RU2685553C1 - Method for assessing of intestinal microbiota state - Google Patents
Method for assessing of intestinal microbiota state Download PDFInfo
- Publication number
- RU2685553C1 RU2685553C1 RU2018118299A RU2018118299A RU2685553C1 RU 2685553 C1 RU2685553 C1 RU 2685553C1 RU 2018118299 A RU2018118299 A RU 2018118299A RU 2018118299 A RU2018118299 A RU 2018118299A RU 2685553 C1 RU2685553 C1 RU 2685553C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- plate
- bile acids
- sample
- state
- intestinal
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано для оценки состояния микробиоценоза кишечника и прогнозирования воспалительного процесса в нем.The present invention relates to the field of medicine, namely to biochemistry, and can be used to assess the state of the intestinal microbiocenosis and predict the inflammatory process in it.
Известно, что основой воспалительного процесса в кишечнике являются продукты жизнедеятельности микрофлоры. Дисбактериоз кишечника рассматривается как клинико-лабораторный синдром, возникающий при ряде заболеваний и клинических ситуаций и характеризующийся изменением качественного и/или количественного состава нормальных микроорганизмов, их избыточным или недостаточным ростом, следствием чего являются метаболические, иммунологические нарушения и различные клинические проявления.It is known that the basis of the inflammatory process in the intestine are the waste products of microflora. Intestinal dysbiosis is considered as a clinical laboratory syndrome that occurs in a number of diseases and clinical situations and is characterized by a change in the qualitative and / or quantitative composition of normal microorganisms, their excessive or insufficient growth, resulting in metabolic, immunological disorders and various clinical manifestations.
Известен способ оценки воспалительного процесса путем определения С - реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови. Определение СРБ основано на его способности образовывать иммунные комплексы с антителами, содержащимися в специфической сыворотке. Это приводит к увеличению абсорбции раствора, которую измеряют на спектрофотометре при длине волны 340 нм. (Камышников B.C. - Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной технике М.: МЕДпресс-информ., - 2004. - с. 208).There is a method of assessing the inflammatory process by determining the C - reactive protein (CRP) in the serum. The definition of CRP is based on its ability to form immune complexes with antibodies contained in specific serum. This leads to an increase in the absorption of the solution, which is measured on a spectrophotometer at a wavelength of 340 nm. (Kamyshnikov B.C. - Handbook of clinical and biochemical studies and laboratory equipment M .: MEDPress-Inform., - 2004. - p. 208).
В норме содержание СРБ в сыворотке крови составляет 0,06-5,0 мг/л. Уровень 5-10 мг/л - признак вялотекущего воспалительного процесса, связанного с высоким риском сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений, таких как инфаркт миокарда, инсульт (Дати Ф., Метцманн Э. Белки. Лабораторные тесты и клиническое применение. М.: Лабо-ра, 2007. - с 63-64).Normally, the content of CRP in serum is 0.06-5.0 mg / l. Level 5-10 mg / l is a sign of a sluggish inflammatory process associated with a high risk of cardiovascular diseases and their complications, such as myocardial infarction, stroke (Dati F., Metzmann E. Proteins. Laboratory tests and clinical use. M .: M .: Labo-ra, 2007. - from 63-64).
Недостатком данного способа является отсутствие специфичности СРБ, т.к. он повышается при инфекциях, травмах, опухолях, ожогах, активном ревматоидном процессе и не отражает состояние микробиоценоза кишечника. Следует так же учитывать, что высокая вариабельность СРБ зависит от многих факторов, как в сторону увеличения - ожирение, понижение уровня ЛПВП, повышение уровня триглицеридов, курение, так и уменьшения - снижение массы тела, прием лекарственных препаратов - аспирина, производных никотиновой кислоты, статинов, фибратов.The disadvantage of this method is the lack of specificity of CRP, since it increases with infections, injuries, tumors, burns, active rheumatoid process and does not reflect the state of the intestinal microbiocenosis. It should also be borne in mind that high variability of CRP depends on many factors, both upward - obesity, lowering HDL levels, increasing triglycerides, smoking, and decreasing - reducing body weight, taking drugs - aspirin, derivatives of nicotinic acid, statins fibrates
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является определение метаболических нарушений в организме больного при эндогенной интоксикации путем определения окисленных метаболитов триптофана - токсических продуктов, которые вызывают глубокие, вплоть до поражения различных органов и систем, изменения (Пат. 2249219 Российская Федерация, МПК G01N 33/68, G01N 30/90. Способ определения окисленных метаболитов триптофана при эндогенной интоксикации / Горохова В.Г., Кузнецова Э.Э., Горохов А.Г., Рунович А.А.; заявитель и патентообладатель НЦ РВХ ВСНЦ СО РАМН. - №2003107548/15; заявл. 19.03.2003; опубл. 27.03.2005, Бюл. №9).The closest in technical essence to the present invention is the determination of metabolic disorders in the patient's body during endogenous intoxication by determining oxidized tryptophan metabolites - toxic products that cause profound changes, including damage to various organs and systems (Pat. 2249219 Russian Federation, IPC G01N 33 / 68, G01N 30/90. Method for determination of oxidized tryptophan metabolites with endogenous intoxication / Gorokhova V.G., Kuznetsova E.E., Gorokhov A.G., Runovich A.A., applicant and patent holder NC RVH VSNTS SB RAMS. - No. 2003107548/15; declared March 19, 2003; published on March 27, 2005, Byul. No. 9).
