RU2719912C1 - Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста - Google Patents

Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста Download PDF

Info

Publication number
RU2719912C1
RU2719912C1 RU2019121113A RU2019121113A RU2719912C1 RU 2719912 C1 RU2719912 C1 RU 2719912C1 RU 2019121113 A RU2019121113 A RU 2019121113A RU 2019121113 A RU2019121113 A RU 2019121113A RU 2719912 C1 RU2719912 C1 RU 2719912C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
blood
tail
blood sampling
rats
medicine
Prior art date
Application number
RU2019121113A
Other languages
English (en)
Inventor
Павел Дмитриевич Тимкин
Марина Евгеньевна Кропотова
Надежда Ивановна Петренко
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Амурская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2019121113A priority Critical patent/RU2719912C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2719912C1 publication Critical patent/RU2719912C1/ru

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G09EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
    • G09BEDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
    • G09B23/00Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
    • G09B23/28Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Computational Mathematics (AREA)
  • Mathematical Analysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Algebra (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Mathematical Optimization (AREA)
  • Mathematical Physics (AREA)
  • Pure & Applied Mathematics (AREA)
  • Business, Economics & Management (AREA)
  • Educational Administration (AREA)
  • Educational Technology (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине. Смачивают тканную салфетку в воде температурой 45°С. Салфетку отжимают и обертывают вокруг хвоста крысы по всей длине. Проводят 3 цикла прогревания по 15 с. Производят забор крови из хвостовой вены. Способ позволяет получить достаточный объем крови для дальнейшего исследования, возможность повторного забора крови через короткий промежуток времени, максимально уменьшить травматизацию тканей хвоста крысы, обеспечить отсутствие загрязнения полученной крови чужеродными частицами, свести к минимуму количество осложнений.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для быстрого забора крови высокого качества у лабораторных животных.
Кровь у крыс, которую забирают для оценки биохимического и клеточного состава крови, может быть получена различными способами. Способы забора крови различаются по количеству забираемой крови - тотальные (терминальные) и нетерминальные, по месту, откуда ведется забор крови, а также по тому, требует ли данный способ наркоза или нет. Наиболее часто забор крови ведут из ретроорбитального венозного сплетения, большой подкожной вены и вен хвоста.
Существуют различные способы взятия крови у крыс, однако, известные способы обладают рядом недостатков: они достаточно травматичны (вплоть до гибели животного), не позволяют получить должного количества крови за один забор, либо состав крови не соответствует желаемому.
Описан способ забора крови из подкожных вен конечностей /Иванова Д.Ю. Сравнительный анализ методов взятия проб крови у экспериментальных крыс // 1, Научное сообщество студентов XXI столетия. Естественные науки: сб. ст. по мат. XLII междунар. студ. науч.-практ. конф. №6(41)/. Процедура обычно выполняется без общей анестезии, но для ее выполнения необходимо надежно зафиксировать животное. На лапке в области кисти бритвой делают разрез и просовывают ее сквозь резиновую манжетку в толстостенную пробирку (гусек), из которой вакуумным насосом откачивают воздух. Кровь собирается на дне пробирки.
Недостатки данного способа заключаются в том, что длительная иммобилизация животного без общей анестезии в рамках подготовки к забору значительно стрессирует животное, что изменяет клеточный и биохимический состав крови. Процедура довольно травматична - в некоторых случаях после данной процедуры животное может хромать, щадя травмированную конечность, что нарушает нормальную жизнедеятельность.
