RU2762139C1 - Средство для лечения уратного нефролитиаза - Google Patents
Средство для лечения уратного нефролитиаза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2762139C1 RU2762139C1 RU2021110917A RU2021110917A RU2762139C1 RU 2762139 C1 RU2762139 C1 RU 2762139C1 RU 2021110917 A RU2021110917 A RU 2021110917A RU 2021110917 A RU2021110917 A RU 2021110917A RU 2762139 C1 RU2762139 C1 RU 2762139C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- activity
- urate
- treatment
- nephrolithiasis
- rats
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/04—Drugs for disorders of the urinary system for urolithiasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и касается применения карнозина в дозе 15 мг/кг в качестве средства для лечения уратного нефролитиаза. Изобретение обеспечивает расширение ассортимента средств для лечения уратного нефролитиаза. 3 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно фармакологии, урологии и может быть использовано для профилактики и лечения уратного нефролитиаза.
Частота возникновения уратного нефролитиаза (УН) в современной популяции достигает до 10% от общей заболеваемости мочекаменной болезнью (МКБ), которая относится к числу наиболее распространенных заболеваний мочевыделительной системы.
Данная патология возникает вследствие нарушения обмена мочевой кислоты (МК), гиперурикемии и гиперурикозурии и образования в почках уратных депозитов, что способствует развитию воспалительных и деструктивных процессов в мочевыделительной системе.
Несмотря на то, что важную патогенетическую роль в развитии уратного нефролитиаза, играет активация процессов свободнорадикального окисления (СРО), на данный момент отсутствуют способы фармакологической коррекции данного заболевания, непосредственно влияющие на выраженность оксидативного стресса и воспалительной инфильтрации в почечной ткани.
В связи с этим, является обоснованным изучение возможности фармакологической коррекции УН путем антиоксидантной терапии. Одним из наиболее перспективных "ренальных" антиоксидантов можно рассматривать карнозин - дипептид, состоящий из остатков аминокислот (3-аланина и гистидина.
Наиболее близким прототипом является способ фармакологической коррекции уратного нефролитиаза, при котором в качестве лекарственного средства используется натрия цитрат (Вощула В.И. - Мн.: ВЭВЭР, 2006. - 268 с.). Данный способ обеспечивает антилитогенный эффект благодаря смещению pH мочи в щелочную сторону, а также образованию хелатных комплексов с ионами кальция.
Недостатками данного способа является ощелачивание мочи, повышающее риск образования фосфатных камней в почках, а также узкий спектр фармакологической активности, затрагивающий только одно звено патогенеза уратного нефролитиаза.
Авторы предлагают средство для лечения уратного нефролитиаза, действие которого осуществляется без существенных изменений pH мочи за счет подавления активности процессов свободнорадикального окисления в почках.
Техническим результатом заявляемого изобретения является расширение ассортимента средств для лечения уратного нефролитиаза.
Технический результат достигается тем, что для лечения уратного нефролитиаза используется пептидный антиоксидант карнозин в дозе 15 мг/кг.
Фармакологические свойства средства для лечения уратного нефролитиаза найдены экспериментальным путем.
Эксперимент проведен на самцах крыс сток Вистар со средней массой от 200 до 320 г, которые содержались в индивидуальных метаболических клетках, приспособленных для сбора мочи. Питание крыс осуществлялось с использованием стандартной лабораторной диеты. Животные были разделены на опытную группу (п=10), а также контрольную группу (п=15), в которых осуществлялось моделирование экспериментального уратного нефролитиаза. Для этого, согласно общепринятой модели (Перфильев В.Ю., Зверев Я.Ф., Жариков А.Ю., Условия развития уратного нефролитиаза и подходы к его моделированию. Нефрология. 2017; 21 (4): 48-54), животным обеих групп ежедневно на протяжении трех недель внутрижелудочно через зонд вводили смесь с содержанием оксониевой кислоты в дозе 500 мг/кг и мочевой кислоты в дозе 1000 мг/кг в течение 3 недель.
С 11-го дня и до конца эксперимента крысы опытной группы ежедневно получали раствор карнозина внутрижелудочно через зонд в дозе 15 мг/кг.
Для определения исходного уровня активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и у-глутамилтрансферазы (ГГТ), за день до начала эксперимента по моделированию уратного нефролитиаза производили сбор суточной мочи каждого животного с последующим определением активности ферментов на автоматическом биохимическом анализаторе DIRUI CS-T240 с использованием оптимизированных кинетических методов. Для определения активности ЛДГ проводили реакцию восстановления 2-оксопропионовой кислоты до 2-гидроксипропионовой. Активность ГТТ определялась по интенсивности окраски 5-амино-2-нитробензоата, который является продуктом реакции транслокации L-гамма-глутамил-3-карбокси-нитроанилида на глицилглицин.