Известный способ осуществляют следующим образом. У пациента берут пробу венозной крови, которую центрифугируют, супернатант наносят на бумажный фильтр и высушивают. Затем фильтр погружают в раствор, содержащий ароматический альдегид, ацетон и концентрированную соляную кислоту, взятые в соотношении 70:5:1, выдерживают в течение 2-3 минут. После чего повторно высушивают и по интенсивности и цветовым оттенкам определяют качественное и полуколичественное содержание окисленных метаболитов триптофана.The known method is as follows. A patient is sampled for venous blood, which is centrifuged, the supernatant is applied to a filter paper and dried. Then the filter is immersed in a solution containing aromatic aldehyde, acetone and concentrated hydrochloric acid, taken in a ratio of 70: 5: 1, incubated for 2-3 minutes. Then re-dried and determine the qualitative and semi-quantitative content of oxidized tryptophan metabolites by intensity and color shades.
К недостаткам известного способа, как и аналогичного, следует отнести невозможность определения состояния микробиоценоза кишечника, т.к. окисленные продукты триптофана являются не только продуктами жизнедеятельности кишечной микрофлоры, но и промежуточными, а также и конечными продуктами нарушения обменных процессов в организме.The disadvantages of this method, as well as similar, include the inability to determine the state of the intestinal microbiocenosis, because The oxidized products of tryptophan are not only the metabolic products of the intestinal microflora, but also intermediate, as well as the final products of metabolic disturbances in the body.
Кроме этого известный способ не достаточно точен, т.к. позволяет определить только качественный и полуколичественный состав метаболитов триптофана в пробе.In addition, the known method is not accurate enough, because allows to determine only the qualitative and semi-quantitative composition of tryptophan metabolites in the sample.
Задачей заявляемого технического решения является разработка способа оценки состояния микробиоты кишечника, основанного на определении основных продуктов ферментативной жизнедеятельности микрофлоры - деконъюгированных желчных кислот (ДЖК).The objective of the proposed technical solution is to develop a method for assessing the state of the intestinal microbiota, based on the determination of the main products of the enzymatic activity of the microflora - deconjugated bile acids (DLC).
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности и специфичности оценки состояния микробиоценоза кишечника за счет определения в крови количественного содержания деконъюгированных желчных кислот - маркеров дисбаланса состава кишечной микрофлоры.The technical result of the proposed method is to improve the accuracy and specificity of assessing the state of the intestinal microbiocenosis due to the determination in blood of the quantitative content of deconjugated bile acids - markers of an imbalance in the composition of the intestinal microflora.
Технический результат достигается тем, что способ оценки состояния микробиоты кишечника включает взятие пробы крови и ее центрифугирование.The technical result is achieved by the fact that the method of assessing the state of the intestinal microbiota involves taking a blood sample and centrifuging it.
