RU2709720C1 - Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser - Google Patents
Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser Download PDFInfo
- Publication number
- RU2709720C1 RU2709720C1 RU2018128262A RU2018128262A RU2709720C1 RU 2709720 C1 RU2709720 C1 RU 2709720C1 RU 2018128262 A RU2018128262 A RU 2018128262A RU 2018128262 A RU2018128262 A RU 2018128262A RU 2709720 C1 RU2709720 C1 RU 2709720C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oxygen
- staphylococcus aureus
- containing gas
- ozone
- culture
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/16—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
- A61L2/20—Gaseous substances, e.g. vapours
- A61L2/202—Ozone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/44—Staphylococcus
- C12R2001/445—Staphylococcus aureus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Заявляемое изобретение относится к ветеринарной медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано в лабораториях и ветеринарных клиниках как способ для стерилизации.The claimed invention relates to veterinary medicine, namely to microbiology, and can be used in laboratories and veterinary clinics as a method for sterilization.
Уровень техникиState of the art
Известен способ озонирования физиологического раствора, путем барботирования физиологического раствора озонокислородной смесью с концентрацией озона на выходе из озонатора от 3 до 10 мг/л. Способ осуществляют следующим образом: генератор озона подключают к источнику кислорода и в электросеть, устанавливают на панели прибора концентрацию озона в озонокислородной смеси и экспозицию. В пробку вставляют длинную иглу, доходящую до дна флакона, и короткую иглу, не доходящую до поверхности раствора, к длинной игле присоединяют поливинилхлоридную трубку от выхода аппарата, к короткой игле присоединяют деструктор озона, включают аппарат и проводят барботирование в течение до 10 мин. Готовый раствор применяют внутривенно или для обработки ран. Приготовление раствора предполагает достаточно высокие концентрации озона в растворе - до 6 мг/л (см. «Озонотерапия. Внутренние болезни» О.В. Масленников, К.Н. Конторщикова, Н. Новгород, 2003 г., с. 39).A known method of ozonation of physiological saline by sparging a physiological saline with an ozone-oxygen mixture with an ozone concentration at the outlet of the ozonizer from 3 to 10 mg / L. The method is as follows: the ozone generator is connected to an oxygen source and to the power grid, the ozone concentration in the ozone-oxygen mixture and the exposure are set on the instrument panel. A long needle is inserted into the cork, reaching the bottom of the bottle, and a short needle not reaching the surface of the solution, a polyvinyl chloride tube is connected to the long needle from the outlet of the apparatus, an ozone destructor is connected to the short needle, the apparatus is turned on and bubbling is carried out for up to 10 minutes. The finished solution is used intravenously or for the treatment of wounds. The preparation of the solution involves a sufficiently high concentration of ozone in the solution - up to 6 mg / l (see "Ozone therapy. Internal diseases" OV Maslennikov, KN Kontorshchikova, N. Novgorod, 2003, p. 39).
Недостатком способа является быстрый распад озона. Концентрация озона в физиологическом растворе при комнатной температуре через 5 мин снижается на 17%, через 10 мин - на 29%, через 15 мин - на 37%, через 20 мин на 43%, через 25 мин - на 46%, а спустя 30 мин - наполовину. После приготовления раствор должен быть использован в кратчайшие сроки.The disadvantage of this method is the rapid decay of ozone. The concentration of ozone in physiological saline at room temperature decreases by 17% after 5 minutes, by 29% after 10 minutes, by 37% after 15 minutes, by 43% after 20 minutes, by 46% after 25 minutes, and after 30 minutes min - half. After preparation, the solution should be used as soon as possible.
