RU2683947C1 - Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use - Google Patents
Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use Download PDFInfo
- Publication number
- RU2683947C1 RU2683947C1 RU2017125272A RU2017125272A RU2683947C1 RU 2683947 C1 RU2683947 C1 RU 2683947C1 RU 2017125272 A RU2017125272 A RU 2017125272A RU 2017125272 A RU2017125272 A RU 2017125272A RU 2683947 C1 RU2683947 C1 RU 2683947C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- interpolymer
- immunostimulating
- polyelectrolyte complex
- vinylpyridine
- prolonged
- Prior art date
Links
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 title claims abstract description 15
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 title claims description 6
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 title abstract description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 claims abstract description 19
- VJOWMORERYNYON-UHFFFAOYSA-N 5-ethenyl-2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=C(C=C)C=N1 VJOWMORERYNYON-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 2-vinylpyridine Chemical compound C=CC1=CC=CC=N1 KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-N 4-ethenylpyridine Chemical compound C=CC1=CC=NC=C1 KFDVPJUYSDEJTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 229920002845 Poly(methacrylic acid) Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 19
- 229920006318 anionic polymer Polymers 0.000 claims description 17
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 8
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 claims description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 claims 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- BHRMHWAEINWAJS-UHFFFAOYSA-N 5-ethenyl-2-methyltetrazole Chemical compound CN1N=NC(C=C)=N1 BHRMHWAEINWAJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003311 CFU-EM Anatomy 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 231100000987 absorbed dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229940031663 carbomer-974p Drugs 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000018276 interleukin-1 production Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/785—Polymers containing nitrogen
- A61K31/787—Polymers containing nitrogen containing heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/79—Polymers of vinyl pyrrolidone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F226/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen
- C08F226/06—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen by a heterocyclic ring containing nitrogen
- C08F226/10—N-Vinyl-pyrrolidone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L39/00—Compositions of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen; Compositions of derivatives of such polymers
- C08L39/04—Homopolymers or copolymers of monomers containing heterocyclic rings having nitrogen as ring member
- C08L39/06—Homopolymers or copolymers of N-vinyl-pyrrolidones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области фармакологии и ветеринарии. Более конкретно, оно раскрывает иммуностимулирующие интерполимерные полиэлектролитные комплексы катионного полимера - полиалкилкарбоновой кислоты, а именно полиакриловой или полиметакриловой, с анионным сополимером - N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина или 4-винилпиридина или 2-винилпиридина, а также способы их получения и применения в качестве иммуностимулирующего средства.The invention relates to the field of pharmacology and veterinary medicine. More specifically, it discloses immunostimulating interpolymer polyelectrolyte complexes of a cationic polymer - polyalkylcarboxylic acid, namely polyacrylic or polymethacrylic, with an anionic copolymer - N-vinylpyrrolidone and 2-methyl-5-vinylpyridine or 4-vinylpyridine or 2-vinylpyridine, and and use as an immunostimulating agent.
Из уровня техники известен патент RU 2000004 (опубл. 15.02.1993), в котором раскрыты сополимеры N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина со средневязкостной молекулярной массой в диапазоне 29-45 кДа, содержащие 25-40 мольн. % 2-метил-5-винилпиридиновых звеньев, обладающие иммуностимулирующим действием, а также пролонгирующим действием при введении антибиотиков.The prior art patent RU 2000004 (publ. 02.15.1993), in which copolymers of N-vinylpyrrolidone and 2-methyl-5-vinylpyridine with a medium viscosity molecular weight in the range of 29-45 kDa, containing 25-40 mol. % 2-methyl-5-vinylpyridine units having an immunostimulating effect, as well as a prolonging effect with the introduction of antibiotics.
В патенте RU 2015993 (опубл. 15.07.1994) раскрыто получение группы сополимеров со средневязкостной молекулярной массой 40 кДа, аналогичных описанным в публикации RU 2000004, в которых среднестатистическое число 2-метил-5-винилпиридиновых звеньев n равно 35, а также показано их противоопухолевое действие.Patent RU 2015993 (published July 15, 1994) discloses the preparation of a group of copolymers with a medium viscosity molecular weight of 40 kDa, similar to those described in publication RU 2000004, in which the average number of 2-methyl-5-vinylpyridine units n is 35, and also their antitumor units are shown act.