К отличительным приемам заявляемого способа относят то, что центрифугирование проводят при 1500 об/мин в течение 15 минут. Затем на пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ отдельно наносят 2 пробы: 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот, после чего пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой. По окончанию элюирования пластинку вынимают и вентилируют в течение 20 мин при 100°С. Далее пластинку обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. По длине пробега пятна пробы, в сравнении с длиной пробега пятна стандартной смеси, идентифицируют наличие деконьюгированных желчных кислот в пробе. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание деконьюгированных желчных кислот в пробе. При их величине равной и менее 15,8±1,56 нг/л состояние микробиоты кишечника оценивают сбалансированным. При содержании дегидроксилированых желчных кислот в пробе более 15,8±1,56 нг/л устанавливают нарушение микробиоценоза кишечника.The distinctive methods of the proposed method include the fact that centrifugation is carried out at 1500 rpm for 15 minutes. Then 2 samples are applied separately to the Sorbfil PTSH-AH-V-UV plate: 0.1 μl of blood plasma and 1.0 μl of a standard mixture of deconjugated bile acids, after which the plate is placed in a chamber with concentrated acetic acid. At the end of the elution, the plate is removed and ventilated for 20 minutes at 100 ° C. Next, the plate is treated with water aerosol and incubated until white spots appear on the transparent background of the plate. The length of the path of the sample spot, in comparison with the path of the spot of the standard mixture, identifies the presence of deconjugated bile acids in the sample. The contours of the spots describe and calculate their area, the values of which establish the quantitative content of deconjugated bile acids in the sample. With their value equal to and less than 15.8 ± 1.56 ng / l, the state of the intestinal microbiota is assessed as balanced. When the content of dehydroxylated bile acids in the sample is more than 15.8 ± 1.56 ng / l, a violation of the intestinal microbiocenosis is established.
Проведенный сопоставительный анализ с прототипом показал, что предлагаемый способ отличается от известного вышеперечисленными приемами и, следовательно, соответствует критерию изобретения «новизна».A comparative analysis with the prototype showed that the proposed method differs from the known one by the methods listed above and, therefore, meets the criteria of the invention of "novelty."
Анализ патентной и специальной литературы выявил, что предлагаемый способ имеет признаки, отличающие его не только от прототипа, но и от других технических решений в данной и смежных областях биохимии и медицины. В доступной литературе авторами предлагаемого технического решения не установлено способа оценки состояния микробиоты кишечника вышеприведенными приемами.Analysis of the patent and special literature revealed that the proposed method has features that distinguish it not only from the prototype, but also from other technical solutions in this and related fields of biochemistry and medicine. In the available literature, the authors of the proposed technical solution have not established a method for assessing the state of the intestinal microbiota by the above techniques.
Известно, что в основе воспалительного процесса в кишечнике лежит нарушение его микробиоценоза и накопление таких аминокислот, как глицин и таурин, которые являются продуктами жизнедеятельности микроорганизмов. При этом глицин и таурин являются составной частью первичных (конъюгированных) желчных кислот. Благодаря действию ферментов кишечной микрофлоры, связанному с отщеплением от молекулы первичных желчных кислот глицина и таурина, а также дегидроксилированию, образуются вторичные желчные кислоты (деконъюгированные). Последние медленнее всасываются в кишечнике, угнетают развитие полезной микробиоты, приводя к нарушению образования мицелл и всасыванию жира, витамина В12. Это провоцирует избыточный бактериальный рост грамположительных анаэробных палочек семейства Lactobacilleae. Процесс сопровождается увеличением содержания деконъюгированных желчных кислот в биосредах организма (Джулай Г.С, Щелоченков С.В.. Микробиота желудочно-кишечного тракта в развитии неалкогольной жировой болезни печени // Верхневолжский медицинский журнал. - 2015. - Т. 14, - вып. 3. - с. 36-41).It is known that the basis of the inflammatory process in the intestine is a violation of its microbiocenosis and the accumulation of amino acids such as glycine and taurine, which are the metabolic products of microorganisms. While glycine and taurine are part of the primary (conjugated) bile acids. Due to the action of intestinal microflora enzymes associated with cleavage of glycine and taurine from the primary bile acid molecule, as well as dehydroxylation, secondary bile acids (deconjugated) are formed. The latter are more slowly absorbed in the intestine, inhibit the development of beneficial microbiota, leading to a violation of the formation of micelles and the absorption of fat, vitamin B 12 . This provokes excessive bacterial growth of gram-positive anaerobic rods of the Lactobacilleae family. The process is accompanied by an increase in the content of deconjugated bile acids in the biological media of the body (Juli G.S., Alkalychenkov S.V. Microbiota of the gastrointestinal tract in the development of non-alcoholic fatty liver disease // Upper Volga Medical Journal. - 2015. - V. 14, - vol. 3. - p. 36-41).
