RU2726825C2 - Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней - Google Patents
Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2726825C2 RU2726825C2 RU2018143378A RU2018143378A RU2726825C2 RU 2726825 C2 RU2726825 C2 RU 2726825C2 RU 2018143378 A RU2018143378 A RU 2018143378A RU 2018143378 A RU2018143378 A RU 2018143378A RU 2726825 C2 RU2726825 C2 RU 2726825C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dmd
- fragment
- polymorphism
- gene
- nucleotide
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
- C12Q1/683—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism involving restriction enzymes, e.g. restriction fragment length polymorphism [RFLP]
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области молекулярной генетики и предназначено для определения полиморфизма С→Т в позиции 1958 (R1958W) гена DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней. Проводят амплификацию фрагмента гена, содержащего мутацию, с использованием двух праймеров с последующим гидролизом продуктов ПЦР эндонуклеазой Aci I. Идентификация генотипов животных осуществляется по результатам электрофореза продуктов ПЦР-ПДРФ в агарозном геле. Фрагмент длиной 202 п.о. специфичен для нормального аллеля (нуклеотид С). Фрагмент длиной 234 п.о. соответствует мутантному аллелю (нуклеотид Т). Изобретение обеспечивает создание дешевого способа идентификации полиморфизма в гене DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней. 2 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к молекулярной генетике, а именно к способам определения полиморфизма генов, в частности гена дистрофина (DMD), обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней, и может быть использовано в племенном свиноводстве.
Важнейшим условием устойчивого развития свиноводства является селекционно-племенной потенциал отрасли. Научное обеспечение этой деятельности считается одним из наиболее перспективных направлений, на которых должны быть сосредоточены усилия [Отраслевая программа «Развитие свиноводства в Российской Федерации на 2013-2015 годы». М., 2013. С. 28.]. Большой вклад в развитие современного свиноводства в РФ внес импорт зарубежного племенного материала. Такой завоз был сопряжен с неконтролируемым вводом и распространением в популяциях племенного скота в России наследственных аномалий, способных нанести существенный вред развитию племенного животноводства и поставить под угрозу биологическую безопасность страны [Молекулярные методы диагностики заболеваний и наследственных дефектов сельскохозяйственных животных / Е.А. Гладырь, Н.А. Зиновьева, Л.К. Эрнст и др. // Зоотехния, 2009. №8. С. 26-27].
Элиминация рецессивных наследственных аномалий в популяциях сельскохозяйственных животных требует разработки и внедрения систем ДНК-идентификации животных - носителей мутантных аллелей. Использование тест-систем ДНК-диагностики позволит очистить популяции животных от скрытых носителей и тем самым за счет современных методов управления генетическими ресурсами повысить эффективность свиноводства. Чувствительность свиней к стрессам представляет определенную проблему в свиноводстве [Генетические аномалии в свиноводстве / О.В. Костюнина, В.Р. Харзинова, Е.А. Гладырь, Н.А. Зиновьева, Е.И. Сизарева // Таврийский научный вестник. - 2011. - №76(2). - С. 190-193]. Стрессы обусловлены рядом факторов, такими как генетическая предрасположенность животных, поведение обслуживающего персонала, скученность при транспортировке и содержании, сезон года и другими [The fatigued pig syndrome / M. Ritter, M. Ellis, M. Benjamin, E. Berg, P. DuBois, J. Marchant-Forde, A. Green, P. Matzat, P. Mormede, Т. Moyer, K. Pfalzgraf, M. Siemens, J. Sterle, T. Whiting, B. Wolter, and A. Johnson // Journal of Animal Science. 2005. 83(Suppl. 1):258. (Abstr.)] К примеру, в 2006 году потери свиноводческой промышленности США в результате транспортного стресса составили примерно 46 млн. долл. [Transport losses in market weight pigs: I. A review of definitions, incidence and economic impact / M.J. Ritter, M. Ellis, N.L. Berry, S.E. Curtis, L, Anil, M. Benjamin, D. Butler, C. Dewey, B. Driessen, P. DuBois, J. Hill, J. Marchant-Forde, P. Matzat, J. McGlone, P. Mormede, T. Moyer, K. Pfalzgraf, J. Salak-Johnson, J. Sterle, C. Stull, T. Whiting, B. Wolter, S. R. Niekamp, A.K.. Johnson // Professional Animal Scientist. 2009. 25:404-414.
