RU2771843C2 - Autologous composition and method for treating pulmonary tuberculosis with drug resistance of the pathogen and absence of effect against the background of polychemotherapy - Google Patents
Autologous composition and method for treating pulmonary tuberculosis with drug resistance of the pathogen and absence of effect against the background of polychemotherapy Download PDFInfo
- Publication number
- RU2771843C2 RU2771843C2 RU2020136808A RU2020136808A RU2771843C2 RU 2771843 C2 RU2771843 C2 RU 2771843C2 RU 2020136808 A RU2020136808 A RU 2020136808A RU 2020136808 A RU2020136808 A RU 2020136808A RU 2771843 C2 RU2771843 C2 RU 2771843C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tuberculosis
- background
- treatment
- pathogen
- polychemotherapy
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 208000008128 Pulmonary Tuberculosis Diseases 0.000 title claims abstract description 23
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 244000052769 pathogens Species 0.000 title claims abstract description 12
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 210000004443 Dendritic Cells Anatomy 0.000 claims abstract description 24
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 14
- 101700053622 esxA Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 9
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 210000001616 Monocytes Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 abstract description 12
- 230000036826 Excretion Effects 0.000 abstract description 11
- 230000029142 excretion Effects 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 36
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 10
- 239000002609 media Substances 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 201000009671 multidrug-resistant tuberculosis Diseases 0.000 description 5
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N Azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 4
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 4
- 229940072185 DRUGS FOR TREATMENT OF TUBERCULOSIS Drugs 0.000 description 4
- 231100000601 Intoxication Toxicity 0.000 description 4
- TYZROVQLWOKYKF-ZDUSSCGKSA-N Linezolid Chemical compound O=C1O[C@@H](CNC(=O)C)CN1C(C=C1F)=CC=C1N1CCOCC1 TYZROVQLWOKYKF-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 4
- DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N Meropenem Chemical compound C=1([C@H](C)[C@@H]2[C@H](C(N2C=1C(O)=O)=O)[C@H](O)C)S[C@@H]1CN[C@H](C(=O)N(C)C)C1 DMJNNHOOLUXYBV-PQTSNVLCSA-N 0.000 description 4
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 4
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 4
- 210000003802 Sputum Anatomy 0.000 description 4
- 230000002146 bilateral Effects 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 4
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 4
- 102100006400 CSF2 Human genes 0.000 description 3
- 108010065839 Capreomycin Proteins 0.000 description 3
- JNIIDKODPGHQSS-DHDCSXOGSA-N Capreomycin Chemical compound N1C(=O)\C(=C\NC(N)=O)NC(=O)C(CNC(=O)CC(N)CCCN)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(N)CNC(=O)C1C1NC(N)=NCC1 JNIIDKODPGHQSS-DHDCSXOGSA-N 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 210000003958 Hematopoietic Stem Cells Anatomy 0.000 description 3
- 229940072221 IMMUNOGLOBULINS Drugs 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 3
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 3
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 3
- 229960004602 capreomycin Drugs 0.000 description 3
- 230000001066 destructive Effects 0.000 description 3
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229960001005 tuberculin Drugs 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 4-Aminosalicylic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C(O)=C1 WUBBRNOQWQTFEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N Amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 description 2
- 108010047814 Antigen-Antibody Complex Proteins 0.000 description 2
- DHSUYTOATWAVLW-WFVMDLQDSA-N Cilastatin Chemical compound CC1(C)C[C@@H]1C(=O)N\C(=C/CCCCSC[C@H](N)C(O)=O)C(O)=O DHSUYTOATWAVLW-WFVMDLQDSA-N 0.000 description 2
- 229960004912 Cilastatin Drugs 0.000 description 2
- 229960003324 Clavulanic Acid Drugs 0.000 description 2
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N Clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 description 2
- DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N D-cycloserine Chemical compound N[C@@H]1CONC1=O DYDCUQKUCUHJBH-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N Ethionamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002182 IMIPENEM Drugs 0.000 description 2
- ZSKVGTPCRGIANV-ZXFLCMHBSA-N IMIPENEM Chemical compound C1C(SCC\N=C\N)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@H]([C@H](O)C)[C@H]21 ZSKVGTPCRGIANV-ZXFLCMHBSA-N 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N Kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 2
- VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N Prothionamide Chemical compound CCCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 VRDIULHPQTYCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940070378 Prothionamide Drugs 0.000 description 2
- DZZWHBIBMUVIIW-DTORHVGOSA-N Sparfloxacin Chemical compound C1[C@@H](C)N[C@@H](C)CN1C1=C(F)C(N)=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN(C3CC3)C2=C1F DZZWHBIBMUVIIW-DTORHVGOSA-N 0.000 description 2
- 229940043517 Specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- ODKYYBOHSVLGNU-IAGONARPSA-N TERIZIDONE Chemical compound O=C1NOCC1\N=C\C(C=C1)=CC=C1\C=N\C1C(=O)NOC1 ODKYYBOHSVLGNU-IAGONARPSA-N 0.000 description 2
- 229960003457 Terizidone Drugs 0.000 description 2
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 description 2
- 229960004909 aminosalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 2
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical Effects 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 2
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 description 2
- 229960002626 clarithromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 229960003077 cycloserine Drugs 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 2
- 229960002001 ethionamide Drugs 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229960003376 levofloxacin Drugs 0.000 description 2
- 229960003907 linezolid Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 229960002260 meropenem Drugs 0.000 description 2
- 229960003702 moxifloxacin Drugs 0.000 description 2
- 229940005931 ophthalmologic Fluoroquinolone antiinfectives Drugs 0.000 description 2
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229960000918 protionamide Drugs 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 2
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229960004954 sparfloxacin Drugs 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 229940041075 systemic Fluoroquinolone antibacterials Drugs 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 210000000601 Blood Cells Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 Bone Marrow Anatomy 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000008581 Brain Disease Diseases 0.000 description 1
- 102100019451 CD80 Human genes 0.000 description 1
- 101700080477 CD80 Proteins 0.000 description 1
- 102100008186 CD83 Human genes 0.000 description 1
- 101700013105 CD83 Proteins 0.000 description 1
- 206010007554 Cardiac failure Diseases 0.000 description 1
- 206010008617 Cholecystitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010011891 Deafness neurosensory Diseases 0.000 description 1
- 206010014623 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010014625 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000000245 Forearm Anatomy 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000005721 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- -1 HLA-ABC Proteins 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failure Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 210000002433 Leukocytes, Mononuclear Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 Macrophages Anatomy 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 229940010383 Mycobacterium tuberculosis Drugs 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 description 1
- 208000008425 Protein Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010066927 Pulmonary tuberculoma Diseases 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N RIFAMPICIN Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229940081190 Rifampin Drugs 0.000 description 1
