RU2708076C1 - Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors - Google Patents
Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors Download PDFInfo
- Publication number
- RU2708076C1 RU2708076C1 RU2019128377A RU2019128377A RU2708076C1 RU 2708076 C1 RU2708076 C1 RU 2708076C1 RU 2019128377 A RU2019128377 A RU 2019128377A RU 2019128377 A RU2019128377 A RU 2019128377A RU 2708076 C1 RU2708076 C1 RU 2708076C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- octreotide
- fmoc
- dpah
- technetium
- lys
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/083—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being octreotide or a somatostatin-receptor-binding peptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F13/00—Compounds containing elements of Groups 7 or 17 of the Periodic System
- C07F13/005—Compounds without a metal-carbon linkage
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
Abstract
Description
Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно к получению радиофармацевтических лекарственных препаратов медицинского назначения для радионуклидной диагностики нейроэндокринных опухолей.The invention relates to the field of pharmaceutical chemistry, namely to the production of radiopharmaceutical pharmaceuticals for medical purposes for the radionuclide diagnosis of neuroendocrine tumors.
Известен способ получения комплекса технеция-99м с октреотидом для диагностики нейроэндокринных опухолей [RU 2655392 C1, МПК (2006.01) C07K 7/06, C07F 13/00, A61K 51/08, A61K 103/10, опубл. 28.05.2018], выбранный в качестве прототипа, включающий модификацию октреотида хелатирующим агентом сукцинимид-1-ил 6-(бис(пиридин-2-илметил)амино)гексаноат в среде диметилформамида в присутствии триэтиламина при комнатной температуре в течение не менее 24 ч при перемешивании, очистку полученного раствора полупрепаративно, используя жидкостную хроматографию, проведение методом лиофилизации отгонки летучих растворителей и высушивания, добавление к DPAH-модифицированному октреотиду, цитрата натрия и олова (II) дихлорида дигидрата, смешивание их, получение жидкого реагента, который стерилизуют фильтрацией и лиофилизируют с предварительной заморозкой до -50°С, добавление к полученному лиофилизату натрия пертехнетата с концентрацией технеция-99м 1 ГБк/мл и инкубирование в течение не менее 30 мин при комнатной температуре. A known method of producing a complex of technetium-99m with octreotide for the diagnosis of neuroendocrine tumors [RU 2655392 C1, IPC (2006.01) C07K 7/06, C07F 13/00, A61K 51/08, A61K 103/10, publ. 05/28/2018], selected as a prototype, including the modification of octreotide with a chelating agent succinimid-1-yl 6- (bis (pyridin-2-ylmethyl) amino) hexanoate in dimethylformamide in the presence of triethylamine at room temperature for at least 24 hours at stirring, purification of the resulting solution in a semi-preparative manner using liquid chromatography, lyophilization of the distillation of volatile solvents and drying, adding to the DPAH-modified octreotide, sodium citrate and tin (II) dichloride dihydrate, mixing them, obtaining a liquid reagent, which is sterilized by filtration and lyophilized with preliminary freezing to -50 ° C, adding pertechnetate to the obtained lyophilizate with a concentration of technetium-
Выход DPAH-модифицированного октреотида (DPAH-октреотида) составляет 60,15%, а радиохимическая чистота готового продукта (комплекса технеция-99м с DPAH-октреотидом) составляет 96,2%.The yield of DPAH-modified octreotide (DPAH-octreotide) is 60.15%, and the radiochemical purity of the finished product (technetium-99m complex with DPAH-octreotide) is 96.2%.
При получении DPAH-модифицированного октреотида проводится прямая модификация октреотида хелатирующим агентом путем образования амидной связи. В данном случае реакция не является специфичной, поскольку в структуре октреотида можно выделить помимо целевой амино-группы D-фенилаланина, также амино-группу L-лизина, которая более доступна для образования амидной связи. Следовательно, невысокий выход в данном способе объясняется образованием побочного продукта.Upon receipt of a DPAH-modified octreotide, direct modification of octreotide with a chelating agent is carried out by forming an amide bond. In this case, the reaction is not specific, since in the structure of octreotide, in addition to the target amino group of D-phenylalanine, the amino group of L-lysine, which is more accessible for the formation of an amide bond, can be isolated. Therefore, the low yield in this method is explained by the formation of a by-product.