В патенте RU 2415876 (опубл. 10.04.2011) раскрыты сополимеры на основе N-винилпирролидона, представленные общей формулой:In the patent RU 2415876 (publ. 10.04.2011) disclosed copolymers based on N-vinylpyrrolidone, represented by the General formula:
где мономерное звено М представляет фрагмент 2-метил-5-винилтетразола (МВТ) или 2-метил-5-винилпиридина (МВП), содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мольн. %, а средневязкостная молекулярная масса сополимера Мμ=46-150 кДа, если М представляет МВП, пригодные для применения в качестве адъювантов при изготовлении вакцин.where the monomer unit M represents a fragment of 2-methyl-5-vinyltetrazole (MBT) or 2-methyl-5-vinylpyridine (MVP), the content of monomer units n is 25-90 mol. %, and the average viscosity molecular weight of the copolymer is Mμ = 46-150 kDa, if M is a MVP suitable for use as adjuvants in the manufacture of vaccines.
В патенте RU 2430932 (опубл. 10.10.2011) раскрыты сополимеры на основе N-винилпирролидона, представленные общей формулой:In the patent RU 2430932 (publ. 10.10.2011) disclosed copolymers based on N-vinylpyrrolidone, represented by the General formula:
где мономерное звено М представляет фрагмент 2-метил-5-винилтетразола (МВТ) или 2-метил-5-винилпиридина (МВП), содержание мономерных звеньев n составляет 25-50 мольн. %, а средневязкостная молекулярная масса сополимера Мμ=15-28 кДа, если М представляет МВП, которые являются активаторами продуцирования интерлейкинов-1, вследствие чего могут быть полезны в качестве противораковых агентов.where the monomer unit M represents a fragment of 2-methyl-5-vinyltetrazole (MBT) or 2-methyl-5-vinylpyridine (MVP), the content of monomer units n is 25-50 mol. %, and the viscosity average molecular weight of the copolymer is Mμ = 15-28 kDa, if M represents MEPs, which are activators of the production of interleukins-1, and therefore can be useful as anticancer agents.
В работе «Разработка технологии получения субстанции сополимера N-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридином и разработка лекарственной формы на ее основе» Кочкиной Ю.В., описано иммуностимулирующее лекарственное средство на основе сополимера N-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридином.In the work “Development of a technology for producing a substance of a copolymer of N-vinylpyrrolidone with 2-methyl-5-vinylpyridine and development of a dosage form based on it”, Kochkina Yu.V., an immunostimulating drug based on a copolymer of N-vinylpyrrolidone with 2-methyl-5- is described vinylpyridine.
В патенте RU 2430933 (опубл. 10.10.2011) раскрыто применение сополимеров на основе М-винилпирролидона, структура которых описывается приведенной выше общей формулой, в качестве активаторов фагоцитоза.In the patent RU 2430933 (publ. 10.10.2011) the use of copolymers based on M-vinylpyrrolidone, the structure of which is described by the above general formula, as phagocytosis activators is disclosed.
В патенте RU 2533113 раскрыто применение сополимера на основе N-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых аддитивных растворимых солей, в качестве иммуностимулятора, пролонгатора действия антибиотиков, активатора продуцирования IL-1 и фагоцитоза.Patent RU 2533113 discloses the use of a copolymer based on N-vinylpyrrolidone in the form of pharmaceutically acceptable additive soluble salts, as an immunostimulant, an antibiotic prolongator, an activator of IL-1 production and phagocytosis.