- 208000009966 Sensorineural Hearing Loss Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- 101710040537 TNF Proteins 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 Cells Anatomy 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 229960004319 Trichloroacetic Acid Drugs 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N Trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010001801 Tumor Necrosis Factor-alpha Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002009 allergen Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 201000001352 cholecystitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 1
- 201000010173 gallbladder papillomatosis Diseases 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 201000001820 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 231100001039 immunological change Toxicity 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent Effects 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 231100000879 sensorineural hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004861 thermometry Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic Effects 0.000 description 1
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 1
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly Effects 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано в комплексном лечении больных туберкулезом с лекарственной устойчивостью возбудителя и отсутствием эффекта терапии противотуберкулезными препаратамиThe invention relates to medicine, namely to phthisiology, and can be used in the complex treatment of tuberculosis patients with drug resistance of the pathogen and the absence of the effect of therapy with anti-tuberculosis drugs
Туберкулез (ТБ) остается сложной медико-экономической и медико-биологической проблемой во всех странах мира, в том числе и в России (Global report WHO, 2019). Согласно документам ВОЗ, ТБ - одно из десяти заболеваний с высоким уровнем смертности. По оценкам ВОЗ, в 2018 году во всем мире было выявлено полмиллиона новых случаев резистентности к рифампицину, из которых 78% - с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий (МЛУ-ТБ) (WHO consolidated guidelines on drug-resistant tuberculosis treatment. 2019. 99р.). Высокий процент глобального бремени туберкулеза с МЛУ-ТБ приходится на Индию (27%), Китай (14%), Российскую Федерацию (9%), а также на страны бывшего СССР (>50% ранее леченных случаев туберкулеза) (Global report WHO, 2019). За последние годы в Российской Федерации, заболеваемость туберкулезом со множественной лекарственной устойчивостью возбудителя (МЛУ-ТБ) остается стабильной с 2015 года и существенно не изменилась к 2019 году (5,2 и 5,4 на 100 тыс. населения соответственно), несмотря на некоторое снижение распространенности (2015 - 25,5 против 2019 - 21,4). При этом в 56,5% случаев у больных сохраняется бактериовыделение, что связано с низкой эффективностью лечения. Применение новых противотуберкулезных препаратов привело к некоторому повышению эффективности лечения больных с МЛУ-ТБ с 2015 года (24,5%) и составила в 2019 году 35,7%, однако по данным ВОЗ необходимо достигнуть показателя 78% (Нечаева О.Б. Эпидемическая ситуация и ресурсы по туберкулезу (справки) за 2018 год [Электронный ресурс]). Низкая эффективность лечения связана с распространенностью туберкулеза с широкой и тотальной лекарственной устойчивостью, развитием большого числа нежелательных явлений на фоне терапии туберкулеза, которые требуют отмены препаратов.Tuberculosis (TB) remains a complex medical, economic and biomedical problem in all countries of the world, including Russia (Global report WHO, 2019). According to WHO documents, TB is one of ten diseases with a high mortality rate. According to WHO estimates, in 2018, half a million new cases of resistance to rifampicin were detected worldwide, of which 78% were multidrug-resistant mycobacteria (MDR-TB) (WHO consolidated guidelines on drug-resistant tuberculosis treatment. 2019. 99r.) . A high percentage of the global burden of MDR-TB occurs in India (27%), China (14%), the Russian Federation (9%), and the former Soviet Union (>50% of previously treated TB cases) (Global report WHO, 2019). In recent years, in the Russian Federation, the incidence of multidrug-resistant tuberculosis (MDR-TB) has remained stable since 2015 and has not changed significantly by 2019 (5.2 and 5.4 per 100 thousand population, respectively), despite some decrease in prevalence (2015 - 25.5 vs. 2019 - 21.4). At the same time, in 56.5% of cases, bacterial excretion persists in patients, which is associated with low treatment efficiency. The use of new anti-TB drugs has led to a slight increase in the effectiveness of the treatment of patients with MDR-TB since 2015 (24.5%) and amounted to 35.7% in 2019, however, according to WHO data, it is necessary to reach 78% (Nechaeva O.B. Epidemicheskaya situation and resources on tuberculosis (references) for 2018 [Electronic resource]). The low effectiveness of treatment is associated with the prevalence of tuberculosis with extensive and total drug resistance, the development of a large number of adverse events during tuberculosis therapy, which require discontinuation of drugs.
Остается актуальным поиск альтернативных методов лечения больных туберкулезом. Специфическая инфекция практически всегда сопровождается изменениями иммунной системы организма, что рассматривается как вторичная иммунная недостаточность, а динамика туберкулезного процесса коррелирует с выраженностью тех или иных иммунологических сдвигов (Б.Е. Кноринг, 2013; Новицкий В.В., 2012). Проведение иммунотерапии может повысить эффективность лечения больных туберкулезом с лекарственной устойчивостью возбудителя. В России для лечения туберкулеза проводились разработки аутологичных вакцин, созданных на основе антиген-активированных дендритных клеток (патент RU 2372 936 Способ создания аутологичной вакцины для лечения туберкулеза (2009); WO/2014/007667 Аутологичная вакцина для лечения туберкулеза легких и способ ее получения (2014). Наряду с трудоемкими методиками получения клеток и дальнейшего их выращивания, для активации дендритных клеток применялся туберкулин. В настоящее время проведение многочисленных исследований (Киселев В.А., 2009, 2010; Слогоцкая Л.В., 2011; Довгалюк И.Ф., 2013) показали, что туберкулин обладает низкой специфичностью и чувствительностью по сравнению с применением аллергена туберкулезного рекомбинантного с наличием специфических антигенов ESAT-6 и SFP-10. Применение туберкулина может влиять не только на иммуногенность вакцины, представляя собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта, но и на развитие побочных реакций после ее введения.The search for alternative methods of treating patients with tuberculosis remains relevant. A specific infection is almost always accompanied by changes in the body's immune system, which is considered as secondary immune deficiency, and the dynamics of the tuberculosis process correlates with the severity of certain immunological changes (B.E. Knoring, 2013; Novitsky V.V., 2012). Immunotherapy can increase the effectiveness of treatment of patients with drug-resistant tuberculosis. In Russia, for the treatment of tuberculosis, autologous vaccines based on antigen-activated dendritic cells were developed (patent RU 2372 936 Method for creating an autologous vaccine for the treatment of tuberculosis (2009); WO/2014/007667 Autologous vaccine for the treatment of pulmonary tuberculosis and a method for its production ( 2014).Along with labor-intensive methods of obtaining cells and their further cultivation, tuberculin was used to activate dendritic cells.Currently, numerous studies are being carried out (Kiselev V.A., 2009, 2010; Slogotskaya L.V., 2011; Dovgalyuk I.F. ., 2013) showed that tuberculin has low specificity and sensitivity compared to the use of the recombinant tuberculosis allergen with the presence of specific antigens ESAT-6 and SFP-10. The use of tuberculin can affect not only the immunogenicity of the vaccine, being a mixture of filtrates of heat-killed cultures of mycobacteria tuberculosis of human and bovine species precipitated with trichloroacetic acid acid, treated with ethyl alcohol and ether for anesthesia, dissolved in a phosphate buffer solution with tween-80 as a stabilizer and phenol as a preservative, but also on the development of adverse reactions after its administration.
