RU2694231C1 - Способ определения предрасположенности к онкопатологии - Google Patents
Способ определения предрасположенности к онкопатологии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2694231C1 RU2694231C1 RU2018100492A RU2018100492A RU2694231C1 RU 2694231 C1 RU2694231 C1 RU 2694231C1 RU 2018100492 A RU2018100492 A RU 2018100492A RU 2018100492 A RU2018100492 A RU 2018100492A RU 2694231 C1 RU2694231 C1 RU 2694231C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- genotype
- myc
- cdk4
- allele
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 101150002130 Rb1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 102200161970 rs137853294 Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102100038042 Retinoblastoma-associated protein Human genes 0.000 claims abstract 3
- 101150108519 CDK4 gene Proteins 0.000 claims description 12
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 7
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101150076397 blm gene Proteins 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 4
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 4
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 108700010154 BRCA2 Genes Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150008921 Brca2 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 208000006402 Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101000725164 Homo sapiens Cytochrome P450 1B1 Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N chloroform;phenol Chemical compound ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 210000005002 female reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009033 hematopoietic malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 1
- 230000002985 oncosuppressive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002205 phenol-chloroform extraction Methods 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M xylene cyanol Chemical compound [Na+].C1=C(C)C(NCC)=CC=C1C(\C=1C(=CC(OS([O-])=O)=CC=1)OS([O-])=O)=C\1C=C(C)\C(=[NH+]/CC)\C=C/1 NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
- C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pathology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицинской генетики. Предложен способ обнаружения предрасположенности к различным типам рака, включающий выделение тотальной нативной ДНК из периферической крови и проведение полимеразной цепной реакции. Проводят генотипирование полиморфных вариантов rs2072052 гена CDK4, rs3134613 гена Myc-L и rs137853294 гена RB1. При выявлении генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотипа *А/*С полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 и генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs137853294 гена RB1, a также их сочетаний RB1/Myc-L/CDK4 - GG/TT/AC, GG/TT/AC, GG/TG/AC, CG/GG/AC, CG/GG/AA прогнозируют высокий риск развития онкопатологии. Изобретение обеспечивает повышение точности прогноза. 2 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к области медицинской генетики и может быть использовано для диагностики предрасположенности к различным видам онкологии.
Рак является одной из основных причин смерти в мире; так, в 2015 г. от этого заболевания умерли 8,8 млн человек. В России у женщин и мужчин преобладают разные формы рака. В целом на первом месте находится рак кожи, на втором месте располагается опухоль молочных желез. Далее по убывающей распространенности расположились такие формы злокачественных новообразований: рак легких, желудка, толстого кишечника, простаты, прямой кишки, лимфоидной ткани, кроветворных органов, матки, почки, поджелудочной железы, шейки матки, мочевого пузыря и яичников. Существует много предложений по диагностике предрасположенности к различным типам рака.
Известен способ прогнозирования наследственной
предрасположенности к раку молочной железы, который характеризуется тем, что проводят амплификацию коротких фрагментов гена BLM протяженностью до 200 и.о., с последующим высокоразрешающим плавлением, включающим оптимизированный для гена BLM этап формирования гетеродуплексов: быстрый нагрев до 95°С и медленное снижение температуры до 50°С; выбирают один фрагмент с аберрантным профилем плавления для секвенирования, секвенируют выбранный фрагмент и при выявлении мутации гена BLM прогнозируют наследственную предрасположенность к раку молочной железы. Способ повышает точность детекции мутации, прост в исполнении и высокоинформативен: позволяет выявлять до 100% мутаций в гене BLM [Патент РФ 2522501 от 17.10.2012].
Известен способ диагностики рака, предраковых состояний и предрасположенности к другим формам заболеваний путем использования в качестве молекулярного маркера интерферон-регулирующего фактора 1 (IRF-1). Способ отличается тем, что IRF-1 - специфичная РНК, анализируется в образце крови или образце, содержащем другой материал, полученный путем биопсии, преимущественно путем обратной транскрипции - реакции удлинения цепи полимеразой, или в таком образце определяется содержание биологически активного полипептида IRF-1. Изобретение основано на том, что новый механизм инактивации генасупрессора опухоли IRF-1 играет критическую роль, например, в гематопоэтической малигнизации. Необычный скиппинг экзонов приводит к образованию молекул РНК, которые утратили экзон 2 или экзоны 2 и 3. Относительные количества молекул РНК полной длины и укороченных молекул значительно различаются в образцах, полученных от больных с опухолями и от здоровых доноров. Изобретение также относится к IRF-1 - специфичным олигонуклеотидам [Заявка на патент РФ 95102480 от 27.12.1996].
