RU2702707C2 - Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent - Google Patents
Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent Download PDFInfo
- Publication number
- RU2702707C2 RU2702707C2 RU2014153094A RU2014153094A RU2702707C2 RU 2702707 C2 RU2702707 C2 RU 2702707C2 RU 2014153094 A RU2014153094 A RU 2014153094A RU 2014153094 A RU2014153094 A RU 2014153094A RU 2702707 C2 RU2702707 C2 RU 2702707C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- anthrax
- bacteriophage
- anthracis
- f112pre
- strains
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии, а именно к выделению нового видоспецифического вирулентного штамма сибиреязвенного бактериофага для получения диагностического препарата. Штамм бактериофага Bacillus anthracis Ф112РRЕ, депонированный в коллекции музея микроорганизмов филиала федерального государственного бюджетного учреждения «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации (г. Екатеринбург), используется для получения препарата для индикации возбудителя сибиреязвенной инфекции и позволяет осуществить быструю идентафикацию микроба В. anthracis для эффективного проведения лечебных и противоэпидемических мероприятий.The invention relates to medical virology and microbiology, in particular to the allocation of a new species-specific virulent strain of anthrax bacteriophage to obtain a diagnostic drug. The strain of the bacteriophage Bacillus anthracis F112PE, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the branch of the federal state budgetary institution “48 Central Research Institute” of the Ministry of Defense of the Russian Federation (Yekaterinburg), is used to obtain a drug for the indication of the causative agent of anthrax infection and allows for the rapid identification of the microbe В Anthracis for effective treatment and anti-epidemic measures.
Аналогами изобретения являются выделенные ранее сибиреязвенные бактериофаги Гамма А-26 и Fah-ВНИИВВиМ, которые, наряду с выраженной литической активностью по отношению к сибиреязвенному микробу, лизируют и некоторые штаммы близкородственных бацилл, что не позволяет достоверно проводить специфическую индикацию возбудителя сибирской язвы. Таким образом, в настоящее время в Российской Федерации и за рубежом отсутствуют видоспецифичные сибиреязвенные бактериофаги с широким спектром литической активности в отношении штаммов разных подвидов В. anthracis, но не лизирующие другие виды микроорганизмов, для специфической индикации возбудителя сибирской язвы. Поэтому поиск и выделение высоковирулентного сибиреязвенного бактериофага, лизирующего сибиреязвенные штаммы и неактивного к близкородственным бациллам, является актуальной задачей [1, 2, 3, 9, 10].Analogs of the invention are the previously isolated anthrax bacteriophages Gamma A-26 and Fah-VNIIIVViM, which, along with pronounced lytic activity against the anthrax microbe, also lyse some strains of closely related bacilli, which does not allow reliable specific indication of the anthrax pathogen. Thus, currently in the Russian Federation and abroad there are no species-specific anthrax bacteriophages with a wide spectrum of lytic activity against strains of different subspecies of B. anthracis, but not lysing other types of microorganisms, for specific indication of the causative agent of anthrax. Therefore, the search and isolation of a highly virulent anthrax bacteriophage lysing anthrax strains and inactive to closely related bacilli is an urgent task [1, 2, 3, 9, 10].
Известны способы идентификации возбудителя сибиреязвенной инфекции, основанные на выявлении фенотипических признаков вида В. anthracis [6, 7].Known methods for identifying the causative agent of anthrax infection, based on the identification of phenotypic characters of the species B. anthracis [6, 7].
Недостатки этих способов связаны с нестабильностью фенотипических свойств микроорганизмов, что требует при идентификации вида изучения комплекса фенотипических признаков, и окончательный результат возможен через четыре-семь дней с начала проведения анализа.The disadvantages of these methods are associated with the instability of the phenotypic properties of microorganisms, which requires identification of the type of study of the complex of phenotypic characters, and the final result is possible four to seven days after the start of the analysis.
