RU2693469C1 - Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity - Google Patents
Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity Download PDFInfo
- Publication number
- RU2693469C1 RU2693469C1 RU2018142928A RU2018142928A RU2693469C1 RU 2693469 C1 RU2693469 C1 RU 2693469C1 RU 2018142928 A RU2018142928 A RU 2018142928A RU 2018142928 A RU2018142928 A RU 2018142928A RU 2693469 C1 RU2693469 C1 RU 2693469C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- homozygous
- obesity
- risk
- men
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
- C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицинской диагностики и терапии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития у мужчин гипертонической болезни, ассоциированной с ожирением.The invention relates to the field of medical diagnosis and therapy, and can be used to predict the risk of developing hypertension in men associated with obesity.
Такие социально-значимые заболевания, как гипертоническая болезнь (ее еще называют эссенциальная гипертензия, далее - ЭГ) и ожирение, являются мультифакторными патологиями, в основе которых лежит сочетание неблагоприятных аллелей ряда генов и действия факторов внешней среды [Баранов B.C. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины. СПб.: Изд-во Н-Л, 2009. 528 с.].Such socially significant diseases as hypertension (also called essential hypertension, hereinafter referred to as EG) and obesity are multifactorial pathologies based on a combination of unfavorable alleles of a number of genes and the action of environmental factors [Baranov B.C. Genetic passport is the basis of individual and predictive medicine. St. Petersburg: Publishing House NL, 2009. 528 p.].
Объединяющими патогенетическими механизмами ЭГ и ожирения являются нарушение липидного и углеводного обмена, дисбаланс в системе «протеолиз-антипротеолиз», активация системной воспалительной реакции [Мазуров В.И., Шавловский М.М. // Медицинский академический журнал. 2006. Т. 6. №1. С. 73-83].The unifying pathogenetic mechanisms of EG and obesity are impaired lipid and carbohydrate metabolism, an imbalance in the “proteolysis-antiproteolysis” system, activation of a systemic inflammatory response [Mazurov VI, Shavlovsky MM // Medical Academic Journal. 2006. T. 6. №1. S. 73-83].
Эссенциальная гипертензия является независимым предрасполагающим фактором для многих сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе ишемической болезни сердца, инсульта, сердечной недостаточности и инфаркта миокарда. Среди взрослого населения России распространенность ЭГ составляет более 40 процентов, [Артериальная гипертензия и гипертоническая болезнь [текст] / Е.Е. Гогин // Терапевтический архив - 2010. - №82 (4). - С. 5-10; 2013 ESH/ESC guidelines for the management of arterial hypertension [Text] / G. Mancia, R. Fagard, K. Narkiewicz [et al.] // J. Hypertens. - 2013. - Vol. 31. - №7. - P. 1281-1357]. Установленными факторами риска развития ЭГ являются избыточная масса тела, дислипидемия, вредные привычки, низкая физическая активность, предпочтение к жирной и соленой пище [И.Е. Чазова, Е.В. Ощепкова, Ю.В. Жернакова «Рекомендации по диагностике и лечению артериальной гипертензии» // Кардиологический вестник. - 2015. - №1. - С. 3-30].Essential hypertension is an independent predisposing factor for many cardiovascular diseases, including coronary heart disease, stroke, heart failure, and myocardial infarction. Among the adult population of Russia, the prevalence of EG is more than 40 percent, [Hypertension and hypertension [text] / E.E. Gogin // Therapeutic Archive - 2010. - №82 (4). - p. 5-10; 2013. H. Mancia, R. Fagard, K. Narkiewicz [et al.] // J. Hypertens. - 2013. - Vol. 31. - №7. - P. 1281-1357]. The established risk factors for EG are overweight, dyslipidemia, bad habits, low physical activity, preference for fatty and salty foods [I.Е. Chazova, E.V. Oshchepkova, Yu.V. Zhernakova "Recommendations for the diagnosis and treatment of arterial hypertension" // Cardiological Bulletin. - 2015. - №1. - p. 3-30].
Эссенциальная артериальная гипертензия считается комплексным заболеванием, наряду со средовыми факторами риска в ее формирование вносят вклад и генетические факторы - вовлеченность последних варьирует в различных популяциях в диапазоне от 30 до 50% [Генетический взгляд на феномен сочетанной патологии у человека [Текст] / В.П. Пузырев // Медицинская генетика. - 2008. - Т. 7. - №9. - С. 3-9; ЕСМ remodeling in hypertensive heart disease [Text] / В.C. Berk, K. Fujiwara, S. Lehoux J. // Clin. Invest. - 2011. - №117 (3). - P. 568-575; Association between ins4436A in 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 gene and essential hypertension in Polish population / P. Hejduk, A. Sakowicz, T. Pietrucha // Postepy Hig. Med. Dosw. - 2015. - №69. - P. 1245-1250].Essential arterial hypertension is considered to be a complex disease, along with environmental risk factors genetic factors contribute to its formation - the latter involvement varies in different populations in the range from 30 to 50% [Genetic view of the phenomenon of concomitant pathology in humans [Text] / V.P. . Puzyrev // Medical genetics. - 2008. - V. 7. - №9. - pp. 3-9; ECM remodeling in hypertensive heart disease [Text] / V.C. Berk, K. Fujiwara, S. Lehoux J. // Clin. Invest. - 2011. - №117 (3). - p. 568-575; Association between ins4436A in 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 gene and essential hypertension in the Polish population / P. Hejduk, A. Sakowicz, T. Pietrucha // Postepy Hig. Med. Dosw. - 2015. - №69. - P. 1245-1250].
Значительная распространенность эссенциальной гипертензии, а также высокая смертность в результате развития осложнений данного заболевания, определяют необходимость установления критериев индивидуального прогнозирования риска развития ЭГ, ассоциированной с абдоминальным ожирением, у мужчин, на основе изучения полиморфных вариантов генов - кандидатов. Поэтому поиск новых диагностических критериев в виде генетических маркерных показателей является актуальной задачей.The significant prevalence of essential hypertension, as well as high mortality due to the development of complications of this disease, determine the need to establish criteria for individual prediction of the risk of developing EG associated with abdominal obesity in men, based on the study of polymorphic variants of candidate genes. Therefore, the search for new diagnostic criteria in the form of genetic marker indicators is an urgent task.
Из уровня техники известны два вида критериев, используемых при прогнозировании риска развития эссенциальной гипертензии. Это лабораторные показатели и данные о полиморфизме ряда генов.The prior art knows two types of criteria used in predicting the risk of developing essential hypertension. These are laboratory indicators and data on the polymorphism of a number of genes.