Прототипом изобретения является способ прогнозирования повышенного риска, включающий обнаружение в биологическом образце от субъекта комбинированного генотипа на основе идентифицированных вариантов гена CYP1B1, гена СНЕК2 и гена BRCA2, где присутствие комбинированного генотипа является показателем предрасположенности с высоким риском по меньшей мере к одному из приведенных ниже типов рака: рака молочной железы, ободочной кишки, почки, гортани, легкого, поджелудочной железы, простаты, щитовидной железы, женских половых путей и яичников, который является качественно и количественно отличным от суммы эффектов низкого риска вариантов этих трех генов, взятых по отдельности [Патент РФ №2009 127 735 от 27.01.2011]. Недостатком данного прототипа является повышенная трудоемкость при генотипировании образцов ДНК.
Задачей изобретения является расширение арсенала средств, направленных на прогнозирование предрасположенности к онкологии, повышение точности и информативности в индивидуальном прогнозе, снижение материальных затрат.
Техническим результатом изобретения является повышение точности и расширение выбора ассоциированных генов, направленных на прогнозирование предрасположенности к раку, повышение точности и информативности в индивидуальном прогнозе, снижение материальных затрат.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе обнаружения предрасположенности к онкологии, включающем выделение тотальной нативной ДНК из периферической крови, генотипирование путем проведения полимеразной цепной реакции, согласно изобретению проводят генотипирование полиморфных вариантов rs3134613 гена Myc-L, rs137853294 гена RB1 и rs2072052 гена CDK4 в качестве праймеров используют олигонуклеотиды 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3', 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3 для гена Myc-L, 5'-tgggggaaagaaaagagtggtagaa-3', 5'-gaggagagaaggtgaagtgcttg-3' для гена RB1, 5'-caccttttcgctccaccatg-3', 5'-ggattaccttgtcactgagcc-3' для гена CDK4, и при выявлении генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs137853294 гена RB1 и гетерозиготного генотипа *А/*С полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 прогнозируют высокий риск развития рака молочной железы.
Поиск новых генов, ассоциированных с онкологией, представляется достаточно важной задачей. Во-первых, сведения о присутствии предрасполагающих мутаций к раку у той или иной женщины позволяют сформировать индивидуальный комплекс медицинских мероприятий, направленных на профилактику и своевременную диагностику этого заболевания. Во-вторых, данные последних лет свидетельствуют о том, что онкопатологии нуждаются в особых, отличных от «спорадических» карцином, схемах лечебных воздействий.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.
Используют метод фенольно-хлороформной экстракции ДНК из периферической крови (Mathew, 1984). Образцы ДНК получают из 4 мл венозной крови человека. В качестве антикоагулирующего соединения используют 0.5 мл 0.5 М раствора ЭДТА. Для получения фракции клеточных ядер к 4 мл крови добавляют 10 мл лизирующего буфера (0.32 М сахароза; 5 мМ MgCl2; 1% тритон Хх100; 10 мМтрис-HCl, рН=7.5), инкубируют 15 мин в морозильнике и центрифугируют 20 мин при 1500g. Полученный осадок ресуспензируют в 400 мкл STE-буфера, затем добавляют 20 мкг/мл протеиназы К и инкубируют при температуре 370С в течение 12 часов. Из полученного лизата выделяют ДНК. Для этого проводят три экстракции по 8 мин при 10000 об/мин: первую - 500 мкл забуферного фенола, вторую-смесью фенол-хлороформ (1:1) и одну экстракцию хлороформом. ДНК осаждают холодным 96% этанолом. Осадок промывают 70% этанолом, подсушивают на воздухе и растворяют в 200-500 мкл дезионизированной воды.
