RU2761482C1 - Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина - Google Patents
Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2761482C1 RU2761482C1 RU2021110357A RU2021110357A RU2761482C1 RU 2761482 C1 RU2761482 C1 RU 2761482C1 RU 2021110357 A RU2021110357 A RU 2021110357A RU 2021110357 A RU2021110357 A RU 2021110357A RU 2761482 C1 RU2761482 C1 RU 2761482C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- olivomycin
- strain
- antibiotic
- olivaceiscleroticus
- producer
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ИНА 813, обладающий повышенной антибиотической активностью образования оливомицина, депонирован в коллекции культур БРЦ ВКПМ НИЦ «Курчатовский институт» - ГосНИИгенетика под регистрационным номером ВКПМ Ас-1976. Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 может быть использован при производстве антибиотика оливомицина. Изобретение позволяет повысить выход антибиотика оливомицина. 2 табл., 1 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине и биотехнологической промышленности и касается нового штамма актиномицета, образующего противоопухолевый антибиотик оливомицин.
Структура оливомицина
Антибиотик оливомицин по химическому строению является природным соединением группы ауреоловой кислоты (митрамицин, хромомицин) и одним из эффективных препаратов при лечении некоторых форм злокачественных новообразований. Оливомицин востребован как исходное сырье для получения полусинтетических дериватов (1, 2) и композиций фармацевтических препаратов (3) с улучшенными химиотерапевтическими свойствами, а также в качестве биохимического реагента в исследованиях по молекулярной биологии.
Предшествующий уровень техники
Известен штамм Streptomyces olivoreticuli № ИНА 7386 - продуцент антибиотика оливомицина (4), принятый в качестве прототипа. Недостатком данного штамма является невысокая антибиотическая активность - 700 мкг в 1 мл ферментационной жидкости.
Раскрытие изобретения
Сущность изобретения состоит в том, что получен новый штамм - продуцент антибиотика оливомицина путем селекционного преобразования известного штамма в результате последовательного трехступенчатого воздействия физических (УФ-лучи) и химических (N-нитрозосоединения) мутагенов на споры известного штамма № ИНА 7386 и отбора активного мутантного штамма № ИНА 813 среди мутагенизированной популяции колоний актиномицета, выросших на фоне устойчивости к рифамицину SV (10 мкг/мл) и оливомицину (1500 мкг/мл).
Полученный новый штамм Streptomyces olivaceiscleroticus № ИНА 813 принят на национальное патентное депонирование в коллекции культур БРЦ ВКПМ НИЦ «Курчатовский институт» - ГосНИИ генетика под номером: штамм ВКПМ Ас-1976. Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 обладает повышенной антибиотической активностью образования оливомицина (850 мкг в 1 мл ферментационной жидкости) и характеризуется следующими таксономическими, культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
Таксономические, культурально-морфологические и физиологические признаки штамма Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976.
Таксономические признаки
Длительность выращивания для изучения таксономических признаков (7-21) суток при температуре 28°С.Для засева диагностических сред использовался споровый посевной материал десятидневной культуры штамма, выращенной на глюкозо-аспарагиновом агаре или среде Линденбайна. Цвет определен по таблице Бондарцева и Праузера. Данные приведены в Таблице №1.
Штамм характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими свойствами.
Морфологические признаки
Гифы воздушного мицелия прямые, спороносцы прямые, во вторичных мутовках споры овальные или продолговатые, поверхность спор гладкая.
Физиолого-биохимические свойства
Аэроб. Растет при (24-37)°С, оптимум роста 28°С и диапазоне значений рН (5,0-10,0) с оптимум роста при рН 7,0; желатину разжижает, молоко пептонизирует. Сахарозу не инвертирует, крахмал гидролизует слабо. На клетчатке не растет. Не восстанавливает нитраты до нитритов. Меланоидные пигменты не образует при росте на провокационной среде Треснера с лимоннокислым железом.
Использование источников углерода при росте на средах с неорганическим источником азота (на минеральной среде Придгейма-Готлиба ISP-9 с 1% ным источником углерода) хорошо утилизирует глюкозу и инозит; умеренно -фруктозу, рамнозу, раффинозу, маннит; слабо - арабинозу, сахарозу; не использует ксилозу и целлюлозу.
Антагонистические свойства
Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 при испытании методом штриха на органическом агаре №2 Гаузе штамм обладает широким спектром антибиотического действия, подавляя рост грамположительных (Bacillus subtilis, Bacillus mycoides, Micrococcus luteus, Stafilococcus aureus) и грамотрицательных (Escherichia coli, Commomonas terrigena, Providencia stuarti) бактерий, а также дрожжеподобных грибков Candida albicans. Штамм фагоустойчив. Фаг в культуре отсутствует.