Из патента РФ №2549462 известен способ определения фактора риска артериальной гипертензии у женщин с абдоминальным ожирением, согласно которому определяют уровень высокомолекулярного адипонектина и значения уровня высокомолекулярного адипонектина менее 4,6 мкг/мл считают фактором риска артериальной гипертензии. Чувствительность способа составляет 89,3%, специфичность - 88,1%. Способ позволяет достоверно определить фактор риска развития артериальной гипертензии у женщин с абдоминальным ожирением.From the patent of the Russian Federation No. 2549462 a method is known for determining the risk factor of arterial hypertension in women with abdominal obesity, according to which the level of high-molecular adiponectin and the value of high-molecular adiponectin less than 4.6 μg / ml are considered to be a risk factor for arterial hypertension. The sensitivity of the method is 89.3%, specificity - 88.1%. The method allows to reliably determine the risk factor for the development of arterial hypertension in women with abdominal obesity.
Однако, этот известный способ не позволяет оценить наличие предрасположенности к развитию артериальной гипертензии с абдоминальным ожирением у мужчин, так как не предполагает использование генетического тестирования.However, this known method does not allow to assess the presence of susceptibility to the development of arterial hypertension with abdominal obesity in men, since it does not involve the use of genetic testing.
Из области техники известен Способ прогнозирования риска развития артериальной гипертензии, охарактеризованный в патенте РФ №2505814. Известный способ включает учет возраста, группы крови систем резус и MN, наличия или отсутствия курения, ожирения, гиперхолестеринемии, злоупотребление солью, массы тела по индексу Кетле, отношения окружности талии к окружности бедер, лабораторные показатели, социальные факторы и вычисление прогностических коэффициентов в баллах, по которым судят о риске развития заболевания.From the field of engineering known Method for predicting the risk of developing hypertension, as described in the patent of the Russian Federation No. 2505814. The known method includes taking into account age, blood group of the RH and MN systems, the presence or absence of smoking, obesity, hypercholesterolemia, salt abuse, body weight using the Quetelet index, the ratio of waist circumference to hip circumference, laboratory indicators, social factors and calculation of prognostic factors in points, judged on the risk of developing the disease.
Однако данный способ не является универсальным, т.к. применим только для коренных жителей Республики Алтай.However, this method is not universal, because applicable only to the indigenous people of the Altai Republic.
Также известен из патента №2624480 Способ прогнозирования риска развития эссенциальной гипертензии на основе комбинаций генов матриксных металлопротеиназ. Данный способ включает выделение дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) из периферической венозной крови индивидуумов русской национальности, анализ полиморфизмов генов матриксных металлопротеиназ и прогнозирование высокого риска развития эссенциальной гипертензии при выявлении сочетания генотипа АА rs1320632 ММР-8 и аллеля С rs11225395 ММР-8.Also known from patent No. 2624480 A method for predicting the risk of developing essential hypertension based on combinations of matrix metalloproteinase genes. This method involves isolating deoxyribonucleic acid (DNA) from the peripheral venous blood of individuals of Russian nationality, analyzing polymorphisms of the matrix metalloproteinase genes and predicting a high risk of developing essential hypertension when a combination of the AA rs1320632 MMP-8 genotype and the rs11225395 MMR allele of MMR are detected.
Использование генетических факторов для прогнозирования риска развития эссенциальной гипертензии у женщин известно и из патента РФ №2664428. Этот метод включает выделение ДНК из периферической венозной крови и последующий анализ полиморфизмов генов матриксных металлопротеиназ rs1799750 ММР-1 и rs3025058 ММР-3. А прогнозирование высокого риска развития эссенциальной гипертензии у женщин устанавливается при выявлении сочетания генотипа 1G/1G по локусу rs1799750 ММР-1 и генотипа 6А/6А по локусу rs3025058 ММР-3.The use of genetic factors to predict the risk of developing essential hypertension in women is also known from RF patent No. 2664428. This method involves the isolation of DNA from peripheral venous blood and the subsequent analysis of polymorphisms of the matrix metalloproteinase genes rs1799750 MMP-1 and rs3025058 MMP-3. A high-risk prediction of the development of essential hypertension in women is established when a combination of the 1G / 1G genotype is detected at the rs1799750 MMP-1 locus and the 6A / 6A genotype at the rs3025058 MMP-3 locus.
Недостатком указанного метода является то, что в основе развития артериальной гипертензии с абдоминальным ожирением лежат нарушения жирового и углеводного обмена, которые данным способом не учитываются, а предполагаемое данным способом тестирование не обеспечивает диагностику абдоминального ожирения, как фактора формирующего эссенциальную гипертензию.The disadvantage of this method is that the basis of the development of arterial hypertension with abdominal obesity are disorders of fat and carbohydrate metabolism, which are not taken into account by this method, and the testing proposed by this method does not provide diagnostics of abdominal obesity as a factor forming essential hypertension.
При этом из уровня техники не были выявлены известные способы прогнозирования риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.At the same time, the prior art did not reveal any known methods of predicting the risk of developing in men essential hypertension associated with obesity, therefore, it is not possible to make the choice of the closest analogue to the claimed object.
Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с абдоминальным ожирением, на основе комбинаций генов ядерных рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом PPAR.The objective of this study is to expand the Arsenal of diagnostic methods, namely the creation of a method for predicting the risk of developing in men essential hypertension associated with abdominal obesity, based on combinations of nuclear receptor genes that activate proliferation of PPAR peroxisome.
Технический результат - обеспечение достоверности диагностики прогнозирования риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, за счет использования в качестве диагностических критериев совокупности генетических вариантов локусов rs4253778 PPARA, rs1801282 PPARG и rs8192678 PPARGC1A.The technical result is to ensure the accuracy of diagnosing the prediction of the risk of developing essential male hypertension associated with obesity by using as a diagnostic criteria the totality of genetic variants of the rs4253778 PPARA, rs1801282 PPARG and rs8192678 PPARGC1A loci.
Указанный технический результат достигается предлагаемым Способом прогнозирования риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, характеризующийся тем, что производят отбор пробы буккального эпителия у мужчин, страдающих ожирением, выделяют из указанной пробы дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК), проводят на детектирующем амплификаторе с использованием полимеразной цепной реакции в режиме реального времени генотипирование полиморфизма генов рецепторов, активируемых пероксисомными пролифераторами: PPARA, PPARG и PPARGC1A, выделяя праймерами участки ДНК для исследования генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), устанавливая при этом для каждого из указанных генов одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное, и при наличии вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), прогнозируют риск развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением.This technical result is achieved by the proposed Method for predicting the risk of developing in men essential hypertension associated with obesity, characterized in that they take a sample of the buccal epithelium in men suffering from obesity, are separated from the specified sample of deoxyribonucleic acid (DNA), carried out on the detecting amplicator using polymerase chain reaction in real time genotyping of polymorphism of receptor genes activated by peroxisomal proliferator and: PPARA, PPARG and PPARGC1A, primers isolated portions of DNA to study the genotypes of the PPARA gene (rs4253778), PPARG gene (rs1801282) and PPARGC1A (rs8192678), setting one of the following states for each of these genes: heterozygote one of the following states: heterozygote one of the following states: heterozygote one of the following genes: heterozygote. a normal homozygous, or variant homozygous, and if there is a variant homozygous or heterozygous genotype of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678), predict the risk of developing men with an essential hypotensum, using a healthy hyperpathy.