У чувствительных к стрессу свиней помимо нарушений в конституции могут проявляться симптомы, приводящие к гибели животных. Известно, что одним из генетических факторов является мутация HAL-1843 в гене рианодинового рецептора 1, RYR1, которая приводит к возникновению злокачественной гипертермии у свиней и пороку PSE (бледное, дряблое, экссудативное мясо). Эта мутация, приводящая к аминокислотной замене (аргинин - цистеин) в 615-й позиции RYR1, была обнаружена в 1991 году и считается ответственной за большинство потерь, обусловленных стрессом [The fatigued pig syndrome / M. Ritter, M. Ellis, M. Benjamin, E. Berg, P. DuBois, J. Marchant-Forde, A. Green, P. Matzat, P. Mormede, T. Moyer. K. Pfalzgraf, M. Siemens, J. Sterle, T. Whiting, B. Wolter, and A. Johnson // Journal of Animal Science. - 2005. - 83(Suppl. 1):258. (Abstr.); Identification of a mutation in porcine ryanodine receptor associated with malignant hyperthermia / J. Fujii, K. Otsu, F. Zorzato. S. de Leon, V.K. Khanna, J.E. Weiler, P.J. 
D.H. MacLennan // Science. - 1991. - №253. - P. 448-451; The effects of halothane sensitivity on carcass composition and meat quality in HAL-1843 normal pigs / C. P. Allison, R. C. Johnson, M. E. Doumit // Journal of Animal Science. - 2005. - №83. - P. 871-678.]. Однако не все фенотипические проявления стресса обусловлены данной мутацией.
В 2012 году коллектив американских ученых во главе с Nonneman D.J. обнаружил симптомы, характерные для классического стресса, у животных, свободных от мутации HAL-1843 в гене RYR1 [A defect in dystrophin causes a novel porcine stresssyndrome / Dan J., Nonneman, Tami Brown-Brandl, Shuna A. Jones, Ralph T.Wiedmann and Gary A. Rohrer // BMCGenomics, 2012. №13. P. 233].
Проведенные полногеномные исследования позволили обнаружить статистически значимую ассоциацию региона на половой хромосоме X (SSCX), локализованного в области 25.1-27.7 Мб гена дистрофина (DMD), со стресс-синдромом. Причиной мутацией является нуклеотидная замена (85890_783; ss410758971, экзон 41), которая приводит к замене аргинина на триптофан в позиции 1958 (R1958W) аминокислотной последовательности DMD. Ген дистрофина кодирует 15-й повтор биспиральной области центрального стержня спектрина и таким образом обуславливает функции белка дистрофина, являющегося важной составляющей структуры мышечной ткани. Дистрофии обеспечивает структурную устойчивость ассоциированного с ним гликопротеинового комплекса (ДАГ-комплекса), расположенного на клеточной мембране [Dystrophin. More thanjust the sum of its parts / E. Le Rumeur,S.J. Winder, J.F. Hubert // Biochim Biophys Acta. - 2010. - №1804. - P. 1713-1722.].
По некоторым данным, мутация R1958W приводит к уменьшению экспрессии дистрофина в диафрагме, поясничной и длиннейшей мышце спины [The physiological response of protease inhibition in dystrophic muscle/K. Hollinger, J.T. Selsby // Acta Physiol, 2013. №208. P. 234-244.].
