени на MDA-MB-231 и MDA-MB-486.

На фиг. 69 проиллюстрирован эффект соединения 17ya и контроля в отношении экспрессии активности каспазы 3/7, оцениваемый на клетках MDA-MB-231 и MDA-MB-468 с использованием системы анализа Caspase Glo 3/7.

На фиг. 70 проиллюстрирован эффект среды-носителя, соединения 17ya и паклитаксела в отношении процента увеличения объема опухоли после обработки.

На фиг. 71 проиллюстрирован эффект среды-носителя, соединения 17ya и паклитаксела в отношении массы тела мыши после обработки.

На фиг. 72 проиллюстрирован конечный объем опухоли после обработки соединением 17ya в дозе 10 мг/кг.

На фиг. 73 проиллюстрирован конечный вес опухоли после обработки с помощью соединения 17ya в дозе 10 мг/кг.

На фиг. 74 проиллюстрирован эффект соединения 17ya, контроля и паклитаксела в отношении доли в процентах некротических клеток.

На фиг. 75 проиллюстрирован эффект контроля, соединения 17ya и паклитаксела в отношении Ki67.

На фиг. 76 проиллюстрирован эффект контроля, соединения 17ya и паклитаксела в отношении CD31.

На фиг. 77 проиллюстрирован эффект контроля, соединения 17ya и паклитаксела в отношении расщепленной PARP.

На фиг. 78 проиллюстрирован эффект контроля, соединения 17ya и паклитаксела в отношении расщепленной каспазы-3.

Следует принимать во внимание, что для простоты и ясности иллюстрации элементы, показанные на фиг., необязательно нарисованы в масштабе. Например, для ясности размеры некоторых элементов могут быть увеличены относительно других элементов. Кроме того, если это сочтено целесообразным, ссылочные позиции могут повторяться на фиг. для обозначения соответствующих или аналогичных элементов.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (I) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (I) имеет формулу

…(I),

где

A и C, каждый независимо, представляют собой замещенные или незамещенные однокольцевые, с конденсированными кольцами или многокольцевые арильные или (гетеро)циклические кольцевые системы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные N-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные S-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные O-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные циклические углеводороды; или замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные смешанные гетероциклы;

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

X представляет собой связь, NH, C₁-C₅углеводород, O или S;

Y представляет собой связь, -C=O, -C=S, -C=N-NH₂, -C=N-OH, -CH-OH, -C=CH-CN, -C=N-CN, -CH=CH-, -C=C(CH₃)₂, -C=N-OMe, -(C=O)-NH, -NH-(C=O), –(C=O)-O, -O-(C=O), -(CH₂)_1-5-(C=O), (C=O)-(CH₂)_1-5, -(SO₂)-NH-, -NH-(SO₂)-, SO₂, SO или S;

где указанные кольца A и C необязательно замещены 1-5 заместителями, которые независимо представляют собой O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2;

где

если B представляет собой бензольное кольцо, тиофеновое кольцо, фурановое кольцо или индольное кольцо, то X не является связью или CH₂, и A не является индолом;

если B представляет собой индол, то X не является O; и

или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата, полиморфа, метаболита, таутомера или изомера.

Трижды негативный рак молочной железы может являться таксан-резистентным TNBC, таксан-чувствительным TNBC и/или метастатическим.

В одном варианте осуществления если B в формуле I представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

В одном варианте осуществления A в соединении формулы I представляет собой индолил. В другом варианте осуществления A представляет собой 2-индолил. В другом варианте осуществления A представляет собой фенил. В другом варианте осуществления A представляет собой пиридил. В другом варианте осуществления A представляет собой нафтил. В другом варианте осуществления A представляет собой изохинолин. В другом варианте осуществления C в соединении формулы I представляет собой индолил. В другом варианте осуществления C представляет собой 2-индолил. В другом варианте осуществления C представляет собой 5-индолил. В другом варианте осуществления B в соединении формулы I представляет собой тиазол. В другом варианте осуществления B в соединении формулы I представляет собой тиазол; Y представляет собой CO, и X представляет собой связь. Неограничивающие примеры соединения формулы I выбраны из: (2-(1H-индол-2-ил)тиазол-4-ил)(1H-индол-2-ил)метанона (8) и (2-(1H-индол-2-ил)тиазол-4-ил)(1H-индол-5-ил)метанона (21).

Настоящее изобретение также охватывает способ лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника у субъекта, нуждающегося в этом, с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (Ia) в терапевтически эффективном количестве субъекту, и где соединение формулы (Ia) имеет структуру

…(Ia),

где

A представляет собой замещенные или незамещенные однокольцевые, с конденсированными кольцами или многокольцевые, арильные или (гетеро)циклические кольцевые системы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные N-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные S-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные O-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные циклические углеводороды; или замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные смешанные гетероциклы;

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₁, R₂ и R₃ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

где указанное кольцо A необязательно замещено 1-5 заместителями, которые независимо представляют собой O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2;

m представляет собой целое число от 1 до 3;

где

если B представляет собой индол, то X не является O;

В одном варианте осуществления если B в формуле Ia представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (II) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (II) имеет формулу:

…II,

где

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

Y представляет собой связь, -C=O, -C=S, -C=N-NH₂, -C=N-OH, -CH-OH, -C=CH-CN, -C=N-CN, -CH=CH-, C=C(CH₃)₂, -C=N-OMe, -(C=O)-NH, -NH-(C=O), –(C=O)-O, -O-(C=O), -(CH₂)_1-5-(C=O), (C=O)-(CH₂)_1-5, -(SO₂)-NH-, -NH-(SO₂)-, SO₂, SO или S;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2;

n представляет собой целое число от 1 до 3; и

m представляет собой целое число от 1 до 3;

где

В одном варианте осуществления если B в формуле II представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (III) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (III) имеет формулу соединения формулы (III)

…(III),

где

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂; и

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2; и

n представляет собой целое число от 1 до 3;

где

В одном варианте осуществления если B в формуле III представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

Настоящее изобретение охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (IV) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (IV) имеет формулу

индол

…(IV),

где кольцо A представляет собой индолил;

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₁ и R₂ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

Y представляет собой связь, C=O, -C=S, -C=N-NH₂, -C=N-OH, -CH-OH, -C=CH-CN, -C=N-CN, -CH=CH-, C=C(CH₃)₂, -C=N-OMe, -(C=O)-NH, -NH-(C=O), –(C=O)-O, -O-(C=O), -(CH₂)_1-5-(C=O), (C=O)-(CH₂)_1-5, -(SO₂)-NH-, -NH-(SO₂)-, SO₂, SO или S;

где указанное A необязательно замещено O-алкилом, O-галогеналкилом, F, Cl, Br, I, галогеналкилом, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксилом, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейным или разветвленным C₁-C₅алкилом, галогеналкилом, алкиламино, аминоалкилом, -OCH₂Ph, -NHCO-алкилом, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкилом, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂; и

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2; и

m представляет собой целое число от 1 до 4;

где

если B представляет собой бензольное кольцо, тиофеновое кольцо, фурановое кольцо или индольное кольцо, то X не является связью или CH₂;

В одном варианте осуществления если B в формуле IV представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

В другом варианте осуществления индолил кольца A в формуле IV присоединен по одному из своих 1-7 положений к X или непосредственно к B, если X представляет собой связь (т.е. ничего).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы IV(a) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы IV(a) имеет формулу:

…IV(a),

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₁, R₂, R₄ и R₅ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂; и

Y представляет собой связь или C=O, -C=S, -C=N-NH₂, -C=N-OH, -CH-OH, -C=CH-CN, -C=N-CN, -CH=CH-, C=C(CH₃)₂, -C=N-OMe, -(C=O)-NH, -NH-(C=O), –(C=O)-O, -O-(C=O), -(CH₂)_1-5-(C=O), (C=O)-(CH₂)_1-5, -(SO₂)-NH-, -NH-(SO₂)-, SO₂, SO или S;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2;

n представляет собой целое число от 1 до 2; и

m представляет собой целое число от 1 до 4;

где

В одном варианте осуществления если B в формуле IVa представляет собой тиазольное кольцо, то X не является связью.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (V) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (V) имеет формулу:

…(V),

B представляет собой

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 1 до 5;

l представляет собой целое число от 0 до 2; и

n представляет собой целое число от 1 до 3;

В другом варианте осуществления B в формуле V не является тиазолом

. В другом варианте осуществления B в формуле V не является оксазолом. В другом варианте осуществления B в формуле V не является оксазолином. В другом варианте осуществления B в формуле V не является имидазолом. В другом варианте осуществления B в формуле V не является тиазолом, оксазолом, оксазолином или имидазолом.

Соединения, охватываемые способом по настоящему изобретению, включают следующие соединения.

Формула V	Соединение	B	R₄, R₅ и R₆
	1a		H
	1b		H
	1c		H
	1d		H
	1e		H
	1f		H
	1g		H
	1h		H
	1i		H
	1k		H
	1l		H
	35a		H
	36a		H

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (VI) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (VI) имеет формулу:

…(VI),

где

n представляет собой целое число от 1 до 3; и

i представляет собой целое число от 1 до 5;

Настоящее изобретение охватывает способы со следующими соединениями.

Формула VI	Соединение	Y	R₄, R₅ и R₆
	1h	-C=O	H
	2a	-C=C(CH₃)₂	H
	2b	-CH-OH	H
	2c	-C=CH-CN (цис и транс)	H
	2d	-C=N-NH₂ (цис и транс)	H
	2e	-C=N-OH (цис и транс)	H
	2f	-C=N-OMe (цис и транс)	H
	2g	-(C=O)-NH-	H
	2h	-NH-(C=O)-	H
	2i	отсутствует	H
	2j	-C=N-CN (цис и транс)	H
	2k	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-F
	2l	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-OH
	2m	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-CH₃
	2n	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-CH₂-CN
	2o	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-N(CH₃)₂
	2p	C=O	R₄=m-F; R₅=p-F; R₆=m-F; n=1
	2q	C=O	R₄=R₆=H R₅= p-CH₂-(C=O)NH₂
	2r	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-CH₂NH₂
	2s	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-CH₂NH-CH₃
	2t	C=O	R₄=m-OMe; R₅=p-OMe; R₆=m-OMe; n=1
	2u	C=O	R₄=R₆=H R₅=p-CH₂NMe₂

В одном варианте осуществления настоящее изобретение направлено на соединение 3a:

…3a.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение направлено на соединение 3b:

…3b.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение направлено на соединение формулы (VII)

…(VII),

где

или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат, полиморф, метаболит, таутомер или изомер.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение направлено на следующие соединения:

Формула VII	Соединение	Y
	4a	S
	4b	SO₂
	4c	SO
	4d	-( SO₂)-NH-

В одном варианте осуществления настоящее изобретение направлено на соединение формулы (VIII)

…(VIII),

где

Q представляет собой S, O или NH;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 3;

Формула VIII	Соединение	R₄	R₅	R₆	Q
	5a	H n=1	H	H	S
	5b	H n=1	p-CH₃	H	S
	5c	H n=1	p-F	H	S
	5d	H n=1	p-Cl	H	S
	5e	H n=1	H	H	N

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (IX) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (IX):

…(IX),

где

R₄ и R₅ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂,

-(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -(O)NH₂ или NO₂;

A’ представляет собой галоген; замещенные или незамещенные однокольцевые, с конденсированными кольцами или многокольцевые, арильные или (гетеро)циклические кольцевые системы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные N-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные S-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные O-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные циклические углеводороды; или замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные смешанные гетероциклы; где указанное кольцо A’ необязательно замещено 1-5 заместителями, которые независимо представляют собой O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 1 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 3;

В одном варианте осуществления соединение формулы IX представлено структурой следующих соединений:

Формула IX	Соединение	A’	R₄, R₅
	6a		H
	6b		H
	6c		H
	6d	Cl	H

В другом варианте осуществления A' формулы IX представляет собой галоген. В одном варианте осуществления A’ в формуле IX представляет собой фенил. В другом варианте осуществления A' формулы IX представляет собой замещенный фенил. В другом варианте осуществления замещение A' представляет собой галоген. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 4-F. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 3,4,5-(OCH₃)₃. В другом варианте осуществления A’ в формуле IX представляет собой замещенный или незамещенный 5-индолил. В другом варианте осуществления A’ в формуле IX представляет собой замещенный или незамещенный 2-индолил. В другом варианте осуществления A' в формуле IX представляет собой замещенный или незамещенный 3-индолил.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (IXa) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (IXa):

…(IXa),

где

i представляет собой целое число от 1 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 3;

В другом варианте осуществления A' формулы IXa представляет собой галоген. В одном варианте осуществления A’ в формуле IXa представляет собой фенил. В другом варианте осуществления A' в формуле IXa представляет собой замещенный фенил. В другом варианте осуществления замещение A' представляет собой галоген. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 4-F. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 3,4,5-(OCH₃)₃. В другом варианте осуществления A’ в формуле IXa представляет собой замещенный или незамещенный 5-индолил. В другом варианте осуществления A’ в формуле IXa представляет собой замещенный или незамещенный 2-индолил. В другом варианте осуществления A' формулы IXa представляет собой замещенный или незамещенный 3-индолил.

В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1-хлор-7-(4-фторфенил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 7-(4-фторфенил)-1-(1H-индол-5-ил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 7-(4-фторфенил)-1-(3,4,5-триметоксифенил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1,7-бис(4-фторфенил)изохинолин (40). В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1,7-бис(3,4,5-триметоксифенил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1-(4-фторфенил)-7-(3,4,5-триметоксифенил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1-(1H-индол-5-ил)-7-(3,4,5-триметоксифенил)изохинолин. В другом варианте осуществления соединение формулы IXa представляет собой 1-хлор-7-(3,4,5-триметоксифенил)изохинолин.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XI) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XI) представлено структурой:

…(XI),

где

X представляет собой связь, NH или S;

Q представляет собой O, NH или S; и

A представляет собой замещенные или незамещенные однокольцевые, с конденсированными кольцами или многокольцевые арильные или (гетеро)циклические кольцевые системы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные N-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные S-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные O-гетероциклы; замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные циклические углеводороды; или замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные смешанные гетероциклы; где указанное кольцо A необязательно замещено 1-5 1-5 заместителями, которые независимо представляют собой O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂; и

i представляет собой целое число от 0 до 5;

В одном варианте осуществления если Q в формуле XI представляет собой S, то X не является связью.

В одном варианте осуществления A в соединении формулы XI представляет собой Ph. В другом варианте осуществления A в соединении формулы XI представляет собой замещенный Ph. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 4-F. В другом варианте осуществления замещение представляет собой 4-Me. В другом варианте осуществления Q в соединении формулы XI представляет собой S. В другом варианте осуществления X в соединении формулы XI представляет собой NH. Неограничивающие примеры соединений формулы XI выбраны из: (2-(фениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5a), (2-(п-толиламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5b), (2-(п-фторфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5c), (2-(4-хлорфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5d), (2-(фениламино)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5e), хлористоводородной соли (2-(фениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5Ha), хлористоводородной соли (2-(п-толиламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5Hb), (2-(п-фторфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5Hc), хлористоводородной соли (2-(4-хлорфениламино)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5Hd), хлористоводородной соли (2-(фениламино)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (5He).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XI(a) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XI(a) представлено структурой:

…XI(a),

где R₄ и R₅ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XI(b) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XI(b) представлено структурой:

…XI(b),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XI(c) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XI(c) представлено структурой:

…XI(c),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XI(d) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XI(d) представлено структурой:

…XI(d),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XI(e) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XI(e) представлено структурой:

…XI(e),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения соединения 55 в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение 55 представлено структурой:

…(55).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения соединения 17ya в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение 17ya представлено структурой:

…(17ya).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения из следующих структур в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение выбрано из следующих структур.

