RU2706405C1

RU2706405C1 - Kit for obtaining, storage and transportation of dry blood samples or blood serum of birds for control of vaccination efficiency

Info

Publication number: RU2706405C1
Application number: RU2018143019A
Authority: RU
Inventors: Николай Юрьевич Саушкин; Александр Павлович Осипов; Жанна Васильевна Самсонова; Ксения Вячеславовна Серебренникова
Original assignee: Общество С Ограниченной Ответственностью "Университест"
Priority date: 2018-12-05
Filing date: 2018-12-05
Publication date: 2019-11-18

Abstract

FIELD: cattle breeding.

SUBSTANCE: invention relates to poultry farming. Disclosed is a kit for obtaining, storage and transportation of dry blood samples or blood serum of industrially grown poultry for further laboratory analysis in order to control the vaccination. Kit comprises box or mail pack, at least one tightly closed plastic container with strip holder, in which there is sorption material for application of blood sample or bird's serum, made in form of narrow rectangular strips of sorption material, as well as containing desiccant, at least one device for skin piercing, gloves, at least one package of antiseptic, as well as instructions to kit.

EFFECT: invention provides simplified procedure.

3 cl

Description

Техническое решение относится к области ветеринарной лабораторной диагностики, в частности к устройствам для взятия, хранения и транспортировки проб крови и сыворотки крови птиц преимущественно при их промышленном выращивании с целью контроля эффективности иммунизации птиц против различных инфекционных заболеваний путем последующего проведения анализа инструментальными методами. Большое количество птицы, сосредоточенное на ограниченной территории, требует постоянного соблюдения ветеринарно-санитарного режима и проведения профилактических мероприятий для предотвращения заноса и распространения инфекционных заболеваний различной этиологии, среди которых наиболее опасными являются респираторные заболевания птицы, сопровождающиеся быстрым распространением болезни на значительном поголовье, независимо от условий его содержания. Вакцинопрофилактика является одним из наиболее эффективных мероприятий для предотвращения распространения заболеваний, приводящих к значительному экономическому ущербу. Для контроля напряженности поствакцинального иммунитета широкое распространение получили методы иммуноферментного анализа (ИФА) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА), направленные на выявление специфических антител в сыворотке крови.The technical solution relates to the field of veterinary laboratory diagnostics, in particular to devices for taking, storing and transporting blood and blood serum samples of birds, mainly during their industrial cultivation, in order to control the effectiveness of immunization of birds against various infectious diseases by subsequent analysis by instrumental methods. A large number of birds, concentrated in a limited area, requires constant observance of the veterinary-sanitary regime and the implementation of preventive measures to prevent the introduction and spread of infectious diseases of various etiologies, the most dangerous of which are respiratory diseases of the bird, accompanied by the rapid spread of the disease in a significant population, regardless of conditions its contents. Vaccination is one of the most effective measures to prevent the spread of diseases, leading to significant economic damage. To control the intensity of post-vaccination immunity, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and hemagglutination inhibition reaction (RTGA), aimed at identifying specific antibodies in serum, are widespread.

Ввиду необходимости получения большого количества проб в местах массового содержания птицы актуальной является проблема отбора и транспортировки биологического материала с сохранением функциональных свойств для последующего проведения его анализа. В настоящее время, как правило, такой отбор крови производится в специальные пробирки, транспортировка которых в ветеринарные лаборатории сопряжена с целым рядом трудностей и необходимостью строгого соблюдения регламентированных правил биобезопасности и выполнения определенных условий, например, температурных (холодовая цепь), временных и т.д.In view of the need to obtain a large number of samples in places of mass bird keeping, the urgent problem is the selection and transportation of biological material while maintaining functional properties for subsequent analysis. Currently, as a rule, such blood sampling is performed in special test tubes, the transportation of which to veterinary laboratories is fraught with a number of difficulties and the need for strict observance of the regulated biosafety rules and the fulfillment of certain conditions, for example, temperature (cold chain), time, etc. .

