RU2687109C1 - Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency - Google Patents
Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687109C1 RU2687109C1 RU2018124910A RU2018124910A RU2687109C1 RU 2687109 C1 RU2687109 C1 RU 2687109C1 RU 2018124910 A RU2018124910 A RU 2018124910A RU 2018124910 A RU2018124910 A RU 2018124910A RU 2687109 C1 RU2687109 C1 RU 2687109C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- placental insufficiency
- placental
- pregnant women
- endothelial dysfunction
- examination
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 206010035138 Placental insufficiency Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 title description 3
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 claims abstract description 11
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- -1 nitrate ions Chemical class 0.000 claims description 5
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910021550 Vanadium Chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- RPESBQCJGHJMTK-UHFFFAOYSA-I pentachlorovanadium Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[V+5] RPESBQCJGHJMTK-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 11
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 10
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 8
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 8
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 8
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000002358 circulating endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 4
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 4
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000004434 Calcinosis Diseases 0.000 description 3
- 102000015689 E-Selectin Human genes 0.000 description 3
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 3
- 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 3
- 230000002308 calcification Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- ZQVHTTABFLHMPA-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorophenoxy)-5-nitropyridine Chemical compound N1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC1=CC=C(Cl)C=C1 ZQVHTTABFLHMPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NULAJYZBOLVQPQ-UHFFFAOYSA-N N-(1-naphthyl)ethylenediamine Chemical compound C1=CC=C2C(NCCN)=CC=CC2=C1 NULAJYZBOLVQPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021551 Vanadium(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 150000004982 aromatic amines Chemical group 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 230000003544 deproteinization Effects 0.000 description 2
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 2
- 150000008049 diazo compounds Chemical class 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 229940005654 nitrite ion Drugs 0.000 description 2
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000002135 phase contrast microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- 101100459438 Caenorhabditis elegans nac-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 1
- 208000001362 Fetal Growth Retardation Diseases 0.000 description 1
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 1
- 206010070531 Foetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010056254 Intrauterine infection Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000002787 Pregnancy Complications Diseases 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 208000006399 Premature Obstetric Labor Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002219 extraembryonic membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 231100000479 fetal death Toxicity 0.000 description 1
- 208000030941 fetal growth restriction Diseases 0.000 description 1
- 210000002458 fetal heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000000544 hyperemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 201000011460 mild pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002562 urinalysis Methods 0.000 description 1
- 210000000685 uterine artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000008347 uteroplacental blood flow Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к акушерству, а именно к диагностике плацентарной недостаточности.The invention relates to obstetrics, namely to the diagnosis of placental insufficiency.
Известен способ определения маркера дисфункции эндотелия при артериальной гипертензии у пациенток в перименопаузе [автор Калоева А.Э. «Функциональные особенности течения артериальной гипертензии у женщин в перименопаузе, 2014 г], заключающийся в определении концентрации оксида азота и его стабильных метаболитов в сыворотке крови. Проводился спектрофотометрический метод определения нитрит-иона, в присутствии реактива Грисса, с которым взаимодействовали нитриты. Реактив Грисса это смесь 1% раствора сульфаниламида и 0,05% водного раствора N-нафтилэтилендиамина в уксусной кислоте. Перед этим к 1 мл плазмы добавляли 96° этиловый спирт, для достижения ее депротеинизации, далее центрифугировали 20 минут. Под действием азотистой кислоты первично ароматические амины образуют окрашенные диазосоединения. Розовая окраска образовавшегося нитрита определяется спектрофотометрическим методом. В результате определяем нитрит-ионы. Для того чтобы перевести нитраты в нитриты необходимо к нитрат-ионам добавить хлорид ванадия (III) - летучий порошок. В итоге определяем суммарный NO, количество нитритов определяли при добавлении реактива Грисса, количество нитратов, получали путем вычитания количество нитритов из концентрации суммарных метаболитов NO. Недостатком данного метода является то, что он применялся только у пациенток с артериальной гипертензией.There is a method for determining the marker of endothelial dysfunction in arterial hypertension in perimenopausal patients [author AE Kaloev. "Functional features of the course of arterial hypertension in women in perimenopause, 2014], which consists in determining the concentration of nitric oxide and its stable metabolites in blood serum. A spectrophotometric method was used to determine the nitrite ion, in the presence of Griess reagent, with which the nitrites interacted. Griess's reagent is a mixture of 1% sulfanilamide solution and 0.05% aqueous solution of N-naphthylethylenediamine in acetic acid. Before this, 96% ethyl alcohol was added to 1 ml of plasma to achieve its deproteinization, then it was centrifuged for 20 minutes. Under the action of nitrous acid, primarily aromatic amines form colored diazo compounds. The pink color of the resulting nitrite is determined by a spectrophotometric method. As a result, we determine nitrite ions. In order to convert nitrates to nitrites, vanadium (III) chloride, a volatile powder, must be added to nitrate ions. As a result, we determine the total NO, the amount of nitrites was determined by adding the Griss reagent, the amount of nitrates, was obtained by subtracting the amount of nitrites from the concentration of total NO metabolites. The disadvantage of this method is that it was used only in patients with arterial hypertension.