Соединение	Структура
8
9
10
11
12
13
14
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
32
33
34
35
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54

Понятно, что в структурах, представленных в настоящем изобретении, в которых атом азота имеет менее 3 связей, атомы Н присутствуют для завершения валентности азота.

В одном варианте осуществления группы A, A' и/или C в формулах I, I(a), IV, IX, IX(a) и XI независимо представляют собой замещенный и незамещенный фуранил, индолил, пиридинил, фенил, бифенил, трифенил, дифенилметан, адамантанил, флуоренил, и другие гетероциклические аналоги, такие как, например, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, тетразинил, пирролизинил, индолил, изохинолинил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, индазолил, хинолизинил, циннолинил, хиналолинил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалинил, оксиранил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, диоксанил, фуранил, пирилий, бензофуранил, бензодиоксолил, тиранил, тиетанил, тетрагидротиофенил, дитиоланил, тетрагидротиопиранил, тиофенил, тиепинил, тианафтенил, оксатиоланил, морфолинил, тиоксанил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазиолил).

В одном варианте осуществления группы A,A' и/или C представляют собой замещенный и незамещенный фенил. В другом варианте осуществления группы A, A’ и/или C представляют собой фенил, замещенный Cl, F или метилом. В одном варианте осуществления группы A,A' и/или C представляют собой замещенный и незамещенный изохинолинил. В одном варианте осуществления группы A, A'и/или C включают замещенные и незамещенные индолильные группы; наиболее предпочтительно, замещенный и незамещенный 3-индолил и 5-индолил.

В одном варианте осуществления группы A, A’ и/или C в формулах I, I(a), IV, IX, IX(a) и XI могут быть замещенными или незамещенными. Таким образом, хотя иллюстративные группы, перечисленные в предыдущем абзаце, являются незамещенными, специалистам в данной области должно быть понятно, что эти группы могут быть замещены одним или более, двумя или более, тремя или более заместителями и даже до пяти заместителей (помимо водорода).

В одном варианте осуществления наиболее предпочтительные группы A, A’и/или C замещены 3,4,5-триметоксифенилом. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены алкокси. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены метокси. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены алкилом. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены метилом. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены галогеном. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены F. В другом варианте осуществления группы A, A’и/или C замещены Cl. В другом варианте осуществления кольца A, A’и/или C замещены Br.

Заместители данных групп A, A’и/или C в формулах I, I(a), IV, IX, IX(a) и XI независимо выбраны из группы, состоящей из водорода (например, отсутствие замещения в определенном положении), гидроксила, алифатического C₁-C₁₀углеводорода с линейной или разветвленной цепью, алкокси, галогеналкокси, арилокси, нитро, циано, алкил-CN, галогена (например, F, Cl, Br, I), галогеналкила, дигалогеналкила, тригалогеналкила, COOH, C(O)Ph, C(O)-алкила, C(O)O-алкила, C(O)H, C(O)NH₂, -OC(O)CF₃, OCH₂Ph, амино, аминоалкила, алкиламино, мезиламино, диалкиламино, ариламино, амидо, NHC(O)-алкила, мочевины, алкилмочевины, алкиламидо (например, ацетамида), галогеналкиламидо, ариламидо, арила и C₅-C₇циклоалкила, арилалкила и их комбинаций. Одиночные заместители могут присутствовать в орто-, мета- или пара-положениях. Когда присутствуют два или более заместителей, один из них находится предпочтительно, хотя необязательно, в пара-положении.

В одном варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V выбрана из замещенного или незамещенного тиазола, тиазолидина, оксазола, оксазолина, оксазолидина, бензола, пиримидина, имидазола, пиридина, фурана, тиофена, изоксазола, пиперидина, пиразола, индола и изохинолина, где указанное кольцо B связано посредством любых двух положений кольца с X и Y или непосредственно с кольцами A и/или C.

В одном варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V не замещена. В другом варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V представляет собой:

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин).

В другом варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V замещена. В другом варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V представляет собой:

(тиазол),

(тиазолидин),

(оксазол),

(оксазолин),

(оксазолидин),

(бензол),

(бензол)

(пиримидин),

(имидазол),

(пиридин),

(фуран),

(тиофен),

(изоксазол),

,

(пиперидин),

(пиразол),

(индол) или

(изохинолин);

где R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой водород, O-алкил, O-галогеналкил, F, Cl, Br, I, галогеналкил, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, линейный или разветвленный C₁-C₅алкил, галогеналкил, алкиламино, аминоалкил, -OCH₂Ph, -NHCO-алкил, COOH, -C(O)Ph, C(O)O-алкил, C(O)H, -C(O)NH₂ или NO₂.

В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(тиазол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(тиазолидин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(оксазол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(оксазолин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(оксазолидин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(бензол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(пиримидин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(имидазол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(пиридин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(фуран). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(тиофен). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(изоксазол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(пиперидин). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(пиразол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(индол). В другом варианте осуществления группа B представляет собой

(изохинолин).

В одном варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V замещена R₁₀ и R₁₁. В другом варианте осуществления как R₁₀, так и R₁₁ представляют собой атомы водорода. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой F. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Cl. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Br. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой I. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -CH₂CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой гидроксил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNHCH₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iN(CH₃)_2. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OC(O)CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкиламино. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅аминоалкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -NHCO-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой COOH. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)H. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NO₂.

В другом варианте осуществления группа B в формуле I, I(a), II, III, IV, IVa и V представляет собой

(тиазол), где R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой H и l равняется 1. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой F. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Cl. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Br. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой I. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -CH₂CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой гидроксил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNHCH₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iN(CH₃)_2. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OC(O)CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкиламино. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅аминоалкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -NHCO-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой COOH. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)H. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NO₂.

(имидазол), где R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой H, и l представляет собой 1. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой F. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Cl. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Br. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой I. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -CH₂CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой гидроксил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNHCH₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iN(CH₃)_2. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OC(O)CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкиламино. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅аминоалкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -NHCO-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой COOH. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)H. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NO₂.

(изохинолин), где R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой H, и l представляет собой 1. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой O-галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой F. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Cl. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой Br. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой I. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -CH₂CN. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой гидроксил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNHCH₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iNH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -(CH₂)_iN(CH₃)_2. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OC(O)CF₃. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкиламино. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅аминоалкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -NHCO-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой COOH. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)Ph. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)O-алкил. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой C(O)H. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой -C(O)NH₂. В другом варианте осуществления R₁₀ и R₁₁ независимо представляют собой NO₂.

В одном варианте осуществления мостик X в формуле I, Ia, II, III, IV, IVa и XI представляет собой связь. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой NH. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой C₁-C₅углеводород. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой CH₂. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой –CH₂-CH₂-. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой O. В другом варианте осуществления мостик X представляет собой S.

В одном варианте осуществления мостик Y в формуле I, Ia, II, III, IV, IVa, VI и VII представляет собой C=O. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой C=S. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой C=N(NH₂)-. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -C=NOH. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –CH-OH. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -C=CH-(CN). В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -C=N(CN). В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -C=C(CH₃)₂. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -C=N-OMe. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -(C=O)NH-. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -NH(C=O)-. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –(C=O)-O. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –O-(C=O). В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –(CH₂)_1-5-(C=O). В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –(C=O)-(CH₂)_1-5. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой S. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой SO. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой SO₂. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой -CH=CH-. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –(SO₂)-NH-. В другом варианте осуществления мостик Y представляет собой –NH-(SO₂)-.

В одном варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ в формуле Ia, II, III, IV, IV(a), V, VI, VIII, IX, IX(a), XI(a), XI(b), XI(c), XI(d) и XI(e) независимо представляют собой водород. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой O-галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой F. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой Cl. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой Br. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой I. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой CF₃. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -CH₂CN. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой NH₂. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой гидроксил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -(CH₂)_iNHCH_3. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -(CH₂)_iNH_2. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -(CH₂)_iN(CH₃)_2. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -OC(O)CF_3. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой линейный или разветвленный C₁-C₅алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой галогеналкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой алкиламино. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой аминоалкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -NHCO-алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой COOH. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -C(O)Ph. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой C(O)O-алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой C(O)H. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой -C(O)NH_2. В другом варианте осуществления R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и R₆ независимо представляют собой NO₂.

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XII в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XII представлено структурой:

…(XII),

где

P и Q независимо представляют собой H или

;

W представляет собой C=O, C=S, SO₂ или S=O;

где по меньшей мере один из Q или P не является водородом;

R₁ и R₄ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂; C(O)O-алкил или C(O)H; где по меньшей мере один из R₁ и R₄ не является водородом;

R₂ и R₅ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

m представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы XIII в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы XIII представлено структурой:

…(XIII),

где

Z представляет собой O или S;

R₁ и R₄ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂; COOH, C(O)O-алкил или C(O)H; где по меньшей мере один из R₁ и R₄ не является водородом;

R₂ и R₅ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂; OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

m представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XIV) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XIV) представлено структурой:

…(XIV),

где R₁ и R₄ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H; где по меньшей мере один из R₁ и R₄ не является водородом;

m представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-F. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой OCH₃ и m равняется 3. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-F. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIV представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-Cl. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-Br. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII, XIII и XIV представляет собой 4-CF₃. Неограничивающие примеры соединений формулы XIV выбраны из: (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aa), (4-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12af), (2-(4-фторфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ba), (2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ca), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12cb), (2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12da), (4-фторфенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12db), (4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12dc), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12fa), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12fb), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)метанона (12fc), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ga); (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gb), (2-(3,4-диметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ha), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12jb), (2-(4-бромфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12la), (2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12pa).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XIVa) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XIVa) представлено структурой:

…(XIVa),

R₂ и R₅ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

R₉ представляет собой H, линейный или разветвленный, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный арил, CH₂Ph, замещенный бензил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, замещенный или незамещенный SO₂-арил, замещенный или незамещенный -(C=O)-арил или OH;

где замещения независимо выбраны из группы водорода (например, отсутствие замещения в определенном положении), гидроксила, алифатического прямого или с разветвленной цепью C₁-C₁₀углеводорода, алкокси, галогеналкокси, арилокси, нитро, циано, алкил-CN, галогена (например, F, Cl, Br, I), галогеналкила, дигалогеналкила, тригалогеналкила, COOH, C(O)Ph, C(O)-алкила, C(O)O-алкила, C(O)H, C(O)NH₂, -OC(O)CF₃, OCH₂Ph, амино, аминоалкила, алкиламино, мезиламино, диалкиламино, ариламино, амидо, NHC(O)-алкила, мочевины, алкилмочевины, алкиламидо (например, ацетамида), галогеналкиламидо, ариламидо, арила и C₅-C₇циклоалкила, арилалкила и их комбинаций;

m представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₉ соединения формулы XIVa представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₉ соединения формулы XIVa представляет собой CH₂Ph. В другом варианте осуществления R₉ соединения формулы XIVa представляет собой (SO₂)Ph. В другом варианте осуществления R₉ соединения формулы XIVa представляет собой (SO₂)-Ph-OCH₃. В другом варианте осуществления R₉ в соединении формулы XIVa представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой OH. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой 4-Cl. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой 4-N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XIVa представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XIVa представляет собой OCH₃; m равняется 3, и R₂ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XIVa представляет собой F; m равняется 1, и R₂ представляет собой H. Неограничивающие примеры соединений формулы XIVa выбраны из: (4-фторфенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11af), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11cb), (4-фторфенил)(1-(фенилсульфонил)-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11db), (2-(4-хлорфенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11fb), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ga), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11gb), (2-(3,4-диметоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ha), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11jb), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-((4-метоксифенил)сульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gba), (1-бензил-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12daa), (1-метил-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12dab), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1-метил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12cba).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XV) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XV) представлено структурой:

…(XV),

где R₄ и R₅ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой F. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XV представляет собой CF₃. Неограничивающие примеры соединений формулы XV выбраны из: (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aa), (2-(4-фторфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ba), (2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ca), (2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12da), (3,4,5-триметоксифенил)(2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ea), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12fa), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ga), (2-(3,4-диметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ha), (2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ia), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ja), (2-(4-гидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ka), (2-(4-бромфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12la), (2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12pa).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XVI) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XVI) представлено структурой:

…(XVI),

R₃ представляет собой I, Br, Cl, или F;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₃ в соединении формулы XVI представляет собой галоген. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OCH₃; n равняется 3, и R₅ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой F. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F; R₅представляет собой водород; n равняется 1, и R₄ представляет собой 4-Cl. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F; R₅представляет собой водород; n равняется 1, и R₄ представляет собой 4-OCH₃. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F; R₅представляет собой водород; n равняется 1, и R₄ представляет собой 4-CH₃. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F; R₅представляет собой водород; n равняется 1, и R₄ представляет собой 4-N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₃ представляет собой F; R₅представляет собой водород; n равняется 1, и R₄ представляет собой 4-OBn. Неограничивающие примеры соединений формулы XVI выбраны из: (4-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12af), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12cb), (4-фторфенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12db), 4-фторфенил)(2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12eb), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12fb), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gb), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12jb).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XVII) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XVII) представлено структурой:

…(XVII),

где R₄ представляет собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

где R₁ и R₂ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

и

m представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVII представляет собой галоген. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой F. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой CH₃. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой CF₃. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OH. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XVII представляет собой галоген. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XVII представляет собой F. В другом варианте осуществления R₁ соединения формулы XVII представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XVII представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XVII представляет собой I. В другом варианте осуществления R₁ соединения формулы XVII представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XVII представляет собой OCH₃, m равняется 3, и R₂ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₁ соединения формулы XVII представляет собой F, m равняется 1, и R₂ представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой F; R₂представляет собой водород; n равняется 3, и R₁ представляет собой OCH_3. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой OCH₃; R₂представляет собой водород; n равняется 3, и R₁ представляет собой OCH_3. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой CH₃; R₂представляет собой водород; n равняется 3, и R₁ представляет собой OCH_3. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Cl; R₂представляет собой водород; n равняется 3, и R₁ представляет собой OCH_3. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой N(Me)₂; R₂представляет собой водород; n равняется 3, и R₁ представляет собой OCH_3.В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVII представляет собой галоген, R₁ представляет собой H, и R₂ представляет собой галоген. В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVII представляет собой галоген, R₁ представляет собой галоген и R₂ представляет собой H. В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVII представляет собой алкокси, R₁ представляет собой галоген, и R₂ представляет собой H. В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVII представляет собой метокси, R₁ представляет собой галоген, и R₂ представляет собой H. Неограничивающие примеры соединений формулы XVII выбраны из: (2-(4-фторфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ba), (2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ca), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12cb), (2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12da), (4-фторфенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12db), (4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12dc), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12fa), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12fb), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-тригидроксифенил)метанона (13fa), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ga), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gb), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12jb), (2-(4-гидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ka), (2-(4-бромфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12la), (2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12pa).

В другом варианте осуществления соединение формулы XVII представлено структурой формулы 12fb:

…(12fb).