В ходе проведения эксперимента, на, 7-й, 11-й, 14-й, 17-й и 21-й дни также производился сбор суточной мочи, с последующим определением активности ЛДГ и ГТТ по методикам, аналогичным тем, которые применялись для определения исходного уровня ферментов.
По истечении 3 недель эксперимента лабораторных животных подвергали эвтаназии под эфирным наркозом, после чего извлекали почки для оценки показателей активности процессов свободнорадикального окисления (СРО), а также для проведения морфологических исследований.
Оценка активности свободнорадикального окисления проводилось в соответствии с общепринятыми методиками (Брюханов В.М., Зверев Я.Ф., Лампатов В.В. и др. Методы доклинического (экспериментального) исследования влияния лекарственных средств на функцию почек. Новосибирск; Гео. 2013; 84 с. ). Определялись концентрация тиобарбитуратреактивных продуктов (ТБРП), общая прооксидантная активность (ОПА), общая антиоксидлантная активность, и активность антиоксидантных ферментов: супероксиддисмутазы (СОД), глутатионпероксидазы (ГПО) и каталазы (КАТ). Концентрация ТБРП определялась методом фотоэлектроколориметрии по интенсивности окраски раствора после протекания химической реакции ТБРП с 2-тио-4,6-пиримидиндионом. Активность КАТ измерялась по степени подавления окисления пероксидом водорода натриевой соли молибденовой кислоты.
Активность СОД оценивалась путем определения концентрации нитроформазана, который является продутом взаимодействия супероксидных радикалов с нитротетразолием. Активность ГПО измерялась с помощью проведения взаимодействия восстановленного глутатиона с дитионитробензойной кислотой. Общую прооксидантную активность оценивали в соответствии с зафиксированным уровнем окраски флюоресцентного комплекса, полученного путем взаимодействия тиобарбитуровой кислоты с продуктами реакции твина-80 с пероксидными радикалами. Общую антиоксидантную активность измеряли с помощью фиксации уровня ингибирвания Fe2+/аскорбат-зависимого окисления ТВИН-80 исследуемым образцом гомогената почек.
Для проведения морфологических исследований производили фиксацию почек в 10%-ном растворе формалина, осуществляли проводку исследуемого материала с помощью аппарата TISSUE-ТЕК VIPTM6 (Sakkura, Япония), получали срезы толщиной 5-7 мкм через почечный сосочек на аппарате Accu-Cut SRM (Sakkura, Япония). Полученные срезы окрашивали гематоксилином и эозином и рассматривали под увеличением х400 на микроскопе марки Nikon Eclipse Е200 (Китай). Количество уратных депозитов в поле зрения и их размер определяли с использованием пакетов программ ImageJ 1.43 и AxioVision 3.1.
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием статистических методов, принятых в экспериментальной фармакологии, в программе Statistica 12.0. (StatSoft, Inc.). Результаты биохимических исследований представлены как медиана (Me) и интраквартильный размах (Q1;Q3), морфологических исследований - в виде среднего значения и стандартной ошибки среднего (M±SEM). Значимость различий проверяли с помощью непараметрических критериев Манна- Уитни (для независимых выборок) и Вилкоксона (для зависимых выборок). Достоверными считали различия при р<0.05.
Результаты исследований представлены в фигурах 1-3.
Фигура 1 - Показатели активности процесса СРО в гомогенате почек экспериментальных крыс.Вариабельность данных представлена медианой с указанием 25 и 75 перцентилей. ТБРП - тиобарбитуратреактивные продукты; ОПА - общая прооксидантная активность; ОАА - общая антиоксидантная активность, СОД - супероксиддистумтаза, КАТ - каталаза; ГПО -глутатионпероксидаза. ринт - уровень статистической значимости различий в контрольной группе относительно группы интактных крыс; рк - уровень статистической значимости различий в опытной группе относительно контрольной группы
Фигура 2 - Динамика активности маркерных ферментов повреждения почечных тканей в почках экспериментальных крыс. Вариабельность данных представлена медианой с указанием 25 и 75 перцентилей; ЛДГ - лактатдегидрогеназа; ГГТ - γ-глутамилтрансфераза. ри/у - уровень статистической значимости изменения показателя внутри группы относительно исходного уровня; рк - уровень статистической значимости различий в опытной группе относительно контрольной группы; Фигура 3 - Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение х 400. а - уратные депозиты в кистозно-измененном канальце почки у контрольной крысы, 6 - уратный конкремент в почечном канальце опытной крысы. Воспалительная реакция менее выражена.