Известно исследование по созданию вакцины на основе дендритных клеток и использованию ее в лечении больных большей частью с впервые выявленным туберкулезом с множественной и широкой лекарственной устойчивостью (Гончаров А.Е., Титов Л.П., Скрягин А.Е., Шпаковская Н.С., Солодовникова В.В., Романова И.В., Антонова Н.П., Коваленко Д.Г., Метелица Л.П., Ветушко Д.А., Скрягина Е.М. Адьювантная терапия туберкулеза с множественной и широкой лекарственной устойчивостью вакциной на основе дендритных клеток // Медицинские новости. - 2014. - №12. - С. 67-72). Дендридные клетки выделяли из моноклональных клеток крови и костного мозга центрифугированием, адгезией и культивированием в питательной среде. Выделение гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) из мононуклеарных клеток костного мозга осуществляли с использованием наборов для прямой иммуномагнитной сепарации. С целью экспансии ГСК растили на среде AIM-V с интерликином 4 (1L-4) и фактором некроза опухоли 
Используемая вакцина характеризуется невысокой специфичностью в связи с применением только одного специфичного для туберкулезной инфекции антигена (протеина CFP-1076-85), травматичностью для пациентов процедуры получения клеток костного мозга, длительностью и сложностью приготовления вакцины.The vaccine used is characterized by low specificity due to the use of only one antigen specific for tuberculosis infection (CFP-1076-85 protein), the traumatic nature of the procedure for obtaining bone marrow cells for patients, the duration and complexity of preparing the vaccine.
Задачей заявляемого способа является разработка эффективной аутологичной композиции на основе активированных специфическими туберкулезными антигенами зрелых дендритных клеток и ее использование в лечении больных туберкулезом легких с лекарственной устойчивостью возбудителя и отсутствием эффекта на фоне полихимиотерапии.The objective of the proposed method is to develop an effective autologous composition based on mature dendritic cells activated by specific tuberculosis antigens and its use in the treatment of patients with pulmonary tuberculosis with drug resistance of the pathogen and no effect on the background of polychemotherapy.
Задача реализуется за счет того, что созданная композиция состоит из зрелых дендритных клеток, дифференцированных из моноцитов периферической крови и активированных специфическими туберкулезными пептидами ESAT-6 и SFP-103 и Т-лимфоцитов, активированных специфическими пептидами ESAT-6 и SFP-10, и что клеточную композицию вводят на фоне комплексного лечения больному туберкулезом с ЛУ десятикратно один раз в неделю внутрикожно в подлопаточную область в объеме 1 мл.The task is realized due to the fact that the created composition consists of mature dendritic cells differentiated from peripheral blood monocytes and activated by specific tuberculosis peptides ESAT-6 and SFP-103 and T-lymphocytes activated by specific peptides ESAT-6 and SFP-10, and that the cell composition is administered against the background of complex treatment to a patient with tuberculosis with LU ten times once a week intradermally into the subscapular region in a volume of 1 ml.
Изобретение поясняется чертежом, где на Фиг. 1 - Динамика снижения специфических иммуноглобулинов после проведения иммунотерапии, на Фиг. 2 - Динамика рентгенологического обследования у пациента с фиброзно-кавернозным туберкулезом легких, а - представлена рентгенограмма до проведения иммунотерапии; б - рентгенограмма через 120 дней после иммунотерапии.The invention is illustrated by the drawing, where in Fig. 1 - The dynamics of the decrease in specific immunoglobulins after immunotherapy, in Fig. 2 - Dynamics of X-ray examination in a patient with fibrous-cavernous pulmonary tuberculosis, a - X-ray before immunotherapy; b - radiograph 120 days after immunotherapy.
Способ реализуется следующим образом.The method is implemented as follows.
I этап.I stage.
Пациентам с сохраняющимся бактериовыделением и/или прогрессированием специфического процесса по данным рентгенологического обследования проводится забор 60 мл периферической крови в вакутейнеры с цитратом. Кровь обрабатывается в течение 36 часов после забора и выделяются мононуклеары, которые культивируют при 37°C в среде RPMI1640 с добавлением 10% человеческой сыворотки, полученной от доноров с IV группой крови.Patients with persistent bacterial excretion and / or progression of a specific process, according to the X-ray examination, take 60 ml of peripheral blood into citrate vacutainers. Blood is processed within 36 hours of collection and mononuclear cells are isolated, which are cultured at 37°C in RPMI1640 medium supplemented with 10% human serum obtained from blood group IV donors.
Из периферийной крови выделяют моноциты, для получения дендритных клеток, и лимфоциты, для создания суспендированной композиции для иммунотерапии, путем центрифугирования на ступенчатом градиенте фикол-урографина (плотность раствора 1,077 г на мл) с последующим прикреплением моноцитов к поверхности культуральных флаконов. Обычно, в зависимости от пациента, получается 0,5-1×107 моноцитов.Monocytes are isolated from peripheral blood to obtain dendritic cells and lymphocytes to create a suspended composition for immunotherapy by centrifugation on a ficol-urografin step gradient (solution density 1.077 g per ml) followed by attachment of monocytes to the surface of culture flasks. Usually, depending on the patient, 0.5-1×10 7 monocytes are obtained.
Для индукции образования дендритных клеток во флаконы с питательной средой, в которой культивируются полученные моноциты, добавляют ростовые факторы: 1) гранулоцит-макрофаг колоний-стимулирующий фактор (GM-CSF) в концентрации 3000 ед/мл и интерлейкин 15 (IL15).To induce the formation of dendritic cells, growth factors are added to the vials with a nutrient medium in which the obtained monocytes are cultivated: 1) granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) at a concentration of 3000 units/ml and interleukin 15 (IL15).