Известен (RU, патент 2300365) контейнер для крови и/или компонентов крови, содержащий емкость, состоящую из корпуса, содержащего лицевую и тыльную стороны, и внутренней полости; и лицевая и/или тыльная сторона корпуса емкости контейнера содержит, по меньшей мере, две области, у которых различны значения пределов прочности при растяжении, лицевая сторона корпуса емкости соединена с тыльной стороной корпуса емкости посредством, по меньшей мере, одного соединительного шва и на корпусе емкости расположен, по меньшей мере, один штуцер для доступа к внутренней полости емкости. В основном разработанное устройство предназначено для хранения донорской крови. Недостатком известного контейнера следует признать отсутствие средств взятия пробы крови, а также необходимость соблюдения низкотемпературных условий в процессе транспортировки жидкой пробы взятой крови или сыворотки.Known (RU, patent 2300365) is a container for blood and / or blood components, containing a container consisting of a housing containing the front and back sides, and an internal cavity; and the front and / or rear side of the container body contains at least two regions with different tensile strengths, the front side of the container body is connected to the back side of the container through at least one connecting seam and on the body the container is located at least one fitting for access to the internal cavity of the container. Basically, the developed device is designed to store donated blood. The disadvantage of the known container should be recognized as the lack of blood sampling, as well as the need to comply with low temperature conditions during the transportation of a liquid sample of blood or serum.

Одним из возможных путей решения проблемы взятия крови или сыворотки и ее дальнейшей транспортировки является использование способа получения и хранения проб для анализа в виде сухих пятен, полученных на специальных целлюлозных мембранах. В настоящее время технологию сухих пятен крови (от англ. – Dried Blood Spots, DBS) используют, как правило, в медицинских исследованиях, в частности при неонатальном скрининге. Преимуществами данной технологии перед обычными способами получения биообразцов является значительное уменьшение объема отбираемого материала, достаточно высокая стабильность сухих образцов при хранении при нормальных температурах и возможность их пересылки без соблюдения требований «холодовой цепи». В ветеринарной диагностике предлагаемый подход пока не получил широкого распространения и в настоящее время проводятся лишь отдельные исследования по анализу биологических жидкостей птиц или животных в виде сухих пятен.One of the possible ways to solve the problem of taking blood or serum and its further transportation is to use the method of obtaining and storing samples for analysis in the form of dry spots obtained on special cellulose membranes. Currently, the technology of dry blood stains (from the English. - Dried Blood Spots, DBS) is used, as a rule, in medical research, in particular with neonatal screening. The advantages of this technology over conventional methods for producing biosamples are a significant reduction in the volume of material taken, a sufficiently high stability of dry samples during storage at normal temperatures and the possibility of their transfer without observing the requirements of the “cold chain”. In veterinary diagnostics, the proposed approach has not yet become widespread and only separate studies are currently being conducted to analyze biological fluids of birds or animals in the form of dry spots.

Известно изобретение (US, патент 8945945 от 03.02.2015), описывающее устройство в виде рабочей карточки с мембранным носителем для получения биообразцов сухих пятен крови от колонии животных и карточку для его осуществления. Заявленная рабочая карточка для получения сухих пятен крови содержит поля для нанесения идентификационной метки животного, у которого произведен забор крови, внутри карточки располагается пористый мембранный бумажный материал для нанесения образцов крови. Каплю крови наносят в центр круговой области, расположенной на пористом бумажном материале карточки, затем карточку высушивают на воздухе, помещают в специальный пакет и транспортируют карточки с мембранами в аналитическую лабораторию. Далее в лаборатории специальным устройством, действующим по принципу обычного дырокола для бумаги, вырезают небольшой круговой участок бумажного носителя (обычно диаметр круга составляет величину 3-6 мм), содержащий часть высушенного пятна крови, элюируют с него образец специальным десорбирующим раствором и затем проводят его анализ, используя стандартное аналитическое оборудование или наборы реагентов. В основном, предложенная в патенте карточка предназначена для получения большого количества однотипных образцов от одной колонии животных.The invention is known (US patent 8945945 dated 02/03/2015), which describes a device in the form of a working card with a membrane carrier for obtaining biosamples of dry blood stains from an animal colony and a card for its implementation. The claimed work card for obtaining dry blood stains contains fields for applying the identification mark of the animal from which the blood was taken, inside the card there is a porous membrane paper material for applying blood samples. A drop of blood is applied to the center of the circular region located on the porous paper material of the card, then the card is dried in air, placed in a special bag and the cards with membranes are transported to an analytical laboratory. Then, in the laboratory, a small circular section of the paper carrier (usually the diameter of the circle is 3-6 mm) containing a part of the dried blood stain is cut out with a special device operating on the principle of a conventional paper hole for paper, the sample is eluted with a special stripping solution and then it is analyzed using standard analytical equipment or reagent kits. Basically, the card proposed in the patent is intended to obtain a large number of samples of the same type from one animal colony.