В другом варианте осуществления соединение формулы XVII представлено структурой формулы 12cb:

…(12cb).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XVIII) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XVIII) представлено структурой:

…(XVIII),

где

W представляет собой C=O, C=S, SO₂ или S=O;

R₄ и R₇ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

R₅ и R₈ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

n представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

q представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления W в соединении формулы XVIII представляет собой C=O. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XVIII представляет собой SO₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVIII представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVIII представляет собой NO₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XVIII представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₇ соединения формулы XVIII представляет собой H. В другом варианте осуществления R₇ соединения формулы XVIII представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₇ соединения формулы XVIII представляет собой OCH₃, и q представляет собой 3. Неограничивающие примеры соединений формулы XVII выбраны из: (4-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-1-ил)метанона (12aba), (2-фенил-1H-имидазол-1-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aaa), 2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазола (10a), 2-(4-нитрофенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазола (10x), 2-(4-(бензилокси)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазола (10j).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XIX) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XIX) представлено структурой:

…(XIX),

где

W представляет собой C=O, C=S, SO₂, S=O;

R₁, R₄ и R₇ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

R₂, R₅ и R₈ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

m представляет собой целое число от 1 до 4;

n представляет собой целое число от 1 до 4;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

q равняется от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой H. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ формулы XIX независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой галоген. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой OH. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой алкил. В другом варианте осуществления R₁, R₄ и R₇ в формуле XIX независимо представляют собой OCH₂Ph. В одном варианте осуществления R₂, R₅ и R₈ в формуле XIX независимо представляют собой H. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈в формуле XIX независимо представляют собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈в формуле XIX независимо представляют собой галоген. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈в формуле XIX независимо представляют собой CN. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈ в формуле XIX независимо представляют собой OH. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈в формуле XIX независимо представляют собой алкил. В другом варианте осуществления R₂, R₅ и R₈ в формуле XIX независимо представляют собой OCH₂Ph. В другом варианте осуществления R₅, R₂ и R₈ в формуле XIX представляют собой H, R₄ представляет собой 4-N(Me)₂, R₁ представляет собой OCH₃, m равняется 3, и R₇ представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₅, R₂, R₇ и R₈ в формуле XIX представляют собой H, R₄ представляет собой 4-Br, R₁ представляет собой OCH₃, и m равняется 3. В другом варианте осуществления W представляет собой SO₂. В другом варианте осуществления W представляет собой C=O. В другом варианте осуществления W представляет собой C=S. В другом варианте осуществления W представляет собой S=O. Неограничивающие примеры соединений формулы XIX выбраны из: (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-((4-метоксифенил)сульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11gaa); (2-(4-бромфенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11la), (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11cb), (2-(4-хлорфенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11fb), (4-фторфенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11af), (4-фторфенил)(1-(фенилсульфонил)-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11db), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ga), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11gb), (2-(3,4-диметоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ha), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11jb), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-((4-метоксифенил)сульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gba).

В другом варианте осуществления соединение формулы XIX представлено структурой формулы 11cb:

…(11cb).

В другом варианте осуществления соединение формулы XIX представлено структурой формулы 11fb:

…(11fb).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XX) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XX) представлено структурой:

…(XX),

где

R₄ представляет собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H; и

i представляет собой целое число от 0 до 5;

В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XX представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ соединения формулы XX представляет собой галоген. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой F. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ представляет собой алкил. В другом варианте осуществления R₄представляет собой метил. Неограничивающие примеры соединений формулы XX выбраны из: (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aa), (2-(4-фторфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ba), (2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ca), (2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12da), (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12fa), (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ga), (2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ia), (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ja), (2-(4-гидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ka), (2-(4-бромфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12la), (2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12pa).

В другом варианте осуществления соединение формулы XX представлено структурой формулы 12da:

…(12da).

В другом варианте осуществления соединение формулы XX представлено структурой формулы 12fa:

…(12fa).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XXI) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XXI) представлено структурой:

…(XXI)

где

A представляет собой индолил;

Q представляет собой NH, O или S;

R₁ и R₂ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H; и

где указанное A необязательно замещено замещенным или незамещенным O-алкилом, O-галогеналкилом, F, Cl, Br, I, галогеналкилом, CF₃, CN, -CH₂CN, NH₂, гидроксилом, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, -OC(O)CF₃, замещенным или незамещенным -SO₂-арилом, замещенным или незамещенным линейным или разветвленным C₁-C₅алкилом, замещенным или незамещенным галогеналкилом, замещенным или незамещенным алкиламино, замещенным или незамещенным аминоалкилом, -OCH₂Ph, замещенным или незамещенным -NHCO-алкилом, COOH, замещенным или незамещенным -C(O)Ph, замещенным или незамещенным C(O)O-алкилом, C(O)H, -C(O)NH₂, NO₂ или их комбинацией;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

m представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₁ в соединении формулы XXI представляет собой OCH₃; m равняется 3, и R₂ представляет собой водород. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой F; m равняется 1, и R₂ представляет собой водород. В одном варианте осуществления Q в формуле XXI представляет собой O. В другом варианте осуществления Q в формуле XXI представляет собой NH. В другом варианте осуществления Q в формуле XXI представляет собой S.

В одном варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXI представляет собой замещенный 5-индолил. В другом варианте осуществления замещение представляет собой –(C=O)-арил. В другом варианте осуществления арил представляет собой 3,4,5-(OCH₃)₃-Ph.

В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXI представляет собой 3-индолил. В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXI представляет собой 5-индолил. В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXI представляет собой 2-индолил. Неограничивающие примеры соединений формулы XXI выбраны из: (5-(4-(3,4,5-триметоксибензоил)-1H-имидазол-2-ил)-1H-индол-2-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (15xaa); (1-(фенилсульфонил)-2-(1-(фенилсульфонил)-2-(3,4,5-триметоксибензоил)-1H-индол-5-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (16xaa); 2-(1H-индол-3-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (17ya); (2-(1H-индол-2-ил)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (62a) и (2-(1H-индол-5-ил)тиазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (66a).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XXIa) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XXIa) представлено структурой:

…(XXIa)

где

W представляет собой C=O, C=S, SO₂, S=O;

A представляет собой индолил;

R₁ и R₂ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

R₇ и R₈ независимо представляют собой H, O-алкил, I, Br, Cl, F, алкил, галогеналкил, аминоалкил, -(CH₂)_iNHCH₃, -(CH₂)_iNH₂, -(CH₂)_iN(CH₃)₂, OCH₂Ph, OH, CN, NO₂, -NHCO-алкил, COOH, C(O)O-алкил или C(O)H;

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

m представляет собой целое число от 1 до 4;

q представляет собой целое число от 1 до 4;

В одном варианте осуществления R₁ в соединении формулы XXIa представляет собой OCH₃; m равняется 3, и R₂ представляет собой водород. В другом варианте осуществления R₁ представляет собой F; m равняется 1, и R₂ представляет собой водород. В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXIa замещено 5-индолилом. В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXIa представляет собой 3-индолил. Неограничивающие примеры соединений формулы XXIa выбраны из: (1-(фенилсульфонил)-2-(1-(фенилсульфонил)-2-(3,4,5-триметоксибензоил)-1H-индол-5-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (16xaa); (1-(фенилсульфонил)-2-(1-(фенилсульфонил)-1H-индол-3-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (17yaa).

Настоящее изобретение также охватывает способы лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника с помощью введения по меньшей мере одного соединения формулы (XXII) в терапевтически эффективном количестве субъекту, нуждающемуся в этом, где соединение формулы (XXII) представлено структурой:

…(XXII),

где

A представляет собой индолил;

i представляет собой целое число от 0 до 5;

В одном варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXII представляет собой замещенный 5-индолил. В другом варианте осуществления замещение представляет собой –(C=O)-арил. В другом варианте осуществления арил представляет собой 3,4,5-(OCH₃)₃-Ph.

В другом варианте осуществления кольцо A соединения формулы XXII представляет собой 3-индолил. Неограничивающие примеры соединений формулы XXII выбраны из: (5-(4-(3,4,5-триметоксибензоил)-1H-имидазол-2-ил)-1H-индол-2-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (15xaa); (2-(1H-индол-3-ил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (17ya),

В другом варианте осуществления соединение формулы XXI или XXII представлено структурой формулы 17ya:

…(17ya).

В одном варианте осуществления Q в соединении формулы XII представляет собой H, и P представляет собой

. В другом варианте осуществления P в соединении формулы XII представляет собой H, и Q представляет собой

. В другом варианте осуществления P в соединении формулы XII представляет собой

, и Q представляет собой SO₂-Ph. В одном варианте осуществления. Q в соединении формулы XII представляет собой H, и P представляет собой

, где W представляет собой C=O. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XII, XVIII, XIX или XXIa представляет собой C=O. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XII, XVIII, XIX или XXIa представляет собой SO₂. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XII, XVIII, XIX или XXIa представляет собой C=S. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XII, XVIII, XIX или XXIa представляет собой S=O.

В одном варианте осуществления Z в соединении формулы XIII представляет собой кислород. В другом варианте осуществления Z в соединении формулы XIII представляет собой серу.

В одном варианте осуществления R₅ в соединении формулы XII—XVI, XVIII или XIX представляет собой водород, n равняется 1, и R₄ находится в пара-положении.

В одном варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой алкил. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой H. В другом варианте осуществления R₄ соединения формулы XII—XX представляет собой метил (CH₃). В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой O-алкил. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой OCH₃. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой I. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой F. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой N(Me)₂. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой OBn. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой OH. В другом варианте осуществления R₄ в соединении формулы XII—XX представляет собой CF₃.

В одном варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; R₁ представляет собой OCH₃, и m равняется 3. В другом варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; m равняется 1, и R₁ находится в пара-положении. В другом варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; m равняется 1, и R₁ представляет собой I. В другом варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; m равняется 1, и R₁ представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; m равняется 1, и R₁ представляет собой F. В другом варианте осуществления R₂ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой водород; m равняется 1, и R₁ представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой I. В другом варианте осуществления R₁ соединения формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой Br. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой Cl. В другом варианте осуществления R₁ в соединении формулы XII, XIII, XIV, XIVa, XVII, XIX, XXI или XXIa представляет собой F.

, где W представляет собой C=O. Неограничивающие примеры соединений формулы XII—XVII и XX—XXII выбраны из (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aa); (4-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ab); (3-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ac); (3,5-диметоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ad); (3,4-диметоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ae); (4-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12af); (3-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ag); (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(п-толил)метанона (12ah); (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(м-толил)метанона (12ai); (2-(4-фторфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ba); (2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ca); (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12cb); (2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12da); (4-фторфенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12db); (4-фторфенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона гидрохлорида (12db-HCl); (4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)(2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12dc); (3,4,5-триметоксифенил)(2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ea); (4-фторфенил)(2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12eb); (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12fa); (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12fb); (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)метанона (12fc); (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ga); (2-(4-(диметиламино)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12gb); (2-(3,4-диметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ha); (2-(3,4-диметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12hb); (2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ia); (4-фторфенил)(2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ib); (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ja); (2-(4-(бензилокси)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12jb); (2-(4-гидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12ka); (2-(4-(гидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (12kb); (2-(4-бромфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12la); (2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12pa); (3,4,5-тригидроксифенил)(2-(3,4,5-тригидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (13ea); (2-(4-хлорфенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-тригидроксифенил)метанона (13fa) и 2-(3,4-дигидроксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-тригидроксифенил)метанона (13ha).

В одном варианте осуществления P в соединении формулы XII представляет собой

, и Q представляет собой SO₂-Ph. Неограничивающие примеры соединения формулы XII, где P в соединении формулы XII представляет собой

, и Q представляет собой SO₂-Ph, выбраны из (4-метоксифенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11ab); (3-метоксифенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11ac); (2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(п-толил)метанона (11ah); (4-фторфенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11af); (3-фторфенил)(2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11ag); (4-фторфенил)(2-(4-метоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11cb); (1-(фенилсульфонил)-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11da) ; (4-фторфенил)(1-(фенилсульфонил)-2-(п-толил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11db); (1-(фенилсульфонил)-2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ea); (4-фторфенил)(1-(фенилсульфонил)-2-(3,4,5-триметоксифенил)-1H-имидазол-4-ил)метанона (11eb); (2-(4-хлорфенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11fb); (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ga); (2-(4-(диметиламино)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11gb); (2-(3,4-диметоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ha); (2-(3,4-диметоксифенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11hb); (1-(фенилсульфонил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11ia); (1-(фенилсульфонил)-2-(2-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11ib); и (2-(4-(бензилокси)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(4-фторфенил)метанона (11jb); (2-(4-бромфенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11la); (1-(фенилсульфонил)-2-(4-(трифторметил)фенил)-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (11pa).

В одном варианте осуществления R₄ и R₅ в соединениях формулы XIII-XVI представляют собой атомы водорода. Неограничивающие примеры соединений формулы XIII-XVI, где R₄ и R₅ представляют собой атомы водорода, выбраны из (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aa); (4-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ab); (3-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ac); (3,5-диметоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанон (12ad); (3,4-диметоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ae); (4-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12af); (3-фторфенил)(2-фенил-1H-имидазол-4-ил)метанона (12ag); (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(п-толил)метанона (12ah) и (2-фенил-1H-имидазол-4-ил)(м-толил)метанона (12ai).

В одном варианте осуществления P в соединении формулы XII представляет собой H, и Q представляет собой

. В другом варианте осуществления W представляет собой C=O. В другом варианте осуществления W в соединении формулы XVIII представляет собой C=O. Неограничивающие примеры соединения формулы XVIII, где W представляет собой C=O, выбраны из (4-метоксифенил)(2-фенил-1H-имидазол-1-ил)метанона (12aba) и (2-фенил-1H-имидазол-1-ил)(3,4,5-триметоксифенил)метанона (12aaa).

В другом варианте осуществления W в соединении формулы XVIII представляет собой SO₂. Неограничивающие примеры соединения формулы XVIII, где W представляет собой SO₂, выбраны из 2-фенил-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазола (10a); 2-(4-нитрофенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазол (10x) и 2-(4-(бензилокси)фенил)-1-(фенилсульфонил)-1H-имидазола (10j).

Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака предстательной железы, рака предстательной железы, резистентного в отношении таксана, рака молочной железы, трижды негативного рака молочной железы, рака легкого, меланомы, глиомы, рака толстой кишки, рака матки, рака яичника и рака поджелудочной железы с применением соединения, описанного в данном документе, например, соединения с формулами VIII, XI, XI(b), XI(c), XI((e) и соединений 5a, 5b, 5c, 5d, 5e, 17ya и 55. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака предстательной железы, рака предстательной железы, резистентного в отношении таксана, рака молочной железы, трижды негативного рака молочной железы, рака легкого, меланомы, глиомы, рака толстой кишки, рака матки, рака яичника и рака поджелудочной железы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака предстательной железы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака предстательной железы, резистентного в отношении таксана, с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака легкого с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака молочной железы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения меланомы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения глиомы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака толстой кишки с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака предстательной железы, рака предстательной железы, резистентного в отношении таксана, рака молочной железы, трижды негативного рака молочной железы, рака легкого, меланомы, глиомы, рака толстой кишки, рака матки, рака яичника и рака поджелудочной железы с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака матки с применением соединения, описанного в данном документе. Настоящее изобретение дополнительно охватывает способы лечения рака поджелудочной железы с применением соединения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления соединение представляет собой соединение формул VIII, XI, XI(b), XI(c) и XI((e) и соединения 5a, 5b, 5c, 5d, 5e, 17ya и 55. В одном варианте осуществления соединение представляет собой соединение с формулой XI. В одном варианте осуществления соединение представляет собой соединение с формулой XI(e). В одном варианте осуществления соединение представляет собой соединение 17ya. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 55.

Применяемые в данном документе термины «однокольцевые, с конденсированными кольцами или многокольцевые, арильные или (гетеро)циклические кольцевые системы» могут представлять собой любое такое кольцо, в том числе без ограничения фенил, бифенил, трифенил, нафтил, циклоалкил, циклоалкенил, циклодиенил, флуорен, адамантан и т.д.

«Насыщенные или ненасыщенные N-гетероциклы» могут представлять собой любой такой N-содержащий гетероцикл, в том числе без ограничения аза- и диазациклоалкилы, такие как азиридинил, азетидинил, диазатидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил и азоканил, пирролил, пиразолил, имидазолил, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, тетразинил, пирролизинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, индазолил, хинолизинил, циннолинил, хинололинил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалинил и т.д.