При получении комплекса технеция-99м с DPAH-модифицированным октреотидом для диагностики нейроэндокринных опухолей при взаимодействии семивалентного технеция-99м с двухвалентным оловом в водной среде происходит образование технеция четырех и пятивалентого, для прочного связывания которого пригодны хелатные группы N2S2,, N3S1, N1S3, и т.д. Тридентантный (N3) хелатирующий агент DPAH не способен прочно связывать технеций-99м указанной валентности, и комплекс разрушается при разбавлении его водой, физиологическим раствором, буферными растворами и т.д., что делает его применение ограниченным для биологических исследований in vitro/ in vivo по сроку годности.Upon receipt of a complex of technetium-99m with DPAH-modified octreotide for the diagnosis of neuroendocrine tumors in the interaction of heptavalent technetium-99m with divalent tin in an aqueous medium, the formation of technetium four and pentavalent, for strong binding of which the chelating groups N 2 S 2 , N 3 S are suitable 1, N 1 S 3, etc. The tridentant (N 3 ) chelating agent DPAH is not able to firmly bind technetium-99m of the indicated valency, and the complex is destroyed when diluted with water, saline, buffer solutions, etc., which makes its use limited for biological studies in vitro / in vivo by expiration date.
Технический результат, на решение которого направлено предлагаемое изобретение, заключается в разработке способа получения комплекса технеция-99м для диагностики нейроэндокринных опухолей, позволяющего повысить радиохимическую чистоту получаемого продукта.The technical result, the solution of which the invention is directed, is to develop a method for producing a technetium-99m complex for the diagnosis of neuroendocrine tumors, which allows to increase the radiochemical purity of the resulting product.
Предложенный способ получения комплекса технеция-99м с производным октреотида для диагностики нейроэндокринных опухолей, также как в прототипе, включает модификацию октреотида хелатирующим агентом сукцинимид-1-ил-6-(бис(пиридин-2-илметил)амино)гексаноатом в среде диметилформамида в присутствии триэтиламина при перемешивании при комнатной температуре, очистку полученного раствора полупрепаративно, используя жидкостную хроматографию, проведение методом лиофилизации отгонки летучих растворителей и высушивание, связывание полученного реагента с технецием-99м с активностью 1 ГБк и инкубирование.The proposed method for producing a complex of technetium-99m with an octreotide derivative for the diagnosis of neuroendocrine tumors, as in the prototype, involves the modification of octreotide with a succinimid-1-yl-6- (bis (pyridin-2-ylmethyl) amino) hexanoate chelating agent in the presence of dimethylformamide in the presence of triethylamine with stirring at room temperature, purification of the resulting solution semi-preparatively using liquid chromatography, lyophilization of the distillation of volatile solvents and drying, binding of the obtained reagent with technetium-99m with an activity of 1 GBq and incubation.
Согласно изобретению сначала смешивают фосфатно-буферный раствор октреотида с рН 7,5–9,0 и раствор ацетонитрила, содержащий 9-флуоренилметилоксикарбонилхлорид (Fmoc-Cl), в мольном соотношении 1:1–1,2, перемешивают в течение 15–60 мин при температуре 20–60°С, проводят очистку полупрепаративно жидкостной хроматографией. Фракции, соответствующие Fmoc-(L-Lys)-октреотиду, объединяют и лиофилизируют. Затем полученный Fmoc-(L-Lys)-октреотид растворяют в диметилформамиде и добавляют сукцинимид-1-ил-6-(бис(пиридин-2-илметил)амино)гексаноат в присутствии триэтиламина, перемешивают и инкубируют в течение 6–10 часов, проводят очистку полупрепаративно жидкостной хроматографией. Фракции, соответствующие DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотиду, объединяют и лиофилизируют. Полученный DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотид гидролизуют, растворяя его в смеси диметилформамида и пиперидина в течение не менее 30 мин при комнатной температуре, проводят очистку полупрепаративно жидкостной хроматографией и лиофилизируют. К полученному DPAH-(D-Phe)-октреотиду добавляют раствор карбонильного технеция-99м с активностью технеция-99м 1 ГБк. Смесь инкубируют при 40°С в течение 60 мин, проводят твердофазную экстракцию, элюируют этанолом, разбавляют раствором натрия хлорида. According to the invention, a phosphate-buffered solution of octreotide with a pH of 7.5–9.0 is first mixed