Разработаны генотипические способы идентификации возбудителя сибиреязвенной инфекции, при использовании которых необходимы трудоемкие и длительные по времени исследования по клонированию геномов, использованию ДНК-зондов, клонированию ДНК-плазмид [5, 6]. В связи с этим актуальными остаются исследования, направленные на поиск альтернативных средств идентификации возбудителя сибиреязвенной инфекции.Genotypic methods have been developed for identifying the causative agent of anthrax infection, the use of which requires laborious and time-consuming studies on the cloning of genomes, the use of DNA probes, and the cloning of DNA plasmids [5, 6]. In this regard, research remains aimed at finding alternative means of identifying the causative agent of anthrax infection.
Идентификация возбудителя с помощью фага является важным критерием для диагностики различных инфекций. Фаги, специфически лизирующие определенный вид микроорганизмов, применяют в практике как диагностические. Преимущество фагодиагностики заключается в том, что она на несколько суток опережает биохимические, серологические, генетические способы диагностики, не требует выделения чистой культуры бактерий, технически проста и доступна [4, 5, 6].Identification of the pathogen using phage is an important criterion for the diagnosis of various infections. Phages that specifically lyse a certain type of microorganism are used in practice as diagnostic ones. The advantage of phagodiagnostics is that it is several days ahead of biochemical, serological, genetic diagnostic methods, does not require isolation of a pure bacterial culture, is technically simple and affordable [4, 5, 6].
Следует отметить, что микробиологическая диагностика сибирской язвы так же основана на использовании методов специфической индикации, к которым, в том числе, относится тест на фаголизабельность [8].It should be noted that the microbiological diagnosis of anthrax is also based on the use of specific indication methods, which include, but are not limited to, the phagolizability test [8].
Цель изобретения - поиск и выделение видоспецифического сибиреязвенного бактериофага, обладающего высокой видовой специфичностью к сибиреязвенному микробу, не лизирующего близкородственные бациллы и сохраняющего длительное время свои основные свойства.The purpose of the invention is the search and isolation of species-specific anthrax bacteriophage, which has high species specificity for anthrax microbe, does not lyse closely related bacilli and retains its basic properties for a long time.
Поставленная цель достигается тем, что предложен новый штамм сибиреязвенного бактериофага, позволяющий гарантированно дифференцировать штаммы В. anthracis от близкородственных микроорганизмов и сохраняющего свои свойства не менее 4-х лет.This goal is achieved by the fact that a new strain of anthrax bacteriophage has been proposed, which allows guaranteed differentiation of B. anthracis strains from closely related microorganisms and retains its properties for at least 4 years.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является новый штамм бактериофага В. anthracis, авторское название Ф112РRЕ, обладающий высокой литической активностью в отношении сибиреязвенных штаммов, не лизирующий близкородственные бациллы.The technical result of the invention is a new strain of bacteriophage B. anthracis, the author’s name is F112PRE, which has high lytic activity against anthrax strains and does not lyse closely related bacilli.
Сущность изобретения состоит в получении селекционным путем нового штамма бактериофага при изучении естественной изменчивости исходной культуры - видоспецифического бактериофага ФПГ, выделенного из лизогенного штамма подвида ВА II В. anthracis [2].The essence of the invention consists in obtaining, by selection, a new strain of the bacteriophage when studying the natural variability of the original culture — the species-specific bacteriophage of FIG, isolated from the lysogenic strain of the subspecies BA II B. anthracis [2].
Штамм бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ хранится в специализированной коллекции музея микроорганизмов филиала федерального государственного бюджетного учреждения «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации (г.Екатеринбург).The strain of bacteriophage B. anthracis F112PE is stored in a specialized collection of the Museum of Microorganisms of the branch of the Federal State Budgetary Institution "48 Central Research Institute" of the Ministry of Defense of the Russian Federation (Yekaterinburg).