Существует способ забора крови из яремной вены /2, Способ взятия крови из яремной вены А.Л. Валентюкевич, Н.А. Тарасов, К.Д. Лапчук // Сборник материалов конференции студентов и молодых ученых, посвященной 90-летию со дня рождения профессора Борец Валентины Максимовны, 20-21 апреля 2017 г., [Гродно] / М-во здравоохранения Респ. Беларусь, УО "Гродн. гос. мед. ун-т"; отв. ред. В.А. Снежицкий. - Гродно: ГрГМУ, 2017. - С. 90. - 1 эл. опт. диск/. Под эфирным наркозом по закрытом контуру производят удаление шерсти (выщипывание с последующим выбриванием) и обработку раствором септоцида подчелюстной области. Производят разрез кожи длиной до 1 см параллельно и ниже нижней челюсти, отступая от последней расстояние длиной 3-5 мм. Разводят края раны зажимом, в ране четко визуализируется яремная вена, имеющая диаметр до 3 мм. Скальпелем производят вскрытие яремной вены, после чего кровь самотеком поступает в предварительно подставленные к краям раны пробирки. После взятия крови рану тампонируют и зашивают.
Такая процедура взятия крови имеет ряд недостатков, таких как сложность процедуры, возможность образования сгустка, гемолиз, большая травматичность и долгий период восстановления животного после вмешательства.
Существует способ забора крови из ретроорбитального венозного сплетения /3, Методические рекомендации по освоению дисциплины «Молекулярные основы рецепции фармакологических агентов». Образовательная программа «Фармакология, клиническая фармакология». Направление подготовки 30.06.01 Фундаментальная медицина/ М.В. Черников, М.А. Оганова. - Пятигорск: ПМФИ - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ, 2015. - 68 с.//. Методика отличается скоростью проведения процедуры - за короткое время можно собрать образцы крови у большой группы животных. Наркотизированную крысу захватывают левой рукой за кожу шеи большим и указательным пальцами, а другими пальцами надежно удерживают за кожу спины. Микропипетку берут в правую руку. Концом пипетки пробуравливающими движениями прокалывают конъюнктиву внутреннего угла глаза и проводят ее на глубину 1-2 мм за глазное яблоко, где находится венозное сплетение. При правильном введении в капилляр микропипетки из ретроорбитального сплетения самотеком поступает кровь.
К недостаткам данного способа относят высокий риск осложнений - от воспалений в области глазницы до слепоты. Возможно загрязнение образцов крови слезной жидкостью или местноанестезирующим препаратом. Повторный забор крови возможен не менее, чем через 10 дней после процедуры.
Есть способ взятия крови путем пункции хвостовой вены /4, Сюрин В.Н. Методы лабораторной диагностики и вирусных болезней животных: справочник. М.: Агропромиздат, 1986. - 351 с./. Перед взятием крови опускают хвост в теплую +35°С (по некоторым данным в очень горячую 45-50°С) воду или натирают 70%-ым этиловым спиртом (ксилолом или толуолом), а затем сдавливают вену у корня хвоста. Для пункции применяют шприц или катетер-бабочку. Кровь насасывают, создавая небольшое отрицательное давление в шприце, чтобы избежать разрушения форменных элементов крови. После процедуры хвост обрабатывают дезинфицирующим средством. Данный способ используем в качестве прототипа.
Недостатки данного способа - возможность ожога хвоста, что приводит к повреждению его тканей вплоть до некроза. Хвост в процессе работы остывает, потому взятие крови с течением времени утрачивает свою эффективность.
Техническая проблема, решаемая данным изобретением, состоит в создании минимально травматичного для крысы способа получения достаточного количества крови для дальнейшего исследования, снижая риск загрязнения крови чужеродными элементами. А также возможность повторного забора крови через небольшой промежуток времени.
Сущность способа заключается в том, что при использовании тканного полотна, предварительно смоченного в воде, подогретой до 45°С, происходит равномерное прогревание хвоста крысы, путем обертывания отжатой ткани вокруг хвоста, вследствие чего расширяются хвостовые сосуды. Проводят 3 цикла прогревания по 15 с. Это способствует ускорению процесса забора крови и лучшей визуализации сосудов для последующего их прокола. В дальнейшем используют жгут, путем накладывания на основание хвоста. Иглу вводят на 1/3 в вену под углом 15°, отводят поршень на себя для уточнения проникновения. После производят снятие жгута и повторно отводят поршень. Допустимый забираемый объем крови при этом способе - до 1 мл.
Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста осуществляется по следующему плану. Крысу извлекают из клетки, удерживая ее за основание хвоста, помещают на ровную поверхность и фиксируют ее. Фиксация производится с помощью различных устройств или ручным способом: животное с умеренной силой придавливают к поверхности стола, держа за шкуру на спине, тем самым, обездвиживая его. Емкость объемом 300 мл предварительно заполняют водой, которую подогревают до температуры 45°С. Тканую салфетку помещают в нагретую воду и слегка отжимают. Салфетку помещают на ровную поверхность и визуально делят на две части. На первой части размещают хвост, второй частью ткани закрывают хвост сверху, таким образом, хвост оказывается внутри салфетки. Длительность прогрева хвоста - 15 секунд. Манипуляция повторяется 3 раза. С помощь тканевого полотна достигается равномерный нагрев поверхности хвоста. Это способствует притоку крови и, следовательно, расширению сосудов. После проведенных действий начинается этап непосредственно взятия крови из хвостовой вены: на основании хвоста фиксируют отрезок эластичной резиновой материи шириной 1-2 мм, которая пережимает сосуды и является аналогом жгута. Производят обработку хвоста дезинфицирующим раствором. При осмотре хвоста необходимо обнаружить сосуд, прокол которого будет в последующем осуществляться. После идентификации вены выполняют ее прокол под углом 15° шприцом объемом 1 мл с иглой 27G и продвигают иглу на 1/3. Далее тянут поршень на себя; наличие крови в шприце - индикатор нахождения иглы в полости вены. Вслед за этим жгут развязывают, и поршень повторно тянут на себя. В этом момент кровь должна поступать в шприц. Допустимый объем взятой крови - до 1 мл. После того, как кровь набрана, шприц с иглой извлекают и обрабатывают область прокола дезинфицирующим раствором.
Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста осуществляется двумя путями: с применением наркоза и без. В первом случае на крысе после того, как ее вытаскивают из клетки, используют препараты для наркоза с различными способами введения: ингаляционно, внутрибрюшинно, орально, подкожно и внутримышечно. Все дальнейшие действия осуществляются по вышеописанному алгоритму.
Изобретение было проверено путем успешного взятия по 1 мл венозной крови у 55 половозрелых белых крыс линии Wistar. Было произведено количественное исследование клеток крови в камере Горяева и при микроскопии мазков крови, предварительно окрашенных по Романовскому-Гимзе. Окраска осуществлялась путем фиксации в растворе эозина метиленового синего по Май-Грюнвальду - 5 минут и непосредственно окрашивания в растворе азур-эозина по Романовскому - 10 минут. Данные электронной микроскопии демонстрировали сохранение структур клеток, отсутствие посторонних частиц.
В сравнение с прототипом, предлагаемый способ обладает рядом преимуществ. В прототипе хвост опускают в горячую воду. Частое воздействие непосредственно горячей воды приводит к ожогам и даже некрозу. При некрозе состав крови сильно изменяется - как в клеточном отношении, так и в биохимическом. Использование тканой салфетки позволяет удобно регулировать температуру прогрева. Если хвост остыл в процессе забора крови, и это мешает работе, то салфетку можно повторно опустить в воду и обернуть ею хвост. В прототипе, где салфетка не используется, пришлось бы вытаскивать иглу из хвоста, хвост помещать обратно в воду, после этого повторно проводить прокол. Повторное нарушение целостности структур хвоста приводит к уменьшению объема крови в проколотом сосуде вследствие стресса и активации систем гемостаза. Далее, в прототипе описан вариант способа, где используется ксилол и толуол для протирания хвоста. Ксилол и толуол относят к высокотоксичным веществам. Они могут привести к гибели животного, не говоря о том, что они впитываются и попадают в кровь, тем самым, загрязняет ее и опять-таки изменяет клеточный состав разными механизмами. Использование салфетки позволяет избежать такое явление, как токсинемия - загрязнение крови токсинами - и ее последствий.
Технический результат от использования способа - получение достаточного объема крови для дальнейшего исследования, максимальное уменьшение травматизации тканей хвоста крысы, отсутствие загрязнения полученной крови чужеродными частицами, сведение к минимуму количества осложнений, возможность повторного забора крови через короткий промежуток времени.

