RU2768464C1 - Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита - Google Patents
Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2768464C1 RU2768464C1 RU2021112097A RU2021112097A RU2768464C1 RU 2768464 C1 RU2768464 C1 RU 2768464C1 RU 2021112097 A RU2021112097 A RU 2021112097A RU 2021112097 A RU2021112097 A RU 2021112097A RU 2768464 C1 RU2768464 C1 RU 2768464C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- membranous nephropathy
- tryptophan
- albumin
- fluorescence
- chronic glomerulonephritis
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6806—Determination of free amino acids
- G01N33/6812—Assays for specific amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики мембранозной нефропатии. Осуществляют определение флуоресценции триптофана. Из сыворотки крови выделяют альбумин. Далее флуориметрическим методом определяют степень поврежденного альбумина по аминокислотным остаткам триптофана. При значении флуоресценции триптофана менее 0,097 ед. фл./г белка диагностируют мембранозную нефропатию. Способ обеспечивает возможность ранней диагностики мембранозной нефропатии за счет определения флуоресценции аминокислотных остатков триптофана, входящих в состав альбумина сыворотки крови. 3 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано при диагностике хронического гломерулонефрита (ХГ), а именно его морфологической формы - мембранозной нефропатии. Хронический гломерулонефрит является глобальной проблемой здравоохранения, которая становится все более распространенной среди населения мира разного возраста.
На данный момент проблема осложнений гломерулонефрита приобретает все большее значение, так как затруднение ранней диагностики все чаще приводит к усугублению клинической картины и повреждению не только мочевыделительной, но и сердечно-сосудистой, дыхательной, нервной систем организма человека. К наиболее типичным осложнениям патологии относят острую почечную недостаточность, хроническую почечную недостаточность, энцефалопатию (эклампсию) с отеком мозга, отек легких, а также острую сердечную недостаточность. Развитие осложнений приводит к значительному ухудшению состояния человека, снижению его нормальной физической активности, а иногда приводит к летальному исходу [1].
Наряду с большим количеством методов исследования патологии почек, ведущими являются: биопсия почечной ткани [2] и определение скорости клубочковой фильтрации (расчетные формулы, проба Реберга-Тареева) [3]. Важно отметить, что биопсия почечной ткани является достаточно дорогостоящим и инвазивным методом обследования, методы определения скорости клубочковой фильтрации позволяют диагностировать заболевание при непосредственном обращении пациента к врачу с жалобами. Таким образом, целесообразна разработка способа ранней диагностики мембранозной нефропатии с целью прогнозирования развития патологии и предупреждения развития глубокой стадии заболевания.
Наиболее частой причиной развития осложнений при хроническом гломерулонефрите является развитие окислительного стресса, который сопровождается повреждением белков, липидов и как следствие приводит к изменению структурно-функциональных особенностей тканей и апоптозу [4].
Изменение содержания и структуры альбумина является важным клиническим показателем происходящих патологических процессов, поэтому в клинике обращают внимание на изменение сывороточного альбумина человека в качестве дополнительного клинического обследования при ряде патологий [5].
Известно об использовании ишемически-модифицированного сывороточного альбумина для ранней диагностики острого коронарного синдрома [6]. Кроме этого окислительная модификация альбумина по остаткам цистеина (Cys34) является признаком фокально-сегментарного гломерулосклероза [7], раннего когнитивного расстройства и болезни Альцгеймера [8], возрастной катаракты [9], цирроза печени [10].
В отечественной и зарубежной литературе мы не встретили исследований по определению окислительной модификации альбумина по остатку триптофана (Trp 189), выделенного из сыворотки крови пациентов с мембранозной нефропатией. Известно, что окисление триптофановых остатков до конечных продуктов (кинуренин, 3-гидроксикинуренин, гидроксипиролиндол, оксииндол, N-формилкинуренин, 3-гидроксикинуренин) сопровождается снижением флуоресценции, характерной для триптофана.
Техническим результатом настоящего изобретения является разработка раннего способа дополнительной диагностики мембранозной нефропатии.
В исследовании использовалась сыворотка крови пациентов с мембранозной нефропатией как одной из основных форм гломерулонефрита по клинико-морфологической классификации. Пациенты поступали в стационар с клиникой нефротического синдрома. В качестве контроля использовали сыворотку крови доноров.