with an acetonitrile solution containing 9-fluorenylmethyloxycarbonyl chloride (Fmoc-Cl) in a molar ratio of 1: 1–1.2, and stirred for 15-60 minutes at a temperature of 20-60 ° C, purification is carried out by semi-preparative liquid chromatography. The fractions corresponding to the Fmoc- (L-Lys) octreotide are combined and lyophilized. Then the obtained Fmoc- (L-Lys) octreotide is dissolved in dimethylformamide and succinimid-1-yl-6- (bis (pyridin-2-ylmethyl) amino) hexanoate is added in the presence of triethylamine, stirred and incubated for 6-10 hours, purification is carried out by semi-liquid chromatography. Fractions corresponding to DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide are combined and lyophilized. The obtained DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide is hydrolyzed by dissolving it in a mixture of dimethylformamide and piperidine for at least 30 minutes at room temperature, purification is carried out by semi-preparative liquid chromatography and lyophilized. To the obtained DPAH- (D-Phe) octreotide is added a solution of carbonyl technetium-99m with an activity of technetium-
Полученный комплекс технеция-99м с DPAH-октреотидом имеет следующую формулу The resulting complex of technetium-99m with DPAH-octreotide has the following formula
DPAH-октреотид синтезируют с применением подхода Fmoc-защиты нецелевой аминогруппы L-лизина. Оптимальным для достижения высоких выходов является на первой стадии использование сред с рН 7,5-9,0 и мольного соотношения октреотида и реагентов 1:1–1,2 поскольку отклонение этих параметров приводит к защите другой целевой амино-группы в D-фенилаланине. На второй стадии оптимальным является время реакции 6–10 часов для образования амидной связи, уменьшение времени реакции приводит к снижению выхода целевого продукта, увеличение времени реакции существенно не влияет на выход.DPAH octreotide is synthesized using the Fmoc protection approach of the non-targeted amino group of L-lysine. It is optimal to achieve high yields at the first stage using media with a pH of 7.5–9.0 and a molar ratio of octreotide and reagents of 1: 1–1.2, since the deviation of these parameters leads to the protection of another target amino group in D-phenylalanine. At the second stage, the reaction time of 6–10 hours is optimal for the formation of an amide bond, a decrease in the reaction time leads to a decrease in the yield of the target product, and an increase in the reaction time does not significantly affect the yield.
Использование карбонильного технеция-99-м [99mTc(H2O)3(CO)3]+способствует образованию прочных связей в полученном комплексе, что перспективно для широкого использования при производстве лекарственных радиофармпрепартов.The use of carbonyl technetium-99-m [ 99m Tc (H 2 O) 3 (CO) 3 ] + promotes the formation of strong bonds in the resulting complex, which is promising for widespread use in the manufacture of medicinal radiopharmaceuticals.
Предлагаемый способ получения комплекса технеция-99м с производным октреотида для диагностики нейроэндокринных опухолей позволяет получать DPAH-модифицированный октреотид с выходом до 90,2%, а также стабильный комплекс технеция-99м с производным октреотида (готовый продукт) с высокой радиохимической чистотой - 98%.The proposed method for producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for the diagnosis of neuroendocrine tumors allows to obtain a DPAH-modified octreotide with a yield of up to 90.2%, as well as a stable complex of technetium-99m with an octreotide derivative (finished product) with high radiochemical purity - 98%.
Технический результат предлагаемого изобретения состоит в повышении радиохимической чистоты комплекса технеция-99м с DPAH-модифицированным октреотидом. Кроме того, повышен выход DPAH-модифицированного октреотида, что позволяет использовать его в большем количестве для получения комплекса технеция-99м, что в свою очередь приводит к удешевлению получаемого продукта.The technical result of the invention consists in increasing the radiochemical purity of the complex of technetium-99m with DPAH-modified octreotide. In addition, the yield of DPAH-modified octreotide is increased, which allows it to be used in larger quantities to obtain a technetium-99m complex, which in turn leads to a cheaper product.
На фиг. 1 представлена ВЭЖ-хроматограмма Fmoc-(L-Lys)-октреотида.In FIG. 1 shows an HPLC chromatogram of an Fmoc- (L-Lys) octreotide.