Для определения содержания деконъюгированных желчных кислот авторы предлагаемого способа предложено использовать высокоэффективную тонкослойную хроматографию на пластинках Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ, применяя в качестве элюента концентрированную уксусную кислоту. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки свидетельствует о наличии деконъюгированных желчных кислот в плазме, идентификация которых была проведена авторами и химическими методами: экстракцией, хроматографией, УФ и ИК-спектроскопиями. Это позволило установить содержание деконъюгированных желчных кислот в крови.To determine the content of deconjugated bile acids, the authors of the proposed method proposed to use high-performance thin layer chromatography on Sorbfil PTSH-AH-V-UV plates, using concentrated acetic acid as eluent. The appearance of white spots on the transparent background of the plate indicates the presence of deconjugated bile acids in the plasma, the identification of which was carried out by the authors and chemical methods: extraction, chromatography, UV and IR spectroscopy. This allowed us to establish the content of deconjugated bile acids in the blood.
На основании проведенных исследований авторами установлено, что у клинически здоровых людей количество ДЖК в плазме крови составляет 15,8±1,56 нг/л и менее, что свидетельствует о сбалансированном микробиоценозе кишечника. Так же авторами установлено, что увеличение содержания ДЖК указывает на нарушение состояния микробиоценоза кишечника.Based on the studies conducted by the authors, it was found that in clinically healthy people, the amount of DLC in the blood plasma is 15.8 ± 1.56 ng / l or less, which indicates a balanced intestinal microbiocenosis. Also, the authors found that an increase in the content of LCA indicates a violation of the state of intestinal microbiocenosis.
Следовательно, отличительные приемы заявляемого способа обеспечивают возможность получения указанного технического результата - повышение точности и специфичности оценки состояния микробиоценоза кишечника. Изложенное позволяет сделать вывод о соответствии технического решения критерию « изобретательский уровень».Therefore, the distinctive techniques of the proposed method provide the possibility of obtaining the specified technical result - improving the accuracy and specificity of assessing the state of the intestinal microbiocenosis. The above allows to make a conclusion about the compliance of the technical solution to the criterion of "inventive step".
Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в медицине, а именно в биохимии, физиологии, микробиологии. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами, следовательно, предлагаемое решение соответствует критерию «промышленная применимость».The method constituting the claimed invention is intended for use in medicine, namely in biochemistry, physiology, microbiology. The possibility of its implementation is confirmed by the methods and means described in the application, therefore, the proposed solution meets the criterion of "industrial applicability".
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.The proposed method is as follows.
Утром (натощак) у пациента забирают кровь из локтевой вены в пробирку, содержащую 3,8% раствор цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 15 минут, получают плазму. На пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ микропипеткой отдельно наносят 0,1 мкл плазмы больного и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой на 10-15 мин под контролем за финишем элюента (примерно 1 см от верхнего края пластинки). После окончания элюирования пластинку вынимают, просушивают, вентилируют в течение 20 мин при 100°С. Далее пластинку обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки относят к фракции деконъюгированных желчных кислот. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание ДЖК в пробе. При величине равной и менее 15,8±1,56 нг/л состояние микро-биоценоза кишечника оценивают сбалансированным. Среднее время анализа составляет около 1,5 часов.In the morning (on an empty stomach) a patient takes blood from the ulnar vein into a tube containing 3.8% sodium citrate solution, centrifuged at 1500 rpm for 15 minutes, plasma is obtained. On the plate Sorbfil PTSH-AH-V-UV micropipette separately put 0.1 μl of the patient's plasma and 1.0 μl of a standard mixture of deconjugated bile acids. The plate is placed in a chamber with concentrated acetic acid for 10-15 minutes under the control of the finish eluent (approximately 1 cm from the top edge of the plate). After completion of the elution, the plate is removed, dried, ventilated for 20 minutes at 100 ° C. Next, the plate is treated with water aerosol and incubated until white spots appear on the transparent background of the plate. The appearance of white spots on a transparent background plate refers to the fraction of deconjugated bile acids. The contours of the spots describe and calculate their area, the values of which establish the quantitative content of GAS in the sample. With a value of less than and 15.8 ± 1.56 ng / l, the state of the intestinal micro-biocenosis is assessed as balanced. The average analysis time is about 1.5 hours.
Предлагаемый способ оценки состояния микробиоты кишечника поясняется примерами конкретного выполнения.The proposed method of assessing the state of the intestinal microbiota is illustrated by examples of specific performance.