Все перечисленные сополимеры на основе N-винилпирролидона, содержащие фрагменты 2-метил-5-винилпиридина, представленные в уровне техники, рассматриваются авторами данного изобретения как его ближайшие аналоги. Их главным недостатком является невозможность достижения пролонгированного иммуностимулирующего действия в связи с тем, что высококонцентрированные растворы описанных сополимеров нестабильны при хранении. Кроме того, сополимеры достаточно быстро выводятся из организма, что требует их многократного введения для поддержания терапевтического эффекта.All of these copolymers based on N-vinylpyrrolidone containing fragments of 2-methyl-5-vinylpyridine, presented in the prior art, are considered by the authors of this invention as its closest analogues. Their main disadvantage is the impossibility of achieving a prolonged immunostimulating effect due to the fact that highly concentrated solutions of the described copolymers are unstable during storage. In addition, copolymers are rapidly excreted from the body, which requires their repeated administration to maintain a therapeutic effect.
Целью данного изобретения является расширение арсенала средств на основе сополимеров N-винилпирролидона, обладающих пролонгированным иммуностимулирующим действием, которые могут найти применение в медицине и ветеринарии.The aim of this invention is to expand the arsenal of funds based on copolymers of N-vinylpyrrolidone, with a prolonged immunostimulating effect, which can be used in medicine and veterinary medicine.
В результате проведенных исследований авторы изобретения установили, что недостатки известного уровня техники могут быть преодолены путем перевода сополимеров на основе N-винилпирролидона в форму их интерполимерных полиэектролитных комплексов (ИПК). Образование ИПК осуществляется за счет взаимодействия карбоксильных групп полиалкилкарбоновой кислоты с пиридиновыми фрагментами сополимеров N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина или 4-винилпиридина или 2-винилпиридина, в результате чего образуется нерастворимый в водных средах и в большинстве органических растворителей ИПК общей структуры (рис. 1).As a result of the studies, the inventors found that the disadvantages of the prior art can be overcome by converting copolymers based on N-vinylpyrrolidone into the form of their interpolymer polyelectrolyte complexes (IPC). The formation of IPC is due to the interaction of the carboxyl groups of polyalkylcarboxylic acid with pyridine fragments of the copolymers of N-vinyl pyrrolidone and 2-methyl-5-vinyl pyridine or 4-vinyl pyridine or 2-vinyl pyridine, resulting in the formation of an insoluble IPC of general structure (fig. 1).
ИПК в качестве катионного полимера содержит полиакриловую или полиметакриловую кислоты, а в качестве анионного полимера - сополимер N-винилпирролидона и винилпиридина, где винилпиридин выбран из группы: 2-метил-5-винилпиридина или 4-винилпиридина или 2-винилпиридина.IPC as a cationic polymer contains polyacrylic or polymethacrylic acid, and as an anionic polymer, a copolymer of N-vinyl pyrrolidone and vinyl pyridine, where vinyl pyridine is selected from the group: 2-methyl-5-vinyl pyridine or 4-vinyl pyridine or 2-vinyl pyridine.
Молекулы катионного и анионного полимеров могут быть введены в ИПК при их различном соотношении, процесс может быть осуществлен в водной среде, органических растворителях и их смесях. Катионный и анионный полимеры могут иметь различные молекулярно-массовые характеристики. Анионный полимер может иметь различное соотношение винилпиридиновых и N-винилпирролидоновых звеньев. Образование и стабилизация ИПК осуществляется за счет образования ионных и водородных связей.Molecules of cationic and anionic polymers can be introduced into IPC at their different ratios, the process can be carried out in an aqueous medium, organic solvents, and mixtures thereof. Cationic and anionic polymers can have different molecular weight characteristics. The anionic polymer may have a different ratio of vinylpyridine and N-vinylpyrrolidone units. The formation and stabilization of the IPC is due to the formation of ionic and hydrogen bonds.
Соотношение катионного и анионного полимеров и их строение влияет на некоторые функциональные свойства материала, включая его иммуностимулирующие свойства и способность к депонированию в месте введения.The ratio of cationic and anionic polymers and their structure affects some functional properties of the material, including its immunostimulating properties and the ability to deposit at the injection site.
ИПК можно использовать в форме суспензий для парентерального введения и в форме имплантата формируемого в месте введения (in situ) в результате совместного или последовательного инъекцирования исходных катионного и анионного полимеров.IPC can be used in the form of suspensions for parenteral administration and in the form of an implant formed at the injection site (in situ) as a result of joint or sequential injection of the starting cationic and anionic polymers.