На фиг. 2 показан масс-спектр полученного Fmoc-(L-Lys)-октреотида.In FIG. 2 shows the mass spectrum of the obtained Fmoc- (L-Lys) octreotide.
На фиг. 3 представлена вэж хроматограмма DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.In FIG. Figure 3 shows a HPLC chromatogram of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
На фиг. 4 показан масс-спектр (M+H+) DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.In FIG. 4 shows the mass spectrum of (M + H + ) DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
На фиг. 5 представлена вэж хроматограмма DPAH-(D-Phe)-октреотида.In FIG. 5 shows a HPLC chromatogram of DPAH- (D-Phe) octreotide.
На фиг. 6 показан масс-спектр DPAH-(D-Phe)-октреотида.In FIG. 6 shows the mass spectrum of DPAH- (D-Phe) octreotide.
Пример 1. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 1. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
9,8⋅10-3 ммоль (10 мг) октреотида (производитель АО «Фарм-синтез») растворили в 1 мл 100 ммоль фосфатно-буферного раствора (рН=8,4), добавили 10,8⋅10-3 ммоль (2,8 мг) 9-флуоренилметилоксикарбонилхлорида (Fmoc-Cl, Arcos organics) в 1 мл ацетонитрила, перемешивали и инкубировали при температуре 60°С в течение 30 минут. Контроль за ходом реакции осуществляли по аналитической ВЭЖ-хроматограмме, представленной на фиг. 1 (tR = 19,119 мин, система ВЭЖХ Ultimate 3000, колонка С18(2) Luna 5 мкм, 100 А°, 250×4.6 мм, градиент концентрации: 0 мин 100% A (0% B), 5 мин 80% A (20% B), 10 мин 65% A (35% B), 15 мин 50% A (50% B), 25 мин 20% A (80% B), 30 мин 0% A (100% B), 32 мин 95% A (5% B), где система А – 0,1% TFA и система Б – 0,1% TFA/ацетонитрил, скорость потока 1 мл/мин). Очистку продукта проводили полупрепаративной ВЭЖХ (система ВЭЖХ Ultimate 3000, колонка С18(2) Luna 10 мкм, 100 А°, 250×10 мм, градиент концентрации 0 мин 100% A (0% B), 5 мин 80% A (20% B), 10 мин 65% A (35% B), 15 мин 50% A (50% B), 25 мин 20% A (80% B), 30 мин 0% A (100% B), 32 мин 95% A (5% B), где система А – 0,1% TFA и система Б – 0,1% TFA/ацетонитрил, скорость потока 12 мл/мин). Фракции, соответствующие Fmoc-(L-Lys)-октреотида, объединили и лиофилизировали. Выход продукта после очистки составил 90,1 %, m/z 1241,5. Масс-спектр Fmoc-(L-Lys)-октреотида представлен на фиг. 2.9.8 × 10 -3 mmol (10 mg) of octreotide (manufactured by Pharm-Synthesis JSC) was dissolved in 1 ml of 100 mmol of phosphate-buffered solution (pH = 8.4), 10.8 × 10 -3 mmol was added ( 2.8 mg) of 9-fluorenylmethyloxycarbonyl chloride (Fmoc-Cl, Arcos organics) in 1 ml of acetonitrile, stirred and incubated at 60 ° C for 30 minutes. The progress of the reaction was monitored by analytical HPLC chromatogram shown in FIG. 1 (t R = 19.119 min, Ultimate 3000 HPLC system, C18 (2) Luna column 5 μm, 100 A °, 250 × 4.6 mm, concentration gradient: 0
Пример 2. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 2. Synthesis of Fmoc- (L-Lys)-octreotide.
Реакционную смесь готовили также, как и в примере 1 с тем отличием, что добавляли Fmoc-Cl в количестве 12,7⋅10-3 ммоль (3,3 мг). Выход продукта составил 71,1%.The reaction mixture was prepared as in Example 1, with the difference that Fmoc-Cl was added in an amount of 12.7 x 10 -3 mmol (3.3 mg). The product yield was 71.1%.
Пример 3. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 3. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили также, как и в примере 1 с тем отличием, что добавляли Fmoc-Cl в количестве 9,8⋅10-3 ммоль (2,6 мг). Выход продукта составил 84,2 %.The reaction mixture was prepared as in Example 1, with the difference that Fmoc-Cl was added in an amount of 9.8 × 10 -3 mmol (2.6 mg). The product yield was 84.2%.