Из-за локализации гена на Х-хромосоме стресс-синдром, как правило, встречается в основном у самцов, унаследовавших Х-хромосому с дефектным аллелем от матери. Наибольшая восприимчивость к стрессу у свиней отмечается в возрасте двух-трех месяцев [A defect in dystrophin causes a novel porcine stresssyndrome / D.J., Nonneman, T. Brovvn-Brandl, S.A. Jones, R.T.Wiedmann, G.A. Rohrer // BMC Genomics, 2012. №13. P. 233].
В качестве прототипа заявленного способа, наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату, можно считать прямое секвенирование продуктов ПЦР [A defect in dystrophin causes a novel porcine stresssyndrome / D.J., Nonneman, T. Brown-Brandl, S.A. Jones, R.T.Wiedmann, G.A. Rohrer // BMC Genomics, 2012. №13. P. 233], использование которого требует наличие дорогостоящего оборудования (ДНК-секвенаторов). Отличие нашего способа заключается в выявлении полиморфизма DMD с использованием метода ПЦР с последующим рестрикционным гидролизом образующегося фрагмента (анализа ПДРФ - полиморфизма длин амплифицированных фрагментов).
Следует отметить, что простота нашего способа определения полиморфизма DMD на основе ПЦР-ПДРФ, отсутствие необходимости использования дорогостоящего оборудования позволит использовать его в селекционной практике с целью идентификации животных, являющихся скрытыми носителями.
Анализ последовательности DMD в области мутации показал, что последняя приводит к исключению сайта рестрикции эндонуклеазы Aci I (последовательность узнавания 
), поэтому в качестве базового метода для моделирования тест-системы определения полиморфизма DMD был выбран метод полимеразной цепной реакции с последующим анализом полиморфизма длин рестрицированных фрагментов (ПЦР-ПДРФ), что является отличием заявленного изобретения от известных способов диагностики аллелей DMD. Такой подход позволяет проводить идентификацию результатов с помощью метода электрофореза в агарозном геле без использования дорогостоящего оборудования, что обеспечит относительно невысокую стоимость разрабатываемого способа.
Суть разработанной тест-системы заключается в амплификации фрагмента гена DMD, содержащего мутацию, длиной 234 п.о. с последующим рестрикционным гидролизом образующегося фрагмента эндонуклеазой AciI. Это приводит к образованию фрагмента длиной 202 п.о., специфичного для нормального аллеля (нуклеотид С), в то время как мутантному аллелю (нуклеотид Т) соответствует нерестрицированный фрагмент длиной 234 п.о. Животные - носители стресс-синдрома имеют генотипы ТТ (свинки) и Т0 (хрячки), свинки - носители гетерозиготного генотипа ТС, а животные - не носители - генотип СС (свинки) и С0 (хрячки), что позволяет дифференцировать мутантные и немутантные аллели DMD методом электрофореза в агарозном геле.
Способ отличается тем, что с применением нескольких технически простых и не требующих дорогостоящих реактивов, оборудования, затрат сил и времени методов, возможно выявление мутантного аллеля Т гена DMD, что позволит применить данный метод в селекции животных.
При создании настоящего изобретения задача состояла в разработке способа обнаружения аллеля Т гена DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома, с целью идентификации скрытых носителей и разработки программ их использования в селекции без снижения репродуктивных способностей свиней.
Задача нашего изобретения - создание дешевого способа идентификации полиморфизма в гене DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней, и может быть использовано в племенном свиноводстве.
Технический результат изобретения достигается тем, что предложен способ диагностики полиморфизма в гене DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней, для использования в селекции свиней, включающий метод полимеразной цепной реакции с последующим гидролизом продуктов реакции с использованием эндонуклеазы рестрикиции AciI. Это приводит к образованию фрагментов длиной 202 п.о. и 32 п.о., специфичных для нормального аллеля (нуклеотид С), в то время как мутантному аллелю (нуклеотид Т) соответствует нерестрицированный фрагмент длиной 234 п.о., а идентификация генотипов животных осуществляется по результатам электрофореза продуктов ПЦР-ПДРФ в агарозном геле. Это обеспечит снижение трудоемкости, увеличение производительности, возможности использования реагентов отечественного производства, относительно невысокую стоимость разрабатываемого способа.