Хранение штамма
Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 хранится в виде спор на стерильной почве с кварцевым песком или на зернах пшена, а также в виде зрелой культуры на агаровых средах под вазелиновым маслом.
Определение антибиотической активности в ферментационной жидкости
Антибиотическая активность штамма Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 при глубинном культивировании определяется луночным методом диффузии в агар (среда №2 Гаузе с органическим источником азота) с использованием в качестве тест-микроорганизма Bacillus subtilis АТСС 6633 и сравнением диаметров зон подавления бактериального роста образцами ферментационной жидкости с калибровочной кривой стандарта субстанции оливомицина (25-100 мкг/мл). Биологическая активность получаемой биосинтезом и химически очищенной субстанции оливомицина определяется трехдозным вариантом метода (ГФХ, стр. 949).
Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 поясняется следующим примером.
Пример. Для получения спорового материала культуру Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 выращивают в течение 7-10 суток при 37°С на агаровой среде №2 Гаузе. Споровым материалом с мицелием (агаровый блочек 1 см2 плотно выросшей культуры) засевают жидкую питательную среду (100 мл в колбах Эрленмейера объемом 0,75 л) следующего состава, %:
| триптон | 0,3 |
| глюкоза | 1,0 |
| пептон | 0,5 |
| NaCl | 0,5 |
| вода водопроводная, рН до стерилизации | 7,0-7,2. |
Стерилизация в течение 30 мин при давлении 0,6 атм. и температуре 120°С.
Культивирование посевного материала в течение 24-48 часов при 28°С на круговой качалке со скоростью вращения 220-240 об/мин. Выросшим посевным мицелием засевают ферментационную питательную среду (100 мл в колбах Эрленмейера объемом 0,75 л) следующего состава, %:
| соевая мука | 3,0 |
| глюкоза | 3,0 |
| NaCl | 0,3 |
| СаСО3 | 0,3 |
| вода водопроводная, рН до стерилизации | 7,0-7,2. |
Стерилизация в течение 30 мин при давлении 0,6 атм. и температуре 120°С.
Количество посевного материала для инокуляции - (5-7) %. Длительность ферментации 120-144 час.
Ферментационное культивирование проводят при 28°С на фуговой качалке со скоростью вращения 220-240 об/мин. Антибиотик оливомицин накапливается в культуральной жидкости продуцента. Антибиотическая активность штамма Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976, определенная биологическим методом диффузии а агар, составляет к окончанию ферментации (144 час) 850 мкг/мл. Выделение антибиотика из нативного раствора проводят экстракционным способом (5).
Таким образом, получен новый мутантный штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976, отличающийся от известного по способности антибиотикообразования, которая более чем на 20% превосходит активность продуцента - прототипа (Таблица 2).
Использование нового штамма Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ас-1976 позволит увеличить выход целевого продукта (субстанции оливомицина) при его лабораторном и промышленном биотехнологическом производстве для нужд медицины.
Источники информации
1. А.Н. Тевяшова, Е.Н. Бычкова, Л.Г. Деженкова, А.Е. Щекотихин. Разработка лекарственной формы нового противоопухолевого полусинтетического антибиотика оливомицина. Химико-фармацевический журнал, 2018, 52, №11, 42-47.
2. И.Д. Трещалин, М.И. Трещалин, А.Н. Тевяшова, Э.Р. Переверзева. Противоопухолевая активность и токсические свойства лекарственной формы оливамида - нового полусинтетического производного оливомицина А. Химико-фармацевтический журнал, 2018, 52, №11, 27-31.
3. Патент RU 2662087 от 07.2018 г.
4. Авторское свидетельство SU 1056637 от 07.1983 г.
5. Авторское свидетельство SU 1374768 от 10.1987 г.
