RU2249219C2 - Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication - Google Patents
Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication Download PDFInfo
- Publication number
- RU2249219C2 RU2249219C2 RU2003107548/15A RU2003107548A RU2249219C2 RU 2249219 C2 RU2249219 C2 RU 2249219C2 RU 2003107548/15 A RU2003107548/15 A RU 2003107548/15A RU 2003107548 A RU2003107548 A RU 2003107548A RU 2249219 C2 RU2249219 C2 RU 2249219C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- content
- metabolites
- supernatant
- oxidized tryptophan
- dried
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано для оценки степени тяжести эндогенной интоксикации.The present invention relates to medicine, namely to biochemistry, and can be used to assess the severity of endogenous intoxication.
При эндогенной интоксикации наблюдается отравление организма как конечными продуктами метаболизма вследствие задержки их выведения и накопления в организме выше физиологических норм, так и промежуточными в связи с нарушениями метаболических процессов (Эндогенная интоксикация при острых хирургических заболеваниях / под ред. Ю.Н.Белокурова, В.В.Рябчикова. - Ярославль: ДИА- пресс, 2000. - с.283).With endogenous intoxication, poisoning of the body is observed both with end products of metabolism due to a delay in their excretion and accumulation in the body above physiological norms, and intermediate in connection with metabolic disturbances (Endogenous intoxication in acute surgical diseases / edited by Yu.N. Belokurov, V. V. Ryabchikova. - Yaroslavl: DIA-press, 2000. - p. 283).
Известен способ обнаружения окисленных продуктов триптофана путем тонкослойной хроматографии на силикагеле с использованием элюентных систем, например метилацетат - изопропанол - 25% амиак, в соотношении 9:7:4 или хлороформ - уксусная кислота в соотношении 95:5. Проявление проводят реактивом Ван-Урка, содержащим 0,125 г альдегида, 0,1 мл 5%-ного раствора хлористого железа и 100 мл 65%-ной серной кислоты.A known method for the detection of oxidized tryptophan products by thin-layer chromatography on silica gel using eluent systems, for example methyl acetate - isopropanol - 25% ammonia, in a ratio of 9: 7: 4 or chloroform - acetic acid in a ratio of 95: 5. The manifestation is carried out with a Van Urk reagent containing 0.125 g of aldehyde, 0.1 ml of a 5% solution of ferric chloride and 100 ml of 65% sulfuric acid.
К недостаткам данного способа следует отнести длительность проведения анализа и необходимость использования специального оборудования (пластины для тонкослойной хроматографии, набор реактивов для элюции и проявления, опрыскиватель).The disadvantages of this method include the duration of the analysis and the need to use special equipment (plates for thin layer chromatography, a set of reagents for elution and manifestation, sprayer).
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ определения содержания токсических продуктов низкого и среднего молекулярного веса в биосубстратах, включающий осаждение высокомолекулярных белков сыворотки и регистрацию спектральной характеристики супернатанта в диапазоне длин волн 210-300 нм (Малахова М.Я. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации // Эфферентная терапия.- 1995, т.1, №1, с.61-64). Регистрация спектра сыворотки в ультрафиолетовой области позволяет провести комплексную оценку токсичных продуктов и более 200 различных веществ, образующихся при нормальном и нарушенном метаболизме. Расчет количества вещества низкой и средней молекулярной массы проводят по формулеThe closest in technical essence to the proposed is a method for determining the content of toxic products of low and medium molecular weight in biosubstrates, including the deposition of high molecular weight whey proteins and recording the spectral characteristics of the supernatant in the wavelength range of 210-300 nm (Malakhova M.Ya. Methods of biochemical registration of endogenous intoxication // Efferent therapy .- 1995, v. 1, No. 1, p. 61-64). Registration of the serum spectrum in the ultraviolet region allows a comprehensive assessment of toxic products and more than 200 different substances formed during normal and impaired metabolism. The calculation of the amount of low and medium molecular weight substances is carried out according to the formula
где: 
Е210-Е300 - величины оптической плотности при заданной длине волны.E 210 -E 300 - optical density at a given wavelength.
Общее время проведения анализа составляет 50 минут.The total analysis time is 50 minutes.