Установлено, что в опытной группе оксидативный стресс в почках крыс под влиянием карнозина существенно ослаблялся (Фиг. 1). Так, концентрация ТБРП была в 1.4 раза статистически значимо ниже аналогического показателя контрольной группы (р<0.001). Кроме того, у крыс, получавших раствор карнозина, увеличились значения ОАА и активности каталазы в 1.4 и 1.3 раза соответственно (р<0.001). Активность ГПО статистически значимо уменьшилась в 1.3 раза (р=0.037).
По результатам биохимических исследований, с 14-х суток исследования у крыс контрольной группы значимо повышалась активность ЛДГ по сравнению с исходным уровнем, а к концу эксперимента - в 7.5 раз (Фиг. 2). При этом наблюдалось значимое снижение активности ГГТ - к 21- му дню данный показатель был ниже исходного уровня в 3 раза. В опытной группе также статистически значимо увеличивалась активность ЛДГ, но гораздо менее выражение, так как по завершении 3 недели эксперимента этот показатель был в 2 раза ниже такового в контрольной группе. Активность ГГТ у животных опытной группы также снижалась, но в меньшей степени, чем у крыс контрольной группы.
По результатам морфологических исследований, в почках крыс контрольной группы были выявлены уратные депозиты у всех 8 особей. Микролиты разной формы и синеватого цвета отмечали в канальцах коркового слоя и сосочке почки (Фиг. За). Их среднее количество составило 3.2±0.4 в поле зрения, а средний размер - 432.8±41.8 мкм2. При этом почечные канальцы были кистозно расширены, имели уплощенный эпителий с ядрами в состоянии пикноза. В строме отмечали явления выраженного воспаления.
На микропрепаратах почек крыс, получавших раствор карнозина, уратные депозиты отмечались у всех 15 животных, но их количество было меньше в 1.6 раза чем в контроле (р=0.01), в среднем - 1.9±0.2. Средний размер конкрементов при этом существенно между группами не различался. Воспалительная реакция в строме была слабо выражена (Фиг. 36).
Таким образом, в результате проведенных экспериментов продемонстрирована возможность эффективного лечения уратного нефролитиаза прямым пептидным антиоксидантом карнозином.
Claims (1)
- Применение карнозина в дозе 15 мг/кг в качестве средства для лечения уратного нефролитиаза.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110917A RU2762139C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Средство для лечения уратного нефролитиаза |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110917A RU2762139C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Средство для лечения уратного нефролитиаза |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2762139C1 true RU2762139C1 (ru) | 2021-12-16 |
Family
ID=79175308
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021110917A RU2762139C1 (ru) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | Средство для лечения уратного нефролитиаза |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2762139C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030003588A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-01-02 | Comper Wayne D. | Method for kidney disease detection by protein profiling |
| RU2649125C1 (ru) * | 2017-05-31 | 2018-03-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ определения риска развития кальцинатов при поликистозной болезни почек у детей |
| RU2738012C1 (ru) * | 2020-03-30 | 2020-12-07 | Артем Андреевич Буданов | Способ прогнозирования риска рецидивирования мочекаменной болезни на стадии первичного кальций-оксалатного нефролитиаза |
-
2021
- 2021-04-16 RU RU2021110917A patent/RU2762139C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030003588A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-01-02 | Comper Wayne D. | Method for kidney disease detection by protein profiling |
| RU2649125C1 (ru) * | 2017-05-31 | 2018-03-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ определения риска развития кальцинатов при поликистозной болезни почек у детей |
| RU2738012C1 (ru) * | 2020-03-30 | 2020-12-07 | Артем Андреевич Буданов | Способ прогнозирования риска рецидивирования мочекаменной болезни на стадии первичного кальций-оксалатного нефролитиаза |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| BATKO A.B. et al., [Experimental nephrolithiasis: nephroprotective effect of calcium antagonists][Article in Russian]. Eksp Klin Farmakol. 2012; 75(12):25-6. * |
| ELBARBARY N.S. et al., The effect of 12 weeks carnosine supplementation on renal functional integrity and oxidative stress in pediatric patients with diabetic nephropathy: a randomized placebo-controlled trial. Pediatr Diabetes. 2018 May;19(3):470-477.doi: 10.1111/pedi.12564. Epub 2017 Jul 26. * |