Перед забором крови у пациентов проводилась оценка состояния выделительной и сердечно-сосудистой системы с помощью общего анализа крови и мочи, где выявлялись лейкоцитоз, снижение количества общего белка и протеинурия.
После подписания информированного согласия у пациентов забиралась кровь из вены без антикоагулянтов. Кровь откручивали на центрифуге (ELMI CM-6M, Германия) при 3000 об/мин в течение 20 минут для получения сыворотки крови. Далее из сыворотки крови выделяли альбумин методом проточного диализа в течение 18-20 часов [11], подтверждали полученную фракцию методом электрофорез [12] (CN-PAGE, система для электрофореза OmniPAGE «WAVE» Maxi 20 x 20 см, Cleaver Scientific Ltd, Великобритания). Степень поврежденного альбумина по аминокислотным остаткам триптофана определяли флуориметрическим методом [13] (Shimadzu RF-6000, Япония).
Полученные результаты обрабатывали с помощью программы Statistica 10.0. Для оценки статистически значимых различий использовали дисперсионный анализ (ANOVA), попарные сравнения выполняли с помощью рангового критерия Манна-Уитни (U-тест). Критический уровень статистической значимости различий нулевой гипотезы (р) принимали равным 0,05.
Пациенты были разделены на две группы по наличию или отсутствию мембранозной нефропатии, как одной из морфологических форм хронического гломерулонефрита. В исследование были включены пациенты с хроническим гломерулонефритом с нефротическим синдромом, а также здоровые доноры. Пациенты поступали в стационар для лечения хронического гломерулонефрита с жалобами на отеки нижних конечностей, нарушение мочеотделения, после обследования у кардиолога и сосудистого хирурга (исключен сердечно-сосудистый генез отеков).
Перед подборкой индивидуального способа лечения проводились различные диагностические исследования: биохимический анализ крови, общий анализ крови и мочи, ультразвуковое исследование почек, биопсия почечной ткани.
Было доказано, что у здоровых доноров флуоресценция триптофана составила 0,23 ед.фл./г белка, что находится в пределах допустимой нормы данного показателя и свидетельствует об отсутствии окислительного стресса, У группы пациентов с мембранозной нефропатией флуоресценция триптофана снижалась менее 0,097 ед.фл./г белка, что свидетельствует о повышении продуктов окисления триптофана на 57,8 % (р<0,05). Важно отметить, что у пациентов, не имеющих мембранозную нефропатию, флуоресценция триптофана не изменялась относительно доноров и составила 0,24 ед.фл./г белка.
Клиническое наблюдение 1: Пациент С., 45 лет, поступил в нефрологическое отделение с диагнозом хронический гломерулонефрит, нефротический синдром. Диагноз выставлен на основании клинико- лабораторных исследований (общие анализы крови и мочи, биохимический анализ крови), подтвержден данными биопсии почечной ткани. Морфологическое исследование подтвердило наличие мембранозной нефропатии, а также острого канальцевого некроза. По результатам общего анализа крови выявлен лейкоцитоз 10,2 * 109/л, а также увеличение уровня креатинина до 145 мкмоль/л. Пациенту было выполнено исследование концентрации продуктов окисления триптофана в сыворотке крови в альбумине, что показало значительное снижение флуоресценции триптофана до 0,083 ед.фл./ г белка, то есть окислительное повреждение аминокислоты на 63,9 % относительно доноров.
Клиническое наблюдение 2: Пациент К., 49 лет, поступил в нефрологическое отделение с диагнозом хронический гломерулонефрит в стадии обострения. Нефротический синдром. По данным УЗИ контуры почек Контуры нечеткие. Rs: 138*70 мм, ТСП 22-23 мм. Эхогенность паренхиматозного слоя повышена. ЧЛС не расширена с обеих сторон. Конкременты с средней трети размером 4 мм. ПО данным морфологического исследования доказано развитие мембранозной нефропатии. По результатам общего анализа крови выявлен лейкоцитоз 14,75 * 109/л, а также увеличение уровня креатинина до 196 мкмоль/л. Общий анализ мочи выявил протеинурию - 3,3 г/л. Пациенту было выполнено исследование концентрации продуктов окисления триптофана в альбумине сыворотке крови, что показало значительное снижение флуоресценции триптофана до 0,078 ед.фл./г белка, то есть окислительное повреждение аминокислоты на 66,1 % относительно доноров.