Также известен способ изучения содержания маркеров дисфункции эндотелия (ЭТ- 1, оксида азота, Е- селектин) в периферической крови женщин с ранними репродуктивными потерями, (автор Айени Д.О. «Современные аспекты потерь ранней беременности», 2012 г. ),Also known is a method of studying the content of markers of endothelial dysfunction (ET-1, nitric oxide, E-selectin) in the peripheral blood of women with early reproductive losses, (by Ayeni D.O. “Modern aspects of early pregnancy loss”, 2012)
заключающийся в том, что основными признаками дисфункции эндотелия сосудов является снижение уровней оксида азота и Е-селектина и увеличение ЭТ-1. Предикторами микротромбозов в формирующемся межворсинчатом пространстве при ранних репродуктивных потерях является изменение уровне маркеров дисфункции эндотелия (оксида азота, Е-селектина, ЭТ-1) в сочетании с гетерогенностью циркулирующей популяции тромбоцитов (повышение содержания активированных клеток, увеличение их размерных параметров), что усугубляет становление адекватного маточно-плацентарного кровотока. Определены наиболее значимые корреляционные связи между морфофункциональными изменениями эндотелия спиральных артерий, маркерами его функционального состояния и нарушениями тромбоцитарного звена гемостаза. Недостатком этого метода можно считать то, что он характеризует состояние эндотелия сосудов плацентарного кровотока только в первом триместре беременности.The main signs of vascular endothelium dysfunction are a decrease in the levels of nitric oxide and E-selectin and an increase in ET-1. Predictors of microthrombosis in the emerging intervillous space with early reproductive losses is a change in the level of endothelial dysfunction markers (nitric oxide, E-selectin, ET-1) in combination with the heterogeneity of the circulating platelet population (increased content of activated cells, an increase in their dimensional parameters), which aggravates the growth adequate uteroplacental blood flow. The most significant correlations between the morphofunctional changes in the endothelium of the spiral arteries, markers of its functional state and disorders of the platelet hemostasis were determined. The disadvantage of this method is that it characterizes the state of the vascular endothelium of the placental blood flow only in the first trimester of pregnancy.
Наиболее близким техническим решением является (автор Мозговая Е.В. «Диагностика и медикаментозная коррекция эндотелиальной дисфункции при гестозе», 2004 г. ) определение количества циркулирующих эндотелиоцитов методом подсчета клеток в камере Горяева при фазово-контрастной микроскопии. Предварительно 1 мл плазмы смешивался с 0,2 мл натриевой соли аденозиндифосфата (АДФ) в концентрации 1 мг/мл в течение 10 минут, после чего производилось центрифугирование, полученный осадок суспензировался в 0,1 мл 0,9% раствора NaC 1 и помещался в камеру Горяева. При условии, что одна сетка камеры Горяева помещает 0,1 мл содержимого, подсчет количества эндотелиальных клеток производился из расчета • 104/ л. Результаты исследования маркеров эндотелиальюй дисфункции Количество циркулирующих в крови эндотелиоцитов. У беременных с преэклампсией выявлено достоверное повышение в крови количества свободных эндотелиальных клеток, при этом отмечено увеличение их количества при возрастании тяжести преэклампсии (г=0,71). У беременных с преэклампсией, не имеющих сочетанной патологии, количествоThe closest technical solution is (author Mozgovaya EV, “Diagnosis and drug correction of endothelial dysfunction in preeclampsia”, 2004) determining the number of circulating endothelial cells by counting cells in the Goryaev chamber with phase-contrast microscopy. Previously 1 ml of plasma was mixed with 0.2 ml of sodium salt of adenosine diphosphate (ADP) at a concentration of 1 mg / ml for 10 minutes, after which centrifugation was performed, the resulting precipitate was suspended in 0.1 ml of 0.9% NaC 1 solution and placed in camera Goryaeva. Provided that one mesh of Goryaev’s chamber places 0.1 ml of the contents, the number of endothelial cells is calculated at the rate of 104 / l. Results of the study of markers of endothelial dysfunction The number of endotheliocytes circulating in the blood. Pregnant women with preeclampsia showed a significant increase in the number of free endothelial cells in the blood, while an increase in their number was noted with an increase in the severity of preeclampsia (r = 0.71). In pregnant women with pre-eclampsia who do not have a combined pathology, the number
