RU2685238C1 - Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine - Google Patents
Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine Download PDFInfo
- Publication number
- RU2685238C1 RU2685238C1 RU2016126437A RU2016126437A RU2685238C1 RU 2685238 C1 RU2685238 C1 RU 2685238C1 RU 2016126437 A RU2016126437 A RU 2016126437A RU 2016126437 A RU2016126437 A RU 2016126437A RU 2685238 C1 RU2685238 C1 RU 2685238C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glycerophosphatidylcholine
- mixture
- solvent
- azeotropic mixture
- azeotropic
- Prior art date
Links
- SUHOQUVVVLNYQR-MRVPVSSYSA-N choline alfoscerate Chemical compound C[N+](C)(C)CCOP([O-])(=O)OC[C@H](O)CO SUHOQUVVVLNYQR-MRVPVSSYSA-N 0.000 title claims abstract description 89
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 71
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 44
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 8
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 20
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 18
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 claims description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002920 hazardous waste Substances 0.000 abstract 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 11
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 11
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 10
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008777 Glycerylphosphorylcholine Substances 0.000 description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 4
- SUHOQUVVVLNYQR-MRVPVSSYSA-O glycerylphosphorylcholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCO[P@](O)(=O)OC[C@H](O)CO SUHOQUVVVLNYQR-MRVPVSSYSA-O 0.000 description 4
- 229960004956 glycerylphosphorylcholine Drugs 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 3
- 229940043232 butyl acetate Drugs 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N glycerophosphatidylethanolamine Chemical compound NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100001261 hazardous Toxicity 0.000 description 3
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N chlorobenzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1 MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical compound CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 229940005741 sunflower lecithin Drugs 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- HQLKZWRSOHTERR-UHFFFAOYSA-N 2-Ethylbutyl acetate Chemical compound CCC(CC)COC(C)=O HQLKZWRSOHTERR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- -1 alkaline earth metal alkoxides Chemical class 0.000 description 1
- 229940072049 amyl acetate Drugs 0.000 description 1
- PGMYKACGEOXYJE-UHFFFAOYSA-N anhydrous amyl acetate Natural products CCCCCOC(C)=O PGMYKACGEOXYJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000005137 deposition process Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-M heptanoate Chemical compound CCCCCCC([O-])=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/10—Phosphatides, e.g. lecithin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к способам получения глицерофосфатидилхолина (ХАС). Глицерофосфатидилхолин является активным переносчиком холина и холиноподобных соединений в мозг человека и животных для лечения различных патологических состояний, в том числе сопровождаемых ишемией (инсульт).The present invention relates to methods for producing glycerophosphatidylcholine (XAC). Glycerophosphatidylcholine is an active carrier of choline and choline-like compounds in the brain of humans and animals for the treatment of various pathological conditions, including those accompanied by ischemia (stroke).
Глицерофосфатидилхолин представляет собой соединений со структурой:Glycerophosphatidylcholine is a compound with the structure:
Из уровня техники, соответствующего настоящему изобретению, известен патент США US 5250719, в котором раскрыт способ получения глицерилфосфорилхолина (глицерофосфатидилхолина) путем деацилирования в метаноле деолеотированного (обезжиренного) соевого лецитина.The state of the art in this invention is known in US Pat. No. 5,250,719, which discloses a method for producing glycerylphosphorylcholine (glycerophosphatidylcholine) by deacylated (degreased) soy lecithin in methanol.
В данном документе суспензия деолеотированного соевого лецитина в безводном метаноле, содержащем CH3ONa, перемешивается при комнатной температуре около 3 часов. Смесь фильтруется и остаток промывается метанолом. Фильтрат нейтрализуется (рН≈6) уксусной кислотой, концентрируется и отделяются жирные кислоты.In this document, a suspension of deoleotised soy lecithin in anhydrous methanol containing CH 3 ONa is stirred at room temperature for about 3 hours. The mixture is filtered and the residue is washed with methanol. The filtrate is neutralized (pH≈6) with acetic acid, concentrated and the fatty acids are separated.
Метанольный раствор обесцвечивается с помощью активированного угля и загружается в смолу Amberlyst.RTM. 15, уравновешенную в метаноле. Смола промывается в метаноле до удаления примесей (контроль по ТСХ), затем смола промывается водой (около 1,2 л). Водный раствор дважды обрабатывается активированным углем (2 г). Водный раствор (содержащий около 44 г глицерофосфатидилхолина и глицерофосфатидилэтаноламина) выделяется сначала на смоле IR 93 (120 мл), в ОН форме уравновешенной в воде и затем на смоле IR 401 (120 мл в ОН форме) уравновешенной в воде и, наконец, на смоле IRC50 (40 мл, в кислой форме) уравновешенной в воде. Полученный раствор концентрируется и содержит 26 г чистого GPC (глицерилфосфорилхолина) (содержание воды 10.1% по результатам неводного титрования с помощью НСlO4 в уксусной кислоте 99.8%).The methanol solution is decolorized with activated carbon and is loaded into Amberlyst.RTM resin. 15 balanced in methanol. The resin is washed in methanol to remove impurities (TLC control), then the resin is washed with water (about 1.2 liters). The aqueous solution is treated twice with activated carbon (2 g). An aqueous solution (containing about 44 g of glycerophosphatidylcholine and glycerophosphatidyl ethanolamine) is released first on IR 93 resin (120 ml), in OH form balanced in water and then on IR 401 resin (120 ml in OH form) balanced in water and finally on resin IRC50 (40 ml, in acidic form) balanced in water. The resulting solution is concentrated and contains 26 g of pure GPC (glycerylphosphorylcholine) (water content 10.1% according to the results of non-aqueous titration with HClO4 in acetic acid 99.8%).
Путем кристаллизации в этаноле был получен кристаллический глицерилфосфорилхолин со следующими характеристиками:Crystalline glycerylphosphorylcholine with the following characteristics was obtained by crystallization in ethanol:
Угол вращения [α]D=-2,92 (с=10% в воде).Rotation angle [α] D = -2.92 (c = 10% in water).
Содержание фосфора Р%=12,18% (расчетное 12.15%).The phosphorus content is P% = 12.18% (calculated 12.15%).
Содержание азота N%=5,49% (расчетное 5.58%).The nitrogen content is N% = 5.49% (calculated 5.58%).