На 4-5 день в среду к полученным дендритным клеткам добавляют (в конечной концентрации 3 микрограмма на мл) специфические пептиды ESAT-6 и SFP-10.On day 4-5, specific peptides ESAT-6 and SFP-10 are added to the obtained dendritic cells (at a final concentration of 3 micrograms per ml) on the medium.
Принудительное введение в клетки антигенов ESAT-6 и SFP-10 осуществляют с помощью прибора для электропорации фирмы "Eppendorf или другой аналогичной техники. Для реализации электропорации в стандартную кювету, имеющую расстояние между плоскими электродами 0,5 см наливают 0,4 мл суспензии клеток в физиологическом растворе с добавлением белка NS3 (10 микрограмм в мл). Электропорация осуществляется при напряжении 300 вольт и времени импульса 250 микросекунд.Forced introduction of ESAT-6 and SFP-10 antigens into cells is carried out using an Eppendorf electroporation device or other similar equipment. To implement electroporation, 0.4 ml of cell suspension is poured into saline supplemented with NS3 protein (10 micrograms per ml) Electroporation is performed at a voltage of 300 volts and a pulse time of 250 microseconds.
Для индукции полного созревания дендритных клеток после введения специфических пептидов ESAT-6 и SFP-10 их культивируют в течение 1 суток в питательной среде с добавлением смеси цитокинов TNFa и IL1b по 500 Ед/мл каждого.To induce full maturation of dendritic cells after the introduction of specific peptides ESAT-6 and SFP-10, they are cultivated for 1 day in a nutrient medium with the addition of a mixture of TNFa and IL1b cytokines, 500 U/ml each.
Подтверждением получения истинных дендритных клеток служат следующие критерии (определяемые с помощью флуоресцентного микроскопа или техники проточной цитометрии):The following criteria (determined using a fluorescence microscope or flow cytometry technique) serve as confirmation of the receipt of true dendritic cells:
а) рост в неприкрепленном к субстрату состоянии (в отличие от макрофагов, которые плотно прикрепляются к субстрату);a) growth in a state not attached to the substrate (in contrast to macrophages, which are tightly attached to the substrate);
б) наличие характерной морфологии дендритных клеток, несущих множественные отростки;b) the presence of a characteristic morphology of dendritic cells bearing multiple processes;
в) появление значительного количества поверхностных маркеров свойственных дендритным клеткам (HLA-DR, HLA-ABC, CD80, CD83).c) the appearance of a significant number of surface markers characteristic of dendritic cells (HLA-DR, HLA-ABC, CD80, CD83).
Одновременно с подготовкой дендритных клеток из взятой порции крови получают активированные Т-лимфоциты, для чего из 20 мл крови с помощью центрифугирования в градиенте плотности по стандартной методике (Хаитов P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. - М.: Медицина, 2000. - 432 с.) выделяют мононуклеарные лейкоциты и с помощью фитогемагглютинина (20 микрограмм/мл) активируют к пролиферации содержащиеся в этой клеточной смеси Т-лимфоциты в соответствии с известной процедурой.Simultaneously with the preparation of dendritic cells, activated T-lymphocytes are obtained from a taken portion of blood, for which from 20 ml of blood using density gradient centrifugation according to the standard method (Khaitov R.M. Immunology / P.M. Khaitov, G.A. Ignatieva, I.G. Sidorovich. - M.: Medicine, 2000. - 432 S.) mononuclear leukocytes are isolated and with the help of phytohemagglutinin (20 micrograms / ml) T-lymphocytes contained in this cell mixture are activated to proliferation in accordance with a known procedure.
Активирование Т-лимфоцитов осуществляют путем их обработки фитогемагглютинином и добавлением специфических антигенов (ESAT-6 и SFP-10) в концентрации 1 мкг на мл. Для преимущественной стимуляции Th1-клеточного пути иммунного ответа к клеткам добавляется бактериальный липополисахарид (0,2 мкг на мл). Полученные активированные лимфоциты (3-5×107 клеток) и дендритные клетки (0,5-1×107 клеток), несущие специфические антигены (ESAT-6 и SFP-10) смешиваются для получения композиции для инъекций.Activation of T-lymphocytes is carried out by their treatment with phytohemagglutinin and the addition of specific antigens (ESAT-6 and SFP-10) at a concentration of 1 μg per ml. Bacterial lipopolysaccharide (0.2 μg per ml) is added to the cells to preferentially stimulate the Th1 cell pathway of the immune response. Received activated lymphocytes (3-5×10 7 cells) and dendritic cells (0.5-1×10 7 cells) bearing specific antigens (ESAT-6 and SFP-10) are mixed to obtain a composition for injection.
II этап.II stage.
Полученная композиция на основе аутологичных активированных специфическими туберкулезными пептидами зрелых дендритных клеток вводится больному путем внутрикожного введения в подлопаточную область в объеме 1 мл десятикратно один раз в неделю больному туберкулезом легких с лекарственной устойчивостью возбудителя на фоне стандартной противотуберкулезной терапии с включением комбинаций из шести-восьми препаратов, которые применяются в лечении туберкулеза легких с широкой лекарственной устойчивостью микобактерий: инъекционные аминогликозиды канамицин (Km) и амикацин (Am) и полипептид (капреомицин - Cm), фторхинолоны III поколения - левофлоксацин (Lfx), спарфлоксацин (Sfx), IV поколения - моксифлоксацин (Mfx)), протионамид (Pto), этионамид (Eto), циклосерин (С8)/теризидон (Trd), аминосалициловая кислота (PAS), линезолид (Lzd), амоксициллин(а-убрать) + клавулановая кислота (Amx/Clv), кларитромицин (С1)/азитромицин (Az), имипенем (Imp)/циластатин (On), меропенем (Мрт). Препараты назначаются согласно переносимости пациентами и их массе телаThe resulting composition based on autologous mature dendritic cells activated with specific tuberculosis peptides is administered to a patient by intradermal injection into the subscapular region in a volume of 1 ml ten times once a week to a patient with drug-resistant pulmonary tuberculosis against the background of standard anti-tuberculosis therapy with the inclusion of combinations of six to eight drugs, which are used in the treatment of pulmonary tuberculosis with broadly drug-resistant mycobacteria: injectable aminoglycosides kanamycin (Km) and amikacin (Am) and polypeptide (capreomycin - Cm), III generation fluoroquinolones - levofloxacin (Lfx), sparfloxacin (Sfx), IV generation - moxifloxacin ( Mfx)), prothionamide (Pto), ethionamide (Eto), cycloserine (C8)/terizidone (Trd), aminosalicylic acid (PAS), linezolid (Lzd), amoxicillin (a-remove) + clavulanic acid (Amx/Clv), clarithromycin (C1)/azithromycin (Az), imipenem (Imp)/cilastatin (On), meropenem (Mri). Drugs are prescribed according to patient tolerance and body weight.
