RU2741382C1 - Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека - Google Patents

Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека Download PDF

Info

Publication number
RU2741382C1
RU2741382C1 RU2019140929A RU2019140929A RU2741382C1 RU 2741382 C1 RU2741382 C1 RU 2741382C1 RU 2019140929 A RU2019140929 A RU 2019140929A RU 2019140929 A RU2019140929 A RU 2019140929A RU 2741382 C1 RU2741382 C1 RU 2741382C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
idiotypic
pyrene
benzo
antibodies
human
Prior art date
Application number
RU2019140929A
Other languages
English (en)
Inventor
Артем Евгеньевич Студенников
Валентин Анатольевич Устинов
Иван Сергеевич Гребенщиков
Андрей Николаевич Глушков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр угля и углехимии Сибирского отделения Российской академии наук", Институт экологии человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр угля и углехимии Сибирского отделения Российской академии наук", Институт экологии человека filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр угля и углехимии Сибирского отделения Российской академии наук", Институт экологии человека
Priority to RU2019140929A priority Critical patent/RU2741382C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2741382C1 publication Critical patent/RU2741382C1/ru

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики. Раскрыт способ определения идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека, включающий забор и подготовку донорской крови, иммобилизацию человеческого рекомбинантного идиотипического Т72 и антиидиотипического А4 антител к бензо[а]пирену на иммунологический планшет, инкубацию с сывороткой крови человека, инкубацию с антителами к IgG человека, меченными пероксидазой хрена и анализ с помощью раствора тетраметилбензидина. Изобретение обеспечивает одновременное определение идиотипических и антиидиотипичеких антител против бензо[а]пирена в одном образце биологической жидкости человека, снижение канцерогенной опасности для здоровья исследователя и изготовителя тест-систем за счет исключения из тест-систем конъюгатов химических канцерогенов, а также высокие чувствительность и воспроизводимость анализа. 2 табл.