ИПК, исходные полимеры и средства на его основе изготавливаются и упаковываются в асептических условиях или стерилизуется в упаковке. Стерильная упаковка может иметь различные формы.IPC, starting polymers and products based on it are manufactured and packaged in aseptic conditions or sterilized in packaging. Sterile packaging may take various forms.
Описание не ограничивает объем притязаний по заявленному изобретению, а описывает и поясняет с помощью примеров его осуществление.The description does not limit the scope of the claims of the claimed invention, but describes and explains with the help of examples its implementation.
Нижеперечисленные примеры предназначены для иллюстрации изобретения, но они не ограничивают его объем.The following examples are intended to illustrate the invention, but they do not limit its scope.
Пример 1Example 1
Отдельно готовят 2,0% раствор катионного полимера и 10,0% раствор анионного полимера. Для этого катионный полимер помещают в дистиллированную воду и выдерживают при постоянном перемешивании 3-4 часа. Анионный полимер помещают в дистиллированную воду и выдерживают в течение 20-30 минут при температуре 4-10°С и перемешивании до полного растворения полимера. Полученные растворы смешивают при мольном соотношении анионного и катионного полимеров при соотношении пиридиновых звеньев (Ру) и карбоксильных групп (СООН) в соответствие с таблицей 1. Образовавшийся нерастворимый осадок отделяют фильтрованием, промывают и сушат.Separately, a 2.0% cationic polymer solution and a 10.0% anionic polymer solution are prepared. To do this, the cationic polymer is placed in distilled water and incubated for 3-4 hours with constant stirring. The anionic polymer is placed in distilled water and incubated for 20-30 minutes at a temperature of 4-10 ° C and stirring until the polymer is completely dissolved. The resulting solutions were mixed at a molar ratio of anionic and cationic polymers with a ratio of pyridine units (Ru) and carboxyl groups (COOH) in accordance with table 1. The resulting insoluble precipitate was separated by filtration, washed and dried.
Пример 2Example 2
Приготовление интерполимерного полиэлектролитного комплекса осуществляется по примеру 1, отличающееся тем, что в качестве катионного полимера используют редко сшитую полиакриловую кислоту марки Acrypol 974Р (Carbomer 974Р).The preparation of the interpolymer polyelectrolyte complex is carried out according to example 1, characterized in that the rarely used cross-linked polyacrylic acid Acrypol 974P (Carbomer 974P) is used as a cationic polymer.
Пример 3Example 3
Приготовление интерполимерного полиэлектролитного комплекса, содержащего химиотерапевтическое средство, осуществляют в асептических условиях аналогично примеру 1. Катионный полимер и химиотерапевтическое вещество помещают в дистиллированную воду и выдерживают при постоянном перемешивании 3-4 часа. Анионный полимер помещают в дистиллированную воду и выдерживают в течение 20-30 минут при температуре 4-10°С и перемешивании до полного растворения полимера. Полученные растворы смешивают при мольном соотношении анионного и катионного полимеров при соотношении пиридиновых звеньев (Py) и карбоксильных групп (СООН) в соответствие с таблицей 2. Образовавшийся нерастворимый осадок отделяют фильтрованием, промывают водой и сушат.The preparation of an interpolymer polyelectrolyte complex containing a chemotherapeutic agent is carried out under aseptic conditions analogously to Example 1. The cationic polymer and the chemotherapeutic substance are placed in distilled water and incubated for 3-4 hours with constant stirring. The anionic polymer is placed in distilled water and incubated for 20-30 minutes at a temperature of 4-10 ° C and stirring until the polymer is completely dissolved. The resulting solutions were mixed at a molar ratio of anionic and cationic polymers with a ratio of pyridine units (Py) and carboxyl groups (COOH) in accordance with table 2. The resulting insoluble precipitate was separated by filtration, washed with water and dried.