В дальнейшем, полученную ДНК используют в качестве матрицы для полимеразной цепной реакции (ПНР) полиморфных локусов генов Myc-L, CDK4 и RB1. Амплификацию изученных локусов проводят с помощью метода полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе «Терцик».
ПНР проводили по следующей схеме:
1. При использовании ScreenMix компании Евроген на 1 образец ДНК используют реактивы в следующем соотношении: 3,5 мкл воды, 1,5 мкл ScreenMix(5x), обратный и прямой праймеры по 2 мкл. Затем добавляют по капле вазелинового масла для предотвращения испарения смеси.
2. При приготовлении рабочей смеси с Taq-полимеразы к 1 мкл геномной ДНК добавляют 2 мкл прямого и обратного олигопраймеров, 1 мкл дезоксинуклеотидтрифосфата, 0,15 мкл термофильной ДНК-полимеразы, 1 мкл буфера для ПЦР, 3,35 мкл воды для инъекций. Затем добавляют вазелинового масла для предотвращения испарения смеси.
В качестве праймеров используют следующие последовательности олигонуклеотидов: 5'-caccttttcgctccaccatg-3', 5'-ggattaccttgtcactgagcc-3' для гена CDK4, 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3', 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3 для гена Myc-L, 5'-tgggggaaagaaaagagtggtagaa-3', 5'-gaggagagaaggtgaagtgcttg-3' для гена RB1.
Режим амплификации для гена Myc-L: 35 циклов со следующими параметрами: 95°С - 30 секунд, 53°С - 30 секунд, 72°С - 30 секунд. После 35-го цикла проводили инкубацию при 72°С в течение 7 минут. Программа для амплификации гена CDK4 следующая: начальная денатурация при 95°С в течение 5 мин.; 30 циклов, включая денатурацию при 95°С - 30 секунд, отжиг праймеров при 61°С - 30 секунд, синтез ДНК при 72°С - секунд; инкубацию при 72°С в течение 7 минут. Для гена RB1 программа амплификации состояла из следующих этапов: денатурации при 95°С - 5 минут; 35 циклов, включая денатурацию при 95°С - 50 секунд, отжиг праймеров при 62°С - 50 секунд, синтез ДНК при 72°С - 50 секунд; и последующую инкубацию при 72°С в течении 7 минут.
Полиморфные варианты rs2072052 гена CDK4, rs3134613 гена Myc-L и rs137853294 гена RB1 являются рестрикционными. Поэтому после проведения полимеразной цепной реакции продукты амплификации подвергают последующей рестрикции - обрабатывают рестрикционной смесью, состоящей из 1 мкл буфера и 0,1 мкл рестриктазы. Для этого 7 мкл амплификата смешивают с 1,1 мкл эндонуклеазами рестрикции. Для полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 используют эндонуклеазу Bst2UI, инкубируют в течение 16 часов в термостате при 60°С и затем идентифицируют аллель *С по фрагментам длиной 133+165 нуклеотидных пар, а аллель *А - 299 нуклеотидных пар.
При идентификации аллелей по полиморфному локусу rs3134613 гена Myc-L смесь амплификата обрабатывают эндонуклеазой рестрикции EcoRI, затем проводят инкубацию при 37°С в течение 16 часов и определяют аллель *Т состоящий из 2 фрагментов длиной 196 и 165 пар оснований и аллеля *G длиной в 361 нуклеотидную пару.
Для полиморфного варианта rs137853294 гена RB1 синтезируют ДНК-продукт длиной 327 нуклеотидных пар, который расщепляют рестриктазой MSP1, образуя фрагменты ДНК и при этом идентифицируют аллель *С длиной в 327 нуклеотидных пар, аллель *G длиной фрагментов в 168 и 159 нуклеотидных пар.
Затем проводят электрофорез в вертикальном 7% полиакриламидном геле. В качестве электролита для электрофореза применяют 1X боратный буфер (0,089 М трис HCl рН=7,8; 0,089 М борная кислота, 0,002 М ЭДТА с рН=8,0).