Недостатком существующего способа является тот факт, что способ работает только с сырьем с высоким содержанием лецитина (соевый лецитин), так как он содержит большее количество фосфатидилхолина и меньшее количество других производных (фосфатидилэтаноламина, фосфатидилсерина, фосфатидилинозитола).The disadvantage of the existing method is the fact that the method works only with raw materials with a high content of lecithin (soy lecithin), since it contains more phosphatidylcholine and fewer other derivatives (phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl serine, phosphatidyl inositol).
Также недостатком является то, что в известном способе реакционную массу в метаноле пропускают сначала через колонку с сильнокислым катионитом, в котором происходит сорбция глицерофосфатидилхолина, затем колонку промывают метанолом от примесей и затем продукт (глицерофосфатидилхолин) эллюируют с колонки водой. В результате этой операции образуется большое количество сложно утилизируемых стоков, содержащих водно-метанольною смесь.Also a disadvantage is that, in a known method, the reaction mass in methanol is passed first through a column with strongly acidic cation exchanger in which glycerophosphatidylcholine is sorbed, then the column is washed with methanol from impurities and then the product (glycerophosphatidylcholine) is eluted from the column with water. As a result of this operation, a large number of difficult to dispose of effluent containing water-methanol mixture.
Достигаемыми техническими результатами настоящего способа являются расширение сырьевой базы для производства глицерофосфатидилхолина, снижение количества опасных и наносящих вред окружающей среде отходов производства, а также расширение арсенала способов получения кристаллического глицерофосфатидилхолина.Achievable technical results of this method are the expansion of the raw material base for the production of glycerophosphatidylcholine, reducing the amount of hazardous and environmentally damaging production waste, as well as expanding the arsenal of methods for producing crystalline glycerophosphatidylcholine.
Заявленные технические результаты достигаются с помощью способа получения кристаллического глицерофосфатидилхолина, содержащего следующие этапы: этап синтеза глицерофосфатидилхолина из фосфатидилхолин содержащего сырья и получения водного раствора глицерофосфатидилхолина; этап очистки водного раствора глицерофосфатидилхолина, с использованием сильноосновного сорбента и с извлечением эллюата; и этап кристаллизации глицерофосфатидилхолина с отгонкой азеотропной смеси, на котором эллюат предварительно разбавляют вторым растворителем, в котором глицерофосфатидилхолин является нерастворимым или малорастворимым и который образует с водой азеотропную смесь, температура кипения такой азеотропной смеси ниже температуры кипения самого растворителя и образованная азеотропная смесь является двухфазной, количество растворителя выбирается так, что его количество в смеси с водой больше, чем его содержание в азеотропной точке полученной смеси, и далее осуществляют отгонку азеотропной смеси с последующим выпадением кристаллического глицерофосфатидилхолина.The claimed technical results are achieved using a method for producing crystalline glycerophosphatidylcholine containing the following steps: the step of synthesizing glycerophosphatidylcholine from phosphatidylcholine containing raw materials and producing an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine; the stage of purification of an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine, using a strongly basic sorbent and extracting elluate; and a step of crystallizing glycerophosphatidylcholine with azeotropic distillation, in which the eluate is prediluted with a second solvent, in which the glycerophosphatidylcholine is insoluble or slightly soluble and which forms an azeotropic mixture with water, the boiling point of the azeotropic mixture below the boiling point of the solvent and a fraction of the mixture and a fraction of the azootropic mixture that forms a mixture of azeotropic and chlorine; the solvent is chosen so that its amount in a mixture with water is greater than its content in the azeotropic point frit, and further carry out the distillation of the azeotropic mixture, followed by precipitation of the crystalline glitserofosfatidilholina.
Получение водного раствора глицерофосфатидилхолина и этап очистки водного раствора глицерофосфатидилхолина, с использованием сильноосновного сорбента с извлечением эллюата вместе обеспечивают повышение выхода глицерофосфатидилхолина и обеспечивают возможность использование сырья с низким содержанием фосфатидилхолина.The preparation of an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine and the stage of purification of an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine using a strongly basic sorbent with extraction of eluate together increase the yield of glycerophosphatidylcholine and enable the use of raw materials with a low content of phosphatidylcholine.
Так в способе по US 5250719, первой отчисткой в колонне является катионная очистка. Особенностью данной очистки тот факт, что целевое вещество, глицерофосфатидилхолин, осаждается на сорбенте и удерживается на нем, затем целевое вещество смывается с сорбента. Однако процесс осаждения на сорбенте чувствителен к исходной концентрации целевого вещества, т.е. снижение содержания фосфатидилхолина в исходном сырье и, соответственно, снижение содержания глицерофосфатидилхолина, существенно ухудшает параметры процесса катионной очистки. Кроме того, в данном случае, катионная очистка приводит к потерям целевого вещества, т.к. не все целевое вещество осаждается на сорбенте и часть проходит через колонну в составе исходной очищаемой смеси, а также, поскольку не весь объем целевого вещества эффективно удаляется с сорбента.So in the method according to US 5,250,719, the first cleaning in the column is cationic purification. The peculiarity of this purification is the fact that the target substance, glycerophosphatidylcholine, is deposited on the sorbent and is retained on it, then the target substance is washed off from the sorbent. However, the deposition process on the sorbent is sensitive to the initial concentration of the target substance, i.e. a decrease in the content of phosphatidylcholine in the feedstock and, accordingly, a decrease in the content of glycerophosphatidylcholine, significantly worsens the parameters of the cationic purification process. In addition, in this case, cationic purification leads to the loss of the target substance, because not all the target substance is deposited on the sorbent and a part passes through the column in the composition of the initial mixture to be purified, and also, since not the entire volume of the target substance is effectively removed from the sorbent.
В способе согласно настоящему изобретению используется очистка водного раствора фосфатидилхолина на сильноосновном сорбенте. В данном случае фосфатидилхолин не взаимодействует с сорбентом, что устраняет известные недостатки. Также отпадает необходимость утилизации опасных и наносящих вред окружающей среде стоков, содержащих метанол.In the method according to the present invention, the purification of an aqueous solution of phosphatidylcholine on a strongly basic sorbent is used. In this case, phosphatidylcholine does not interact with the sorbent, which eliminates the known disadvantages. Also, there is no need to dispose of hazardous and environmentally harmful wastewater containing methanol.
Отсутствие многократной очистки смеси и использованием сорбентов, в соответствии с настоящим изобретением, компенсируется эффективным этапом кристаллизации глицерофосфатидилхолина с отгонкой смеси.The absence of multiple purification of the mixture and the use of sorbents, in accordance with the present invention, is compensated for by the effective crystallization step of glycerophosphatidylcholine with distillation of the mixture.
