RU2695364C1 - Способ лечения нерубцовой алопеции - Google Patents
Способ лечения нерубцовой алопеции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2695364C1 RU2695364C1 RU2018139307A RU2018139307A RU2695364C1 RU 2695364 C1 RU2695364 C1 RU 2695364C1 RU 2018139307 A RU2018139307 A RU 2018139307A RU 2018139307 A RU2018139307 A RU 2018139307A RU 2695364 C1 RU2695364 C1 RU 2695364C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hair
- transferred
- cells
- cellular material
- solution
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 title claims abstract description 17
- 230000037390 scarring Effects 0.000 title abstract 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 47
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims abstract description 32
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 29
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 claims abstract description 13
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 230000001857 anti-mycotic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims abstract description 10
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 241000894007 species Species 0.000 claims abstract description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 claims description 10
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 7
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 claims description 7
- 210000000442 hair follicle cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims description 5
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims description 5
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims description 5
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 5
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 210000002768 hair cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 71
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 19
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 9
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 4
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 4
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 4
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 4
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- 241000204034 Mycoplasmataceae Species 0.000 description 2
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 2
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 2
- 230000002338 cryopreservative effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 2
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000000694 mesotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700587 Alphaherpesvirinae Species 0.000 description 1
- 241000340974 Alphapapillomavirus Species 0.000 description 1
- 241000701021 Betaherpesvirinae Species 0.000 description 1
- 241001495184 Chlamydia sp. Species 0.000 description 1
- 241000606069 Chlamydiaceae Species 0.000 description 1
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001278027 Eucoccidiorida Species 0.000 description 1
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 1
- 241000701046 Gammaherpesvirinae Species 0.000 description 1
- 241000711557 Hepacivirus Species 0.000 description 1
- 241000700739 Hepadnaviridae Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 241000701043 Lymphocryptovirus Species 0.000 description 1
- 241000202944 Mycoplasma sp. Species 0.000 description 1
- 241000700732 Orthohepadnavirus Species 0.000 description 1
- 241000016377 Orthoretrovirinae Species 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 description 1
- 241000223929 Sarcocystidae Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589970 Spirochaetales Species 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 241000589884 Treponema pallidum Species 0.000 description 1
- 241001125316 Ureaplasma sp. Species 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 206010068168 androgenetic alopecia Diseases 0.000 description 1
- 201000002996 androgenic alopecia Diseases 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000001136 chorion Anatomy 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 231100000640 hair analysis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000009707 neogenesis Effects 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000010490 psychological well-being Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/01—Hydrocarbons
- A61K31/015—Hydrocarbons carbocyclic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/50—Placenta; Placental stem cells; Amniotic fluid; Amnion; Amniotic stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/51—Umbilical cord; Umbilical cord blood; Umbilical stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к эстетической медицине и может быть использовано для лечения нерубцовой алопеции. Способ лечения нерубцовой алопеции, заключающийся в том, что предварительно получают клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, для чего выдергивают волосы из волосистой части головы взрослого донора и помещают их в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком, отбирают волосы, находящиеся в стадии анагена, и отсекают от них волосяные фолликулы, которые промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика и переносят в раствор коллагеназы I-го типа, где их инкубируют, и переносят в культуральные флаконы, а через 21 день клеточный материал диссоциируют из сфероидов, образованных в культуральных флаконах, получая окончательно клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, и получают также клеточный материал в виде мезенхимальных стромальных клеток плаценты человека и клеточный материал в виде эндотелиоцитов пуповинной вены, после чего каждый вид клеточного материала переносят в суспензию с использованием раствора трипсина с версеном, материал промывают физиологическим раствором с последующим переносом в стерильной среде в вакуумную пробирку, затем клеточный материал трех полученных видов, полученный при определенных условиях, смешивают, переносят в пробирку и хранят, при определенных условиях, для последующего введения через иглу в мезодермальный слой кожи в виде папул с размером от 2 до 4 мм при угле наклона иглы в 45°. Вышеописанный способ позволяет расширить арсенал способов лечения нерубцовой алопеции. 5 ил.
Description
Изобретение относится к эстетической медицине и может быть использовано для лечения алопеций.
Известен способ лечения нарушения роста волос [RU 2381786, С2, А61К 8/37, 20.02.2010], включающий введение пациенту алкилового эфира никотиновой кислоты с алкильной группой с прямой цепью или разветвленной цепью, содержащей от приблизительно 6 до приблизительно 22 СН2 групп в количестве, достаточном для снижения или для прекращения выпадения волос у указанного субъекта.
Недостатком способа является относительно низкая эффективность лечения.