Бактериофаг В. anthracis Ф112РRЕ характеризуется следующими свойствами: является крупным бактериальным вирусом с икосаэдрической головкой и сокращающимся хвостовым отростком. По классификации А.С.Тихоненко, фаг принадлежит морфотипу А1 (семейство Myoviridae). Расстояние между противоположными апикальными вершинами изометричной головки составляет 119-120 нм. Длина хвостового отростка - 196-197 нм. В отростке можно выделить ряд структурных элементов. Посредством шейки с размерами 12×8 нм хвост соединяется с головкой. Длина чехла в интактном состоянии составляет 184-185 нм, в сокращенном виде - 83-85 нм. Фаг не имеет воротничка. Аппарат адсорбции фага включают базальную пластинку и фибриллы. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК. Бактериофаг В. anthracis Ф112РRЕ инактивируется при температуре 50°C в течение 30 минут. Литическая активность фага не изменяется в пределах рН 5,7-8,0. Фаг устойчив к антибиотику хинозолу. Морфология негативных колоний: на газоне роста индикаторного штамма В. anthracis «55-ВНИИВВиМ» культура данного бактериофага образует однородную популяцию негативных прозрачных колоний размером 3-4 мм.The bacteriophage B. anthracis F112PE is characterized by the following properties: it is a large bacterial virus with an icosahedral head and a contracting caudal process. According to the classification of A.S. Tikhonenko, the phage belongs to the morphotype A1 (family Myoviridae). The distance between the opposite apical peaks of the isometric head is 119-120 nm. The length of the tail process is 196-197 nm. A number of structural elements can be distinguished in the appendix. By means of a neck with dimensions of 12 × 8 nm, the tail is connected to the head. The length of the cover in the intact state is 184-185 nm, in abbreviated form - 83-85 nm. The phage has no collar. The phage adsorption apparatus includes a basal plate and fibrils. The type of nucleic acid is DNA. The bacteriophage B. anthracis F112PE is inactivated at a temperature of 50 ° C for 30 minutes. The lytic activity of the phage does not change within pH 5.7-8.0. The phage is resistant to the chinosol antibiotic. Morphology of negative colonies: on the growth lawn of the indicator strain B. anthracis “55-VNIIVViM”, the culture of this bacteriophage forms a homogeneous population of negative transparent colonies 3-4 mm in size.
Продолжительность латентного периода: 40 мин.Latency: 40 min.
Урожайность: от 150 до 200 фаговых частиц на одну инфицированную клетку.Productivity: from 150 to 200 phage particles per infected cell.
Адсорбционная способность фага: при температуре 37°C за 10 минут адсорбируется 84,8% фага на поверхности вегетативных клеток В. anthracis.Phage adsorption capacity: at a temperature of 37 ° C in 10 minutes 84.8% of the phage is adsorbed on the surface of B. anthracis vegetative cells.
Спектр литического действия: лизирует 90,7% из изученных 632 сибиреязвенных штаммов и не проявляет литической активности к штаммам морфологического типа S подвида ВА III В. anthracis (всего 37 штаммов) и близкородственных бацилл (всего 160 штаммов): B.cereus, B.mycoides, B.subtilis, B.mesentericus, B.brevis, B.megaterium, B.thuringiensis. Бактериофаг Bacillus anthracis Ф112РRЕ стабильно сохраняет литическую активность при длительном хранении (4 года). Осмотический шок инактивирует 35% фаговых частиц.Spectrum of lytic action: lyses 90.7% of the studied 632 anthrax strains and does not show lytic activity to morphological type S strains of subspecies BA III B. anthracis (37 strains in total) and closely related bacilli (160 strains in total): B.cereus, B. mycoides, B.subtilis, B.mesentericus, B.brevis, B.megaterium, B.thuringiensis. The bacteriophage Bacillus anthracis F112PRE stably maintains lytic activity during prolonged storage (4 years). Osmotic shock inactivates 35% of phage particles.
Способ хранения: суспензия фага Ф112РRЕ хранится в лиофильном (сухом) виде при температуре (4±2)°C в течение 4-х лет.Storage method: a suspension of phage F112PRE is stored in a lyophilic (dry) form at a temperature of (4 ± 2) ° C for 4 years.
Возможность практического использования изобретения подтверждается примерами конкретного выполнения.The possibility of practical use of the invention is confirmed by examples of specific performance.
Пример 1. Выделение сибиреязвенного бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ.Example 1. Isolation of anthrax bacteriophage B. anthracis F112PRE.