После каждого введения осуществляется контроль состояния больного с проведением:After each injection, the patient's condition is monitored with the following:
1) определения частоты сердечных сокращений (ЧСС);1) determining the heart rate (HR);
2) определения частоты дыхания (ЧД);2) determining the respiratory rate (RR);
3) термометрии;3) thermometry;
4) клинического анализа крови (КАК);4) clinical blood test (AS);
5) биохимического анализа крови (БАК);5) biochemical blood test (BAC);
6) общего анализа мочи (ОАМ).6) general urine analysis (OAM).
III этап.III stage.
После проведения десятикратного курса иммунотерапии проводится оценка результатов лечения в динамике на 30-е, 60-е, 120-е и 240-е сутки.After a ten course of immunotherapy, the results of treatment are evaluated in dynamics on the 30th, 60th, 120th and 240th day.
Проводится оценка:The following is being assessed:
- выраженности симптомов интоксикации и респираторной симптоматики;- severity of symptoms of intoxication and respiratory symptoms;
- динамика бактериовыделения с помощью: микроскопического исследования мокроты для выявления КУМ методом люминесцентной микроскопии; культурального исследования мокроты (посев материала на плотные и жидкие питательные среды в системе BACTECMGIT 960);- dynamics of bacterial excretion with the help of: microscopic examination of sputum to detect AFB by fluorescent microscopy; cultural examination of sputum (inoculation of material on solid and liquid nutrient media in the BACTECMGIT 960 system);
- рентгенологическая динамика с помощью рентгенографии и СКТ грудной клетки.- X-ray dynamics using X-ray and CT scan of the chest.
Положительный результат лечения характеризуется прекращением бактериовыделения и/или получением положительной рентгенологической динамике в виде рассасывания очаговых и/или инфильтративных изменений, а также сокращением полостей распада легочной ткани.A positive result of treatment is characterized by the cessation of bacterial excretion and / or the receipt of positive X-ray dynamics in the form of resorption of focal and / or infiltrative changes, as well as a reduction in the cavities of lung tissue decay.
Исследование по созданию аутологичной композиции на основе активированных специфическими туберкулезными пептидами ESAT-6 и SFP-10 зрелых дендритных клеток и лечения на фоне комплексной терапии больных туберкулезом легких с ЛУ возбудителя и отсутствием эффекта одобрено ЛЭК ФГБУ «СПб НИИФ» МЗ РФ, выписка из Протокола №27.5 (исходящий №58 от 19.02.16).A study on the creation of an autologous composition based on mature dendritic cells activated with specific tuberculosis peptides ESAT-6 and SFP-10 and treatment against the background of complex therapy in patients with pulmonary tuberculosis with DR of the pathogen and no effect was approved by the LEC of the Federal State Budgetary Institution "SPb NIIF" of the Ministry of Health of the Russian Federation, extract from Protocol No. 27.5 (outgoing No. 58 dated 02.19.16).
Проводилось обследование, забор биологического материала и лечение 25 пациентов (19 мужчин (76,0%) и 6 женщин (24,0%) на базе отделения терапии туберкулеза легких и хирургии туберкулеза ФГБУ «СПб НИИФ» Минздрава России, отделения для лечения больных туберкулезом с множественной и широкой лекарственной устойчивостью СПб ГБУЗ «Городская туберкулезная больница №2» и отделения терапии туберкулеза с лекарственной устойчивостью СПб ГБУЗ «Пушкинский противотуберкулезный диспансер» с мая 2016 года по февраль 2018 года.Examination, sampling of biological material and treatment of 25 patients (19 men (76.0%) and 6 women (24.0%)) were carried out on the basis of the Department of Therapy of Pulmonary Tuberculosis and Tuberculosis Surgery of the Federal State Budgetary Institution "SPb NIIF" of the Ministry of Health of Russia, the department for the treatment of patients with tuberculosis with multidrug and extensive drug resistance of St. Petersburg State Budgetary Institution of Health "City Tuberculosis Hospital No. 2" and the Department of Treatment of Drug-Resistant Tuberculosis of St. Petersburg State Budgetary Institution of Health "Pushkin TB Dispensary" from May 2016 to February 2018.
Средний возраст больных составил 38,3±10,5 года, средний срок предшествующей непрерывной противотуберкулезной химиотерапии составил 16,2±6,8 лет. На фоне лечения противотуберкулезными препаратами у пациентов сохранялось бактериовыделение и отрицательная рентгенологическая динамика. В 18,6% случаев было проведено хирургическое лечение.The average age of patients was 38.3±10.5 years, the average duration of previous continuous anti-tuberculosis chemotherapy was 16.2±6.8 years. During treatment with anti-tuberculosis drugs, bacterial excretion and negative radiological dynamics persisted in patients. Surgical treatment was performed in 18.6% of cases.
Все больные имели распространенный двухсторонний деструктивный туберкулез легких без возможности проведения радикального хирургического лечения. В 88,0% (22) случаев имел место фиброзно-кавернозный туберкулез легких, в 8,0%) (2) - диссеминированный туберкулез легких, у одного пациента - цирротический туберкулез легких. У 2 больных (4,4%) отмечалась тотальная лекарственная устойчивость возбудителя.All patients had widespread bilateral destructive pulmonary tuberculosis without the possibility of radical surgical treatment. In 88.0% (22) of cases, fibrous-cavernous pulmonary tuberculosis occurred, in 8.0%) (2) - disseminated pulmonary tuberculosis, in one patient - cirrhotic pulmonary tuberculosis. 2 patients (4.4%) had total drug resistance of the pathogen.
В исследование не включались больные с отсутствием бактериовыделения, туберкулемой (-ми) легких, очаговым туберкулезом легких, злокачественными процессами, ВИЧ-инфекцией, генерализованными формами туберкулеза, микобактериозом органов дыхания, онкологическими заболеваниями, с обострением хронических заболеваний, пациенты, получающие лучевую, цитостатическую, длительную системную глюкокортикостероидную терапию.The study did not include patients with no bacterial excretion, pulmonary tuberculoma(s), focal pulmonary tuberculosis, malignant processes, HIV infection, generalized forms of tuberculosis, mycobacteriosis of the respiratory system, oncological diseases, with exacerbation of chronic diseases, patients receiving radiation, cytostatic, long-term systemic glucocorticosteroid therapy.