В известном способе проводят кристаллизацию глицерофосфатидилхолина в этиловом спирте. Глицерофосфатидилхолин-содержащая смесь растворяется в этиловом спирте, далее понижается температура раствора и начинается выпадение кристаллов глицерофосфатидилхолина. Общий состав данной системы является неизменным.In a known method, crystallization of glycerophosphatidylcholine is carried out in ethyl alcohol. The glycerophosphatidylcholine-containing mixture is dissolved in ethyl alcohol, then the temperature of the solution decreases and the precipitation of glycerophosphatidylcholine crystals begins. The overall composition of this system is unchanged.
Очевидно, что в данном случае требуется достаточно высокая чистота глицерофосфатидилхолин-содержащей смеси, которая достигается многократной очисткой на различных сорбентах, которая ведет к описанным выше потерям целевого вещества, чувствительна к содержанию целевого вещества в исходной смеси и производит к образованию большого количества опасных и наносящих вред окружающей среде стоков.Obviously, in this case, a sufficiently high purity of the glycerophosphatidylcholine-containing mixture is required, which is achieved by repeated purification on various sorbents, which leads to the loss of the target substance described above, is sensitive to the content of the target substance in the initial mixture and produces a large amount of hazardous and harmful environmental effluent.
Этап кристаллизации глицерофосфатидилхолина, согласно настоящему изобретению, проводится с отгонкой смеси. Сам глицерофосфатидилхолин является нелетучим и остается в кубовом остатке.The stage of crystallization of glycerophosphatidylcholine, according to the present invention, is carried out with the mixture distilled. Glycerophosphatidylcholine itself is non-volatile and remains in the VAT residue.
Для водного раствора глицерофосфатидилхолина выбирается растворитель, который образует с водой двухфазную азеотропную смесь, у которой температура кипения в точке азеотропа ниже температуры кипения растворителя. То есть формируют положительный гетероазеотроп. В результате формируется две фазы, в одной преимущественно содержание воды, в другой - второго растворителя. Глицерофосфатидилхолин распределен между фазами. Полярные примеси содержатся преимущественно в водной фазе, неполярные - в фазе второго растворителя.For an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine, a solvent is selected, which forms a two-phase azeotropic mixture with water, whose boiling point at the azeotrope is lower than the boiling point of the solvent. That is, form a positive heteroazeotrope. As a result, two phases are formed, in one the content of water is predominant, in the other - of the second solvent. Glycerophosphatidylcholine is distributed between the phases. Polar impurities are predominantly in the aqueous phase, non-polar in the second solvent phase.
Отличительной особенностью таких смесей является то, что при перегонке двухфазной жидкой смеси любого состава конденсат (пар) будет иметь постоянную концентрацию до тех пор, пока в кубе сохраняются обе жидкие фазы.A distinctive feature of such mixtures is that during the distillation of a two-phase liquid mixture of any composition, the condensate (steam) will have a constant concentration as long as both liquid phases remain in the cube.
Таким образом, благодаря тому, что количество второго растворителя выбирается больше, чем в азеотропной смеси, и тому, что температура кипения азеотропа ниже температуры кипения второго растворителя, удается отогнать всю водную фазу смеси. Также вместе с водой и вторым растворителем удаляются примеси.Thus, due to the fact that the amount of the second solvent is chosen more than in the azeotropic mixture, and the boiling point of the azeotrope is lower than the boiling point of the second solvent, it is possible to drive off the entire aqueous phase of the mixture. Also along with water and the second solvent impurities are removed.
После удаления водной фазы фактически получается смесь с очень низким содержанием воды. Поскольку глицерофосфатидилхолин нерастворим или малорастворим во втором растворителе, происходит его кристаллизация в безводной форме.After removal of the aqueous phase, a mixture with a very low water content is actually obtained. Since glycerophosphatidylcholine is insoluble or slightly soluble in the second solvent, it crystallizes in an anhydrous form.
Показатели чистоты и содержания воды полученного в результате экспериментов глицерофосфатидилхолина были намного выше показателей, требуемых в фармацевтике.The purity and water content of the experimental glycerophosphatidylcholine was much higher than that required in pharmaceuticals.
Применение двухфазной азеотропной смеси также положительно сказывается на следующем.The use of a two-phase azeotropic mixture also has a positive effect on the following.
В любом производстве, для целей снижения ресурсоемкости и выбросов (стоков) требуется регенерация второго растворителя.In any production, for the purpose of reducing resource consumption and emissions (sinks), regeneration of the second solvent is required.
Для удаления водной фазы дистиллята, полученного на этапе кристаллизации с отгонкой, достаточно осуществить простую операцию расслаивания смеси с удалением одной из жидких фаз.To remove the aqueous phase of the distillate obtained in the crystallization stage with distillation, it is sufficient to carry out a simple operation of separation of the mixture with the removal of one of the liquid phases.
Таким образом, объем смеси для дальнейшей очистки второго растворителя (например, перегонки) будет меньше, что положительно сказывается на энергоемкости, количестве используемых реагентов и формируемых при очистке стоков.Thus, the volume of the mixture for further purification of the second solvent (for example, distillation) will be less, which has a positive effect on the energy intensity, the amount of reagents used and the effluents formed during cleaning.
Кроме того, применение двухфазной азеотропной смеси обеспечивает возможность использование растворителей, у которых азеотропная точка находится далеко от индивидуального растворителя.In addition, the use of a two-phase azeotropic mixture allows the use of solvents, in which the azeotropic point is far from the individual solvent.
Так, в случае истинной азеотропной смеси, для эффективного удаления воды требуется смесь с азеотропной точкой, соответствующей максимально низкому содержанию воды и максимально высокому содержанию растворителя.So, in the case of a true azeotropic mixture, for effective removal of water requires a mixture with an azeotropic point, corresponding to the lowest possible water content and the highest possible solvent content.
Однако это означает, что требуется использовать растворитель в количестве, во много раз превышающем количество воды, содержащейся в растворе для кристаллизации.However, this means that it is required to use a solvent in an amount many times greater than the amount of water contained in the solution for crystallization.
Поскольку, согласно изобретению, имеется возможность отогнать водную фазу в любом случае, расположение азеотропной точки максимально близко к индивидуальному второму растворителю, не является критическим.Since, according to the invention, it is possible to ward off the aqueous phase in any case, the location of the azeotropic point as close as possible to the individual second solvent is not critical.