Перед нанесением на вертикальный электрофорез пробы смешивают в соотношении 1:5 с краской, содержащей 0,25% бромфенолового синего, 0,25% ксиленцианола, 15% фикола. Эти пробы вводят в лунки и проводят электрофорез при напряжении 300 В в течение 20-30 минут после 15-минутного преэлектрофореза. После разделения продуктов гель 3 минуты окрашивают в бромистом этидии (0,1 мкг/мл в 1*ТАЕ), затем промывают дистиллированной водой и визуализируют под УФ свете при длине волны 254 нм. Генотипы типируют по критерию присутствия или отсутствия сайта рестрикции и соответствующего фрагмента на электрофорезе.
Было обследовано 220 проживающих в Республике Башкортостан пациентов, образцы ДНК которых, были взяты при информированном согласии на взятие крови, проведение лабораторных и генетических исследований. Из них 120 здоровых индивидов без отягощенного онкологического анамнеза и 100 онкологических больных с клинически подтвержденным онкологическим анамнезом, находившихся на стационарном лечении в ГБУЗ «Республиканский клинический онкологический диспансер» МЗ Республики Башкортостан. Клиническое обследование больных проведено врачами отделений.
Исследование полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L выявило существенные различия в частотах генотипов у больных раком и в группе контроля. Так в группе онкобольных выявлено достоверно значимое увеличение частоты генотипа *G/*G (р=0,001, χ2=6,71) и аллеля *G (p=0,003, χ2=4,75).
При анализе распределения частот генотипов и аллелей полиморфного локуса rs2072052 гена CDK4 было выявлено достоверно значимое повышение частоты гетерозиготного генотипа *А/*С (р=0,05, χ2=3,85) и непротективного аллеля *С (р=0,02, χ2=5,3) в группе онкобольных.
Анализ распределения частот генотипов и аллелей полиморфного локуса rs137853294 гена RB1 показал достоверно значимое повышение частоты гомозиготного генотипа *G/*G (р=0,0005, χ2=57,61) и непротективного аллеля *G (р=0,0005, χ2=19,84) в группе онкобольных.
В результате сравнительного анализа распределения частот сочетаний генотипов полиморфных локусов изучаемых генов для оценки взаимодействия генов-онкосупрессоров с онкогенами при предрасположенности к онкологии были выявлены достоверно значимые различия в исследуемых выборках, так было выявлено повышение частот 6 сочетаний, не выявленных в группе контроля. В группе онкобольныхвыявлены рисковые сочетания генотипов по полиморфным локусам rs137853294 гена Rb1, rs3134613 гена Myc-L и rs2072052 гена CDK4, которые в группе контроля не были выявлены: GG/TT/AC (р=0,002, χ2=14,36), GG/TT/AC (р=0,001, χ2=6,22), GG/TG/AC (р=0,002, χ2=14,36), CG/GG/AC (р=0,002, χ2=10,29), CG/GG/AA (р=0,001, χ2=6,22).
На основании полученных результатов можно сделать вывод об ассоциации генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотипа *А/*С полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 и генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs137853294 гена RB1 с повышенным риском развития онкопатологии и возможности использования данных полиморфизмов для прогнозирования онкологического заболевания. Выявленные сочетания генотипов включают как рисковые генотипы генов онкосупрессии, так и онкогена, что свидетельствует о совместном влиянии данных генов на риск развития онкопатологии.
Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Пациентка Н., 49 лет, поступила с жалобами на уплотнения в правой молочной железе.
Предварительный диагноз: рак молочной железы.
Семейный анамнез: онкологическими заболеваниями не отягощен.
Результаты лабораторных исследований: опухоль в верхненаружном квадранте правой молочной железы 2,5 см. Лимфоузлы не увеличены. Слева без патологии. Цитология: протоковый рак умеренно-дифференцированный.
Результаты ПНР: в клиническом материале выявлен генотип *G/*G и аллель *G полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотип *А/*С полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 и генотип *G/*G, аллель *G полиморфного локуса rs!37853294 гена RB1.
Окончательный диагноз: рак правой молочной железы II стадии без метастаз.
Пример 2. А., 45 лет, из группы контроля.
Результаты ПЦР: в клиническом материале выявлен генотип *Т/*Т и аллель *Т полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотип *А/*А полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 и генотип *С/*С полиморфного локуса rs137853294 гена RB1.