Известен также способ [RU 2295304, С2, А61В 17/00, 20.03.2007], основанный на том, что в затылочной области головы пациента вырезают кожную полоску с волосяными фолликулами, ушивают донорскую рану, из кожной полоски формируют фолликулярные объединения-графты, для пересадки заготовленных графтов в затылочной области головы и на макушке формируют микроотверстия, направления каналов которых соответствуют направлению роста волос, причем для формирования отверстий разрезы производят параллельно донорской ране.
Недостатком этого способа также является относительно низкая эффективность лечения.
Кроме того, известен способ [RU 2550428, CI, А61В 17/00, 10.05.2015], включающий забор фрагмента кожного имплантата из волосистой области, наложение на образовавшийся дефект косметического шва, деление вырезанного фрагмента на фолликулярные графты, образование микронадрезов на реципиентной области и пересадку в них фолликулярных графтов, при этом перед забором фрагмента кожного имплантата с помощью компьютерной программы TrichoSciencePro v 1.1 рассчитывают площадь реципиентной области, проводят фототрихограмму, оценивая жизнеспособность волосяных фолликулов, на основании полученных данных определяют требуемое количество волосяных фолликулов, затем на реципиентную область наносят «шаблон», после чего на 30% реципиентной области формируют микронадрезы диаметром 1,0 мм для пересадки 2-х и 3-х жизнеспособных фолликулярных графтов и одиночных волосяных фолликулов, которые вводят с помощью одноразовых игл диаметром 0,8-1,0 мм.
Недостатком этого технического решения является относительно низкая эффективность, обусловленная малой приживаемостью волос.
Еще одним аналогом предложенного является способ [IBRAHIM ZA et al. Stem cell therapy as a novel therapeutic intervention for resistant cases of alopecia areata and androgenetic alopecia. J. Dermatolog Treat. 2016, Aug., 24:1-30; ZHAO J. et al. Treatment of alopecia by transplantation of hair follicle steam cells and dermal papilla cells encapsulated in algenate gels. Med. Hypotheses. 2008; 70(5): 1014-6], включающий использование мезенхимальных стволовых клеток, в том числе из волосяных фолликулов кожи, в т.ч. для интрадермального введения.
Недостатком указанных выше технических решений является относительно узкий арсенал способов лечения нерубцовой алопеции, что не всегда обеспечивает выбор эффективного способа.
В эстетической медицине для лечения различного вида алопеций все чаще и чаще используются методы клеточной терапии. Они демонстрируют высокую эффективность и являются хорошей альтернативой лечения облысения пересадкой волос, позволяющей вырастить новые волосы. Полное восстановление нормально функционирующего волосяного фолликула из выделенных и культивированных стволовых клеток ростовых зон волоса представляет собой проблему, которая еще не решена в тканевой инженерии.
Однако показано, что при введении в мезослой кожи головы собственных аутологичных клеток, выделенных из дермальной папиллы и зоны bulge волосяного фолликула в смеси с донорскими мезенхимальными клетками, выделенными из интимы стенки вены и Вартонева студня пуповины человека, стимулируется рост новых волос, улучшается состояние растущих волос, а также предотвращается их преждевременная потеря. Такие клетки способны встраиваться в поврежденные волосяные луковицы, тем самым восстанавливая их, способствовать сборке волосяных фолликулов de novo, как за счет клеток волосяного фолликула, так и за счет аллогенных клеток, которые улучшают трофику кожного покрова, индуцируя формирование новой капиллярной сети. Потеря волос, вызванная травмами или патологиями, такими, как алопеция, сказывается не только на психологическое благополучие пациентов, но и ухудшает нормальное функционирование кожи. Предложенный способ предлагает стратегию регенерации и неогенеза волосяного фолликула у взрослого человека.
Наиболее близким по технической сущности к предложенному является способ лечения нерубцовой алопеции [RU 2631642, C1, А61М 5/00, А61К 35/28, А61Р 17/14, 25.09.2017], включающий введение в мезодермальный слой кожи мезенхимальных стволовых клеток, которые выделяют из биоптата кожи с волосистой части головы взрослого донора, при этом, дополнительно выделяют мезенхимальные стволовые клетки из плаценты, после чего указанные клетки смешивают в соотношении от 3:1 до 1:3, доводят объем смеси до 2-4 мл и вводят ее в мезодермальный слой кожи человека в зоне облысения на глубину 2-3 мм через каждые 2-3 мм при объеме каждой инъекции, равном 0,02 мл.
Недостатком наиболее близкого технического решения является относительно низкая эффективность лечения.
Задачей предложенного способа является расширение арсенала способов лечения нерубцовой алопеции и повышение эффективности лечения.