Description

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики и может найти применение для определения индивидуальных рисков возникновения заболеваний, связанных с воздействием химических канцерогенов окружающей среды: злокачественных опухолей, врожденных пороков развития, аутоиммунных и других.
Известно достаточно много аналогичных решений, но все они, на наш взгляд, имеют те или иные недостатки. Все найденые нами аналоги разбираются ниже. В литературе и базах данных не описан способ определения идиотипичеких и антиидиотипичеких антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека с использованием рекомбинантных человеческих идиотипичеких и антиидиотипичеких антител методом иммуноферментного анализа, предлагаемый нами.
Одним из известных подходов к решению определения индивидуальных онкорисков является анализ антител, специфических к химическим канцерогенам, в частности бензо[а]пирену, в биологических жидкостях человека. Ранее, методом иммуноферментного анализа были обнаружены ассоциации антител к химическим канцерогенам из окружающей среды с онкологическими заболеваниями. Поэтому предлагаемый нами метод определения идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологичеких жидкостях человека является измерением изменений иммунной системы человека в ответ на воздействие химических канцерогенов из окружающей среды.
Аналогами заявляемого изобретения являются способы определения антител в биологических жидкостях человека (например, патенты РФ: G01N 33/531, G01N 33/68, G01N 33/577, G01N 33/53, CN 108196061 (А), CN 108226460 (A), CN 107677810 (А); другие патенты: US 8383350 (В1), WO 2005108989 (А2), US 5219730 (A), US 4910131 (A), WO 9901477 (А1), WO 9006515 (A1), CN 105785030 (A), CN 105203750 (A), UA 78419 (U)), основанных на использовании твердофазного иммуноферментного анализа. Традиционный твердофазный иммуноферментный анализ включает связывание антигена с поверхностью микропланшета с последующим помещением биологической жидкости, содержащей антитела, на микропланшет, инкубирование, проведение цветной реакции и спектрофотометрическую оценку показателей цветной реакции.
Признаками данных технических решений, совпадающих с существенными признаками заявляемого изобретения являются.
1) Использование иммуноферментного анализа.
Недостатками этих предложенных методов:
1) Не было предложено измерять идиотипические и антиидиотипические антитела против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека, используя человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Другим аналогом заявляемого изобретения является метод, запатентованный ранее (патент RU 21244731 С1). Согласно этому методу предлагается использовать твердофазный иммуноферментный анализ, где конъюгат фторметилбензантрила уксусной кислоты с человеческим сывороточным альбумином адсорбирован на стенках лунок иммунологического планшета. Затем инкубируют исследуемую биологическую жидкость с адсорбированным антигеном. Проявляют связавшиеся с антигеном антитела с помощью анти-антител, меченых ферментом.
Недостатками известного способа являются:
1) Использование конъюгата бензо[а]пирена для определения идиотипических антител против бензо[а]пирена, что может привести неточному определению идиотипических антител в биологической жидкости человека;
2) Использование конъюгата фторметилбензантрила уксусной кислоты с человеческим сывороточным альбумином в качестве антигена может сопровождаться в ряде случаев высоким неспецифическим связыванием антител исследуемой биологической жидкости человека не с антигеном, а с белком-носителем, что существенно ограничивает возможность метода.
Используя иммуноферментный анализ в патентах: US 8383350 (В1), WO 2005108989 (А2), US 5219730 (A), US 4910131 (A), WO 9901477 (А1), WO 9006515 (А1) было предложено использовать антиидиотипичекие антитела для детекции идиотипических антител в биологических жидкостях человека.
Признаками данных технических решений, совпадающих с существенными признаками заявляемого изобретения являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Использование антиидиотипичеких антител для детекции идиотипических антител в биологических жидкостях человека.
Недостатками этих предложенных методов:
1) Не было предложено измерять идиотипические и антиидиотипические антитела против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека, используя человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Другим аналогом изобретения является анализ антител к бензо[а]пирену и его метаболитам в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа и иммобилизованных на иммунологичекий планшет конъюгатов бензо[а]пирена и его производных с белками: Harris et al, 1985; Haugen et al, 1986; Newman et al, 1988; Ovrebo et al, 1995; Petruzzelli et al, 1998; Galati et al, 2001; Глушков и др, 2000; Глушков и др, 2002; Глушков и др, 2004; De Buck et al, 2005; Глушков и др, 2006; Глушков и др, 2008; Pouns et al, 2009; Глушков и др, 2010; Глушков и др, 2011; Глушков и др, 2012; Глушков и др, 2013; Pauk et al, 2013; Глушков и др, 2014; Borska et al, 2014; Глушков и др, 2016, 2016; Glushkov et al, 2016; Глушков и др, 2017; Borsky et al, 2017; Глушков и др, 2018; Глушков и др, 2018).
Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Измерение уровней идиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека.
Однако, в этой группе работ:
1) Идиотипические антитела к бензо[а]пирену определялись с помощью конъюгатов бензо[а]пирена и его метаболитов с ДНК или белком, иммобилизованных на иммунологический планшет.
2) Наличие бензо[а]пирена и его производных в составе аналитических тест-систем представляет собой угрозу здоровью для пользователей и исследователей.