Поставленный технический результат обеспечивается за счет следующего.The technical result is ensured by the following.
PPARs рецепторы относятся к особому виду ядерных рецепторов, которые регулируют экспрессию генов в клетке в ответ на связывание со специфическим для данного рецептора лигандом. PPAR расшифровывается как «рецептор, активирующий пролиферацию пероксисом» (анг. Peroxisome Proliferator-Activated Receptor). Пероксисомы - это широко распространенные внутриклеточные органеллы, с помощью которых клетка избавляется от токсических веществ.PPARs receptors are a special type of nuclear receptor that regulates gene expression in a cell in response to binding to a specific ligand for a given receptor. PPAR stands for “peroxisome proliferation receptor” (Eng. Peroxisome Proliferator-Activated Receptor). Peroxisomes are widely distributed intracellular organelles, with the help of which the cell gets rid of toxic substances.
В настоящее время установлено, что функция PPARs рецепторов значительно шире. Они не только активируют пролиферацию пероксисом, но и контролируют обмен углеводов, жиров и белков в клетке, процессы клеточной дифференцировки и апоптоза.It has now been established that the function of PPARs receptors is much wider. They not only activate peroxisome proliferation, but also control the metabolism of carbohydrates, fats and proteins in the cell, the processes of cell differentiation and apoptosis.
Природными (физиологическими) лигандами этого семейства ядерных рецепторов являются насыщенные и ненасыщенные длинноцепочечные жирные кислоты и некоторые эйказаноиды.The natural (physiological) ligands of this family of nuclear receptors are saturated and unsaturated long-chain fatty acids and some eucazanoids.
Идентифицировано 3 типа PPARs: альфа, гамма и дельта (бета).Three types of PPARs have been identified: alpha, gamma and delta (beta).
⋅ α (альфа) - экспрессируется в печени, почках, сердце, мышцах, жировой ткани;⋅ α (alpha) - is expressed in the liver, kidneys, heart, muscles, adipose tissue;
⋅ β/δ (бета/дельта) - экспрессируется во многих тканях, преимущественно в печени, жировой ткани и коже;⋅ β / δ (beta / delta) - is expressed in many tissues, mainly in the liver, adipose tissue and skin;
⋅ γ (гамма) - экспрессируется в трех формах, вследствие альтернативного сплайсинга:⋅ γ (gamma) - is expressed in three forms, due to alternative splicing:
γ1 - экпрессируется во всех тканях, включая сердце, поджелудочную железу, селезенку, толстый кишечник.γ1 - expresses in all tissues, including the heart, pancreas, spleen, large intestine.
γ2 - большей частью экспрессируется в адипоцитах (состоит из 30 аминокислот).γ2 - mostly expressed in adipocytes (consists of 30 amino acids).
γ3 - синтезируется в макрофагах, толстом кишечнике, белой жировой ткани.γ3 - synthesized in macrophages, colon, white adipose tissue.
Основная физиологическая роль PPARα (его еще обозначают PPARA) - реагировать активацией на поступление в печень с кровью жирных кислот (ЖК) и их производных, а также на ксенобиотики, называемые пролифераторами пероксисом (отсюда название рецепторов). Активация PPARα запускает в гепатоцитах транскрипционные программы захвата, активирования и окисления ЖК в пероксисомах, микросомах и митохондриях, что дает необходимую энергию и ряд субстратов для осуществления всех остальных функций печени. Экспрессируются также гены синтеза липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП) и триглицеридов (ТГ). Первые экспортируются в кровь, вторые откладываются в виде внутриклеточных хиломикронов. Дезинтоксикационная функция печени также находится под контролем PPARα.The main physiological role of PPARα (it is also designated PPARA) is to react by activating fatty acids (FA) and their derivatives into the liver with blood, as well as xenobiotics called peroxisome proliferators (hence the name of receptors). PPARα activation triggers transcriptional programs for capturing, activating and oxidizing FA in peroxisomes, microsomes and mitochondria in hepatocytes, which provides the necessary energy and a number of substrates for all other functions of the liver. The genes for the synthesis of very low density lipoproteins (VLDL) and triglycerides (TG) are also expressed. The former are exported to the blood, the latter are deposited in the form of intracellular chylomicrons. Liver detoxification function is also under the control of PPARα.
Жизненно важная роль PPARγ (его еще обозначают PPARG) демонстрируется при редком варианте парциальной липодистрофии, названной синдромом резистентности PPARγ к действию лигандов. PPARγ у пациентов с этим дефектом не активируется природными лигандами ЖК, а также тиазолидиндионами (ТЗД). У них отмечается высокий уровень ХВ (хронического воспаления), тяжелая ДЛП (дислипопротеинемия), с увеличением уровня липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и уменьшением уровня липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), АГ (артериальная гипертензия), гепатостеатоз, раннее развитие АС (атеросклероза), инфаркты миокарда и инсульты (PPARγ ligand resistance syndrome).The vital role of PPARγ (also referred to as PPARG) is demonstrated in a rare variant of partial lipodystrophy, called PPARγ resistance syndrome to the action of ligands. PPARγ in patients with this defect is not activated by natural FA ligands, as well as thiazolidinediones (TZD). They have a high level of IV (chronic inflammation), severe DLP (dyslipoproteinemia), with an increase in the level of low-density lipoprotein (LDL) and a decrease in the level of high-density lipoprotein (HDL), AH (arterial hypertension), hepato-steatosis, early development of AS (atherosclerosis) , myocardial infarction and stroke (PPARγ ligand resistance syndrome).
PPARγ полностью контролирует жировую ткань, начиная от образования адипоцитов и заканчивая процессами захвата, инкорпорации и трансформации ЖК. В печени PPARγ увеличивает экспрессию генов транспорта и поглощения липидов и ингибирует гены неоглюкогенеза: пируватдегидрогеназу и фосфоенолпируваткарбоксикиназу.PPARγ completely controls adipose tissue, ranging from adipocyte formation to the processes of capture, incorporation and transformation of fatty acids. In the liver, PPARγ increases the expression of lipid transport and absorption genes and inhibits the neoglucogenesis genes: pyruvate dehydrogenase and phosphoenolpyruvate carboxykinase.
PPARGC1A (коактиватор 1a PPARγ) в результате воздействия на транскрипционные факторы опосредованно выполняет следующие функции: повышение секреции инсулина и катаболическое воздействие на жировую массу; активацию процессов адаптивного термогенеза; стимуляцию образования митохондрий и усиление окислительных процессов; регуляцию глюконеогенеза и транспорта глюкозы; регуляцию липогенеза и другое.PPARGC1A (coactivator 1a PPARγ) as a result of exposure to transcription factors indirectly performs the following functions: increasing insulin secretion and catabolic effects on fat mass; activation of adaptive thermogenesis; stimulation of mitochondrial formation and enhancement of oxidative processes; regulation of gluconeogenesis and glucose transport; regulation of lipogenesis and more.