Требуемый технический результат заключается в повышении эффективности лечения нерубцовой алопеции и расширение арсенала технических средств лечения алопеции.
Поставленная задача решается, а требуемый технический результат достигается тем, что, в способе лечения нерубцовой алопеции, включающем введение в мезодермальный слой кожи в зоне облысения клеточного материала на глубину 2-3 мм, согласно изобретению, предварительно получают клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, для чего выдергивают волосы из волосистой части головы взрослого донора и помещают их в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком, отбирают волосы, находящиеся в стадии анагена и отсекают от них волосяные фолликулы, которые промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика и переносят в 0,1% раствор коллагеназы 1-го типа, где их и инкубируют в течением 1-2 ч при 37°С и переносят в культуральные флаконы с коллагеновым покрытием с DMEM:F12, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки в растворе гентамицин/стрептомицин/глутамина с равным их соотношением, а через 21 день клеточный материал диссоциируют из сфероидов, образованных в культуральных флаконах, получая окончательно клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, и получают также клеточный материал в виде мезенхимальных стромальных клетоки плаценты человека и клеточный материал в виде эндотелиоцитов пуповинной вены, после чего каждый вид клеточного материала переносят в суспензию с использованием 0,25%-ного раствора трипсина с версеном (1: 1), материал промывают его физиологическим раствором путем двухкратного центрифугирования в по 5 минут при 300g с последующим переносом в стерильной среде в вакуумную пробирку, затем клеточный материал трех полученных видов смешивают в соотношении 1-3:1-3:1-3, переносят в пробирку и доводят объем смеси в ней до объема 2-4 мл и содержаат при температуре +2 - +8°С для последующего введения через иглу в мезодермальный слой кожи в виде папул с размером от 2 до 4 мм при угле наклона иглы в 45°.
На графических материалах представлены:
на фиг. 1 - чашка Петри с волосами донора в растворе Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика;
на фиг. 2 - волосяной фолликул в стадии анагена;
на фиг. 3 - пример формирования сфероидов из клеток ростовых зон волосяного фолликула и зоны bulge волосяных фолликулов;
на фиг. 4 - пример манипуляций для выделению и культивирования эндотелиоцитлов из интимы вены пуповины человека;
на фиг. 5 - пример манипуляций для обработки куска пуповины.
Предложенный способ лечения нерубцовой алопеции реализуется следующим образом.
Материально-техническое обеспечение.
1. Помещение для использования под лабораторию, отвечающее лицензионным требованиям.
2. Оборудование: центрифуга, СО2-инкубатор, ламинарный шкаф, инвертированный микроскоп, автоматическая пипетка, микропипетка, замораживатель, сосуд Дьюара, низкотемпературный холодильник, бытовой холодильник, камера Горяева, водяная баня, термос.
3. Реактивы: антибиотики, антимикотики, питательная среда ДМЕМ/Р12, фетальная телячья сыворотка, Версен, 0,25%-ный раствор трипсина, ДМСО, раствор Хенкса, физиологический раствор, коллагеназа 1-го типа, трипановый синий.
4. Расходные материалы: одноразовая культуральная пластиковая посуда (флаконы, пробирки, серологические пипетки, чашки Петри, наконечники для микропипеток, криопробирки); покровные стекла, набор медицинских инструментов (пинцет, хирургические ножницы, глазные ножницы, скальпель, шпатель, карцанг), вакутейнеры.
Получение аутологичных клеток из волосяных фолликулов кожи головы человека.
Получение образцов волос.
А. Волосы выдергиваются с разных областей волосистой части головы взрослого донора при помощи пинцета и помещаются в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком (см. фиг. 1), где представлена чашка Петри с волосами пациента в растворе Хенкса.
Б. При помощи микроскопа отбираются волосы, находящиеся в стадии анагена, у которых затем отсекаются волосяные фолликулы (см. фиг. 2).
Выделение аутологичных клеток из волосяных фолликулов кожи человека и их культивирование.
A. Все манипуляции по выделению и культивированию аутологичных клеток из волосяных фолликулов головы человека проводятся стерильно в условиях специально оборудованного культурального бокса.
Б. Отсеченные волосяные фолликулы промываются раствором Хенкса (ПанЭко, РФ) с добавлением антибиотика/антимикотика («Gibco», США).
B. Промытые луковицы переносятся в 0,1% раствор коллагеназы 1-го типа и инкубируются 1-2 ч при 37°С.
Г. После этого волосяные фолликулы переносятся в культуральные флаконы с коллагеновым покрытием с DMEM:F12, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки и р-р гентамицин/стрептомицин/глутамина (все - Gibco, США).