Claims (1)
- Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus ВКПМ Ac-1976 - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110357A RU2761482C1 (ru) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110357A RU2761482C1 (ru) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2761482C1 true RU2761482C1 (ru) | 2021-12-08 |
Family
ID=79174514
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021110357A RU2761482C1 (ru) | 2021-04-14 | 2021-04-14 | Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2761482C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2817695C1 (ru) * | 2023-12-05 | 2024-04-18 | Автономная некоммерческая образовательная организация высшего образования "Научно-технологический университет "Сириус" | Штамм Streptomyces sp. YVZ014 - продуцент антибиотика лизолипина X |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2013448C1 (ru) * | 1992-03-23 | 1994-05-30 | Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов | Штамм streptomyces bambergiensis - продуцент моеномицина а |
| RU2464319C1 (ru) * | 2011-07-21 | 2012-10-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе РАМН (НИИНА РАМН) | Штамм streptomyces coeruleorubidus - продуцент антибиотика даунорубицина |
| RU2689699C1 (ru) * | 2018-06-05 | 2019-05-28 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | Штамм Amycolatopsis umgeniensis - продуцент антибиотика эремомицина |
-
2021
- 2021-04-14 RU RU2021110357A patent/RU2761482C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2013448C1 (ru) * | 1992-03-23 | 1994-05-30 | Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов | Штамм streptomyces bambergiensis - продуцент моеномицина а |
| RU2464319C1 (ru) * | 2011-07-21 | 2012-10-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе РАМН (НИИНА РАМН) | Штамм streptomyces coeruleorubidus - продуцент антибиотика даунорубицина |
| RU2689699C1 (ru) * | 2018-06-05 | 2019-05-28 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" | Штамм Amycolatopsis umgeniensis - продуцент антибиотика эремомицина |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БИБИКОВА М.В. и др., Штамм Streptomyces sp. 17- продуцент олигомицина SC-II (характеристика продуцента, биологические свойства антибиотика), Антибиотики и химиотерапия, 2012,57, 7-8, с. 3-6. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2817695C1 (ru) * | 2023-12-05 | 2024-04-18 | Автономная некоммерческая образовательная организация высшего образования "Научно-технологический университет "Сириус" | Штамм Streptomyces sp. YVZ014 - продуцент антибиотика лизолипина X |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Maiese et al. | Calicheamicins, a novel family of antitumor antibiotics: taxonomy, fermentation and biological properties | |
| Onaka et al. | Goadsporin, a chemical substance which promotes secondary metabolism and morphogenesis in Streptomycetes I. purification and characterization | |
| Furumai et al. | Arisostatins A and B, new members of tetrocarcin class of antibiotics from Micromonospora sp. TP-A0316 I. Taxonomy, fermentation, isolation and biological properties | |
| HU193973B (en) | Process for preparing 4'-dechloro-rebeccamicin | |
| EP3085772B1 (en) | New streptomyces filamentosus variant and method for producing daptomycin using same | |
| RU2761482C1 (ru) | Штамм Streptomyces olivaceiscleroticus - продуцент противоопухолевого антибиотика оливомицина | |
| Singh et al. | Purification and chemical characterization of antimicrobial compounds from a new soil isolate Streptomyces rimosus MTCC 10792 | |
| RU2710733C1 (ru) | Штамм Streptomyces tendae - продуцент противобактериального антибиотика ИНА 5812 | |
| Lam et al. | Pyrrolosporin A, a new antitumor antibiotic from Micromonospora sp. C39217-R109-7 I. Taxonomy of producing organism, fermentation and biological activity | |
| CN111172049A (zh) | 一株毒黄素高产菌株及其应用 | |
| US6395711B1 (en) | Macrolides with antitumor activity | |
| RU2352631C2 (ru) | ШТАММ Amycolatopsis orientalis ВКПМ-Ас-807-ПРОДУЦЕНТ ЭРЕМОМИЦИНА | |
| SU882414A3 (ru) | Способ получени антибиотика с-15003 р-4 | |
| RU2689699C1 (ru) | Штамм Amycolatopsis umgeniensis - продуцент антибиотика эремомицина | |
| RU2737140C1 (ru) | Штамм бактерий streptomyces resistomycificus recb-31b для получения биопрепарата для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности | |
| RU2633511C1 (ru) | Штамм Amycolatopsis orientalis - продуцент антибиотика диметилванкомицина и способ получения антибиотика | |
| JP3523290B2 (ja) | 化合物３１６６８ｐおよび３１６６８ｕ、それらの製造方法およびそれらの使用 | |
| US5171836A (en) | Antibiotics plusbacin | |
| RU2795449C1 (ru) | Новые депсипептидные соединения, обладающие антибактериальной активностью | |
| RU2813975C1 (ru) | Штамм Streptomyces sp. YVZ013 - продуцент антибиотика поликетомицина | |
| Ezaki et al. | BN-183B, A NEW ANTITUMOR ANTIBIOTIC PRODUCED BY PSEUDOMONAS TAXONOMY, ISOLATION, PHYSICO-CHEMICAL AND BIOLOGICAL PROPERTIES | |
| RU2788348C1 (ru) | Новый штамм - продуцент ванкомицина amycolatopsis japonica | |
| RU2724537C1 (ru) | Штамм Amycolatopsis rifamycinica - продуцент антибиотика тетраценомицина Х | |
| RU2433169C1 (ru) | ШТАММ Streptoalloteichus cremeus subsp. tobramycini ВКПМ Ас-1083 - ПРОДУЦЕНТ ТОБРАМИЦИНА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТОБРАМИЦИНА | |
| RU2464319C1 (ru) | Штамм streptomyces coeruleorubidus - продуцент антибиотика даунорубицина |