«Насыщенные или ненасыщенные O-гетероциклы» могут представлять собой любой такой O-содержащий гетероцикл, в том числе без ограничения оксиранил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, диоксанил, фуранил, пирилий, бензофуранил, бензодиоксолил, и т.д.

«Насыщенные или ненасыщенные S-гетероциклы» могут представлять собой любой такой S-содержащий гетероцикл, в том числе без ограничения тиранил, тиетанил, тетрагидротиофенил, дитиоланил, тетрагидротиопиранил, тиофенил, тиепинил, тианафтенил и т.д.

«Насыщенные или ненасыщенные смешанные гетероциклы» могут представлять собой любой гетероцикл, содержащий два или более гетероатомов, представляющих собой S, N или O, в том числе без ограничения оксатиоланил, морфолинил, тиоксанил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазиолил и т.д.

Применяемый в данном документе термин «алифатический углеводород с прямой или с разветвленной цепью» относится как к алкиленовым группам, которые содержат один атом углерода до определенного верхнего предела, так и к алкенильным группам и алкинильным группам, которые содержат два атома углерода до верхнего предела, независимо от того, присутствуют ли атомы углерода в одной цепи или в разветвленной цепи. Если конкретно не указано иное, углеводород может включать не более приблизительно атомов 30 углерода или не более приблизительно 20 углеводородов, или не более приблизительно 10 углеводородов. Алкенильные и алкинильные группы могут быть моно-ненасыщенными или полиненасыщенными. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₆ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₈ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₁₀ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил предусматривает C₁-C₁₂ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил предусматривает C₁-C₅ атомов углерода.

Применяемый в данном документе термин «алкил» может представлять собой любую алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую до приблизительно 30 атомов углерода, если не указано иное. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₆ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₈ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил включает C₁-C₁₀ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил предусматривает C₁-C₁₂ атомов углерода. В другом варианте осуществления алкил предусматривает C₁-C₂₀ атомов углерода. В другом варианте осуществления циклическая алкильная группа содержит 3-8 атомов углерода. В другом варианте осуществления разветвленный алкил представляет собой алкил, замещенный боковыми алкильными цепями с 1-5 атомами углерода.

Алкильная группа может быть единственным заместителем или может быть компонентом более крупного заместителя, такого как алкокси, галогеналкил, арилалкил, алкиламино, диалкиламино, алкиламидо, алкилмочевина и т.д. Предпочтительные алкильные группы представляют собой метил, этил и пропил, и таким образом галогенметил, дигалогенметил, тригалогенметил, галогенэтил, дигалогенэтил, тригалогенэтил, галогенпропил, дигалогенпропил, тригалогенпропил, метокси, этокси, пропокси, арилметил, арилэтил, арилпропил, метиламино, этиламино, пропиламино, диметиламино, диэтиламино, метиламидо, ацетамидо, пропиламидо, галогенметиламидо, галогенэтиламидо, галогенпропиламидо, метилмочевину, этилмочевину, пропилмочевину и т.д.

Применяемый в данном документе термин «арил» относится к любому ароматическому кольцу, которое непосредственно связано с другой группой. Арильная группа может быть единственным заместителем, или арильная группа может быть компонентом более крупного заместителя, такого как арилалкил, ариламино, ариламидо и т.д. Иллюстративные арильные группы включают без ограничения фенил, толил, ксилил, фуранил, нафтил, пиридинил, пиримидинил, пиридазинил, пиразинил, триазинил, тиазолил, оксазолил, изооксазолил, пиразолил, имидазолил, тиофенил, пирролил, фенилметил, фенилэтил, фениламино, фениламидо и т.д.

Применяемый в данном документе термин «аминоалкил» относится к аминогруппе, замещенной алкильной группой, как определено выше. Аминоалкил относится к моноалкиламину, диалкиламину или триалкиламину. Неограничивающие примеры аминоалкильных групп представляют собой -N(Me)₂, -NHMe, -NH₃.

В другом варианте осуществления «галогеналкильная» группа относится к алкильной группе, как определено выше, которая замещена одним или более атомами галогена, например F, Cl, Br или I. Неограничивающими примерами галогеналкильных групп являются CF₃, CF₂CF₃, CH₂CF₃.

В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрено соединение, применяемое по настоящему изобретению, или его изомер, метаболит, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтический продукт, таутомер, гидрат, N-оксид, полиморф или кристалл или их комбинации. В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен изомер соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен метаболит соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрена фармацевтически приемлемая соль соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен фармацевтический продукт соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен таутомер соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен гидрат соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен N-оксид соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен полиморф соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен кристалл соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрена композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению, описанное в данном документе, или в другом варианте осуществления комбинацию изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, таутомера, гидрата, N-оксида, полиморфа или кристалла соединения по настоящему изобретению.

В одном варианте осуществления термин «изомер» включает без ограничения, оптические изомеры и аналоги, структурные изомеры и аналоги, конформационные изомеры и аналоги и т.п.

В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой чистые (E)-изомеры. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой чистые (Z)-изомеры. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой смесь (E)- и (Z)-изомеров. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой чистые (R)-изомеры. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой чистые (S)-изомеры. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой смесь (R)- и (S)-изомеров.

Соединения по настоящему изобретению могут также присутствовать в форме рацемической смеси, содержащей по существу эквивалентные количества стереоизомеров. В другом варианте осуществления соединения по настоящему изобретению можно получить или выделить иным образом с использованием известных процедур для получения стереоизомера, по существу не содержащего его соответствующего стереоизомера (т.е. по существу чистого). Под «по существу чистым» подразумевается, что стереоизомер является чистым на по меньшей мере приблизительно 95%, более предпочтительно чистым на по меньшей мере приблизительно 98%, наиболее предпочтительно чистым на по меньшей мере приблизительно 99%.

Соединения по настоящему изобретению могут также находиться в форме гидрата, что означает, что соединение дополнительно включает стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной нековалентными межмолекулярными силами.

Соединения по настоящему изобретению могут существовать в форме одного или более возможных таутомеров, и в зависимости от конкретных условий может оказаться возможным разделить некоторые или все таутомеры на индивидуальные и отдельные объекты. Следует понимать, что настоящим охватываются все возможные таутомеры, включая все дополнительные енольные и кето-таутомеры и/или изомеры. Например, включены без ограничения следующие таутомеры.

Таутомеризация имидазольного кольца

Настоящее изобретение включает «фармацевтически приемлемые соли» соединений по настоящему изобретению, которые можно получить с помощью реакции соединения по настоящему изобретению с кислотой или основанием. Некоторые соединения, в частности те, которые содержат кислотные или основные группы, также могут находиться в форме соли, предпочтительно фармацевтически приемлемой соли. Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований или свободных кислот, которые не являются нежелательными с биологической или иной точки зрения. Соли образуются с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., и с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, N-ацетилцистеин и т.п. Другие соли известны специалистам в данной области и могут быть легко адаптированы для использования в соответствии с настоящим изобретением.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли аминов соединений по настоящему изобретению могут быть получены из неорганической кислоты или из органической кислоты. В одном варианте осуществления примерами неорганических солей аминов являются бисульфаты, бораты, бромиды, хлориды, гемисульфаты, гидроброматы, гидрохлораты, 2-гидроксиэтилсульфонаты (гидроксиэтансульфонаты), йодаты, йодиды, изотионаты, нитраты, персульфаты, фосфаты, сульфаты, сульфаматы, сульфанилаты, сульфоновые кислоты (алкилсульфонаты, арилсульфонаты, галогензамещенные алкилсульфонаты, галогензамещенные арилсульфонаты), сульфонаты и тиоцианаты.

В одном варианте осуществления примеры органических солей аминов могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются ацетаты, аргинины, аспартаты, аскорбаты, адипаты, антранилаты, альгинаты, алканкарбоксилаты, замещенные алканкарбоксилаты, альгинаты, бензолсульфонаты, бензоаты, бисульфаты, бутираты, бикарбонаты, битартраты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклогексилсульфаматы, циклопентанпропионаты, эдетаты кальция, камсилаты, карбонаты, клавуланаты, циннаматы, дикарбоксилаты, диглюконаты, додецилсульфонаты, дигидрохлориды, деканоаты, энантуаты, этансульфонаты, эдетаты, эдисилаты, эстолаты, эзилаты, фумараты, формиаты, фториды, галактуронаты, глюконаты, глутаматы, гликоляты, глюкорат, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, глюцептаты, гликоллиларсанилаты, глутараты, глутамат, гептаноаты, гексаноаты, гидроксималеаты, гидроксикарбоновые кислоты, гексилрезорцинаты, гидроксибензоаты, гидроксинафтоаты, гидрофтораты, лактаты, лактобионаты, лаураты, малаты, малеаты, метиленбис(бета-оксинафтоат), малонаты, манделаты, мезилаты, сульфонаты метана, метилбромиды, метилнитраты, метилсульфонаты, малеаты калия, мукаты, монокарбоксилаты, нафталинсульфонаты, 2-нафталинсульфонаты, никотинaты, нитраты, напсилаты, N-метилглюкамины, оксалаты, октаноаты, олеаты, памоаты, фенилацетаты, пикраты, фенилбензоаты, пивалаты, пропионаты, фталаты, фенилацетат, пектинаты, фенилпропионаты, пальмитаты, пантотенаты, полигалактураты, пируваты, хинаты, салицилаты, сукцинаты, стеараты, сульфанилаты, субацетаты, тартраты, теофиллинацетаты, п-толуолсульфонаты (тозилаты), трифторацетаты, терефталаты, таннаты, теоклаты, тригалоацетаты, триэтиодид, трикарбоксилаты, ундеканаты и валераты.

В одном варианте осуществления примеры неорганических солей карбоновых кислот или гидроксилов могут быть выбраны из солей аммония, щелочных металлов, включая литий, натрий, калий, цезий; щелочноземельные металлы, включая кальций, магний, алюминий; цинк, барий, холины, солей четвертичного аммония.

В другом варианте осуществления примеры органических солей карбоновых кислот или гидроксила могут быть выбраны из аргинина, органических аминов, включая алифатические органические амины, алициклические органические амины, ароматические органические амины, бензатины, трет-бутиламины, бенетамины (N-бензилфенэтиламин), дициклогексиламины, диметиламины, диэтаноламины, этаноламины, этилендиамины, гидрабамины, имидазолы, лизины, метиламины, меламины, N-метил-D-глюкамины, N,N’-дибензилэтилендиамины, никотинамиды, органические амины, орнитины, пиридины, пиколины, пиперазины, прокаин, трис(гидроксиметил)метиламины, триэтиламины, триэтаноламины, триметиламины, трометамины и мочевина.

В одном варианте осуществления соли могут быть образованы обычными способами, такими как взаимодействие формы продукта свободного основания или свободной кислоты с одним или более эквивалентами соответствующей кислоты или основания в растворителе или среде, в которых соль нерастворима или в растворителе, таком как вода, который удаляют в вакууме или сублимационным высушиванием, или заменой ионов существующей соли на другой ион или подходящую ионообменную смолу.

Соединения, используемые в способе по настоящему изобретению, синтезируют согласно опубликованным способам. В частности, соединения синтезируют в соответствии со способами, описанными в публикациях PCT №№ WO 2010/74776, опубликованной 1 июля 2010 г.; WO 2011/19059, опубликованной 9 сентября 2010 г.; и WO 2012/027481, опубликованной 1 марта 2012 г., которые включены в настоящий документ посредством ссылки.

Фармацевтическая композиция

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции для применения при лечении трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника, включающей фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно соединение, описанное выше. Обычно фармацевтическая композиция по настоящему изобретению будет включать соединение или его фармацевтически приемлемую соль, а также фармацевтически приемлемый носитель. Термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к любым подходящим вспомогательным веществам, носителям, наполнителям или стабилизаторам и может находиться в твердой или жидкой форме, такой как таблетки, капсулы, порошки, растворы, суспензии или эмульсии.

Как правило композиция будет содержать от приблизительно 0,01 до 99 процентов, предпочтительно от приблизительно 20 до 75 процентов активного(-ых) соединения(-ий) совместно со вспомогательными веществами, носителями и/или наполнителями. Хотя индивидуальные потребности могут варьироваться, определение оптимальных диапазонов эффективных количеств каждого компонента находится в пределах компетенции специалистов в данной области. Типичные дозировки составляют от приблизительно 0,01 до приблизительно 100 мг/кг массы тела. Предпочтительные дозировки составляют от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мг/кг массы тела. Наиболее предпочтительные дозировки составляют от приблизительно 1 до приблизительно 100 мг/кг массы тела. Схему лечения для введения соединений по настоящему изобретению также могут легко определить специалисты в данной области. То есть частоту введения и размер дозы можно установить обычной оптимизацией, предпочтительно с минимизацией любых побочных эффектов.

Твердые стандартные лекарственные формы могут быть традиционного типа. Твердая форма может представлять собой капсулу и т.п., например, обычного желатинового типа, содержащую соединения и носитель, например смазывающие вещества и инертные заполнители, такие как лактоза, сахароза или кукурузный крахмал. Соединения могут быть подвергнуты таблетированию с обычными основами для таблеток, такими как лактоза, сахароза или кукурузный крахмал, в сочетании со связующими, такими как аравийская камедь, кукурузный крахмал или желатин, разрыхлителями, такими как кукурузный крахмал, картофельный крахмал или альгиновая кислота, и смазывающим веществом, таким как стеариновая кислота или стеарат магния.

Таблетки, капсулы и т.п. также могут содержать связующее, такое как трагакантовая камедь, аравийская камедь, кукурузный крахмал или желатин; наполнители, такие как дикальцийфосфат; разрыхлитель, такой как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота; смазывающее вещество, такой как стеарат магния; и подсластитель, такой как сахароза, лактоза или сахарин. Когда стандартная дозированная форма представляет собой капсулу, она может содержать, помимо материалов вышеуказанного типа, жидкий носитель, такой как жирное масло.

Различные другие материалы могут присутствовать в качестве покрытий или для модификации физической формы единицы дозирования. Например, таблетки могут быть покрыты шеллаком, сахаром или обоими. Сироп может содержать, помимо активного ингредиента, сахарозу в качестве подсластителя, метил- и пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и ароматизатор, такой как вишневое или апельсиновое ароматизирующее средство.

Для перорального терапевтического введения активные соединения могут объединяться с наполнителями и использоваться в форме таблеток, капсул, настоек, суспензий, сиропов и т.п. Такие композиции и препараты должны содержать по меньшей мере 0,1% активного соединения. Процентное содержание соединения в этих композициях, конечно, может варьировать и обычно может составлять от приблизительно 2% до приблизительно 60% от веса единицы. Количество активного соединения в таких терапевтически полезных композициях таково, что будет получена подходящая дозировка. Предпочтительные композиции согласно настоящему изобретению получают таким образом, чтобы доза для перорального применения содержала от приблизительно 1 до 800 мг активного соединения.

Активные соединения или составы на их основе можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или с усвояемым съедобным носителем, или они могут быть заключены в капсулы с твердой или мягкой оболочкой, или они могут быть спрессованы в таблетки, или они могут быть совмещены непосредственно с пищей рациона.

Фармацевтические формы, подходящие для инъекционного использования, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для экстемпорального приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий. Во всех случаях форма должна быть стерильной и жидкой до такой степени, чтобы ее можно было легко набрать с помощью шприца. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носитель может быть растворителем или дисперсионной средой, содержащей, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), их подходящие смеси и растительные масла.