Д. Через две недели происходит образование сфероидов из клеток на поверхности волосяных фолликулов, в зоне дермальной папуллы и зоны bulge, (см. фиг. 3), где иллюстрируется формирование сфероидов из клеток ростовых зон волосяного фолликула.
Е. Спустя 21 день, когда происходит остановка роста сфероидов, клетки диссоциируют из сфероидов, и переводят в суспензию с использованием раствора 0,25%-го трипсина с версеном (1: 1).
Получение эндотелиоцитов из интимы стенки вены пуповины человека.
Получение пуповины.
А. Забор пуповины должен осуществляться сразу после родов.
Б. Пуповина помещается в стерильный герметичный контейнер,
о
который помещается на лед в сумку-холодильник (температура+2° - +8°С).
В. Транспортировка пуповины может осуществляться до трех суток при условии соблюдения герметичности, стерильности и температурного режима.
Г. К транспортируемой пуповине прилагается следующий пакет документов:
1. Анамнез донора (матери) пуповины.
2. Результаты диагностики крови донора (матери) пуповины на вирусы (в соответствии с приказным списком).
3. Информированное согласие донора.
Выделение эндотелиоцитов из интимы вены пуповины человека и их культивирование.
A. Все манипуляции по выделению и культивированию эндотелиоцитов из интимы вены пуповины человека проводятся стерильно в условиях специально оборудованного культурального бокса. Пример манипуляций для выделению и культивирования эндотелиоцитлов из интимы вены пуповины человека представлен на фиг. 4.
Б. Кусок пуповины, длиной 10-12 см промывается раствором Хенкса с добавлением антибиотика/антимикотика и помещается в чашку Петри 10 см.
B. С помощью шприца вена промывается еще несколько раз тем же раствором, до тех пор, пока сосуд не освободится от сгустков крови полностью (см. фиг. 5).
Г. Далее вена заполняется 0,1%-ным раствором коллагеназы I типа, пуповина с двух сторон зажимается корнцангами и помещается в СО2-инкубатор на 30 минут.
Д. После инкубации пуповину, не снимая зажимов, следует немного помять, а затем корнцанги разжать и слить все содержимое в центрифужную пробирку.
Е. Вена пуповины промывается раствором Хенкса еще несколько раз, все смывы также тщательно собираются в центрифужную пробирку.
Ж. Полученная суспензия центрифугируется 5 минут 200 g.
3. Осадки, полученные в соответствии с п. Д, ресуспендируются каждый в 15 мл ростовой среды: MEM 200; 10% фетальная телячья сыворотка; р-р гентамицин/стрептомицин/глутамина (все - Gibco, США); 0,25 мг ципрофлоксацина.
И. Содержимое каждой пробирки, полученное в соответствии с п. Ж, З, переносится в отдельный культуральный флакон площадью 75 см и культивируется со сменой ростовой среды (состав см. выше) каждые 3 дня до достижения полученной первичной культурой клеток 80%-ой конфлюэнтности.
К. При достижении монослоем 80%-ой конфлюэнтности, клетки переводятся в суспензию с использованием раствора 0,25%-го трипсина с версеном (1:1) и рассеваются в культуральные флаконы площадью 75 см в соотношении 1:3.
Получение мезенхимальных стромальных клеток из плаценты человека.
Получение плаценты.
A. Забор плаценты должен осуществляться сразу после родов.
Б. Плацента помещается в стерильный герметичный контейнер, который помещается на лед в сумку-холодильник (температура +2° - +8°С).
B. Транспортировка плаценты может осуществляться до трех суток при условии соблюдения герметичности, стерильности и температурного режима.
Г. К транспортируемой плаценте прилагается следующий пакет документов:
1. анамнез донора (матери) плаценты;
2. результаты диагностики крови донора (матери) плаценты на вирусы (в соответствии с приказным списком);
Выделение мезенхимальных стромальных клеток из плаценты человека и их культивирование.
A. Все манипуляции по выделению и культивированию мезенхимальных стромальных клеток из плаценты человека проводятся стерильно в условиях специально оборудованного культурального бокса.
Б. Амнион плаценты, вместе с неглубоким захватом хориона, нарезается на небольшие кусочки, достаточные для помещения в изопропиленовую пробирку объемом 50 мл.
B. Кусочки ткани, полученные в соответствии с п. Б, энергично промываются от крови. Для этого каждый кусочек помещается в отдельную изопропиленовую пробирку объемом 50 мл, заполненную 40 мл раствора Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика (Gibco, США) и энергично встряхивается.