Пример 4. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 4. Synthesis of Fmoc- (L-Lys)-octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что использовали фосфатно-буферный раствор с рН=7,5. Выход продукта составил 85,2%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 1, with the difference that a phosphate-buffered solution with pH = 7.5 was used. The product yield was 85.2%.
Пример 5. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 5. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что использовали фосфатно-буферный раствор с рН=9,0. Выход продукта составил 90,2%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 1, with the difference that a phosphate-buffered solution with pH = 9.0 was used. The product yield was 90.2%.
Пример 6. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 6. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что смесь перемешивали и инкубировали при температуре 20°С. Выход продукта составил 85,1%.The reaction mixture was prepared in the same way as in example 1 with the difference that the mixture was stirred and incubated at a temperature of 20 ° C. The product yield was 85.1%.
Пример 7. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 7. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что смесь перемешивали и инкубировали при температуре 40°С. Выход продукта составил 89,1%.The reaction mixture was prepared in the same way as in example 1 with the difference that the mixture was stirred and incubated at a temperature of 40 ° C. The product yield was 89.1%.
Пример 8. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 8. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что смесь перемешивали и инкубировали 15 минут. Выход продукта составил 75,2 %.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 1, with the difference that the mixture was stirred and incubated for 15 minutes. The product yield was 75.2%.
Пример 9. Синтез Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 9. Synthesis of Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 1 с тем отличием, что смесь перемешивали и инкубировали 45 минут. Выход продукта составил 90,1%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 1, with the difference that the mixture was stirred and incubated for 45 minutes. The product yield was 90.1%.
Пример 10. Синтез DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 10. Synthesis of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
4⋅10-3 ммоль (5 мг) Fmoc-(L-Lys)-октреотида растворили в 1 мл диметилформамида, добавили 10 мкл триэтиламина, 8⋅10-3 ммоль (3,3 мг) сукцинимид-1-ил-6-(бис(пиридин-2-илметил)амино)гексаноата, перемешивали и инкубировали при комнатной температуре 6 часов. Контроль за ходом реакции осуществляли по аналитической ВЭЖ-хроматограмме, представленной на фиг. 3 (tR = 19,157 мин, условия примера 1). Очистку продукта проводили полупрепаративной ВЭЖХ (условия примера 1). Фракции, соответствующие DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотиду, объединяли и лиофилизировали. Выход продукта после очистки составил 92,2% (чистота более 99%), m/z 1536,3. Масс-спектр (M+H+) DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида представлен на фиг. 4.4⋅10 -3 mmol (5 mg) Fmoc- (L-Lys) octreotide was dissolved in 1 ml of dimethylformamide was added 10 .mu.l of triethylamine, 8⋅10 -3 mmoles (3.3 mg), succinimide-1-yl-6- (bis (pyridin-2-ylmethyl) amino) hexanoate was stirred and incubated at room temperature for 6 hours. The progress of the reaction was monitored by analytical HPLC chromatogram shown in FIG. 3 (t R = 19.157 min, the conditions of example 1). Purification of the product was carried out by semi-preparative HPLC (conditions of example 1). Fractions corresponding to DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide were combined and lyophilized. The product yield after purification was 92.2% (purity more than 99%), m / z 1536.3. The mass spectrum of (M + H + ) DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide is shown in FIG. 4.
Пример 11. Синтез DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 11. Synthesis of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 10 с тем отличием, что время инкубации составило 8 часов. Выход продукта составил 92,0%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 10 with the difference that the incubation time was 8 hours. The product yield was 92.0%.
Пример 12. Синтез DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 12. Synthesis of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 10 с тем отличием, что время инкубации составило 10 часов. Выход продукта составил 92,0%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 10 with the difference that the incubation time was 10 hours. The product yield was 92.0%.