эндотелиоцитов было достоверно выше, чем при физиологической беременности (11,9±1,3-104/л), но несколько ниже, чем во всей группе беременных с преэклампсией в целом (соответственно 18,2±1,1 и 37,3±2,3-104/л). При преэклампсии на фоне заболеваний почек отмечен более высокий уровень десквамированных эндотелиальных клеток и при легкой преэклампсии, и при тяжелом ((нефропатия И-Ш), соответственно 22,5±1,8 и 40,1±2,0-104/л. При преэклампсии на фоне АГ этот маркер был достоверно выше, чем при чистой преэклампсии (соответственно 26,9±1,9; р<0,01 и 45,1±2,2-104/л; р<0,05). Недостатком предложенного метода являлось отсутствие данных маркеров эндотелия фетоплацентарного комплекса.endotheliocytes was significantly higher than during physiological pregnancy (11.9 ± 1.3-104 / l), but slightly lower than in the whole group of pregnant women with preeclampsia in general (respectively, 18.2 ± 1.1 and 37.3 ± 2.3-104 / l). In preeclampsia, kidney disease showed a higher level of desquamated endothelial cells in mild preeclampsia and in severe ((I-III nephropathy), respectively 22.5 ± 1.8 and 40.1 ± 2.0-104 / l. With preeclampsia on the background of AH, this marker was significantly higher than with pure preeclampsia (respectively 26.9 ± 1.9; p <0.01 and 45.1 ± 2.2-104 / l; p <0.05). The disadvantage of the proposed method was the lack of these markers of the endothelium of the placental complex.
Цель изобретения - ранняя диагностика плацентарной недостаточности у беременных при помощи изучения показателей эндотелия.The purpose of the invention is the early diagnosis of placental insufficiency in pregnant women with the help of studying the endothelium parameters.
Поставленная цель достигается тем, что определение концентрации оксида азота и его стабильных метаболитов в сыворотке крови при помощи спектрофотометрического метода определения нитрит-иона в присутствии реактива Грисса, который представляет собой смесь 1% раствора сульфаниламида и 0,05% водного раствора N-нафтилэтилендиамина в уксусной кислоте. Предварительно, к 1 мл плазмы добавляли 96° этиловый спирт, для достижения ее депротеинизации, затем центрифугировали в течение 20 минут. Под действием азотистой кислоты при помощи спектрофотометрического методапервично ароматические амины образуют окрашенные диазосоединения розовой окраски, в результате чего определяются нитрит-ионы. Для того чтобы перевести нитраты в нитриты необходимо к нитрат-ионам добавить хлорид ванадия (III). Таким образом, определяем суммарный NO, количество нитритов выявляли при добавлении реактива Грисса. Количество нитратов получали путем вычитания количество нитритов из концентрации суммарных метаболитов NO.This goal is achieved by determining the concentration of nitric oxide and its stable metabolites in serum using a spectrophotometric method for the determination of nitrite ion in the presence of Griess reagent, which is a mixture of 1% sulfanilamide solution and 0.05% aqueous solution of N-naphthylethylenediamine in acetic acid acid. Previously, to 1 ml of plasma was added 96 ° ethyl alcohol to achieve its deproteinization, then centrifuged for 20 minutes. Under the action of nitrous acid using a spectrophotometric method, primarily aromatic amines form colored diazo compounds of a pink color, as a result of which nitrite ions are detected. In order to convert nitrates to nitrites, vanadium (III) chloride must be added to nitrate ions. Thus, we determine the total NO, the amount of nitrite was detected by adding the Griss reagent. The amount of nitrates was obtained by subtracting the amount of nitrites from the concentration of total NO metabolites.