Недостатком известного контейнера следует признать неэкономный расход мембранного носителя для получения образца крови, необходимость точного позиционирования карточки при нанесении образца и сложной процедуре идентификации пятна крови и наличии стадии высушивания карточки на воздухе, что иногда трудновыполнимо в полевых условиях или в условиях промышленного содержания животных.A disadvantage of the known container is the uneconomical consumption of the membrane carrier for obtaining a blood sample, the need for accurate positioning of the card when applying the sample and the complicated procedure for identifying a blood stain and the stage of drying the card in air, which is sometimes difficult in the field or in industrial animals.

Известно, что при промышленном выращивании птицы в процессе ее роста проводится ряд вакцинаций, после которых необходимо постоянно контролировать напряженность иммунитета или, говоря другими словами, содержание в крови специфических антител против конкретных возбудителей инфекционных заболеваний. Для контроля специфического иммунитета из птичника, в котором была проведена вакцинация поголовья, кровь и сыворотка отбирается не у всех особей, а у репрезентативной группы, причем идентификация каждой особи в конкретной группе не производится.It is known that during the industrial cultivation of poultry during its growth a series of vaccinations is carried out, after which it is necessary to constantly monitor the intensity of immunity or, in other words, the content of specific antibodies in the blood against specific pathogens of infectious diseases. To control specific immunity from the house in which the livestock was vaccinated, blood and serum are taken not from all individuals, but from a representative group, and each individual in a particular group is not identified.

Наиболее близким аналогом предлагаемого технического решения можно считать устройство для получения, хранения и транспортировки сухих образцов жидкостных объектов, предназначенных для последующего проведения лабораторного анализа (Патент РФ № RU 2519030 от 10.06.2014), в котором мембранные носители для получения, транспортировки и хранения биологических жидкостей в сухом виде используются в формате узких стрипов, закрепленных в специальной карточке, изготовленной из плотной бумаги. После нанесения индивидуального образца биологической жидкости на каждый из стрипов карточку с заполненными идентификационными сведениями оставляют сушиться на воздухе до полного высыхания образца (примерно на 2 часа), затем вкладывают в конверт и отсылают в лабораторию для проведения анализа. Преимуществами такого подхода по сравнению с обычными целлюлозными карточками для пробоотбора являются равномерное распределение образца на носителе, более эффективный смыв вещества в раствор с носителя и, как следствие, возможность проведения количественного анализа. Однако существенным недостатком указанного устройства для целей контроля вакцинации в птицеводческих хозяйствах является сложность получения сухих образцов в реальных условиях ввиду отсутствия условий для высушивания на воздухе большого количества карточек с индивидуальными пробами.The closest analogue of the proposed technical solution can be considered a device for receiving, storing and transporting dry samples of liquid objects intended for subsequent laboratory analysis (RF Patent No. RU 2519030 of 06/10/2014), in which membrane carriers for receiving, transporting and storing biological fluids in dry form they are used in the format of narrow strips fixed in a special card made of thick paper. After applying an individual sample of biological fluid to each of the strips, a card with the completed identification information is left to air dry until the sample has completely dried (for about 2 hours), then put in an envelope and sent to the laboratory for analysis. The advantages of this approach compared to conventional cellulose cards for sampling are the uniform distribution of the sample on the carrier, more efficient washing of the substance into the solution from the carrier and, as a consequence, the possibility of quantitative analysis. However, a significant drawback of this device for vaccination control in poultry farms is the difficulty of obtaining dry samples in real conditions due to the lack of conditions for air drying of a large number of cards with individual samples.