Пример 4Example 4
Приготовление суспензии наночастиц (Вариант 13). В асептических условиях интерполимерный комплекс (Вариант 3) диспергируют с использованием высокоскоростного диспергатора в 2-2,5% растворе метилцеллюлозы в течение 15 минут при 30000 об/мин. Суспензию фильтруют последовательно через мембранные фильтры 1,4, 0,45 и 0,22 мкм, разливают в стерильные флаконы, укупоривают и маркируют.Preparation of a suspension of nanoparticles (Option 13). Under aseptic conditions, the interpolymer complex (Option 3) is dispersed using a high-speed dispersant in a 2-2.5% methylcellulose solution for 15 minutes at 30,000 rpm. The suspension is filtered sequentially through 1.4, 0.45 and 0.22 μm membrane filters, poured into sterile vials, sealed and labeled.
Пример 5Example 5
Для приготовления иммуностимулирующего препарата пролонгированного действия в форме микрочастиц (Вариант 14), в асептических условиях 50 мл раствора содержащего 20% катионного полимера и 1% Pluronic F 68 прикапывают в течение 5 минут к 100 мл 80% раствора анионного полимера в хлористом метилене при диспергировании высокоскоростным гомогенизатором при 8000 об/мин. Затем полученную эмульсию смешивают при диспергировании с 150 мл 1% раствора поливинилового спирта (ММ 40 кДа). После чего, полученную дисперсию выдерживают при постоянном перемешивании 6-8 часов для полного удаления органического растворителя. Частицы отделяют фильтрованием, промывают водой, лиофильно высушивают, помещают в стерильные стеклянные флаконы, укупоривают и маркируют.To prepare a prolonged-acting immunostimulating drug in the form of microparticles (Option 14), under aseptic conditions, 50 ml of a solution containing 20% cationic polymer and 1% Pluronic F 68 are added dropwise within 5 minutes to 100 ml of an 80% solution of anionic polymer in methylene chloride when dispersed with high-speed homogenizer at 8000 rpm Then the resulting emulsion is mixed when dispersed with 150 ml of a 1% solution of polyvinyl alcohol (MM 40 kDa). After that, the resulting dispersion is kept under constant stirring for 6-8 hours to completely remove the organic solvent. Particles are separated by filtration, washed with water, freeze-dried, placed in sterile glass bottles, sealed and labeled.
Пример 6Example 6
Для приготовления иммуностимулирующего препарата пролонгированного действия в форме имплантата in situ растворы анионного и катионного полимеров готовят в асептических условиях по примеру 1. Раствор анионного полимера помещают в стерильный флакон или шприц - №1, а раствор катионного полимера в стерильный флакон или шприц - №2, укупоривают и маркируют.To prepare a sustained-release immunostimulating preparation in the form of an implant in situ, anionic and cationic polymer solutions are prepared under aseptic conditions as in Example 1. The anionic polymer solution is placed in a sterile vial or syringe - No. 1, and the cationic polymer solution in a sterile vial or syringe - No. 2, cork and label.
При применении растворы вводят внутримышечно последовательно через одну иглу или одновременно с использованием трехходового коннектора (рис. 2) в объемах, соответствующих мольному соотношению пиридиновых и карбоксильных групп, указанному в таблице 3.When using the solutions, they are administered intramuscularly sequentially through one needle or simultaneously using a three-way connector (Fig. 2) in volumes corresponding to the molar ratio of pyridine and carboxyl groups indicated in Table 3.
Пример 7Example 7
Исследование острой токсичности интерполимерных полиэлектролитных комплексов.Study of acute toxicity of interpolymer polyelectrolyte complexes.