Таким образом, предлагаемый способ определения предрасположенности к онкологии позволяет выявлять и идентифицировать риск развития рака в доступном клиническом материале, что коррелирует с результатами других исследований и, соответственно, обеспечивает единую интерпретацию данных.
Claims (1)
- Способ обнаружения предрасположенности к различным типам рака, включающий выделение тотальной нативной ДНК из периферической крови и ДНК-типирование путем проведения полимеразной цепной реакции, отличающийся тем, что проводят генотипирование полиморфных вариантов rs2072052 гена CDK4, rs3134613 гена Myc-L и rs137853294 гена RB1, в качестве праймеров используют олигонуклеотиды 5'-caccttttcgctccaccatg-3', 5'-ggattaccttgtcactgagcc-3' для гена CDK4, 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3', 5'-tttgggatgtagggaagcctgc-3 для гена Myc-L, 5'-tgggggaaagaaaagagtggtagaa-3', 5'-gaggagagaaggtgaagtgcttg-3' для гена RB1, и при выявлении генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs3134613 гена Myc-L, генотипа *А/*С полиморфного варианта rs2072052 гена CDK4 и генотипа *G/*G и аллеля *G полиморфного локуса rs137853294 гена RB1, a также их сочетаний RB1/Myc-L/CDK4 - GG/TT/AC, GG/TT/AC, GG/TG/AC, CG/GG/AC, CG/GG/AA прогнозируют высокий риск развития онкопатологии.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100492A RU2694231C1 (ru) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Способ определения предрасположенности к онкопатологии |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018100492A RU2694231C1 (ru) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Способ определения предрасположенности к онкопатологии |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2694231C1 true RU2694231C1 (ru) | 2019-07-10 |
| RU2018100492A RU2018100492A (ru) | 2019-07-16 |
| RU2018100492A3 RU2018100492A3 (ru) | 2019-07-17 |
Family
ID=67251949
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018100492A RU2694231C1 (ru) | 2018-01-09 | 2018-01-09 | Способ определения предрасположенности к онкопатологии |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2694231C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2777084C1 (ru) * | 2021-04-27 | 2022-08-01 | Акционерное общество "Центр Генетики и Репродуктивной Медицины "ГЕНЕТИКО" | Способ преимплантационного генетического тестирования семейной фокальной эпилепсии 1 типа |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2161309C2 (ru) * | 1994-03-18 | 2000-12-27 | Исследовательский Фонд Университета Юты, | Мутации гена мтs в зародышевой линии и способ выявления предрасположенности к злокачественным опухолям в гене мтs |
| RU2470998C2 (ru) * | 2006-06-22 | 2012-12-27 | Ян Любински | Определение предрасположенности к раку путем идентификации генотипических комбинаций специфичных вариантов генов cyp1b1, brca2 и снек2 |
-
2018
- 2018-01-09 RU RU2018100492A patent/RU2694231C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2161309C2 (ru) * | 1994-03-18 | 2000-12-27 | Исследовательский Фонд Университета Юты, | Мутации гена мтs в зародышевой линии и способ выявления предрасположенности к злокачественным опухолям в гене мтs |
| RU2470998C2 (ru) * | 2006-06-22 | 2012-12-27 | Ян Любински | Определение предрасположенности к раку путем идентификации генотипических комбинаций специфичных вариантов генов cyp1b1, brca2 и снек2 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| YE Y. et al. Genetic variants in cell cycle control pathway confer susceptibility to bladder cancer. Cancer. 2008 Jun; 112(11): 2467-74. * |