Г. Промытые кусочки ткани измельчаются и инкубируются 1-2 ч при 370С в 0,1% растворе коллагеназы I го типа в чашках Петри диаметром 10 см из расчета 1 кусочек ткани: 1 чашка Петри: 10 мл раствора фермента.
Д. Полученная в соответствии с п. Г суспензия из каждой чашки Петри, переносится в отдельную изопропиленовую пробирку объемом 50 мл и осаждается центрифугированием (5 мин, 300 g).
Е. Осадки, полученные в соответствии с п. Д, ресуспендируются каждый в 15 мл ростовой среды: DMEM:F12; 10% фетальная телячья сыворотка; р-р гентамицин/стрептомицин/глутамина (все - Gibco, США); 0,25 мг ципрофлоксацина.
Ж. Содержимое каждой пробирки, полученное в соответствии с п. Д, Е переносится в отдельный культуральный флакон площадью 75 см и культивируется со сменой ростовой среды (состав см. выше) каждые 3 дня до достижения полученной первичной культурой клеток 80% ой конфлюэнтности.
3. При достижении монослоем 80% ой конфлюэнтности, клетки переводятся в суспензию с использованием раствора 0,25% го трипсина с версеном (1:1) и рассеваются в культуральные флаконы площадью 75 см в соотношении 1:3.
Подготовка и длительное хранение (криоконсервация) мезенхимальных стромальных клеток, выделенных из плаценты человека.
Замораживание клеток проводят на уровне не старше V пассажа для создания запаса клеток, которые можно впоследствии восстановить, или для сохранения невостребованных клеток. Все манипуляции по криоконсервации клеточных линий, предназначенных для длительного хранения, проводятся стерильно в условиях специально оборудованного культурального бокса.
Подготовка клеток к замораживанию.
Клетки отделяют от пластика смесью растворов версена и трипсина в отношении 1:1 и переносят в центрифужную пробирку (15-50 мл в зависимости от полученного обьема клеточной суспензии) и центрифугируют (5 мин, 300 g). Осадок ресуспендируют в среде для криозаморозки (90% фетальной телячьей сыворотки, 10% диметилсульфоксида (DMSO).
Подсчитывают количество клеток в полученной суспензии и разбавляют ее средой для криозаморозки до конечной концентрации 1 млн. клеток/мл. Полученную клеточную суспензию разливают в криопробирки требуемых объемов и сразу начинают процесс замораживания.
Режим криозамораживания.
А. Для замораживания криопробирки с клетками переносят в контейнер для замораживания пробирок Mr. Frosty™ (Thermo Scientific, США) и помещают его в низкотемпературный холодильник (-80°С).
Б. Через сутки ампулы с клетками переносят в сосуд Дьюара с жидким азотом (-196°С).
Разморозка криоконсервированного клеточного материала.
А. Клетки восстанавливают при температуре 37- 40° на водяной бане до таяния льда. Замороженные клетки достаточно хрупкие, плохо переносят пипетирование, взбалтывание и потому требуют особенно аккуратного обращения.
Б. Все манипуляции, связанные с размораживанием клеток, следует проводить максимально быстро и не допускать передержки клеток в размороженном криоконсерванте.
В. Содержимое криопробирки переносится в культуральный флакон 75 см2 с фильтром, содержащий 10 мл полной ростовой среды.
Д. Клетки культивируются 24 ч в СO2-инкубаторе (37°С, 5% СO2, 80% влажности), затем старая среда, содержащая криоконсервант, удаляется и заменяется на 10 мл свежей полной ростовой среды.
Е. Полученные клетки культивируются со сменой ростовой среды каждые 3 дня до достижения полученной первичной культурой клеток 80%-ой конфлюэнтности.
З. Далее работы с размороженными мезенхимальными стромальными клетками производятся в соответствии с п. З получения клеток.
Паспортизация клеточного материала.
Паспортизация является необходимой процедурой, документирующей результаты контроля состава, качества и безопасности клеточного материала.
Общая структура паспорта клеточного материала включает в себя четыре обязательных блока:
1. Общая информация: научное название клеток; происхождение клеточного материала; маркировка образца; информация о доноре клеток.
2. Жизнеспособность клеток, внешний вид образца: жизнеспособность клеток, %; стерильность; величина рН; цвет и консистенция образца; общая концентрация клеток, кл/мл; объем образца; время выдачи; срок годности, условия хранения.
3. Результаты тестирования образца на отсутствие инфекционных агентов из списка, общего для всех типов клеток.
4. Результаты тестирования образца на отсутствие инфекционных агентов, специфических для данного типа клеток.