Соединения или фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно также вводить в инъекционных лекарственных формах путем растворения или суспендирования этих материалов в физиологически приемлемом разбавителе с фармацевтическим вспомогательным веществом, носителем или наполнителем. Такие вспомогательные вещества, носители и/или наполнители включают без ограничения стерильные жидкости, такие как вода и масла, с добавлением или без добавления поверхностно-активного вещества и других фармацевтически и физиологически приемлемых компонентов. Иллюстративные масла представляют собой масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, например арахисовое масло, соевое масло или минеральное масло. Обычно вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы и родственного сахара, а также гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, являются предпочтительными жидкими носителями, особенно для растворов для инъекций.

Активные соединения или составы на их основе также можно вводить парентерально. Растворы или суспензии этих активных соединений можно приготовить в воде, подходящей для смешивания с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Также можно приготовить дисперсии в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях в маслах. Иллюстративные масла представляют собой масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, например арахисовое масло, соевое масло или минеральное масло. Обычно вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы и родственного сахара, а также гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, являются предпочтительно жидкими носителями, особенно для растворов для инъекций. При обычных условиях хранения и использования эти препараты содержат консервант, предотвращающий рост микроорганизмов.

Для использования в виде аэрозолей соединения или составов на их основе в растворе или суспензии могут быть упакованы в аэрозольный контейнер под давлением вместе с подходящими пропеллентами, например углеводородными пропеллентами, такими как пропан, бутан или изобутан, с обычными вспомогательными веществами. Материалы по настоящему изобретению также можно вводить в форме без давления, например, для небулайзера или распылителя.

Соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, вводят в сочетании с противораковым средством. В одном из воплощений противораковое средство представляет собой моноклональное антитело. В некоторых вариантах осуществления моноклональные антитела используют для диагностики, мониторинга или лечения рака. В одном варианте осуществления моноклональные антитела реагируют со специфическими антигенами на раковых клетках. В одном варианте осуществления моноклональное антитело выполняет функцию антагониста рецептора раковых клеток. В одном варианте осуществления моноклональные антитела усиливают иммунный ответ пациента. В одном варианте осуществления моноклональные антитела действуют против факторов роста клеток, таким образом блокируя рост раковых клеток. В одном варианте осуществления противораковые моноклональные антитела конъюгированы или связаны с противораковыми лекарственными средствами, радиоизотопами, другими модификаторами биологического ответа, другими токсинами или их комбинацией. В одном из вариантов реализации противораковые моноклональные антитела конъюгированы или связаны с соединением, как описано в данном документе выше.

Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу лечения тройного отрицательного рака молочной железы и/или рака яичников, который включает выбор субъекта, нуждающегося в лечении рака, и введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение и фармацевтически приемлемый носитель в условиях, эффективных для лечения рака.

При введении соединений их можно вводить системно или, альтернативно, их можно вводить непосредственно в определенное место, где присутствуют раковые клетки или предраковые клетки. Таким образом, введение можно осуществлять любым способом, эффективным для доставки соединений или фармацевтических композиций к раковым клеткам или предраковым клеткам. Примеры способов введения включают, без ограничения, введение соединений или композиций перорально, местно, чрескожно, парентерально, подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно, интраназальной инстилляцией, внутриполостной или внутривезикарной инстилляцией, внутриглазным, внутриартериальным, внутриочаговым способом введения или путем нанесения на слизистые оболочки, например, носа, горла и бронхиол.

Биологическая активность

Настоящее изобретение охватывает соединения и композиции для применения при лечении трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника. По меньшей мере одно соединение или композиция, содержащая его, будет полезна для подавления, сдерживания, усиления или стимулирования желаемой реакции у субъекта, как будет понятно специалисту в данной области. Композиции могут дополнительно содержать дополнительные активные ингредиенты, активность которых полезна для конкретного применения, для которого вводят соединение по настоящему изобретению.

Резистентность к лекарственным средствам является основной причиной неудач химиотерапии рака. Одним из основных факторов множественной лекарственной резистентности является сверхэкспрессия P-гликопротеина (P-gp). Этот белок является клинически важным белком-переносчиком, принадлежащим к семейству переносчиков АТФ-связывающих кассет на клеточной мембране. Он может перекачивать субстраты, в том числе противораковые лекарственные средства, из опухолевых клеток через АТФ-зависимый механизм. TNBC может быть TNBC, резистентным в отношении таксана, TNBC, чувствительным в отношении таксана и/или метастазировать.

Способ лечения TNBC был проиллюстрирован исследованиями соединения 17ya in vitro, определяющими противораковую активность соединения. Активность соединения 17ya в отношении TNBC сравнивали с активностью колхицина и паклитаксела в отношении линий клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468. В испытаниях с MDA-MB-231 определили, что IC₅₀(нМ) составляла 17,46, 3,05 и 8,23 для колхицина, паклитаксела и соединения 17ya соответственно, и SE составляла 0,05, 0,04 и 0,05 соответственно. В испытаниях с MDA-MB-468 определили, что IC₅₀(нМ) составляла 9,80, 4,61 и 22,96 для колхицина, паклитаксела и соединения 17ya соответственно, и SE составляла 0,02, 0,03 и 0,02, соответственно. На фиг. 1 графически проиллюстрированы результаты противораковой активности соединения 17ya in vitro в сравнении с колхицином и паклитакселом для линий клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468. На фиг. 2 проиллюстрирован эффект противодействия миграции для соединения 17ya (16 нМ) на клетках TNBC в сравнении с колхицином (16 нМ) и контролем в линиях клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468. Противоинвазионные свойства соединения 17ya (40 нМ) также определили на линиях клеток TNBC MDA-MB-231 и MDA-MB-468 в сравнении с контролем, колхицином (32 нМ) и паклитакселом (32 нМ).

Индуцирование апоптоза клеток, обусловленного соединением 17ya на клетках TNBC, также определяли по сравнению с контролем, когда 100 нМ соединения 17ya изучали через 24 часа, 48 часов и 72 часа. См. фиг. 7 для иллюстрации. Соединение 17ya индуцировало апоптоз клеток TNBC дозозависимым и зависящим от времени образом по сравнению с контролем, где соединение 17ya исследовали при 50 нМ, 100 нМ, 150 нМ и 200 нМ в течение 48 часов и сравнивали с колхицином (200 нМ, 48 часов) и паклитакселом (200 нМ, 48 часов). Результаты проиллюстрированы на фиг. 8. Противораковая активность соединения 17ya изучали in vivo в дозах 5 мг/кг и 10 мг/кг и сравнивали с контролем, и было определено, что соединение 17ya подавляет рост опухоли TNBC дозозависимым образом, не влияя на массу тела. На фиг. 9 проиллюстрировано сравнение роста опухоли в процентах и веса тела (г) для соединения 17ya в дозе 5 мг/кг и 10 мг/кг с контролем. На фиг. 10 проиллюстрировано сравнение размеров опухолей, поскольку соединение 17ya подавляло рост опухоли TNBC дозозависимым образом.

Противораковую активность соединения 17ya сравнивали с активностью в отношении паклитаксела. Было определено, что соединение 17ya подавляло рост опухоли TNBC в значительной степени по сравнению с контролем и подобно обработке паклитакселом. На фиг. 11 проиллюстрировано графическое сравнение влияния среды-носителя, соединения 17ya (12,5 г / кг) и паклитаксела (12,5 г / кг) на массу опухоли (г) и конечный объем опухоли (мм³).

Также была изучена антиметастатическая активность соединения 17ya in vivo. Активность соединения 17ya (10 мг/кг) сравнивали с контролем и паклитакселом (10 мг/кг) в срезах легких, окрашенных с помощью H 7 E. На фиг. 12 проиллюстрированы результаты этого исследования, где соединение 17ya приводило к очень небольшому количеству метастазов, как и паклитаксел, в отличие от контроля, для которого наблюдали большое количество метастазов.

Эффективность соединения 17ya in vitro определяли с использованием мышиной ортотопической модели рака. Через две недели после трансплантации самкам мышей NSG клеток SKOV3 в левый яичник, мышам вводили среду-носитель или соединение 17ya (10 мг/кг) перорально в течение 4 недель (5 обработок в неделю). Для исследования активности соединения 17ya в клетках SKOV3 и OVCAR3 способность клеток к выживанию изучали с помощью анализа образования колоний. Миграцию и инвазию клеток исследовали с использованием модифицированной камеры системы Transwell. Предварительно покрытые матригелем вкладыши Transwell использовали для исследования способности клеток к инвазии.

Обработка соединением 17ya значительно ингибировала рост опухоли яичника SKOV3 и метастазирование в основные органы (печень и селезенку) in vivo по сравнению с контролем - средой-носителем (таблица 1). После обработки соединением 17ya в течение 2 недель при концентрации 10 нМ или 30 нМ рост как SKOV3, так и OVCAR3 клеток значительно снижался. В соответствии с этим открытием, способность к миграции и инвазии клеток рака яичника существенно подавлялась обработкой 20 нМ соединения 17ya как в клетках SKOV3, так и в клетках OVCAR3. Результаты обобщены в следующей таблице 1.

Таблица 1

Перечень	Среда-носитель	Соединение 17ya	% подавления (отн. контроля)	% увеличения (отн. контроля)
Вес опухоли	175,8 ± 35,9 мг	24,4 ± 7,2 мг	86,10
Изменение массы мышей	1,86 ± 0,65 г	2,46 ± 1,32 г		70,96
Метастазы в печень	5/5*	0/5
Метастазы в селезенку	3/5*	0/5*

* Примечание: для этого набора данных в знаменателе количество исследованных мышей, а в числителе - количество мышей с метастазами.

Результаты испытаний продемонстрировали, что соединение 17ya, доступное перорально, эффективно подавляет рост опухоли и метастазирование на мышиной ортотопической модели рака яичника, не обладает острой токсичностью и снижает выживаемость, способность к миграции и инвазии клеток рака яичника, и сделан вывод, что соединение 17ya является ингибитором тубулина для лечения рака яичника.

В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрены способы для лечения трижды негативного рака молочной железы и/или рака яичника, включающие введение субъекту по меньшей мере одного соединения, описанного выше и/или изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, таутомера, гидрата, N-оксида, полиморфа или кристалла указанного соединения или любой их комбинации в терапевтически эффективном количестве для лечения трижды негативного рака молочной железы.

Настоящее изобретение охватывает способ лечения субъекта, страдающего трижды негативным раком молочной железы и/или раком яичника, включающий введение субъекту по меньшей мере одного соединения, описанного выше, или его изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, таутомера, гидрата, N-оксида, полиморфа, кристалла или любой их комбинации в количестве, эффективном для лечения трижды негативного рака молочной железы у субъекта. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 12db. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 11cb. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 11fb. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 12da. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 12fa. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 12fb. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 12cb. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 55. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 6b. В другом варианте осуществления соединение представляет собой соединение 17ya.

Еще один дополнительный аспект настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения ракового состояния, который включает получение по меньшей мере одного соединения, описанного выше, и затем введение эффективного количества соединения пациенту способом, эффективным для лечения или предотвращения ракового состояния.

В соответствии с одним вариантом осуществления пациент, подлежащий лечению, характеризуется наличием предракового состояния, и введение соединения является эффективным для предотвращения развития предракового состояния в раковое состояние. Это может происходить путем разрушения предраковой клетки до или одновременно с ее дальнейшим развитием в раковое состояние.

В соответствии с другим вариантом осуществления пациент, подлежащий лечению, характеризуется наличием ракового состояния, и введение соединения эффективно либо для обуславливания регресса ракового состояния, либо для подавления роста ракового состояния, то есть для остановки его роста полностью или снижения скорости его роста. Это предпочтительно происходит путем уничтожения раковых клеток, независимо от их расположения в теле пациента. То есть, независимо от того, расположены ли раковые клетки в месте первичной опухоли или раковые клетки метастазировали и создали вторичные опухоли в теле пациента.

В контексте настоящего описания субъект или пациент относится к любому пациенту-млекопитающему, включая без ограничения людей и других приматов, собак, кошек, лошадей, коров, овец, свиней, крыс, мышей и других грызунов. В одном варианте осуществления субъект мужского пола. В другом варианте осуществления субъект женского пола. В некоторых вариантах осуществления способы, описанные в данном документе, могут быть полезны для лечения как мужчин, так и женщин.

Способ охватывает введение по меньшей мере одного соединения в комбинации с противораковым средством путем введения соединений, описанных в данном документе, отдельно или в комбинации с другими средствами.

Когда соединения или фармацевтические композиции по настоящему изобретению вводят для лечения, сдерживания, снижения тяжести, снижения риска или подавления ракового состояния, фармацевтическая композиция также может содержать или может вводиться совместно с другими терапевтическими средствами или в составе схемы лечения, известной в настоящее время или разрабатываемой в дальнейшем для лечения различных типов рака. Примеры других терапевтических средств или схемы лечения включают без ограничения лучевую терапию, иммунотерапию, химиотерапию, хирургическое вмешательство и их комбинации.

Следующие примеры представлены для более полной иллюстрации предпочтительных вариантов осуществления изобретения. Однако их никоим образом не следует истолковывать как ограничивающие объем настоящего изобретения.

Примеры

Примеры изложены ниже исключительно для иллюстративных целей и не предназначены для ограничения каким-либо образом объема настоящего изобретения.

Материалы и способы

Клеточная культура. Линии клеток рака яичника SKOV3 и OVCAR3 получали из ATCC (Американская коллекция типовых культур, Манассас, Вирджиния, США) и культивировали в модифицированной по Дюльбекко среде Игла (DMEM), дополненной 10% FBS (MIDSCI; Сент-Луис, США), 100 Ед./мл пенициллина и 100 мг/мл стрептомицина (Invitrogen; Карлсбад, Калифорния, США). Клетки культивировали в инкубаторе при 5% диоксида углерода (CO₂) и 37°C.

Общая часть. Все реагенты приобретали в компаниях Sigma-Aldrich Chemical Co., Fisher Scientific (Питтсбург, Пенсильвания, США), AK Scientific (Маунтин-Вью, Калифорния, США), Oakwood Products (Западная Колумбия, Южная Каролина, США) и т.д. и использовали без дополнительной очистки. Чувствительные к влаге реакции осуществляли в атмосфере аргона. ABT-751 получали в соответствии со способами, описанными Yoshino et al.²⁶ Обычную тонкослойную хроматографию (TLC) выполняли на алюминиевых пластинах Uniplates (Analtech, Ньюарк, Делавэр, США). Точки плавления измеряли с помощью прибора для определения точки плавления Фишера-Джонса (без поправки). Спектры ЯМР получали на спектрометре Bruker AX 300 (Биллерика, Массачусетс, США) или Varian Inova-500 (Вернон Хиллз, Иллинойс, США). Химические сдвиги указаны в миллионных долях (ppm) относительно TMS в CDCl₃. Масс-спектральные данные собирали на устройстве Bruker ESQUIRE с электрораспылением/ионной ловушкой в режимах положительных и отрицательных ионов. Элементный анализ выполнялся компанией Atlantic Microlab Inc.

Пример 1

Подавление роста опухоли рака яичника

Анализ клоногенной выживаемости клеток. Высевали 350 клеток SKOV3 или OVCAR3 в 6-луночные планшеты и культивировали в течение 3 дней с DMEM, содержащей 10% FBS (т.e. ростовой средой). На третий день культивирования среду заменяли свежей ростовой средой, содержащей варьирующие концентрации соединения 17ya в диапазоне от 0, 1,25, 2,5, 5, 10 до 30 нМ. Каждые 3 дня среду заменяли свежей ростовой средой, содержащей соединение 17ya, до 13-го дня культивирования. Затем клетки фиксировали 70% этанолом и окрашивали кристаллическим фиолетовым. Для статистического анализа подсчитывали колонии из лунок в трех повторностях.