Нами было проведено комплексное обследование 50 беременных основной группы с выявленной фетоплацентарной недостаточностью во II и Ш триместре. Из них 1 подгруппу составили 25 беременных с выявленными нарушениями ФПК I степени, во 2 подгруппу вошли 25 беременных с нарушениями кровотока II степени. Контрольная группа состояла из 50 беременных, с физиологически протекающей беременностью и без нарушений в фетоплацентарной системе.We conducted a comprehensive survey of 50 pregnant women of the main group with identified placental insufficiency in the II and III trimester. Of these, 1 subgroup consisted of 25 pregnant women with identified I degree violations of the FPC; 25 subgroups included 25 pregnant women with II degree blood flow disorders. The control group consisted of 50 pregnant women, with a physiologically proceeding pregnancy and without violations in the placental system.
Всем пациентам проводились общеклинические, акушерско-гинекологические, микробиологические, микроскопические, иммунологические и инструментальные методы исследования (УЗИ плода, допплерометрия ФПК, кардиотокография плода). Определение количества циркулирующих эндотелиоцитов производилось методом подсчета клеток в камере Горяева при фазово-контрастной микроскопии. Предварительно 1 мл плазмы смешивался с 0,2 мл натриевой соли аденозиндифосфата (АДФ-№) в концентрации 1 мг/мл в течение 10 минут, после чего производилось центрифугирование, полученный осадок суспензировался в 0,1 мл 0,9% раствора №С1 и помещался в камеру Горяева. При условии, что одна сетка камеры Горяева помещает 0,1 мл содержимого, подсчет количества эндотелиальных клеток производился из расчета • 104/ л. Клинико-лабораторное обследование беременных, включающее клинические и биохимические анализы крови, общий анализ мочи, суточную потерю белка и функциональные почечные пробы, проводилось по общепринятым методикам. Агрегационная активность тромбоцитов определялась методом фотометрирования плазмы крови по Вогп-у.All patients underwent general clinical, obstetric-gynecological, microbiological, microscopic, immunological and instrumental methods of examination (fetal ultrasound, dopplerometry FPK, fetal cardiotocography). The determination of the number of circulating endotheliocytes was performed by counting the cells in the Goryaev chamber with phase-contrast microscopy. Previously, 1 ml of plasma was mixed with 0.2 ml of sodium salt of adenosine diphosphate (ADP-No) at a concentration of 1 mg / ml for 10 minutes, after which centrifugation was performed, the resulting precipitate was suspended in 0.1 ml of 0.9% solution No. C1 placed in the camera Goryaeva. Provided that one mesh of Goryaev’s chamber places 0.1 ml of the contents, the number of endothelial cells is calculated at the rate of 104 / l. Clinical and laboratory examinations of pregnant women, including clinical and biochemical blood tests, urinalysis, daily loss of protein and functional renal tests, were carried out according to generally accepted methods. Platelet aggregation activity was determined by the method of photometry of blood plasma according to Vogp-y.
Ультразвуковые (УЗ) исследования фето-плацентарного комплекса у пациенток исследуемых групп проводили при помощи аппаратов «Aloka - SD 500» (Япония) и «Sim - 500 Uplus» (Италия».Ultrasound (US) studies of the feto-placental complex in patients of the studied groups were performed using the Aloka-SD 500 (Japan) and Sim-500 Uplus (Italy) apparatus.
Определение кровотока в сосудах плода и маточной артерии проводилось при помощи ультразвукового диагностического прибора «ALOKA 2000»; основным параметром исследования являлось систоло-диастолическоеотношение (СДО) сосудов, представляющее собой отношение величин максимальной, систолической и конечной диастолической скоростей кровотока.Determination of blood flow in the vessels of the fetus and uterine artery was performed using an ultrasonic diagnostic device "ALOKA 2000"; The main parameter of the study was the systolic-diastolic ratio (LMS) of the vessels, which is the ratio of the maximum, systolic and end diastolic blood flow rates.
Кардиотокография плода осуществлялась на кардиомониторе «Partecust» фирмы «Siemens» ФРГ. Определение биофизического профиля плода включало в себя: двигательную активность плода, дыхательные движения, мышечный тонус, объем околоплодных вод, степень зрелости плаценты. Гистологическое исследование плацент проводили на микротоме (MR 2055, Leica, Германия) путем окрашивания срезов гематоксилином и эозином использовали набор реактивов SigmaDiagnosticsTrichromeStains (Masson).The fetal cardiotocography was carried out on the Partecust cardiomonitor of Siemens, Germany. The determination of the biophysical profile of the fetus included: fetal motor activity, respiratory movements, muscle tone, amniotic fluid volume, placenta maturity level. Histological examination of the placenta was carried out on a microtome (MR 2055, Leica, Germany) by staining the sections with hematoxylin and eosin using a SigmaDiagnosticsTrichromeStains (Masson) reagent kit.