К недостаткам данного способа следует отнести получение общей характеристики веществ, циркулирующих в крови, принадлежащих к разным классам соединений и определяющих профиль спектрограммы. Данное обстоятельство ограничивает получение информации о компонентном составе, что в свою очередь не дает полного представления о степени тяжести эндогенной интоксикации и не позволяет провести в полном объеме необходимые лечебные мероприятия.The disadvantages of this method include obtaining a general characteristic of substances circulating in the blood, belonging to different classes of compounds and determining the profile of the spectrogram. This circumstance limits the receipt of information on the component composition, which in turn does not provide a complete picture of the severity of endogenous intoxication and does not allow the necessary therapeutic measures to be taken in full.
Задачей заявляемого технического решения является разработка способа, позволяющего быстро и объективно идентифицировать компонентный состав гетероциклических соединений, формирующих на спектрограмме пик при 280 нм и оценить их содержание в биологических объектах.The objective of the proposed technical solution is to develop a method that allows you to quickly and objectively identify the component composition of heterocyclic compounds that form a peak at 280 nm in the spectrogram and evaluate their content in biological objects.
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности и чувствительности определения за счет обеспечения возможности идентификации окисленных продуктов триптофана - триптамина, О-аминофенола, индола и скатола в биологических средах, а также упрощение и сокращение времени проведения анализа.The technical result of the proposed method is to increase the accuracy and sensitivity of determination by providing the ability to identify oxidized tryptophan products - tryptamine, O-aminophenol, indole and scatol in biological media, as well as simplifying and shortening the analysis time.
Технический результат достигается тем, что способ определения окисленных метаболитов триптофана при эндогенной интоксикации включает взятие пробы, осаждение ацетонитрилом высокомолекулярных соединений и получение супернатанта. Количественное и качественное содержание окисленных метаболитов триптофана проводят по спектральной характеристике супернатанта.The technical result is achieved by the fact that a method for determining oxidized tryptophan metabolites during endogenous intoxication involves sampling, precipitation of high molecular weight compounds with acetonitrile and obtaining a supernatant. Quantitative and qualitative content of oxidized tryptophan metabolites is carried out according to the spectral characteristics of the supernatant.
Отличительными приемами заявляемого способа являются: супернатант наносят на бумажный фильтр, высушивают, погружают в раствор, содержащий ароматический альдегид, ацетон и концентрированную соляную кислоту, взятые в весовом соотношении 70:5:1, выдерживают в течение 2-3 минут, после чего повторно высушивают. По интенсивности окрашивания судят о качественном и количественном составе метаболитов.Distinctive techniques of the proposed method are: the supernatant is applied to a paper filter, dried, immersed in a solution containing aromatic aldehyde, acetone and concentrated hydrochloric acid, taken in a weight ratio of 70: 5: 1, incubated for 2-3 minutes, and then re-dried . The intensity of staining is used to judge the qualitative and quantitative composition of metabolites.
Приемами нанесения супернатанта на бумажный фильтр, высушивания и помещения в раствор, содержащий ароматический альдегид, ацетон и концентрированную соляную кислоту, взятые в весовом соотношении 70:5:1, достигается стабильная фиксация и проявление исследуемых веществ на бумажном носителе.By applying supernatant to a paper filter, drying it and placing it in a solution containing aromatic aldehyde, acetone and concentrated hydrochloric acid, taken in a weight ratio of 70: 5: 1, stable fixation and development of the test substances on a paper carrier is achieved.
Интенсивность окрашивания окисленных метаболитов триптофана позволяет достоверно определить качественный и количественный состав гетероциклических соединений.The intensity of staining of oxidized tryptophan metabolites allows one to reliably determine the qualitative and quantitative composition of heterocyclic compounds.
Авторам заявляемого способа не известно и в доступной литературе не найдено использование подобного состава реагента для проведения анализа окисленных продуктов триптофана - триптамина, О-аминофенола, индола, скатола.The authors of the proposed method is not known and in the available literature did not find the use of a similar reagent composition for the analysis of the oxidized products of tryptophan - tryptamine, O-aminophenol, indole, skatol.
Все эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию изобретения “новизна”.All these differences allow us to conclude that the claimed technical solution meets the criteria of the invention of "novelty."