Это позволяет использовать такие растворители, как 1-бутанол (вода 44,50 : 1-бутанол 55,50), бутилацетат (27,10 : 72,90), 2-этилбутилацетат (52,40 : 47,60), толуол (20.20 : 79.80) и другие.This allows the use of solvents such as 1-butanol (water 44.50: 1-butanol 55.50), butyl acetate (27.10: 72.90), 2-ethyl butylacetate (52.40: 47.60), toluene ( 20.20: 79.80) and others.
Таким образом, предоставляется возможность снизить потребление второго растворителя и, соответственно, снизить негативные последствия его применения для природы и человека.Thus, it is possible to reduce the consumption of the second solvent and, accordingly, reduce the negative effects of its use on nature and humans.
Предпочтительно, этап кристаллизации с отгонкой азеотропной смеси проводят в, по меньшей мере, две стадии, при этом на каждой из стадий осуществляют разбавление вторым растворителем.Preferably, the stage of crystallization with distillation of the azeotropic mixture is carried out in at least two stages, with dilution with a second solvent at each of the stages.
При этом на первой стадии осуществляют неполную отгонку азеотропной смеси с получением глицерофосфатидилхолина в гидратированной форме, а на второй стадии проводят отгонку азеотропной смеси до получения глицерофосфатидилхолина в кристаллической форме.In the first stage, the azeotropic mixture is incompletely distilled to obtain glycerophosphatidylcholine in the hydrated form, and in the second stage the azeotropic mixture is distilled to obtain glycerophosphatidylcholine in crystalline form.
Предпочтительно, в качестве второго растворителя используют 1-бутанол, так как он показал хорошие результаты в экспериментах, наименее опасен для природы и человека и имеет хорошее значение содержания в азеотропной смеси.Preferably, 1-butanol is used as the second solvent, since it has shown good results in experiments, is less dangerous for nature and humans and has a good content in the azeotropic mixture.
В результате осуществления способа был получен кристаллический глицерофосфатидилхолин.As a result of the process, crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained.
На его основе изготавливалась фармацевтическая композиция для лечения и\или профилактики нарушений, связанных ишемическими состояниями, в том числе с инсультом, содержащая в качестве активных компонентов глицерофосфатидилхолин и фармацевтически приемлемый носитель.Based on it, a pharmaceutical composition was prepared for the treatment and / or prevention of disorders associated with ischemic conditions, including stroke, containing glycerophosphatidylcholine as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier.
Указанная фармацевтическая композиция также выполнялась в пероральной форме.The specified pharmaceutical composition was also carried out in oral form.
В результате осуществления способа был получен кристаллический глицерофосфатидилхолин, содержащий следы или остатки вещества, в котором глицерофосфатидилхолин нерастворим или малорастворим, которое образовывает с водой азеотропную смесь, температура кипения такой азеотропной смеси ниже, чем температура кипения этого вещества, и образованная азеотропная смесь является двухфазной.As a result of the implementation of the method, crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained, containing traces or residues of a substance in which glycerophosphatidylcholine is insoluble or slightly soluble, which forms an azeotropic mixture with water, the boiling point of such azeotropic mixture is lower than the boiling point of this substance, and the azeotropic mixture formed is two-phase.
На его основе изготавливалась фармацевтическая композиция для лечения и\или профилактики нарушений, связанных ишемическими состояниями, в том числе с инсультом, содержащая в качестве активных компонентов глицерофосфатидилхолин и фармацевтически приемлемый носитель.Based on it, a pharmaceutical composition was prepared for the treatment and / or prevention of disorders associated with ischemic conditions, including stroke, containing glycerophosphatidylcholine as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier.
Указанная фармацевтическая композиция также выполнялась пероральной форме.Said pharmaceutical composition was also administered in oral form.
Далее приводится подробное описание конкретных вариантов осуществления изобретения.The following is a detailed description of specific embodiments of the invention.
Согласно настоящему изобретению осуществляют следующие этапы.According to the present invention, the following steps are carried out.
Этап 1 обезжиривания.Stage 1 degreasing.
Фосфатидилхолин содержащее сырье, такое как соевый, подсолнечниковый и рапсовый лецитины, обезжиривают.Phosphatidylcholine containing raw materials such as soybean, sunflower and rapeseed lecithins are degreased.
Для обезжиривания применяют многократную обработку ацетоном. Далее обезжиренный концентрат сушат.For degreasing used multiple treatment with acetone. Next, the fat-free concentrate is dried.
Этап 2 синтеза.Stage 2 synthesis.
Синтез глицерофосфатидилхолина осуществляют путем проведения реакции переэтерификации в любом алифатическом спирте под действием любых алкоголятов щелочных и/или щелочноземельных металлов.The synthesis of glycerophosphatidylcholine is carried out by carrying out the transesterification reaction in any aliphatic alcohol under the action of any alkali and / or alkaline earth metal alkoxides.
Полученную реакционную массу охлаждают и отделяют выделившийся осадок.The resulting reaction mass is cooled and the precipitate separated is separated.
Фильтрат нейтрализуют, например, с помощью ортофосфорной кислоты.The filtrate is neutralized, for example, with orthophosphoric acid.
Выпавший осадок фильтруют. Раствор, содержащий глицерофосфатидилхолин, упаривают под вакуумом при температуре не выше 37°С.The precipitate is filtered. The solution containing glycerophosphatidylcholine is evaporated under vacuum at a temperature not higher than 37 ° C.
Этап 3 очистки в колонне.Stage 3 cleaning in the column.
К раствору добавляют воду, тем самым получая водный раствор глицерофосфатидилхолина.Water is added to the solution, thereby obtaining an aqueous solution of glycerophosphatidylcholine.
В отличие от таких примесей, как глицерофосфатидилэтаноламин, глицерофосфатидилсерин, глицерофосфатидилинозитол, в водном растворе имеют отрицательный заряд, получаемый из фофатидилхолина глицерофосфатидилхолин имеет нейтральный заряд.Unlike impurities such as glycerophosphatidylethanolamine, glycerophosphatidylserine, glycerophosphatidylinositol, in an aqueous solution they have a negative charge, which is obtained from fofatidylcholine glycerophosphatidylcholine has a neutral charge.