Способ отличается тем, что с применением нескольких технически простых и не требующих дорогостоящих реактивов, затрат сил и времени методов, возможно выявление мутантного аллеля Т гена DMD, что позволит применить данный метод в селекции животных.
Сущность изобретения - определение полиморфизма гена DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней, методом ПЦР-ПДРФ.
Разрабатываемый способ базируется на определении нуклеотидной трансверсии С→Т в позиции 1958 гена DMD (R1958W). С этой целью был выбран участок гена DMD с мутацией, обуславливающей наличие стресс-синдрома. В электронной базе была найдена нуклеотидная последовательность интересующего нас участка ДНК (номер GenBank NW_003612750).
Для создания серии референтных образцов с известными генотипами по DMD, (n=48) из проб ткани (ушной выщип, n=24 (хряки) и n=24 (свиноматки) выделяли ДНК: по 24 образца каждого из видов биоматериала методом экстракции перхлоратом с использованием магнитных частиц (ООО «Изоген», Россия) и по 24 образца - с использованием колонок Nexttec (Nexttec Biotechnologie GmbH, Германия) в соответствии с рекомендациями производителей. Референтные генотипы генерировали посредством прямого определения последовательности в области мутации методом пиросеквенирования. С этой целью проводили амплификацию фрагмента длиной 234 п.о., содержащего мутацию, с использованием праймеров DMD_1Pyro,и DMD_2Pyro_Bio (мечен биотином) с последующим отжигом зонда DMD_Zond и пиросеквенированием. Для пиросеквенирования использовали базовую последовательность TA/GTCAGCG, где A/G - мутируемый нуклеотид, Т, Т - контрольные нуклеотиды. Были теоретически смоделированы гистограммы возможных генотипов DMD и получены результаты генотипирования животных (рис. 1). Где А - теоретически смоделированные гистограммы в зависимости от генотипа по DMD, ось X - базовая последовательность нуклеотидов, ось Y - условные единицы (соответствуют теоретически рассчитанной силе люминесценции); В, С, D - результирующие пикограммы последовательности DMD в области исследуемой мутации, ось X - базовая последовательность нуклеотидов, ось Y - условные единицы (регистрируемая прибором сила люминесценции);
В результате проведенного генотипирования была создана серия референтных образцов (n=48), в том числе 5 образцов с генотипом ТТ (стресс-чувствительный) и 43 образца с генотипом СС (стресс-устойчивый).
Определение полиморфизма DMD предложенным способом выполняли следующим образом:
1. Исходя из локализации мутации были подобраны два праймера, фланкирующие определяемую мутацию, при этом праймер DMD_1 является прямым, а праймер DMD_2 - обратным:
DMD_ 1 5' gccaactcagatccagctcagc3'
DMD_2 5'agcccaatgtgaggagaagct3'
Продукт амплификации праймеров DMD_1 и DMD_2 имеет длину 234 п.о. Схема представлена в приложении 1 на рисунке 2А. Где DMD_1, DMD_2 - праймеры, фланкирующие фрагмент; c/t - локализация исследуемой мутации; AciI - эндонуклеаза; Б: электрофореграмма продуктов PCR в 3% агарозном геле: дорожки 1, 2, 3, 4, 6, 9, 10, 11, 12, 14 - генотип Т0 либо ТТ (носитель); дорожка 5, 7, 13 - генотип СТ (гетерозигота, носитель); дорожка 15 - генотип СС либо С0 (не носитель); дорожка 8 - маркер молекулярной массы Fast Ruler Low Ranger; длины рестрикционных фрагментов в п.о. указаны слева от фотографии.