Для получения чистых линий проводили пассаж бактериофага ФПГ методом Грациа с использованием индикаторного штамма 71/12 второй вакцины Ценковского, отбирали морфологически однотипные наиболее прозрачные негативные колонии диаметром более 2 мм. Данную операцию проводили шестикратно, получив таким образом морфологически однотипные прозрачные негативные колонии бактериофага диаметром 3-4 мм. При последующих пассажах на указанном индикаторном штамме полученный бактериофаг морфологических свойств не менял.To obtain clean lines, the passage of the bacteriophage FPG was performed by the Grazia method using the indicator strain 71/12 of the second Zenkovsky vaccine, morphologically the same type of the most transparent negative colonies with a diameter of more than 2 mm were selected. This operation was performed six times, thus obtaining morphologically homogeneous transparent negative bacteriophage colonies with a diameter of 3-4 mm. In subsequent passages on the indicated indicator strain, the bacteriophage obtained did not change its morphological properties.
Пример 2. Репродукция бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ Example 2. The reproduction of bacteriophage B. anthracis F112PE
Репродукцию бактериофага проводят на вакцинном штамме В. anthracis «55-ВНИИВВиМ» с использованием плотной питательной среды на основе гидролизата рыбной муки (аминный азот 110-120 мг %, рН 7,2-7,4) и полужидкого 0,7% мясо-пептонного агара. В асептических условиях в пробирки разливают по 0,2 см3 споровой агаровой культуры В. anthracis 55-ВНИИВВиМ из разведения 1,0⋅108 спор⋅см-3 и 0,5 см3 бактериофага из разведения 1,0⋅103 частиц⋅см-3 (из расчета высева на 1 чашку от 400 до 600 фаговых частиц). Затем в пробирки добавляют по 2,5 см предварительно растопленного и охлажденного до температуры (46±1)°C 0,7% мясо-пептонного агара.The reproduction of the bacteriophage is carried out on the vaccine strain B. anthracis "55-VNIIVViM" using a dense nutrient medium based on fish meal hydrolyzate (amine nitrogen 110-120 mg%, pH 7.2-7.4) and semi-liquid 0.7% meat peptone agar. Aseptically dispensed into vials, 0.2 cm 3 of agar culture spore B. anthracis VNIIVViM 55 dilution of 1,0⋅10 8 spor⋅sm -3 and 0.5 cm 3 of bacteriophage particles 3 dilution 1,0⋅10 ⋅cm -3 (from the calculation of seeding for 1 cup from 400 to 600 phage particles). Then, 2.5 cm of pre-melted and peptone meat agar 0.7% pre-melted and cooled to a temperature of (46 ± 1) ° C are then added to the tubes.
Приготовленную таким способом смесь тщательно перемешивают в пробирке, а затем осторожно распределяют вторым слоем по всей поверхности первого слоя 2,5% мясо-пептонного агара. После застывания среды чашки Петри агаром вниз помещают в термостат при температуре (36±1)°C на 18 часов выращивания. По окончании срока инкубации в каждую чашку добавляют по 5 см3 0,9% раствора натрия хлорида. Для получения фаголизата отмывают фаговые частицы и остатки лизированных клеток вакцинного сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ 0,9% раствором натрия хлорида. Полученный фаголизат центрифугируют 20 минут при 8000 об/мин и фильтруют через мембранные фильтры «Millipore» с диаметром пор 0,45-0.22 мкм. В полученном фильтрате определяют титр бактериофага по Грациа.The mixture prepared in this way is thoroughly mixed in a test tube, and then carefully distributed with a second layer over the entire surface of the first layer of 2.5% meat-peptone agar. After the medium has solidified, the Petri dishes are placed with agar down in a thermostat at a temperature of (36 ± 1) ° C for 18 hours of cultivation. At the end of the incubation period, 5 cm 3 of a 0.9% sodium chloride solution is added to each dish. To obtain a phagolysate, phage particles and the remains of lysed cells of the vaccine anthrax strain 55-VNIIIVViM with 0.9% sodium chloride are washed. The resulting phagolysate is centrifuged for 20 minutes at 8000 rpm and filtered through Millipore membrane filters with a pore diameter of 0.45-0.22 μm. In the obtained filtrate determine the titer of the bacteriophage according to Grazia.
Пример 3. Проверка спектра литической активности бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ методом спот-тестирования.Example 3. Verification of the spectrum of the lytic activity of the bacteriophage B. anthracis F112PE by spot testing.