Водный раствор глицерофосфатидилхолина пропускают через колонну, заполненную сильноосновным сорбентом. Например, сильнощелочным анионитом в гидроксильной форме.An aqueous solution of glycerophosphatidylcholine is passed through a column filled with a strongly basic sorbent. For example, strongly alkaline anion exchange resin in hydroxyl form.
В результате все отрицательно заряженные примеси задерживаются сорбентом, а глицерофосфатидилхолин свободно проходит через сорбент и остается в водном растворе.As a result, all negatively charged impurities are trapped by the sorbent, and glycerophosphatidylcholine freely passes through the sorbent and remains in the aqueous solution.
Затем колонну промывают водой для вымывания остатков глицерофосфатидилхолина.Then the column is washed with water to wash out residues of glycerophosphatidylcholine.
Как видно из указанного выше, в настоящем способе отсутствуют какие-либо водно-метанольные стоки, что является бесспорным преимуществом.As can be seen from the above, in this method there are no water-methanol effluent, which is an indisputable advantage.
Этап 4 кристаллизации с отгонкой.Stage 4 crystallization with distillation.
К полученному на предыдущем этапе эллюату добавляют растворитель, который отвечает следующим требованиям:To the eluate obtained in the previous step, a solvent is added that meets the following requirements:
- глицерофосфатидилхолин должен быть нерастворим или малорастворим в растворителе;- glycerophosphatidylcholine must be insoluble or slightly soluble in the solvent;
- растворитель должен образовывать с водой азеотропную смесь;- the solvent should form an azeotropic mixture with water;
- температура кипения азеотропной смеси должна быть ниже, чем температура кипения растворителя;- the boiling point of the azeotropic mixture should be lower than the boiling point of the solvent;
- образованная азеотропная смесь должна быть двухфазной.- the azeotropic mixture formed should be two-phase.
Количество растворителя выбирается так, что его количество в смеси с водой больше, чем его содержание в азеотропной точке полученной смеси.The amount of solvent is chosen so that its amount in a mixture with water is greater than its content in the azeotropic point of the resulting mixture.
Очевидно, что растворитель не должен вступать в химическую реакцию с глицерофосфатидилхолином.It is obvious that the solvent should not enter into a chemical reaction with glycerophosphatidylcholine.
К таким растворителям, в частности, относятся 1-бутанол, толуол, ксилол, гексанол, бутилацетат, амилацетат, хлорбензол, анизол и т.д.Such solvents, in particular, include 1-butanol, toluene, xylene, hexanol, butyl acetate, amyl acetate, chlorobenzene, anisole, etc.
После добавления растворителя образуется двухфазная жидкая система, в одном слое которой выше содержание добавленного растворителя, а во втором выше содержание воды, глицерофосфатидилхолин распределен между слоями. При этом содержание глицерофосфатидилхолина выше во втором слое.After the addition of the solvent, a two-phase liquid system is formed, in one layer of which the content of the added solvent is higher, and in the second one the content of water is higher, glycerophosphatidylcholine is distributed between the layers. The content of glycerophosphatidylcholine is higher in the second layer.
Далее начинают отгонку азеотропа.Next, start the azeotrope distillation.
Как известно, состав пара таких систем всегда равен составу азеотропа и при перегонке такой двухфазной жидкой смеси любого состава конденсат (пар) будет иметь постоянную концентрацию до тех пор, пока в кубе сохраняются обе жидкие фазы. Таким образом, поскольку содержание растворителя в смеси больше, чем в азеотропной точке, при отгонке азеотропа удаляется вся вода и глицерофосфатидилхолин остается в растворителе и кристаллизуется в безводной форме.As is known, the composition of the vapor of such systems is always equal to the composition of the azeotrope and during the distillation of such a two-phase liquid mixture of any composition, the condensate (vapor) will have a constant concentration as long as both liquid phases remain in the cube. Thus, since the solvent content in the mixture is greater than at the azeotropic point, all water is removed by distilling off the azeotrope and glycerophosphatidylcholine remains in the solvent and crystallizes in an anhydrous form.
Полученный глицерофосфатидилхолин промывают, например, ацетоном для удаления остатков растворителя.The glycerophosphatidylcholine obtained is washed, for example, with acetone to remove residual solvent.
Благодаря использованию сильноосновного сорбента и нового способа кристаллизации становится возможным использовать сырье с низким содержанием фосфатидилхолина, поскольку не требуется осаждение на сорбенте, что ведет к потерям вещества и применяется более эффективный способ кристаллизации.Due to the use of a strongly basic sorbent and a new crystallization method, it becomes possible to use raw materials with a low content of phosphatidylcholine, since precipitation is not required on the sorbent, which leads to loss of substance and a more efficient crystallization method is used.
Для получения еще более чистого глицерофосфатидилхолина, этап кристаллизации проводят в две стадии.To obtain even more pure glycerophosphatidylcholine, the crystallization step is carried out in two stages.
Сначала удаляется азеотроп до содержания воды в смеси 1-1,5% и получают глицерофосфатидилхолин в гидратированной форме (паста).First, the azeotrope is removed until the water content in the mixture is 1-1.5% and glycerophosphatidylcholine is obtained in the hydrated form (paste).
Глицерофосфатидилхолин в гидратированной форме промывают, например, ацетоном для удаления остатков растворителя.Glycerophosphatidylcholine in hydrated form is washed, for example, with acetone to remove residual solvent.
Далее в полученный глицерофосфатидилхолин снова добавляют растворитель и повторяют процесс отгонки и кристаллизации.Next, the solvent is again added to the resulting glycerophosphatidylcholine, and the distillation and crystallization process is repeated.
Предпочтительно, второй раз отгонку и кристаллизацию проводить под вакуумом. Это обеспечивает получение менее окрашенного продукта (более чистого продукта).Preferably, the second time the distillation and crystallization is carried out under vacuum. This provides a less colored product (a cleaner product).
Глицерофосфатидилхолин в кристаллической безводной форме промывают, например, ацетоном для удаления остатков растворителя и сушат под вакуумом.Glycerophosphatidylcholine in crystalline anhydrous form is washed, for example, with acetone to remove residual solvent and dried under vacuum.
В данном случае получают более чистый глицерофосфатидилхолин с более низким содержанием воды.In this case, a more pure glycerophosphatidylcholine with a lower water content is obtained.
