RU2732622C1 - Bacillus cereus strain - serotonin producer - Google Patents
Bacillus cereus strain - serotonin producer Download PDFInfo
- Publication number
- RU2732622C1 RU2732622C1 RU2019132571A RU2019132571A RU2732622C1 RU 2732622 C1 RU2732622 C1 RU 2732622C1 RU 2019132571 A RU2019132571 A RU 2019132571A RU 2019132571 A RU2019132571 A RU 2019132571A RU 2732622 C1 RU2732622 C1 RU 2732622C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- serotonin
- bacillus cereus
- strain
- producer
- cereus strain
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
- A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
- A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/085—Bacillus cereus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области микробиологии. Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 №-12401 может быть использован для получения серотонина.The invention relates to the field of microbiology. Strain Bacillus cereus 9-08-CH9 No.-12401 can be used to obtain serotonin.
Известно, что продукция серотонина достаточно распространена в микробном мире, включая представителей симбиотической и паразитической микробиоты животных и человека. Серотонин способны продуцировать Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus и определено высокое содержание серотонина в культурах бактерий Morganella morganii, Klebsiella pneumonia и Hafnia alvei (Олескин А.В., Эль-Регистан Г.И., Шендеров Б.А. Межмикробные химические взаимодействия и диалог микробиота-хозяин: роль нейромедиаторов // Микробиология, 2016, том 85, №1, с. 3-25).It is known that the production of serotonin is quite widespread in the microbial world, including representatives of the symbiotic and parasitic microbiota of animals and humans. Serotonin is capable of producing Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and a high serotonin content in the cultures of bacteria Morganella morganii, Klebsiella pneumonia and Hafnia alvei has been determined (Oleskin A.V., El-Registan G.I., Shenderov B.A. Intermicrobial chemical interactions and dialogue of microbiota -master: the role of neurotransmitters // Microbiology, 2016, volume 85, no. 1, pp. 3-25).
Технический результат, на достижение которого направлено изобретение, заключается в получении средства для продуцирования серотонинаThe technical result to which the invention is directed is to obtain a means for the production of serotonin
Указанный технический результат достигается тем, что в качестве продуцента серотонина используется выделенный из образцов многолетнемерзлых пород галоценового периода штамм бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9.The specified technical result is achieved by the fact that the bacterial strain Bacillus cereus 9-08-CH9 isolated from samples of permafrost rocks of the halocene period is used as a serotonin producer.
Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 идентифицирован и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика за №В-12401 (копия справки о депонировании прилагается), Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 выделен из многолетнемерзлых пород (из серого ожелезненного песка ниже торфяного горизонта, глубина места отбора пробы 2 м ниже берегового растительного покрова) при отборе проб с правого берега реки Чара на 9 км выше по течению реки от поселка Новая Чара (Читинская обл.), координаты: (N560 45. 688', Е 1180 11, 440').Bacillus cereus strain 9-08-СН9 was identified and deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms of the Federal State Unitary Enterprise GosNIIgenetics under No. В-12401 (a copy of the deposition certificate is attached), Bacillus cereus strain 9-08-СН9 was isolated from permafrost (from gray ferruginous sand below peat horizon, the depth of the sampling site is 2 m below the coastal vegetation cover) when sampling from the right bank of the Chara river 9 km upstream of the river from the village of Novaya Chara (Chita region), coordinates: (N560 45.688 ', E 1180 11 , 440 ').
Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.The Bacillus cereus 9-08-CH9 strain is characterized by the following cultural-morphological and physiological-biochemical characteristics.
Культурально-морфологические особенности штамма Bacillus cereus 9-08-СН9.Cultural and morphological characteristics of the Bacillus cereus strain 9-08-CH9.
Колонии на ГРМ-агаре матовые, шероховатые, мелкие, с неровным краем. Colonies on timing agar are matte, rough, small, with an uneven edge.
Грамположительные палочки имеют центральное расположение споры.Gram-positive rods have a central spore location.