Клиническое наблюдение 3: Пациент М., 41 год, поступил в нефрологическое отделение с диагнозом Хронический гломерулонефрит, хроническая болезнь почек 1 стадии. По данным УЗИ контуры почек нечеткие. Rd: 115-52. ТПС 15 мм. ЧЛС не расширена. В с/3 киста 13мм. Эхогенность паренхиматозного слоя повышена с обеих сторон. ПО данным морфологического исследования доказано, что у больного болезнь минимальных изменений, ранняя стадия фокально-сегментарного гломерулосклероза. По результатам общего анализа крови выявлен лейкоцитоз 16,5 * 109/л, а также увеличение уровня креатинина до 216 мкмоль/л. Общий анализ мочи выявил протеинурию - 6,6 г/л. Пациенту было выполнено исследование концентрации продуктов окисления триптофана в сыворотке крови по альбумину, что показало почти полное отсутствие изменений - 0,24 ед.фл./ г белка, что не отличается от значений данного показателя доноров.
Таким образом, доказано достоверно значимое снижение флуоресценции триптофана менее 0,097 ед.фл./г белка у пациентов с мембранозной нефропатией, что позволяет использовать данный критерий для диагностики мембранозной нефропатии.
Claims (1)
- Способ диагностики мембранозной нефропатии, включающий определение флуоресценции триптофана, при этом из сыворотки крови выделяют альбумин, далее флуориметрическим методом определяют степень поврежденного альбумина по аминокислотным остаткам триптофана, и при значении флуоресценции триптофана менее 0,097 ед. фл./г белка диагностируют мембранозную нефропатию.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021112097A RU2768464C1 (ru) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021112097A RU2768464C1 (ru) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2768464C1 true RU2768464C1 (ru) | 2022-03-24 |
Family
ID=80819382
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021112097A RU2768464C1 (ru) | 2021-04-27 | 2021-04-27 | Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2768464C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU1674400A (en) * | 1998-12-21 | 2000-07-12 | Monash University | Kidney disease detection and treatment |
| US20030003588A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-01-02 | Comper Wayne D. | Method for kidney disease detection by protein profiling |
| US10107810B2 (en) * | 2014-07-24 | 2018-10-23 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika Ag | Methods and kits for monitoring membranous nephropathy |
| WO2021152370A1 (en) * | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Warszawski Uniwersytet Medyczny | Method of screening for a chronic kidney disease or glomerulopathy, method of monitoring a response to treatment of a chronic kidney disease or glomerulopathy in a subject and a method of treatment of a chronic kidney disease or glomerulopathy |
-
2021
- 2021-04-27 RU RU2021112097A patent/RU2768464C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU1674400A (en) * | 1998-12-21 | 2000-07-12 | Monash University | Kidney disease detection and treatment |
| US20030003588A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-01-02 | Comper Wayne D. | Method for kidney disease detection by protein profiling |
| US10107810B2 (en) * | 2014-07-24 | 2018-10-23 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika Ag | Methods and kits for monitoring membranous nephropathy |
| WO2021152370A1 (en) * | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Warszawski Uniwersytet Medyczny | Method of screening for a chronic kidney disease or glomerulopathy, method of monitoring a response to treatment of a chronic kidney disease or glomerulopathy in a subject and a method of treatment of a chronic kidney disease or glomerulopathy |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| HUH H. et al. Factors affecting the long-term outcomes of idiopathic membranous nephropathy. BMC Nephrol. 2017, 18(1):104, doi:10.1186/s12882-017-0525-6. * |