Сравнение заявляемого технического решения не только с прототипом, но и другими техническими решениями в биохимии не позволило выявить в них признаки, отличающие заявленное решение не только от способа-прототипа, но и от других аналогичных технических решений.Comparison of the claimed technical solution not only with the prototype, but also with other technical solutions in biochemistry did not reveal the signs that distinguish the claimed solution not only from the prototype method, but also from other similar technical solutions.
Нами не найдена информация, в которой бы говорилось об определении окисленных метаболитов триптофана при эндогенной интоксикации приемами заявляемого способа.We have not found information that would talk about the determination of oxidized tryptophan metabolites during endogenous intoxication by the methods of the proposed method.
Предлагаемый способ позволяет получить усматриваемый заявителем технический результат - повышение точности и чувствительности определения содержания окисленных метаболитов триптофана в биологических средах и сокращение времени проведения анализа.The proposed method allows to obtain the technical result perceived by the applicant - increasing the accuracy and sensitivity of determining the content of oxidized tryptophan metabolites in biological media and reducing the analysis time.
Это позволяет сделать вывод о соответствии технического решения критерию “изобретательский уровень”.This allows us to conclude that the technical solution meets the criterion of "inventive step".
Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в медицине, а именно в биохимии. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами, следовательно, предлагаемое решение соответствует критерию изобретения “промышленная применимость”.The method comprising the claimed invention is intended for use in medicine, namely in biochemistry. The possibility of its implementation is confirmed by the methods and means described in the application, therefore, the proposed solution meets the criteria of the invention “industrial applicability”.
Заявляемый способ осуществляют следующим образом.The inventive method is as follows.
После осаждения высокомолекулярных соединений пробу сыворотки крови наносят на бумажный фильтр в количестве 2-10 мкл и высушивают на воздухе, после чего помещают в кристаллизатор с проявительным раствором. Состав проявителя: ароматический альдегид, ацетон и концентрированная соляная кислота, взятые в весовом соотношении 70:5:1. Экспозицию проводят в течение 2-3 минут, после чего проводят повторное высушивание на воздухе.After the precipitation of high molecular weight compounds, a blood serum sample is applied to a paper filter in an amount of 2-10 μl and dried in air, after which it is placed in a crystallizer with a developing solution. The composition of the developer: aromatic aldehyde, acetone and concentrated hydrochloric acid, taken in a weight ratio of 70: 5: 1. The exposure is carried out for 2-3 minutes, followed by repeated drying in air.
При наличии окисленных продуктов триптофана пятна пробы окрашиваются от фиолетового до желтого цвета. По интенсивности и цветовым оттенкам судят о качественном и количественном составе метаболитов. Так о степени гидроксилирования судят по интенсивности желтого окрашивания. Интенсивность окрашивания возрастает в ряду моно-, ди-, триоксипроизводных. Интенсивность окрашивания негидроксилированных метаболитов триптофана служит количественным критерием их содержания в сыворотке, при этом изменение окраски происходит от слабо сине-фиолетовой до ярко-фиолетовой.In the presence of oxidized tryptophan products, sample spots turn violet to yellow. The intensity and color shades judge the qualitative and quantitative composition of metabolites. So the degree of hydroxylation is judged by the intensity of yellow staining. The intensity of staining increases in the series of mono-, di-, trioxy derivatives. The intensity of staining of non-hydroxylated tryptophan metabolites serves as a quantitative criterion for their content in serum, while the color change occurs from weak blue-violet to bright violet.
Как для гидроксилированных, так и не содержащих гидроксильные группы метаболитов триптофана составлены калибровочные шкалы, которые дают возможность определять пикограммовые количества исследуемых метаболитов.For both hydroxylated and hydroxyl-free groups of tryptophan metabolites, calibration scales have been compiled that make it possible to determine picogram amounts of the studied metabolites.
Общее время анализа составляет не более 30 минут. Предложенный способ поясняется примерами конкретного выполнения.The total analysis time is not more than 30 minutes. The proposed method is illustrated by examples of specific performance.