Пример 1. Клинически здоровый пациент - донор. Утром у пациента-донора (натощак) была забрана кровь из локтевой вены. Кровь была забрана в пробирку, содержащую 3,8% раствор цитрата натрия. Плазму крови от форменных элементов отделили центрифугированием в течение 15 минут при 1500 об/мин. На пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ микропипеткой нанесли 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Затем пластинку поместили в камеру с концентрированным раствором уксусной кислоты.Example 1. Clinically healthy patient is a donor. In the morning, blood from the ulnar vein was collected from a donor patient (on an empty stomach). The blood was collected in a tube containing a 3.8% sodium citrate solution. Blood plasma from the formed elements was separated by centrifugation for 15 minutes at 1500 rpm. 0.1 μl of blood plasma and 1.0 μl of a standard mixture of deconjugated bile acids were applied to the Sorbfil PTSH-AH-B-UV plate with a micropipette. Then the plate was placed in a chamber with a concentrated solution of acetic acid.
После окончания элюирования - при финише элюента примерно 1 см от верхнего края пластинки, пластинку вынули из этой камеры и вентилировали в течение 20 минут при 100°С. После чего пластинку осторожно обработали водным аэрозолем. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки было отнесено к фракции ДЖК. Контуры пятен были обрисованы и проведен расчет их площадей. Площадь пятна стандартной смеси деконъюгированных кислот составила 3,15 мм2, содержание ДЖК - 2,17 нг/л; площадь пятна пациента-донора - 21,7 мм2, что составило 14,9 нг/л. Это свидетельствовало о сбалансированном состоянии микрофлоры кишечника.After completion of the elution — when the eluent is finished, about 1 cm from the upper edge of the plate, the plate was removed from this chamber and ventilated for 20 minutes at 100 ° C. After that, the plate was carefully treated with a water spray. The appearance of white spots on the transparent background of the plate was attributed to the fraction of JLC. The contours of the spots were outlined and their areas were calculated. The area of the stain of a standard mixture of deconjugated acids was 3.15 mm 2 , the content of DLC was 2.17 ng / l; the spot area of the donor patient was 21.7 mm 2 , which was 14.9 ng / l. This indicated a balanced state of the intestinal microflora.
Пример. 2. Больной А., Диагноз: язвенный колит впервые выявленный, острая атака.Example. 2. Patient A., Diagnosis: ulcerative colitis, newly diagnosed, acute attack.
При поступлении пациента А. в стационар содержание ДЖК было определено по предлагаемому способу и составило 48 нг/л, что в 3,03 раза превысило их уровень у клинически здоровых людей, что указывало на нарушение микробиоты кишечника, сопровождающееся тяжестью клинического состояния больного: температура тела 38,0, боли в животе, неоформленный стул с примесью крови, частота стула 5-7 раз в сутки, уменьшение массы тела, выраженная общая слабость. Эндоскопически установлено: отек слизистой оболочки, гиперемия, наличие эрозий, контактная кровоточивость, фибринозный налет на стенке кишечника. Бактериологический анализ слизистой оболочки биоптата толстой кишки показал преобладание анаэробной микрофлоры над аэробной (12:6, при норме 1:10), снижение содержания бифидобактерий до 10%, лактобацилл до 6%, бактероидов до 8%, нарастание условно-патогенной микрофлоры до 70%, появление энтеротоксической E. Coli и клостридий.Upon admission of patient A. to the hospital, the content of GC was determined by the proposed method and was 48 ng / l, which was 3.03 times higher than their level in clinically healthy people, which indicated a violation of the intestinal microbiota, accompanied by the severity of the patient's clinical condition: body temperature 38.0, abdominal pain, unformed stool mixed with blood, stool frequency 5-7 times a day, weight loss, severe general weakness. Endoscopically established: edema of the mucous membrane, hyperemia, the presence of erosions, contact bleeding, fibrinous plaque on the intestinal wall. Bacteriological analysis of the mucous membrane of the colon biopsy showed a predominance of anaerobic microflora over aerobic (12: 6, at a rate of 1:10), a decrease in the content of bifidobacteria to 10%, lactobacilli to 6%, bacteroids to 8%, increase in conditionally pathogenic microflora to 70% , the appearance of enterotoxic E. Coli and clostridia.