| LEE T. et al. Serum albumin at partial remission predicts outcomes in membranous nephropathy. kidney Int Rep. 2020, 5(5), p.706-717. * |
| АБАЛЕНИХИНА Ю.В. и др. Состояние окислительной модификации тирозина и триптофана в условиях in vivo-модулирования синтеза оксида азота. Наука молодых. 2016, стр.1-11. * |
| АБАЛЕНИХИНА Ю.В. и др. Состояние окислительной модификации тирозина и триптофана в условиях in vivo-модулирования синтеза оксида азота. Наука молодых. 2016, стр.1-11. LEE T. et al. Serum albumin at partial remission predicts outcomes in membranous nephropathy. kidney Int Rep. 2020, 5(5), p.706-717. HUH H. et al. Factors affecting the long-term outcomes of idiopathic membranous nephropathy. BMC Nephrol. 2017, 18(1):104, doi:10.1186/s12882-017-0525-6. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Reimann et al. | Trichinosis and periarteritis nodosa: Differential diagnosis; possible relationship | |
| RU2768464C1 (ru) | Способ диагностики мембранозной нефропатии как одной из форм хронического гломерулонефрита | |
| RU2427837C1 (ru) | Способ диагностики деструктивного панкреатита | |
| JP5850374B2 (ja) | アルツハイマー病の診断補助方法、及び診断システム | |
| Rafalska et al. | Stratifying risk for progression in IgA nephropathy: how to predict the future | |
| RU2588841C1 (ru) | Способ диагностики риска сочетанного течения атеросклероза у больных хронической ишемией нижних конечностей | |
| Prejbisz et al. | Smaller caliber renal arteries are a novel feature of uromodulin-associated kidney disease | |
| JP6062439B2 (ja) | 早期腎障害の評価マーカーとその測定方法 | |
| Tampe et al. | MO087 PLASMALEMMAL VESICLE-ASSOCIATED PROTEIN-1 (PLVAP) INDICATES THE FORMATION OF DIAPHRAGM-BRIDGED FENESTRATIONS OF GLOMERULAR ENDOTHELIAL CELLS IN KIDNEY DISEASE | |
| RU2616904C1 (ru) | Способ определения инфаркта миокарда при проведении судебно-медицинской экспертизы | |
| Alina-Emanuela et al. | MO635 PRO-INFLAMMATORY CYTOKINES IL-6 AND IL-17 DISPLAY A PARTICULAR MOLECULAR PATTERN IN ASSOCIATION WITH DYSREGULATED MIRNAS IN PATIENTS WITH TYPE 2 DIABETES MELLITUS IN THE EARLY STAGES OF DIABETIC KIDNEY DISEASE | |
| RU2785492C1 (ru) | Способ диагностики синдрома хронической мезентериальной ишемии в бассейне чревного ствола и верхней брыжеечной артерии у пациентов пожилого и старческого возраста | |
| RU2814003C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития диабетической ретинопатии у больных с сахарным диабетом 2-го типа | |
| RU2814934C1 (ru) | Способ оценки эндогенной интоксикации у животных | |
| Memon et al. | Hyperuricemia in Patients with Chronic Liver Disease | |
| RU2321348C1 (ru) | Способ диагностики возможности развития склероза в интерстиции почек при оксалатной нефропатии | |
| RU2767929C1 (ru) | Способ диагностики степени тяжести ишемического инсульта | |
| Mccafferty et al. | FP514 THe East and NoRth LOndon DIabetes Cohort Study (HEROIC): Rationale, Study Design and Outline Protocol | |
| Yaqub et al. | FP513 CLINICAL PROFILE AND MANAGEMENT OF PATIENTS WITH DIABETIC KIDNEY DISEASE: DATA FROM A HOSPITAL BASED REGISTRY ESTABLISHED IN A LOW INCOME COUNTRY | |
| RU2367349C1 (ru) | Неинвазивный способ определения количества склерозированных клубочков почек при геморрагической лихорадке с почечным синдромом | |
| RU2218870C1 (ru) | Способ оценки прогрессирования хронической почечной недостаточности у больных хроническим гломерулонефритом | |
| Galkina et al. | FP515 Tubular damage markers are useful for the diagnosis of kidney injury in patients with normoalbuminuric diabetic nephropathy | |
| RU2430370C2 (ru) | Способ диагностики отторжения почечного аллотрансплантата | |
| RU2241222C1 (ru) | Способ оценки степени поражений клубочкового и стромального аппарата почек у детей с нефропатией, ассоциированной с туберкулезной инфекцией | |
| Al-Shammari et al. | EARLY BIOCHEMICAL MARKER OF KIDNEY DISEASE |