Способ озонирования физиологического раствора, включающий барботирование физиологического раствора озоно-кислородной смесью с концентрацией озона на выходе из озонатора от 3 до 10 мг/л, отличающийся тем, что проводят двухэтапную обработку физраствора, при этом после завершения барботирования физраствора озоно-кислородной смесью во флакон с озонированным физиологическим раствором дополнительно вводят озоно-кислородную смесь под повышенным давлением от 1,5 до 2,9 атм с концентрацией озона от 6 до 10 мг/л (см. пат. RU 2289413).A method of ozonizing a physiological solution, including bubbling a physiological solution with an ozone-oxygen mixture with an ozone concentration of 3 to 10 mg / l at the outlet of the ozonizer, characterized in that two-stage treatment of the saline solution is carried out, while after the completion of the bubbling of the saline with an ozone-oxygen mixture into a bottle with an ozonized physiological solution is additionally injected with an ozone-oxygen mixture under increased pressure from 1.5 to 2.9 atm with an ozone concentration of from 6 to 10 mg / l (see US Pat. RU 2289413).
Недостатком данного способа также является быстрый распад озона и трудоемкость метода.The disadvantage of this method is the rapid decay of ozone and the complexity of the method.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятым авторами за прототип является способ обработки культур озоном. Проводились исследования с шестью бактериальными штаммами с использованием различных концентраций озона в озоно-кислородной смеси (О3/О2) для определения минимально эффективной дозы. Бактериальные штаммы высевали на кровяной агар в чашки Петри при концентрации микробных клеток 1×105 на чашку. Озон вырабатывался медицинским генератором озона. Прибор был оснащен кислородным регулятором потока, в котором кислородный поток проходит через стеклянный цилиндр и подвергается воздействию электрического разряда диэлектрического барьера с контролируемой энергией и напряжением. Конечным продуктом является газовая смесь О3/О2, в которой концентрация озона регулируется за счет изменения потока кислорода и напряжения от электродов. Такие культуры как Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa высевали на кровяной агар в чашках Петри и инкубировали аэробно при температуре 35±2°С в течение 18-24 часов. Стандартизированный инокулят данных культур был приготовлен с использованием прямого пересева колоний с кровяного агара. Пересев был осуществлен по стандарту мутности «0,5 McFarland» (1 к 2×108 КОЕ/мл) с использованием фотометрического устройства (колориметра). Суспензию разбавляли 1:1000 в стерильном физиологическом растворе, в результате получали пробирку, содержащую приблизительно 10 КОЕ/мл. Затем 10 мл этой суспензии высевали на подготовленные чашки Петри с кровяным агаром. Первоначально агаровые пластинки с высеянной культурой экспонировали в течение 60 мин. В последствии было выяснено, что минимальная доза и время необходимые для полного предотвращения бактериального роста Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa составляет 20 мкг/мл в течение 5 мин. Затем применяли меньшую концентрацию 15 мкг/мл в течение 5 мин. на шести бактериальных культурах: Escherichia coli, Staphylococcus aureus неустойчивый к оксациллину, Staphylococcus aureus устойчивый к оксациллину, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa. Эксперименты повторяли для каждой культуры по 4 раза и оценивали результаты (Effect of low-dose gaseous ozone on pathogenic bacteria / Belchor Pontes, Ana Maria Cattani Heimbecker, Glacus de Souza Brito, Silvia F Costa, Inneke M van der Heijden, Anna S LevinEmail author and Samir Rasslan // BMC Infectious Diseases. - 2012. - №12. - P. 358).The closest in technical essence and the achieved positive effect and adopted by the authors for the prototype is a method of processing crops with ozone. Studies were conducted with six bacterial strains using various concentrations of ozone in an ozone-oxygen mixture (O 3 / O 2 ) to determine the minimum effective dose. Bacterial strains were plated on blood agar in Petri dishes at a concentration of microbial cells of 1 × 10 5 per cup. Ozone was produced by the medical ozone generator. The device was equipped with an oxygen flow regulator, in which the oxygen flow passes through a glass cylinder and is exposed to an electric discharge of a dielectric barrier with controlled energy and voltage. The final product is an O 3 / O 2 gas mixture in which the ozone concentration is controlled by changing the oxygen flow and voltage from the electrodes. Cultures such as Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa were seeded on blood agar in Petri dishes and incubated aerobically at a temperature of 35 ± 2 ° C for 18-24 hours. A standardized inoculum of these cultures was prepared using direct reseeding of colonies from blood agar. Reseeding was carried out according to the turbidity standard "0.5 McFarland" (1 to 2 × 10 8 CFU / ml) using a photometric device (colorimeter). The suspension was diluted 1: 1000 in sterile saline, resulting in a tube containing approximately 10 CFU / ml. Then 10 ml of this suspension was sown on prepared Petri dishes with blood agar. Initially, agar plates with a seeded culture were exposed for 60 minutes. Subsequently, it was found that the minimum dose and time necessary to completely prevent the bacterial growth of Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa is 20 μg / ml for 5 minutes. A lower concentration of 15 μg / ml was then applied for 5 minutes. on six bacterial cultures: Escherichia coli, Staphylococcus aureus unstable to oxacillin, Staphylococcus aureus resistant to oxacillin, Enterococcus faecalis, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa. The experiments were repeated 4 times for each culture and the results were evaluated (Effect of low-dose gaseous ozone on pathogenic bacteria / Belchor Pontes, Ana Maria Cattani Heimbecker, Glacus de Souza Brito, Silvia F Costa, Inneke M van der Heijden, Anna S Levin Email author and Samir Rasslan // BMC Infectious Diseases. - 2012. - No. 12. - P. 358).
Недостатками данного способа является невысокая концентрация микробных клеток в посеве (105 КОЕ/мл), низкая концентрация озона в газовой смеси, отсутствие возможности использования медицинского озонатора в условиях ветеринарных клиник.The disadvantages of this method is the low concentration of microbial cells in culture (10 5 CFU / ml), low concentration of ozone in the gas mixture, the inability to use a medical ozonizer in veterinary clinics.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Задачей предлагаемого изобретения является изучение бактерицидного действия кислородсодержащим газом, вырабатываемой портативным озонатором в условиях «in vitro» на примере Staphylococcus aureus.The objective of the invention is to study the bactericidal action of an oxygen-containing gas produced by a portable ozonizer in vitro using the example of Staphylococcus aureus.
Техническим результатом изобретения является отсутствие роста Staphylococcus aureus на мясо-пептоном агаре в чашках Петри.The technical result of the invention is the lack of growth of Staphylococcus aureus on meat-peptone agar in Petri dishes.
Технический результат достигается с помощью способа обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, в котором проводят высевание культуры Staphylococcus aureus в стерильной зоне на среду в чашках Петри и обработку кислородсодержащим газом в течение 5 минут, отличающийся тем, что культуру предварительно засевают с помощью бактериальной петли в пробирки с мясо-пептонным агаром, культивируют в термостате при температуре 37±2°C в аэробной среде в течение 24 часов, после чего осторожно смывают ее физиологическим раствором и доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 10 млрд по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, затем градуированной пипеткой высевают 0,1 мл полученной культуры на мясо-пептонный агар в чашки Петри, соблюдая стерильность вносят трубку озонатора на расстоянии 1 см от поверхности агара, затем чашки Петри помещают в термостат суховоздушный, поддерживающий температуру 37(±1)°С на 20 часов.The technical result is achieved using a method of processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, in which the culture of Staphylococcus aureus is sown in a sterile zone on a medium in Petri dishes and treated with oxygen-containing gas for 5 minutes, characterized in that the culture is pre-seeded with a bacterial loops in test tubes with meat peptone agar, cultured in an incubator at a temperature of 37 ± 2 ° C in an aerobic environment for 24 hours, after which they are carefully washed off with physiological growth orom and bring the concentration of microbial cells in 1 ml to 10 billion according to the Tarasevich turbidity standard in a sterile tube, then 0.1 ml of the obtained culture is inoculated with a graduated pipette into meat-peptone agar in Petri dishes, observing sterility, introduce an ozonizer tube at a distance of 1 cm from the surface agar, then Petri dishes are placed in a dry-air thermostat, maintaining a temperature of 37 (± 1) ° С for 20 hours.