3) В данной группе работ не определялся уровень антиидиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
Следующим аналогом изобретения является анализ идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа, конъюгатов бензо[а]пирена с белком и мышиных идиотипических одноцепочечных антител против бензо[а]пирена: Ustinov et al, 2013; Grebenshchikov et al., 2019. В этом случае иммобилизованный на иммунологичекий планшет конъюгат бензо[а]пирена с белком связывает идиотипические антитела, а мышиное идиотипическое одноцепочечное антитело против бензо[а]пирена - антиидиотипические антитела к бензо[а]пирену из биологических жидкостей человека. Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Определение идиотипических и антиидиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
Недостатками предложенного метода являются:
1) Уровень идиотипических антител в биологических жидкостях человека определялся с помощью конъюгата бензо[а]пирена с белком.
2) Уровень антиидиотипических антител в биологических жидкостях человека определялся с помощью мышиных одноцепочечных антител против бензо[а]пирена.
3) Этот метод гетерогенен, т.к. идиотипические антитела определяются с помощью конъюгата бензо[а]пирена с белком, а антиидиотипические с помощью мышиных одноцепочечных антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
4) Не использовались человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Поэтому, такая гетерогенная система определения антител в сыворотках крови человека не дает точной оценки специфической иммунной реакции организма на химические канцерогены.
Другим аналогом изобретения является анализ идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа, конъюгатов бензо[а]пирена с белком и мышиных моноклональных идиотипических одноцепочечных антител против бензо[а]пирена: Chagnaud et al., 1991; Chagnaud et al., 1992; Chagnaud et al., 1995. Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Определение идиотипических и антиидиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
Недостатками предложенного метода являются:
1) Уровень идиотипических антител в биологических жидкостях человека определялся с помощью конъюгата бензо[а]пирена с белком.
2) Уровень антиидиотипических антител в биологических жидкостях человека определялся с помощью мышиных моноклональных антител против бензо[а]пирена.
3) Данный метод также гетерогенен, как и в предыдущем примере.
4) Не использовались человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Следующим аналогом данного изобретения является анализ антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа и крысиных моноклональных идиотипических антител против бензо[а]пирена: Herlyn et al., 1991; Herlyn et al., 1994. Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Определение антиидиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
Недостатками предложенного метода являются:
1) В данной работе не определялся уровень идиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
2) Для определения применялись крысиные моноклональные идиотипических антител против бензо[а]пирена.
3) Не использовались человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Следующим аналогом данного изобретения является анализ антиидиотипических антител к раково-эмбриональному антигену при раке кишечника в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа и F(ab')2 мышиных моноклональных антител: Frodin et al., 1991. Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Определение антиидиотипических антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека.
Недостатками предложенного метода являются:
1) Не использовались идиотипические и антиидиотипические антитела против бензо[а]пирена.
2) Не использовались человеческие одноцепочечые антитела.
3) В данной работе не определялся уровень идиотипических антител в биологических жидкостях человека.
4) Для определения антиидиотипических антител против бензо[а]пирена использовались F(ab')2 мышиные моноклональные антитела.
5) Не использовались человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Следующим аналогом данного изобретения является анализ идиотипических и антиидиотипических антител к маркеру рака кишечника СО17-1A/GA733/Ep-CAM в биологических жидкостях человека с помощью иммуноферментного анализа, мышиных идиотипических моноклональных антител против CO17-1A/GA733/Ep-CAM и поликлональных антиидиотипических против CO17-1A/GA733/Ep-CAM из козы: Herlyn et al., 1986; Herlyn et al., 1994; Gruber et al., 2000. Признаками, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются:
1) Использование иммуноферментного анализа;
2) Определение идиотипических и антиидиотипических антител в биологических жидкостях человека.
Недостатками предложенного метода являются:
1) Не использовались идиотипические и антиидиотипические антитела против бензо[а]пирена.
2) Не использовались человеческие одноцепочечые антитела.
3) Для определения антиидиотипических антител в биологических жидкостях человека использовались мышиные идиотипические моноклональные антитела.
4) Для определения идиотипических антител в биологических жидкостях человека использовались поликлональные антитела из козы.
5) Не использовались человеческие одноцепочечные антитела против бензо[а]пирена.
Общими недостатками перечисленных последних примеров определения антиидиотипических антител в биологических жидкостях человека является использование в качестве адсорбированного антитела идиотипических антител, полученных от животных после активной иммунизации против бензо[а]пирена или раковых маркеров. В предлагаемом нами методе используются человеческие нативные антитела не иммунизированных людей.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является одновременное определение идиотипических и антиидиотипичеких антител против бензо[а]пирена в одном образце биологической жидкости человека; предлагаемый метод отличается от ранее предложенных методов по воспроизводимости и чувствительности; снижение канцерогенной опасности для здоровья исследователя и изготовителя тест-систем за счет исключения из тест-систем конъюгатов химических канцерогенов.