Пациентам проводилась иммунотерапия с введением аутологичной композиции с активированными специфическими пептидами ESAT-6 и SFP-10 дендритными клетками на фоне противотуберкулезной терапии.Patients underwent immunotherapy with the introduction of an autologous composition with activated specific peptides ESAT-6 and SFP-10 dendritic cells against the background of anti-tuberculosis therapy.
Все пациенты получали противотуберкулезную терапию с учетом данных о чувствительности возбудителя по результатам бактериологического исследования и включением комбинаций из шести-восьми препаратов второго и третьего ряда согласно существующим рекомендациям (инъекционные аминогликозиды канамицин (Km) и амикацин (Am) и полипептид (капреомицин - Cm), фторхинолоны III поколения - левофлоксацин (Lfx), спарфлоксацин (Sfx), IV поколения - моксифлоксацин (Mfx)), протионамид (Pto), этионамид (Eto), циклосерин (Cs)/теризидон (Trd), аминосалициловая кислота (PAS), линезолид (Lzd), амоксициллин(а-убрать) + клавулановая кислота (Amx/Clv), кларитромицин (Cl)/азитромицин (Az), имипенем (Imp)/циластатин (On), меропенем (Mpm). Препараты назначаются согласно переносимости пациентами и их массе тела.All patients received anti-tuberculosis therapy taking into account data on the sensitivity of the pathogen based on the results of bacteriological examination and the inclusion of combinations of six to eight second- and third-line drugs according to existing recommendations (injectable aminoglycosides kanamycin (Km) and amikacin (Am) and a polypeptide (capreomycin - Cm), third generation fluoroquinolones - levofloxacin (Lfx), sparfloxacin (Sfx), IV generation - moxifloxacin (Mfx)), prothionamide (Pto), ethionamide (Eto), cycloserine (Cs) / terizidone (Trd), aminosalicylic acid (PAS), linezolid (Lzd), amoxicillin (a-remove) + clavulanic acid (Amx/Clv), clarithromycin (Cl)/azithromycin (Az), imipenem (Imp)/cilastatin (On), meropenem (Mpm). Drugs are prescribed according to patient tolerance and body weight.
Оценка эффективности лечения проводилась в динамике на 30-е, 60-е, 120-е и 240-е сутки по выраженности симптомов интоксикации и респираторной симптоматики; прекращению бактериовыделения с помощью: микроскопического исследования мокроты для выявления КУМ методом люминесцентной микроскопии; культурального исследования мокроты (посев материала на плотные и жидкие питательные среды в системе BACTECMGIT 960) и рентгенологической динамике с помощью рентгенографии и компьютерной томографии органов грудной клетки.Evaluation of the effectiveness of treatment was carried out in dynamics on the 30th, 60th, 120th and 240th day according to the severity of symptoms of intoxication and respiratory symptoms; cessation of bacterial excretion with the help of: microscopic examination of sputum to detect AFB by fluorescent microscopy; cultural study of sputum (inoculation of material on solid and liquid nutrient media in the BACTECMGIT 960 system) and radiological dynamics using X-ray and computed tomography of the chest.
На этапе подписания информированного согласия пять пациентов отказались от проведения иммунотерапии или имели критерии невключения.At the informed consent stage, five patients refused immunotherapy or met exclusion criteria.
Пациентам проводился забор 60 мл периферической крови в вакутейнеры с цитратом и ее обработка не позднее 36 часов после забора. Полученные дендритные клетки и Т-лимфоциты активировались специфическими пептидами ESAT-6 и SFP-10, далее после получения суспендированной аутологичной композиции на основе зрелых дендритных клеток в лабораторных условиях проводилось ее введение внутрикожно в дозе 1 мл еженедельно десятикратно.Patients were taken 60 ml of peripheral blood into vacutainers with citrate and processed no later than 36 hours after collection. The resulting dendritic cells and T-lymphocytes were activated with specific peptides ESAT-6 and SFP-10, then after obtaining a suspended autologous composition based on mature dendritic cells in laboratory conditions, it was administered intradermally at a dose of 1 ml ten times a week.
В динамике после курса терапии у больных определялись изотипы активированных специфическими пептидами ESAT-6/SFP-10 иммуноглобулинов (ИК (иммунные комплексы), IgG1, IgG3, IgE, IgG1+IgG3) методом динамического светорассеяния, вклад которых должен снижаться на фоне терапии, что в свою очередь говорит о снижении активности туберкулезной инфекции (Патент RU 2707571 Способ прогнозирования развития туберкулеза у здоровых лиц / Старшинова А.А., Зинченко Ю.С., Истомина Е.В., Филатов М.В., Денисова Н.В., Павлова М.В., Сапожникова Н.В., Яблонский П.К., Бурдаков B.C., Чурилов Л.П.). Измерения проводятся на лазерном корреляционном спектрометре (сертификат RU. С.39.003. А №5381) ЛКС-03 (ИНТОКС-МЕД, Россия).In the dynamics after the course of therapy in patients, the isotypes of immunoglobulins activated by specific peptides ESAT-6 / SFP-10 (IC (immune complexes), IgG1, IgG3, IgE, IgG1 + IgG3) were determined by dynamic light scattering, the contribution of which should decrease during therapy, which in turn, indicates a decrease in the activity of tuberculosis infection (Patent RU 2707571 Method for predicting the development of tuberculosis in healthy individuals / Starshinova A.A., Zinchenko Yu.S., Istomina E.V., Filatov M.V., Denisova N.V. , Pavlova M.V., Sapozhnikova N.V., Yablonsky P.K., Burdakov V.C., Churilov L.P.). The measurements are carried out on a laser correlation spectrometer (certificate RU. C.39.003. A No. 5381) LKS-03 (INTOX-MED, Russia).
В 70,0% случаев (n=14) не отмечено побочных реакций на введение композиции. У одного больного (7,2%) отмечалась общая побочная реакция в виде тремора, озноба на первое введение. У 5 (38,7%) - на 8 и 9 введение отмечалась кожная реакция в местах введения в виде папулы, с регрессией к 4-8 неделе.In 70.0% of cases (n=14) there were no adverse reactions to the administration of the composition. One patient (7.2%) had a general adverse reaction in the form of tremor, chills on the first injection. In 5 (38.7%) - on 8 and 9 injections, a skin reaction was noted at the injection sites in the form of a papule, with regression by 4-8 weeks.
Отдаленные результаты лечения были проанализированы у четырнадцати больных после 240 дней терапии и через год после проведения курса иммунотерапии.Long-term results of treatment were analyzed in fourteen patients after 240 days of therapy and one year after the course of immunotherapy.