Испытание проводят по следующей методике: на плотную питательную среду (МПА-агар) наносят 0,1 см3 (из концентрации 1,0⋅107 кл⋅см-3) 18-часовой исследуемой бульонной культуры В. anthracis, растирают шпателем и наносят в центр 1 каплю (из концентрации 1,0⋅107-1,0⋅108 БОЕ/см3) фаголизата В. anthracis Ф112РRЕ. Посев инкубируют в течение 18 часов при 37°C. В случае, если исследуемая культура относится к В. anthracis, на бактериальном газоне наблюдается четкая зона специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры.The test is carried out according to the following procedure: 0.1 cm 3 (from a concentration of 1.0⋅10 7 cells⋅cm -3 ) of an 18-hour test broth culture of B. anthracis is applied to a solid nutrient medium (MPA agar), triturated and applied 1 drop to the center (from a concentration of 1.0 × 10 7 -1.0 × 10 8 PFU / cm 3 ) of B. anthracis F112PRE phagolysate. Inoculation is incubated for 18 hours at 37 ° C. If the culture under study belongs to B. anthracis, a clear zone of specific lysis is observed on the bacterial lawn. The presence of a lysis is a diagnostic feature for identifying a culture.
Пример 4. Проверка диагностических свойств бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ.Example 4. Verification of the diagnostic properties of the bacteriophage B. anthracis F112PE.
Исследовали литическую активность бактериофага в отношении сибиреязвенных штаммов и близкородственных бацилл по методике, изложенной в примере 3. Определили литическую активность фага (исходная концентрация 1,0⋅1010 БОЕ⋅см-3), разведенного 1:100000, к 632 сибиреязвенным штаммам.The lytic activity of the bacteriophage against anthrax strains and closely related bacilli was studied according to the method described in Example 3. The lytic activity of the phage (initial concentration 1.0 × 10 10 PFU-cm- 3 ) diluted 1: 100000 to 632 anthrax strains was determined.
Большинство штаммов (90,7%) В. anthracis лизировались бактериофагом Ф112РRЕ (без вторичного роста - штаммы подвидов BAI и В AIV, со вторичным ростом - штаммы подвидов ВА II и ВА III), при этом активности фага к 160 штаммам различных близкородственных бацилл, 24 и 37 штаммам В. anthracis морфологического типа S, подвидов ВА II и ВА III соответственно, не выявлено. Следует отметить, что последние не лизировались также ни одним из двух других испытанных бактериофагов (Гамма А-26 и Fah-ВНИИВВиМ) Показана высокая литическая активность фага В. anthracis Ф112РRЕ в диагностическом препарате в отношении большинства сибиреязвенных штаммов, выделенных из разных источников внешней среды, больных или погибших животных и людей. Это подтверждает заявленное назначение препарата для идентификации сибиреязвенного возбудителя.Most strains (90.7%) of B. anthracis were lysed by the bacteriophage F112PRE (without secondary growth, strains of subspecies BAI and B AIV, with secondary growth, strains of subspecies BA II and BA III), with phage activity to 160 strains of various closely related bacilli, 24 and 37 strains of B. anthracis morphological type S, subspecies BA II and BA III, respectively, were not detected. It should be noted that the latter were also not lysed by any of the other two bacteriophages tested (Gamma A-26 and Fah-VNIIIVViM). High lytic activity of phage B. anthracis Ф112РРЕ in the diagnostic preparation was shown for the majority of anthrax strains isolated from different environmental sources. sick or dead animals and people. This confirms the claimed purpose of the drug to identify the anthrax pathogen.
Пример 5. Сравнение чувствительности различных подвидов В. anthracis к сибиреязвенным бактериофагам Ф112PRE, Гамма А-26 и Fah-ВНИИВВиМ.Example 5. Comparison of the sensitivity of various subspecies of B. anthracis to anthrax bacteriophages F112PRE, Gamma A-26 and Fah-VNIIIVViM.