Благодаря использованию в предлагаемом способе в качестве исследуемого материала буккального эпителия (пробы биологического материала со слизистой щеки), обеспечивается простота и надежность исследований, а также получение нужной информативности в плане выделения из указанной пробы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) и посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) проведения генотипирования полиморфизма указанных генов PPARA, PPARG и PPARGC1A.Thanks to the use of the buccal epithelium as a test material (a sample of biological material from the cheek mucosa), the research provides simplicity and reliability, as well as obtaining the necessary information content in terms of extracting deoxyribonucleic acid (DNA) from the specified sample and by means of polymerase chain reaction (PCR) carrying out the genotyping of polymorphisms of the indicated PPARA, PPARG and PPARGC1A genes
При этом предлагается использовать в качестве праймера участок ДНК rs4253778 гена PPARA, rs1801282 гена PPARG и rs8192678 гена PPARGC1A, устанавливая при этом для каждого гена одно из следующих его состояний: гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное.It is proposed to use as a primer a portion of the rs4253778 DNA of the PPARA gene, rs1801282 of the PPARG gene and rs8192678 of the PPARGC1A gene, establishing one of the following states for each gene: heterozygous, or normal homozygous, or variant homozygous.
У гена PPARA (rs4253778): G/G - нормальный гомозиготный генотип; G/C - гетерозиготный генотип; С/С - вариантный гомозиготный генотип.In the PPARA gene (rs4253778): G / G is a normal homozygous genotype; G / C - heterozygous genotype; C / C - variant homozygous genotype.
У гена PPARG (rs1801282): С/С - нормальный гомозиготный генотип; C/G - гетерозиготный генотип; G/G - вариантный гомозиготный генотип.In the PPARG gene (rs1801282): С / С - normal homozygous genotype; C / G - heterozygous genotype; G / G - variant homozygous genotype.
У гена PPARGC1A (rs8192678): G/G - нормальный гомозиготный генотип; G/A - гетерозиготный генотип; А/А - вариантный гомозиготный генотип.In the PPARGC1A gene (rs8192678): G / G is a normal homozygous genotype; G / A - heterozygous genotype; A / A - variant homozygous genotype.
Можно предположить, что именно дефекты регуляторных генов, таких как PPARs, являются причиной каскада метаболических и гормональных нарушений создающих условия, ведущие к атеросклеротическим нарушениям целостности эндотелия сосудов, потери их эластичности и запуску процессов гипертонизации. Поэтому использование их в сочетании в качестве диагностических критериев для установления риска предрасположенности мужчин к эссенциальной гипертензии на фоне абдоминального ожирения является оправданным, но в то же время, неочевидным.It can be assumed that it is the defects of regulatory genes, such as PPARs, that cause a cascade of metabolic and hormonal disorders that create conditions leading to atherosclerotic integrity of the vascular endothelium, loss of their elasticity and the start of hypertonation processes. Therefore, their use in combination as diagnostic criteria for determining the risk of predisposition of men to essential hypertension against the background of abdominal obesity is justified, but at the same time, not obvious.
Именно благодаря расширению информационных показателей, связанных с полиморфными вариантами указанных генов, ассоциированных с метаболическими нарушениями липидного и углеводного обменов, и будет обеспечена достоверность прогноза появления риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с абдоминальным ожирением.It is thanks to the expansion of information indicators associated with the polymorphic variants of these genes associated with metabolic disorders of lipid and carbohydrate metabolism, and the accuracy of the prediction of the risk of men’s development of essential hypertension associated with abdominal obesity will be ensured.
Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.Based on the foregoing, it can be concluded that the technical result is achieved due to the combination of operations of the proposed method, their sequence and modes of its implementation.
Из уровня техники (Патент РФ №2646479) известен (http://www1.fips.ru/fips_servl/fip_servlet?DB=RUPAT&DocNumber=2646479&TypeFile=html) Способ определения наследственной предрасположенности человека к спортивной деятельности и оценки рисков для здоровья, при реализации которого применяют 14 генетических критериев, в том числе и гены PPARGC1A 1444G>A (rs8192678), PPARG2 Prol2Ala C>G (rs1801282), PPARA 2528 G>C (rs4253778). Каждому гену придают численное значение в баллах, устанавливают сумму этих значения, по которой судят о наследственной предрасположенности спортсмена к проявлению таких физических качеств, как выносливость, скорость, сила. Однако назначение указанного способа совершенно другое и никак не связано с прогнозированием риска развития у мужчин к эссенциальной гипертензии, ассоциированной с абдоминальным ожирением.The prior art (RF Patent No. 2646479) is known (http://www1.fips.ru/fips_servl/fip_servlet?DB=RUPAT&DocNumber=2646479&TypeFile=html) A method for determining a person’s hereditary predisposition to sports activity and health risk assessment, when implemented 14 genetic criteria are used, including the genes PPARGC1A 1444G> A (rs8192678), PPARG2 Prol2Ala C> G (rs1801282), PPARA 2528 G> C (rs4253778). Each gene is given a numerical value in points, sets the sum of these values, which is judged on the hereditary predisposition of the athlete to the manifestation of such physical qualities as endurance, speed, strength. However, the purpose of this method is completely different and has nothing to do with predicting the risk of development in men for essential hypertension associated with abdominal obesity.
Практические перспективы использования предлагаемого способа заключаются в возможности прогнозировать риск развития гипертонизации мужчин с учетом генотипа, семейного анамнеза, образа жизни, а также в возможности проводить дифференцированную терапию, корректировать питание, физическую активность, совмещая традиционные подходы и использование генетических детерминант.Practical prospects for using the proposed method are the ability to predict the risk of developing hypertonation of men, taking into account the genotype, family history, lifestyle, as well as the ability to conduct differentiated therapy, adjust nutrition, physical activity, combining traditional approaches and the use of genetic determinants.
Предлагаемый способ реализуется следующим образом.The proposed method is implemented as follows.
1. Проводят отбор группы мужчин одной этнической популяции в возрасте 26-50 лет. По результатам клинического обследования (вес, рост, индекс массы тела ИМТ, окружность талии) было установлено, что все из них страдают ожирением (ожирение по классификации ВОЗ, 1997 год).1. A group of men of one ethnic population aged 26–50 is selected. According to the results of a clinical examination (weight, height, BMI, waist circumference), it was found that all of them are obese (WHO obesity, 1997).
2. У указанных мужчин отбирают пробу буккального эпителия (в виде мазка со слизистой оболочки щеки). После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную пробирку типа «Эппендорф» с 500 мкл транспортной среды (стерильный 0,9%-ный раствор NaCl). Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.2. A sample of buccal epithelium is taken from these men (in the form of a swab from the buccal mucosa). After the material is collected, a tampon (a working part of a probe with a cotton swab) is placed in a sterile Eppendorf tube with 500 μl of transport medium (sterile 0.9% NaCl solution). The tube with the solution and the working part of the probe is closed.