Условия и состав сред для выращивания штамма Bacillus cereus 9-08-СН9. Культивирование указанного штамма осуществляют в термостате посевом клеток бактерий штрихом в стандартные пробирки на скошенный питательный агар для культивирования микроорганизмов (ГРМ-агар (г. Оболенск, ТУ 9398-020-78095326-2006) или питательный агар для культивирования широкого спектра микроорганизмов (ООО «НПЦ «Биокомпас-С», г. Углич. ТУ 9385-001-64786015-2012)) в аэробных условиях, в термостате при t° от +25 до +36°С 18-24 часа. Все работы по культивированию осуществляют при соблюдении стерильности.Conditions and composition of media for growing Bacillus cereus strain 9-08-CH9. The cultivation of the specified strain is carried out in a thermostat by inoculating bacterial cells by streaking into standard test tubes on a canted nutrient agar for the cultivation of microorganisms (GRM agar (Obolensk, TU 9398-020-78095326-2006) or nutrient agar for the cultivation of a wide range of microorganisms (OOO NPTs "Biocompass-S", Uglich. TU 9385-001-64786015-2012)) under aerobic conditions, in a thermostat at t ° from +25 to + 36 ° C for 18-24 hours. All cultivation work is carried out while maintaining sterility.
Физиолого-биохимические особенности штамма Bacillus cereus 9-08-СН9: каталаза+, оксидаза+, рост на ЖСА+, лецитиназа-, желатиназа-, кровяной агар+, гемолиз+, МПБ+, МПА+, анаэробный рост-, рост на цитратной среде+, глюкоза K+, арабиноза К+, ксилоза К+, крахмал-, казеин+, восстановление нитратов+, сероводород-, индол-.Physiological and biochemical characteristics of the Bacillus cereus strain 9-08-CH9: catalase +, oxidase +, growth on YSA +, lecithinase-, gelatinase-, blood agar +, hemolysis +, MPB +, MPA +, anaerobic growth-, growth on citrate medium +, glucose K +, arabinose K +, xylose K +, starch-, casein +, reduction of nitrates +, hydrogen sulfide-, indole-.
Чувствительность к антибиотикам: штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 №В-12401. Заявляемый штамм чувствителен к пенициллину, эритромицину, налидиксовой кислоте, линкомицину. устойчив к стрептомицину.Antibiotic susceptibility: Bacillus cereus strain 9-08-CH9 # B-12401. The claimed strain is sensitive to penicillin, erythromycin, nalidixic acid, lincomycin. resistant to streptomycin.
Срок хранения высеянного в пробирки на питательную среду штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 №В-12401 в холодильнике (2°С-5°С) 2 месяца.The shelf life of the Bacillus cereus 9-08-СН9 # В-12401 strain seeded in test tubes on a nutrient medium in a refrigerator (2 ° С-5 ° С) is 2 months.
Штамм бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9, №В-12401 не является зоопатогенным или фитопатогенным.The bacterial strain Bacillus cereus 9-08-CH9, # B-12401 is not zoopathogenic or phytopathogenic.
Достижение указанного технического результата изобретения проводилось следующим образом.The achievement of the specified technical result of the invention was carried out as follows.
Культивирование штамма бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 осуществляли по описанной ниже методике. Штамм бактерий высевали штрихом в пробирки на скошенный, приготовленный стандартным методом, питательный агар (ГРМ-агар, г. Оболенск, ТУ 9398-020-78095326-2006) и культивировали в термостате 48 часа при t=26°C. Затем производили смыв микроорганизмов из каждой пробирки 5 мл дистиллированной воды. Концентрацию микроорганизмов определяли культуральным методом серийных разведений по количеству КОЕ на агаризованной питательной среде в чашках Петри (Герхард, 1984). После определения количества клеток бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 в исходной маточной суспензии плотность культур доводили до рабочей концентрации в 1-3⋅109 КОЕ в 1 мл стерильной дистиллированной воды. Суспензию бактериальных клеток в дистиллированной воде инкубировали в термостате при t=26°С в течение 3 суток, после чего ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 30 минут.The cultivation of the bacterial strain Bacillus cereus 9-08-CH9 was carried out as described below. The bacterial strain was streaked in test tubes on a beveled nutrient agar prepared by the standard method (GRM agar, Obolensk, TU 9398-020-78095326-2006) and cultured in a thermostat for 48 hours at t = 26 ° C. Then the microorganisms were washed out from each tube with 5 ml of distilled water. The concentration of microorganisms was determined by the culture method of serial dilution by the number of CFU on agar nutrient medium in Petri dishes (Gerhard, 1984). After determining the number of cells of bacteria Bacillus cereus 9-08-CH9 in the original mother suspension, the density of the cultures was brought to a working concentration of 1-3x10 9 CFU in 1 ml of sterile distilled water. A suspension of bacterial cells in distilled water was incubated in a thermostat at t = 26 ° C for 3 days, after which it was centrifuged at 3000 rpm for 30 minutes.