Проведен анализ чувствительности бактериофага В. anthracis Ф112PRE в сравнении с коммерческими препаратами бактериофагов Гамма А-26 и Fah-ВНИИВВиМ по методике, изложенной в пункте 3. Результаты представлены в таблице 1. Показана более высокая литическая активность фага Ф112РRЕ в отношении сибиреязвенных штаммов, по сравнению с бактериофагами Гамма А-26 и Fah-ВНИИВВиМ.The sensitivity analysis of the bacteriophage B. anthracis F112PRE in comparison with commercial preparations of the bacteriophages Gamma A-26 and Fah-VNIIVViM according to the method described in paragraph 3. The results are presented in table 1. The higher lytic activity of phage F112PE in relation to anthrax strains is shown, compared with bacteriophages Gamma A-26 and Fah-VNIIIVViM.
Таким образом, изобретение практически осуществимо, его использование в микробиологии позволит организовать производство диагностического сибиреязвенного препарата, применение которого в медицине, ветеринарии обеспечит быструю идентификацию сибиреязвенного возбудителя для своевременного и эффективного проведения лечебных и противоэпидемических мероприятий. Избирательный спектр литического действия бактериофага В. anthracis Ф112РRЕ в препарате позволяет идентифицировать сибиреязвенные штаммы за 18-20 часов.Thus, the invention is practicable, its use in microbiology will make it possible to organize the production of a diagnostic anthrax drug, the use of which in medicine, veterinary medicine will provide a quick identification of the anthrax pathogen for the timely and effective implementation of therapeutic and anti-epidemic measures. The selective spectrum of the lytic action of the bacteriophage B. anthracis F112PRE in the preparation allows the identification of anthrax strains in 18-20 hours.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИINFORMATION SOURCES
1. Васильев, П.Г. Чувствительность штаммов Bacillus anthracis, выделенных из разных источников внешней среды, к видоспецифическим сибиреязвенным бактериофагам / П.Г. Васильев, Ю.И. Иванов, Н.С. Садыков, В.В. Кожухов // Материалы юбилейной науч. конф. посвященной 70-летию НИИ Микробиологии МО РФ. Киров. - 1998. - С. 64.1. Vasiliev, P.G. The sensitivity of strains of Bacillus anthracis isolated from different environmental sources to species-specific anthrax bacteriophages / P.G. Vasiliev, Yu.I. Ivanov, N.S. Sadykov, V.V. Kozhukhov // Materials of the anniversary scientific. conf. dedicated to the 70th anniversary of the Research Institute of Microbiology of the Ministry of Defense of the Russian Federation. Kirov. - 1998 .-- S. 64.
2. Васильев, П.Г. Спектр литической активности видоспецифического сибиреязвенного бактериофага ФПГ / П.Г. Васильев, Л.И. Маринин, Р.Ш. Зиганшин, Н.В. Литусов, А.В. Сенькин, А.В. Степанов, А.Н. Шевцов, А.В. Маслов // Проблемы медицинской и экологической биотехнологии. В сб.: Тезисы докладов юбилейной научно-практической конференции, посвященной 25-летию ГНЦ ПМ. Оболенск. - 1999. - С. 33.2. Vasiliev, P.G. The spectrum of lytic activity of species-specific anthrax bacteriophage FPG / P.G. Vasiliev, L.I. Marinin, R.Sh. Ziganshin, N.V. Litusov, A.V. Senkin, A.V. Stepanov, A.N. Shevtsov, A.V. Maslov // Problems of medical and environmental biotechnology. In: Abstracts of the anniversary scientific and practical conference dedicated to the 25th anniversary of SSC PM. Obolensk. - 1999 .-- S. 33.
3. Гаврилов, В.А. Изучение диагностической ценности сибиреязвенных бактериофагов для идентификации штаммов разных подвидов Bacillus anthracis / В.А. Гаврилов, П.Г. Васильев, Н.В. Литусов, Е.В. Пименов, А.К. Галиуллин, А.Ф. Андрус, В.И. Фролов, Р.Ш. Зиганшин, А.Н. Забокрицкий, Н.С. Садков, А.В. Сенькин // Ветеринарная медицина. - 2004. - №4. - С. 13-15.3. Gavrilov, V.A. The study of the diagnostic value of anthrax bacteriophages to identify strains of different subspecies of Bacillus anthracis / V.A. Gavrilov, P.G. Vasiliev, N.V. Litusov, E.V. Pimenov, A.K. Galiullin A.F. Andrus, V.I. Frolov, R.Sh. Ziganshin, A.N. Zabokritsky, N.S. Sadkov, A.V. Senkin // Veterinary medicine. - 2004. - No. 4. - S. 13-15.