Пример 13. Синтез DPAH-октреотида путем гидролиза DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 13. Synthesis of DPAH-octreotide by hydrolysis of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
2,6⋅10-3 ммоль (4 мг) DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида растворили в 400 мкл диметилформамида, добавили 100 мкл пиперидина, смесь инкубировали при комнатной температуре 30 мин. Контроль за ходом реакции осуществляли по аналитической ВЭЖ-хроматограмме, представленной на фиг. 5 (tR = 14,300 мин, условия примера 1). Очистку продукта проводили полупрепаративной ВЭЖХ (условия примера 1). Фракции, соответствующие DPAH-(D-Phe)-октреотиду, объединяли и лиофилизировали. Выход продукта после очистки составил 91,2%, m/z 1314,4. Масс-спектр DPAH-(D-Phe)-октреотида представлен на фиг. 6.2.6⋅10 -3 mmol (4 mg) DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide was dissolved in 400 μl of dimethylformamide, 100 μl of piperidine was added, the mixture was incubated at room temperature for 30 minutes. The progress of the reaction was monitored by analytical HPLC chromatogram shown in FIG. 5 (t R = 14,300 min, conditions of Example 1). Purification of the product was carried out by semi-preparative HPLC (conditions of example 1). Fractions corresponding to DPAH- (D-Phe) octreotide were combined and lyophilized. The product yield after purification was 91.2%, m / z 1314.4. The mass spectrum of DPAH- (D-Phe) octreotide is shown in FIG. 6.
Пример 14. Синтез DPAH-октреотида путем гидролиза DPAH-(D-Phe)-Fmoc-(L-Lys)-октреотида.Example 14. Synthesis of DPAH-octreotide by hydrolysis of DPAH- (D-Phe) -Fmoc- (L-Lys) octreotide.
Реакционную смесь готовили так же, как и в примере 19 с тем отличием, что время инкубации составило 45 минут. Выход продукта составил 91,2%.The reaction mixture was prepared in the same manner as in Example 19 with the difference that the incubation time was 45 minutes. The product yield was 91.2%.
Пример 15. Получение комплекса технецием-99м [99mTc(H2O)3(CO)3]+ с DPAH-октреотидом.Example 15. Obtaining a complex of technetium-99m [ 99m Tc (H 2 O) 3 (CO) 3 ] + with DPAH-octreotide.
Во флакон, содержащий 100 мкг DPAH-октреотида, полученного в примере 13, добавляли 1 мл раствора карбонильного технеция-99м [99mTc(H2O)3(CO)3]+ активностью 1 ГБк, смесь инкубировали при 40°С в течение 60 мин. Очистку проводили, используя картридж Sep-Pak C18 (360 мг), предварительно промытый 10 мл этанола, 10 мл воды; полученный комплекс технеция-99м с DPAH-(D-Phe)-октреотидом (DPAH-модифицированным октреотидом) элюировали 1 мл этанола и разбавляли 9 мл 0,9% раствора натрия хлорида. In a vial containing 100 μg of DPAH-octreotide obtained in Example 13, 1 ml of a solution of carbonyl technetium-99m [ 99m Tc (H 2 O) 3 (CO) 3 ] + with an activity of 1 GBq was added, the mixture was incubated at 40 ° C for 60 min Purification was performed using a Sep-Pak C18 cartridge (360 mg), pre-washed with 10 ml of ethanol, 10 ml of water; the resulting technetium-99m complex with DPAH- (D-Phe) octreotide (DPAH-modified octreotide) was eluted with 1 ml of ethanol and diluted with 9 ml of 0.9% sodium chloride solution.