Определение биогенного амина серотонина осуществляли методом иммуноферментного анализа (ИФА). По данным С.Д. Зайко, ведущего специалиста по продукции ЗАО «АНАЛИТИКА», сравнительные исследования показывают высокую степень корреляции результатов ИФА с данными, полученными методом высокоэффективной жидкостной и газовой хроматографии. (Определение биогенных аминов в лабораторной практике. С.Д. Зайко / Клинико-лабораторный консилиум, 2009, том 4 (29), с. 54-60.)The determination of the biogenic amine serotonin was carried out by the method of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). According to S.D. Zayko, a leading product specialist at ANALITIKA CJSC, comparative studies show a high degree of correlation between ELISA results and data obtained by high-performance liquid and gas chromatography. (Determination of biogenic amines in laboratory practice. SD Zaiko / Clinical and laboratory council, 2009, volume 4 (29), pp. 54-60.)
Для определения серотонина использовали «Набор реагентов для определения серотонина в сыворотке крови и тромбоцитах (Strotonin ELISA Fast Track)»; номер по каталогу: ВАЕ-8900; производитель Labor Diagnostika nord GmbH & Co.Kg, Германия.For the determination of serotonin, the "Kit of reagents for the determination of serotonin in blood serum and platelets (Strotonin ELISA Fast Track)" was used; catalog number: BAE-8900; manufacturer Labor Diagnostika nord GmbH & Co.Kg, Germany.
Определение концентрации серотонина в супернатанте клеток бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 производилась в четырех независимых пробах.Determination of the concentration of serotonin in the supernatant of Bacillus cereus 9-08-CH9 bacteria was carried out in four independent samples.
Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью программы «SPSS ver. 11.5. for Windows».Statistical processing of the obtained data was carried out using the SPSS ver. 11.5. for Windows ".
Результаты измерений концентрации серотонина и кортизола в ИФА приведены в таблицах 1.The results of measurements of the concentration of serotonin and cortisol in ELISA are shown in tables 1.
Референтное значение содержания серотонина в сыворотке крови здорового человека от 70 до 270 нг/млThe reference value of the serotonin content in the blood serum of a healthy person is from 70 to 270 ng / ml
Результаты определения концентрации серотонина в супернатанте клеток бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 показали, что они находятся на уровне референтных значений концентраций данных веществ в биологических жидкостях здорового человека.The results of determining the concentration of serotonin in the supernatant of Bacillus cereus 9-08-CH9 bacteria showed that they are at the level of the reference values of the concentrations of these substances in the biological fluids of a healthy person.