Как указывается выше, для обезжиривания сырья и для промывки глицерофосфатидилхолина применяют ацетон. Однако очевидно, что для этих целей может использоваться любое вещество, обладающее следующими характеристиками: растворять жиры и спирты, не растворять глицерофосфатидилхолин и фосфатидилхолин. Также очевидно, такое вещество не должно вступать в реакцию с компонентами очищаемой смеси. К таким веществам можно отнести, в частности, диэтиловый эфир, метиэтилкетон и метилтретбутиловый эфир. В данном случае, ацетон выбран из практических соображений: его доступности, степени опасности, экологичности и т.д.As indicated above, acetone is used for degreasing raw materials and for washing glycerophosphatidylcholine. However, it is obvious that for these purposes any substance with the following characteristics can be used: dissolve fats and alcohols, do not dissolve glycerophosphatidylcholine and phosphatidylcholine. It is also obvious that such a substance should not react with the components of the mixture being cleaned. Such substances include, in particular, diethyl ether, methyl ethyl ketone and methyl tertiary butyl ether. In this case, acetone is chosen for practical reasons: its availability, degree of danger, environmental friendliness, etc.
Предварительное обезжиривание сырья обеспечивает снижение примесей, образующихся на этапе синтеза глицерофосфатидилхолина, что положительно сказывается дальнейших этапах очистки.The preliminary degreasing of the raw material ensures the reduction of impurities formed during the synthesis of glycerophosphatidylcholine, which has a positive effect on the further purification steps.
Промежуточная (после первой стадии кристаллизации с отгонкой азеотропной смеси) и финальная промывка (после второй стадии кристаллизации азеотропной смеси) обеспечивают более полное удаления оставшейся воды и загрязненного растворителя из глицерофосфатидилхолина.The intermediate (after the first crystallization stage with azeotropic distillation) and the final rinsing (after the second crystallization stage of the azeotropic mixture) provide more complete removal of the remaining water and contaminated solvent from glycerophosphatidylcholine.
Пример 1.Example 1
Этап 1 обезжиривания.Stage 1 degreasing.
100 кг соевого лецитина с содержанием фосфатидилхолина 13% обрабатывают 3 раза по 100 л ацетона для обезжиривания. Обезжиренный концентрат сушат и получают 62 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 19%.100 kg of soy lecithin with phosphatidylcholine content of 13% is treated 3 times with 100 l of acetone for degreasing. Fat-free concentrate is dried and receive 62 kg of fat-free concentrate with a phosphatidylcholine content of 19%.
Этап 2 синтеза.Stage 2 synthesis.
62 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 19% растворяют в 40 л безводного метанола, добавляют 2 кг метилата натрия и перемешивают при 30°С 6 часов.62 kg of fat-free concentrate with a phosphatidylcholine content of 19% are dissolved in 40 liters of anhydrous methanol, 2 kg of sodium methylate are added and stirred at 30 ° C for 6 hours.
Полученную реакционную массу охлаждают до 0°С, отделяют выделившийся осадок. Фильтрат нейтрализуют, добавляя 1,21 кг ортофосфорной кислоты. Выпавший осадок фильтруют и упаривают под вакуумом при температуре не выше 37°С.The resulting reaction mass is cooled to 0 ° C, separated precipitate separated. The filtrate is neutralized by adding 1.21 kg of phosphoric acid. The precipitation is filtered and evaporated under vacuum at a temperature not higher than 37 ° C.
Этап 3 очистки в колонне.Stage 3 cleaning in the column.
К кубовому остатку добавляют 14 литров воды и полученный раствор пропускают через колонну высотой 80 см и диаметром 10 см, заполненную сильнощелочным анионитом в гидроксильной форме, затем колонну промывают 1 литром воды.14 liters of water are added to the bottom residue and the resulting solution is passed through a column 80 cm high and 10 cm in diameter filled with strongly alkaline anion exchanger in hydroxyl form, then the column is washed with 1 liter of water.
Этап 4 кристаллизации с отгонкой.Stage 4 crystallization with distillation.
К эллюату добавляют 50 л 1-бутанола и отгоняют 30 литров азеотропа бутанола с водой до остаточного содержания воды в растворе 1-1,5%. Выпавший глицерофосфатидилхолин в гидратированной форме фильтруют, промывают два раза по 30 л ацетона.50 liters of 1-butanol are added to the elluate and 30 liters of azeotrope of butanol with water are distilled off until the residual water content in the solution is 1-1.5%. Glycerophosphatidylcholine precipitated in hydrated form is filtered, washed twice with 30 L of acetone.
Полученную пасту растворяют в 30 л 1-бутанола, и отгоняют под вакуумом 10 литров азеотропа бутанола с водой. Кубовый остаток охлаждают до 10°С, перемешивают 2 часа, фильтруют выпавший безводный глицерофосфатидилхолин, промывают его 2 раза по 10 литров ацетона, сушат под вакуумом.The resulting paste is dissolved in 30 liters of 1-butanol, and 10 liters of azeotrope of butanol with water are distilled off under vacuum. VAT residue is cooled to 10 ° C, stirred for 2 hours, the precipitated anhydrous glycerophosphatidylcholine is filtered, washed with 2 times 10 liters of acetone, dried under vacuum.
В результате был получен чистый кристаллический глицерофосфатидилхолин с содержанием воды 0,18% и содержанием основного вещества 98,6% (в пересчете на сухое, свободное от органических растворителей вещество).As a result, pure crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained with a water content of 0.18% and a basic substance content of 98.6% (in terms of dry substance free of organic solvents).
Пример 2.Example 2
Этап 1 обезжиривания.Stage 1 degreasing.
150 кг подсолнечникового лецитина с содержанием фосфатидилхолина 9% обрабатывают 3 раза по 100 л ацетона для обезжиривания. Обезжиренный концентрат сушат и получают 91 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 13%.150 kg of sunflower lecithin with phosphatidylcholine content of 9% is treated 3 times with 100 liters of acetone for degreasing. Fat-free concentrate is dried and get 91 kg of fat-free concentrate with a phosphatidylcholine content of 13%.
Этап 2 синтеза.Stage 2 synthesis.
91 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 13% растворяют в 60 л безводного метанола, добавляют 2.1 кг метилата натрия и перемешивают при 30°С 6 часов.91 kg of fat-free concentrate with a phosphatidylcholine content of 13% are dissolved in 60 l of anhydrous methanol, 2.1 kg of sodium methylate are added and stirred at 30 ° C for 6 hours.