Стандартное обследование клеточного материала после пассирования in vitro включает в себя тестирование методом ПЦР мезенхимальных клеток, выделенных из кожи и плаценты человека на отсутствие следующих инфекционных агентов:
- вирусов иммунодефицита 1 го и 2 го типов (Retroviridae, Orthoretrovirinae, Lentivirus);
- вирусов гепатита В (Hepadnaviridae, Orthohepadnavirus) и гепатита С (Flaviviridae, Hepacivirus);
- вирусов простого герпеса 1 го и 2 го типов (Herpesviridae, Alphaherpesvirinae, Simplexvirus); цитомегаловируса (Herpesviridae, Betaherpesvirinae, Cytomegalovirus); вируса Эпштейна-Барр (Herpesviridae, Gammaherpesvirinae, Lymphocryptovirus);
- Treponema pallidum (Spirochaetales, Spirochaetacea); Mycoplasma sp.(Mycoplasmatales, Mycoplasmataceae); Toxoplasma sp.(Eucoccidiorida, Sarcocystidae).
- папилломавирусов человека (Papillomaviridae) из рода Alphapapillomavirus (типы: 2, 6, 7, 10, 16, 18, 26, 32, 34, 53, 54, 61, 71, cand90);
- Ureaplasma sp.(Mycoplasmatales, Mycoplasmataceae);
- Chlamydia sp.(Chlamydiales, Chlamydiaceae).
Исключение инфекционных агентов в мезенхимальных стромальных клетках выполняется в клинико-диагностической лаборатории однократно. Стандартное обследование проводится после пассирования in vitro образца клеточной линии в количестве не менее 500 тыс.клеток.
Приготовление клеточного материала для транспортировки и медицинского применения.
А. Отобранные образцы клеточных культур, не старше V пассажа, переводятся в суспензию с использованием раствора 0,25%-го трипсина с версеном (1:1). Для этого ростовая среда удаляется, а монослой дважды промывается физиологическим раствором, а затем инкубируется в растворе 0,25%-го трипсина с версеном (1:1) при 37°С из расчета 3мл раствора на культуральный флакон площадью 75 см2.
Б. Полученная в соответствии с п. А суспензия переносится в изопропиленовую пробирку объемом 50 мл, после чего осуществляется подсчет количества в ней клеток при помощи камеры Горяева.
В. Далее суспензия промывается физиологическим раствором. Для этого клетки осаждаются центрифугированием (5 мин 300g), а осадок ресуспендируется в физиологическом растворе. Манипуляция повторяется дважды.
Г. Полученный в п. В осадок клеток, ресуспендируется в стерильной среде транспортировки, состоящей из физиологического раствора и разрешенного к применению лекарственного средства, обеспечивающего лучшую выживаемость клеток и улучшение лечебных характеристик технологии.
Д. Процент жизнеспособных клеток в препарате определяется с помощью окраски трипановым синим и подсчетом в камере Горяева. Для медицинского применения необходим уровень не ниже 80% жизнеспособных клеток в суспезии.
Е. Полученная в п. Г суспензия (далее клеточный материал) переносится стерильно в вакуумную пробирку для забора крови (вакутейнер, Gibco, США).
Ж. Все манипуляции, пп. А-Е, проводятся отдельно для каждого вида клеток.
3. Затем клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, клеточный материал в виде мезенхимальных стромальных клетоки плаценты человека и клеточный материал в виде эндотелиоцитов пуповинной вены смешивается в соотношении от 1-3:1-3:1-3 (аутологичные клетки волосяного фолликула: мезенхимальные стромальные клетки плаценты человека: эндотелиоциты пуповинной вены) в зависимости от показаний врача, который учитывает возраст пациента и степень тяжести заболевания.
И. Смесь, полученная в п. З, доводится до объема 2-4 мл. Объем зависит от площади очага облысения.
Транспортировка и временное хранение клеточного материала.
A. Вакутейнер с готовым клеточным материалом помещается в термос со льдом и транспортируется к месту назначения.
Б. Транспортировка и хранение клеточного материала осуществляется стерильно при температурном режиме +2 - +8°С.
B. Срок годности клеточного материала для медицинского применения не более 6 ч.
Введение клеточного материала.
Клеточный материал вводится в мезодермальный слой кожи в зоне облысения, как обычный мезотерапевтический коктейль. При введении используется папульная техника, при этом формируются папулы различного диаметра, что позволяет клеточному материалу действовать постепенно, поступая малыми порциями из депо, максимально пролонгируя свой регенеративный эффект. Рассасывание папул при процедуре происходит от нескольких часов до нескольких дней. Размер папул может колебаться от 2 до 4 мм, глубина введения клеточного материала 2-3 мм, угол наклона иглы составляет 45 градусов.