Целью настоящего изобретения является устройство, обеспечивающее проведение процедуры получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови и сыворотки крови без выполнения отдельной стадии предварительного высушивания биологического материала и возможности забора большого количества биопроб, без конкретной идентификации отдельных особей для последующего проведения лабораторного анализа.The aim of the present invention is a device that provides a procedure for obtaining, storing and transporting dry samples of blood and blood serum without performing a separate stage of preliminary drying of biological material and the possibility of collecting a large number of biological samples, without specific identification of individual individuals for subsequent laboratory analysis.

Для достижения указанной цели предложено использовать набор разработанного состава.To achieve this goal, it is proposed to use a set of developed composition.

Разработанный набор для получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови птицы при ее промышленном выращивании для последующего проведения лабораторного анализа с целью контроля вакцинации включает, по меньшей мере, часть элементов, выбранных из группы, содержащей: упаковочную коробку или почтовый конверт с нанесенной на ее внешней стороне необходимой для изделий ветеринарного назначения идентификационной информацией, по меньшей мере, одно устройство для прокалывания кожных покровов и получения капель крови, по меньшей мере, одну упаковку антисептического средства для подготовки поверхности кожи к проколу для отбора крови и обработки кожи после прокола, по меньшей мере, одну упаковку, содержащую фиксированное количество мембранных носителей в виде узких стрипов, предназначенных для нанесения крови или сыворотки крови и получения высушенных образцов, и осушитель, по меньшей мере, один бланк заказа для информации о получаемых образцах для проведения лабораторных анализов необходимого числа образцов, по меньшей мере, один полимерный контейнер, обеспечивающий герметичную внешнюю оболочку стрипов с полученными жидкими образцами, содержащими осушитель в количестве достаточном для поглощения влаги соответствующей общему объему взятой крови или сыворотки крови, а также инструкцию к набору.The developed kit for receiving, storing and transporting dry blood samples of poultry during its industrial cultivation for subsequent laboratory analysis in order to control vaccination includes at least part of the elements selected from the group consisting of: a packing box or a postal envelope printed on its outer the side of the identification information necessary for veterinary products, at least one device for piercing the skin and receiving drops of blood, at least e, one package of an antiseptic to prepare the skin surface for a puncture for blood sampling and skin treatment after a puncture, at least one package containing a fixed amount of membrane carriers in the form of narrow strips intended for applying blood or blood serum and obtaining dried samples, and a desiccant, at least one order form for information about the samples to be obtained for laboratory analysis of the required number of samples, at least one polymer container, provide s outer shell sealed with strips obtained liquid samples containing desiccant in an amount sufficient to absorb the moisture corresponding to the total volume taken blood or blood serum, as well as the instructions in the kit.

Все вышеперечисленные элементы желательно использовать при проведении процедуры взятия, хранения и транспортировки сухих образцов крови птиц для проведения лабораторного анализа с целью контроля проводимой вакцинации. Но в некоторых случаях использования, в частности, когда взятие пробы производят вблизи места проведения анализа, набор может не включать в себя почтовый конверт, обеспечивающий внешнюю оболочку полимерного контейнера с образцами крови. Возможны и другие варианты взятия пробы, ее хранение и транспортировку, когда набор может включать не все указанные элементы.It is advisable to use all of the above elements when carrying out the procedure of taking, storing and transporting dry blood samples of birds for laboratory analysis in order to control the ongoing vaccination. But in some cases of use, in particular, when a sample is taken near the place of analysis, the kit may not include a mail envelope that provides the outer shell of the polymer container with blood samples. There are other options for sampling, its storage and transportation, when the kit may not include all of these elements.