Статистическая обработка результатов исследования производилась на персональном компьютере с применением стандартных пакетов программ прикладного статистического анализа (GraphPadInstat, StatisticaforWindows v.4.0, Exel 2000 и др.). Проверку гипотез о равенстве двух средних проводили с помощью t-критерия Стьюдента.Statistical processing of the research results was carried out on a personal computer using standard software packages of applied statistical analysis (GraphPadInstat, StatisticaforWindows v.4.0, Exel 2000, etc.). The hypothesis on the equality of the two averages was tested using Student's t-test.
Результаты исследования.The results of the study.
В результате проведенной кардиотокографии было выявлено, что в основной группе беременных сердцебиение плода составило 139,4±2,0 уд./мин. (Р>0,05), частота шевелений плода за 30 мин. была 7,6±0,3 (Р<0,05), величина сердечных осцилляций равнялась 9,2±07 уд. мин. (Р<0,05), миокардиальный рефлекс составил 19,8±1,1 уд./мин. (Р<0,05). В тоже время в группе сравнения средняя частота сердцебиения плода составила 137,7±1,3 уд/мин. (Р>0,05), частота шевелений плода за 30 мин. была 7,7±0,3 (Р<0,05), величина сердечных осцилляций равнялась 9,3±06 уд./мин. (Р<0,05), миокардиальный рефлекс составил 20,8±0,8 уд./мин. (Р<0,05). Биофизический профиль плодов у беременных с фетоплацентарной недостаточностью был оценен в 7 и >баллов) в 89% случаев (Р<0,05). В группе сравнения данный показатель отмечался в 78% случаев. Анализ эхографической оценки плаценты выявил, что у беременных основной группы с высокой частотой выявлялся кальциноз плаценты различной степени выраженности (52,1%), преждевременное созревание плаценты (69,3%). Следует отметить, что у пациенток данной группы толщина плацент составляла 42,3±2,2 мм В группе сравнения показатель толщины плаценты составил 32,6±0,4 мм.As a result of cardiotocography, it was found that in the main group of pregnant women the fetal heart rate was 139.4 ± 2.0 beats / min. (P> 0.05), the frequency of perturbations of the fetus in 30 minutes. was 7.6 ± 0.3 (P <0.05), the magnitude of cardiac oscillations was 9.2 ± 07 beats. min (P <0.05), the myocardial reflex was 19.8 ± 1.1 beats per minute. (P <0.05). At the same time, in the comparison group, the average heart rate of the fetus was 137.7 ± 1.3 beats / min. (P> 0.05), the frequency of perturbations of the fetus in 30 minutes. was 7.7 ± 0.3 (P <0.05), the value of cardiac oscillations was 9.3 ± 06 beats / min. (P <0.05), the myocardial reflex was 20.8 ± 0.8 beats / min. (P <0.05). The biophysical profile of fetuses in pregnant women with placental insufficiency was estimated at 7 and> points) in 89% of cases (P <0.05). In the comparison group, this indicator was observed in 78% of cases. Analysis of the echographic assessment of the placenta revealed that in pregnant women of the main group, placental calcification of varying severity (52.1%), premature placenta maturation (69.3%) were detected with a high frequency. It should be noted that in patients of this group, the thickness of the placentas was 42.3 ± 2.2 mm In the comparison group, the indicator of the thickness of the placenta was 32.6 ± 0.4 mm.
При допплерометрическом исследовании проводилось изучение характера гемодинамики с определением индексов сосудистого сопротивления, позволяющего судить о функционировании всего фетоплацентарного комплекса (табл. 1).In the Doppler study, hemodynamic studies were carried out with the definition of vascular resistance indices, which allowed to judge the functioning of the entire placental complex (Table 1).