Предлагается способ определения антител к бензо[а]пирену, включающий забор и подготовку донорской крови, иммобилизацию человеческого рекомбинантного идиотипического Т72 и антиидиотипического А4 антител к бензо[а]пирену на иммунологический планшет, добавление сыворотки крови человека и детекцию связавшихся из сыворотки крови антител к бензо[а]пирену с помощью антител против IgG человека, меченных пероксидазой хрена и субтрата пероксидазы - тетраметилбензидин.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом:
1. Для осуществления способа использовались сыворотки крови доноров. Все исследования были проведены с согласия доноров крови.
2. Антитела по изобретению известны и подробно описаны в Ustinov et al., 2015 и Studennikov et al., 2017. Использовались: человеческое рекомбинантное идиотипическое антитело против бензо[а]пирена - Т72, и человеческое рекомбинантное антиидиотипическое антитело против бензо[а]пирена - А4. Все антитела были экспрессированы и выделены из E. coli.
3. Лунки иммунологического планшета сенсибилизировали 50 мкл буферным раствором PBS с одноцепочечными антителами А4 20 нг/мкл и в другие лунки иммунологического планшета - Т72 20 нг/мкл инкубированием в течение часа при 37°С с покачиванием.
4. Затем во все лунки иммунологического планшета вносили 250 мкл буферного раствора PBS с 1% БСА и 0,05% твин-20, инкубировали час при 37°С с покачиванием.
5. Промывали 3 раза по 250 мкл буферным раствором PBS с 0,05% твин-20.
6. Затем вносили во все лунки иммунологического планшета по 50 мкл раствора коммерческого препарата антител против IgG человека, меченных пероксидазой хрена, с разведением 1:5000 и инкубировали час при 37°С с покачиванием.
7. Все лунки иммунологического планшета промывали 3 раза по 250 мкл буферным раствором PBS с 0,05% твин-20.
8. Регистрацию сигнала проводили с помощью коммерческого раствора тетраметилбензидин (по 50 мкл в каждую лунку иммунологического планшета) при длине волны 450 нм.
Изобретение предлагается использовать для осуществления метода иммуноанализа идиотипических и антиидиотипических антител антител против бензо[а]пирена в биологических жидкостях человека, в котором в качестве антигенов применяются - человеческие рекомбинантные идиотипические и антиидиотипические антитела к бензо[а]пирену, иммобилизованные на иммунологический планшет.
В то же время, нами получены рекомбинантные антитела человека, специфичные к наиболее распространенным канцерогенам окружающей среды - бензо[а]пирену, которые можно использовать в качестве стандарта, а также соответствующие антиидиотипические рекомбинантные антитела человека к бензо[а]пирену, которые можно использовать в качестве антигена при разработке безопасного для здоровья метода иммуноанализа антител против химических канцерогенов в биологических жидкостях человека.
Таким образом, значимость и причинно-следственная связь с заявленным техническим результатом разработки предлагаемого способа определения антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека обусловлена следующим:
- доказанным канцерогенным эффектом бензо[а]пирена из окружающей среды;
- возможностью выявления неизвестных ранее иммунологических механизмов адаптации человека к бензо[а]пирену и особенностей их нарушения при онкологических заболеваниях;
- практической важностью создания информативного и безопасного для здоровья метода оценки индивидуальных онкологических рисков для последующей профилактики рака.
Причинно-следственная связь с заявленным техническим результатом достигается за счет использования в качестве антигена не конъюгаты бензо[а]пирена с белком и антитела иммунизированных животных, а гомогенной системы нативных человеческих идиотипических и антиидиотипических антител.
Предлагаемый способ актуален, осуществим и позволяет достигать заявленный технический результат, отличается от известных аналогов и имеет явные преимущества перед ними.
Сущность предлагаемого изобретения показана в табл. 1 и табл. 2:
где в табл. 1 показаны средние значения уровней идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в сыворотках крови здоровых доноров и больных раком легкого;
в табл. 2 - воспроизводимость и чувствительность предлагаемого метода в сравнении с ранее предложенным методом определения уровней идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в сыворотках крови человека.
Табл. 1. Значения средних арифметических значений уровней для идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в сыворотках крови здоровых доноров и больных раком легкого. В последнем столбце указаны данные Т-критерия Стьюдента между группами больных и здоровых людей по идиотипическим и антиидиотипическим антителам к бензо[а]пирену. Уровни антител рассчитывали по формуле: (оптическая плотность антитела - оптическая плотность фона) / оптическая плотность фона.
Figure 00000001
Табл. 2. Воспроизводимость и чувствительность предлагаемого метода в сравнении с ранее предложенным методом. Воспроизводимость определяли несколькими измерениями идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в сыворотках крови. Чувствительность предлагаемого метода расчитывали по калибровочной кривой, построенной по результатам иммуноферментного анализа прямого связывания очищенных человеческих рекомбинантных идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену.
Figure 00000002