В основе набора лежит технология получения сухих пятен крови или сыворотки крови на пористом носителе. Каждый из образцов из репрезентативной выборки птиц наносят на отдельный мембранный носитель в виде узкой полоски из пористого мембранного материала, входящей в состав набора, погружая полоску одним концом в исследуемый образец, выдерживают в течение нескольких секунд, пока жидкость не заполнит под действием капиллярных сил большую часть полоски по ее длине и затем полоски, относящиеся к данной репрезентативной выборке, помещают в отдельный полимерный контейнер с осушителем и в таком виде транспортируют в лабораторию, где в дальнейшем проводят десорбцию анализируемого вещества и анализ путем определения в образцах титра специфических антител, вырабатываемых в процессе вакцинации против возбудителя определенного заболевания одним из известных стандартизованных методов.The kit is based on the technology of obtaining dry blood stains or blood serum on a porous carrier. Each of the samples from a representative sample of birds is applied to a separate membrane carrier in the form of a narrow strip of porous membrane material, which is part of the kit, immersing the strip at one end in the test sample, incubated for several seconds, until the liquid fills most of the capillary forces strips along its length and then strips related to this representative sample are placed in a separate polymer container with a desiccant and transported in this form to the laboratory, where in the future carry out the desorption of the analyte and analysis by determining in the titer samples specific antibodies produced during vaccination against the causative agent of a particular disease using one of the standardized methods known.

Каждый используемый элемент набора использован по своему прямому назначению. Сорбирующие жидкий биологический образец полоски (стрипы) выполнены из высокопористого адсорбционного мембранного материала на основе стекловолокна, обеспечивающие механическую прочность и жесткость полосок при намокании. Высокопористый мембранный материал обладает адсорбционной емкостью не менее 40 мг воды на см² и способен к обратимой десорбции сухих компонентов при погружении высушенного жидкостного объекта в водный растворитель. При этом все стрипы имеют одинаковые размеры, шириной от 0,2 см до 2 см, а длину от 3 до 10 см, причем на свободном конце внешней стороны полоски на ней нанесены линии на расстоянии от 0,2 см до 2 см, ограничивающие одинаковую площадь в виде прямоугольных участков.Each used element of the set is used for its intended purpose. Strips (strips) absorbing a liquid biological sample are made of highly porous adsorption membrane material based on fiberglass, providing mechanical strength and stiffness of the strips when wet. The highly porous membrane material has an adsorption capacity of at least 40 mg of water per cm ² and is capable of reversible desorption of dry components when a dried liquid object is immersed in an aqueous solvent. Moreover, all strips have the same dimensions, with a width of 0.2 cm to 2 cm, and a length of 3 to 10 cm, and at the free end of the outer side of the strip, lines are drawn on it at a distance of 0.2 cm to 2 cm, restricting the same area in the form of rectangular sections.

Предпочтительно закрываемый полимерный контейнер, содержащий осушитель, выполнен в виде герметичной пластиковой емкости с держателем стрипов, либо пластикового пакета с осушителем с застежкой типа «зип-лок», предотвращающих попадание внутрь пакета влаги при ее транспортировке в лабораторию, и обеспечивающих дополнительную сохранность сухих образцов.Preferably, the closable polymer container containing the desiccant is made in the form of a sealed plastic container with a strip holder, or a plastic bag with a desiccant with a zip-lock fastener to prevent moisture from getting inside the package when transporting it to the laboratory, and to ensure additional safety of dry samples.