Полученную реакционную массу охлаждают до 0°С, отделяют выделившийся осадок. Фильтрат нейтрализуют, добавляя 1,21 кг ортофосфорной кислоты. Выпавший осадок фильтруют и упаривают под вакуумом при температуре не выше 37°С.The resulting reaction mass is cooled to 0 ° C, separated precipitate separated. The filtrate is neutralized by adding 1.21 kg of phosphoric acid. The precipitation is filtered and evaporated under vacuum at a temperature not higher than 37 ° C.
Этап 3 очистки в колонне.Stage 3 cleaning in the column.
К кубовому остатку добавляют 16 литров воды и полученный раствор пропускают через колонну высотой 100 см и диаметром 12 см, заполненную сильнощелочным анионитом в гидроксильной форме, затем колонну промывают 1,5 литром воды.16 liters of water are added to the bottom residue and the resulting solution is passed through a column 100 cm high and 12 cm in diameter filled with strongly alkaline anion exchanger in hydroxyl form, then the column is washed with 1.5 liter of water.
Этап 4 кристаллизации с отгонкой.Stage 4 crystallization with distillation.
К эллюату добавляют 64 л 1-бутанола и отгоняют 34 литров азеотропа бутанола с водой до остаточного содержания воды в растворе 1-1,5%. Выпавший глицерофосфатидилхолин в гидратированной форме фильтруют, промывают два раза по 35 л ацетона.64 liters of 1-butanol are added to the elluate and 34 liters of azeotrope of butanol with water are distilled off until the residual water content in the solution is 1-1.5%. The precipitated glycerophosphatidylcholine in the hydrated form is filtered, washed twice with 35 l of acetone.
Полученную пасту растворяют в 36 л 1-бутанола, и отгоняют под вакуумом 12 литров азеотропа бутанола с водой. Кубовый остаток охлаждают до 10°С, перемешивают 2 часа, фильтруют выпавший безводный глицерофосфатидилхолин, промывают его 2 раза по 12 литров ацетона, сушат под вакуумом.The resulting paste is dissolved in 36 l of 1-butanol, and 12 liters of azeotrope of butanol with water are distilled off under vacuum. VAT residue is cooled to 10 ° C, stirred for 2 hours, the precipitated anhydrous glycerophosphatidylcholine is filtered, washed 2 times with 12 liters of acetone each time, dried under vacuum.
В результате был получен чистый кристаллический глицерофосфатидилхолин с содержанием воды 0,15% и содержанием основного вещества 98,3% (в пересчете на сухое, свободное от органических растворителей вещество).As a result, pure crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained with a water content of 0.15% and a basic substance content of 98.3% (in terms of a dry substance free of organic solvents).
Пример 3.Example 3
Этап 1 обезжириванияStage 1 degreasing
230 кг подсолнечникового лецитина с содержанием фосфатидилхолина 8% обрабатывают 3 раза по 150 л ацетона для обезжиривания. Обезжиренный концентрат сушат и получают 91 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 12%.230 kg of sunflower lecithin with a phosphatidylcholine content of 8% is treated 3 times with 150 liters of acetone for degreasing. Fat-free concentrate is dried and receive 91 kg of fat-free concentrate containing 12% phosphatidylcholine.
Этап 2 синтезStage 2 synthesis
140 кг обезжиренного концентрата с содержанием фосфатидилхолина 12% растворяют в 90 л безводного метанола, добавляют 3.6 кг метилата натрия и перемешивают при 35°С 5 часов.140 kg of fat-free concentrate containing 12% phosphatidylcholine are dissolved in 90 l of anhydrous methanol, 3.6 kg of sodium methoxide are added and stirred at 35 ° C for 5 hours.
Полученную реакционную массу охлаждают до 0°С, отделяют выделившийся осадок. Фильтрат нейтрализуют, добавляя 1,85 кг ортофосфорной кислоты. Выпавший осадок фильтруют и упаривают под вакуумом при температуре не выше 37°С.The resulting reaction mass is cooled to 0 ° C, separated precipitate separated. The filtrate is neutralized by adding 1.85 kg of phosphoric acid. The precipitation is filtered and evaporated under vacuum at a temperature not higher than 37 ° C.
Этап 3 очистка в колонкеStage 3 Column Cleaning
К кубовому остатку добавляют 25 литров воды и полученный раствор пропускают через колонну высотой 150 см и диаметром 14 см, заполненную сильнощелочным анионитом в гидроксильной форме, затем колонну промывают 2.5 литром воды.25 liters of water are added to the bottom residue and the resulting solution is passed through a column 150 cm high and 14 cm in diameter filled with strongly alkaline anion exchanger in hydroxyl form, then the column is washed with 2.5 liter of water.
Этап 4 кристаллизации с отгонкойStage 4 crystallization with distillation
К эллюату добавляют 100 л бутанола и отгоняют 51 литр азеотропа бутанола с водой до остаточного содержания воды в растворе 1-1,5%. Выпавший глицерофосфатидилхолин в гидратированной форме фильтруют, промывают два раза по 50 л ацетона.100 liters of butanol are added to the elluate and 51 liters of azeotrope of butanol with water are distilled off until the residual water content in the solution is 1-1.5%. The precipitated glycerophosphatidylcholine in the hydrated form is filtered, washed twice with 50 l of acetone.
В результате был получен чистый кристаллический глицерофосфатидилхолин с содержанием воды 4,2% и содержанием основного вещества 97,6% (в пересчете на сухое, свободное от органических растворителей вещество).As a result, pure crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained with a water content of 4.2% and a basic substance content of 97.6% (in terms of a dry substance free of organic solvents).
Также были проведены эксперименты по получению глицерофосфатидилхолина из других источников сырья, например, фосфатидный концентрат, полученный из рапсового или подсолнечного масла, с содержанием лецитина до 4%, а также с использованием других растворителей, например, бутилацетат или толуол. Во всех случаях был получен чистый кристаллический глицерофосфатидилхолин с содержанием воды не более 0,5% и содержанием основного вещества не менее 97,0%.Also experiments were carried out to obtain glycerophosphatidylcholine from other sources of raw materials, for example, phosphatide concentrate obtained from rapeseed or sunflower oil, with a lecithin content of up to 4%, as well as using other solvents, for example, butylacetate or toluene. In all cases, pure crystalline glycerophosphatidylcholine was obtained with a water content of not more than 0.5% and a basic substance content of not less than 97.0%.