Сущность способа обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, включающий высевание культуры Staphylococcus aureus в стерильной зоне на среду в чашках Петри и обработку кислородсодержащим газом в течение 5 минут, при этом, культуру предварительно засевают с помощью бактериальной петли в пробирки с мясо-пептонным агаром, культивируют в термостате при температуре 37±2°С в аэробной среде в течение 24 часов, после чего осторожно смывают ее физиологическим раствором и доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 10 млрд по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, затем градуированной пипеткой высевают 0,1 мл полученной культуры на мясо-пептонный агар в чашки Петри, соблюдая стерильность вносят трубку озонатора на расстоянии 1 см от поверхности агара, затем чашки Петри помещают в термостат суховоздушный, поддерживающий температуру 37(±1)°С на 20 часов.The essence of the method of processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, including plating a culture of Staphylococcus aureus in a sterile zone on medium in Petri dishes and treating with an oxygen-containing gas for 5 minutes, while the culture is pre-seeded using a bacterial loop in peptone meat test tubes agar, cultivated in a thermostat at a temperature of 37 ± 2 ° C in an aerobic environment for 24 hours, after which it is carefully washed off with physiological saline and the concentration of microbial cells in 1 ml is adjusted to 10 billion according to the Tarasevich’s turbidity standard in a sterile test tube, then 0.1 ml of the obtained culture is inoculated into meat-peptone agar in Petri dishes using a graduated pipette, sterilizing, an ozonizer tube is introduced at a distance of 1 cm from the agar surface, then the Petri dishes are placed in a dry-air thermostat, supporting temperature 37 (± 1) ° С for 20 hours.
Краткое описание чертежей и их материаловA brief description of the drawings and their materials
На фиг. 1 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, пассажирование культуры Staphylococcus aureus на мясо-пептонный агар в пробирках.In FIG. 1 shows a method of processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, transferring a culture of Staphylococcus aureus to meat-peptone agar in test tubes.
На фиг. 2 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, посев культуры на мясо-пептонный агар.In FIG. Figure 2 shows a method of processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, sowing the culture on meat-peptone agar.
На фиг. 3 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, обработка кислородсодержащим газом культуры Staphylococcus aureus из портативного озонатора в стерильной зоне.In FIG. Figure 3 shows a method of treating a Staphylococcus aureus culture with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, and treating a Staphylococcus aureus culture with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer in a sterile zone.
На фиг. 4 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, результаты обработки кислородсодержащим газом Staphylococcus aureus в чашках Петри при 1 минуте.In FIG. Figure 4 shows a method for treating a Staphylococcus aureus culture with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer, the results of treating a Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas in Petri dishes at 1 minute.
На фиг. 5 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, результаты обработки кислородсодержащим газом Staphylococcus aureus в чашках Петри при 2 минутах.In FIG. Figure 5 shows a method for treating a Staphylococcus aureus culture with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer; the results of treating a Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas in Petri dishes at 2 minutes.
На фиг. 6 дан способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора, результаты обработки кислородсодержащим газом Staphylococcus aureus в чашке Петри при 5 минутах.In FIG. Figure 6 shows a method of treating a Staphylococcus aureus culture with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer; the results of treating a Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas in a Petri dish at 5 minutes.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Примеры конкретного выполнения способа обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора.Examples of a specific implementation of the method for processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer.
Культуру Staphylococcus aureus, выделили от больного животного с предварительным диагнозом «Стафилококкоз верхних дыхательных путей».The culture of Staphylococcus aureus was isolated from a sick animal with a preliminary diagnosis of Staphylococcosis of the upper respiratory tract.