Далее производят выделение ДНК из пробы. Для этого пробы в количестве 100 мкл лизируют 300 мкл лизирующего раствора, представляющего собой 0,5%-ный раствор саркозила и протеиназы К (20 мг/мл) в ацетатном буфере (pH 7,5). Затем добавляют сорбент (каолин) и последовательными процедурами промывки отмывают фосфатно-солевым буфером (pH 7,2) пробы от белков и смесью изопропиловый спирт : ацетон от липидов. Нуклеиновые кислоты остаются при этом на сорбенте. Далее адсорбированные на сорбенте ДНК из пробы экстрагируют ТЕ-буфером, представляющим собой смесь 10 мМ трис-HCl и 1 мМ ЭДТА (pH 8,0). Экстракт подвергают центрифугированию. После центрифугирования пробирки надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК.Next, produce DNA extraction from the sample. To do this, samples in the amount of 100 μl are lysed with 300 μl of lysis solution, which is a 0.5% solution of sarcosyl and proteinase K (20 mg / ml) in acetate buffer (pH 7.5). Then add the sorbent (kaolin) and successive washing procedures are washed with phosphate-saline buffer (pH 7.2) of the sample from proteins and a mixture of isopropyl alcohol: acetone from lipids. Nucleic acids remain on the sorbent. Next, the DNA adsorbed on the sorbent is extracted from the sample with TE buffer, which is a mixture of 10 mM Tris-HCl and 1 mM EDTA (pH 8.0). The extract is subjected to centrifugation. After centrifuging the tube, the supernatant contains purified DNA.
Полученный материал готов к постановке полимеразной цепной реакции (ПЦР). Полимеразную цепную реакцию проводят на детектирующем амплификаторе с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» с использованием готовых наборов праймеров и зондов производства ЗАО «Синтол», Россия, в котором в качестве праймеров использовались участки ДНК гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678).The resulting material is ready for the formulation of polymerase chain reaction (PCR). Polymerase chain reaction is carried out on a detecting amplifier with hybridization-fluorescence detection in “real time” mode using ready-made sets of primers and probes produced by Syntol, Russia, in which PPARA DNA (rs4253778) DNA was used as a primer ( rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678).
Проводят реакцию амплификации, это достигается тем, что для исследования аллельного состояния каждого гена у отдельного человека готовят свою реакционную смесь. В каждую пробирку вносят 0,1 мкл готовой смеси праймеров (принятый в генетике термин, обозначающий конечные нуклеотиды с меткой, ограничивающие (отрезающие) амплифицируемую цепочку нуклеотидов гена) и зондов для выбранных генов: гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), (использованы Наборы реагентов для определения полиморфизма гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), ЗАО «Синтол», Россия).Amplification reaction is carried out, this is achieved by preparing a reaction mixture for an individual to study the allelic state of each gene. Each tube contains 0.1 µl of the prepared primer mixture (genetically accepted term for the final labeled nucleotides, limiting (cutting) the amplified chain of gene nucleotides) and probes for the selected genes: the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and of the PPARGC1A gene (rs8192678), (Reagent kits were used to determine the polymorphism of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678), CJSC “Sintol”, Russia).
В каждую пробирку добавляют остальные компоненты необходимые для осуществления ПЦР: нуклеотиды (дезоксинуклеозидтрифосфаты: по 10 мМ дАТФ, дТТФ, дГТФ, дЦТФ), буфера (100 мМ трис-HCl-буфера, 500 мМ KCl, 40 мМ MgCl2) и Tag F-полимеразы. Вносят пробу в количестве 10 мкл. Таким образом, общий объем реакционной смеси составляет 25 мкл. Каждая пробирка плотно закрывается пробкой и устанавливается в амплификатор.The remaining components necessary for PCR are added to each tube: nucleotides (deoxynucleoside triphosphates: 10 mM dATP, dTTP, dGTP, dCTP), buffer (100 mM Tris-HCl buffer, 500 mM KCl, 40 mM MgCl 2 ) and Tag F- polymerase. Bring sample in an amount of 10 μl. Thus, the total volume of the reaction mixture is 25 μl. Each test tube is tightly closed with a stopper and installed in the amplifier.
При проведении ПЦР амплификацию и детекцию проводят на детектирующем амплификаторе CFX96 фирмы Bio-Rad.When PCR is performed, amplification and detection is performed on a CF -96 CF-96 amplification detector from Bio-Rad.
Используется универсальная программа амплификации, подобранная производителем реактивов. Она включает в себя несколько этапов: 1 этап - активация TaqF-полимеразы (режим «горячего старта») продолжается 15 мин при 95°C; 2 этап - установочные циклы амплификации без измерения флуоресценции (5 циклов); 3 этап - рабочие циклы амплификации с измерением флюоресценции (40 циклов).A universal amplification program selected by the reagent manufacturer is used. It includes several stages: Stage 1 - TaqF polymerase activation (“hot start” mode) lasts 15 minutes at 95 ° C; Stage 2 - installation cycles amplification without measuring fluorescence (5 cycles); Stage 3 - amplification cycles with fluorescence measurement (40 cycles).
Каждый цикл амплификации включает в себя денатурацию ДНК (5 с при 95°C), отжиг праймеров (20 с при 60°C) и саму реакцию полимеризации ДНК (15 с при 72°C).Each amplification cycle includes DNA denaturation (5 s at 95 ° C), primer annealing (20 s at 60 ° C) and the DNA polymerization reaction itself (15 s at 72 ° C).
Регистрация сигнала флюоресценции, возникающего при накоплении продуктов амплификации участков ДНК проводится в режиме «реального времени» после стадии отжига праймеров для выбранных генов по каналу VIC - для детекции одного из аллельных вариантов генов, и по каналу FAM - для альтернативного варианта.The registration of the fluorescence signal arising from the accumulation of amplification products of DNA sites is carried out in the “real time” mode after the primer annealing stage for the selected genes via the VIC channel - to detect one of the allelic variants of the genes, and the FAM channel - for the alternative.
Результаты интерпретируются на основании наличия (или отсутствия) пересечения кривой флюоресценции с установленной на заданном уровне пороговой линией, что соответствует наличию (или отсутствию) значения порогового цикла (N) в соответствующей графе в таблице результатов, отображаемой в программном обеспечении для амплификатора CFX96.The results are interpreted based on the presence (or absence) of the intersection of the fluorescence curve with a threshold line set at a given level, which corresponds to the presence (or absence) of the threshold cycle value (N) in the corresponding column in the results table displayed in the software for the CFX96 amplificator.
По соотношению пороговых циклов, полученных по двум каналам детекции, определяют состояние гена PPARA в исследуемом участке ДНК (rs4253778), гена PPARG в исследуемом участке ДНК (rs1801282), гена PPARGC1A в исследуемом участке ДНК (rs8192678) (метод аллельной дискриминации). Возможных вариантов состояния гена было два: гомозиготное - в случае, когда одно из значений порогового цикла не определяется (ниже пороговой линии) и гетерозиготное - в случае, когда получено два значения пороговых циклов и по этим каналам получены параболические кривые флюоресценции. В зависимости от того, накопление какого продукта амплификации происходит в реакции, устанавливается гетерозиготное, или нормальное гомозиготное, или вариантное гомозиготное состояние гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678).The ratio of threshold cycles obtained by two detection channels determines the state of the PPARA gene in the DNA region under investigation (rs4253778), the PPARG gene in the DNA region under study (rs1801282), and the PPARGC1A gene in the DNA region under study (rs19192678) (allelic discrimination method). There were two possible variants of the state of the gene: homozygous — in the case when one of the threshold cycle values is not determined (below the threshold line) and heterozygous — in the case when two threshold cycles values are obtained and parabolic fluorescence curves are obtained through these channels. Depending on the accumulation of which amplification product occurs in the reaction, a heterozygous or normal homozygous or variant homozygous state of the PPARA gene (rs4253778), of the PPARG gene (rs1801282) and of the PPARGC1A gene (rs8192678) is established.