2. Реакции проводили в 15 мкл реакционной смеси следующего состава: 1×ПЦР буфер (16.6 мМ (NH4)2SO4, 67.7 мМ Трис-HCl, рН=8.8, 0.1% (v/v) Tween 20, 1.5 мМ MgCl2), 0,2 мМ дНТФ, 10 пмоль каждого из праймеров, 2 мМ MgCl2, 1 Ед Taq-полимеразы и 1 мкл ДНК при следующем температурно-временном режиме: 1 цикл - 95°С 5 мин, 44 цикла последовательно - 94°С - 45 с., 62°С - 45 с., 72°С - 45 с., заключительная элонгация при 72°С - 8 мин;
3. По завершении ПЦР к реакционной смеси добавляли 0,2 мкл эндонуклеазы AciI (Neb, Великобритания) и 1,5 мкл буфера IX NEB-буфер CutSmart и инкубировали при 37°С в течение 10-12 ч.
4. Определение аллелей DMD осуществляли методом гель-электрофореза, нанося по 5 мкл продуктов гидролиза в 3% агарозный гель, электрофоретически разделяли в 1х ТАЕ буфере 20 мин при 100 V и детектировали под ультрафиолетовым светом (УФ), при этом генотипу СС или С0 соответствует фрагмент длиной 202 п.о., генотипу СТ - два фрагмента длиной 234 и 202 п.о. (прил. рис. 2Б). Генотипу Т0 или ТТ (в зависимости от пола животного) соответствует наличие одного фрагмента длиной 234 п.о.
5. Результативность разработанной тест-системы оценивали посредством сравнения результатов генотипирования референтных образцов.
Пример. Контрольное использование предложенного способа определения полиморфизма DMD было апробировано на 100 свиньях породы дюрок, 100 свиньях породы крупная белая и 500 свиньях породы ландрас. Исследование выявило отсутствие аллеля Т у свиней пород крупная белая и дюрок, у свиней породы ландрас частота генотипов СТ и Т0 составила 11,33 и 0,39%%, соответственно.
Таким образом, предложенный способ может быть использован в генетике сельскохозяйственных животных для выявления полиморфизма в гене DMD обуславливающего наличие стресс-синдрома, с целью проведения тестирования племенного поголовья на наличие аллеля Т в гене DMD у племенных свиней различного происхождения с целью профилактики распространения мутации в стадах.
DMD_1 5’gccaactcagatccagctcagc3’
DMD_2 5’agcccaatgtgaggagaagct3’
Claims (1)
- Способ определения полиморфизма С→Т в позиции 1958 (R1958W) гена DMD, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней, включающий амплификацию фрагмента гена, содержащего мутацию, с использованием двух праймеров с последующим гидролизом продуктов ПЦР эндонуклеазой Aci I, это приводит к образованию фрагмента длиной 202 п.о., специфичного для нормального аллеля (нуклеотид С), в то время как мутантному аллелю (нуклеотид Т) соответствует нерестрицированный фрагмент длиной 234 п.о., а идентификация генотипов животных осуществляется по результатам электрофореза продуктов ПЦР-ПДРФ в агарозном геле.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018143378A RU2726825C2 (ru) | 2018-12-07 | 2018-12-07 | Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018143378A RU2726825C2 (ru) | 2018-12-07 | 2018-12-07 | Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018143378A3 RU2018143378A3 (ru) | 2020-06-08 |
| RU2018143378A RU2018143378A (ru) | 2020-06-08 |
| RU2726825C2 true RU2726825C2 (ru) | 2020-07-15 |
Family
ID=71067152
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018143378A RU2726825C2 (ru) | 2018-12-07 | 2018-12-07 | Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2726825C2 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU923485A1 (ru) * | 1980-08-27 | 1982-04-30 | Белорусский научно-исследовательский институт животноводства | Способ отбора свиней по устойчивости к стресс-синдрому |
| RU2456957C2 (ru) * | 2010-08-26 | 2012-07-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Уральская государственная академия ветеринарной медицины | Способ определения стрессовой чувствительности у свиноматок |
-
2018