Пример 1.Example 1
Больной Н., диагноз: панкреонекроз, распространенный гнойный перитонит. Общее содержание веществ низкого и среднего молекулярного веса, определенное по способу-прототипу, составило: в лимфе 15,177 условных единиц (у.е.), в сыворотке крови - 9,389 у.е. Полученные величины в 1,27 раза превышали их уровень у практически здорового человека. Содержание веществ при 280 нм было особенно высоким в лимфе и в сыворотке крови, что превышало показатель донора в сыворотке крови в 1,6 раза. Данные показатели свидетельствуют о тяжелом клиническом течении заболевания.Patient N., diagnosis: pancreatic necrosis, widespread purulent peritonitis. The total content of low and medium molecular weight substances, determined by the prototype method, was: in lymph 15.177 conventional units (cu), in blood serum - 9.389 cu The obtained values were 1.27 times higher than their level in a practically healthy person. The substance content at 280 nm was especially high in lymph and in blood serum, which was 1.6 times higher than the donor in blood serum. These indicators indicate a severe clinical course of the disease.
Проведение анализа по заявляемому способу позволило выявить наличие соединений с лимонно-желтым окрашиванием, которые были идентифицированы как производные скатола. Полуколичественная их оценка охарактеризована +++.The analysis of the claimed method revealed the presence of compounds with lemon yellow staining, which were identified as derivatives of skatol. Their semi-quantitative assessment is characterized by +++.
Нахождение окисленных метаболитов по заявляемому способу в лимфе и сыворотке больного указывает на наличие продуктов промежуточного обмена и характеризует глубокие нарушения метаболических процессов и тяжелый эндотоксикоз, что свидетельствует о необходимости применения методов экстракорпоральной детоксикации.The presence of oxidized metabolites according to the claimed method in the patient’s lymph and serum indicates the presence of intermediate metabolic products and characterizes deep metabolic disturbances and severe endotoxemia, which indicates the need for extracorporeal detoxification methods.
Пример 2.Example 2
Больная Щ. Диагноз железодефицитная анемия. Содержание веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) в сыворотке крови составило 10,296 у.е., что в 1,3 раза превысило их содержание у донора. Определение этих веществ при длине волны 280 нм было в 1,82 раза выше, чем у донора.Patient S. Diagnosis of iron deficiency anemia. The content of low and medium molecular weight substances (VNSSM) in the blood serum was 10.296 cu, which was 1.3 times higher than their content in the donor. The determination of these substances at a wavelength of 280 nm was 1.82 times higher than that of the donor.
Проведение анализа по предлагаемому способу позволило выявить присутствие соединений преобладающей серо-фиолетовой окраски, что было верифицировано как производные индола с альдегидной группой. Полуколичественное их содержание оценили ++. Из изложенного следует, что заявляемым способом в сыворотке крови был определен значительный уровень окисленных продуктов триптофана, что указывало на выраженность эндогенной интоксикации.The analysis of the proposed method revealed the presence of compounds of a predominant gray-violet color, which was verified as derivatives of indole with an aldehyde group. Semi-quantitative content was rated ++. From the foregoing, it follows that the claimed method in the blood serum was determined a significant level of oxidized tryptophan products, which indicated the severity of endogenous intoxication.
Пример 3.Example 3
Больной С. с диагнозом ИБС, 3-й функциональный класс, стенокардия напряжения и покоя. При поступлении суммарное содержание ВНСММ в сыворотке крови составляло 10,218 у.е., при 280 нм - 0,895, что в 1,32 и 2,28 раза соответственно превышало уровень донора.Patient S. with a diagnosis of coronary heart disease, 3rd functional class, angina pectoris and rest. Upon admission, the total content of VNSMM in blood serum was 10.218 cu, at 280 nm - 0.895, which was 1.32 and 2.28 times higher than the level of the donor.
Использование предлагаемого способа выявило, что в сыворотке крови больного имеются соединения, дающие фиолетовое окрашивание, что указывает на наличие индолил-3-уксусной или индолил-3-пропионовой кислоты. По интенсивности окраски ее содержание соответствовало +++. Следовательно, предлагаемый способ выявил наличие промежуточных продуктов обмена - окисленных соединений триптофана, что указывает на тяжесть состояния больного с выраженной эндогенной интоксикацией.Using the proposed method revealed that in the patient's blood serum there are compounds that give a violet color, which indicates the presence of indolyl-3-acetic or indolyl-3-propionic acid. According to the color intensity, its content corresponded to +++. Therefore, the proposed method revealed the presence of intermediate metabolic products - oxidized tryptophan compounds, which indicates the severity of the patient with severe endogenous intoxication.