4. Генов, И. Диагностическая оценка некоторых ускоренных методов дифференциации Bacillus anthracis от других апатогенных спорообразующих бацилл / И. Генов // Вет. мед. науки (Болгария). - 1966. - Т. 3. - №3. - С. 247-253.4. Genov, I. Diagnostic evaluation of some accelerated methods of differentiation of Bacillus anthracis from other apatogenic spore-forming bacilli / I. Genov // Vet. honey. Science (Bulgaria). - 1966. - T. 3. - No. 3. - S. 247-253.
5. Завирюха, А.И. Дифференциальная диагностика возбудителя сибирской язвы от ложносибиреязвенных бацилл / А.И. Завирюха, А.П. Иванов // В сб.: Достижения и перспективы борьбы с сибирской язвой в СССР. - 1978. - С. 130-131.5. Zaviryukha, A.I. Differential diagnosis of the causative agent of anthrax from false anthrax bacilli / A.I. Zaviryukha, A.P. Ivanov // In Sat: Achievements and Prospects for the Fight against Anthrax in the USSR. - 1978. - S. 130-131.
6. Крылова, М.Д. Фаготипирование бактерий / М.Д. Крылова, - М., 1963.6. Krylova, M.D. Phagotyping of bacteria / M.D. Krylova, - M., 1963.
7. Матвеева, К.И. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней / К.И. Матвеева, М.И. Соколова. - М., 1964. - 683 с.7. Matveeva, K.I. Guide to the microbiological diagnosis of infectious diseases / K.I. Matveeva, M.I. Sokolova. - M., 1964 .-- 683 p.
8. «Лабораторная диагностика и обнаружение возбудителя сибирской язвы». Методические указания. МУК 4.2.2413-08.8. "Laboratory diagnosis and detection of the causative agent of anthrax." Methodical instructions. MUK 4.2.2413-08.
9. Русалев, B.C. Фагочувствительность аэробных спорообразующих бактерий / B.C. Русалев // Ветеринария. - 1990. - №8. - С. 29-31.9. Rusalev, B.C. Phagosensitivity of aerobic spore-forming bacteria / B.C. Rusalev // Veterinary medicine. - 1990. - No. 8. - S. 29-31.
10. Ипатенко, Н.Г. Испытание сибиреязвенных бактериофагов "К" ВИЭВ и Гамма МВА / Н.Г.Ипатенко, А.А.Маничев // Ветеринария. - 1989. - №2. - С. 59-60.10. Ipatenko, N.G. Testing anthrax bacteriophages "K" VIEV and Gamma MBA / N.G. Ipatenko, A.A. Manichev // Veterinary medicine. - 1989. - No. 2. - S. 59-60.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014153094A RU2702707C2 (en) | 2014-12-25 | 2014-12-25 | Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014153094A RU2702707C2 (en) | 2014-12-25 | 2014-12-25 | Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014153094A RU2014153094A (en) | 2016-07-20 |
| RU2014153094A3 RU2014153094A3 (en) | 2019-04-10 |
| RU2702707C2 true RU2702707C2 (en) | 2019-10-09 |
Family
ID=56413228
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014153094A RU2702707C2 (en) | 2014-12-25 | 2014-12-25 | Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2702707C2 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110129279B (en) * | 2019-04-24 | 2022-02-18 | 昆明理工大学 | Enterococcus faecalis bacteriophage and separation, purification, enrichment and application thereof |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2008919C1 (en) * | 1989-02-21 | 1994-03-15 | Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт | Method for diagnostics of anthrax |
| RU2037520C1 (en) * | 1992-06-24 | 1995-06-19 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | Recombinant plasmid dna pzat1 used for preparing dna-probe which is used for identification of toxigenic strains of anthrax pathogen, method of construction of plasmid dna pzat1 and a strain of bacterium escherichia coli used for preparing recombinant plasmid dna pzat1 and dna-probe which is used for identification of toxigenic strains of anthrax pathogen |
| RU2351650C1 (en) * | 2007-08-07 | 2009-04-10 | Федеральное государственное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФГУН ГНЦ ПМБ) | Bacillus anthracis R/D BATERIOPHAGE STRAIN USED TO PRODUCE PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS, LIQUID PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS AND PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS |
-
2014
- 2014-12-25 RU RU2014153094A patent/RU2702707C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2008919C1 (en) * | 1989-02-21 | 1994-03-15 | Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт | Method for diagnostics of anthrax |