Claims (1)

  1. Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста, включающий прогрев хвоста и забор крови из хвостовой вены, отличающийся тем, что прогрев осуществляют при помощи тканой салфетки, которую смачивают в воде температурой 45°С, отжимают и обертывают вокруг хвоста по всей длине на 15 секунд, при этом процедуру повторяют 3 раза.
RU2019121113A 2019-07-03 2019-07-03 Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста RU2719912C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019121113A RU2719912C1 (ru) 2019-07-03 2019-07-03 Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019121113A RU2719912C1 (ru) 2019-07-03 2019-07-03 Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2719912C1 true RU2719912C1 (ru) 2020-04-23

Family

ID=70415375

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019121113A RU2719912C1 (ru) 2019-07-03 2019-07-03 Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2719912C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2837339C1 (ru) * 2024-03-07 2025-03-31 Федеральное бюджетное учреждение науки "Научно-исследовательский институт системной биологии и медицины" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Способ подготовки венозной крови крыс для проведения биохимического и протеомного анализа

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2317543C1 (ru) * 2006-06-08 2008-02-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Дальневосточный государственный аграрный университет Способ взятия крови у лабораторных мышей
RU2648032C1 (ru) * 2017-01-10 2018-03-21 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Омский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ОмГМУ Минздрава России) Способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии
CN108888382A (zh) * 2018-05-22 2018-11-27 上海市同济医院 一种小鼠尾静脉采血及注射夹

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2317543C1 (ru) * 2006-06-08 2008-02-20 Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Дальневосточный государственный аграрный университет Способ взятия крови у лабораторных мышей
RU2648032C1 (ru) * 2017-01-10 2018-03-21 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Омский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ОмГМУ Минздрава России) Способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии
CN108888382A (zh) * 2018-05-22 2018-11-27 上海市同济医院 一种小鼠尾静脉采血及注射夹

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Parasuraman S et al. Blood sample collection in small laboratory animals, Journal of pharmacology & pharmacotherapeutics, 2010, vol. 1, 2, 87-93. *
Zou Wusong et al. Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System., Journal of visualized experiments, 2017, 130. *
Иванова Д.Ю. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ВЗЯТИЯ ПРОБ КРОВИ У ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНЫХ КРЫС, Научное сообщество студентов XXI столетия. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ: сб. ст. по мат. XLII междунар. студ. науч.-практ. конф., 2016, 6(41). *
Иванова Д.Ю. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ВЗЯТИЯ ПРОБ КРОВИ У ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНЫХ КРЫС, Научное сообщество студентов XXI столетия. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ: сб. ст. по мат. XLII междунар. студ. науч.-практ. конф., 2016, 6(41). Zou Wusong et al. Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System., Journal of visualized experiments, 2017, 130. Parasuraman S et al. Blood sample collection in small laboratory animals, Journal of pharmacology & pharmacotherapeutics, 2010, vol. 1, 2, 87-93. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2837339C1 (ru) * 2024-03-07 2025-03-31 Федеральное бюджетное учреждение науки "Научно-исследовательский институт системной биологии и медицины" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Способ подготовки венозной крови крыс для проведения биохимического и протеомного анализа
RU2840917C1 (ru) * 2024-11-12 2025-05-30 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России) Способ забора крови из ретроорбитального венозного сплетения у мелких лабораторных животных

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Donovan et al. Blood collection
CN110090044A (zh) 一种用于采集皮肤间质液的水凝胶微针贴片及其制备方法和使用方法
Robertson A method of citrated blood transfusion
Barthel et al. A step-by-step guide for microsurgical collection of uncontaminated cerebrospinal fluid from rat cisterna magna
RU2719912C1 (ru) Способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста
US20240268729A1 (en) Finger Cuff Device With Lancet Guide and Integrated Absorbent Pad for Capillary Sample Collection
CN221636061U (zh) 一种胸腔穿刺护理包
Hox et al. Cavernous nerve stimulation and recording of intracavernous pressure in a rat
TR201610821A2 (ru)
RU2672476C1 (ru) Игла для биопсии
RU2840917C1 (ru) Способ забора крови из ретроорбитального венозного сплетения у мелких лабораторных животных
CN215192519U (zh) 一种建立神经损伤性勃起功能障碍模型的装置
RU2627468C1 (ru) Способ лечения атрофических рубцов кожи
CN209547993U (zh) 儿童抽血装置
CN208877583U (zh) 利器盒
CN209712999U (zh) 埋线针具
Korngold et al. [24] Collection of mouse thoracic duct lymphocytes
CN112603576A (zh) 一种建立神经损伤性勃起功能障碍模型的装置与方法
CN222841122U (zh) 一种便于股动脉置管的动物失血性休克模型造模台
RU44486U1 (ru) Инструмент для биопсии кожи
CN101301227A (zh) 大鼠硬脊膜外腔和蛛网膜下腔置管方法
Liu et al. Collecting Blood from Various Sites and Vessels
CN215994382U (zh) 一种用于胃肠道穿孔的修补膜
CN213284851U (zh) 一种一次性防刺伤防漏输液器
CN221533844U (zh) 一种人体皮下微生物样本采集装置