В предпочтительном варианте комплектации при взятии пробы крови или сыворотки крови у выращиваемой птицы набор используют следующим образом. На полимерном контейнере для приема образцов, содержащего внутри осушитель, заполняют необходимую идентификационную информацию о времени, месте и причине забора биоматериала. Надевают на руки входящие в состав набора пластиковые или резиновые перчатки. Согласно руководства по забору биоматериала у птицы для проведения контрольных анализов после вакцинации производят отбор биоматериала от требуемого количества особей птицы, обеспечивающих репрезентативную выборку. Для этого из упаковки со стрипами берут полоску, наносят на неё требуемое количество крови или сыворотки крови и без высушивания помещают в контейнер с осушителем, контейнер плотно закрывают. Повторяют операции с необходимым числом особей птицы.In a preferred embodiment, when taking a blood sample or blood serum from a farmed bird, the kit is used as follows. On a polymer container for receiving samples containing a desiccant inside, fill in the necessary identification information about the time, place and reason for taking the biomaterial. Put on the hands included in the kit plastic or rubber gloves. According to the guidelines for the collection of biomaterial from poultry for control analyzes after vaccination, biomaterial is selected from the required number of poultry specimens providing a representative sample. For this, a strip is taken from the packaging with strips, the required amount of blood or blood serum is applied to it, and without drying it is placed in a container with a desiccant, the container is tightly closed. Repeat the operation with the required number of birds.

По окончании процедур забора требуемого количества биоматериала закрытый контейнер с осушителем и полученными образцами, а также заполненным бланком заказа помещают в почтовый пакет с адресом лаборатории или упаковочную коробку с нанесенной на внешней стороне необходимой для изделий ветеринарного назначения идентификационной информацией и адресом лаборатории. По почте или с курьером отсылают полученные образцы с сопроводительными документами в лабораторию для последующего выполнения необходимого анализа. Таким образом, высушивание биоматериала происходит в процессе пересылки его в лабораторию, а также отсутствует отдельная стадия высушивания на воздухе в условиях птицеводческого хозяйства.At the end of the sampling procedures for the required amount of biomaterial, a closed container with a desiccant and the samples obtained, as well as a completed order form, are placed in a mailing bag with the laboratory address or packing box with the identification information necessary for veterinary products and the laboratory address on the outside. By mail or by courier, the samples are sent with accompanying documents to the laboratory for the subsequent execution of the necessary analysis. Thus, the drying of the biomaterial occurs in the process of sending it to the laboratory, and there is also no separate stage of drying in the air under conditions of poultry farming.

Технический результат, получаемый при реализации разработанного устройства, состоит в создании набора, обеспечивающего проведение процедуры получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови и сыворотки крови без предварительного высушивания биологического материала и возможности забора большого количества биопроб без конкретной идентификации индивидуальных особей для последующего проведения лабораторного анализа, что приводит к упрощению процедуры пробоподготовки, снижению конечной стоимости анализа, повышению производительности труда и достоверности анализа.The technical result obtained by the implementation of the developed device consists in creating a kit that provides the procedure for obtaining, storing and transporting dry samples of blood and blood serum without first drying the biological material and the possibility of collecting a large number of biological samples without specific identification of individual individuals for subsequent laboratory analysis, which leads to a simplification of the sample preparation procedure, a decrease in the final cost of analysis, and an increase in production clusive labor and reliability analysis.

Claims

1. A kit for receiving, storing and transporting dry blood samples or blood serum of industrially grown poultry for subsequent laboratory analysis in order to monitor vaccination, characterized in that it contains a box or postal packet with the identification number printed on the outside for the veterinary products information, at least one tightly closed plastic container with a strip holder with the possibility of applying identification information to it, which contains sorption material for applying a blood or serum sample of the bird, made in the form of narrow rectangular strips of sorption material, and also containing moisture absorbing material, at least one device for piercing the skin, plastic or rubber gloves, at least one packaging of an antiseptic to prepare the skin surface for a puncture for blood sampling and skin treatment after a puncture, as well as instructions for a set.

2. The kit according to claim 1, characterized in that the strips of sorption material are made of a material based on a porous hydrophilic glass fiber membrane carrier with an adsorption capacity of at least 40 μl per cm ² , have the same dimensions - width from 0.2 cm to 2 cm, and a length of 3 to 10 cm, and transverse lines are drawn on them at an equal distance from 0.2 cm to 2 cm from each other, bounding the same area in the form of rectangular regions.

3. The kit according to claim 1, characterized in that the closable plastic container is made in the form of a plastic container with a strip holder or a plastic bag with a zip-lock fastener to prevent moisture from entering the bag, glued onto it with an inscription label and located inside a container or bag with a desiccant.