| RU2037520C1 (en) * | 1992-06-24 | 1995-06-19 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | Recombinant plasmid dna pzat1 used for preparing dna-probe which is used for identification of toxigenic strains of anthrax pathogen, method of construction of plasmid dna pzat1 and a strain of bacterium escherichia coli used for preparing recombinant plasmid dna pzat1 and dna-probe which is used for identification of toxigenic strains of anthrax pathogen |
| RU2351650C1 (en) * | 2007-08-07 | 2009-04-10 | Федеральное государственное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФГУН ГНЦ ПМБ) | Bacillus anthracis R/D BATERIOPHAGE STRAIN USED TO PRODUCE PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS, LIQUID PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS AND PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014153094A (en) | 2016-07-20 |
| RU2014153094A3 (en) | 2019-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brenner et al. | Isolation of Bartonella (Rochalimaea) henselae: effects of methods of blood collection and handling | |
| Caniza et al. | Bartonella henselae: etiology of pulmonary nodules in a patient with depressed cell-mediated immunity | |
| Dean et al. | Phage typing of coagulase-negative staphylococci and micrococci | |
| Ariel et al. | Ranavirus in wild edible frogs Pelophylax kl. esculentus in Denmark | |
| Takai et al. | Molecular epidemiology of Rhodococcus equi of intermediate virulence isolated from patients with and without acquired immune deficiency syndrome in Chiang Mai, Thailand | |
| McNerney et al. | Mycobacteriophage and their application to disease control | |
| Ahmad et al. | The first isolation and molecular characterization of Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae Pakistan strain: A causative agent of contagious caprine pleuropneumonia | |
| CN102703609B (en) | Onsite quick detection kit of channel catfish virus and detection method thereof | |
| CN113293143B (en) | Salmonella bacteriophage capable of reducing vertical transmission of salmonella pullorum and application thereof | |
| Takai et al. | Pathogenicity of Rhodococcus equi expressing a virulence-associated 20 kDa protein (VapB) in foals | |
| RU2702707C2 (en) | Bacteriophage bacillus anthracis f112pre strain used for specific indication of anthrax agent | |
| Lysenko et al. | Further evidence for cancer as cell-wall-deficient mycobacterial disease | |
| RU2531236C1 (en) | Method of detecting microorganism of species vibrio parahaemolyticus | |
| Smith et al. | Identification of Malleomyces by specific bacteriophages | |
| Adegoke | Characteristics of staphylococci isolated from man, poultry and some other animals | |
| Waag et al. | Methods of isolation, amplification, and purification of Coxiella burnetii | |
| Jung et al. | Prevalence state of canine brucellosis in South Korea during 2015 and 2016 | |
| RU2351650C1 (en) | Bacillus anthracis R/D BATERIOPHAGE STRAIN USED TO PRODUCE PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS, LIQUID PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS AND PREPARATION FOR ANTHRAX INFECTION DIAGNOSTICS | |
| Shalaby et al. | Evaluating Flinders Technology Associates card for transporting bacterial isolates and retrieval of bacterial DNA after various storage conditions | |
| RU2616287C1 (en) | Agent for producing preparations for diagnostics of typhus caused by rickettsia raoultii with genotype dns28 | |
| RU2460802C1 (en) | Method for identifying yersinia enterocolitica | |
| RU2729575C1 (en) | Method for identification of cholera vibrio o1 serogroups of biovars classical and el tor | |
| Abbas et al. | Seropositivity, involvement in suspected cases of chronic respiratory diseases and comparative efficacy of various sero-diagnostic tests of Mycoplasma gallisepticum | |
| Liu et al. | Isolation, identification and significance of Cryptococcus neoformans and Candida albicans from faecal specimen of pigeon | |
| Barrow | Aspects of the epidemiology of bovine tuberculosis in badgers and cattle. II. The development and use of a typing system for Mycobacterium bovis |