После проведенной стандартной терапии состояние больного улучшилось. Содержание ДЖК составило 28 нг/л. Микробный пейзаж также изменился: увеличилось содержание бифидобактерий до 19%, лактобацилл до 13%, бактероидов до 17%, снизилось содержание условно-патогенной флоры.After standard therapy, the patient's condition improved. The content of JLC was 28 ng / l. The microbial landscape has also changed: the content of bifidobacteria increased to 19%, lactobacilli to 13%, bacteroids to 17%, the content of conditionally pathogenic flora decreased.
Следовательно, определение уровня ДЖК позволило провести лабораторный мониторинг состояния микрофлоры кишечника и подтвердить эффективность проводимой терапии.Consequently, determination of the level of GIC allowed to conduct laboratory monitoring of the state of the intestinal microflora and confirm the effectiveness of the therapy.
Пример 3. Больная В., диагноз: распространенный гнойный перитонит. Содержание ДЖК в плазме крови при поступлении составило 42 нг/л, что в 2,6 раза выше, чем в контроле. Это указывало на избыточный бактериальный рост и нарушение микробиоценоза кишечника и сопровождалось тяжелым клиническим состоянием больной.Example 3. Patient V., diagnosis: widespread purulent peritonitis. The content of DLC in the blood plasma at admission was 42 ng / l, which is 2.6 times higher than in the control. This indicated excessive bacterial growth and impaired intestinal microbiocenosis and was accompanied by a severe clinical condition of the patient.
Авторами предлагаемого способа было исследовано 50 образцов крови пациентов, проходивших лечение в Иркутской ОКБ, из них: 20 пациентов с распространенным гнойным перитонитом, панкреонекрозом - 15, воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК) - 15. Группу клинически здоровых людей (контроль) составили 15 человек. Полученные данные представлены в таблице.The authors of the proposed method were examined 50 blood samples of patients treated in the Irkutsk Design Bureau, among them: 20 patients with common purulent peritonitis, pancreatic necrosis - 15, inflammatory bowel disease (IBD) - 15. A group of clinically healthy people (control) were 15 people. The data obtained are presented in the table.
Представленные патологии проявляются дисбиотическими нарушениями, которые характеризуются изменением соотношения между аэробной и анаэробной флорой, снижением содержания бифидобактерий, лактобацилл. бактероидов, энтеротоксических штаммов, увеличением численности условно-патогенных бактерий.The presented pathologies manifest as dysbiotic disorders, which are characterized by a change in the ratio between aerobic and anaerobic flora, a decrease in the content of bifidobacteria, lactobacilli. bacteroids, enterotoxic strains, an increase in the number of opportunistic bacteria.
Авторами предлагаемого способа на основании проведенных исследований установлено, что у клинически здоровых людей содержание деконъюгированных желчных кислот составляет 15,8±1,56 нг/л, что свидетельствует о сбалансированном состоянии микробиоты кишечника. Так же авторами установлено, что увеличение уровня ДЖК указывает на избыточный бактериальный рост микрофлоры в кишечнике.The authors of the proposed method on the basis of the research found that clinically healthy people, the content of deconjugated bile acids is 15.8 ± 1.56 ng / l, which indicates a balanced state of the intestinal microbiota. It was also established by the authors that an increase in LCV level indicates excessive bacterial growth of microflora in the intestine.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет с более высокой точностью и специфичностью оценить состояние микробиоценоза кишечника. Повышенное содержание деконьюгированных желчных кислот служит маркером дисбаланса состава кишечной микрофлоры и приводит к развитию разных патологий.Thus, the proposed method allows with a higher accuracy and specificity to assess the state of the intestinal microbiocenosis. The increased content of deconjugated bile acids serves as a marker of an imbalance in the composition of the intestinal microflora and leads to the development of various pathologies.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018118299A RU2685553C1 (en) | 2018-05-17 | 2018-05-17 | Method for assessing of intestinal microbiota state |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018118299A RU2685553C1 (en) | 2018-05-17 | 2018-05-17 | Method for assessing of intestinal microbiota state |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2685553C1 true RU2685553C1 (en) | 2019-04-22 |
Family
ID=66314384