Примечание: р- достоверность показателей основной группы и группы сравнения с нормативными показателямиNote: p - reliability of indicators of the main group and the group of comparison with regulatory indicators
Результаты проведенного исследования выявили, что у беременных основной группы в большинстве случаев (74%), отмечались наличие двухфазных кривых с положительной диастолической скоростью кровотока (средние значения СДО-2,83±0,2; ИР-0,71±0,12; ПИ-1,5±0,63). При сопоставлении с показателями пациенток с I степенью нарушениями фетоплацентарного кровотока (r=0,54; р0,001); со II-ой степенью нарушения ФПК (r=0,71; р0,001) корреляционный анализ определил положительнную связь между NO и степенью нарушения кровотока при допплерометрическом исследовании. Известно, что прогрессирующее снижение продукции оксида азота и его метаболитов приводит к эндотелийзависимойконстрикции и, как следствие, способствует нарушению кровотока в системе мать- плацента-плод (табл. 2)The results of the study revealed that in the majority of cases in pregnant women of the main group (74%), there were biphasic curves with a positive diastolic blood flow velocity (average values of LMS-2.83 ± 0.2; IR-0.71 ± 0.12; PI-1,5 ± 0,63). When compared with the indicators of patients with I degree of impaired fetoplacental blood flow (r = 0.54; p0.001); with the II degree of FPC violation (r = 0.71; p0.001), the correlation analysis determined a positive relationship between NO and the degree of blood flow disturbance in the Doppler study. It is known that a progressive decrease in the production of nitric oxide and its metabolites leads to endothelium-dependent constriction and, as a result, contributes to impaired blood flow in the mother-placenta-fetus system (Table 2)
Примечание: * р>0,05; * * р0,05 степень достоверности различий между основной и контрольной группамиNote: * p> 0.05; * * p0.05 degree of reliability of differences between the main and control groups
При определении количества циркулирующих эндотелиальных клеток (ЦЭК) в плазме крови в I группе уровень ЦЭК составил 4,23±1,7 (104) (р>0,05); во II группе - 10,6±0,7(104) (р0,001), что указывало на начальные признаки эндотелиальной дисфункции у беременных основной группы.When determining the number of circulating endothelial cells (CEC) in the blood plasma in group I, the level of CEC was 4.23 ± 1.7 (10 4 ) (p>0.05); in group II - 10.6 ± 0.7 (10 4 ) (p0.001), which indicated the initial signs of endothelial dysfunction in pregnant women of the main group.
Анализ патоморфологических исследований плаценты показал, что у беременных основной группы аномалии развития последа проявлялись соответственно в 58,3% и 62,5% случаев в виде диспластического развития ворсин плаценты (34% и 42,6%), избыточного отложения межворсинчатогофибриноида и массивных кальцификатов в ткани плаценты (49,8% и 61,3%). Необходимо заметить, что распространение возбудителя в интервиллезное пространство привело к развитию виллузита (56% и 72,4% соответственно). Исходом гематогенного инфицирования являлся облитерирующий васкулит и склерозирующийвиллузит (Фиг. 1).An analysis of pathological studies of the placenta showed that in pregnant women of the main group, abnormal development of the afterbirth was manifested in 58.3% and 62.5% of cases, respectively, in the form of dysplastic development of the villus of the placenta (34% and 42.6%), excessive intervillous fibrinous deposits and massive calcifications in placental tissue (49.8% and 61.3%). It should be noted that the spread of the pathogen into the intervillous space led to the development of villusite (56% and 72.4%, respectively). The outcome of hematogenous infection was obliterating vasculitis and sclerosing villusitis (Fig. 1).
Гистоструктура плацент женщин группы сравнения выявила массивные фибриноидные межворсинчатые отложения и кальцификаты. (табл. 3).The histostructure of the placental women of the comparison group revealed massive fibrinoid intervillous deposits and calcifications. (tab. 3).
Примечание: * - p<0,05; ** - р<0,01Note: * - p <0.05; ** - p <0.01
Инфекционный компонент был представлен в основном трансмуральным воспалением плодных оболочек, диффузным или крупноочаговым интервиллезитом, базальным децидуитом и/или виллузитом, поражением спиральных артерий и сосудов ворсин, что создает благоприятные условия для реализации внутриутробного инфицирования.The infectious component was represented mainly by transmural inflammation of the fetal membranes, diffuse or large-focal intervillitis, basal deciduitis and / or villusitis, damage to the spiral arteries and villi vessels, which creates favorable conditions for the implementation of intrauterine infection.
Пример 1.Example 1
Беременная Е., 28 лет.Pregnant E., 28 years old.
Жалобы на тянущие боли внизу живота, повышенную двигательную активность плода.Complaints of pulling pain in the lower abdomen, increased motor activity of the fetus.
Анамнез: менструации с 16 лет, по 4-5 дней, через 28-30 дней, регулярные, умеренные, безболезненые. Половая жизнь с 23 лет. Первая беременность завершилась преждевременными родами в сроке 30 недель, гибелью плода. Настоящая беременность II, роды предстоят первые.Anamnesis: menstruation from 16 years, 4-5 days, after 28-30 days, regular, moderate, painless. Sex life from 23 years. The first pregnancy ended in preterm labor in the period of 30 weeks, the death of the fetus. This pregnancy II, the birth is coming first.