3. И при наличии вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), прогнозируют риск развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением.3. And in the presence of variant homozygous or heterozygous genotypes of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678), predict the risk of developing in men essential hypertension associated with obesity.
Наличие эссенциальной гипертензии - это когда систолическое артериальное давление (САД) 135 мм рт.ст. и/или диастолическое артериальное давление (ДАД) 85 мм рт.ст. и выше.The presence of essential hypertension is when the systolic blood pressure (SBP) is 135 mm Hg. and / or diastolic blood pressure (DBP) is 85 mm Hg. and higher.
Для доказательства достоверности заявляемых критериев диагностики прогнозирования риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, был установлен в каждой группе мужчин САД и ДАД, а также в пробе крови обследованных мужчин определяли уровень триглицеридов и уровень ЛПНП.In order to prove the reliability of the proposed diagnostic criteria for predicting the risk of developing essential male hypertension associated with obesity in men, GAD and DBP were established in each group of men, and the level of triglycerides and LDL levels were determined in the blood sample of the examined men.
Показатель триглицеридов является подтверждающим фактором изменения состояния эндотелия сосудов и риска формирования атеросклероза и гипертонической болезни.The triglyceride index is a confirming factor of changes in the state of the vascular endothelium and the risk of atherosclerosis and hypertension.
А уровень ЛПНП является подтверждающим фактором повышения риска развития сердечно-сосудистых заболеваний.A level of LDL is a confirmatory factor in increasing the risk of developing cardiovascular diseases.
Данные, полученные в результате исследований, приведены в таблице 1.The data obtained as a result of research are shown in table 1.
Данные, приведенные в указанной таблице 1, показывают, что при одновременном сочетании вариантного гомозиготного или гетерозиготного генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678) (пациенты 1-6 с гипертензией), наблюдается эссенциальная гипертензия, что доказывается повышенным артериальным давлением САД и ДАД у этой группы мужчин (примечание 2 к таблице 1) и повышением у них в крови по сравнению с физиологической нормой уровня триглицеридов и ЛПНП. А это значит, что при генетической поломке (наличие полиморфизма генов активаторов пероксисом) генов жирового обмена, у такого типа мужчин развивается абдоминальное ожирение и формирование на его фоне имеющейся у данных пациентов эссенциальной гипертензии (примечание 2 к таблице 1).The data presented in the indicated table 1 show that with simultaneous combination of variant homozygous or heterozygous genotypes of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678) (patients 1-6 with hypertension), an essential hypotension is observed; it is proved by increased arterial pressure of the SAP and dad in this group of men (note 2 to table 1) and an increase in their blood levels compared to the physiological norm of triglycerides and LDL. This means that with genetic breakdown (the presence of polymorphism of activator genes by peroxisome) of fat metabolism genes, this type of men develops abdominal obesity and the formation of essential hypertension in these patients (note 2 to table 1).
Тогда как при нормальном гомозиготном генотипов указанных генов (пациенты 7, 8) отсутствуют гипертензия, абдоминальное ожирение, уровень триглицеридов и ЛПНП находится в пределах физиологической нормы, что доказывает наличие ассоциации нормального гомозиготного генотипа генов активаторов пероксисом с отсутствием ожирения (изменения его лабораторных индикаторных показателей) и развитием эссенциальной гипертензии.Whereas with normal homozygous genotypes of these genes (patients 7, 8) there is no hypertension, abdominal obesity, the level of triglycerides and LDL is within the physiological norm, which proves the association of the normal homozygous genotype of activator genes with no obesity (changes in laboratory indicators) and the development of essential hypertension.
У пациентов 9, 10, имеющих наследование вариантного генотипа только одного из указанных генов, или у пациента 11, который имеет наследование вариантного генотипа только двух из указанных генов, а не одновременно всех трех заявляемых генов вместе, риск развития эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, а также их реализация, не диагностированы, т.к. уровень триглицеридов и ЛПНП находится в пределах физиологической нормы, что указывает на отсутствие необходимых генетических условий для реализации развития эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, то есть измененного полиморфизма всех трех генов одновременно. У этой группы мужчин САД и ДАД находится в пределах нормы (примечание 2 к таблице 1).In patients 9, 10 who have inheritance of the variant genotype of only one of these genes, or in patient 11, who has the inheritance of the variant genotype of only two of these genes, and not all three of the claimed genes together, the risk of developing essential hypertension associated with obesity, as well as their implementation, not diagnosed, because the level of triglycerides and LDL is within the physiological norm, which indicates the lack of the necessary genetic conditions for the realization of the development of essential hypertension associated with obesity, that is, altered polymorphism of all three genes simultaneously. For this group of men, SAD and DBP are within the normal range (note 2 to table 1).
Таким образом, это доказывает то, что только одновременное наличие у мужчины, страдающего эссенциальной гипертензией ассоциированной с ожирением, полиморфных генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), характеризуется появлением негативных эффектов в виде отклонения от нормы уровня триглицеридов и ЛПНП, характеризующих риск развития эссенциальной гипертензии, и таким образом подтверждается точность и достоверность предлагаемого способа.Thus, this proves that only the simultaneous presence of polymorphic genotypes of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A (rs8192678) gene in a man suffering from essential hypertension associated with obesity, is characterized by the appearance of negative effects in the form of the PPARGC1A gene (rs8192678) triglycerides and LDL levels that characterize the risk of developing essential hypertension, and thus confirms the accuracy and reliability of the proposed method.
Для иллюстрации реализации предлагаемого способа приведены два примера по конкретным пациентам - мужчинам, одного возраста и этнической принадлежности, у первого из которых установлено наличие одновременно трех полиморфных генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), а также наличие эссенциальной гипертензии, ассоциированной с абдоминальным ожирением, а у второго пациента - только двух полиморфных генотипов из указанных генов без признаков эссенциальной гипертензии, но имеющего ожирение 2 степени.To illustrate the implementation of the proposed method, two examples are given for specific patients - men, of the same age and ethnicity, the first of which revealed the presence of three polymorphic genotypes of the PPARA gene (rs4253778), the PPARG gene (rs1801282) and the PPARGC1A gene (rs8192678), as well as the presence of essential hypertension associated with abdominal obesity, and in the second patient - only two polymorphic genotypes of these genes with no signs of essential hypertension, but having obesity 2 degrees.