В предложенном способе лечения аутологичные клетки волосяного фолликула выделяются, культивируются и далее при минимальном масштабировании и без пассирования вводятся в очаг облысения пациента. Особенно важным является то, что значительная часть клеток выращивается в сфероидах. Многочисленные научные исследования продемонстрировали, что двухмерное культивирование в значительной мере снижает активность аутологичных клеток волосяного фолликула, а также приводит к потере их плюрипотентных свойств, что ухудшает их регенеративный потенциал. Этого не происходит при трехмерном культивировании в сфероидах, так как это естественная ориентация клеток, наиболее близко воспроизводящая их модель деления и существования in vivo. Клетки при этом, в условиях культуры, когда на них не оказывается воздействие организма в целом, значительно омолаживаются, становятся ювенильными. Возвращаясь в кожу, они не только сами оказывают омолаживающее воздействие, но и способны запустить обратные процессы у стареющих или поврежденных клеток кожи. Полученные и размноженные in vitro клетки дермальной папилы и зоны bulge способны встраиваться в поврежденные участки волосяного фолликула и собирать их de novo. Эффект от клеточной терапии аутологичными клетками усиливается совместным введением с донорскими эндотелиоцитами, выделенными из интимы стенки пуповинной вены и стромальными плацентарными клетками. Эндотелиоциты способны стимулировать рост кровеносных капилляров в коже, а совместное их введение со стромальными клетками, выделенными из плаценты человека, в значительной степени усиливают это свойство.
Таким образом, мы получаем улучшение трофики кожи в зоне облысения за счет образования в ней новых капилляров, что усиливает кровообращение. Нерубцовая алопеция - самый распространенный вид облысения на сегодняшний день, который не всегда хорошо поддается лечению обычными методами в трихологии, но при этом доставляет пациенту массу неудобств и проблем эстетического характера. Клеточная мезотерапия данного заболевания показала очень хороший результат и сегодня является альтернативой медикаментозному лечению нерубцовой алопеции. Суть самого способа подразумевает доставку клеточного материала непосредственно в мезодерму, что позволяет введенным клеткам различного происхождения запустить регенеративные процессы в проблемной зоне. Результаты фототрихограммы пациентов, применивших данный способ лечения, показывают переход веллусных волос в терминальные, утолщение волос в зоне проведенной процедуры и остановка их потери, а также появление новых волос в зоне облысения.
Claims (1)
- Способ лечения нерубцовой алопеции, включающий введение в мезодермальный слой кожи в зоне облысения клеточного материала на глубину 2-3 мм, отличающийся тем, что предварительно получают клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, для чего выдергивают волосы из волосистой части головы взрослого донора и помещают их в раствор Хенкса с антибиотиком и антимикотиком, отбирают волосы, находящиеся в стадии анагена, и отсекают от них волосяные фолликулы, которые промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотика и антимикотика и переносят в 0,1% раствор коллагеназы I-го типа, где их инкубируют в течение 1-2 ч при 37°С, и переносят в культуральные флаконы с коллагеновым покрытием с DMEM:F12, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки в растворе гентамицин/стрептомицин/глутамин с равным их соотношением, а через 21 день клеточный материал диссоциируют из сфероидов, образованных в культуральных флаконах, получая окончательно клеточный материал в виде аутологичных клеток волосяного фолликула, и получают также клеточный материал в виде мезенхимальных стромальных клеток плаценты человека и клеточный материал в виде эндотелиоцитов пуповинной вены, после чего каждый вид клеточного материала переносят в суспензию с использованием 0,25%-ного раствора трипсина с версеном 1:1, материал промывают физиологическим раствором путем двухкратного центрифугирования по 5 минут при 300 g с последующим переносом в стерильной среде в вакуумную пробирку, затем клеточный материал трех полученных видов смешивают в соотношении 1-3:1-3:1-3, переносят в пробирку и доводят объем смеси в ней до объема 2-4 мл и хранят при температуре +2-+8°С для последующего введения через иглу в мезодермальный слой кожи в виде папул с размером от 2 до 4 мм при угле наклона иглы в 45°.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018139307A RU2695364C1 (ru) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Способ лечения нерубцовой алопеции |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018139307A RU2695364C1 (ru) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Способ лечения нерубцовой алопеции |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2695364C1 true RU2695364C1 (ru) | 2019-07-23 |