Данная беременность протекала в первой половине на фоне угрозы прерывания, по поводу чего находилась на стационарном лечении в сроке 10-11 недель. В сроке 33 недель выявлено нарушение маточно-плацентарного и плодово-плацентарного кровотока 2-й А степени.This pregnancy proceeded in the first half amid the threat of termination, about which she was hospitalized for a period of 10-11 weeks. In the period of 33 weeks revealed a violation of uteroplacental and fetal-placental blood flow of the 2nd A degree.
Объективно: среднего телосложения, умеренного питания. Общее состояние удовлетворительное, АД-100/70 мм. рт.ст., ps 79 уд. в мин. Живот овоидной формы, увеличен за счет беременности. Матка возбудима при пальпации. Положение плода продольное, предлежит головка над входом в малый таз.Objectively: medium build, moderate nutrition. The general condition is satisfactory, AD-100/70 mm. Hg, ps 79 beats. in minutes Abdomen ovoid shape, increased due to pregnancy. The uterus is excitable by palpation. The position of the fetus is longitudinal, presents the head above the entrance to the small pelvis.
Сердцебиение плода несколько приглушено, ритмичное 140 уд. в мин. Воды целы. Отеков нет. Физиологические оправления в норме. Высота стояния дна матки 32. Окружность живота 102 см.The heartbeat of the fetus is somewhat muffled, rhythmic 140 beats. in minutes The waters are intact. There is no edema. Physiological regimens are normal. The height of the bottom of the uterus 32. Abdominal circumference 102 cm
Гинекологический статус: НПО развиты правильно, гиперемированы; оволосение по женскому типу.Gynecological status: NGOs are developed correctly, hyperemic; female hair distribution.
В зеркалах: шейка матки синюшного цвета. Наружный зев закрыт.Выделения слизистые.In mirrors: cervix cyanotic color. The outer mouth is closed. The secretions of the mucous membranes.
Обследована: 17.03.15 г. Данные допплерометрии (нарушение маточно-плацентарного и плодово-плацентарного кровотока 2-й А степени), кардиотокографическое исследование (задержка внутриутробного развития плода на 2 недели, по Фишеру 6-7 баллов).Surveyed: March 17, 1515. Doppler data (impaired uteroplacental and fetal placental blood flow, grade 2 A), cardiotochographic examination (fetal intrauterine growth retardation for 2 weeks, 6-7 points according to Fisher).
Исследование маркера (оксида азота и его стабильных метаболитов):The study of the marker (nitric oxide and its stable metabolites):
NOхмкмоль/л - 27,3NO x μmol / l - 27.3
NO2 мкмоль/л - 5,1NO 2 μmol / l - 5.1
NO3-мкмоль/л - 22,21NO 3 μmol / L - 22.21
Диагноз: Беременность 34 недели. Головное предлежание. Угроза преждевременных родов. Плацентарная недостаточность II ст. ЗВУР плода. ОАА (антенатальная гибель плода).Diagnosis: Pregnancy 34 weeks. Head previa. The threat of preterm birth. Placental insufficiency II Art. Zvur fetus. OAA (antenatal fetal death).
ВЫВОД. В результате собственных комплексных исследований эндотелия у беременных раскрыты ряд патогенетически важных механизмов, лежащих в основе плацентарной недостаточности (снижение продукции оксида азота и его метаболитов), что позволит проводить раннюю диагностику данного осложнения беременности с целью проведения своевременной коррекции.CONCLUSION. As a result of our own comprehensive studies of endothelium in pregnant women, a number of pathogenetically important mechanisms underlying placental insufficiency (reduced production of nitric oxide and its metabolites) were revealed, which will allow early diagnosis of this pregnancy complication in order to carry out timely correction.