Пример 1. Пациент, 37 лет, русский. Установлено наличие вариантного гомозиготного генотипа гена PPARA (rs4253778) - СС, вариантного гомозиготного генотипа гена PPARG (rs1801282) - GG, вариантного гомозиготного генотипа гена PPARGC1A (rs8192678) - АА. САД равен 154 мм.рт.ст.; ДАД равен 94 мм.рт.ст. Содержание триглицеридов - фактора риска формирования ожирения, атеросклероза и гипертонической болезни - 2,91 ммоль/дм3, т.е. выше диапазона нормы (0,3-1,7 ммоль/дм3). Содержание липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) - фактора жирового перерождения эндотелия сосудов и риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, в т.ч. гипертонической болезни - 4,80 ммоль/дм3, т.е. выше диапазона нормы (0-3,9 ммоль/дм3). Таким образом, установлены высокие значения уровня триглицеридов и содержания липопротеидов низкой плотности на фоне наличия вариантного гомозиготного полиморфизма генотипов гена PPARA (rs4253778), гена PPARG (rs1801282) и гена PPARGC1A (rs8192678), кодирующих белки ответственные за рецепторы, активирующие пролиферацию пероксисом, контролирующие обмен углеводов, жиров, участвующих в патогенезе формирования ожирения, а в последующем атеросклероза и гипертензии.Example 1. Patient, 37 years old, Russian. The presence of the variant homozygous genotype of the PPARA gene (rs4253778) - CC, the variant homozygous genotype of the PPARG gene (rs1801282) - GG, the variant homozygous genotype of the PPARGC1A gene (rs8192678) - AA was established. CAD is equal to 154 mm Hg; DBP is equal to 94 mm Hg. The content of triglycerides - a risk factor for the formation of obesity, atherosclerosis and hypertension - 2.91 mmol / dm 3 , i.e. above the normal range (0.3-1.7 mmol / dm 3 ). The content of low-density lipoprotein (LDL) is a factor of fatty degeneration of the vascular endothelium and the risk of developing cardiovascular diseases, including hypertension - 4.80 mmol / dm 3 , i.e. above the normal range (0-3.9 mmol / dm 3 ). Thus, high values of triglycerides and low-density lipoprotein levels were established against the background of the presence of variant homozygous polymorphism of the genes of the PPARA gene (rs4253778), of the PPARG gene (rs1801282) and of the PPARGC1A gene (rs8192678), which encode proteins responsible for the receptors, which are applied, and they are used, they are applied, they are used, they are used, they are used, they are used, they are used, they are used, they are used, they are used, they have to be applied, they can be used, they should be applied, they should be used, they can be used, they should be used, they can be used, they can be used, they can be used, they can be used, they should be used, they can be used, they should be used, they can be used, they should be used, they can be used, they should be used, they can be used, they can be used, they should be used, they should be used, they should be used as a source, they should be used in case of the harsh polymorphism and the level of triglycerides and low content of low density lipoproteins). carbohydrates, fats involved in the pathogenesis of the formation of obesity, and later atherosclerosis and hypertension.
Это говорит о том, что, согласно предлагаемому способу, у данного пациента состояние оценивается, как реализация генетического риска развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением.This suggests that, according to the proposed method, in a given patient, the condition is assessed as the realization of the genetic risk of developing in men essential hypertension associated with obesity.
Пример 2. Пациент, 30 лет, русский. Установлено наличие нормального гомозиготного генотипа гена PPARA (rs4253778) - GG, гетерозиготного генотипа гена PPARG (rs1801282) - CG, нормального гомозиготного генотипа гена PPARGC1A (rs8192678)- GG. Без признаков эссенциальной гипертензии: САД равен 124 мм.рт.ст.; ДАД равен 74 мм.рт.ст. Содержание триглицеридов - фактора риска формирования ожирения, атеросклероза и гипертонической болезни - 1,12 ммоль/дм3, т.е. в пределах диапазона нормы (0,3-1,7 ммоль/дм3). Содержание липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) - фактора жирового перерождения эндотелия сосудов и риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, в т.ч. гипертонической болезни - 3,57 ммоль/дм3, т.е. в пределах диапазона нормы (0-3,9 ммоль/дм3). Таким образом, установлены нормальные значения уровня триглицеридов и содержания липопротеидов низкой плотности на фоне наличия нормального гомозиготного генотипов гена PPARA (rs4253778) и гена PPARGC1A (rs8192678), и гетерозиготного генотипа гена PPARG (rs1801282), кодирующих белки ответственные за рецепторы, участвующие в патогенезе формирования ожирения, а в последующем атеросклероза и гипертензии.Example 2. Patient, 30 years old, Russian. The presence of the normal homozygous genotype of the PPARA gene (rs4253778) - GG, the heterozygous genotype of the PPARG gene (rs1801282) - CG, the normal homozygous genotype of the PPARGC1A gene (rs8192678) - GG. Without signs of essential hypertension: CAD is 124 mm Hg; DBP is 74 mm Hg. The content of triglycerides - a risk factor for the formation of obesity, atherosclerosis and hypertension - 1.12 mmol / dm 3 , i.e. within the normal range (0.3-1.7 mmol / dm 3 ). The content of low-density lipoprotein (LDL) is a factor of fatty degeneration of the vascular endothelium and the risk of developing cardiovascular diseases, including hypertension - 3.57 mmol / dm 3 , i.e. within the normal range (0-3.9 mmol / dm 3 ). Thus, the set normal values triglycerides and content of low density lipoprotein in background presence of normal homozygous genotypes PPARA gene (rs4253778) and PPARGC1A gene (rs8192678), and heterozygous genotype PPARG gene (rs1801282), encoding proteins responsible for receptors involved in the pathogenesis of forming obesity, and later atherosclerosis and hypertension.
Что согласно предлагаемому способу, указывает на отсутствие у данного пациента необходимых генетических условий (наличие полиморфизма всех трех генов) для реализации развития эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением.That, according to the proposed method, indicates the absence of the necessary genetic conditions in the patient (the presence of polymorphism of all three genes) for the realization of the development of essential hypertension associated with obesity.
Таким образом, приведенные данные показывают, что при реализации предлагаемого способа с использованием предлагаемых критериев обеспечивается его назначение.Thus, the data show that when implementing the proposed method using the proposed criteria, its purpose is ensured.
Заявляемый способ позволяет с достаточной достоверностью прогнозировать риск развития у мужчин эссенциальной гипертензии, ассоциированной с ожирением, по заявляемым генетическим критериям.The inventive method allows with sufficient accuracy to predict the risk of developing in men essential hypertension associated with obesity, according to the claimed genetic criteria.
Примечание: 1. У пациентов 7 и 8 отсутствуют эссенциальная гипертензия и абдоминальное ожирение; у пациентов 1-6 наличие эссенциальной гипертензии и абдоминального ожирения; у пациента 9 отсутствие эссенциальной гипертензии и наличие абдоминального ожирения 1 степени; у пациентов 10-11 отсутствие эссенциальной гипертензии и наличие абдоминального ожирения 2 степени.Note: 1. In patients 7 and 8, there is no essential hypertension and abdominal obesity; in patients 1-6, there is essential hypertension and abdominal obesity; Patient 9 lacks essential hypertension and the presence of abdominal obesity 1 degree; patients 10-11 lack of essential hypertension and the presence of abdominal obesity 2 degrees.