По результатам комплексного обследования симптомы интоксикации снизились через 60 дней в 65,0% (13/20) случаев и к 120 дням отмечались только в 15,0% (3/20) случаев, которые далее диагностировались к 240 дням после иммунотерапии.According to the results of a comprehensive examination, the symptoms of intoxication decreased after 60 days in 65.0% (13/20) of cases and by 120 days were noted only in 15.0% (3/20) of cases, which were further diagnosed by 240 days after immunotherapy.
Прекращение бактериовыделения отмечалось через 60 дней в 25,0% (5 из 20) случаев, через 120 дней после иммунотерапии в 30,0% (6 из 20) случаев. К 240 дню после терапии и через год после проведенного лечения положительная динамика сохранялась в 66,7% (10 из 14) случаев.Termination of bacterial excretion was noted after 60 days in 25.0% (5 out of 20) of cases, 120 days after immunotherapy in 30.0% (6 out of 20) of cases. By day 240 after therapy and one year after treatment, positive dynamics persisted in 66.7% (10 out of 14) of cases.
По данным рентгенологического обследования имела место рентгенологическая динамика в виде рассасывания очаговых и инфильтративных изменений в легких в 20,0% (4 из 20) через 60 дней, через 120 дней - в 30% (6 из 20) и к 240 дням - в 42,8%) (6 из 14) данная динамика сохранялась, что значимо с учетом отсутствия положительного результата на фоне противотуберкулезных препаратов.According to the X-ray examination, there was an X-ray dynamics in the form of resorption of focal and infiltrative changes in the lungs in 20.0% (4 out of 20) after 60 days, after 120 days - in 30% (6 out of 20) and by 240 days - in 42 .8%) (6 out of 14), this trend persisted, which is significant given the lack of a positive result on the background of anti-tuberculosis drugs.
По отдаленным результатам лечения через 12 месяцев после проведения иммунотерапии в 42,8% (6 из 14) терапия была прекращена с учетом отсутствия бактериовыделения и положительной динамики по данным рентгенологического обследования. Три пациента скончались из-за прогрессирования туберкулезного процесса (20,0%) и один больной скончался в связи с развитием сердечной недостаточности. Два пациента прекратили прием терапии самостоятельно и у двоих (15,3%) отмечалось прогрессирование туберкулезного процесса.According to the long-term results of treatment, 12 months after immunotherapy, in 42.8% (6 out of 14) therapy was discontinued, taking into account the absence of bacterial excretion and positive dynamics according to X-ray examination. Three patients died due to the progression of the tuberculous process (20.0%) and one patient died due to the development of heart failure. Two patients discontinued therapy on their own and two (15.3%) showed progression of the tuberculous process.
Результаты иммунологического исследования изотиповResults of the immunological study of isotypes
иммуноглобулинов, активированных специфическими пептидами, показывают снижение уровня иммуноглобулинов после проведения иммунотерапии (Фиг. 1).immunoglobulins activated with specific peptides show a decrease in the level of immunoglobulins after immunotherapy (Fig. 1).
Согласно полученным данным, благодаря проведению иммунотерапии удалось в 42,8% случаев получить высокую эффективность лечения у больных туберкулезом легких, у которых на фоне проведения полихимиотерапии положительной динамики не отмечалось.According to the data obtained, thanks to the immunotherapy, it was possible to obtain high efficiency of treatment in 42.8% of cases in patients with pulmonary tuberculosis, in whom no positive dynamics was observed during polychemotherapy.
Клинический пример №1.Clinical example No. 1.
Пациент С.А.В. (58 л.) поступил в стационар с диагнозом «Фиброзно-кавернозный туберкулез легких с бактериовыделением (МБТ (+) и широкой лекарственной устойчивостью возбудителя (ШЛУ МБТ) (S, Н, R, Е, Z, Pt, Am, Km, Cap, Cs, Ofx)». Сопутствующие заболевания: папилломатоз желчного пузыря, гипертоническая болезнь (II ст.), двухсторонняя сенсоневральная тугоухость, поверхностный гастрит, хронический простатит, энцефалопатия II ст., смешанного генеза, хронический холецистит (ремиссия).Patient S.A.V. (58 y.) was admitted to the hospital with a diagnosis of Fibrous-cavernous pulmonary tuberculosis with bacterial excretion (MBT (+) and extensive drug resistance of the pathogen (XDR MBT) (S, H, R, E, Z, Pt, Am, Km, Cap , Cs, Ofx)". Concomitant diseases: gallbladder papillomatosis, hypertension (stage II), bilateral sensorineural hearing loss, superficial gastritis, chronic prostatitis, stage II encephalopathy, mixed genesis, chronic cholecystitis (remission).
Анамнез болезни: туберкулезом легких болеет с 2008 года, изначально деструктивный туберкулез легких, МБТ (+), лечение в стационаре с положительной динамикой в течение 7 месяцев, был выписан, а в 2013 году снят с учета. Рецидив в 2015 году, двухсторонний деструктивный туберкулез легких. МБТ (+), впервые установлена МЛУ МБТ, в стационаре больному была выполнена клапанная бронхоблокация, там же больной лечился с 21.07.2015 по 26.04.2016 по 4 режиму с отрицательной динамикой, хирургическое лечение показано не было с учетом распространенности процесса и выраженной сердечно-сосудистой патологией, расширен спектр лекарственной устойчивости до ШЛУ МБТ (данные об устойчивости так же к капреомицину) 26.04.2016 был переведен для продолжения лечения в противотуберкулезный диспансер. Инвалид 2 группы. Проведенное обследование: микобактерии туберкулеза определены как методом бактериоскопии так и посевом, при рентгеновском исследовании были выявлены двухсторонние каверны в легких на фоне инфильтративно-очаговых изменений с обеих сторон.History of the disease: pulmonary tuberculosis has been ill since 2008, initially destructive pulmonary tuberculosis, MBT (+), treatment in a hospital with positive dynamics for 7 months, was discharged, and in 2013 deregistered. Relapse in 2015, bilateral destructive pulmonary tuberculosis. MBT (+), MDR MBT was first established, the patient underwent valvular bronchoplasty in the hospital, the patient was treated there from 07/21/2015 to 04/26/2016 according to the 4th regimen with negative dynamics, surgical treatment was not indicated, taking into account the prevalence of the process and severe cardiac vascular pathology, the spectrum of drug resistance was expanded to XDR MBT (data on resistance also to capreomycin) on 04/26/2016 was transferred to continue treatment in the TB dispensary. Disabled 2 groups. Conducted examination: Mycobacterium tuberculosis was determined both by bacterioscopy and by culture, X-ray examination revealed bilateral cavities in the lungs against the background of infiltrative-focal changes on both sides.