Медико-социальная эффективность. Данный метод приводит к более ранней диагностике плацентарной недостаточности у беременных, и, следовательно, способствует своевременному эффективному лечению данной патологии, а так же к сокращению койко-дней (7 дней) и снижению затрат.Medico-social effectiveness. This method leads to an earlier diagnosis of placental insufficiency in pregnant women, and, therefore, contributes to the timely effective treatment of this pathology, as well as to the reduction of bed-days (7 days) and cost reduction.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018124910A RU2687109C1 (en) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018124910A RU2687109C1 (en) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2687109C1 true RU2687109C1 (en) | 2019-05-07 |
Family
ID=66430452
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018124910A RU2687109C1 (en) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2687109C1 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2521367C2 (en) * | 2012-07-04 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method for prediction of developing placental insufficiency |
-
2018
- 2018-07-06 RU RU2018124910A patent/RU2687109C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2521367C2 (en) * | 2012-07-04 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Method for prediction of developing placental insufficiency |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LAM K., Role of nitric oxide pathway in placental dysfunction following fetal bypass. Представлено на сорок третьей ежегодной встрече Общества торакальных хирургов, Сан-Диего, Калифорния, 29-31 января 2007 г., найдено онлайн 14.03.2019, найдено в интернет https://www.annalsthoracicsurgery.org/article/S0003-4975(07)00905-8/fulltext. * |
| LAM K., Role of nitric oxide pathway in placental dysfunction following fetal bypass. Представлено на сорок третьей ежегодной встрече Общества торакальных хирургов, Сан-Диего, Калифорния, 29-31 января 2007 г., найдено онлайн 14.03.2019, найдено в интернет https://www.annalsthoracicsurgery.org/article/S0003-4975(07)00905-8/fulltext. RU 2521367 C2, * |
| Метельская В. А. и др., ГУ Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины Минздрава РФ, Москва, Оксид азота: роль в регуляции биологических функций, методы определения в крови человека, найдено онлайн 14.03.2019, найдено в интернет http://www.ramld.ru/articles/files/metelska7.pdf. Прогнозирование и диагностика плацентарной недостаточности в ранние сроки беременности - тема диссертации и автореферата по ВАК, 14.00.01, кандидат медицинских наук Кокашвили, Хатуна Бежановна, Научная библиотека диссертаций и авторефератов disser Cat http://www.dissercat.com/content/prognozirovanie-i-diagnostika-platsentarnoi-nedostatochnosti-v-rannie-sroki-beremennosti#ixzz5hx1cHb9T. Иванова А. С. и др., Влияние оксида азота и альфа-токоферола на структурные изменения в плаценте при нарушении маточно-плацентарного кровообращения у белых крыс, Экспериментальная и клиническая фармакология, 2015, 8, стр.10-13, найдено онлайн 14.03.2019, найдено в Интернет http://ekf.folium.ru/index.ph * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vaala et al. | Management strategies for mares at risk for periparturient complications | |
| Songster et al. | Prenatal prediction of lethal pulmonary hypoplasia using ultrasonic fetal chest circumference | |
| Amon et al. | Preterm labor | |
| RU2577759C1 (en) | Method for prediction of clinical outcome of pregnancy in women with thrombophilia | |
| Zuspan | Chronic hypertension in pregnancy | |
| RU2687109C1 (en) | Method of vascular endothelium examination in placental insufficiency | |
| Jurczak et al. | Arterial ovarian blood flow in the periovulatory period of GnRH-induced and spontaneous estrous cycles of bitches | |
| RU2148256C1 (en) | Method for predicting placental insufficiency in preclinical period | |
| RU2761315C1 (en) | Method for preventing complications of perinatal period | |
| Church et al. | Cocaine's lethality increases during late gestation in the rat: A study of “critical periods” of exposure | |
| Wiberg-Itzel | Lactate level in amniotic fluid, a new diagnostic tool | |
| Amon | Premature labor | |
| RU2461833C1 (en) | Method for prediction of onset of retrochorial hematomas in pregnant women suffering undifferentiated connective tissue dysplasia | |
| Ousey et al. | Clinical diagnosis and treatment of problems in the late pregnant mare | |
| RU2123698C1 (en) | Method of preclinical prediction of incompetent pregnancy | |
| Abdelhameid et al. | Effects of Metformin on Pregnancy Outcomes in Women with Polycystic Ovary Syndrome during First Trimester | |
| RU2553624C1 (en) | Method for predicting toxaemias of pregnancy | |
| RU2393841C1 (en) | Method of treating threatened miscarriage in early pregnancy | |
| Bahadue et al. | Identification of the pregnancy at risk | |
| Vidyasagara | Study of Amniotic Fluid Index and Feto Maternal Outcome in Term Pregnancy at Vims, Ballari | |
| RU2420737C1 (en) | Differential diagnostic technique for foetal maturity degree | |
| RU2193198C2 (en) | Method for choosing the tactics of delivery | |
| RU2259568C2 (en) | Method for diagnosing severe gestosis forms | |
| RU2267133C2 (en) | Method for predicting threat of premature delivery | |
| Fiolna | Prediction of adverse perinatal outcomes following induction of labour |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200707 |
|
| TC4A | Change in inventorship |
Effective date: 20211118 |