При этом во всех пробах кристаллического глицерофосфатидилхолина, полученного способом, соответствующем настоящему изобретению обнаруживались следы или остатки растворителя, а именно, вещества в котором глицерофосфатидилхолин нерастворим, которое образовывает с водой азеотропную смесь, температура кипения такой азеотропной смеси ниже, чем температура кипения этого вещества, и образованная азеотропная смесь является двухфазной.Moreover, in all samples of crystalline glycerophosphatidylcholine obtained by the method of the present invention, traces or residues of the solvent were found, namely, a substance in which the glycerophosphatidylcholine is insoluble, which forms an azeotropic mixture with water, the boiling point of such azeotropic mixture is lower than the boiling point of this substance, and the azeotropic mixture formed is biphasic.
Claims (7)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016126437A RU2685238C1 (en) | 2016-07-01 | 2016-07-01 | Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016126437A RU2685238C1 (en) | 2016-07-01 | 2016-07-01 | Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2685238C1 true RU2685238C1 (en) | 2019-04-17 |
Family
ID=66168540
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016126437A RU2685238C1 (en) | 2016-07-01 | 2016-07-01 | Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2685238C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114106036A (en) * | 2021-11-08 | 2022-03-01 | 云南开放大学(云南国防工业职业技术学院) | Separation and extraction method of L-alpha-glycerophosphatidylcholine |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0486100A1 (en) * | 1990-11-15 | 1992-05-20 | MAGIS FARMACEUTICI S.p.A. | Process for preparing alpha-glycerophosphorylcholine |
| US5250719A (en) * | 1989-05-08 | 1993-10-05 | Prime European Therapeuticals S.P.A. | Process for the preparation of L-α-glycerylphosphoryl-choline and of L-α-glycerylphosphorylethanolamine |
| EP0575717A1 (en) * | 1992-06-24 | 1993-12-29 | CHEMI S.p.A. | A process for the preparation of glycerophospholipids |
| RU2008134143A (en) * | 2008-08-21 | 2010-02-27 | Тимофей Георгиевич Кожока (RU) | PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF CITYCOLINE, CHOLIN ALPHOSCERATE AND L-CARNITINE (OR ACETYL-L-CARNITINE) FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF DISEASES OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AND METHOD |
| US8658401B2 (en) * | 2011-03-24 | 2014-02-25 | Jiannan University | Method for preparing high purity L-α glycerylphosphorylcholine |
-
2016
- 2016-07-01 RU RU2016126437A patent/RU2685238C1/en active IP Right Revival
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5250719A (en) * | 1989-05-08 | 1993-10-05 | Prime European Therapeuticals S.P.A. | Process for the preparation of L-α-glycerylphosphoryl-choline and of L-α-glycerylphosphorylethanolamine |
| EP0486100A1 (en) * | 1990-11-15 | 1992-05-20 | MAGIS FARMACEUTICI S.p.A. | Process for preparing alpha-glycerophosphorylcholine |
| EP0575717A1 (en) * | 1992-06-24 | 1993-12-29 | CHEMI S.p.A. | A process for the preparation of glycerophospholipids |
| RU2008134143A (en) * | 2008-08-21 | 2010-02-27 | Тимофей Георгиевич Кожока (RU) | PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF CITYCOLINE, CHOLIN ALPHOSCERATE AND L-CARNITINE (OR ACETYL-L-CARNITINE) FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF DISEASES OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AND METHOD |
| US8658401B2 (en) * | 2011-03-24 | 2014-02-25 | Jiannan University | Method for preparing high purity L-α glycerylphosphorylcholine |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ИПАТОВА О.М. Фосфоглив: механизм действия и применение в клинике. Издательство Москва. 2005. * |
| Регистр Лекарственных Средств России (РЛС). Энциклопедия лекарственных средств. М.: "РЛС-2008", 2007. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114106036A (en) * | 2021-11-08 | 2022-03-01 | 云南开放大学(云南国防工业职业技术学院) | Separation and extraction method of L-alpha-glycerophosphatidylcholine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI97886C (en) | Process for the extraction of organic tin esters from reaction mixtures containing them and the re-use of extracted organic tin compounds | |
| US20060124545A1 (en) | Process for producing 1,3-propanediol | |
| US20090259034A1 (en) | Removal of acids from tertiary amide solvents | |
| CN1085551A (en) | 10-deacetylation baccatin III manufacture method | |
| JP2883202B2 (en) | Process for producing L-alpha-glyceryl phosphorylcholine and L-alpha-glyceryl phosphorylethanolamine | |
| KR100262281B1 (en) | A process for the preparation of glycerophospholipids | |
| RU2685238C1 (en) | Method of producing crystalline glycerophosphatidylcholine | |
| CZ20002856A3 (en) | Process for obtaining HMG-CoA reductase inhibitors of high purity | |
| WO2020015763A1 (en) | Calcium dibutyacyladenosine cyclophosphate salt crystal | |
| ES2572887T3 (en) | Procedure for extraction in a process for the production of a di-, tri- or polyhydric alcohol | |
| Marsden et al. | XIX.—Organic derivatives of silicon. Part IV. The sulphonation of benzylethylpropylsilicyl oxide and of benzylethyldipropylsilicane | |
| CN103755685B (en) | Purifying and refining method of esomeprazole sodium | |
| GB2058792A (en) | Process for the Preparation of L- alpha -Glycerylphosphoryl Choline | |
| BRPI1015067B1 (en) | METHOD FOR PRODUCING A LOWER ALKYL ESTER OF FATTY ACID, GLYCEROL AND STERILE GLYCOSIDE. | |
| CN1133846A (en) | Method for purifying O,S-dimethyl N-acetyphosphoramidothioate | |
| EP0153292B1 (en) | Purification of crude sorbic acid | |
| JPH08311085A (en) | Production of basic amino acid salt of dimerized branched alkyl phosphate | |
| CN1362019A (en) | Prepn of soluble acephate powder | |
| US3376339A (en) | Purification of amphoteric and basic antibiotics | |
| CN100343243C (en) | Manufacture of ascorbic acid esters | |
| RU2339612C1 (en) | Method of obtaining levulinic acid by acid-catalytic saccharose conversion | |
| JP3357532B2 (en) | Method for producing branched dimerized alkyl phosphate basic amino acid salt | |
| JP4132256B2 (en) | Method for producing halogen-containing phosphate ester | |
| CN105646631A (en) | Extraction method for chenodeoxycholic acid | |
| RU2133754C1 (en) | Method of phosphonation of 2′,3′-didesoxynucleosides |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190702 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20201117 |