Анализ миграции клеток. Анализ миграции клеток проводили с использованием модифицированной камеры системы Transwell (BD FALCON, Сан-Хосе, Калифорния, США). Камеры вставляли в 24-луночные планшеты для культивирования клеток. В верхнюю камеру добавляли 3 × 104 клеток SKOV3 или OVCAR3 с соединением 17ya (20 нМ) и обработкой средой-носителем в 300 мкл бессывороточной среды DMEM. DMEM, содержащую 10% FBS (в качестве хемоаттрактанта), добавляли в нижнюю камеру каждой лунки и инкубировали в течение 8 ч. Среду и немигрировавшие клетки в верхней камере удаляли, в то время как мигрировавшие клетки на нижней стороне мембран фиксировали метанолом и окрашивали кристаллическим фиолетовым. Делали снимки при 10X увеличении и подсчитывали клетки в по меньшей мере трех разных полях.

Анализ клеточной инвазии. Клетки SKOV3 или OVCAR3 (5 × 10⁵) с соединением 17ya (20 нМ) и обработкой средой-носителем высевали в 300 мкл бессывороточной среды DMEM на вкладыши, предварительно покрытые матригелем (BD BIOCOAT с использованием 24-луночной Tumor Invasion System (BD BioSciences, Сан-Хосе, Калифорния, США). DMEM, содержащую 10% FBS, добавляли в нижнюю камеру инвазионной системы в качестве хемоаттрактанта и инкубировали в течение 24 ч. Среду и немигрировавшие клетки в верхней камере удаляли, в то время как мигрировавшие клетки на нижней стороне мембран фиксировали метанолом и окрашивали в течение 5 мин. гематоксилином и эозином. Делали снимки при 10X увеличении. Инвазивные клетки подсчитывали в по меньшей мере трех разных полях.

Мышиная ортотопическая модель рака яичника. 5 × 105 клеток SKOV3, меченых лентивирусным вектором, экспрессирующим люциферазу (pLenti-UBC-Luc2-T2A-mKate), интрабурсально инъецировали 10 двухмесячным самкам мышей NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ с сильно ослабленным иммунитетом (NSG). Через две недели после трансплантации самкам мышей NSG клеток SKOV3 в левый яичник, мышам вводили среду-носитель или соединение 17ya (10 мг/кг) перорально в течение 4 недель (5 обработок в неделю). Для каждой группы использовали по пять мышей. Инициирование опухоли и метастазирование контролировали один раз в неделю с помощью системы визуализации Xenogen. Всех мышей умерщвляли через два месяца; яичники и органы с метастазами собирали и визуализировали с помощью системы визуализации Xenogen; опухоли взвешивали, а ткани обрабатывали для окрашивания H&E.

Обработка соединением 17ya ингибировала выживаемость клеток рака яичника. Для тестирования эффекта соединения 17ya в отношении клеток рака яичника выживаемость клеток исследовали путем анализа образования колоний клеток, как описано выше. Культивировали 350 клеток яичника SKOV3 и OVCAR3 в 6-луночных планшетах и обрабатывали соединением 17ya в шести дозах: 0, 1,25, 2,5, 5, 10 и 30 нМ. На 13-й день колонии окрашивали кристаллическим фиолетовым. Соединение 17ya значительно ингибировало выживаемость как клеток SKOV3, так и клеток OVCAR3, как показано на фиг. 13 (**p < 0,01, ***p < 0,001).

Обработка соединением 17ya ингибировала миграцию и инвазию клеток рака яичника. С использованием планшетов Transwell тестировали миграцию клеток по сравнению с клетками, обработанными соединением 17ya и средой-носителем. Выяснили, что миграция клеток была значительно снижена как в клетках SKOV3, так и в клетках OVCAR3 с соединением 17ya, как показано на фиг. 14A. Инвазию клеток оценивали с использованием покрытых матригелем планшетов Transwell. Обработка соединением 17ya значительно уменьшала количество клеток по сравнению с обработанными средой-носителем клетками как SKOV3, так и OVCAR3, как показано на фиг. 14B.

Соединение 17ya ингибировало рост и метастазирование опухоли яичника in vivo. Создавали мышиную ортотопическую модель рака яичника. Инъецировали интрабурсально 5 х 105 клеток SKOV3-Luc2 дикого типа 2-месячным самкам мышей NSG и мышей обрабатывали пять дней в неделю в течение 4 недель. Опухоли собирали и визуализировали с использованием системы Xenogen. Клетки SKOV3, трансдуцированные лентивирусным вектором люциферазы, инъецировали в левые яичники двухмесячным мышам NSG, мышей обрабатывали средой-носителем или соединением 17ya (10 мг/кг) в течение 4 недель. Обработка соединением 17ya значительно ингибировала рост опухоли яичника SKOV3, как показано на фиг. 15B. Обработка соединением 17ya ингибировала метастазирование в основные органы (печень и селезенку) in vivo по сравнению с обработанным средой-носителем контролем, как показано на фиг. 15A. Окрашивание H.E на яичниках, опухолях и печени показало, что обработка соединением 17ya ингибировала рост и метастазирование опухоли яичника, как показано на фиг. 15C. Опухоли не были видны в яичниках, печени и селезенке мышей, обработанных соединением 17ya.

Пример 2

Материалы и способы

Химические соединения и линии клеток. Колхицин приобретали в компании Sigma (Сент-Луис, Миссури, США). Паклитаксел приобретали в компании LC Laboratories (Уоберн, Массачусетс, США). Соединение 17ya синтезировали, как описано (Chen et al., «Discovery of novel 2-aryl-4-benzoyl-imidazole (ABI-III) analogues targeting tubulin polymerization as antiproliferative agents.» J. Med. Chem., 2012, 55. 7285-7289.), с чистотой

и идентичностью, подтвержденной с помощью HPLC, HR-MS (Waters, Милфорд, Массачусетс, США) и протонного ядерного магнитного резонанса (Bruker, Биллерика, Массачусетс, США). В данном исследовании использовали две линии клеток трижды негативного рака молочной железы (TNBC) человека: MDA-MB-231 и MDA-MB-468, приобретенные у ATCC (Манассас, Виргиния, США) и аутентифицированные перед применением в данном исследовании. Эти клетки культивировали в среде DMEM (Mediatech, Inc., Манассас, Виргиния, США), дополненной 10% эмбриональной бычьей сывороткой (Atlanta Biologicals, Лоуренсвилл, Джорджия, США) и 1% раствором антибиотика-антимикотика (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) при 37°C во влажной атмосфере, содержащей 5% CO₂.

Анализ жизнеспособности клеток. Антипролиферативный эффект соединения 17ya исследовали на раковых линиях клеток меланомы человека (A375 и M14), HER2-положительного рака молочной железы человека (MDA-MB-453 и SKBR3) и TNBC (MDA-MB-231 и MDA-MB-468) с использованием рутинного анализа MTS, как описано Li et al., «A Potent, Metabolically Stable Tubulin Inhibitor Targets Colchicine Binding Site and Overcomes Taxane Resistance,» Cancer Res., 2018, 78, 265-277. Значения IC₅₀ (50% ингибирования роста клеток) рассчитывали с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 7 с использованием нелинейной регрессии.

Анализ образования колоний. Клетки MDA-MB-231 или MDA-MB-468 высевали в 12-луночные планшеты с плотностью клеток 200 клеток/лунка и инкубировали в течение 24 ч. Затем клетки обрабатывали колхицином, паклитакселом и соединением 17ya при различных концентрациях. Среду каждой группы обновляли один раз в неделю. После культивирования в течение 7 дней (MDA-MB-231) и 14 дней (MDA-MB-468) клетки промывали с помощью PBS, фиксировали метанолом и окрашивали 0,5% кристаллическим фиолетовым. Морфологию колоний регистрировали под микроскопом и площадь колоний определяли количественно с использованием программного обеспечения ImageJ (NIH, Бетесда, Мэриленд, США). Обработку лекарственным средством выполняли в трех повторностях.

Анализ активности каспазы 3/7. Апоптоз, индуцированный соединением 17ya, измеряли с использованием аналитической системы Caspase Glo 3/7 (Promega, Мадисон, Висконсин, США) в соответствии с инструкциями производителя, как описано в Li et al., «Design, Synthesis and Structure-Activity Relationship Studies of Novel Surviving Inhibitors with Potent Anti-Proliferative Properties,» PLoS One, 2015, 10, e0129807. Высевали 5000 клеток в каждую лунку 96-луночного планшета и обрабатывали 20 нМ соединения 17ya в течение 24 ч. в трех повторностях. Активность каспазы 3/7 нормализовали по общему содержанию белка в каждом образце.

Анализ миграции и инвазии клеток. Хемотаксическую миграцию клеток проводили с использованием 96-луночного планшета Transwell, содержащего мембранный вкладыш (размер пор 8 мкм) и лоток (BD Biosciences, Калифорния, США), а эффект соединения 17ya в отношении клеточной инвазии оценивали с использованием камеры для инвазии с матригелем (Корнинг, штат Нью-Йорк, США). В обоих анализах клетки MDA-MB-231 и MDA-MB-468 в бессывороточной среде истощали в течение 24 ч., после чего клетки суспендировали в бессывороточной среде, содержащей 16 нМ колхицина и соединение 17ya, и высевали их в верхнюю часть камеры мембранного вкладыша или покрытой матригелем мембраны в трех повторностях. Среду, содержащую сыворотку, добавляли в нижнюю камеру в качестве хемоаттрактанта. После 24 ч. инкубации клеток MDA-MB-231 и 48 ч. инкубации клеток MDA-MB-468, клетки, которые не мигрировали через мембрану и не проникали через матригель, удаляли ватными тампонами, в то время как клетки, которые мигрировали или проникали на нижнюю поверхность камеры, фиксировали в 4% забуференном растворе фосфата формалина, окрашивали 0,5% раствором кристаллического фиолетового и визуализировали с помощью микроскопа. Количество мигрировавших или проникших клеток подсчитывали вручную с помощью программного обеспечения ImageJ.

Миграцию клеток также анализировали с помощью анализа методом царапин. Вкратце, клетки MDA-MB-231 (10⁵ клеток/лунка) и MDA-MB-468 (2 x 10⁵ клеток/лунка) высевали в 12-луночные планшеты и инкубировали в течение ночи. На следующий день на монослой клеток наносили царапину с использованием стерильного наконечника пипетки на 200 мкл. После смывания плавающих клеток среду для культивирования клеток заменяли средой, содержащей среду-носитель DMSO, колхицин, паклитаксел или соединение 17ya при определенной концентрации (например, 16 нM). Через 12 ч., 24 ч. и 48 ч. определяли ширину насечки и визуализировали ее с помощью системы визуализации Evos Fl (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США). Степень зарастания насечки показана как процент уменьшения исходной ширины царапины в каждый момент времени измерения. Эксперименты выполняли в трех повторностях.

Иммунофлуоресцентное окрашивание. Высевали 10⁵ клеток MDA-MB-231 или 2 x 10⁵ клеток MDA-MB-468 в 6-луночные планшеты на стерильные покровные стекла за 24 ч. до обработки с помощью 32 нМ колхицина, паклитаксела и соединения 17ya в течение 18 ч. Для визуализации тубулина клетки трижды промывали с помощью PBS, фиксировали 4% параформальдегидом в течение 15 мин. и повышали проницаемость с помощью 0,2% Triton X-100 в PBS в течение 15 мин. Затем клетки блокировали в 1,5% бычьем сывороточном альбумине (BSA), 0,1% Tween 20 в PBS в течение 1 часа и инкубировали с антителом к α-тубулину (Thermo Fisher Scientific, Волтем, Массачусетс, США) в 1% бычьем сывороточном альбумине (BSA), 0,1% Tween 20 в PBS в течение ночи при 4°C. На следующий день клетки промывали и инкубировали с антителом козы к IgG мыши Alexa Fluor 647 (Molecular Probes, Юджин, Орегон, США) в темноте в течение 1 ч. при комнатной температуре с последующим добавлением реагента Prolong Diamond Antifade с DAPI (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США), а затем накрывали предметными стеклами. Изображения, представленные на фиг., получали с помощью микроскопа Keyence BZ-X700 (Keyence, Осака, Япония).

Выявление апоптоза. Клетки MDA-MB-231 и MDA-MB-468 высевали в 6-луночные планшеты (2 × 10⁵/лунка). После инкубации в течение ночи клетки обрабатывали 100 нМ соединения 17ya в течение 24 ч., 48 ч. и 72 ч. Исследование зависимости от дозы проводили путем обработки клеток возрастающими дозами в течение 48 ч. Затем клетки дважды промывали с помощью PBS и 10⁵ клеток суспендировали в 200 мкл связывающего буфера Annexin V-FITC (eBioscience, Гранд Айленд, штат Нью-Йорк, США). Добавляли 185 мкл клеточной суспензии в суспензию клеток с 5 мкл Annexin V-FITC и 10 мкл йодида пропидия, после перемешивания и инкубации в течение 10 мин. при комнатной температуре клетки анализировали с помощью анализатора клеток Bio-Rad ZE5 (Bio-rad, Геркулес, Калифорния, США).

Анализ клеточного цикла, вестерн-блоттинг, ортотопическую модель ксенотрансплантата in vivo.

Все исследования на животных проводили в соответствии с Принципами ухода за лабораторными животными NIH и протоколами, утвержденными Комитетом по уходу и использованию институциональных животных при Научном центре здравоохранения Университета Теннесси. Самок мышей Nod-Scid-γ (NSG) возрастом 5–6 недель содержали в среде без специфических патогенов с 12:12-часовым циклом свет-темнота. Температуру поддерживали при 20–26°C, а относительную влажность при 30–70%. Инокулировали хирургическим путем 2,5 x 10⁵ клеток MDA-MB-231 в 10 мкл HBSS в жировые подушечки левой и правой паховых молочных желез мышей NSG, как описано в работе Pfeffer et al., «Comprehensive analysis of microRNA (miRNA) targets in breast cancer cells,» J. Biol. Chem., 2013, 288, 27480-27493, включенной в данный документ посредством ссылки. Мышей еженедельно осматривали в отношении появления опухоли до достижения среднего размера опухоли 100 мм³. Затем мышей рандомно делили на 3 группы (n=5 на группу) и начинали обработку лекарственным средством. Контрольной группе вводили среду-носитель (соотношение PEG 300:вода 1:1) перорально, группам обработки лекарственным средством вводили 5 мг/кг соединения 17ya или 10 мг/кг соединения 17ya перорально пять раз в неделю, соответственно. Размер первичной опухоли контролировали дважды в неделю с использованием цифрового штангенциркуля и во время обработки регистрировали массу тела мышей. Объем опухоли рассчитывали с использованием формулы объем = (ширина² × длина)/2. После 33 дней обработки, когда размер опухоли в группе обработки средой-носителем достигал 1000 мм³, опухоли и основные органы визуализировали и собирали в 10% забуференный раствор фосфата формалина для гистологического анализа. Другую подобную ортотопическую модель ксенотрансплантата для сравнения эффективности соединения 17ya с паклитакселом создавали, как описано выше. Мышей рандомно делили на 3 группы, по 8 мышей на группу. Аналогичным образом, контрольной группе вводили среду-носитель (соотношение PEG 300: вода 1:1) перорально, группе обработки паклитакселом вводили 12,5 мг/кг паклитаксела посредством внутрибрюшинной инъекции через день и группе обработки соединением 17ya вводили 12,5 мг/кг соединения 17ya перорально пять раз в неделю, опухоли и основные органы собирали в 10% забуференный раствор фосфата формалина для гистологического анализа, когда размер опухоли в группе обработки средой-носителем достигал 1000 мм³.