Claims (1)

  1. Способ определения идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека, включающий забор и подготовку донорской крови, иммобилизацию человеческого рекомбинантного идиотипического Т72 и антиидиотипического А4 антител к бензо[а]пирену на иммунологический планшет, инкубацию с сывороткой крови человека, инкубацию с антителами к IgG человека, меченными пероксидазой хрена, и анализ связавшихся антител с помощью раствора тетраметилбензидина.
RU2019140929A 2019-12-09 2019-12-09 Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека RU2741382C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019140929A RU2741382C1 (ru) 2019-12-09 2019-12-09 Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019140929A RU2741382C1 (ru) 2019-12-09 2019-12-09 Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2741382C1 true RU2741382C1 (ru) 2021-01-25

Family

ID=74213405

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019140929A RU2741382C1 (ru) 2019-12-09 2019-12-09 Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2741382C1 (ru)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2357975C1 (ru) * 2007-12-03 2009-06-10 Институт экологии человека Сибирского отделения Российской академии наук (ИЭЧ СО РАН) ПЕПТИД-ИММУНОМИМЕТИК ХИМИЧЕСКИХ КАНЦЕРОГЕНОВ, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ СПЕЦИФИЧЕСКИ ВЗАИМОДЕЙСТВОВАТЬ С АНТИТЕЛАМИ ПРОТИВ БЕНЗО[α]ПИРЕНА И БЕНЗ[α]АНТРАЦЕНА

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2357975C1 (ru) * 2007-12-03 2009-06-10 Институт экологии человека Сибирского отделения Российской академии наук (ИЭЧ СО РАН) ПЕПТИД-ИММУНОМИМЕТИК ХИМИЧЕСКИХ КАНЦЕРОГЕНОВ, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ СПЕЦИФИЧЕСКИ ВЗАИМОДЕЙСТВОВАТЬ С АНТИТЕЛАМИ ПРОТИВ БЕНЗО[α]ПИРЕНА И БЕНЗ[α]АНТРАЦЕНА

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STUDENNIKOV А.Е. et al. New human single chain anti-idiotypic antibody against benzo[a]pyrene // Central European Journal of Immunology, 2017, V.42, pp.123-130. *
USTINOV V.A. et al. ANTIBODIES AGAINST BENZO[A]PYRENE IN IMMUNIZED MOUSE AND IN LUNG CANCER PATIENTS // 2013, V.35, pp.207-210. *
USTINOV V.A. et al. ANTIBODIES AGAINST BENZO[A]PYRENE IN IMMUNIZED MOUSE AND IN LUNG CANCER PATIENTS // 2013, V.35, pp.207-210. STUDENNIKOV А.Е. et al. New human single chain anti-idiotypic antibody against benzo[a]pyrene // Central European Journal of Immunology, 2017, V.42, pp.123-130. USTINOV V.A. et al. Generation and Characterization of Human Single-Chain Antibodies Against Polycyclic Aromatic Hydrocarbons // Immunological Investigations, 2015, V.44, pp.536-552. *
USTINOV V.A. et al. Generation and Characterization of Human Single-Chain Antibodies Against Polycyclic Aromatic Hydrocarbons // Immunological Investigations, 2015, V.44, pp.536-552. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Majdoubi et al. A majority of uninfected adults show preexisting antibody reactivity against SARS-CoV-2
Voiler Heterogeneous enzyme-immunoassays and their applications
Hayrapetyan et al. Enzyme-linked immunosorbent assay: types and applications
US20080139406A1 (en) Allergen-Microarray Assay
US20120295814A1 (en) CA-125 Immune Complexes as Biomarkers of Ovarian Cancer
CN112679605B (zh) 针对新型冠状病毒核衣壳蛋白的抗体或其抗原结合片段及其应用
Partridge et al. Emerging technologies and generic assays for the detection of anti-drug antibodies
WO2023284686A1 (zh) 一种结合抗体的生物传感检测方法及检测系统
Heyduk et al. Peptide ligand-based ELISA reagents for antibody detection
RU2741382C1 (ru) Способ иммуноферментного анализа идиотипических и антиидиотипических антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека
KR101794403B1 (ko) 쇼그렌증후군 특이적 항체반응 검사를 이용한 쇼그렌증후군 진단방법
Patzl et al. Determination of autoantibodies to thyroglobulin, thyroxine and triiodothyronine in canine serum
US11703507B2 (en) Immunoassay for SARS-CoV-2 antibodies
US20230055382A1 (en) Detecting gut barrier dysfunction and/or cirrhosis
AU2009247267B2 (en) Method for quantification of antigen-specific canine or human IgE
RU2702900C1 (ru) Способ количественного определения антител к бензо[а]пирену в биологических жидкостях человека
CN103454418B (zh) 一种大片形吸虫免疫层析快速检测试纸条及其制备方法
RU2297634C2 (ru) Диагностический набор реагентов "нарко-ифа-пептидный тест" для выявления наркоманий
RU2818115C1 (ru) Способ определения индекса авидности аутоантител в сыворотке крови человека на гидрогелевых биочипах
JP2005249592A (ja) 遊離ヒトイムノグロブリン軽鎖の測定法及びキット
Kaur et al. Pull Down Assay-Based Protein Analysis
KR102094727B1 (ko) 인플루엔자 바이러스의 헤마글루티닌 측정 방법
CN109997043B (zh) 护理点测定法
Jordan Enzyme-linked immunosorbent assay
US20220034904A1 (en) IMMUNOASSAY FOR SARS-CoV-2 ANTIBODIES