Проведен курс иммунотерапии суспендированной композицией на основе дендритных клеток (10 введений еженедельно, на фоне противотуберкулезной терапии).A course of immunotherapy with a suspended composition based on dendritic cells was carried out (10 injections weekly, against the background of anti-tuberculosis therapy).
Через 60 дней после проведения иммунотерапии у пациента отмечалась прибавка в весе 3 кг, симптомы интоксикации не определялись. Получен первый отрицательный результат по данным микроскопии. Далее через 120 дней получены отрицательные результаты посевов по данным бактериологического обследования. Полученная динамика сохранялась далее к 240 дням терапии и далее через год после иммунотерапии.60 days after immunotherapy, the patient had an increase in weight of 3 kg, the symptoms of intoxication were not determined. The first negative result was obtained according to microscopy. Further, after 120 days, negative results of crops were obtained according to bacteriological examination. The resulting dynamics persisted further to 240 days of therapy and then a year after immunotherapy.
На контрольных рентгенограммах 30-е, 60-е, 120-е и 240-е сутки отмечалась умеренная положительная динамика процесса с уменьшением инфильтративных и очаговых изменений и полостей распада (Фиг. 2). Вклад изотипов специфических иммуноглобулинов (IgG1, IgG3, IgE, IgG1+IgG3) снизился через 120 дней в два раза.On the control radiographs on the 30th, 60th, 120th and 240th days, a moderate positive dynamics of the process was noted with a decrease in infiltrative and focal changes and decay cavities (Fig. 2). The contribution of isotypes of specific immunoglobulins (IgG1, IgG3, IgE, IgG1+IgG3) decreased by half after 120 days.
Пациент выписан из стационара с рекомендацией дальнейшего наблюдения в условиях диспансера по месту жительства. Через год после окончания проведения иммунотерапии получение положительной динамики и стабилизация процесса позволили завершить курс лечения и назначить противорецидивное лечение.The patient was discharged from the hospital with a recommendation for further observation in a dispensary at the place of residence. A year after the end of immunotherapy, positive dynamics and stabilization of the process made it possible to complete the course of treatment and prescribe anti-relapse treatment.
Claims (2)
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020136808A RU2020136808A (en) | 2022-05-11 |
| RU2771843C2 true RU2771843C2 (en) | 2022-05-12 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2372936C1 (en) * | 2008-05-19 | 2009-11-20 | Закрытое акционерное общество "Томские клеточные технологии" (ЗАО "Томские клеточные технологии") | Method for preparing autologous tuberculosis vaccine |
| WO2014007667A1 (en) * | 2012-06-25 | 2014-01-09 | Volgushev Sergei Anatolievich | Autologous vaccine for treating pulmonary tuberculosis and method for producing same |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2372936C1 (en) * | 2008-05-19 | 2009-11-20 | Закрытое акционерное общество "Томские клеточные технологии" (ЗАО "Томские клеточные технологии") | Method for preparing autologous tuberculosis vaccine |
| WO2014007667A1 (en) * | 2012-06-25 | 2014-01-09 | Volgushev Sergei Anatolievich | Autologous vaccine for treating pulmonary tuberculosis and method for producing same |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ПЕТРОВСКАЯ С.Н. Экспериментальные подходы к разработке противотуберкулезной вакцины на основе дендритных клеток. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / ГУ "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии РАМН". Москва, 2006. НАЗАРЕНКО М.М. и др. Эффективность применения терапевтической вакцины на основе дендритных клеток у больных туберкулезом легких с широкой лекарственной устойчивостью возбудителя // Медицинский альянс. 2018. N S3. С. 140-141. ГОНЧАРОВ А.Е. и др. Адъювантная терапия туберкулеза с множественной и широкой лекарственной устойчивостью вакциной на основе дендритных клеток // Медицинские новости. 2014. N12. С. 67-72. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Märten et al. | Therapeutic vaccination against metastatic renal cell carcinoma by autologous dendritic cells: preclinical results and outcome of a first clinical phase I/II trial | |
| Hegmans et al. | Consolidative dendritic cell-based immunotherapy elicits cytotoxicity against malignant mesothelioma | |
| TWI572718B (en) | Immunosuppressive cells and making methods and composition thereof | |
| JP6615148B2 (en) | Induction of IL-12 using immunotherapy | |
| KR20180041229A (en) | Methods for stem cell transplantation | |
| AU2023208190A1 (en) | Methods relating to activated dendritic cell compositions and immunotherapeutic treatments for subjects with advanced cancers | |
| CN105886469B (en) | CIK cell and its cultural method and application | |
| Nagel et al. | Cell-mediated immunity against malignant melanoma in monozygous twins | |
| CN106589133A (en) | Preparation and applications of liver-cancer-specific CTL cells induced by new enhanced antigen combined polypeptide | |
| CN115521914A (en) | Human primary natural killer cell in-vitro amplification system and method | |
| RU2771843C2 (en) | Autologous composition and method for treating pulmonary tuberculosis with drug resistance of the pathogen and absence of effect against the background of polychemotherapy | |
| WO2023165573A1 (en) | Culture medium formula for activating whole anti-tumor immune system and method for preparing agonist activated whole immune effector cells | |
| US7175839B1 (en) | Cancer immunotherapy using allostimulated cells in a multiple sequential implantation strategy | |
| TW200404002A (en) | Treatment method achieved by using the lymphocytes derived from HLA matching donor-originating activated lymphocytes, formula having the lymphocytes as a main constituent thereof; method and preparation kit for manufacturing the formula | |
| CN107849537A (en) | Induce the dendritic cells through optimal activation of anti-tumor immune response improve or increased | |
| RU2597976C2 (en) | Method for producing regulatory dendritic cells | |
| RU2372936C1 (en) | Method for preparing autologous tuberculosis vaccine | |
| US20090232834A1 (en) | Methods and Agents to Treat Autoimmune Diseases | |
| EP1871872B1 (en) | Method for activating cd8 t cells | |
| CN114657123A (en) | Exosome cell-free vaccine of over-expression RAE-1 derived from leukemia specific dendritic cell and preparation method thereof | |
| JPWO2005097976A1 (en) | Dendritic cells obtained by antigen pulsing | |
| US20200330576A1 (en) | Aldh1 antigen-pulsed dendritic cells | |
| CN117815369A (en) | Application of recombinant protein CCL11 in treatment of malignant pleural effusion | |
| CN116768982A (en) | Polypeptide and application thereof in preparation of medicines for preventing and treating tumors | |
| JP2008538499A (en) | CD4 T cell activation method {MethodForActivating CD4TCells} |