2. У пациентов 1-6 - САД 148,1±2,7 мм.рт.ст.; у пациентов 7-11 - САД 117,1±2,1 мм.рт.ст. (достоверность различий между группами p=0,02);2. In patients 1-6 - GARDEN 148.1 ± 2.7 mm Hg; in patients 7-11 - GARDEN 117.1 ± 2.1 mm Hg. (significance of differences between p = 0.02 groups);
У пациентов 1-6 - ДАД 95±1,9 мм.рт.ст.; у пациентов 7-11 - ДАД 77,1±1,1 мм.рт.ст. (р=0,01);In patients 1-6 - DAP 95 ± 1.9 mm Hg; in patients 7-11 - DAP 77.1 ± 1.1 mm Hg. (p = 0.01);
3. Ген PPARA (rs4253778): G/G - нормальный гомозиготный генотип; G/C - гетерозиготный генотип; С/С - вариантный гомозиготный генотип;3. PPARA gene (rs4253778): G / G - normal homozygous genotype; G / C - heterozygous genotype; С / С - variant homozygous genotype;
4. Ген PPARG (rs1801282): С/С - нормальный гомозиготный генотип; C/G - гетерозиготный генотип; G/G - вариантный гомозиготный генотип.4. PPARG gene (rs1801282): С / С - normal homozygous genotype; C / G - heterozygous genotype; G / G - variant homozygous genotype.
5. Ген PPARGC1A (rs8192678): G/G - нормальный гомозиготный генотип; G/A - гетерозиготный генотип; А/А - вариантный гомозиготный генотип.5. Gene PPARGC1A (rs8192678): G / G - normal homozygous genotype; G / A - heterozygous genotype; A / A - variant homozygous genotype.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018142928A RU2693469C1 (en) | 2018-12-04 | 2018-12-04 | Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018142928A RU2693469C1 (en) | 2018-12-04 | 2018-12-04 | Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2693469C1 true RU2693469C1 (en) | 2019-07-03 |
Family
ID=67251840
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018142928A RU2693469C1 (en) | 2018-12-04 | 2018-12-04 | Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2693469C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2783252C1 (en) * | 2021-12-10 | 2022-11-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований" | Method for assessing the risk of developing abdominal obesity in persons with vibration disease caused by exposure to local vibration |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2505814C1 (en) * | 2012-08-14 | 2014-01-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method for prediction of risk of development of arterial hypertension in tubalars, ethnic group native to altai republic |
| RU2661604C1 (en) * | 2017-09-13 | 2018-07-17 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Method for predicting the risk of developing essential hypertension |
-
2018
- 2018-12-04 RU RU2018142928A patent/RU2693469C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2505814C1 (en) * | 2012-08-14 | 2014-01-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method for prediction of risk of development of arterial hypertension in tubalars, ethnic group native to altai republic |
| RU2661604C1 (en) * | 2017-09-13 | 2018-07-17 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Method for predicting the risk of developing essential hypertension |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| AHMETOV I.I. et al. Sports genomics: Current state of knowledge and future directions. Cellular and Molecular Exercise Physiology. 2012; 1(1): e1. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2783252C1 (en) * | 2021-12-10 | 2022-11-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований" | Method for assessing the risk of developing abdominal obesity in persons with vibration disease caused by exposure to local vibration |
| RU2809912C1 (en) * | 2023-07-14 | 2023-12-19 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Method of predicting risk of developing hypertension in men based on results of genetic testing |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grant et al. | A longitudinal study of DNA methylation as a potential mediator of age-related diabetes risk | |
| Zannad et al. | Genetics strongly determines the wall thickness of the left and right carotid arteries | |
| Fernandez et al. | Association of NOS3 gene with metabolic syndrome in hypertensive patients | |
| De Luis et al. | Relation of a variant in adiponectin gene (rs266729) with metabolic syndrome and diabetes mellitus type 2 in adult obese subjects. | |
| Zeng et al. | Insulin treatment affects leukocyte telomere length in patients with type 2 diabetes: 6-year longitudinal study | |
| RU2619872C1 (en) | Method for estimation of individual risk of excessive body and obesity development in children consuming drinking water with increased chloroform and tetrachloromethane content | |
| Syed et al. | Association of aldosterone and cortisol with cardiovascular risk factors in prehypertension stage | |
| Szostaczuk et al. | Identification of blood cell transcriptome‐based biomarkers in adulthood predictive of increased risk to develop metabolic disorders using early life intervention rat models | |
| Akintunde | Epidemiology of conventional cardiovascular risk factors among hypertensive subjects with normal and impaired fasting glucose | |
| de Luis et al. | The association of SNP276G> T at adiponectin gene with insulin resistance and circulating adiponectin in response to two different hypocaloric diets | |
| Badr et al. | A pilot study on the relation between irisin single-nucleotide polymorphism and risk of myocardial infarction | |
| RU2693469C1 (en) | Method for prediction of men's risk of essential hypertension associated with obesity | |
| Takashima et al. | Validation of the association between the gene encoding proteasome subunit α type 6 and myocardial infarction in a Japanese population | |
| Mostafa et al. | A pilot study on gene expression of endoplasmic reticulum unfolded protein response in chronic kidney disease | |
| CN106987633A (en) | A kind of primer and kit for detecting colorectal cancer serum secretion type lncRNAs | |
| RU2700565C1 (en) | Method for determining predisposition to developing obesity in children in conditions of excessive contamination with aluminum | |
| Im | Emerging biomarkers in alcohol-associated hepatitis | |
| Erman et al. | Beta cell function as an assessment tool for cardiovascular risk in patients with metabolic syndrome | |
| Etem et al. | Common single nucleotide polymorphisms in the FNDC5 gene and serum irisin levels in acute myocardial infarction | |
| RU2780505C1 (en) | Method for predicting the risk of gastric ulcer development based on genetic analysis | |
| RU2779085C1 (en) | Method for detecting predisposition to the development of metabolic syndrome in the form of obesity in schoolchildren aged 7-10 years | |
| RU2786314C1 (en) | A method for predicting the risk of developing peptic ulcer disease in women based on genetic data | |
| KR102533533B1 (en) | Information provision method for the treatment of alcoholic cirrhosis using Veillonella dispar strain | |
| RU2766728C1 (en) | Method for determining predisposition to dysfunction of the autonomic nervous system in females associated with excessive contamination with hexane | |
| WO2022107634A1 (en) | Method for assisting determination on adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, method for determining adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, method for collecting data for use in determination on adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, method for diagnosing adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, in vitro method for assisting determination on adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, method for testing on adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, method for diagnosing adaptability of esophageal cancer to endoscopic therapy, diagnosis kit, and method for treating esophageal cancer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201205 |