Через 1,5 месяца после проведенного лечения фетальной терапией метаболический статус больного явно улучшился: суммарное содержание ВНСММ уменьшилось вдвое и составило 5,088 у.е., пик на спектрограмме при 280 нм снизился в 3 раза - уменьшился уровень окисленных продуктов триптофана. Заявляемым способом обнаружена следовая окраска соединений, что свидетельствовало о резком снижении содержания продуктов извращенного метаболизма.1.5 months after the treatment with fetal therapy, the patient’s metabolic status clearly improved: the total content of VHFMM decreased by half and amounted to 5.088 cu, the peak in the spectrogram at 280 nm decreased 3 times - the level of oxidized tryptophan products decreased. The inventive method revealed a trace color of the compounds, which indicated a sharp decrease in the content of distorted metabolism products.
Через 3 месяца после лечения, хотя и общий пул ВНСММ несколько увеличился, незначительно возросло содержание веществ ароматического строения, определенных при 280 нм. Однако эти показатели находились в пределах значений донора. Особо хотелось бы отметить корреляцию уменьшения содержания окисленных продуктов триптофана с клиническим состоянием больного.3 months after treatment, although the total pool of VNSMM increased slightly, the content of aromatic substances determined at 280 nm increased slightly. However, these indicators were within the range of the donor. I would especially like to note the correlation of the decrease in the content of oxidized tryptophan products with the clinical condition of the patient.
Всего было обследовано в динамике 156 больных, из них 20 пациентов с панкреонекрозом, 80 - с ишемической болезнью сердца, 16 - с железодефицитной анемией, 34 - со злокачественными опухолями толстого кишечника, 6 - с острым лейкозом. У всех больных исследование окисленных метаболитов триптофана проводили одновременно по заявляемому способу и по прототипу. Суммарное содержание токсических продуктов в сыворотке крови, определенное по способу-прототипу (при поступлении в стационар), составляло 12,3-10,8 у.е. Полученные данные не позволили установить качественный состав соединений, циркулирующих в биосредах, в области 270-280 нм. Проведение исследований по заявляемому способу позволило установить, что у 20 больных панкреонекрозом, у 30-ти со злокачественными опухолями толстого кишечника и у 6-ти с острым лейкозом в сыворотке крови присутствовали соединения, дающие лимонно-желтое окрашивание интенсивностью +++, что указывало на наличие производных скатола и свидетельствовало о глубоких нарушениях метаболических процессов и тяжелом эндотоксикозе. У 20-ти пациентов ИБС и 10-ти с железодефицитной анемией предлагаемым способом выявлено, что в сыворотке крови содержатся вещества, дающие серо-фиолетовое окрашивание интенсивностью ++, верифицированные как производные индола с альдегидной группой.In total, 156 patients were examined in dynamics, of which 20 patients with pancreatic necrosis, 80 with coronary heart disease, 16 with iron deficiency anemia, 34 with malignant tumors of the large intestine, 6 with acute leukemia. In all patients, the study of oxidized tryptophan metabolites was carried out simultaneously by the present method and the prototype. The total content of toxic products in blood serum, determined by the prototype method (upon admission to the hospital), was 12.3-10.8 cu The data obtained did not allow to establish the qualitative composition of the compounds circulating in biological media in the region of 270-280 nm. Studies on the claimed method made it possible to establish that in 20 patients with pancreatic necrosis, in 30 with malignant tumors of the large intestine and in 6 with acute leukemia in the blood serum there were compounds giving a lemon-yellow staining with +++ intensity, which indicated the presence of derivatives of skatol also testified to deep metabolic disturbances and severe endotoxemia. In 20 patients with IHD and 10 with iron deficiency anemia, the proposed method revealed that the blood serum contains substances that give a gray-violet staining intensity ++, verified as derivatives of indole with an aldehyde group.
Проведение анализа заявляемым способом у 30-ти больных ИБС, у 6-ти с железодефицитной анемией давало фиолетовую окраску и свидетельствовало о наличии окисленных продуктов триптофана.The analysis of the claimed method in 30 patients with coronary heart disease, in 6 with iron deficiency anemia gave a purple color and indicated the presence of oxidized tryptophan products.