Приведенные результаты исследования подтверждают достижение технического результата и соответствие заявленного штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 критериям новизна, изобретательский уровень, промышленная применимость.The above research results confirm the achievement of the technical result and the compliance of the claimed Bacillus cereus 9-08-CH9 strain with the criteria of novelty, inventive step, and industrial applicability.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019132571A RU2732622C1 (en) | 2019-10-14 | 2019-10-14 | Bacillus cereus strain - serotonin producer |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019132571A RU2732622C1 (en) | 2019-10-14 | 2019-10-14 | Bacillus cereus strain - serotonin producer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2732622C1 true RU2732622C1 (en) | 2020-09-21 |
Family
ID=72922414
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019132571A RU2732622C1 (en) | 2019-10-14 | 2019-10-14 | Bacillus cereus strain - serotonin producer |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2732622C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103396960B (en) * | 2013-07-25 | 2015-06-03 | 四川农业大学 | Bacillus cereus (strain B2), liquid preparation, preparation method of liquid preparation, and application of B2 strain or liquid preparation in prevention and treatment of melanconium juglandinum kunze |
| RU2624032C1 (en) * | 2016-04-13 | 2017-06-30 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тюменский научный центр сибирского отделения Российской академии наук | Strains of bacillus cereus 875 ts microorganism as tools for plant productivity improvement |
-
2019
- 2019-10-14 RU RU2019132571A patent/RU2732622C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103396960B (en) * | 2013-07-25 | 2015-06-03 | 四川农业大学 | Bacillus cereus (strain B2), liquid preparation, preparation method of liquid preparation, and application of B2 strain or liquid preparation in prevention and treatment of melanconium juglandinum kunze |
| RU2624032C1 (en) * | 2016-04-13 | 2017-06-30 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тюменский научный центр сибирского отделения Российской академии наук | Strains of bacillus cereus 875 ts microorganism as tools for plant productivity improvement |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ШИШОВ В.А. "Биогенные амины в динамике роста микроорганизмов"// Авто дисс.канд.биол.наук, Москва, 2010. * |
| ШИШОВ В.А. "Биогенные амины в динамике роста микроорганизмов"// Автореферат дисс.канд.биол.наук, Москва, 2010. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Konno et al. | The metabolism of nicotinic acid in Mycobacteria: a method for differentiating tubercle bacilli of human origin from other Mycobacteria | |
| Muhammad et al. | ANTIBIOTIC PRODUCTION BY THERMOPHILIC BACILLUS SPECIE SAT-4. | |
| Gutierrez et al. | Interrelationship between certain bacteria and the rumen ciliate Dasytricha ruminantium | |
| Ponnusamy et al. | Isolation, identification and antibiogram of Mannheimia hemolytica associated with caprine pneumonia in the Cauvery Delta Region of Tamil Nadu, India | |
| RU2732622C1 (en) | Bacillus cereus strain - serotonin producer | |
| Hayward et al. | Development of specific tests for rapid detection of Escherichia coli and all species of Proteus in urine | |
| RU2737557C1 (en) | Dopamine producer | |
| Jansson | Isolation of fastidious mycoplasma from human sources | |
| RU2732611C1 (en) | Cortisol producer | |
| Karim et al. | Determination of L-glutaminase activity by some bacterial species | |
| RU2817849C1 (en) | Bacillus megaterium 2-06-ts1 strain - cortisol producer | |
| CN111944019B (en) | Antibacterial polypeptide compound and preparation method and application thereof | |
| Rasouli-Nasab et al. | Comparison of various methods for isolation of Nocardia from soil | |
| CN110295115B (en) | Lichen endophytic fungus with broad-spectrum antibacterial activity | |
| CN1198774A (en) | Method and apparatus for testing paraffinophilic microorganisms for antimicrobial agent sensitivity | |
| RU2786394C1 (en) | Method for reducing the level of clinical material contamination when soculated on dense nutritional media for isolation of mycobacterium tuberculosis complex | |
| RU2788348C1 (en) | New strain producing vancomycin amycolatopsis japonica | |
| RU2711954C1 (en) | Method for preliminary identification of non-tuberculosis mycobacteria using a universal chromogenic medium | |
| JP2015188407A (en) | Culture methods for microorganisms | |
| RU2802575C1 (en) | Streptomyces baarnensis, a new daptomycin producer | |
| RU2801749C1 (en) | New producer strain of vancomycin amycolatopsis keratiniphila | |
| RU2722670C1 (en) | Meristem culture solanum tuberosum growth stimulator | |
| RU2789838C1 (en) | New producer strain of ramoplanin actinoplanes ramoplaninifer | |
| RU2465316C1 (en) | Haemophilus influenzae b n 326 bacterial strain, stable producer of capsular saccharide | |
| CN111925959B (en) | Multi-drug-resistant staphylococcus dolphin and application thereof |