Пример 1. Культуру предварительно засевают с помощью бактериальной петли в пробирки с мясо-пептонным агаром, культивируют в термостате при температуре 35±2°С в аэробной среде в течение 18 часов. Ресуспендируют культуру Staphylococcus aureus физиологическим раствором. В стерильной зоне пастеровской пипеткой набирают культуру (Рис. 1). Доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 5 млрд по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, затем градуированной пипеткой высевают 0,3 мл полученной культуры на мясо-пептонный агар в чашки Петри (Рис. 2) в стерильной зоне (между двумя горящими спиртовками). Подключают портативный озонатор (патент №2661232) к сети питания. Включают прибор. Приоткрывают чашку Петри, вносят трубку озонатора на расстоянии 3 см и производят круговые движения по всей поверхности в течение 1 минуты (Рис. 3). Обработанную кислородсодержащим газом чашку Петри помещают в термостат суховоздушный, поддерживающий температуру 30(±1)°С на 10 часов.Example 1. The culture is pre-seeded using a bacterial loop in test tubes with meat-peptone agar, cultivated in an incubator at a temperature of 35 ± 2 ° C in an aerobic environment for 18 hours. Resuspend the culture of Staphylococcus aureus with saline. In a sterile zone, a culture is harvested with a Pasteur pipette (Fig. 1). The concentration of microbial cells in 1 ml was adjusted to 5 billion according to the Tarasevich turbidity standard in a sterile test tube, then 0.3 ml of the obtained culture was inoculated onto a meat-peptone agar in Petri dishes (Fig. 2) in a sterile zone (between two burning alcohols) using a graduated pipette . Connect a portable ozonizer (patent No. 2661232) to the power network. Turn on the device. They open the Petri dish, introduce the ozonizer tube at a distance of 3 cm and make circular motions over the entire surface for 1 minute (Fig. 3). The oxygen-treated gas Petri dish is placed in a dry-air thermostat, maintaining a temperature of 30 (± 1) ° С for 10 hours.
Данный способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора не позволяет оказывать бактерицидного действия получаемого газа, насчитывается большое количество колоний (их количество составило 511 штук). Это объясняется высокой концентрацией микробных клеток (в 1 мл до 5 млрд) при низком содержании озона (массовой концентрацией озона на выходе менее 15 мг/куб.м; производительность по озону менее 1 г/час).This method of processing the culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer does not allow the bactericidal action of the resulting gas to be produced; there are a large number of colonies (their number was 511 pieces). This is due to the high concentration of microbial cells (in 1 ml up to 5 billion) with a low ozone content (mass concentration of ozone at the output less than 15 mg / cubic meter; ozone productivity less than 1 g / hour).
Пример 2. Проводят аналогично примера №1, но культивируют в термостате при температуре 36±2°C в аэробной среде в течение 20 часов, доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 7 млрд по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, затем градуированной пипеткой высевают 0,2 мл полученной культуры на мясо-пептонный агар в чашки Петри в стерильной зоне (между двумя горящими спиртовками). Вносят трубку озонатора на расстоянии 2 см и производят круговые движения по всей поверхности в течение 2 минут. Обработанную кислородсодержащим газом чашку Петри помещают в термостат суховоздушный, поддерживающий температуру 35(±1)°С на 15 часов.Example 2. Carried out analogously to example No. 1, but cultivated in a thermostat at a temperature of 36 ± 2 ° C in an aerobic environment for 20 hours, bring the concentration of microbial cells in 1 ml to 7 billion according to the standard Tarasevich turbidity in a sterile tube, then seeded with a graduated pipette 0.2 ml of the resulting culture on meat-peptone agar in Petri dishes in the sterile zone (between two burning alcohols). The ozonizer tube is introduced at a distance of 2 cm and circular motions are made over the entire surface for 2 minutes. Treated with oxygen-containing gas, the Petri dish is placed in a dry-air thermostat, maintaining a temperature of 35 (± 1) ° С for 15 hours.
В рассмотренном способе обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим тазом рост бактерий снизился, количество колоний уменьшилось, но не прекратилось (их количество составило 143 штуки). Это объясняется высокой концентрацией микробных клеток (в 1 мл до 7 млрд) и недостаточным временем воздействия кислородсодержащим газом, в результате, концентрация озона ниже минимально подавляющей концентрации (массовая концентрациея озона на выходе менее 33 мг/куб.м; производительность по озону менее 3 г/час).In the considered method of processing the culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing pelvis, bacterial growth decreased, the number of colonies decreased, but did not stop (their number was 143 pieces). This is due to the high concentration of microbial cells (in 1 ml to 7 billion) and the insufficient exposure time to an oxygen-containing gas, as a result, the ozone concentration is below the minimum inhibitory concentration (mass concentration of ozone at the exit is less than 33 mg / cubic meter; ozone productivity is less than 3 g /hour).