| ГУБАЕВА Ю.Г. и др. Анализ взаимодействия генов-онкосупрессоров (RB, ING1, ТР53) при онкопатологии. Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки. Электронный сборник статей по материалам XL студенческой международной заочной научно-практической конференции. - М.: Изд. "МЦНО". 2016; 11(39): 6-14 [Найдено 20.11.2018] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.nauchforum.ru/archive/MNF_nature/11(39).pdf . * |
| ГУБАЕВА Ю.Г. и др. Анализ роли полиморфного варианта онкогена MYC-L при онкопатологии. Материалы Всероссийской (с международным участием) студенческой научно-практической конференции "Наука 2020" (19 апреля 2017 г.). - Уфа: Изд-во БГПУ, 2017. - С. 172-175. * |
| ГУБАЕВА Ю.Г. и др. Анализ роли полиморфного варианта онкогена MYC-L при онкопатологии. Материалы Всероссийской (с международным участием) студенческой научно-практической конференции "Наука 2020" (19 апреля 2017 г.). - Уфа: Изд-во БГПУ, 2017. - С. 172-175. ГУБАЕВА Ю.Г. и др. Анализ взаимодействия генов-онкосупрессоров (RB, ING1, ТР53) при онкопатологии. Молодежный научный форум: Естественные и медицинские науки. Электронный сборник статей по материалам XL студенческой международной заочной научно-практической конференции. - М.: Изд. "МЦНО". 2016; 11(39): 6-14 [Найдено 20.11.2018] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.nauchforum.ru/archive/MNF_nature/11(39).pdf . * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2777084C1 (ru) * | 2021-04-27 | 2022-08-01 | Акционерное общество "Центр Генетики и Репродуктивной Медицины "ГЕНЕТИКО" | Способ преимплантационного генетического тестирования семейной фокальной эпилепсии 1 типа |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2018100492A (ru) | 2019-07-16 |
| RU2018100492A3 (ru) | 2019-07-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Le Guellec et al. | CTNNB1 mutation analysis is a useful tool for the diagnosis of desmoid tumors: a study of 260 desmoid tumors and 191 potential morphologic mimics | |
| CN105316421B (zh) | 用于检测与肺癌相关的shox2基因启动子区甲基化程度的试剂盒 | |
| CN107254531B (zh) | 早发性结直肠癌辅助诊断的遗传生物标志物及其应用 | |
| CN104745575A (zh) | 用于检测细胞增殖性异常或疾病程度分级的基因组合物及其用途 | |
| JP5209272B2 (ja) | 肝臓癌関連遺伝子、及び肝臓癌リスクの判定方法 | |
| CN104745681A (zh) | 多元基因组合物及其用途 | |
| Alharbi et al. | Screening for genetic mutations in LDLR gene with familial hypercholesterolemia patients in the Saudi population | |
| CN110564850B (zh) | 一种ewsr1-tfeb融合基因及其检测引物和应用 | |
| EP3368684B1 (en) | Biomarker for breast cancer | |
| CN113355414A (zh) | 食管癌检测试剂盒及其应用 | |
| CN113215257A (zh) | 一种用于检测乳腺癌相关基因甲基化的核酸组合物、试剂盒和检测方法 | |
| JPWO2011148715A1 (ja) | 正常眼圧緑内障疾患感受性遺伝子及びその利用 | |
| RU2694231C1 (ru) | Способ определения предрасположенности к онкопатологии | |
| CN109439750B (zh) | 一种用于检测宫颈癌易感性的分子标记、试剂盒及应用 | |
| RU2440415C1 (ru) | Набор синтетических олигонуклеотидов для определения нуклеотидной последовательности кодирующей части гена brca1 и выявления мутаций, ассоциированных с наследственными формами рака молочной железы | |
| CN110029165A (zh) | 一种用于检测子宫内膜癌易感相关遗传标记的试剂盒 | |
| US20090192107A1 (en) | Breast Cancer Markers | |
| CN117210559A (zh) | 一种卵巢癌相关的基因甲基化检测组合物及其用途 | |
| CN109321658B (zh) | 一种检测宫颈癌易感性的试剂盒 | |
| US11542559B2 (en) | Methylation-based biomarkers in breast cancer screening, diagnosis, or prognosis | |
| US10155991B2 (en) | Biomarkers for use in colorectal cancer | |
| CN108118091B (zh) | 可用于检测与结直肠癌相关的prmt6基因启动子区甲基化程度的试剂盒及其应用 | |
| CN102732637B (zh) | 一种多重巢式甲基化特异性pcr检测试剂盒及其使用方法与应用 | |
| CN106868130A (zh) | 用于结肠直肠癌中使用的生物标志物 | |
| KR20100090702A (ko) | 암의 검출에 사용하기 위한 약 12317-16254 잔기의 미토콘드리아 ｄｎａ 결손 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200110 |