Экспериментальная модель метастазиса легкого. Мышей NSG возрастом 7–8 недель использовали для исследования эффективности соединения 17ya в отношении ингибирования метастазиса TNBC. Инокулировали 2 x 10⁵ клеток MDA-MB-231 в 100 мкл HBSS каждой мыши посредством инъекции в хвостовую вену. Обработки средой-носителем, 10 мг/кг соединения 17ya и 10 мг/кг паклитаксела, с той же частотой введения доз, что и на ортотопической модели ксенотрансплантата, начинали через 24 ч. Во время обработки еженедельно контролировали состояние здоровья и массу тела животных. Через 23 дня мышей умерщвляли, все основные органы визуализировали и собирали в 10% забуференный раствор фосфата формалина для последующего гистологического и иммуногистохимического анализа.

Гистологический и иммуногистохимический (IHC) анализ. Фиксированные опухоли и органы помещали в парафин и нарезали несколько срезов для дальнейшего окрашивания гематоксилином/эозином (H&E) и IHC-окрашивания. Окрашивание H&E и IHC-окрашивание проводили, как описано ранее. Первичные антитела, используемые при IHC-окрашивании, включали антитело кролика к Ki67 (1:400), антитело кролика к CD31 (1:100), антитело кролика к расщепленной Parp (1:50) и антитело кролика к расщепленной каспазе 3 (1:200) (№ 9027; № 77699; № 5625; № 9661, Cell Signal Technology, Дэнверс, Массачусетс США), а биотинилированное антитело лошади к IgG кролика (BA-1100, Vector Laboratories Inc., Берлингейм, Калифорния, США) использовали в качестве вторичного антитела. IHC-окрашивание против митохондрий проводили для визуализации метастазиса клеток MDA-MB-231 на экспериментальной модели метастазиса легкого. Изображения получали с помощью микроскопа Keyence BZ-X700.

Соединение 17ya уменьшало пролиферацию различных клеток рака молочной железы. Соединение 17ya ранее тестировали на панели линий раковых клеток меланомы с IC₅₀ 10 нM, как описано в работе Li et al., «Discovery of novel 2-aryl-4-benzoyl-imidazole (ABI-III) analogues targeting tubulin polymerization as antiproliferative agents,» J. Med. Chem., 2012, 55 7285-7289. Соединение 17ya оценивали с использованием анализа MTS, чтобы определить, может ли оно также ингибировать рост клеток рака молочной железы. В таблице 2 показано, что соединение 17ya оказывало антипролиферативный эффект в отношении линий клеток рака молочной железы, особенно в TNBC. Тестирование предусматривало два хорошо известных ингибитора тубулина – колхицин и паклитаксел, чтобы сравнить эффективность соединения 17ya в отношении роста клеток TNBC. Результаты теста показаны на фиг. 16. Все три ингибитора тубулина были мощными ингибиторами пролиферации TNBC. Анализ образования колоний всегда используется для оценки пролиферации клеток путем определения роста колоний от микроколоний до макроколоний. Результаты образования колоний показали, что соединение 17ya ослабляло способность к пролиферации клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468 дозозависимым образом.

Таблица 2. Соединение 17ya уменьшало пролиферацию различных раковых заболеваний молочной железы

Тип опухоли	Линия клеток	IC₅₀±SEM (нM)
Меланома	M14	8,86 ± 1,97
Меланома	RPMI7951	8,76 ± 2,24
Молочная железа	MDA-MB-453	13,59 ± 2,42
	SKBR3	13,29 ± 1,41
	MDA-MB-231	8,23 ± 2,39
	MDA-MB-468	9,59 ± 2,36

Соединение 17ya ингибировало миграцию и инвазию клеток TNBC. Исследовали эффект соединения 17ya в отношении миграции и инвазии клеток TNBC после 24 или 48 часов обработки лекарственным средством. На фиг. 17 проиллюстрированы результаты. Соединение 17ya ингибировало способность клеток мигрировать через мембранный вкладыш в присутствии концентрации 16 нМ, демонстрируя эффективность, аналогичную колхицину. Подобным образом, соединение 17ya снижало способность клеток TNBC проникать через мембрану, покрытую матригелем. Для дальнейшего подтверждения этих результатов проводили анализ методом царапин с использованием паклитаксела и колхицина в качестве положительного контроля. При дозе 16 нМ соединение 17ya, колхицин и паклитаксел демонстрировали эффективное ингибирование миграции клеток. На основании этих данных авторы настоящего изобретения пришли к выводу, что соединение 17ya значительно подавляло миграцию клеток, что подчеркивает потенциальную роль, которую соединение 17ya играет в ингибировании метастазирования TNBC.

Соединение 17ya влияло на сборку микротрубочек и организацию митотического веретена. Соединение 17ya использовали с иммунофлуоресцентным окрашиванием для визуализации сети микротрубочек и сравнивали с известным дестабилизирующим микротрубочки средством колхицином и стабилизирующим микротрубочки средством паклитакселом. Клетки TNBC в группе отрицательного контроля демонстрировали интактные волокна микротрубочек и организацию микротрубочек. На фиг. 18 проиллюстрированы эти результаты. Обработка паклитакселом приводила к появлению мультиполярных веретен с сильно конденсированными хромосомами из-за усиления полимеризации тубулина в клетках TNBC. Как и при обработке колхицином, клетки, обработанные соединением 17ya, сморщивались и форма клеток изменялась с веретена на круглую и неправильную, что подтверждало то, что соединение 17ya было нацелено на тубулин и препятствовало полимеризации тубулина.

Соединение 17ya индуцировало повышенный апоптоз в клетках TNBC. Поскольку сообщалось, что многие ингибиторы тубулина обладают проапоптотическим эффектом в отношении раковых клеток, – исследовали соединение 17ya для определения эффекта в отношении индуцирования апоптоза в клетках TNBC. Клетки MDA-MB-231 обрабатывали 100 нМ соединения 17ya в зависимости от времени. Соединение 17ya индуцировало апоптоз клеток, как показано на фиг. 19. Клетки обрабатывали возрастающими концентрациями соединения 17ya в течение 48 ч. Соединение 17ya инициировало гибель апоптотических клеток дозозависимым образом и, таким образом, вызывало апоптоз клеток TNBC.

Соединение 17ya ингибировало рост и метастазирование опухоли TNBC in vivo. Для подтверждения результатов in vitro исследовали противораковую активность соединения 17ya на мышиной ортотопической модели TNBC, чтобы определить, можно ли наблюдать in vivo мощный эффект соединения 17ya in vitro. После 33 дней обработки, обработка соединением 17ya ингибировала рост опухоли TNBC дозозависимым образом без влияния на массу тела мышей. Результаты показаны на фиг. 20. Эффективность соединения 17ya у мышей, несущих опухоли TNBC, была продемонстрирована уменьшением размера опухоли и массы опухоли по сравнению с контрольными (обработанными средой-носителем) мышами. Изменение формы всех опухолей в этих трех группах показало, что размер опухоли уменьшался с увеличением дозы соединения 17ya. Окрашивание H&E срезов опухоли определило, что соединение 17ya индуцировало некроз опухоли TNBC, что было аналогично тому, что наблюдалось in vitro. В исследовании сравнивали эффективность соединения 17ya и паклитаксела на одной и той же модели, поскольку паклитаксел является одним из стандартных средств лечения TNBC в клинике. И соединение 17ya, и паклитаксел значительно уменьшали размер опухоли и массу опухоли. Результаты показаны на фиг. 21. Общая картина опухоли подтвердила, что размер опухоли уменьшался у мышей, обработанных как соединением 17ya, так и паклитакселом. Хотя соединение 17ya было менее эффективным, чем паклитаксел в отношении регрессии роста опухоли, его лучше растворять и вводить при лечении рака по сравнению с паклитакселом. Окрашивание H & E опухолей в сравнительном исследовании также позволило предположить, что и соединение 17ya, и паклитаксел индуцировали некроз опухоли TNBC. Исследование хвостовой вены определило эффективность соединения 17ya в борьбе с метастазированием TNBC in vivo. На фиг. 22 и фиг. 23 показано, что легкие в группе обработки средой-носителем были полностью метастазированы (обозначено желтой стрелкой), тогда как легкие в группе обработки соединением 17ya и паклитакселом были не сильно поражены, что позволило предположить, что соединение 17ya значительно снижало метастазирование TNBC. Подобные результаты получали в тканях печени, почки и селезенки, что дополнительно демонстрирует, что соединение 17ya ингибировало метастазирование TNBC.

Пример 3

В дополнение к описанным выше материалам и способам, в следующих примерах использовали следующие процедуры.

Анализ клеточного цикла. Для определения профиля клеточного цикла в митотической фазе (особенно в G2 и M-фазах) клетки обрабатывали колхицином, паклитакселом и соединением 17ya. Клетки собирали с помощью трипсинизации, фиксировали, пермеабилизировали, окрашивали антителом к фосфо-гистону H3-AlexaFluor® 488 на льду в течение 1 ч. в темноте и инкубировали со свежеприготовленным раствором йодида пропидия/РНКазы в течение 30 мин. при комнатной температуре в темноте в соответствии с протоколом производителя (№ FCCH0225103, EMD Millipore Corp., Берлингтон, Массачусетс, США). Затем окрашенные клетки анализировали с помощью анализатора клеток Bio-Rad ZE5 (Bio-Rad, Геркулес, Калифорния, США). Обработку данных и построение графиков выполняли с помощью FlowJo (FlowJo, LLC, Ашленд, Орегон, США).

Вестерн-блоттинг. Клетки инкубировали с возрастающими дозами соединения 17ya и 100 нМ колхицина и паклитаксела в течение 24 ч. или 100 нМ соединения 17ya в течение 24 ч., 48 ч. и 72 ч., как в исследовании в зависимости от времени. Затем клетки собирали, промывали охлажденным до температуры льда PBS, лизировали в буфере RIPA (25 нМ Tris, pH 7,6, 150 нМ NaCl, 1% NP-40, 1% дезоксихолата натрия, 0,1% SDS) протеазой Halt™ и ингибитором фосфатазы (Thermo Fischer Scientific), а затем центрифугировали при 13000 об./мин. при 4°C в течение 10 мин. Белок в надосадочной жидкости определяли с помощью анализа белка BCA (Thermo Fischer Scientific). Загружали равные количества каждого образца денатурированного белка и разделяли в градиентных гелях SDS-PAGE (Bio-Rad, № 456-1083). Белок переносили способом влажного бокса на PVDF-мембраны. Затем мембраны блокировали в 5% обезжиренном молоке в растворе TBST при комнатной температуре в течение 1 ч., инкубировали с первичными антителами в течение ночи при 4°C и после этого связывали со вторичными антителами в течение 1 ч. Использовали следующие первичные антитела: антитело кролика к поли(AДФ-рибоза)полимеразе (PARP, 1:1000), антитело кролика к расщепленной PARP (1:1000), антитело кролика к расщепленной каспазе 3 (1:1000) и антитело кролика к конъюгату GAPDH с HRP (№ 9532; № 5625; № 9661; № 3683, Cell Signal Technology, Дэнверс, Массачусетс США). Связанные белки выявляли с использованием Western ECL Substrate Clarity™ (Bio-Rad, № 1705060) и визуализировали с помощью системы ChemiDoc-It2 Imager (UVP, LCC, Упланд, Калифорния, США).

In vivo модель ортотоксического ксенотрансплантата. Все исследования на животных проводили в соответствии с Принципами ухода за лабораторными животными NIH и протоколами, утвержденными Комитетом по уходу и использованию институциональных животных при Научном центре здравоохранения Университета Теннесси. Самок мышей Nod-Scid-γ (NSG) возрастом 5–6 недель содержали в среде без специфических патогенов с 12:12-часовым циклом свет-темнота. Температуру поддерживали при 20–26°C, а относительную влажность при 30–70%. Инокулировали хирургическим путем 2,5 x 10⁵ клеток MDA-MB-231 в 10 мкл HBSS в жировые подушечки левой и правой паховых молочных желез мышей NSG, как описано в работе Pfeffer et al., «Comprehensive analysis of microRNA (miRNA) targets in breast cancer cells,» J. Biol. Chem., 2013, 288, 27480-27493, включенной в данный документ посредством ссылки. Мышей еженедельно осматривали в отношении появления опухоли до достижения среднего размера опухоли 100 мм³. Затем мышей рандомно делили на 5 групп (n=14 в контрольной группе обработки средой-носителем, n=8 в группе обработки лекарственным средством) и начинали обработку лекарственным средством. Контрольной группе вводили среду-носитель (соотношение PEG 300:вода 1:1) перорально, группам обработки лекарственным средством вводили 5 мг/кг соединения 17ya, 10 мг/кг соединения 17ya, 12,5 мг/кг соединения 17ya перорально пять раз в неделю и 12,5 мг/кг паклитаксела посредством внутрибрюшинной инъекции через день, соответственно. Размер первичной опухоли контролировали дважды в неделю с использованием цифрового штангенциркуля и во время обработки регистрировали массу тела мышей. Объем опухоли рассчитывали с использованием формулы объем = (ширина² × длина)/2. После 18 дней обработки, когда размер опухоли в группе обработки средой-носителем достигал 1000 мм³, опухоли и основные органы визуализировали и собирали в 10% забуференный раствор фосфата формалина для гистологического анализа.

Соединение 17ya усиливало пролиферацию различных клеток рака молочной железы и препятствовало сборке микротрубочек и организации митотического веретена. Соединение 17ya ранее тестировали на панели линий раковых клеток меланомы со средней IC₅₀ 4 нМ, а теперь его оценивали, чтобы определить с использованием анализа MTS, может ли соединение 17ya ингибировать рост раковых клеток молочной железы. Результаты показали, что соединение 17ya оказывало антипролиферативный эффект в отношении линий клеток рака молочной железы со значением IC₅₀ 14 нМ в HER2-положительных клетках рака молочной железы и 8 нМ в клетках TNBC. Дестабилизирующий тубулин колхицин и стабилизирующее тубулин средство паклитаксел включали для сравнения эффективности колхицина, паклитаксела и соединения 17ya в отношении роста клеток TNBC. (См. фиг. 58A для MDA-MB-231 и фиг. 58B для MDA-MB-486). Все три ингибитора тубулина были действенными в ингибировании пролиферации TNBC, при этом значения IC₅₀ соединения 17ya варьировали от 8,2 до 9,6 нM. Результаты анализа образования колоний показали, что соединение 17ya ослабляло способность к пролиферации клеток TNBC дозозависимым образом. (См. фиг. 59A для MDA-MB-231 и фиг. 59B для MDA-MB-486). Паклитаксел продемонстрировал наиболее заметный эффект с относительным процентом покрывающих колоний 27,5% по сравнению с колхицином (100%) при 8 нМ, а соединение 17ya (55%) было более эффективным, чем колхицин. В клетках MDA-MB-468 снижение образования колоний наблюдали с колхицином (51%), паклитакселом (7,4%) и соединением 17ya (37,7%) при дозе 8 нМ, что указывало на то, что все три ингибитора тубулина ингибировали образование колоний клетками TNBC.

Иммунофлуоресцентное окрашивание использовали для визуализации сети микротрубочек в сравнении с колхицином и паклитакселом. Клетки TNBC в группе отрицательного контроля продемонстрировали интактные волокна микротрубочек и организацию микротрубочек, как показано на фиг. 60. Обработка паклитакселом приводила в результате к появлению мультиполярных веретен с сильно конденсированными хромосомами из-за усиления полимеризации тубулина в клетках TNBC. Как и при обработке колхицином, клетки, обработанные соединением 17ya, сморщивались и форма клеток изменялась с веретена на круглую и неправильную, что подтверждало, что соединение 17ya было нацелено на тубулин и препятствовало полимеризации тубулина.