| PAVLYASHIK G.V. et al., [Comparative estimation of antilithogenic activity of porcine kidney derived biomedical substance and sodium citrate in experimental urolithiasis][Article in Russian]. Urologiia. 2017 Jun; (2):24-27. doi: 10.18565/urol.2017.2.24-27. * |
| ZHARIKOV A. et al., [Anti-lithogenic effect of meloxicam in experimental nephrolithiasis][Article in Russian]. Eksp Klin Farmakol. 2012; 75(3):14-7. * |
| ZHARIKOV A. et al., [Anti-lithogenic effect of meloxicam in experimental nephrolithiasis][Article in Russian]. Eksp Klin Farmakol. 2012; 75(3):14-7. ZHARIKOV A. et al., Experience of Using Tripeptide Leu-Ile-Lys for Experimental Therapy of Chronic 16-Week Oxalate Nephrolithiasis in Rats. Bull Exp Biol Med. 2020 Jun;169(2):237-241.doi: 10.1007/s10517-020-04858-x. Epub 2020 Jul 10. ELBARBARY N.S. et al., The effect of 12 weeks carnosine supplementation on renal functional integrity and oxidative stress in pediatric patients with diabetic nephropathy: a randomized placebo-controlled trial. Pediatr Diabetes. 2018 May;19(3):470-477.doi: 10.1111/pedi.12564. Epub 2017 Jul 26. BATKO A.B. et al., [Experimental nephrolithiasis: nephroprotective effect of calcium antagonists][Article in Russian]. Eksp Klin Farmakol. 2012; 75(12):25-6. PAVLYASHIK G.V. et al., [Comparative estimation of antilithogenic activity of porcine kidney derived biomedical substance and sodium citrate in experimental urolith * |
| ZHARIKOV A. et al., Experience of Using Tripeptide Leu-Ile-Lys for Experimental Therapy of Chronic 16-Week Oxalate Nephrolithiasis in Rats. Bull Exp Biol Med. 2020 Jun;169(2):237-241.doi: 10.1007/s10517-020-04858-x. Epub 2020 Jul 10. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ismail et al. | Anti-inflammatory activity of Salacia oblonga Wall. and Azima tetracantha Lam. | |
| Millar et al. | Evaluating the antioxidant potential of new treatments for inflammatory bowel disease using a rat model of colitis. | |
| Ryan et al. | An ultrastructural study of the mechanisms of proteinuria in aminonucleoside nephrosis | |
| Luthen et al. | Intrapancreatic zymogen activation and levels of ATP and glutathione during caerulein pancreatitis in rats | |
| Batra et al. | Influence of lead and zinc on rat male reproduction at ‘biochemical and histopathological levels’ | |
| Menconi et al. | Nitric oxide donor-induced hyperpermeability of cultured intestinal epithelial monolayers: role of superoxide radical, hydroxyl radical, and peroxynitrite | |
| Styrud et al. | Correlations between maternal metabolism and deranged development in the offspring of normal and diabetic rats | |
| Zhao et al. | Folic acid promotes wound healing in diabetic mice by suppression of oxidative stress | |
| EP3297625B1 (en) | Compound for the prophylaxis or treatment of diabetic nephropathy or diabetic kidney disease | |
| Martínez Sánchez et al. | Protective effect of Mangifera indica L. extract (Vimang®) on the injury associated with hepatic ischaemia reperfusion | |
| Marczin et al. | Effects of oxidant stress on endothelium-derived relaxing factor-induced and nitrovasodilator-induced cGMP accumulation in vascular cells in culture. | |
| ESSNER | Observations on hepatic and renal peroxisomes (microbodies) in the developing chick | |
| Pustygina et al. | Indices of oxidative stress in the brain of newborn rats subjected to prenatal hyperhomocysteinemia | |
| Özdemir-Kumral et al. | Potential effect of 1, 25 Dihydroxyvitamin D3 on thioacetamide-induced hepatotoxicity in rats | |
| RU2762139C1 (ru) | Средство для лечения уратного нефролитиаза | |
| Santos-Alves et al. | Physical exercise positively modulates DOX-induced hepatic oxidative stress, mitochondrial dysfunction and quality control signaling | |
| Tabouy et al. | Ursodeoxycholate protects against ethanol-induced liver mitochondrial injury | |
| Burcham et al. | Extensive protein carbonylation precedes acrolein‐mediated cell death in mouse hepatocytes | |
| Ernst et al. | Ultrastructural demonstration of mercury in Sertoli and Leydig cells of the rat following methyl mercuric chloride or mercuric chloride treatment | |
| RU2679120C1 (ru) | Фармакологическое средство для лечения мочекаменной болезни | |
| Connolly et al. | Pathogenesis of Pichinde virus infection in strain 13 guinea pigs: an immunocytochemical, virologic, and clinical chemistry study | |
| Keeling et al. | The enhancement of paraquat toxicity in rats by 85% oxygen: lethality and cell-specific lung damage | |
| RU2760949C1 (ru) | Фармакологическое средство для лечения уратной нефропатии | |
| Naghibi et al. | The effect of 2, 3-dihydroxybenzoic acid and tempol in prevention of vancomycin-induced nephrotoxicity in rats | |
| Kumar et al. | Antioxidant enzymes in rheumatoid arthritis |