Пример 3. Проводят аналогично примера №1, но культивируют в термостате при температуре 37±2°С в аэробной среде в течение 24 часов, доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 10 млрд по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, затем градуированной пипеткой высевают 0,1 мл полученной культуры на мясо-пептонный агар в чашки Петри в стерильной зоне (между двумя горящими спиртовками). Вносят трубку озонатора на расстоянии 1 см и производят круговые движения по всей поверхности в течение 5 минут. Обработанную кислородсодержащим газом чашку Петри помещают в термостат суховоздушный, поддерживающий температуру 37(±1)°С на 20 часов.Example 3. Carried out analogously to example No. 1, but cultivated in a thermostat at a temperature of 37 ± 2 ° C in an aerobic environment for 24 hours, the concentration of microbial cells in 1 ml was adjusted to 10 billion according to the Tarasevich turbidity standard in a sterile tube, then seeded with a graduated pipette 0.1 ml of the obtained culture on meat-peptone agar in Petri dishes in the sterile zone (between two burning spirits). The ozonizer tube is introduced at a distance of 1 cm and circular movements are made over the entire surface for 5 minutes. The oxygen-treated gas Petri dish is placed in a dry-air thermostat, maintaining a temperature of 37 (± 1) ° С for 20 hours.
Данный способ обработки культуры Staphylococcus aureus кислородсодержащим газом из портативного озонатора позволяет оказывать бактерицидное действие на микроорганизмы (бактерицидная эффективность составила 99,9%). Это объясняется массовой концентрацией озона на выходе не менее 70 мг/куб.м; производительность по озону не менее 8 г/час.This method of processing a culture of Staphylococcus aureus with an oxygen-containing gas from a portable ozonizer allows you to have a bactericidal effect on microorganisms (bactericidal efficiency was 99.9%). This is due to the mass concentration of ozone at the output of at least 70 mg / m3; ozone productivity of at least 8 g / hour.
Таким образом, пример 3 является оптимальным. Рассмотренный способ способствует бактерицидному действию кислородсодержащего газа, вырабатываемого портативным озонатором в условиях «in vitro» на примере Staphylococcus aureus.Thus, example 3 is optimal. The considered method promotes the bactericidal action of an oxygen-containing gas produced by a portable ozonizer in vitro using the example of Staphylococcus aureus.
Предлагаемое изобретение по сравнению с другими способами физической стерилизации имеет следующие преимущества:The invention in comparison with other methods of physical sterilization has the following advantages:
- отсутствие роста культуры Staphylococcus aureus на мясо-пептоном агаре в чашках Петри;- the lack of growth of the culture of Staphylococcus aureus on meat peptone agar in Petri dishes;
- меньшее время стерилизации;- shorter sterilization time;
- нет необходимости в удалении следов стерилизующего агента с инструментов и оборудования промывкой в стерильной воде или длительной аэрацией стерильным воздухом;- there is no need to remove traces of the sterilizing agent from instruments and equipment by washing in sterile water or prolonged aeration with sterile air;
- нет необходимости в утилизации реагентов.- no need for disposal of reagents.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018128262A RU2709720C1 (en) | 2018-08-01 | 2018-08-01 | Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018128262A RU2709720C1 (en) | 2018-08-01 | 2018-08-01 | Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2709720C1 true RU2709720C1 (en) | 2019-12-19 |
Family
ID=69006652
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018128262A RU2709720C1 (en) | 2018-08-01 | 2018-08-01 | Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2709720C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2802662C1 (en) * | 2023-01-11 | 2023-08-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for pseudomonas aeruginosa biofilm destruction by a combination of ozone with hydrogen peroxide |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2554743C1 (en) * | 2014-03-04 | 2015-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный аграрный университет" | Method for livestock houses disinfection from staphylococcosis agents |