Испытание проводили на здоровых мышах весом 18-20 г в количестве 5 групп по 6 голов. Интерполимерные полиэлектролитные комплексы (Варианты 1,7 и 10) диспергируют в стерильном изотоническом растворе NaCl из расчета 10 масс. % до образования однородной суспензии и вводят каждому животному 0,4 мл суспензии. Животным контрольной группы вводили раствор натрия хлорида. Наблюдение за животными осуществляли в течение 7 суток, на протяжении которых гибели животных в опыте не наблюдалось. Это указывает на величину LD50 для мышей, превышающую 5000 мг/кг и позволяет интерполимерные комплексы, отнести к нетоксичным веществамThe test was carried out on healthy mice weighing 18-20 g in the amount of 5 groups of 6 animals. Interpolymer polyelectrolyte complexes (Options 1.7 and 10) are dispersed in a sterile isotonic NaCl solution at the rate of 10 mass. % until a homogeneous suspension is formed and 0.4 ml of suspension is administered to each animal. The animals of the control group were injected with sodium chloride solution. Observation of animals was carried out for 7 days, during which the death of animals in the experiment was not observed. This indicates an LD50 value for mice in excess of 5000 mg / kg and allows interpolymer complexes to be classified as non-toxic substances.
Пример 8Example 8
Исследование пролонгированного иммуностимулирующего действия ИПК методом миграционной активности колониеобразующих клеток селезенки (эндогенное колониеобразование)Study of the prolonged immunostimulating effect of IPC by the method of migration activity of colony-forming spleen cells (endogenous colony formation)
Методика выполнения исследования описана в монографии Переверзев А.Е. Кроветворные колониеобразующие клетки и физические стресс-факторы. - Л.: Наука, 1986. - 172 с. стр. 43-44.The research methodology is described in the monograph Pereverzev A.E. Hematopoietic colony-forming cells and physical stress factors. - L .: Nauka, 1986 .-- 172 p. p. 43-44.
Мышей линии BALB в кассетах по 30 мышей облучают γ-излучением 137Cs с экспозиционной дозой 600 рентген (поглощенная доза 1,5 Гр, что вызывает гибель 50% животных в течение 1-2 месяцев). За 2, 7 и 14 суток до облучения мышам подкожно (в область холки) вводят 0,5 мл суспензии ИПК согласно таблице 4 с концентрацией 5000 мг/кг (доза соединений составляет 2500 мкг/мышь) или равный объем стерильного изотонического раствора NaCl (контрольная группа). На 10 сутки после облучения мышей умерщвляют разрывом шейного отдела позвоночника, извлекают селезенки, которые помещают в фиксатор Боэна. Колонии подсчитывают визуально под лупой.BALB mice in cassettes of 30 mice are irradiated with γ-radiation of 137Cs with an exposure dose of 600 X-rays (absorbed dose of 1.5 Gy, which causes the death of 50% of the animals within 1-2 months). 2, 7 and 14 days prior to irradiation, mice are injected subcutaneously (in the withers area) with 0.5 ml of an IPC suspension according to table 4 with a concentration of 5000 mg / kg (dose of compounds is 2500 μg / mouse) or an equal volume of sterile isotonic NaCl solution (control Group). On the 10th day after irradiation, the mice are killed by rupture of the cervical spine, spleens are removed, which are placed in a Boen fixative. Colonies are counted visually under a magnifying glass.
Иммуностимулирующее действие ИПК оценивают по разности числа колоний в опытных группах по сравнению с контрольной группой. Результаты представлены в таблице 4.