Пример 4

Соединение 17ya ингибировало миграцию и инвазию клеток TNBC. В примере обращается внимание на эффект соединения 17ya в отношении миграции и инвазии клеток TNBC после 24 или 48 часов обработки. Соединение 17ya ингибировало способность клеток TNBC мигрировать через мембранный вкладыш в присутствии концентрации 16 нМ при средней степени миграции 40% в клетках MDA-MB-231 и 34% в клетках MDA-MB-468 по сравнению с контрольной группой (степень миграции 100%), как показано на фиг. 61. Соединение 17ya снижало способность клеток TNBC проникать через покрытую матригелем мембрану со средним уровнем инвазии 55% и 36% среди клеток MDA-MB-231 и MDA-MB-468, соответственно, при этом уровень инвазии в контрольной группе принимали за 100%. Результаты показаны на фиг. 62. Проводили анализ методом царапин с использованием паклитаксела и колхицина в качестве положительных контролей. При дозе 16 нМ соединение 17ya, колхицин и паклитаксел продемонстрировали эффективное ингибирование миграции клеток, как показано на фиг. 63A для MDA-MB-231 и фиг. 63B для MDA-MB-486. Через 24 часа средние степени миграции клеток MDA-MB-231, обработанных DMSO, колхицином, паклитакселом и соединением 17ya, составляли 100%, 67,3%, 13,3% и 44,9%, соответственно. Подобным образом, после 48 часов обработки колхицином, паклитакселом и соединением 17ya удалось снизить миграцию клеток MDA-MB-231 со средними степенями миграции 15,8%, 14,5% и 17,9%, соответственно. Результаты позволяют заключить, что соединение 17ya значительно подавляло миграцию клеток.

Пример 5

Соединение 17ya блокировало клетки TNBC в G2/M-фазе и индуцировало апоптоз клеток. Динамика микротрубочек играет важную роль в делении клеток. Ее нарушение может привести к остановке митоза растущих клеток в метафазе и в конечном итоге вызвать гибель клеток. В данном примере было определено, что соединение 17ya может влиять на остановку клеточного цикла. Анализ проточной цитометрии проводили для клеток, обрабатываемых в течение 24 часов посредством 100 нМ колхицина, 100 нМ паклитаксела и различных концентраций соединения 17ya. Различные соединения демонстрировали различные эффекты в отношении прогрессирования клеточного цикла в разных линиях клеток. Обработка соединением 17ya индуцировала накопление клеток MDA-MB-231 в G2- и M-фазах с уменьшением популяции клеток в G1- и S-фазах дозозависимым образом. Колхицин и паклитаксел, используемые в качестве положительных контролей, также останавливали клетки MDA-MB-231 в G2/M-фазе, как показано на фиг. 64A. Соединение 17ya индуцировало остановку G2-фазы в клетках MDA-MB-468 и уменьшало популяцию клеток в G1-фазе, при этом оно оказывало небольшой эффект в отношении процентного содержания клеток в S-фазе, как показано на фиг. 64B. Наблюдалось небольшое увеличение клеток в М-фазе. Колхицин останавливал клетки MDA-MB-468 в G2-фазе, паклитаксел останавливал клетки как в G2-, так и в M-фазе, как показано на фиг. 64B. Концентрация соединения 17ya приводила результате к большому накоплению клеток в G2/M-фазе, начиная с 20 нМ в клетках MDA-MB-231, 50 нМ в клетках MDA-MB-468, при этом максимальное накопление наблюдалось при 100 нМ. Таким образом, соединение 17ya индуцировало остановку G2/M-фазы клеток TNBC, что приводило к ингибированию роста.

Исследовали проапоптотический эффект соединения 17ya в отношении клеток TNBC. Эффект соединения 17ya в отношении индуцирования апоптоза в клетках TNBC исследовали с использованием способа двойного окрашивания Annexn V-FITC-PI. Клетки MDA-MB-231 и MDA-MB-468 обрабатывали возрастающими концентрациями соединения 17ya в течение 24 ч. Количественно соединение 17ya инициировало гибель апоптотических клеток дозозависимым образом, на что указывает появление Annexin-V⁺/PI^- клеток, Annexin-V⁺/PI⁺ клеток и Annexin-V^-/PI⁺ клеток, показанных на типичных гистограммах на фигах 65A-В. Эффективность соединения 17ya в отношении индуцирования апоптоза клеток TNBC была идентична эффективности колхицина, но выше чем у паклитаксела. Результаты показывают, что клетки MDA-MB-231 (фиг. 66A) и MDA-MB-468 (фиг. 66B), обработанные 100 нМ соединения 17ya в течение 24, 48 и 72 часов, претерпевали апоптоз зависимым от времени образом.

Каспазы и PARP играют важную роль в инициации и осуществлении запрограммированной гибели клеток. Авторы настоящего изобретения определяли эффект соединения 17ya в отношении того, запускает ли оно гибель апоптотических клеток посредством регуляции пути каспазы-3/PARP, экспрессии расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP в клетках TNBC, обработанных соединением 17ya, согласно анализу вестерн-блоттинга. Результаты показали, что экспрессия расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP усиливалась дозозависимым образом после 24 часов обработки соединением 17ya, хотя их экспрессия была ниже, чем в группе обработки паклитакселом, среди клеток как MDA-MB-231 (фиг. 67A), так и MDA-MB-468 (фиг. 67B). Колхицин также был способен индуцировать повышающую регуляцию расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP в клетках MDA-MB-468 после 24 часов обработки. Соединение 17ya повышало содержание расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP в зависимости от времени, как показано на фиг. 68. Чтобы подтвердить эффект соединения 17ya в отношении экспрессии расщепленной каспазы-3 и расщепленной PARP на уровне белка, активность каспазы 3/7 оценивали на клетках MDA-MB-231 и MDA-MB-468 с использованием аналитической системы Caspase Glo 3/7. Результаты показаны на фиг. 69. Колхицин и паклитаксел использовали в качестве положительных контролей. По сравнению с клетками контрольной группы соединение 17ya, колхицин и паклитаксел замещали до 4 раз более высокую активность каспазы 3/7, что согласовалось с усиленным индуцированием апоптоза клеток TNBC.

Пример 5

Соединение 17ya ингибировало рост опухоли TNBC in vivo. Соединение 17ya влияло на рост in vivo линий раковых клеток человека, как было исследовано с помощью противораковой активности на мышиной ортотопической модели TNBC. Поскольку паклитаксел является одним из широко используемых химиотерапевтических средств для лечения TNBC в клинике, – он был включен в качестве сравнения. Мышей NSG, несущих ксенотрансплантаты MDA-MB-231, обрабатывали средой-носителем, 5 мг/кг соединения 17ya, 10 мг/кг соединения 17ya, 12,5 мг/кг соединения 17ya и 12,5 мг/кг паклитаксела в течение 18 дней. По сравнению с группой обработки средой-носителем процент увеличения размера опухоли был значительно снижен в группах обработки 10 мг/кг и 12,5 мг/кг соединения 17ya и паклитакселом, тогда как пероральное введение 5 мг/кг демонстрировало относительно слабое ингибирование роста опухоли, как показано на фиг. 70. Во время обработки в группах обработки соединением 17ya не наблюдали потерю массы тела, что свидетельствовало об отсутствии токсичности. В то время как обработка 12,5 мг/кг паклитаксела значительно снижала массу тела мышей, что свидетельствовало о накопленной токсичности паклитаксела во время обработки, как показано на фиг. 71. По сравнению с контрольной группой обработки средой-носителем, соединение 17ya при 5 мг/кг уменьшало средний объем опухоли и массу опухоли на 38,66% и 26,83%, соответственно. Соединение 17ya при 10 мг/кг уменьшало средние значения объема и массы опухоли на 55,73% и 56,10%, соответственно, а доза 12,5 мг/кг уменьшала средние значения объема опухоли и массы опухоли на 61,32% и 62,6%, соответственно. Результаты показали, что соединение 17ya ингибировало рост опухоли TNBC дозозависимым образом, как показано на фиг. 72 и 73. Группа обработки 12,5 мг/кг соединения 17ya была сопоставима с паклитакселом по средней конечной массе опухоли (0,46 г против 0,38 г). Эффективность соединения 17ya и паклитаксела против опухолей была очевидна на изображениях опухолей, при этом обработка продемонстрировала значительное уменьшение объема опухоли по сравнению с группой обработки средой-носителем.

Пример 6

Соединение 17ya индуцировало некроз опухоли, антиангиогенез и апоптоз in vivo. Опухоли иссекали, окрашивали H&E и экспрессию маркера пролиферации клеток Ki67, прогностического ангиогенного маркера CD31, апоптотических маркеров расщепленной PARP и расщепленной каспазы-3 определяли с помощью IHC-окрашивания. Внутри опухоли происходит естественный некроз, вызванный внутренней гипоксией, при этом визуализировали посредством как H&E, так и IHC рядом с краем опухоли. Обработка как соединением 17ya, так и паклитакселом увеличивала количество некротических опухолевых клеток с пикнозом, на что указывало сморщивание ядер. Количество некротических клеток увеличивалось при дозе соединения 17ya от 5 мг/кг до 12,5 мг/кг. Повышенный процент площади некротических клеток для целых опухолей наблюдали в группе обработки соединением 17ya по сравнению с аналогом, обработанным средой-носителем, как показано на фиг. 74. Опухоли в группе обработки соединением 17ya (12,5 мг/кг) имели площадь некротических клеток 49,5%, что сравнимо с процентом некроза опухоли, индуцированного паклитакселом (41,5%), что продемонстрировало способность соединения 17ya индуцировать некроз опухоли, который был более эффективным для индуцирования некроза опухоли, чем паклитаксел. IHC-анализ показал, что обработка соединением 17ya значительно уменьшала количество Ki67-положительных клеток (фиг. 75) и CD31-положительных клеток (фиг. 76) в опухолевых тканях, что продемонстрировало снижение на 71% и 87% опухолей, обработанных соединением 17ya (12,5 мг/кг), по сравнению с опухолями в контрольной группе обработки средой-носителем, соответственно, что позволило предположить, что соединение 17ya ингибировало пролиферацию клеток TNBC и разрушало сосудистую сеть опухоли in vivo. Результаты продемонстрировали явное дозозависимое повышение содержания клеток, экспрессирующих расщепленную PARP (фиг. 77) и расщепленную каспазу-3 (фиг. 78), что подтверждало усиление апоптоза вследствие обработки соединением 17ya. Подавление роста опухоли, нарушение сосудистой сети опухоли и индуцирование гибели апоптотических клеток после обработки паклитакселом были очевидны из гистологических результатов IHC, и при этом противораковая активность паклитаксела была подобна таковой у соединения 17ya. В совокупности, результаты показали, что соединение 17ya проявляло противораковую активность, подобную таковой у паклитаксела, которая значительно подавляла рост опухоли на уровне in vivo.

Пример 7

Соединение 17ya ингибировало спонтанный метастазис TNBC и рак на мышиной модели метастазиса легкого. В эксперименте тестировали ингибирование спонтанного метастазиса легкого у мышей в среде-носителе, соединении 17ya при 5 мг/кг, 10 мг/кг и 12,5 мг/кг и паклитакселе 12,5 мг/кг. В группе обработки средой-носителем очаги метастазиса легкого были увеличены в доле легкого (у четырех мышей имелись большие метастазы, у 10 мышей имелось более чем пять метастазов в легких). Соединение 17ya ингибировало спонтанное метастазирование клеток TNBC с несколькими очагами метастазиса в группе обработки 5 мг/кг (шесть мышей с небольшим количеством метастазов, две мыши без метастазов), один или два небольших очага метастазиса в группе обработки 10 мг/кг (четыре мыши с небольшим количеством метастазов, четыре мыши без метастазов), при этом метастазис или отсутствие метастазиса наблюдали в группе обработки 12,5 мг/кг (одна мышь с одним метастазом легкого, семь без метастазов) и отсутствие метастазиса наблюдали в группе обработки 12,5 мг/кг паклитаксела (все восемь мышей не имели метастазиса), что указывало на значительную роль соединения в ингибировании метастазиса TNBC.

Поскольку соединение 17ya уменьшало количество и размер метастазов TNBC на мышиной ортотопической модели, для оценки антиметастазирующего эффекта соединения использовали экспериментальную модель метастазиса легкого. Из-за слабости мышей после инокуляции в хвостовую вену в качестве дозировки для этого исследования выбирали 10 мг/кг паклитаксела и 10 мг/кг соединения 17ya. После 22 дней обработки мышей умерщвляли, легкие, печени, почки и селезенки собирали, фиксировали и исследовали с помощью антимитохондриального IHC- и H&E-окрашивания. Легкие в группе обработки средой-носителем были полны метастазов (обозначены коричневыми точками), в то время как в легких групп обработки соединением 17ya и паклитакселом наблюдали значительное ингибирование в легких метастазиса TNBC. Результаты в тканях печени и селезенки были подобными. Метастазы с повышением температуры выявляли в почках обработанных средой-носителем мышей, в то время как почки в группах обработки соединением 17ya и паклитакселом были чистыми, что продемонстрировало то, что соединение 17ya ингибировало метастазы TNBC. Значения массы тела и физической активности мышей были нормальными в группе обработки соединением 17ya, в то время как значения массы тела и физической активности мышей в группе обработки паклитакселом были немного снижены, что продемонстрировало токсичность паклитаксела во время длительного лечения. H&E-окрашивание показало, что множественные метастазы разного размера наблюдались в легком, печени, почке и селезенке обработанных средой-носителем мышей, тогда как метастазы у обработанных соединением 17ya и паклитакселом мышей были редкими и меньшего размера. Результаты исследования легких показали, что соединение 17ya продемонстрировало эффективность, сравнимую с таковой у паклитаксела, в подавлении метастазиса клеток TNBC без значительной токсичности у мышей.

Все описанные в настоящем документе признаки (в том числе в прилагаемых формуле изобретения, реферате и графических материалах), и/или все стадии любого раскрытого способа или процесса могут быть объединены с любым из вышеуказанных аспектов в любой комбинации, за исключением комбинаций, где по меньшей мере некоторые из таких признаков и/или стадий являются взаимоисключающими. Хотя предпочтительные варианты осуществления были изображены и подробно описаны в данном документе, специалистам в соответствующей области будет очевидно, что различные модификации, дополнения, замены и т.п. могут быть выполнены без отступления от сути настоящего изобретения, и таким образом они считаются попадающими в объем настоящего изобретения, определяемый нижеследующей формулой изобретения.

Claims

1. Способ лечения трижды негативного рака молочной железы у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, представленного структурой формулы XI(e):

…XI(e),

i представляет собой целое число от 0 до 5; и

n представляет собой целое число от 1 до 4, или

фармацевтически приемлемой соли, гидрата, или их комбинации, чтобы излечить трижды негативный рак молочной железы.

2. Способ по п. 1, где указанное соединение представляет собой соединение 17ya, представленное структурой

…(17ya).

3. Способ по п. 1, дополнительно включающий дополнительное средство терапии рака.

4. Способ по п. 1, где соединение объединено с фармацевтически приемлемым носителем.

5. Способ по п. 1 или 2, где указанный трижды негативный рак молочной железы представляет собой метастатический трижды негативный рак молочной железы.

6. Способ по п. 1 или 2, где указанный трижды негативный рак молочной железы является лекарственно-устойчивым трижды негативным раком молочной железы.

7. Способ по п. 6, где указанный лекарственно-устойчивый трижды негативный рак молочной железы представляет собой устойчивый к таксанам трижды негативный рак молочной железы.

8. Способ по п. 7, где указанный трижды негативный рак молочной железы представляет собой устойчивый к таксанам и метастатический трижды негативный рак молочной железы.

9. Способ по любому из пп. 1-8, где указанное лечение трижды негативного рака молочной железы происходит без значительной токсичности.

10. Способ по любому из пп. 5-9, дополнительно включающий дополнительное средство терапии рака.