Радиохимическая чистота комплекса технеция-99м с DPAH-модифицированным октреотидом составила 98,0%.The radiochemical purity of the technetium-99m complex with DPAH-modified octreotide was 98.0%.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019128377A RU2708076C1 (en) | 2019-09-10 | 2019-09-10 | Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019128377A RU2708076C1 (en) | 2019-09-10 | 2019-09-10 | Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2708076C1 true RU2708076C1 (en) | 2019-12-04 |
Family
ID=68836520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019128377A RU2708076C1 (en) | 2019-09-10 | 2019-09-10 | Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2708076C1 (en) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ337303A (en) * | 1997-04-25 | 2000-12-22 | Mallinckrodt Inc | Method for the preparation of facial metal tricarbonyl compounds and their use in the labelling of biologically active substrates |
| RU2294897C2 (en) * | 2005-02-28 | 2007-03-10 | Государственное унитарное предприятие Научно-производственное объединение "Радиевый институт им. В.Г. Хлопина" | METHOD OF PREPARING WATER-SOLUBLE CARBONYL COMPLEX OF SHORT-LIVING TECHNETIUM-99m |
| RU2537175C2 (en) * | 2013-03-26 | 2014-12-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Method for producing radioimmune preparation for diagnosing and treating oncological diseases |
| RU2655392C1 (en) * | 2017-03-02 | 2018-05-28 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | METHOD OF OBTAINING THE TECHNETIUM-99m COMPLEX WITH OCTREOTIDE FOR DIAGNOSING OF NEUROENDOCRINE TUMORS |
-
2019
- 2019-09-10 RU RU2019128377A patent/RU2708076C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ337303A (en) * | 1997-04-25 | 2000-12-22 | Mallinckrodt Inc | Method for the preparation of facial metal tricarbonyl compounds and their use in the labelling of biologically active substrates |
| RU2294897C2 (en) * | 2005-02-28 | 2007-03-10 | Государственное унитарное предприятие Научно-производственное объединение "Радиевый институт им. В.Г. Хлопина" | METHOD OF PREPARING WATER-SOLUBLE CARBONYL COMPLEX OF SHORT-LIVING TECHNETIUM-99m |
| RU2537175C2 (en) * | 2013-03-26 | 2014-12-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Method for producing radioimmune preparation for diagnosing and treating oncological diseases |
| RU2655392C1 (en) * | 2017-03-02 | 2018-05-28 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | METHOD OF OBTAINING THE TECHNETIUM-99m COMPLEX WITH OCTREOTIDE FOR DIAGNOSING OF NEUROENDOCRINE TUMORS |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU700772B2 (en) | Peptide derived radionuclide chelators | |
| Shetty et al. | Stable aluminium fluoride chelates with triazacyclononane derivatives proved by X-ray crystallography and 18 F-labeling study | |
| JP3036602B2 (en) | Technetium-99m labeled peptide for imaging | |
| US5183653A (en) | Boronic acid adducts of metal dioxime complexes useful in labelling proteins and other amine-containing compounds | |
| CN109438517B (en) | Complex of bifunctional linking agent coordinated with carbonyl metal core and preparation method thereof | |
| JP2000515514A (en) | Analogous compounds of radiometal element binding peptides | |
| JPH06503352A (en) | Technetium-99m labeled polypeptide for imaging | |
| EP0831938B1 (en) | Radiolabeled peptide compositions for site-specific targeting | |
| CN111228521B (en) | Dar2 polypeptide radiopharmaceutical and preparation method thereof | |
| JP3397338B2 (en) | Polypeptides | |
| WO2013081091A1 (en) | Drug for producing radiolabeled polypeptide reducing non-specific renal accumulation | |
| KR20050033067A (en) | Radioactively labelled amino acid analogues, their preparation and use | |
| WO2001077122A1 (en) | Ternary ligand complexes useful as radiopharmaceuticals | |
| Mundwiler et al. | Picolylamine-methylphosphonic acid esters as tridentate ligands for the labeling of alcohols with the fac-[M (CO) 3]+ core (M= 99mTc, Re): synthesis and biodistribution of model compounds and of a 99mTc-labeled cobinamide | |
| RU2708076C1 (en) | Method of producing a technetium-99m complex with an octreotide derivative for diagnosing neuroendocrine tumors | |
| JPH11504002A (en) | Hydroxyalkylphosphine compounds for use as diagnostics and therapeutics and methods for their preparation | |
| JP5481673B2 (en) | Radiolabeled drug | |
| JPH0381295A (en) | Chelate derivative as atrial sodium diuretic factor (anf) | |
| Shim et al. | Development of a new thiol-reactive prosthetic group for site-specific labeling of biomolecules with radioactive iodine | |
| CA2232315A1 (en) | Bifunctional sulfide-containing sulfonamide-chelating agents such as s2 ny for radioactive isotopes | |
| Suzuki et al. | Assessment of macrocyclic triamine ligands as synthons for organometallic 99mTc radiopharmaceuticals | |
| CN115974962A (en) | FAP (FAP-associated protein) targeted probe as well as preparation method and application thereof | |
| RU2655392C1 (en) | METHOD OF OBTAINING THE TECHNETIUM-99m COMPLEX WITH OCTREOTIDE FOR DIAGNOSING OF NEUROENDOCRINE TUMORS | |
| JP5604680B2 (en) | Radiolabeled drug | |
| Suzuki et al. | Synthesis and evaluation of a para-carboxylated benzyl-DOTA for labeling peptides and polypeptides |