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018118299A RU2685553C1 (en) | 2018-05-17 | 2018-05-17 | Method for assessing of intestinal microbiota state |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2685553C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5631138A (en) * | 1994-11-24 | 1997-05-20 | Yuugengaisha B.S.R. | Method for the measurement of serum bile acids by elisa and method for the diagnosis of liver disease |
| RU2249219C2 (en) * | 2003-03-19 | 2005-03-27 | Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской Академии медицинских наук | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication |
-
2018
- 2018-05-17 RU RU2018118299A patent/RU2685553C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5631138A (en) * | 1994-11-24 | 1997-05-20 | Yuugengaisha B.S.R. | Method for the measurement of serum bile acids by elisa and method for the diagnosis of liver disease |
| RU2249219C2 (en) * | 2003-03-19 | 2005-03-27 | Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской Академии медицинских наук | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| VAN DEN ENDE A. et al., Microanalysis of free and conjugated bile acids by thin-layer chromatography and in situ spectrofluorimetry, Anal Biochem. 1983 Oct 1;134(1):153-62 - . * |
| ГУРОВА М. М. и др., Роль новых методов диагностики в оценке состояния кишечной микробиоты у детей, Вестник Челябинского государственного университета. 2014, N 13 (342), Вып. 4, С. 42-49. * |
| ГУРОВА М. М. и др., Роль новых методов диагностики в оценке состояния кишечной микробиоты у детей, Вестник Челябинского государственного университета. 2014, N 13 (342), Вып. 4, С. 42-49. VAN DEN ENDE A. et al., Microanalysis of free and conjugated bile acids by thin-layer chromatography and in situ spectrofluorimetry, Anal Biochem. 1983 Oct 1;134(1):153-62 - реферат. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Das et al. | Microbial metabolite signaling is required for systemic iron homeostasis | |
| Sampaio-Maia et al. | The role of the gut microbiome on chronic kidney disease | |
| Loffredo et al. | Oxidative stress and gut-derived lipopolysaccharides in neurodegenerative disease: role of NOX2 | |
| JP7307216B2 (en) | Novel lactic acid bacteria and uses thereof | |
| Cabre et al. | Fatty acid binding protein 4 is increased in metabolic syndrome and with thiazolidinedione treatment in diabetic patients | |
| Chen et al. | Triterpenoid herbal saponins enhance beneficial bacteria, decrease sulfate-reducing bacteria, modulate inflammatory intestinal microenvironment and exert cancer preventive effects in ApcMin/+ mice | |
| Han et al. | Spironolactone ameliorates renal injury and connective tissue growth factor expression in type II diabetic rats | |
| Levy et al. | Cysteinyl maresins regulate the prophlogistic lung actions of cysteinyl leukotrienes | |
| JP6393425B2 (en) | Pharmaceutical composition for prevention or treatment of metabolic diseases, comprising Bacteroides acifaciens as an active ingredient | |
| Fan et al. | Serum indoxyl sulfate predicts adverse cardiovascular events in patients with chronic kidney disease | |
| Baumann et al. | Microbiota profiling in aging-associated inflammation and liver degeneration | |
| Raptis et al. | Serum Fas ligand, serum myostatin and urine TGF-β1 are elevated in autosomal dominant polycystic kidney disease patients with impaired and preserved renal function | |
| CA2893990A1 (en) | Probiotic strains for the treatment and/or prevention of diarrhea | |
| Dembowski et al. | Phenotype, intestinal morphology, and survival of homozygous and heterozygous endothelin B receptor–deficient (spotting lethal) rats | |
| RU2685553C1 (en) | Method for assessing of intestinal microbiota state | |
| EP3134543B1 (en) | Method for diagnosing hepatic fibrosis | |
| Prokopovich et al. | Variability of Oxalobacter formigenes and oxalate in stool samples | |
| EP1210604B1 (en) | Methods and kits for diagnosing or monitoring a synovial or osteoarticular pathology comprising the use of a specific marker of the synovial tissue degradation | |
| Ghzaiel et al. | 7β-Hydroxycholesterol and 7-ketocholesterol: New oxidative stress biomarkers of sarcopenia inducing cytotoxic effects on myoblasts and myotubes | |
| JP2015044836A (en) | Method for preparing longan seed extract and uses thereof | |
| Rustamova et al. | Evaluation of the concentration of short-chain fatty acids in the oral fluid in patients with chronic periodontitis | |
| Christoffersen et al. | Effects of the non-commensal Methylococcus capsulatus Bath on mammalian immune cells | |
| JP7422388B2 (en) | Short-chain fatty acids that have the ability to enhance the expression of aquaporin 3 | |
| RU2692803C1 (en) | Method for predicting severity of atopic dermatitis in children with accompanying intestinal dysbacteriosis | |
| Hojo et al. | Effect of serum fatty acid composition on coronary atherosclerosis in Japan |