Family
ID=67512387
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018139307A RU2695364C1 (ru) | 2018-11-08 | 2018-11-08 | Способ лечения нерубцовой алопеции |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2695364C1 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2271819C1 (ru) * | 2004-08-18 | 2006-03-20 | ЗАО "РеМеТэкс" | Биотрансплантат, способ его получения (варианты) и способ лечения алопеции |
CN105769911A (zh) * | 2016-03-23 | 2016-07-20 | 中国人民解放军第二军医大学 | 间充质干细胞诱导斑秃处毛发再生的方法及应用 |
US9533012B2 (en) * | 2014-09-17 | 2017-01-03 | Gwo Xi Stem Cell Applied Technology Co., Ltd. | Method for enhancing therapeutic effect of stem cells |
RU2631642C1 (ru) * | 2016-11-29 | 2017-09-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания Стемма" | Способ лечения нерубцовой алопеции |
-
2018
- 2018-11-08 RU RU2018139307A patent/RU2695364C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2271819C1 (ru) * | 2004-08-18 | 2006-03-20 | ЗАО "РеМеТэкс" | Биотрансплантат, способ его получения (варианты) и способ лечения алопеции |
US9533012B2 (en) * | 2014-09-17 | 2017-01-03 | Gwo Xi Stem Cell Applied Technology Co., Ltd. | Method for enhancing therapeutic effect of stem cells |
CN105769911A (zh) * | 2016-03-23 | 2016-07-20 | 中国人民解放军第二军医大学 | 间充质干细胞诱导斑秃处毛发再生的方法及应用 |
RU2631642C1 (ru) * | 2016-11-29 | 2017-09-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания Стемма" | Способ лечения нерубцовой алопеции |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
IBRAHIM Z.A. et al. Stem cell therapy as a novel therapeutic intervention for resistant cases of alopecia areata and androgenetic alopecia. J Dermatolog Treat. 2016 Aug 24:1-30. * |
ОЛИСОВА О.Ю. Богатая тромбоцитами плазма в терапии нерубцовых алопеций// Российский журнал кожных и венерических болезней, 2014, N 6, С. 60-62. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI773693B (zh) | 從臍帶的羊膜分離間質幹細胞的方法、從臍帶的羊膜分離的間質幹細胞群以及用於從臍帶的羊膜分離間質幹細胞的細胞培養基 | |
WO2019161591A1 (zh) | 间充质干细胞的分离培养方法及冻存、复苏方法 | |
RU2323252C1 (ru) | Способ культивирования мезенхимальных стволовых клеток человека ex vivo | |
US9173903B2 (en) | Fluid associated with adult stem cells for medical, cosmetic, and veterinary use | |
CN102712905A (zh) | 从脐带组织分离包括间充质祖细胞亚群的单核细胞和包括内皮祖细胞亚群的血管细胞的方法 | |
CN106434557A (zh) | 由脐带间充质干细胞制备cd34阳性细胞的方法 | |
TW202012618A (zh) | 一種誘導或改善間質幹細胞傷口癒合特性的方法 | |
US20200149005A1 (en) | The method of autologous primary hair follicles preparation in 3d culture | |
JP5340564B2 (ja) | 人工皮膚およびその製造方法 | |
RU2631642C1 (ru) | Способ лечения нерубцовой алопеции | |
CN106701682A (zh) | 由脐血分离造血干细胞并扩增cd34阳性细胞的方法 | |
CN115418341B (zh) | 成纤维细胞向毛乳头细胞转分化的方法及其应用 | |
US8986678B2 (en) | Preparation of parental cell bank from foetal tissue | |
CN105154388B (zh) | 一种皮肤角质细胞分离、培养方法 | |
RU2695364C1 (ru) | Способ лечения нерубцовой алопеции | |
RU2681854C1 (ru) | Способ лечения нерубцовой алопеции | |
BR112020004517A2 (pt) | células tronco derivadas de porco neonato e processo para sua preparação | |
CN111484971A (zh) | 血源性女性自体生殖干细胞的制备方法和试剂盒及应用 | |
CN111494423B (zh) | 一种干细胞组合物及其应用和干细胞滴液 | |
RU2455353C1 (ru) | Клеточный продукт для аутологичных и аллогенных трансплантаций, полученный из пуповины человека, и способ его получения | |
RU2664478C2 (ru) | Способ получения культуральной ростовой добавки на основе лизата тромбоцитов человека | |
US20130302890A1 (en) | Stem cells & matrix from cord tissue | |
Goh | Surgical Therapies | |
AU2015215979B2 (en) | Apparatus and process for generating and harvesting adult stem cells and fluid associated with it from skin and omentum for medical, cosmetic, and veterinary use | |
RU2526813C1 (ru) | Комбинированный трансплантат дермального матрикса с мезенхимальными мультипотентными стромальными клетками, способ его получения и способ лечения ран с его использованием |