- 2018-12-07 RU RU2018143378A patent/RU2726825C2/ru active IP Right Revival
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU923485A1 (ru) * | 1980-08-27 | 1982-04-30 | Белорусский научно-исследовательский институт животноводства | Способ отбора свиней по устойчивости к стресс-синдрому |
| RU2456957C2 (ru) * | 2010-08-26 | 2012-07-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Уральская государственная академия ветеринарной медицины | Способ определения стрессовой чувствительности у свиноматок |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| NONNEMAN D.J. et al. A defect in dystrophin causes a novel porcine stress syndrome. BMC Genomics. 2012 Jun 12; 13: 233. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2018143378A3 (ru) | 2020-06-08 |
| RU2018143378A (ru) | 2020-06-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Szmatoła et al. | Characteristics of runs of homozygosity in selected cattle breeds maintained in Poland | |
| Zhang et al. | Progress of genome wide association study in domestic animals | |
| US20090269741A1 (en) | Method for assessing traits selected from longissimus dorsi peak force, intramuscular fat, retail beef yield and net feed intake in bovine animals | |
| Meydan et al. | Identification of factor XI deficiency in Holstein cattle in Turkey | |
| Bence et al. | Lessons from the canine Oxtr gene: populations, variants and functional aspects | |
| Cook et al. | Genetics of swayback in American Saddlebred horses | |
| Sartelet et al. | Genome-wide next-generation DNA and RNA sequencing reveals a mutation that perturbs splicing of the phosphatidylinositol glycan anchor biosynthesis class H gene (PIGH) and causes arthrogryposis in Belgian Blue cattle | |
| Galov et al. | Genetic structure and admixture between the Posavina and Croatian Coldblood in contrast to Lipizzan horse from Croatia. | |
| Giesecke et al. | Evaluation of SPATA1‐associated markers for stallion fertility | |
| RU2726825C2 (ru) | Способ определения полиморфизма гена dmd, обуславливающего наличие стресс-синдрома у свиней | |
| Zhang et al. | Population validation of reproductive gene mutation loci and association with the litter size in Nubian goat | |
| US20150344959A1 (en) | Compositions and methods for genotyping canines | |
| Sahu et al. | Advances in genomic strategies to improve growth and meat production traits in sheep: An overview | |
| KR101321219B1 (ko) | 유전체 정보 분석에 의한 한우 마블링 유전능력 진단 방법 | |
| KR101289576B1 (ko) | 한우 육량 관련 분자마커 개발 | |
| CN111269994A (zh) | 一种利用普通牛y染色体单核苷酸遗传标记鉴定公牛品种的方法 | |
| JP2013106533A (ja) | ウシ個体における枝肉重量及び体高を増加させる遺伝的能力を評価する遺伝子マーカー及びそれを用いた枝肉重量及び体高に関する遺伝的能力の評価方法 | |
| KR101289484B1 (ko) | 한우 마블링 진단용 유전자 검사 방법 | |
| RU2639510C2 (ru) | Способ диагностики полиморфизма smc2, ассоциированного с гаплотипом фертильности нн3 крупного рогатого скота | |
| McCue et al. | Genomic tools and resources: Development and applications of an equine SNP genotyping array | |
| Guo et al. | Genome-wide association study for rib eye muscle area in a Large White× Minzhu F2 pig resource population | |
| RU2745902C1 (ru) | Способ определения полиморфизма гена рецептора меланокортина 4 (mc4r), ассоциированного с мясными и откормочными качествами свиней | |
| RU2744733C1 (ru) | Способ определения достоверности происхождения и чистопородности свиней | |
| Suprovych et al. | Population genetic structure of the Ukrainian black-pied dairy breed with the genome BoLA-DRB3 | |
| Krovvidi et al. | Polymorphism of Deleted in Azoospermia-Like (Dazl) Gene in Ongole, Crossbred and Murrah Bulls Used for Artificial Insemination in Andhra Pradesh, India |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201208 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20220418 |