Предлагаемый способ позволяет быстро и экономично определить наличие окисленных гетероциклических соединений, являющихся токсическими продуктами, которые вызывают глубокие метаболические нарушения в организме больного, вплоть до поражения различных органов и систем.The proposed method allows you to quickly and economically determine the presence of oxidized heterocyclic compounds, which are toxic products that cause deep metabolic disturbances in the patient’s body, up to and including damage to various organs and systems.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003107548/15A RU2249219C2 (en) | 2003-03-19 | 2003-03-19 | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003107548/15A RU2249219C2 (en) | 2003-03-19 | 2003-03-19 | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2003107548A RU2003107548A (en) | 2004-09-10 |
| RU2249219C2 true RU2249219C2 (en) | 2005-03-27 |
Family
ID=35560780
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003107548/15A RU2249219C2 (en) | 2003-03-19 | 2003-03-19 | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2249219C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2685553C1 (en) * | 2018-05-17 | 2019-04-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Иркутский научный центр хирургии и травматологии" | Method for assessing of intestinal microbiota state |
-
2003
- 2003-03-19 RU RU2003107548/15A patent/RU2249219C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| МАЛАХОВА М.Я. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации. Эфферентная терапия. 1995, т.1, №1, с. 61-64. * |
| Справочник биохимика. Пер. с англ. ДОСОН Р. и др. - М.: Мир, 1991, с.379-395. ZHANG XIU-LING et al. Определение триптофана в сыворотке крови методом ВЭЖХ. Dalian qinggongye xueyuan xuebao. 1999, №2, с.165-167. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2685553C1 (en) * | 2018-05-17 | 2019-04-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Иркутский научный центр хирургии и травматологии" | Method for assessing of intestinal microbiota state |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5470750A (en) | Detection of appendicitis by measurement of orthohydroxyhippuric acid | |
| Wang et al. | A new approach for turn-on fluorescence sensing of l-DOPA | |
| CN112014389A (en) | Ascorbic acid interference-based urine occult blood test paper and preparation method thereof | |
| Chou et al. | High performance liquid chromatography with fluorimetric detection for the determination of total homocysteine in human plasma: method and clinical applications | |
| Lukaszewski et al. | Biosensors for the determination of protein biomarkers | |
| Deacon | Performance of screening tests for porphyria | |
| Chen et al. | HPLC for simultaneous quantification of free mannose and glucose concentrations in serum: use in detection of ovarian cancer | |
| ES2227564T3 (en) | MULTI-PATH ANALYTICAL ELEMENT. | |
| RU2249219C2 (en) | Method for detecting oxidized tryptophan metabolites at endogenic intoxication | |
| Montoliu et al. | Activation of soluble guanylate cyclase by nitric oxide in lymphocytes correlates with minimal hepatic encephalopathy in cirrhotic patients | |
| Akram et al. | Development and validation of an economical uric acid-Fe3+/Fe2+-ferrozine-based colorimetric assay to estimate uric acid level of pure and biological samples | |
| Agrup et al. | 5-S-cysteinyldopa in the urine of melanoma patients | |
| Pourkarim et al. | Determination of verapamil in exhaled breath condensate by using microextraction and liquid chromatography | |
| Liu et al. | Circulating levels of hydroxylated bradykinin function as an indicator of tissue HIF-1α expression | |
| US20040121421A1 (en) | Homocysteine assay adaptable to screening | |
| Gonçalves-Dias et al. | A Mechanistic-Based and Non-invasive Approach to Quantify the Capability of Kidney to Detoxify Cysteine-Disulfides | |
| Favier | How to demonstrate the occurrence of an oxidative stress in human? | |
| Attia et al. | A highly selective and sensitive spectrofluorimetric method for the assessment of 3-nitrotyrosine in serum using (Eu (TTA) 3 Phen) photo probe | |
| US5955374A (en) | Method of detection of bilirubin in urine on an automated analyzer | |
| RU2728784C1 (en) | Method for evaluating the effectiveness of a drug therapy of ischemic heart disease by parameters of a carbonyl-dependent modification of erythrocyte superoxide dismutase | |
| Minder et al. | Porphyrins, porphobilinogen, and δ-aminolevulinic acid | |
| Bissell | Laboratory evaluation in porphyria | |
| CZ30896U1 (en) | A reaction mixture for the quantitative determination of sarcosine in a sample of human urine, serum or plasma | |
| RU2157528C1 (en) | Method for predicting malignant neoplasm to be the case | |
| JPS592700A (en) | Method for measuring total polyamine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050320 |