| RU2657421C2 (en) * | 2016-11-15 | 2018-06-13 | Луиза Андреевна Очирова | Method for disinfection of objects and tools intended for preventive and treatment manipulations |
-
2018
- 2018-08-01 RU RU2018128262A patent/RU2709720C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2554743C1 (en) * | 2014-03-04 | 2015-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный аграрный университет" | Method for livestock houses disinfection from staphylococcosis agents |
| RU2657421C2 (en) * | 2016-11-15 | 2018-06-13 | Луиза Андреевна Очирова | Method for disinfection of objects and tools intended for preventive and treatment manipulations |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KOWALSKI W.J. et al, "Bactericidal effects of high airborne ozone concentrations on Escherichia coli and Staphylococcus aureus"//Ozon science & engineering, 1998, vol.20, pp. 205-221. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2802662C1 (en) * | 2023-01-11 | 2023-08-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for pseudomonas aeruginosa biofilm destruction by a combination of ozone with hydrogen peroxide |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cunningham et al. | Effect of temperature on the bactericidal action of sodium hypochlorite endodontic irrigant | |
| CN104189898B (en) | P. aeruginosa bacteria vaccine and preparation method thereof | |
| RU69405U1 (en) | MULTIFUNCTIONAL LOW TEMPERATURE GAS STERILIZER | |
| CN101405013A (en) | Methods of treating or preventing peritonitis with oxidative reductive potential water solution | |
| RU2709720C1 (en) | Method of treating staphylococcus aureus culture with oxygen-containing gas from portable ozoniser | |
| Patenall et al. | Limiting Pseudomonas aeruginosa biofilm formation using cold atmospheric pressure plasma | |
| Schulz et al. | Repetitive pneumoperitoneum with ozonized oxygen as a preventive in lethal polymicrobial sepsis in rats | |
| CN205953589U (en) | Reinforcing ultraviolet water treatment facilities | |
| CN107473327A (en) | The method that Escherichia coli are removed using low temperature plasma | |
| RU2814268C1 (en) | Physiological solution ozonation method | |
| CN210796062U (en) | Sterilization device for aquaculture | |
| Ghosh et al. | Sterilization and disinfection of extracted human teeth for institutional use | |
| Matsumoto et al. | Safe standard of aeration for ethylene oxide sterilized supplies | |
| RU2657421C2 (en) | Method for disinfection of objects and tools intended for preventive and treatment manipulations | |
| Fuliful et al. | Cold Atmospheric Pressure Plasma Apparatus for Use in Treatment of Fungal Skin Infections | |
| RU2725136C1 (en) | Method for simulating an intra-abdominal pseudomonas infection process | |
| Alexander et al. | Mechanism of emergence of resistance to streptomycin of H. pertussis and H. parapertussis during treatment with this antibiotic | |
| RU2376365C1 (en) | Method for cultivation of tuberculosis mycobacteria | |
| Hussaini et al. | Micro Oxidation Sterilization by Non-Thermal Plasma Technology. | |
| Sidash et al. | Effect of ultrasound on s. epidermidis museum culture | |
| RU2265050C1 (en) | Method for stimulation of macrophage phagocytic activity | |
| RU2798306C1 (en) | Nozzle-compressor on the uv irradiator for directing the flow of ionized air from the body of the uv irradiator into the wound or cavity through the drainage system | |
| CN109550048B (en) | Application of phenol safranine-mediated sonodynamic antibacterial chemotherapy in inhibiting activity of staphylococcus aureus | |
| Koval | DETERMINATION OF THE RATE CONSTANT OF MICROORGANISMS DESTRUCTION AFTER ULTRASOUND WATER TREATMENT AND DIFFERENT GASES ACTION | |
| KR20160127600A (en) | Device for sterilization of culture solution for hydroponics and method for sterilizing thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200802 |