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017125272A RU2683947C1 (en) | 2017-07-14 | 2017-07-14 | Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017125272A RU2683947C1 (en) | 2017-07-14 | 2017-07-14 | Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2683947C1 true RU2683947C1 (en) | 2019-04-03 |
Family
ID=66090150
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017125272A RU2683947C1 (en) | 2017-07-14 | 2017-07-14 | Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2683947C1 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2000004C1 (en) * | 1992-07-16 | 1993-02-15 | Фармацевтическая фирма "Ковидон" | Copolymers of 2-methyl-5-vinylpyridine and n-vinylpyrrolidone showing immunostimulation effect |
-
2017
- 2017-07-14 RU RU2017125272A patent/RU2683947C1/en active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2000004C1 (en) * | 1992-07-16 | 1993-02-15 | Фармацевтическая фирма "Ковидон" | Copolymers of 2-methyl-5-vinylpyridine and n-vinylpyrrolidone showing immunostimulation effect |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Изволенский В.В. Терполимеризация 2-метил-5-винилпиридина с акриловой кислотой и N-винилпирролидоном в водно-изопропанольном растворе // Высокомол. соед. 1994. Т.36(А). N5. С.875-877. * |
| КЛЮКИНА Н.Д. Полиакриловая кислота как адъювант в противоящурной вакцине. Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. Владимир, 2007. * |
| Нажмитдинов A.M. и др. Компенсация Т-хелперов сополимером акриловой кислоты и N-винилпирролидона при иммунном ответе у мышей с искусственным и генетическим Т-дефицитом. Иммунология, 1980, N2, с.50-51. * |
| Хаитов Р.М. Разработка вакцин нового поколения на основе структурного объединения антигенов и синтетических полимерных иммуномодуляторов. PBMC-1997. 43(5), с.390-401. * |
| Хаитов Р.М. Разработка вакцин нового поколения на основе структурного объединения антигенов и синтетических полимерных иммуномодуляторов. PBMC-1997. 43(5), с.390-401. КЛЮКИНА Н.Д. Полиакриловая кислота как адъювант в противоящурной вакцине. Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. Владимир, 2007. Нажмитдинов A.M. и др. Компенсация Т-хелперов сополимером акриловой кислоты и N-винилпирролидона при иммунном ответе у мышей с искусственным и генетическим Т-дефицитом. Иммунология, 1980, N2, с.50-51. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102275105B1 (en) | High Density Reticulated Cross-linked Hyaluronic Acid and Process for Preparing the Same | |
| EP1750679B1 (en) | Gel composition comprising charged polymers | |
| KR100314488B1 (en) | Polysaccharide Gel Composition | |
| Kanwar et al. | In situ forming depot as sustained-release drug delivery systems | |
| CN103405773B (en) | A kind of preparation and application of biodegradable Thermo-sensitive in-situ hydrogel | |
| Cheng et al. | In situ gelling polysaccharide‐based hydrogel for cell and drug delivery in tissue engineering | |
| EP1891941A1 (en) | Aqueous gels comprising microspheres | |
| US20220072134A1 (en) | Temperature-responsive degradable hydrogels | |
| Songkroh et al. | Injectable in situ forming chitosan-based hydrogels for curcumin delivery | |
| Liu et al. | Preparation and characterization of glutaraldehyde cross-linked O-carboxymethylchitosan microspheres for controlled delivery of pazufloxacin mesilate | |
| US20230103552A1 (en) | Systems and pharmaceutical compositions for treatment by direct injection of a targeted population of cells | |
| Saouaf et al. | Modulation of injectable hydrogel properties for slow co‐delivery of influenza subunit vaccine components enhance the potency of humoral immunity | |
| KR20200072322A (en) | Method for manufacturing controlled releasable DDS device using thermosensitive hydrogel | |
| Lin et al. | Sustained intrathecal delivery of amphotericin B using an injectable and biodegradable thermogel | |
| RU2683947C1 (en) | Interpolymer polyelectrolyte complex and a prolonged immunostimulating agent on its basis, for medical and veterinary use | |
| P Venkatesh et al. | In situ gels based drug delivery systems | |
| WO2019084197A1 (en) | Temperature-responsive degradable hydrogels | |
| KR20100129263A (en) | Aqueous dispersion containing polysaccharide particulate gel and method for producing the same | |
| EP3936112A1 (en) | Hydrophilic degradable microspheres for delivering buprenorphine | |
| US20220241194A1 (en) | Crosslinkable hydrogel compositions | |
| RU2442586C1 (en) | Hydrogel anticancer medicament | |
| RU2684608C1 (en) | Interpolymer material for medical and veterinary use and prolonged medicinal and veterinary agents on its basis | |
| Mahobia et al. | Glutaraldehyde crosslinked and alkaline denaturation induced self association of haemoglobin to design nanocarriers for In vitro release of insulin in simulated gastrointestinal fluids (SGFs) | |
| CN104721173B (en) | A kind of bag bromine butylphenyl phthaleine PLGA nano particles and preparation method thereof | |
| RU2745998C1 (en) | Bioadhesive antibacterial composition, the method of its manufacture (options) |